作為toll樣受體調(diào)節(jié)劑的取代的苯并氮雜卓的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了可用于調(diào)節(jié)通過Toll樣受體TLR7和／或TLR8的信號傳導(dǎo)的組合物和方法。所述組合物和方法用于治療或預(yù)防疾病，包括癌癥、自身免疫性疾病、纖維化疾病、心血管疾病、感染性疾病、炎性疾病、移植排斥和移植物抗宿主病。
【專利說明】作為TOLL樣受體調(diào)節(jié)劑的取代的苯并氮雜卓
[0001]相關(guān)申請案
[0002]該申請要求2011年I月12日遞交的美國臨時專利申請第61/432，068號的優(yōu)先權(quán)和權(quán)益，上述申請的整個內(nèi)容通過引用以其全部結(jié)合到本文中。
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0003]本發(fā)明涉及用于調(diào)節(jié)免疫功能的方法和組合物。更具體地講，本發(fā)明涉及用于調(diào)節(jié)TLR7和/或TLR8介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的組合物和方法。
[0004]發(fā)明背景
[0005]免疫系統(tǒng)的刺激，其包括先天性免疫與適應(yīng)性免疫中的任何一種或兩者的刺激，是能導(dǎo)致對宿主的保護(hù)性或不良生理結(jié)果的復(fù)雜現(xiàn)象。近年來，人們對基于先天性免疫的機(jī)制的興趣已經(jīng)增大，其被確認(rèn)為啟動并支持適應(yīng)性免疫。該興趣已經(jīng)部分地受到最近發(fā)現(xiàn)的稱為Toll樣受體(TLR)的高度保守模式識別受體蛋白家族的推動，其確信作為病原體相關(guān)分子模式(PAMP)的受體參與先天性免疫。因此，可用于調(diào)節(jié)先天性免疫的組合物和方法具有很大的重要性，因為它們可影響對涉及自身免疫、炎癥、過敏、哮喘、移植排斥、移植物抗宿主病(GvHD)、感染、癌癥和免疫缺陷的病癥的治療途徑。
[0006]Toll樣受體(TLR)為I型跨膜蛋白，其使得生物體(包括哺乳動物)能夠檢測微生物和啟動先天性免疫反應(yīng)(Beutler，B.,Nature2004,430:257-263)。它們含有同源胞質(zhì)域和富亮氨酸的胞外域，并且通常形成感測胞外(或內(nèi)化)信號的同源二聚體并隨后借助銜接分子(adaptor molecule)比如MyD88 (髓樣分化因子88)啟動信號轉(zhuǎn)導(dǎo)級聯(lián)。在TLR的胞質(zhì)域內(nèi)存在這樣的高同源性，最初，提示類似的信號傳導(dǎo)途徑存在于所有的TLR(Re，F(xiàn).，Strominger, J.L.，Immuno`biology2004, 209: 191-198)。的確，所有的 TLR 均可激活 NF-kB和MAP激酶；然而，細(xì)胞因子/趨化因子源于TLR激活的釋放分布似乎對每一個TLR都是獨(dú)特的。另外，TLR刺激的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑非常類似于細(xì)胞因子受體IL-1R誘導(dǎo)的途徑。這可能是由于這些受體共有的同源性，即TIR(Toll/IL-lR同源性)域。一旦TIR域在TLR中被激活并且MyD88被募集，絲氨酸/蘇氨酸的IRAK家族的激活導(dǎo)致其最終促進(jìn)Ik-B的降解和NF-kB的激活(Means T.K.，等Life Sc1.2000，68:241-258)。盡管看來該級聯(lián)被設(shè)計為使得胞外刺激能夠促進(jìn)胞內(nèi)事件，但是有證據(jù)表明，一些TLR遷移至其中信號轉(zhuǎn)導(dǎo)也可被啟動的核內(nèi)體。該過程可使得與吞噬的微生物密切接觸并與這些受體在先天性免疫反應(yīng)中所起的作用相符(Underhill, D.Μ.,等,Naturel999,401:811-815)。該過程也可使得因損傷的組織(例如，在炎性疾病中)或凋亡而釋放的宿主核酸能夠借助內(nèi)體遞呈(endosomalpresentation)而觸發(fā)反應(yīng)。在哺乳動物中，存在11種協(xié)調(diào)該快速反應(yīng)的TLR。幾年前提出的假設(shè)現(xiàn)在已被證實(Janeway,C.A., Jr.,Cold Spring Harb.Syrup.Quant.Biol.1989,54:1-13)，即先天性免疫反應(yīng)通過由微生物引起的TLR激活模式啟動獲得性免疫反應(yīng)。