專利名稱：新型肽衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及有抗腫瘤作用的新型肽衍生物，更詳細(xì)地說，涉及式(I)所示的肽衍生物或其鹽，

式中(a)Q1表示1-二甲胺基-2-甲基丙基，而Q2表示(R)-或(S)-2-羥基-2-苯基乙胺基、2-苯基環(huán)丙基氨基或1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基，或者(b)Q1表示1-甲基-2-吡咯烷基，而Q2表示

，其中A表示氫原子或

其中Y表示氫原子或-COR1，R1表示羥基、低級(jí)烷氧基、芳烷氧基或

其中R2和R3可以相同也可以不同，分別表示氫原子、低級(jí)烷基、苯基或含有從S、O和N中選擇的1個(gè)或2個(gè)雜原子的4～7元雜環(huán)基，或者R2和R3也可以連同它們與之結(jié)合的氮原子一起形成一個(gè)還可以再含有從S、O和N中選擇的一個(gè)雜原子的4～7元雜環(huán)；B表示因情況而異還可以有鹵原子、羥基、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基取代的苯基。
背景技術(shù)：
從海洋軟體動(dòng)物截尾海兔屬的耳狀截尾海兔(Dolabella auricularia)分離出有細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用和/或抗贅生物作用的化合物，迄今為止也只有幾個(gè)，這些化合物稱為Dolastatin 1～15。其中Dolastatin 10是1987年由Pettit等人從印度洋產(chǎn)耳狀截尾海兔中提取的、具有以下結(jié)構(gòu)式的五肽，已知是已知化合物中有最強(qiáng)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用的化合物(參照Pettit等美國(guó)化學(xué)會(huì)志Journal of the American Chemical Society，第109卷第6883頁(yè)，1987年；和美國(guó)專利No.4816444說明書)。

而且，此后也有人報(bào)告了Dolastatin 10的全合成(參照美國(guó)專利No.4978744說明書)。
另一方面，本發(fā)明者等人以前也公開了某種Dolastatin 10衍生物(參照WO93/03054號(hào)和WO95/09864號(hào)公報(bào))。
這一次，本發(fā)明者等人發(fā)現(xiàn)，(a)Dolastatin 10的C端Dolaphenine(α-噻唑基苯乙胺)由其它取代基代替的某種Dolastatin10衍生物，和(b)Dolastatin 10的N端Dolavaline(N，N-二甲基纈氨酸)由N-甲基脯氨酸代替的某種Dolastatin 10衍生物，有比Dolastatin 10強(qiáng)得多的抗腫瘤作用。
發(fā)明公開本說明書中，“低級(jí)”這一術(shù)語(yǔ)系指帶有這一術(shù)語(yǔ)的基團(tuán)或化合物的碳原子數(shù)在6個(gè)以下，較好在4個(gè)以下。
在上述式(I)中，“低級(jí)烷基”可以列舉諸如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正己基等，“低級(jí)烷氧基”可以列舉諸如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基等。而“芳烷氧基”系指芳基-低級(jí)烷氧基，包括諸如芐氧基、苯乙氧基等，“鹵原子”包括氟、氯、溴和碘原子。
R2或R3表示“含有從S、O和N中選擇的1個(gè)或2個(gè)雜原子的4～7元雜環(huán)基”的情況下，該雜環(huán)基的實(shí)例可以列舉氮雜環(huán)丁基、呋喃基、噻吩甲基、吡啶基、哌啶基、吖庚因基、噻唑基、咪唑基、噁唑基、嘧啶基、噠嗪基等；另一方面，R2和R3表示“連同它們與之結(jié)合的氮原子一起形成一個(gè)還可以再含有從S、O和N中選擇的1個(gè)雜原子的4～7元雜環(huán)”的情況下，該雜環(huán)的實(shí)例可以列舉氮雜環(huán)丁-1-基、吡咯烷-1-基、哌啶子基、1-全氫吖庚因基、哌嗪-1-基、嗎啉代、噻嗎啉代基等。
不過，如下基團(tuán)的實(shí)例，

