專利名稱：一種銀杏雙黃酮的提取分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥有效成分提取分離方法，確切地說(shuō)是一種銀杏雙黃酮的提取分離方法。
背景技術(shù)：
銀杏(Gimkgo biloba)又名白果樹(shù)，為銀杏科，銀杏屬植物。銀杏在我國(guó)分布較廣。主要分布于江蘇、山東、廣西、云南、貴州、四川等地，其擁有量占世界總量的70%以上， 近年來(lái)隨著銀杏資源的開(kāi)發(fā)利用，我國(guó)各地有計(jì)劃地?cái)U(kuò)大銀杏樹(shù)的種植。本世紀(jì)60年代以來(lái)，由于銀杏制劑對(duì)防治心腦血管疾病、老年癡呆癥和對(duì)抗血小板活化因子的作用的發(fā)現(xiàn)， 國(guó)內(nèi)外加大了對(duì)銀杏化學(xué)成分、藥理活性及臨床應(yīng)用等方面研究的力度，并對(duì)銀杏有效成分的提取工藝做了大量的探索研究。銀杏葉含黃酮類化合物，黃酮甙，其甙元分別為山柰酚、槲皮素、異鼠李素，雙黃酮類，以及銀杏萜內(nèi)酯A、B、C，原花青素，莽草酸、β -谷留醇等。黃酮類物質(zhì)是一種生理活性物質(zhì)，有維生素樣的活性，清除自由基的能力，是優(yōu)良的氧清除劑和脂質(zhì)抗氧化劑。具有降低血壓、防止動(dòng)脈硬化和抗衰老作用。其中，銀杏雙黃酮類化合物具有抗凝血、抗炎和抑制cAMP磷酸二酯酶活性等特種作用?？紤]到銀杏雙黃酮具有上述專屬功效，有必要進(jìn)行提取分離。而國(guó)內(nèi)對(duì)銀杏雙黃酮類化合物提取分離研究較少。主要以乙醚等溶劑提取，再用乙酸乙酯為洗脫液上硅膠柱分離(例如，鐘郁青，徐禮燊.《藥學(xué)學(xué)報(bào)》，1995，30 (9) :694-697)，大多為分析檢測(cè)過(guò)程原料的前處理工藝。國(guó)內(nèi)外對(duì)銀杏雙黃酮類活性物質(zhì)的提取分離研究的報(bào)道較少。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明內(nèi)容旨在為開(kāi)發(fā)保健食品、中藥新藥提供高質(zhì)量的原料藥-銀杏雙黃酮， 所要解決的技術(shù)問(wèn)題是銀杏雙黃酮的提取和分離。本發(fā)明的技術(shù)方案是以銀杏葉采用水作為溶媒提取傳統(tǒng)產(chǎn)品銀杏葉提取物(GBE) 的殘?jiān)鼮槠鹗荚?，其先?jīng)過(guò)無(wú)水乙醇浸提，干燥后采用乙酸乙酯等中低極性溶劑萃取，再經(jīng)過(guò)石油醚等低極性溶劑結(jié)晶，濃縮后進(jìn)行超臨界(X)2快速脫溶結(jié)晶，可獲得“綠色”高純銀杏雙黃酮產(chǎn)品。具體的技術(shù)方案是將銀杏葉殘?jiān)苡跓o(wú)水乙醇中，濃縮干燥后溶解到溫水中，再用乙酸乙酯萃取 2次，萃取液脫溶后采用石油醚結(jié)晶2-3次，濃縮后再采用超臨界(X)2快速脫溶結(jié)晶時(shí)間 20-30min、結(jié)晶溫度35_50°C、壓力8_20MPa，可制得純度高達(dá)98 %以上的銀杏雙黃酮高純
ΡΠ O具體操作步驟是(1)首先選擇溫水G0-60°C )提取銀杏葉后的殘?jiān)鼮樵?，選擇5-8倍體積的無(wú)水乙醇溶解、溫度控制在50-70°C，提取至少2-3次；(2)將提取液合并、脫溶干燥后，采用3倍體積的溫水(35-45°C )進(jìn)行溶解，再采用乙酸乙酯溶劑萃取2次；(3)將萃取液體合并后濃縮、真空濃縮干燥成粉末，再采用石油醚進(jìn)行重結(jié)晶2-3 次，純度達(dá)90%以上；(4)將上述結(jié)晶粗品進(jìn)行超臨界CO2快速脫溶結(jié)晶，控制在壓力8 20MPa，溫度在；35 50°C，時(shí)間在20 30min ；(5)停機(jī)后收集抗溶劑結(jié)晶產(chǎn)物，可制得純度98%以上銀杏雙黃酮。本法工藝簡(jiǎn)單，無(wú)需柱色譜、冷凍干燥燥等復(fù)雜、耗時(shí)、耗能工藝。同時(shí)其得率也較傳統(tǒng)工藝高，銀杏雙黃酮純度超過(guò)98%，收率> 30% (以銀杏葉中銀杏雙黃酮計(jì))，適合批量生產(chǎn)。目前，杏葉制備GBE后的殘?jiān)寐实?