專利名稱：抑制血管生成的5－取代的－1,2,4－噻二唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用作血管生成抑制劑的5-取代的-1，2，4-噻二唑衍生物及其制備方法，本發(fā)明還涉及含有所述化合物的組合物及其作為藥物的用途。
血管生成，即由內(nèi)皮細胞形成的新血管，在許多生理及病理過程中起著重要作用。血管供血的發(fā)展是正常組織的生長、成熟和維持所必需的。其對傷口愈合也是必要的。血管生成對于實體腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移是至關(guān)重要的并且涉及多種其它病理性疾病如新生血管性青光眼、糖尿病性視網(wǎng)膜病、牛皮癬及類風濕性關(guān)節(jié)炎。這些病理癥狀的特點為血管生成作用增強，即在此期間正常休眠內(nèi)皮細胞活化，降解細胞外基質(zhì)屏障，增殖并移動形成新血管。為了控制這些依賴血管生成的疾病，具有血管生成抑制特性的化合物將是極其有用的。
本領(lǐng)域已公開了幾種抑制血管生成的化合物，也稱為血管阻滯劑、血管抑制劑或血管生成拮抗劑。例如，氫化可的松為一種熟知的血管生成抑制劑(Folkman等，Science 2301375，1985，“在肝素或肝素片斷存在下的一類新的類固醇血管生成抑制劑”；Folkman等，Science221719，1983，“在可的松存在下由肝素或肝素片斷引起的血管生成抑制和腫瘤消退”)。
EP-0398427(1990年11月22日公布)公開抗鼻病毒的pyridazinames，EP-0435381(1991年7月3日公布)描述了抗小核糖核酸病毒活性的噠嗪胺類(pyridazinaminies)。EP-0429344(1991年5月29日公布)公開作為膽堿能激動劑的氨基噠嗪衍生物。
本發(fā)明化合物不同于現(xiàn)有技術(shù)化合物之處在于其總是由噻二唑基部分取代，尤其是基于這樣的事實，即這些化合物意外地具有血管生成抑制性質(zhì)。
本發(fā)明涉及下式化合物
及其N-氧化物形式、藥學上可接受的酸加成鹽和立體化學異構(gòu)形式，其中X為CH或N；R1為氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、氨基、一-或二(C1-6烷基)氨基、Ar1、Ar1NH-、C3-6環(huán)烷基、羥甲基或芐氧基甲基；R2為氫、C1-6烷基、氨基、氨基羰基、一-或二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基氨基、羥基或C1-6烷氧基；R3、R4和R5各自獨立選自氫、鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、硝基、氨基、氰基、疊氮基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷硫基、C1-6烷氧基羰基或Het1；
為Ar2、Ar2CH2-或Het2；Ar1為苯基；由1、2或3個各自獨立選自下列的取代基取代的苯基鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三鹵代甲基、氨基或硝基；Ar2為苯基；由1、2或3個各自獨立選自下列的取代基取代的苯基鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三鹵代甲基、氨基或硝基；Het1為選自下列的單環(huán)雜環(huán)噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基或噁唑啉基；且各單環(huán)雜環(huán)可任選在碳原子上由C1-4烷基取代；及Het2為選自下列的單環(huán)雜環(huán)呋喃基、噻吩基、噁二唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基；且各單環(huán)雜環(huán)可任選在碳原子上由1或2個各自獨立選自下列的取代基取代鹵代、C1-4烷基、C1-4烷氧基、硝基或三氟甲基。