可以列舉氨基、甲胺基、乙胺基、異丙胺基、叔丁胺基、二甲胺基、二乙胺基、苯胺基、N-甲基-N-苯基氨基、呋喃基氨基、吡啶基氨基、2-噻唑基氨基、咪唑基氨基、嘧啶基氨基、吡咯烷-1-基、哌啶子基、嗎啉代基等。
符號(hào)B所表示的“因情況而異也可以有鹵原子、羥基、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基取代的苯基”，系指無取代基的苯基或者有1個(gè)鹵原子、羥基、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基取代的苯基，可以列舉諸如苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2-溴苯基、3-氟苯基、3-碘苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、2-羥基苯基、4-羥基苯基、2-甲基苯基、4-乙基苯基、2-甲氧基苯基、4-乙氧基苯基等。
本發(fā)明中較好的一組化合物是Q1為1-二甲胺基-2-甲基丙基而Q2為(R)-或(S)-2-羥基-2-苯基乙胺基時(shí)上述式(I)的化合物。
本發(fā)明中較好的另一組化合物是Q2表示

其中A表示氫原子，而B表示因情況而異也可以有鹵原子、尤其氟原子取代的苯基時(shí)，上述式(I)的化合物。
此外，本發(fā)明中較好的又一組化合物是Q2表示

-B，其中A表示因情況而異也可以有N-低級(jí)烷基氨基甲?；〈?-噻唑基，而B表示無取代基的苯基時(shí)，上述式(I)的化合物。
要說明的是，本發(fā)明的上述式(I)化合物中，由于異丙基、仲丁基、甲氧基和甲基各自結(jié)合的碳原子是不對(duì)稱碳原子，因而這些基團(tuán)可以有任意的(R)-或(S)-立體配置，這些全部包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)，但若從藥理活性的觀點(diǎn)來看，較好的是具有與Dolastatin 10相同立體構(gòu)型的化合物。
上述式(I)的肽化合物還可以呈鹽的形式存在，此類鹽的實(shí)例可以列舉鹽酸鹽、氫溴酸鹽、三氟乙酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、乙酸鹽等。
按照本發(fā)明，上述式(I)的肽化合物可以按照諸如肽化學(xué)領(lǐng)域眾所周知的液相合成法(參照E.休列達(dá)和K.柳布凱著“The Peptides”第1卷第76～136頁(yè)，1965年，Academic Press出版)，通過使各氨基酸或肽片斷縮合來制備。
例如，為避免在縮合時(shí)發(fā)生外消旋化，較好的是通過使下述式(II)的三肽片斷

