技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種用于多元蛋白復合物表達的成套載體及其應用。該成套載體分為單基因表達載體和共表達接收載體兩部分,蛋白復合物各組分可并行克隆到不同的單基因表達載體中,然后將單基因表達載體和共表達載體在同一管中進行組裝反應,即可得到蛋白復合物共表達載體。通過試驗證明:本發(fā)明通過IIs型限制性內(nèi)切酶的設計,可使酶切和連接在同一管中進行,中間不需要酶切產(chǎn)物純化等操縱,同時,本發(fā)明的設計可以將多個蛋白的轉(zhuǎn)錄單元一次實驗同時組裝到共表達載體上,因此共表達載體的組裝極大地縮短了克隆時間,而且不同抗性以及ccdB篩選,提高了克隆的效率,另外,共表達載體轉(zhuǎn)錄出單順反子mRNA,可提高蛋白表達量。
技術(shù)研發(fā)人員:戴俊彪;陳柱成;吳慶余;秦怡然;林繼偉
受保護的技術(shù)使用者:清華大學;無錫青蘭生物科技有限公司
文檔號碼:201510847331
技術(shù)研發(fā)日:2015.11.27
技術(shù)公布日:2017.06.09