本發(fā)明涉及食品制備領(lǐng)域，具體涉及啤酒廢酵母制備多肽的方法。
背景技術(shù)：
許多小分子肽不僅能提供人體生長、發(fā)育所需的營養(yǎng)物質(zhì)與能量，而且還具有防病治病、調(diào)節(jié)人體生理機(jī)能的功能。這些功能是原蛋白質(zhì)和其組成氨基酸所不具備的，目前已從酪蛋白、乳清蛋白、大豆蛋白、豌豆蛋白、玉米蛋白、卵白蛋白、絲蛋白、膠原蛋白、水產(chǎn)蛋白等的酶解物中制得一系列功能各異的生物活性肽。但是利用啤酒廢酵母制備多肽的研究卻未見報道。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供了一種啤酒廢酵母制備多肽的方法。首先對啤酒廢酵母進(jìn)行預(yù)處理，除去雜質(zhì)，之后對預(yù)處理后的啤酒廢酵母采用自溶法制備啤酒廢酵母多肽液，制得的啤酒廢酵母多肽液采用等電點沉淀法去除核酸，之后對去除核酸的多肽液進(jìn)行脫色處理，然后進(jìn)行凝膠層析，經(jīng)過真空濃縮后，干燥得多肽。
所述的對啤酒廢酵母的預(yù)處理方法為將啤酒廢酵母加入兩倍0～4℃無菌水，添加啤酒廢酵母質(zhì)量1％的NaHCO3，反應(yīng)15min，傾去上清液，再用蒸餾水洗滌兩次，離心得干凈廢酵母。
所述的自溶法制備啤酒廢酵母多肽液為稱取預(yù)處理后的酵母泥與蒸餾水，預(yù)處理后的酵母泥與蒸餾水質(zhì)量比為1∶2，自溶時間為30～40h，溶液的pH為6～6.5，自溶溫度為40～50℃，自溶促進(jìn)劑NaCl的用量為預(yù)處理后的酵母泥質(zhì)量的4％。
所述的等電點法去除核酸為用6mol/L HCl溶液將啤酒廢酵母多肽液pH調(diào)整至核酸等電點，將核酸沉淀下來，然后通過離心去除雜質(zhì)，取得上清液。
所述的脫色處理為將去除核酸的啤酒廢酵母多肽液的pH調(diào)節(jié)至3～3.5，加入去除核酸的啤酒廢酵母多肽液質(zhì)量3％的顆粒狀活性炭，在溫度40～50℃下脫色3～4h。
所述的凝膠層析法用到的凝膠為經(jīng)過pH等于7.0Tris-HCl緩沖液溶脹的凝膠SephadexG-25，洗脫流速為0.5mL/min。
所述的干燥得多肽的方法為真空冷凍干燥。
有益效果
本發(fā)明以啤酒廢酵母作為原料，變廢為寶，同時制備工藝簡單易行，制得的多肽氨基酸含量豐富，具有較高的營養(yǎng)價值。
具體實施方式
原料及儀器
啤酒廢酵母 北京燕京啤酒股份有限公司；
NaCl、NaHCO3、NaOH、HCl、三氯乙酸 分析純 天津大茂化學(xué)試劑廠
PHS-25型精密數(shù)顯酸度計 上海偉業(yè)儀器廠；
TG328A型分析天平 奧豪斯國際貿(mào)易(上海)有限公司；
梅特勒一托利多AG135天平 上海梅特勒儀器公司；
電熱恒溫水浴鍋 天津太斯特儀器有限公司；
TDL-40B型離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠；
YXQ-LS-50SI型立式壓力蒸汽滅菌器 上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；
SephadexG-25 Superfine Amersham Biosciences公司；
UV-2550紫外分光光度計 日本島津公司；
Biochrom30型氨基酸自動分析儀 Amersham Biosciences公司；
AKTA purifine制備色譜儀 Amersham Biosciences公司；
F 1.6×100cm層析柱 上海亞榮公司；
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RE-52B 上海亞榮生化儀器廠；
真空干燥器 上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠；
ALPHAl-4 冷凍干燥機(jī)德國；
實施例1
將北京燕京啤酒股份有限公司的啤酒廢酵母加入兩倍4℃無菌水，添加啤酒廢酵母質(zhì)量1％的NaHCO3，反應(yīng)15min，傾去上清液，再用蒸餾水洗滌兩次，離心得干凈廢酵母。稱取預(yù)處理后的酵母泥與蒸餾水，預(yù)處理后的酵母泥與蒸餾水質(zhì)量比為1∶2，加入預(yù)處理后的酵母泥質(zhì)量4％的自溶促進(jìn)劑NaCl，將溶液的pH調(diào)至6.5，在溫度為40℃下自溶35h，得啤酒廢酵母多肽液。用6mol/L HCl溶液將啤酒廢酵母多肽液pH調(diào)整至核酸等電點，將核酸沉淀下來，然后通過離心去除雜質(zhì)，取得上清液。將去除核酸的啤酒廢酵母多肽液的pH調(diào)節(jié)至3.5， 加入去除核酸的啤酒廢酵母多肽液質(zhì)量3％的顆粒狀活性炭，在溫度50℃下脫色4h。之后用經(jīng)過pH等于7.0Tris-HCl緩沖液溶脹的凝膠SephadexG-25進(jìn)行凝膠層析，洗脫流速為0.5mL/min。真空濃縮后，真空冷凍干燥得多肽。
經(jīng)過精制后所得到的啤酒廢酵母多肽液為澄清透明黃色液體，略帶苦味，有酵母特殊的香味。
將啤酒廢酵母多肽液經(jīng)過凝膠層析分離、冷凍干燥所得啤酒廢酵每多肽為乳白色精細(xì)粉末，略微發(fā)黃，略帶苦味，有酵母特殊的香味，易溶于水。
制得的多肽含有16種氨基酸，其中包括7種人體必需氨基酸，氨基酸總量為967mg/100mL。
以上實施例可以說明本發(fā)明制得的多肽中氨基酸含量豐富，具有較高的營養(yǎng)價值，同時制備工藝簡單。