(式中Q1有上述的含義)，與下述式(III)的片斷縮合來合成，

(式中Q2有上述的含義)。
此外，為了高效率地合成大多數(shù)本發(fā)明化合物，較好的是通過使下述式(IV)的四肽片斷

(式中Q1有上述的含義)，與下述式(V)的片斷縮合來進(jìn)行，H-Q2(V)(式中Q2有上述的含義)。
縮合反應(yīng)一般可以通過在惰性溶劑例如氯仿、乙酸乙酯、四氫呋喃(THF)、二甲基甲酰胺(DMF)、乙腈等中，必要時(shí)在有機(jī)堿例如三乙胺、N-甲基嗎啉、二異丙基乙胺(DIEA)等的存在下，用縮合劑例如二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)、二苯基磷酰胺(DPPA)、氰基磷酸二乙酯(DEPC)、BOP試劑等處理來進(jìn)行。
反應(yīng)溫度通常是-10℃～室溫、較好是0℃左右，式(III)化合物、有機(jī)堿和縮合劑相對(duì)于式(1I)化合物而言各自的用量比例，較為有利的是，式(II)化合物每1摩爾，式(III)化合物至少1摩爾、較好1.0～1.1摩爾左右，有機(jī)堿1～2摩爾左右，而縮合劑為等摩爾左右。
此外，式(IV)化合物與式(V)化合物的反應(yīng)也可以在與上述式(II)化合物與式(III)化合物的反應(yīng)相同的條件下進(jìn)行。
要說明的是，在Y表示羧基的情況下，式(I)化合物也可以通過用堿使Y表示低級(jí)烷氧羰基時(shí)的式(I)化合物水解來制備。
這樣得到的式(I)肽化合物從反應(yīng)混合物中的分離、精制，可以用重結(jié)晶、離子交換色譜法、凝膠過濾、高速液體色譜法等進(jìn)行。
還要說明的是，上述反應(yīng)中作為起始原料使用的所述式(II)、(III)和(IV)化合物大部分是先有文獻(xiàn)中從未記載的新型化合物，但通過用液相合成法使其構(gòu)成成分的各氨基酸縮合就可以容易地制備。
本發(fā)明的式(I)肽化合物有比Dolastatin 10更強(qiáng)的抗腫瘤作用，而且治療范圍比也大，可用于處置或治療諸如白血病、非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌、大腸癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)癌、黑素瘤、卵巢癌、腎臟癌、胃癌、膀胱癌等。
本發(fā)明的式(I)化合物的抗腫瘤作用可以測(cè)定如下。
向7周齡的CDF1小鼠的腹腔內(nèi)各移植小鼠白血病P388細(xì)胞0.1ml(106細(xì)胞/小鼠)。在移植第1日(移植次日)和第5日經(jīng)腹腔內(nèi)注射藥物，對(duì)小鼠的生死進(jìn)行60日觀察，從觀察結(jié)果按下式算出延命率(ILS，％)。要說明的是，下式中T系指給藥組的生存日數(shù)中值，C系指對(duì)照組的生存日數(shù)中值。

其結(jié)果列于下表中。其中，抗腫瘤作用以Dolastatin 10的延命率作為1時(shí)的相對(duì)比值表示。
表化合物的實(shí)施例No.抗腫瘤作用實(shí)施例1 1.5實(shí)施例2 1.9實(shí)施例9 1.3Dolastatin 10 1本發(fā)明涉及的化合物當(dāng)作為藥劑使用時(shí)，因其用途而異，可以配制成固體形態(tài)(例如錠劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、散劑、細(xì)粒劑、丸劑、糖錠劑等)、半固體形態(tài)(例如栓劑、軟膏等)或液體形態(tài)(注射劑、乳劑、懸浮液劑、洗劑、噴霧劑等)中任何一種制劑形態(tài)再使用。但是，能在上述制劑中使用的無毒添加劑可以列舉諸如淀粉、明膠、葡萄糖、乳糖、果糖、麥芽糖、碳酸鎂、滑石粉、硬脂酸鎂、甲基纖維素、羧甲基纖維素或其鹽、阿拉伯樹膠、聚乙二醇、對(duì)羥基苯甲酸烷酯、糖漿、乙醇、丙二醇、凡士林、碳蠟、甘油、氯化鈉、亞硫酸鈉、磷酸鈉、檸檬酸等。該藥劑還可以再含有治療上有用的其它藥劑。
該藥劑中本發(fā)明化合物的含量因其劑型而異，但一般較好的是，在固體和半固體形態(tài)的情況下含有0.1～50％(重量)的濃度，而在液體形態(tài)的情況下含有0.05～10％(重量)的濃度。
本發(fā)明化合物的給藥量，因作為給藥對(duì)象的、以人為首的溫血?jiǎng)游锓N類、給藥途徑、癥狀輕重、醫(yī)生診斷等方面的不同可以有很大差異，但一般可以是每日0.01～50mg/kg左右。然而，根據(jù)患者的癥狀輕重、醫(yī)生的診斷，當(dāng)然也可以給藥比上述范圍的下限少的劑量或比上限多的劑量。上述給藥量可以一天一次或分?jǐn)?shù)次給藥。
實(shí)施例以下用參考例和實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
要說明的是，參考例和實(shí)施例中使用的化合物號(hào)碼對(duì)應(yīng)的化合物結(jié)構(gòu)，請(qǐng)參照以下流程