上述定義及下文使用的鹵代一般指氟代、氯代、溴代和碘代；C1-4烷基定義為具有1-4個碳原子的直鏈和支鏈飽和烴基，如甲基、乙基、丙基、丁基、1-甲基乙基、2-甲基丙基等；C1-6烷基意欲包括C1-4烷基及其具有5-6個碳原子的較高同系物，如戊基、2-甲基丁基、己基、2-甲基戊基等。
部分的實例為
其中
為式Ar2CH2的基團，當X為CH時，所述基團的CH2部分優(yōu)選連接在哌啶基部分的氮原子上，或當X為氮時，則連接在哌嗪基部分的氮原子上。
上述藥學上可接受的酸加成鹽意欲包括式(I)化合物可形成的具治療活性的、非毒性酸加成鹽。具有堿性性質(zhì)的式(I)化合物可通過用適當?shù)乃崽幚硭龅膲A形式，而轉(zhuǎn)化為其藥學上可接受的酸加成鹽。適當?shù)乃岚ɡ纾瑹o機酸如氫鹵酸，例如鹽酸或氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或有機酸例如，乙酸、丙酸、羥基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對-甲苯磺酸、環(huán)己烷氨基磺酸、水楊酸、對-氨基-水楊酸、撲酸等。
術(shù)語酸加成鹽也包括式(I)化合物可形成的水合物及溶劑加合物形式。此類形式的實例為例如，水合物和醇化物等。
上文使用的術(shù)語式(I)化合物的立體化學異構(gòu)形式定義為式(I)化合物可能具有的，由相同順序的鍵連接的相同原子組成的，但具有不可交換的不同三維結(jié)構(gòu)的所有可能的化合物。除非另外提及或指明，則一個化合物的化學名稱包括該化合物可能具有的所有可能的立體化學異構(gòu)形式的混合物。所述混合物可含所述化合物的基本分子結(jié)構(gòu)的所有非對映異構(gòu)體和/或?qū)τ丑w。式(I)化合物的所有立體化學異構(gòu)形式，包括純凈形式或其相互的混合物，均在本發(fā)明范圍內(nèi)。
某些式(I)化合物也可以以其互變異構(gòu)形式存在。雖然此類形式在上式中并未明確指明，但仍包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
式(I)化合物的N-氧化物形式意欲包括其中一個或多個氮原子被氧化為所謂N-氧化物的那些式(I)化合物。
下文任何時候使用的術(shù)語“式(I)化合物”還包括藥學上可接受的酸加成鹽及所有立體異構(gòu)形式。
一組重要的化合物包括其中符合一個或多個下列限制條件的式(I)化合物a)X為N；b)R1為氫、C1-6烷基、氨基或二(C1-6烷基)氨基；b)R2為氫；c)R3、R4和R5各自獨立選自氫、鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、硝基或C1-6烷氧基羰基。
具體的一組化合物為其中X為N；R1為氫、C1-4烷基或二(C1-4烷基)氨基；R2為氫；R3、R4和R5各自獨立選自氫、鹵代、C1-4烷基、C1-4烷氧基或三氟甲基；及二價基團
為Ar2、Ar2CH2-或Het2，其中Ar2為苯基或由1或2個各自獨立選自下列的取代基取代的苯基鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三鹵代甲基、氨基或硝基；Het2為噻二唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基的那些式(I)化合物。
優(yōu)選的一組化合物為其中X為N，R1為甲基，R2為氫，R3和R4為氫而R5為三氟甲基的那些式(I)化合物。
更優(yōu)選的一組化合物為其中R5為3位上的三氟甲基的那些優(yōu)選的式(I)化合物。
