專(zhuān)利名稱(chēng)：一種高純度二酮哌嗪環(huán)肽的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有生物活性的高純度二酮哌嗪環(huán)肽的制備方法，屬于藥物化學(xué) 合成領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
二酮哌嗪環(huán)肽是通過(guò)內(nèi)酰胺橋連方式形成的首尾成環(huán)的環(huán)二肽，其核心骨架具有 穩(wěn)定的哌嗪二酮(Diketopipcrazine)六元環(huán)結(jié)構(gòu)(式I)，而且不再有游離的氨基與羧基， 因此可以較好地耐受蛋白水解酶的降解作用。此外，二酮哌嗪結(jié)構(gòu)具有較密集的氫鍵供體 及氫鍵受體，而氫鍵正是藥物分子與蛋白靶點(diǎn)相互作用的重要形式之一，因此二酮哌嗪結(jié) 構(gòu)是一種非常重要的藥效基團(tuán)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的天然產(chǎn)物中，不少具有二酮哌嗪環(huán)肽結(jié)構(gòu)。在 新藥發(fā)現(xiàn)與研究中，二酮哌嗪環(huán)肽可作為先導(dǎo)化合物組合化學(xué)合成的模板。已報(bào)道的二酮哌嗪環(huán)肽的合成以固相合成法為主。但固相合成成本較高，只適用 于少量制備。本發(fā)明提出了一種簡(jiǎn)單高效地制備二酮哌嗪環(huán)肽(式I)的方法，中間產(chǎn)物不需要 柱層析純化，操作簡(jiǎn)單；環(huán)合反應(yīng)用HPLC檢測(cè)，反應(yīng)進(jìn)程清晰可見(jiàn)；后處理方便易行，產(chǎn)品 純度達(dá)99 %。，可用于大量制備二酮哌嗪環(huán)肽產(chǎn)物。
權(quán)利要求
1.一種高純度二酮哌嗪環(huán)肽的制備方法，步驟如下1)N端用叔丁氧羰基保護(hù)的氨基酸與C端用甲酯保護(hù)的氨基酸反應(yīng)，生成線性二肽。2)線性二肽只需經(jīng)過(guò)萃取處理，便直接在酸性條件下脫去N端保護(hù)基。3)脫保護(hù)的線性二肽粗產(chǎn)品直接在堿性條件下進(jìn)行環(huán)化反應(yīng)，通過(guò)研磨得到高純度的 二酮哌嗪環(huán)肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于保護(hù)氨基酸生成線性二肽的反應(yīng)是在 1-羥基苯并三氮唑、N, N- 二異丙基乙胺、0-苯并三氮唑-N，N, N, N-四甲脲六氟磷酸酯的 作用下完成的，所用溶劑是二甲基甲酰胺。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于生成線性二肽的反應(yīng)完成后，反應(yīng)液用乙 酸乙酯萃取，有機(jī)相依次用lmol/L鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌，用 無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，不需要柱層析純化，直接在酸性條件下脫去N端叔丁氧羰保護(hù)基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于脫保護(hù)線性二肽的環(huán)合反應(yīng)是在三乙胺 作用下完成的，反應(yīng)溫度為25°C -70°C，所用溶劑是甲醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于環(huán)合反應(yīng)用反相HPLC來(lái)監(jiān)測(cè)。使用色譜 柱型號(hào)SinoChrom，0DS_BP，4. 6mm*200mm, 5 μ，ΙΟΟΑ，流動(dòng)相為甲醇-水體系。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于環(huán)合反應(yīng)濃縮后得到的粗產(chǎn)物是用甲醇 或者乙醚研磨的方法來(lái)得到高純產(chǎn)品，無(wú)需硅膠柱層析。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一所述的方法，其特征在于所述二酮哌嗪環(huán)肽包括環(huán) (L-酪-L-纈)，環(huán)(L-亮-L-纈)，環(huán)(L-異亮-L-纈)，(L-苯丙-L-纈)，環(huán)(L-苯 丙-L-脯)，環(huán)(L-亮-L-脯)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種在液相體系中大量制備高純度二酮哌嗪環(huán)肽分子的方法，核心技術(shù)方案包括以下步驟1)N-叔丁氧羰基保護(hù)的氨基酸與C端用甲酯保護(hù)的氨基酸反應(yīng)，生成線性二肽；2)線性二肽只需經(jīng)過(guò)萃取，便直接在酸性條件下脫去N端保護(hù)基；3)脫保護(hù)的線性二肽直接在堿性條件下進(jìn)行環(huán)化反應(yīng)，粗產(chǎn)物經(jīng)乙醚研磨，得到高純度的二酮哌嗪環(huán)肽；4)反應(yīng)進(jìn)程及終產(chǎn)物的純度用HPLC分析檢測(cè)。本發(fā)明用便宜易得的保護(hù)氨基酸為原料，操作簡(jiǎn)單易行，后處理方便，產(chǎn)物純度可達(dá)99％。該工藝適合工業(yè)化生產(chǎn)，具有可觀的經(jīng)濟(jì)實(shí)用價(jià)值，在藥物合成上有廣泛的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)C07D487/04GK102146065SQ201110025008
公開(kāi)日2011年8月10日 申請(qǐng)日期2011年1月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月24日
發(fā)明者朱佳, 聶菲璘, 蘇賢斌 申請(qǐng)人:南京工業(yè)大學(xué)