因此，由不同群體的傳染性生物體呈現(xiàn)的病原體相關(guān)分子模式(PAMP)導(dǎo)致涉及某些細(xì)胞因子、趨化因子和生長因子的先天性免疫反應(yīng)，隨后為借助導(dǎo)致抗體產(chǎn)生和細(xì)胞毒性T細(xì)胞生成的抗原遞呈調(diào)整適應(yīng)于感染性病原體的精確獲得性免疫反應(yīng)。[0007]革蘭陰性菌脂多糖(LPS)已經(jīng)長期被理解為佐劑和免疫刺激物以及作為用于誘導(dǎo)類似于感染性休克的哺乳動物體內(nèi)炎性反應(yīng)的藥理學(xué)工具。使用遺傳學(xué)方法，TLR4被確定為LPS的受體。LPS為TLR4激動劑的發(fā)現(xiàn)闡明了 TLR調(diào)節(jié)對于疫苗和人類疾病療法的有用性(Aderem, A.；Ulevitch, R.J.，Nature2000,406:782-787)。目前已意識到，除了調(diào)節(jié)某些細(xì)胞類型的增殖和凋亡外，各種TLR激動劑還可激活B細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和幾種類型的上皮細(xì)胞。
[0008]迄今，有些類似的TLR7和TLR8已經(jīng)被鑒定為內(nèi)體隔室中發(fā)現(xiàn)的單鏈RNA的受體，并因此被認(rèn)為對病毒挑戰(zhàn)的免疫反應(yīng)是重要的。咪喹莫德，一種被批準(zhǔn)的局部抗病毒/抗癌藥物，最近已經(jīng)被描述為已經(jīng)證實在某些皮膚疾病中具有臨床療效的TLR7激動劑(Miller R.L.,等,Int.J.1mmunopharm.1999, 21:1-14)。該小分子藥物已經(jīng)被描述為ssRNA的結(jié)構(gòu)模擬物。TLR8在2000年第一次被描述(Du, X.,等，European CytokineNe twork2000 (Sept.),11 (3):362-371)并且迅速被認(rèn)為參與了對病毒感染的先天性免疫反應(yīng)(Miettinen, M.,等，Genes and Immunity2001 (Oct.), 2 (6):349-355)。
[0009]最近報道某些具有抗病毒活性的咪唑并喹啉化合物為TLR7和TLR8的配體(HemmiH.，等(2002) Nat.1mmunol.3:196-200 ；Jurk Μ.，等(2002) Nat.1mmunol.3:499)。咪唑并喹啉是具有抗病毒和抗腫瘤性能的免疫細(xì)胞的強(qiáng)效合成激活劑。使用來自野生型和缺乏MyD88的小鼠的巨噬細(xì)胞，Hemmi等最近報道兩種咪唑并喹啉即咪喹莫德和瑞喹莫德(R848)誘導(dǎo)腫瘤壞死因子(TNF)和白細(xì)胞介素-12(IL-12)并僅激活野生型細(xì)胞內(nèi)與通過TLR 激活一致的 NF-1cB (Hemmi H.，等(2002) Nat.1mmunol.3:196-200)。來自缺乏 TLR7 而非其他TLR的小鼠的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生了不能檢測的應(yīng)答于這些咪唑并喹啉的細(xì)胞因子。另外，咪唑并喹啉誘導(dǎo)了脾臟B細(xì)胞的劑量依賴性增殖和來自野生型而非TLR7-/-小鼠的細(xì)胞中胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)級聯(lián)的激活。熒光素酶分析證實了在人類胚胎腎細(xì)胞內(nèi)表達(dá)人TLR7而非TLR2或TLR4導(dǎo)致應(yīng)答于瑞喹莫德的NF-KB激活。因此，Hemmi等的發(fā)現(xiàn)結(jié)果提示這些咪唑并喹啉化合物是可通過TLR7誘導(dǎo)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的TLR7的非天然配體。最近報道R848也是人 TLR8 的配體(Jurk M.,等(2002) Nat.1mmunol.3:499)。
[0010]鑒于調(diào)節(jié)toll樣受體的化合物的巨大治療潛力，并且盡管已經(jīng)完成的工作，還是存在拓展其用途和治療益處的實質(zhì)性持續(xù)需要。
發(fā)明概要
[0011]本文所述的組合物可用于在體外和體內(nèi)調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。這樣的組合物將在多種臨床應(yīng)用中，比如在用于治療或預(yù)防涉及不需要的免疫活性的病癥，包括炎性和自身免疫性疾病的方法中發(fā)現(xiàn)用途。
[0012]具體地講，本發(fā)明涉及具有式I的化合物:
[0013]
【權(quán)利要求】
1.一種具有式I的化合物:

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有式II