最優(yōu)選的式(I)化合物為1-[4-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)苯基]-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪，及1-[5-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)-2-吡啶基]-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪，及其藥學上可接受的酸加成鹽、立體異構(gòu)形式或N-氧化物。
本發(fā)明化合物一般通過式(II)中間體與式(III)中間體的反應制備。
在上述和下述反應流程中，W代表合適的活性離去基團例如，鹵代如氟代、氯代、溴代、碘代，或者在某些情況下，W也可為磺酰氧基如甲磺酰氧基、苯磺酰氧基、三氟甲磺酰氧基等活性離去基團。所述反應可按照本領(lǐng)域熟知的步驟進行，例如在反應惰性溶劑如N，N-二甲基甲酰胺、乙腈、甲基異丁酮等中，最好在堿如碳酸氫鈉、碳酸鈉或三乙胺存在下，一起攪拌兩種反應物進行。該反應可在室溫至反應混合物的回流溫度之間方便地進行。
其中R1為CH3的式(I)化合物，即式(I-a)代表的所述化合物也可在反應-惰性溶劑例如，甲醇或乙醇中，在堿如吡啶存在下通過用羥氨基-O-磺酸處理式(IV)中間體制備。
式(I)化合物還可按照本領(lǐng)域熟知的基團轉(zhuǎn)換反應，通過式(I)化合物的相互轉(zhuǎn)換而制備。
按照本領(lǐng)域熟知的將三價氮轉(zhuǎn)化為其N-氧化物形式的方法，也可將式(I)化合物轉(zhuǎn)化為相應的N-氧化物形式。所述N-氧化反應一般可通過式(I)的原料與合適的有機或無機過氧化物反應而進行。合適的無機過氧化物包括如過氧化氫、堿金屬或堿土金屬的過氧化物，例如，過氧化鈉、過氧化鉀；合適的有機過氧化物可包括過氧酸，例如，苯甲過氧酸(benzenecarboperoxoic acid)或鹵代苯甲過氧酸，例如3-氯代苯甲過氧酸、過氧鏈烷酸如過氧乙酸、烷基過氧化氫如叔丁基過氧化氫。合適的溶劑為例如，水、低級鏈烷醇如乙醇等，烴如甲苯，酮如2-丁酮、鹵代烴如二氯甲烷，及此類溶劑的混合物。
原料和某些中間體為已知的化合物且可由商業(yè)購得，或者可根據(jù)本領(lǐng)域熟知的常規(guī)反應方法制得。例如，某些式(II)的中間體，例如5-(4-氟代苯基)-3-甲基-1，2，4-噻二唑已由Yang-i Lin等在J.Org.Chem.，45(19)，3750-3753頁(1980)中描述，且某些式(III)中間體，如1-[3-(三氟甲基)苯基]-哌嗪可從商業(yè)購得。
式(II)中間體可通過式(V)化合物(其中W為如上定義的合適的離去基團)與式(VI)中間體反應(任選作為其酸加成鹽加入)來制備。
式(IV)中間體可如流程I所示制備。
流程I
在流程I中，式(VII)中間體，其中W1為合適的離去基團例如，鹵代或磺酰氧基而Z為氰基或氨基羰基，按照上述合成式(I)化合物的本領(lǐng)域熟知的反應方法與式(III)中間體反應。生成的式(VIII)中間體用Lawesson’s試劑在合適的溶劑，例如甲苯或吡啶中處理，或在合適的溶劑，例如N，N-二甲基甲酰胺中，任選在三乙胺存在下，用硫化氫處理。隨后，在反應-惰性溶劑，例如甲苯或二氯甲烷中，用N，N-二甲基乙酰胺縮二甲醇處理式(IX)中間體，由此產(chǎn)生式(IV)中間體。
式(I)化合物和某些中間體在其結(jié)構(gòu)中可以具有一個或多個立體化學中心，以R或S構(gòu)型存在。例如，R1、R2、R3、R4或R5可以是具有立體化學中心的C1-6烷基。
按照上述方法制備的式(I)化合物可以以對映體的外消旋混合物的形式合成，其可按照以下本領(lǐng)域熟知的拆分方法彼此分離。式(I)的外消旋化合物可以通過與合適的手性酸反應而轉(zhuǎn)化為相應的非對映異構(gòu)的鹽形式。所述非對映異構(gòu)的鹽形式隨后可例如通過選擇性的或分級結(jié)晶法分離而對映體可以通過堿從中釋放出來。另一種分離式(I)化合物的對映體形式的方法涉及采用手性固定相進行液相層析。合適的手性固定相為，例如多糖，特別是纖維素或直鏈淀粉衍生物。市售可得的多糖基的手性固定相為ChiralCel CA、OA、OB、OC、OD、OF、OG、OJ和OK，及Chiralpak AD、AS、OP(+)和OT(+)。與所述多糖手性固定相結(jié)合使用的合適的洗脫劑或流動相為己烷等，可用醇如乙醇、異丙醇等改性。所述純的立體化學異構(gòu)形式也可從相應的純立體化學異構(gòu)形式的合適原料衍生，條件是該反應應是立體特異性的。如果需要特異性的立體異構(gòu)體，則優(yōu)選通過立體特異性的制備方法合成所述化合物。這些方法特別適于使用對映體純的原料。