圖1～3。其中，Bu1表示叔丁基，Boc表示叔丁氧羰基，Bzl表示芐基，Z表示芐氧羰基，Me表示甲基，Q2、B和Y有上述的含義。
流程圖1

流程圖2


流程圖3

參考例1化合物1 830.7mg(1.71毫摩爾)在水冷卻下溶于50％三氟乙酸/二氯甲烷20ml中，在室溫?cái)嚢?小時(shí)后減壓蒸干，殘?jiān)苡诙谆柞０?DMF)5ml中，在冰冷卻下添加三乙胺2.4ml，減壓蒸干。
另一方面，化合物2 644.3mg(1.71毫摩爾)在冰冷卻下溶于4N氯化氫/二噁烷8.6ml中，在室溫?cái)嚢?.5小時(shí)后減壓蒸干。
兩者合并、溶于DMF 7ml中，在冰冷卻、攪拌下添加氰基磷酸二乙酯(DEPC)352mg(2.16毫摩爾)和三乙胺0.53ml(3.82毫摩爾)，在0℃～室溫連續(xù)攪拌過夜。反應(yīng)液用乙酸乙酯-苯(4∶1)混合液稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水洗滌、干燥。蒸出溶劑，殘留油狀物1.35g以己烷-甲醇-二氯甲烷(4∶5∶15)作為洗脫劑用塞法迪克斯LH-20柱色譜法精制，得到無定形物形式的目標(biāo)化合物3 1.06g(收率89.7％)。
28D-48.2°(c＝0.375，MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.1(m)、1.27(3H，d，J＝6.8Hz)、1.6-2.2(m)、2.25(6H，s)、2.3-2.6(m)、3.02(3H，s)、3.30(3H，s)、3.35(3H，s)、3.9-4.3(m)、4.80(1H，dd，J＝9.2Hz，6.4Hz)、5.13(2H，s)、6.86(1H，br.d)、7.34(5H，s)。
參考例2化合物3 688mg(1.00毫摩爾)溶于叔丁醇-水(9∶1)10ml中，添加5％鈀/炭0.1g，在氫氣流下攪拌5小時(shí)。濾出催化劑、洗滌、濾洗液減壓蒸干，得到無色泡沫狀目標(biāo)化合物4 590mg(收率98.7％)。
26D-57.3°(c＝0.955，MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.1(m)、1.17(3H，d，J＝4.4Hz)、1.6-2.2(m)、2.54(6H，s)、3.04 and 3.08(3H，s)、3.27和3.31(3H，s)、3.36知3.42(3H，s)、4.0-4.3(m)、4.6-5.0(m)、5.0-5.4(m)、6.97(1H，br.d)。
實(shí)施例1化合物4 30mg(50微摩爾)、(R)-2-羥基-2-苯基乙胺鹽酸鹽10mg(58微摩爾)溶于DMF 0.5ml中，在冰冷卻、攪拌下添加DEPC 9.5mg(58微摩爾)和三乙胺16μl(11.5微摩爾)，在0℃～室溫連續(xù)攪拌過夜。反應(yīng)液用二氯甲烷稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水洗滌、干燥、蒸出溶劑，殘留的殘?jiān)扔梅旨?jí)TLC(展開溶劑二氯甲烷-甲醇(10∶1))、然后以己烷-甲醇-二氯甲烷(4∶5∶15)作為洗脫劑用塞法迪克斯LH-20柱色譜法精制，得到無定形物形式的目標(biāo)化合物5-A(化合物5中R為(R)-2-羥基-2-苯基乙胺基的化合物)25.1mg(收率69.9％)。
23D-43.8°(c＝0.319，MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.1(m)、1.27(3H，d，J＝7.0Hz)、1.6-2.2(m)、2.27(6H，s)、2.3-2.6(m)、3.02(3H，s)、3.32(3H，s)、3.43(3H，s)、3.82(1H，br.d)、4.0-4.2(m)、4.77(1H，dd，J＝9.0Hz，6.8Hz)、6.6-7.0(m)、7.2-7.5(5H，m)。
