一種醋酸格拉默的簡便制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種醋酸格拉默的制備方法。本發(fā)明用叔丁氧羰基保護L‐賴氨酸的伊普西龍氨基，用芐酯或者取代芐酯保護L‐谷氨酸的伽馬羧基，用芐基或者取代芐基保護L‐酪氨酸的酚羥基，然后將三種保護后的氨基酸以及L‐丙氨酸做成氮羧酸酸酐；在引發(fā)劑的誘導下發(fā)生聚合反應生成未脫保護的混合多肽，然后利用酸解的方法將三種氨基酸的保護基一步脫去，再利用透析的方法除去小分子雜質(zhì)得到醋酸格拉默的純品。本發(fā)明的方法能夠提高收率和產(chǎn)品質(zhì)量，降低成本，操作簡便，適合工業(yè)生產(chǎn)。
【專利說明】一種醋酸格拉默的簡便制備方法
【技術(shù)領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種抗多發(fā)性硬化藥物的制備方法，特別涉及醋酸格拉默的制備方法，屬于化學【技術(shù)領域】。
【背景技術(shù)】
[0002]醋酸格拉默是一種臨床上用于治療多化性硬化的藥物，其結(jié)構(gòu)如下:(Glu, Ala, Lys, Tyr) x.XCH3COOH 或(C5H9NO4.C3H7NO2.C6H14N2O2.C9H11NO3) x.XC2H4O2,商品名為克帕松(Copaxone?)，是一種由以色列梯瓦制藥公司研制的用于治療多發(fā)性硬化的免疫調(diào)節(jié)藥物。本藥物1996年獲得美國FDA批準用于治療多發(fā)性硬化癥。目前該藥物已經(jīng)在包括美國、以色列、加拿大、歐盟在內(nèi)的世界上40多個國家批準上市。制備醋酸格拉默的方法在W000/05250和美國專利3，849，550中有描述。
[0003]醋酸格拉默是一種由L-丙氨酸、L-賴氨酸、L-谷氨酸、L-酪氨酸四種氨基酸組成的多肽醋酸鹽的混合物，四種氨基酸占總氨基酸的摩爾比分別為L-谷氨酸0.129-0.153 ；L-丙氨酸0.392-0.462 ;L_酪氨酸0.086-0.100 ;L_賴氨酸0.300-0.374。該混合多肽醋酸鹽的平均分子量為4700到11000道爾頓。
[0004]目前已有文獻報道的醋酸格拉默的合成工藝主要存在兩個問題:一是脫保護的過程比較復雜或者成本較高；二是沒有將L-酪氨酸中的酚羥基進行保護，從而增加副產(chǎn)物雜質(zhì)的可能。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明目的在于提供一種能夠提高收率和產(chǎn)品質(zhì)量，降低成本，操作簡便，適合工業(yè)化生產(chǎn)的醋酸格拉默的簡便制備方法。
[0006]本發(fā)明技術(shù)方案如下:
[0007]一種醋酸格拉默的制備方法，包括下列步驟:
[0008](I)將保護后的L-谷氨酸(式I )、L_賴氨酸(式II)、L-酪氨酸(式III)以及未經(jīng)保護的L-丙氨酸做成氮羧酸酸酐，在溶劑中、引發(fā)劑存在下進行聚合反應，得到未脫保護基的混合多肽；
[0009]式I化合物為
[0010]
【權(quán)利要求】
1.一種醋酸格拉默的制備方法，包括下列步驟: (1)將保護后的L-谷氨酸(式I)、L-賴氨酸(式II)、L-酪氨酸(式III)以及未經(jīng)保護的L-丙氨酸做成氮羧酸酸酐，在溶劑中、引發(fā)劑存在下進行聚合反應，得到未脫保護基的混合多肽； 式I化合物為

2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于步驟(1)中L-谷氨酸的保護基為芐基；L-賴氨酸的保護基為叔丁氧羰基；L-酪氨酸的保護基為芐基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于步驟(1)中保護后的L-谷氨酸、L-賴氨酸、L-酪氨酸以及未經(jīng)保護的L-丙氨酸的氮羧酸酸酐的加入量占四種氮羧酸酸酐總量的摩爾比例分別為=L-丙氨酸44%，L-賴氨酸32.6%，L-谷氨酸14%，L-酪氨酸9.4%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于步驟(1)中聚合反應在0-80°C的條件下進行，聚合反應的反應時間為5-50小時；優(yōu)選反應溫度為25°C，反應時間為24小時。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于步驟(1)中聚合反應的溶劑的用量為:每克原料加入10-30毫升溶劑,優(yōu)選10毫升。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于步驟(1)中聚合反應的引發(fā)劑用量為四種氮羧酸酸酐總摩爾量的0.1%-3%，優(yōu)選1%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于步驟(2)中所述的酸解所用的酸為三氟乙酸、溴化氫水溶液、溴化氫的冰醋酸溶液或者濃鹽酸與冰醋酸的混合溶液中的一種，所用酸的加量為每克底物10-30毫升酸，優(yōu)選每克底物20毫升酸。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于步驟(2)中所述的脫去保護基酸解過程反應時間為1-10小時，優(yōu)選10小時。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于步驟(3)中所述的透析的方法是醋酸格拉默粗品通過對水透析的方法得到純品，并通過用質(zhì)量百分比0.3%醋酸水溶液透析的方法成鹽。
10.一種醋酸格拉默的制備方法，包括下列步驟: (1)分別將7.12g L-谷氨酸-Y-芐酯、7.39gN-e-叔丁氧羰基-L-賴氨酸、8.14g0_芐基-L-酪氨酸以及2.67g未經(jīng)保護的L-丙氨酸加入0.5倍摩爾量即4.45g的三光氣，并在四氫呋喃中70°C回流至固體全部溶解，蒸去大部分四氫呋喃,并用正己烷重結(jié)晶,得到四種氮羧酸酸酐； 將2.54g L-丙氨酸氮羧酸酸酐，1.85g L-谷氨酸-Y-節(jié)酯氮羧酸酸酐，4.45gN-ε -叔丁氧羰基-L-賴氨酸氮羧酸酸酐，1.40g0-芐基-L-酪氨酸氮羧酸酸酐溶解在102mLN，N-二甲基甲酰胺中，并加入摩爾比為1%的二乙胺，混合物在室溫下攪拌24個小時；之后將溶液倒入冷水500mL中，攪拌一個小時，過濾、洗滌、干燥；得到未脫保護的混合多肽8.3g ； (2)將未脫保護的混合多肽2g放入40毫升質(zhì)量濃度為33%的溴化氫冰醋酸溶液中，在20°C的溫度下攪拌10小時； (3)將上一步中的反應液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，并加入100毫升水溶解，置于截留分子量為2000的透析袋中，于水中透析，除去分子量小于2000的物質(zhì)，之后再在0.3%的醋酸水溶液中透析，將溶液冷凍干燥，得到固體產(chǎn)物1.4g。
【文檔編號】C07K14/00GK103910784SQ201410142860
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2014年4月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月10日
【發(fā)明者】徐文方, 張瀟男 申請人:山東大學