式(I)化合物具有在體內(nèi)和體外抑制血管生成的有價值的藥理性質(zhì)。
根據(jù)它們的藥理活性，式(I)化合物，它們的藥學上可接受的酸加成鹽、其立體化學異構(gòu)形式或N-氧化物形式為血管生成的抑制劑。因此，血管生成抑制劑適用于控制或治療依賴血管生成的疾病，例如眼部新血管性疾病、新生血管性青光眼、糖尿病性視網(wǎng)膜病、晶狀體后纖維組織形成、血管瘤、血管纖維瘤、牛皮癬、骨關(guān)節(jié)炎和類風濕性關(guān)節(jié)炎。此外，血管生成抑制劑也適用于控制實體瘤生長，例如，乳癌、前列腺癌、黑素瘤、腎臟腫瘤、結(jié)腸癌、宮頸癌等及它們的轉(zhuǎn)移。
因此，本發(fā)明公開用作藥物的式(I)化合物以及這些式(I)化合物在治療血管生成依賴性疾病的藥物制備中的用途。
根據(jù)所述化合物在治療或預防血管生成依賴性疾病中的用途，本發(fā)明提供治療患有此類疾病的溫血動物的方法，所述方法包括系統(tǒng)給予治療有效量的式(I)化合物、其N-氧化物或藥學上可接受的酸加成鹽。
根據(jù)它們的有用的藥理性質(zhì)，所述化合物可以配制成各種給藥目的的不同藥物形式。為制備本發(fā)明的藥用組合物，可以將作為活性成分的有效量的特定化合物(以堿或酸加成鹽的形式)與藥學上可接受的載體混合成緊密混合物，該載體可采用多種形式，其取決于給藥所需的制劑形式。這些藥用組合物優(yōu)選以單一的劑型適合于口服、直腸或經(jīng)胃腸外注射給藥。例如，在制備口服劑型的藥用組合物時，在口服液體制劑如懸浮液、糖漿、酏劑和溶液的情況下，可以使用任何常用的藥物介質(zhì)，例如，水、甘醇、油、醇等；或者在散劑、丸劑、膠囊和片劑的情況下，可使用固體載體如淀粉、糖、高嶺土、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等。由于片劑和膠囊方便給藥，因而代表了最有利的口服單位劑型，此種情況下明顯應使用固體藥用載體。對于胃腸外組合物，載體通常包括無菌水(至少為大部分)，盡管可包括其它成分以幫助溶解。例如，可以制備可注射的溶液，其中所述載體包括生理鹽水溶液、葡萄糖溶液或生理鹽水和葡萄糖溶液的混合液。也可以制備可注射的懸浮液，其中可以使用合適的液體載體、懸浮劑等。在適合于經(jīng)皮給藥的組合物中，該載體任選包括滲透促進劑和/或適合的濕潤劑，任選與少量的任何性質(zhì)的合適添加劑混合，該添加劑應對皮膚不產(chǎn)生明顯的有害作用。所述添加劑可促進經(jīng)皮給藥和/或有助于制備所需的組合物。這些組合物可以各種方式給藥，如作為透皮貼劑、定點給藥(spot-on)作為軟膏劑。式(I)的酸加成鹽由于其超過相應的堿形式的增加的水溶性，因而明顯更適于制備含水組合物。
將上述藥用組合物配制成給藥方便且劑量均一的單位劑型是特別有利的。本說明書和權(quán)利要求書中使用的單位劑型指適合作為單位劑量的物理上獨立的單位，每一單位含有經(jīng)計算可與所需的藥用載體一起產(chǎn)生所需療效的預定量的活性成分。此類單位劑型的實例為片劑(包括劃痕片或包衣片)、膠囊、丸劑、袋裝散劑、糯米紙囊劑、注射溶液或懸浮液、茶匙量和湯匙量的口服液等，及其分開的多劑量組合。
對于口服給藥，所述藥用組合物可采用固體劑型，例如，片劑(僅用于吞服及咀嚼型兩種)、膠囊或gelcaps可通過常規(guī)方法，用藥學上可接受的賦形劑如粘合劑(如預膠凝化的玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羥丙基甲基纖維素)，填充劑(如乳糖、微晶纖維素或磷酸鈣)，潤滑劑(如硬脂酸鎂、滑石粉或二氧化硅)，崩解劑(如馬鈴薯淀粉或羥基乙酸淀粉鈉)，或潤濕劑(如月桂基硫酸鈉)來制備。所述片劑可采用本領(lǐng)域眾所周知的方法包衣。