實(shí)施例2同實(shí)施例1一樣進(jìn)行，從化合物4和(S)-2-羥基-2-苯基乙胺得到化合物5-B(化合物5中R為(S)-2-羥基-2-苯基乙胺基的化合物)(收率79.1％，)[α]28D-44.5°(c＝0.330，MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.1(m)、1.26(3H，d，J＝7.0Hz)、1.5-2.2(m)、2.65(6H，s)、3.02(3H，s)、3.32(3H，s)、3.40(3H，s)、3.85(1H，dd，J＝9.5Hz，1.5Hz)、4.0-4.2(m)、4.71(1H，dd，J＝8.1Hz，6.8Hz)、4.8-5.1(m)、6.7-6.9(m)、7.2-7.5(5H，m)。
實(shí)施例3同實(shí)施例1一樣進(jìn)行，從化合物4和dl-反式-2-苯基環(huán)丙基胺得到化合物5-C(化合物5中R為2-苯基環(huán)丙基胺基的化合物)(收率82.1％)。
24D-52.4°(c＝0.354，MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.2(m)、1.2-1.4(m)、1.6-2.2(m)、2.37(6H，s)、3.02(3H，s)、3.33 and 3.35(3H，s)、3.41(3H，s)、3.8-4.3(m)、4.76(1H.dd，J＝8.7Hz.6.9Hz)、7.26(5H，s)。
實(shí)施例4同實(shí)施例1一樣進(jìn)行，從化合物4和1，2，3，4-四氫異喹啉得到化合物5-D(化合物5中R為1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基的化合物)(收率66.2％)。
23D-48.2°(c＝0.320，MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.6-1.1(m)、1.1-1.3(m)、1.5-2.2(m)、2.55(6H，s)、2.7-3.0(m)、3.00(3H，s)、3.30(3H，s)、3.44(3H，s)、3.55-4.0(m)、4.0-4.3(m)、4.5-5.0(m)、7.15 and 7.19(4H，s)。
參考例3化合物6 0.85g(1.73毫摩爾)溶于叔丁醇-水(9∶1)15ml中，添加5％Pd/C 0.1g，在氫氣流下攪拌。反應(yīng)3小時(shí)后濾出催化劑、洗滌，濾洗液減壓蒸干。殘?jiān)苡诒?0ml中減壓蒸干，再重復(fù)一次這一操作，得到油狀物。此油狀物連同Z-脯氨酸0.48g(1.93毫摩爾)和氰基磷酸二乙酯(DEPC)0.31g(1.90毫摩爾)一起溶于二甲基甲酰胺(DMF)10ml中，在冰冷卻、攪拌下滴加三乙胺0.19g(1.88毫摩爾)溶于DMF 1ml中的溶液。
然后，在0℃攪拌4小時(shí)、在室溫連續(xù)攪拌過夜，然后清澈的反應(yīng)液用乙酸乙酯充分稀釋，用冰冷的2N鹽酸和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌、干燥、減壓蒸出溶劑，得到油狀物1.01g。用硅膠柱色譜法(洗脫劑∶乙酸乙酯-己烷(2∶1))精制，得到無色泡沫狀目標(biāo)化合物7 0.97g(收率95.1％)。
27D-81.7°(c＝1.025、MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.75-1.05(12H，m)、1.46(9H，s)、1.8-2.2(4H，m)、2.3-2.4(2H，m)、2.96(3H，s)、3.34(3H，s)、3.4-3.6(2H，m)、3.8-4.0(1H，m)、4.2-4.4(1H，m)、4.73(1H，dd，J＝8.9Hz，6.3Hz)、5.17(2H，br.s)、7.32(5H，s)。
參考例4化合物7 0.50g(0.85毫摩爾)溶于甲醇20ml中，添加37％福爾馬林1.0g和5％ Pd/C 0.4g，在氫氣流下連續(xù)攪拌48小時(shí)。濾出催化劑、用甲醇洗滌，濾洗液減壓蒸干，得到的油狀物溶于乙酸乙酯-己烷(1∶1)中，濾出不溶物。濾液減壓蒸干，殘留的油狀物用硅膠柱色譜法(洗脫劑∶乙酸乙酯-己烷(2∶1))精制，得到無色油狀的目標(biāo)化合物8 0.36g(收率90.0％)。