3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中R4為H、鹵素、未取代的C1-C6烷基或-C(O)OR10。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的化合物，其中R4為-C(O)ORltl，其中Rltl為烷基。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的化合物，其中Rltl為乙基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中R4為-C(O) NReRd,其中R。和Rd均為烷基。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的化合物，其中R。和Rd均為丙基。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的化合物，其中R。或Rd的至少一者為被一個-OH取代的烷基。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的化合物，其中Rc和Rd之一為
10.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的化合物，R4為Br。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的化合物，R4為甲基或乙基。






'
12.根據(jù)權(quán)利要求1-11任一項所述的化合物，其中R7為
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的化合物，其中R7不為3-甲基苯基也不為3，4-二氯苯基。
14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的化合物，其中R7不為
15.根據(jù)權(quán)利要求1-11任一項所述的化合物，其中R7為
16.根據(jù)權(quán)利要求1-15任一項所述的化合物，其中Ra和Rb的至少一者不為氫。
17.根據(jù)權(quán)利要求1-15任一項所述的化合物,其中Ra和Rb之一為烷基而另一者為氫。
18.根據(jù)權(quán)利要求1-15任一項所述的化合物，其中Ra和Rb的一者或多者為用Re取代的烷基。
19.根據(jù)權(quán)利要求1-15任一項所述的化合物，其中Ra和Rb均為烷基。
20.根據(jù)權(quán)利要求1-15任一項所述的化合物，其中Ra和Rb之一為Re而Ra和Rb的另一者為氫。
21.根據(jù)權(quán)利要求1-20任一項所述的化合物，其中R2和R3的至少一者不為氫。
22.根據(jù)權(quán)利要求1-20任一項所述的化合物，其中R2和R3相連接形成飽和碳環(huán)。
23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的化合物，其中所述飽和碳環(huán)為環(huán)丙基。
24.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有式III:
25.根據(jù)權(quán)利要求24所述的化合物，其中R2,和R3,均為H。
26.根據(jù)權(quán)利要求24所述的化合物，其中R2,或R3,為未取代或取代的C1-C6烷基。
27.根據(jù)權(quán)利要求24所述的化合物，其中R2,或R3,為甲基。
28.根據(jù)權(quán)利要求24所述的化合物，其中R2,和R3,均為甲基。
29.根據(jù)權(quán)利要求24所述的化合物，其中R2,和^與它們連接的碳原子一起形成具有3至7個成員的飽和碳環(huán)。
30.根據(jù)權(quán)利要求24所述的化合物，其中R2,和^與它們連接的碳原子一起形成環(huán)丙基環(huán)。
31.一種包含權(quán)利要求1-30任一項的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。
32.一種選自表1或表1A中的那些之一的化合物。
33.權(quán)利要求1-32任一項的化合物，用于治療TLR7和/或TLR8介導(dǎo)的病癥。
34.權(quán)利要求1-32任一項的化合物，用于治療自身免疫疾病。
【文檔編號】C07D403/10GK103562186SQ201280012808
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2012年1月12日 優(yōu)先權(quán)日:2011年1月12日
【發(fā)明者】J·J·霍伯特, R·赫什伯格, L·E·伯吉斯, H·W·楊 申請人:帆德制藥股份有限公司, 陣列生物制藥公司