口服給藥的液體制劑可以采用例如，溶液、糖漿或懸浮液的形式，或它們可以作為臨用前用水或其它合適的溶媒復制的干產(chǎn)物存在。這樣的液體制劑可通過常規(guī)方法，任選用藥學上可接受的添加劑例如，懸浮劑(如山梨醇糖漿、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素或氫化食用脂肪)，乳化劑(如卵磷脂或阿拉伯膠)，非水性溶媒(如杏仁油、油性脂或乙醇)和防腐劑(如甲基或丙基對-羥基苯甲酸酯或山梨酸)來制備。
藥學上可接受的甜味劑優(yōu)選至少包括至少一種強化甜味劑例如，糖精、糖精鈉或糖精鈣、天冬甜素、雙氧噁噻嗪鉀、環(huán)己基氨基磺酸鈉、天門冬酰丙氨酸酯、二氫查耳酮甜味劑、莫那靈、甜菊苷或三氯半乳蔗糖(4，1’，6’-三氯-4，1’，6’-三脫氧半乳糖蔗糖)，優(yōu)選糖精、糖精鈉或糖精鈣，并任選使用本體(bulk)甜味劑例如，山梨醇、甘露醇、果糖、蔗糖、麥芽糖、異麥芽糖醇、葡萄糖、氫化葡萄糖糖漿、木糖醇、焦糖或蜂蜜。
強化甜味劑一般以低濃度使用。例如，在使用糖精鈉的情況下，該濃度范圍可在0.04％-0.1％(w/w)之間(以最終制劑總體積為基準計)，優(yōu)選為低劑量制劑的約0.06％和高劑量制劑的約0.08％。本體甜味劑可有效地大量使用，其范圍為約10％-約35％，優(yōu)選為約10％-15％(w/v)。
在低劑量制劑中可遮蔽苦味成分的藥學上可接受的調(diào)味劑優(yōu)選為水果型調(diào)味劑，例如櫻桃、樹莓、黑加侖或草莓調(diào)味劑。兩種調(diào)味劑的組合可產(chǎn)生非常好的效果。在高劑量制劑中，需要使用更強的調(diào)味劑，例如Caramel Chocolate(焦糖巧克力)調(diào)味劑、Mint Cool(涼薄荷)調(diào)味劑、Fantasy調(diào)味劑等藥學上可接受的強力調(diào)味劑。存在于最終組合物中的每種調(diào)味劑的濃度范圍為0.05％-1％(w/v)。聯(lián)合使用所述強力調(diào)味劑較為有利。調(diào)味劑優(yōu)選以制劑在酸性條件下不產(chǎn)生味道和色澤的任何改變或喪失的劑量使用。
本發(fā)明化合物也可配制為貯存式制劑。此類長效制劑可通過植入(如皮下或肌內(nèi))或經(jīng)肌內(nèi)注射給藥。因此，例如，該化合物可與合適的聚合物或疏水物質(zhì)配制(例如，在可接受的油中配制為乳劑)，或者與離子交換樹脂配制，或配制為難溶性衍生物，例如，難溶性鹽。
本發(fā)明化合物可配制為經(jīng)注射胃腸外給藥(較方便經(jīng)靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮下)的制劑，例如，通過大劑量注射或連續(xù)靜脈內(nèi)輸注。注射用制劑可以為單位劑型，例如，為安瓿或多劑量容器形式，并含有防腐劑。組合物可采用在油性或水性溶媒中的懸浮液、溶液或乳液的形式，并可含有調(diào)配劑如等滲調(diào)節(jié)劑、懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。或者，活性成分可為臨用前用合適的溶媒例如，無菌、無熱原水再配制的粉末形式。
本發(fā)明化合物也可配制為直腸用的組合物，例如，栓劑或滯留式灌腸劑，例如，含有常規(guī)的栓劑基質(zhì)如可可脂或其它甘油酯。
對于鼻內(nèi)給藥，本發(fā)明化合物可作為，例如液體噴霧劑、粉末劑或以滴劑的形式使用。
本領(lǐng)域技術(shù)人員從下文所示的試驗結(jié)果可以很容易確定有效量。一般來說，推測有效量在0.001mg/kg-10mg/kg體重之間，特別是在0.01mg/kg-1mg/kg體重之間。在一天內(nèi)，將所需劑量按適當?shù)臅r間間隔分2、3、4或多次亞劑量給藥可能是適宜的。所述亞劑量可以配制為單位劑型，例如，每單位劑型含有0.01-500mg，特別是0.1mg-200mg的活性成分。