25D-76.2°(c＝1.10、MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.05(12H，m)、1.46(9H，s)、1.6-1.9(4H，m)2.31(3H，s)、2.3-2.45(2H，m)、2.99(3H，s)、3.36(3H，s)、3.75-4.0(1H，m)、4.73(1H，dd，J＝9.8Hz，7.1Hz)、7.81(1H，br.d)。
參考例5化合物8 310mg(0.66毫摩爾)在0℃溶于50％三氟乙酸/二氯甲烷中，在室溫?cái)嚢?小時(shí)后減壓蒸干。
另一方面，化合物2 263mg(0.70毫摩爾)在0℃ 4N氯化氫/二噁烷中，在室溫?cái)嚢?小時(shí)后減壓蒸干。殘?jiān)苡贒MF 3ml中，在冰冷卻下添加三乙胺0.9ml后減壓蒸干。殘?jiān)苡贒MF 3ml中，在冰冷卻下添加DEPC 136mg(0.83毫摩爾)和三乙胺0.11ml(0.79毫摩爾)，原樣連續(xù)攪拌過夜。
反應(yīng)液用乙酸乙酯-苯(4∶1)混合液稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水洗滌，干燥、減壓蒸出溶劑，得到油狀物449mg。用硅膠柱色譜法(洗脫劑∶二氯甲烷-甲醇(30∶1→10∶1))將其精制，得到無色油狀目標(biāo)化合物9。185mg(收率41.5％)。
Dn.d.
1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.1(m)、1，27(3H，d，J＝7.0Hz)、1.5-2.3(m)、2.34(3H，s)、2.3-2.9(m)、3.00(3H，s)、3.30(3H，s)、3.35(3H，s)、3.85-4.3(m)、4.68(1H，dd，J＝8.7Hz，4.9Hz)、5.13(2H，s)、7.34(5H，s)。
參考例6化合物9 185mg溶于叔丁醇-水(9∶1)3ml中，添加5％ Pd/C40mg，在氫氣流下攪拌5小時(shí)。濾出催化劑、洗滌，濾洗液減壓蒸干，得到無色油狀目標(biāo)化合物10。155mg(收率97.1％)。
D-83°(c＝0.365、MeOH)實(shí)施例5化合物10 23.4mg(40微摩爾)和苯乙胺12.1mg(100微摩爾)溶于DMF 0.5ml中，在冰冷卻、攪拌下添加DEPC 9.6mg(59微摩爾)和三乙胺8μl，原樣連續(xù)攪拌過夜。反應(yīng)液用二氯甲烷稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水洗滌、干燥、蒸出溶劑，得到殘?jiān)?3.0mg。用塞法迪克斯LH-20柱色譜法(洗脫劑∶己烷-甲醇-二氯甲烷(4∶5∶15)將其精制，得到無色蠟狀目標(biāo)化合物11-A(化合物11中B為苯基的化合物)18.8mg(收率68.6％)。
25D-61.0°(c＝0.39、MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.1(m)、1.21(3H，d，J＝7.0Hz)、1.5-2.2(m)、2.38(3H，s)、2.83(2H，t，J＝7.0Hz)、3.01(3H，s)、3.32(3H，s)、3.36(3H，s)、3.2-3.6(m)、3.84(1H，dd，J＝7.9Hz，2.2Hz)、3.9-4.2(m)、4.71(1H，dd，J＝9.2Hz，7.0Hz)、6.3-6.6(1H，m)、7.23(5H，s)、7.7-8.1(1H，m)。
同實(shí)施例5一樣進(jìn)行，使化合物10與苯乙胺衍生物反應(yīng)，得到實(shí)施例6～8的化合物。