，價(jià)格便宜，進(jìn)行本項(xiàng)目產(chǎn)品開(kāi)發(fā)既提高分離純化的生產(chǎn)效率，又降低銀杏葉殘?jiān)沫h(huán)境污染、變廢為寶。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 ①稱取IOkg溫水提取銀杏葉后的殘?jiān)善?，? 6 (W/V)的固液比溶于無(wú)水乙醇中，萃取溫度55°C，提取2 ；②將無(wú)水乙醇提取液合并、真空脫溶得到固體粉末，將粉末采用3倍體積的35°C 溫水溶解，再采用乙酸乙酯溶劑萃取2次；③萃取液體合并后濃縮、真空濃縮干燥成粉末，再采用石油醚進(jìn)行重結(jié)晶3次，純度達(dá)90%以上；④將上述結(jié)晶粗品進(jìn)行超臨界CO2快速脫溶結(jié)晶，控制在壓力lOMPa，溫度在 40°C，時(shí)間在 20min ；⑤試驗(yàn)結(jié)束后，取樣檢測(cè)，可得到純度98. 5%的高純銀杏雙黃酮3. 5g。實(shí)施例2 ①稱取IOkg溫水提取銀杏葉后的殘?jiān)善?，? 7 (W/V)的固液比溶于無(wú)水乙醇中，萃取溫度65°C，提取3 ；②將無(wú)水乙醇提取液合并、真空脫溶得到固體粉末，將粉末采用3倍體積的45°C 溫水溶解，再采用乙酸乙酯溶劑萃取2次；③萃取液體合并后濃縮、真空濃縮干燥成粉末，再采用石油醚進(jìn)行重結(jié)晶2次，純度達(dá)90%以上；④將上述結(jié)晶粗品進(jìn)行超臨界CO2快速脫溶結(jié)晶，控制在壓力15MPa，溫度在 45°C，時(shí)間在 30min ；⑤試驗(yàn)結(jié)束后，取樣檢測(cè)，可得到純度98. 7%的高純銀杏雙黃酮4. 2g。
權(quán)利要求
1.一種銀杏雙黃酮的提取分離方法，具體操作步驟是(1)首先選擇溫水G0-60°C)提取銀杏葉后的殘?jiān)鼮樵希x擇5-8倍體積的無(wú)水乙醇溶解、溫度控制在50-70°C，提取至少2-3次；(2)將提取液合并、脫溶干燥后，采用3倍體積的溫水(35-45°C)進(jìn)行溶解，再采用乙酸乙酯溶劑萃取2次；(3)將萃取液體合并后濃縮、真空濃縮干燥成粉末，再采用石油醚進(jìn)行重結(jié)晶2-3次， 純度達(dá)90%以上；(4)將上述結(jié)晶粗品進(jìn)行超臨界(X)2快速脫溶結(jié)晶，控制在壓力8 20MPa，溫度在 35 50°C，時(shí)間在20 30min ；(5)停機(jī)后收集抗溶劑結(jié)晶產(chǎn)物，可制得純度98%以上銀杏雙黃酮。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種銀杏雙黃酮的提取分離方法，其特征在于所述的采用 50-70°C無(wú)水乙醇提取2-6次、乙酸乙酯萃取2-4次，萃取液脫溶得到固體粉末，然后用石油醚結(jié)晶2-6次，最后放置在超臨界(X)2中快速脫溶結(jié)晶。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種銀杏雙黃酮的提取分離方法，其特征在于重結(jié)晶有機(jī)溶劑選自石油醚。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種銀杏雙黃酮的提取分離方法，其特征在于超臨界CCV決速脫溶結(jié)晶；工藝參數(shù)控制在壓力5 25MPa，溫度在30 55°C，時(shí)間在15 35min。
全文摘要
一種銀杏雙黃酮的提取分離方法，是一種集成溶劑浸提-萃取-溶劑重結(jié)晶-超臨界CO2快速脫溶結(jié)晶方法。用該方法對(duì)銀杏葉制備粗提物后的殘?jiān)M(jìn)行深加工，制備高純銀杏雙黃酮。用無(wú)水乙醇提取、乙酸乙酯萃??；重結(jié)晶溶劑為石油醚；超臨界CO2快速脫溶結(jié)晶，結(jié)晶條件為壓力≤20MPa，溫度≤50℃。產(chǎn)品含量最高可達(dá)98％以上。該分離純化工藝，方法簡(jiǎn)便、成本低、易于工業(yè)生產(chǎn)應(yīng)用。
文檔編號(hào)C07D311/30GK102351825SQ20111022473
公開(kāi)日2012年2月15日 申請(qǐng)日期2011年8月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月8日
發(fā)明者劉鵬程, 張文成, 樊恩生 申請(qǐng)人:徐州康泰生物制品有限公司