下列實施例僅供說明試驗部分下文的“DMF”指N，N-二甲基甲酰胺，“DCM”指二氯甲烷，“DIPE”指二異丙基醚及“THF”指四氫呋喃。
A.中間體的制備實施例A.1a)將2-氯代-4-甲基嘧啶(0.07mol)的亞硫酰氯(100ml)中的混合物攪拌并回流16小時。蒸發(fā)溶劑得到2-氯代-4-[二氟代(氟代硫代)甲基]嘧啶(中間體1)。
b)于0℃，將1-亞氨基-乙胺鹽酸鹽(1∶1)(0.08mol)加入到中間體1(0.07mol)的DCM(300ml)的攪拌混合物中。于0℃滴加氫氧化鈉(50％，20ml)。于5℃攪拌該混合物1小時。加入水(300ml)和DCM(300ml)。使該混合物分層。用DCM洗滌含水層兩次。將合并的有機層干燥、過濾并蒸發(fā)溶劑。殘留物在玻璃濾器上經(jīng)硅膠純化(洗脫劑DCM)。收集兩份純的部分并蒸發(fā)其溶劑，得到3.5g的2-氯代-4-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)嘧啶(中間體2)。
實施例A.2a)將6-氮代-3-吡啶基甲酰胺(0.11mol)、1-[3-(三氟甲基)-苯基]-哌嗪(0.11mol)和碳酸鈉(0.22mol)的DMF(300ml)中的混合物于120℃攪拌過夜。將該混合物傾入冰水(600ml)中并攪拌1小時。濾除沉淀物并干燥。將該部分中的一份(4g)溶于DCM和碳酸氫鈉水溶液中。使該混合物分層。用DCM萃取含水層3次。將合并的有機層干燥、過濾并蒸發(fā)溶劑至小體積。濾除沉淀物并干燥，得到3.2g的6-[4-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌嗪基]-3-吡啶甲酰胺(中間體3)。
b)將中間體3(0.013mol)和Lawesson氏試劑(0.007mol)在甲苯(130ml)中的混合物攪拌并回流2小時。冷卻該混合物。加入水(100ml)。攪拌該混合物1小時并使之分層。用甲苯萃取含水層3次，用DCM萃取1次。將合并的有機層干燥、過濾并蒸發(fā)溶劑，得到7.3g的6-[4-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌嗪基]-3-吡啶硫代甲酰胺(中間體4)。
實施例A.3將中間體4(0.013mol)和1，1-二甲氧基-N，N-二甲基-乙胺(0.021mol)的混合物靜置過夜，然后可不經(jīng)進一步純化使用，得到N-[1-(二甲基氨基)亞乙基]-6-[4-[3-(三氟甲基)苯基]-1-哌嗪]-3-吡啶硫代甲酰胺(中間體5)表I.1列出根據(jù)實施例A.3制備的中間體。
表I.1
B.最終化合物的制備實施例B.1將5-(4-氟代苯基)-3-甲基-1，2，4-噻二唑(0.012mol)、1-[3-(三氟甲基)苯基]-哌嗪(0.014mol)和碳酸鈉(0.024mol)的DMF(10ml)中的混合物于140℃攪拌24小時，然后于150℃攪拌24小時，冷卻后傾入冰水(200ml)中并攪拌。濾除沉淀物，溶于DCM中，干燥、過濾并蒸發(fā)溶劑。使殘留物從DIPE中結(jié)晶。濾除沉淀物并干燥，得到2.5g(52％)的1-[4-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)苯基]-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪(化合物2)。