實(shí)施例6化合物11-B(化合物11中B為2-氟苯基的化合物)蠟狀物(收率73.0％)[α]28D-61.7°(c＝0.326、MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.1(m)、1.21(3H，d，J＝7.1Hz)、1.5-2.3(m)、2.33(3H，s)、2.3-2.6(m)、2.88(2H，t，J＝7.3Hz)、3.01(3H，s)、3.32(3H，s)、3.37(3H，s)、3.2-3.7(m)、3.84(1H，dd，J＝8.0Hz，2.5Hz)、3.9-4.2(br)、4.5-4.9(1H，m)、6.-4-6.6(1H，m)、6.8-7.3(4H，m)、7.6-8.1(1H，m)。
實(shí)施例7化合物11-C(化合物11中B為3-氟苯基的化合物)無定形粉末(收率70.9％)[α]28D-56.4°(c＝0.287、MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.1(m)、1.22(3H，d，J＝7.0Hz)、1.5-2.2(m)、2.34(3H，s)、2.3-2.7(m)、2.84(2H，t，J＝6.8Hz)、3.02(3H，s)、3.32(3H，s)、3.36(3H，s)、3.3-3.6(m)、3.83(1H，dd，J＝8.4Hz，2.2Hz)、3.9-4.3(m)、4.5-4.9(m)、6.5-6.7(1H，m)、6.8-7.2(4H，m)、7.7-8.1(1H，m)。
實(shí)施例8化合物11-D(化合物11中B為4-氟苯基的化合物)無定形粉末(收率72.7％)[α]28D-55.9°(c＝0.285、MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.1(m)、1.22(3H，d，J＝7.3Hz)、1.5-2.2(m)、2.34(3H，br.s)、2.80(2H，t，J＝7.0Hz)、3.01(3H，s)、3.32(3H，s)、3.36(3H，s)、3.2-3.6(m)、3.75-3，95(1H，m)、3.95-4.3(m)、4.5-4.9(m)、6.4-6.6(1H，m)、6.8-7.2(4H，m)。
實(shí)施例9在冰冷卻下向化合物8 14.8mg(32微摩爾)中添加50％三氟乙酸/二氯甲烷0.4ml，在室溫?cái)嚢?小時(shí)后用氮?dú)獯祾咧粮?。另一方面，化合?2-A(化合物12中Y為氫原子的化合物)14.3mg(30微摩爾)同樣用50％三氟乙酸/二氯甲烷0.4ml處理至干。兩者合并、溶于DMF 1ml中，在冰冷卻下添加三乙胺85μl，然后減壓蒸干。將其再溶于DMF 0.4ml中，在冰冷卻、攪拌下添加DEPC 6.7mg(41微摩爾)和三乙胺10μl(72微摩爾)，原樣連續(xù)攪拌過夜。
反應(yīng)液減壓蒸干，殘?jiān)苡诙燃淄橹?，用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水洗滌、干燥。蒸出溶劑得到的殘?jiān)梅旨?jí)TLC(展開溶劑二氯甲烷-甲醇(10∶1))精制，得到白色粉末狀目標(biāo)化合物13-A(化合物13中Y為氫原子的化合物)14.5mg(收率62.0％)。
25D-92.4°(c＝0.218、MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.2(m)、1.22(3H，d，J＝7.0Hz)、1.5-2.0(m)、2.35(3H，s)、3.01(3H，s)、3.33(3H，s)、3.36(3H，s)、3.89(1H，dd，J＝7.0Hz，2.2Hz)、4.0-4.3(1H，m)、4.66(1H，dd，J＝7.9Hz，6.6Hz)、5.5-5.7(1H，m)、7.21(5H，s)、7.73(1H，d，J＝3.3Hz)。
實(shí)施例10同實(shí)施例9一樣進(jìn)行，使化合物8與化合物12-B(化合物12中Y為甲氧羰基的化合物)反應(yīng)，得到無定形固體狀化合物13-B(化合物13中Y為甲氧羰基的化合物)(收率78.2％)。
Dn.d.
1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.4(m)、1.11(3H，d，J＝7.0Hz)、1.5-2.1(m)、2.35(3H，s)、3.02(3H，s)、3.32(3H，s)、3.33(3H，s)、3.95(3H，s)、3.8-4.3(m)、4.70(1H，dd，J＝7.5Hz，6.8Hz)、5.4-5.8(1H，m)、7.23(5H，s)、8.05(1H，s)。
實(shí)施例11在冰冷卻下向化合物13-B 38.7mg(47微摩爾)中添加70％三乙胺水溶液，溶解后在室溫放置過夜，然后減壓蒸干。殘?jiān)梅旨?jí)TLC(展開溶劑∶二氯甲烷-甲醇(10∶1))，然后用以己烷-甲醇-二氯甲烷(4∶5∶15)為洗脫劑的塞法迪克斯LH-20柱色譜法精制，得到無定形固體目標(biāo)化合物13-C(化合物13中Y為N-乙基氨基甲?；幕衔?34.8mg(收率88 5％)。
28D-81.4°(C＝0.309，MeOH)1H-NMR(CDCl3，δ)0.7-1.1(m)、1.11(3H，d，J＝7.3Hz)、1.26(3H，t，J＝7.3Hz)、1.5-2.2(m)、2.36(3H，s)、3.02(3H，s)、3.33(6H，s)、3.2-3.7(m)、3.8-4.0(1H，br.dd)、4.0-4.3(m)、4.69(1H，dd，J＝8.8Hz，6.8Hz)、5.3-5.7(1H，m)、7.24(5H，s)、7.95(1H，s)。
權(quán)利要求
1.下式所示肽衍生物或其鹽，
式中(a)Q1表示1-二甲胺基-2-甲基丙基，而Q2表示(R)-或(S)-2-羥基-2-苯基乙胺基、2-苯基環(huán)丙基氨基或1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基，或者(b)Q1表示1-甲基-2-吡咯烷基，而Q2表示
，其中A表示氫原子或
其中Y表示氫原子或-COR1，R1表示羥基、低級(jí)烷氧基、芳烷氧基或
其中R2和R3可以相同也可以不同，分別表示氫原子、低級(jí)烷基、苯基或含有從S、O和N中選擇的1個(gè)或2個(gè)雜原子的4～7元雜環(huán)基，或者R2和R3也可以連同它們與之結(jié)合的氮原子一起形成一個(gè)還可以再含有從S、O和N中選擇的一個(gè)雜原子的4～7元雜環(huán)；B表示因情況而異還可以有鹵原子、羥基、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基取代的苯基。
2.權(quán)利要求1所述的肽衍生物或其鹽，其中Q1表示1-二甲胺基-2-甲基丙基，而Q2表示(R)-或(S)-2-羥基-2-苯基乙胺基。
3.權(quán)利要求1所述的肽衍生物或其鹽，其中Q1表示1-甲基-2-吡咯烷基，而Q2表示
，式中A表示氫原子，而B表示因情況而異也可以有鹵原子取代的苯基。
4.權(quán)利要求3所述的肽衍生物或其鹽，其中鹵原子是氟原子。
5.權(quán)利要求1所述的肽衍生物或其鹽，其中Q1表示1-甲基 2-吡咯烷基，而Q2表示
，式中A表示因情況而異也可以有N-低級(jí)烷基氨基甲?；〈?-噻唑基，而B表示無取代基的苯基。
6.一種醫(yī)用藥，其中含有權(quán)利要求1所述的肽衍生物或其鹽。
7.一種抗腫瘤劑，其中含有權(quán)利要求1所述的肽衍生物或其鹽。
8.一種醫(yī)藥組合物，其中包含有效量的權(quán)利要求1所述的肽衍生物或其鹽以及制藥學(xué)上允許的添加劑。
9.患者中腫瘤的一種處置方法，其中包括給患者施用有效量的權(quán)利要求1所述的肽衍生物或其鹽。
全文摘要
通式(Ⅰ)所代表的肽衍生物或其鹽,其抗腫瘤藥效是Dolastatin10的10倍,可用作抗癌劑和抗腫瘤劑。在所述式(Ⅰ)中,(a)Q
文檔編號(hào)C07K5/00GK1182434SQ96193417
公開日1998年5月20日 申請(qǐng)日期1996年4月8日 優(yōu)先權(quán)日1995年4月21日
發(fā)明者榊原恭一, 権藤昌昭, 宮崎宏一, 伊藤毅, 杉村明廣, 小林基博 申請(qǐng)人:帝國(guó)臟器制藥株式會(huì)社