實施例B.2將羥胺-O-磺酸(0.011mol)的甲醇(15ml)中的混合物一次性加入中間體5(0.01mol)和吡啶(0.02mol)在乙醇(40ml)中的混合物中。于室溫下攪拌該混合物90分鐘。蒸發(fā)溶劑。使殘留物溶于DCM中，用水和0.1N氫氧化鈉水溶液洗滌，干燥、過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘留物溶于甲醇中、過濾并干燥。使殘留物溶于乙腈(100ml)。攪拌該混合物并沸騰至完全溶解，然后使之結(jié)晶出來。濾出沉淀物并干燥，得到1.4g(35％)的1-[5-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)-2-吡啶基]-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪(化合物8)。
表F.1列出根據(jù)以上實施例之一制備的化合物和表F.2列出上述試驗部分制備的化合物的碳、氫和氮元素分析實驗值(欄題目“exp.”)和理論值(欄題目“theor.”)。
表F.1
表F.2
C.藥理學實施例實施例C.1按照Nicosia，R.F.和Ottinetti在“Laboratory Investigation”，63卷，115頁，1990中所述，采用大鼠主動脈環(huán)的血管生成模型，在體外測定血管生成抑制活性。將化合物抑制微血管形成的能力與溶媒處理的對照組環(huán)比較。培養(yǎng)8天后，采用成像分析系統(tǒng)進行定量分析(微血管面積)，該系統(tǒng)包括光學顯微鏡、CCD攝像機以及按照Nissanov，J.、Tuman，R.W.、Gruver，L.M.和Fortunato，J.M.在“LaboratoryInvestigation”，73卷(#5)，734頁，1995中所述的常規(guī)設計的自動成像分析程序。在數(shù)個濃度下測試化合物，以確定抑制效力(IC50’s)。化合物1、2和6具有低于10nM的IC50值。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物
及其N-氧化物形式、藥學上可接受的酸加成鹽和立體化學異構(gòu)形式，其中X為CH或N；R1為氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、氨基、一-或二(C1-6烷基)氨基、Ar1、Ar1NH-、C3-6環(huán)烷基、羥甲基或芐氧基甲基；R2為氫、C1-6烷基、氨基、氨基羰基、一-或二(C1-6烷基)氨基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基氨基、羥基或C1-6烷氧基；R3、R4和R5各自獨立選自氫、鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、硝基、氨基、氰基、疊氮基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷硫基、C1-6烷氧基羰基或Het1；
為Ar2、Ar2CH2-或Het2；Ar1為苯基；由1、2或3個各自獨立選自下列的取代基取代的苯基鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三鹵代甲基、氨基或硝基；Ar2為苯基；由1、2或3個各自獨立選自下列的取代基取代的苯基鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三鹵代甲基、氨基或硝基；Het1為選自下列的單環(huán)雜環(huán)噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基或噁唑啉基；且各單環(huán)雜環(huán)可任選在碳原子上由C1-4烷基取代；及Het2為選自下列的單環(huán)雜環(huán)呋喃基、噻吩基、噁二唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基；且各單環(huán)雜環(huán)可任選在碳原子上由1或2個各自獨立選自下列的取代基取代鹵代、C1-4烷基、C1-4烷氧基、硝基或三氟甲基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中X為N；R1為氫、C1-6烷基、氨基或二(C1-6烷基)氨基；R2為氫；R3、R4和R5各自獨立選自氫、鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基、硝基或C1-6烷氧基羰基。
3.權(quán)利要求1或2中任一項的化合物，其中X為N；R1為氫、C1-4烷基或二(C1-4烷基)氨基；R2為氫；R3、R4和R5各自獨立選自氫、鹵代、C1-4烷基、C1-4烷氧基或三氟甲基；及二價基團
為Ar2、Ar2CH2-或Het2，其中Ar2為苯基和Het2為噻二唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基。
4.權(quán)利要求1-3中任一項的化合物，其中X為N，R1為甲基，R2為氫，R3和R4為氫而R5為三氟甲基。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物為1-[4-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)苯基]-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪，或1-[5-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)-2-吡啶基]-4-[3-(三氟甲基)苯基]哌嗪，及其立體異構(gòu)形式或藥學上可接受的酸加成鹽。
6.含有藥學上可接受的載體和作為活性成分的治療有效量的權(quán)利要求1-5中任一項的化合物的組合物。
7.制備權(quán)利要求6的藥用組合物的方法，其中將藥學上可接受的載體與權(quán)利要求1-5的化合物充分混合。
8.權(quán)利要求1-5中任一項的化合物作為藥物。
9.權(quán)利要求1-5中任一項的化合物在治療依賴血管生成的疾病的藥物制備中的用途。
10.權(quán)利要求1的化合物的制備方法，其中a)任選在合適的堿存在下，在反應惰性溶劑中，使式(II)中間體與式(III)中間體反應；
b)在合適的堿存在下，在反應惰性溶劑中，用羥氨基-O-磺酸處理式(IV)中間體，從而得到如其中R1為甲基的式(I)化合物所定義的式(I-a)化合物；
在上面的反應流程中，基團X、R1、R2、R3、R4、R5和
如權(quán)利要求1中所定義，且W為合適的離去基團；c)或者，式(I)化合物可按照本領(lǐng)域熟知的轉(zhuǎn)換反應互相轉(zhuǎn)化；或者，如果需要，式(I)化合物可轉(zhuǎn)化為藥學上可接受的酸加成鹽，或者相反，式(I)化合物的酸加成鹽可用堿轉(zhuǎn)化為游離堿形式；且如果需要，制備其立體化學異構(gòu)形式。
11.式(IV)化合物
及其酸加成鹽、N-氧化物形式或立體化學異構(gòu)形式，其中X、R2、R3、R4、R5和二價基團
如權(quán)利要求1中所定義。
12.制備如權(quán)利要求10的式(IV)化合物的方法，其中a)在反應惰性溶劑中，用N，N-二甲基乙酰胺縮二甲醇處理式(IX)中間體，由此產(chǎn)生式(IV)化合物；
b)或者，式(IV)化合物可按照本領(lǐng)域熟知的轉(zhuǎn)換反應互相轉(zhuǎn)化；或者，如果需要，式(IV)化合物可轉(zhuǎn)化為酸加成鹽，或者相反，式(IV)化合物的酸加成鹽可用堿轉(zhuǎn)化為游離堿形式；且如果需要，制備其立體化學異構(gòu)形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有血管生成抑制活性的式(Ⅰ)化合物及其N－氧化物形式、藥學上可接受的酸加成鹽和立體化學異構(gòu)形式,其中X為CH或N;R
文檔編號C07D295/14GK1261358SQ98806394
公開日2000年7月26日 申請日期1998年6月22日 優(yōu)先權(quán)日1997年6月24日
發(fā)明者R·A·斯托克布勒克斯, M·A·瑟斯特斯, M·J·M·范德阿爾, M·G·M·威廉斯, R·W·圖曼 申請人:詹森藥業(yè)有限公司