專利名稱：白花丹醌的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種白花丹醌的制備方法，具體涉及一種采用水蒸汽蒸餾或溶劑提取 方法結(jié)合大孔樹脂及重結(jié)晶技術(shù)制備白花丹醌的方法。
背景技術(shù)：
白花丹為白花丹科白花丹屬植物白花丹Plumbago zeylanica L.的全草或根。藥 性辛、苦、澀，溫，有毒。具有祛風(fēng)除濕，行氣活血，解毒消腫的功效。主治風(fēng)濕痹痛，血瘀經(jīng) 閉，跌打扭傷，癰腫瘰疬，疥癬瘙癢，毒蛇咬傷。生于氣候炎熱的地區(qū)，常見于陰濕的溝邊或 村邊路旁曠地。產(chǎn)于福建、臺灣、廣東、廣西、四川、貴州、云南等地。白花丹多作為民族藥 材，廣西壯醫(yī)用葉治療跌打損傷、肝脾腫大；云南傣醫(yī)用其干根散瘀消腫，治風(fēng)濕疼痛新 疆維吾爾醫(yī)用白花丹莖枝，稱做“夏特然吉印地”(Xiateranjiyindi)，多由巴基斯坦或印度 購入，常以配方入丸、膏藥用，主治白癜風(fēng)、偏癱、胃腹脹痛及牛皮癬等癥?，F(xiàn)代藥理研究表 明白花丹具有殺蟲、殺螨、抑菌、抗乙型肝炎病毒、抗腫瘤、中樞興奮作用、護肝、抗肝纖維 化、升高血糖、降壓和擴張血管、抗凝血作用、抗動脈粥樣硬化、抗生育等作用。根中主要含 有白花丹素、3-氯白花丹素、茅膏醌等酚性成分，地上部分含3，6’_雙白花丹素、羽扇豆醇， 全草還含有香草酸和白花丹酸。其中白花丹素是其主要有效成分，具有抗細(xì)菌、抗真菌效 果，并被用于抗癌和抗艾滋病感染研究。中國專利03139971. 1以白花丹素為活性成分的殺 螨劑，用有機溶劑提取植物中的白花丹素，加工制得乳油制劑、可濕性粉劑或其殺螨復(fù)配助 劑，0. 001g/ml白花丹素24h、48h殺螨率(% )分別為83. 15士5. 83、84. 81 士5. 61，產(chǎn)卵抑制 指數(shù)分別為0. 906,0. 852 ；中國專利200810038102. 7公開了白花丹醌在抑制血管新生中的 新用途，并通過實驗證明白花丹醌能抑制內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移、成管，并能抑制雞胚尿囊 膜的血管新生，可以用于制備抑制血管新生的藥物。近年來對白花丹的成分、藥理及臨床等方面研究已取得一定進展，但還需進一步 深入研究，因此對其主要活性成分白花丹醌的提取純化顯得尤為重要，可為研究工作提供 高純度的單體物質(zhì)，為白花丹的開發(fā)利用提供高質(zhì)量的原料，以發(fā)揮它更大的社會效益和 經(jīng)濟效益。白花丹醌(Plumbagin)又名藍雪醌、白花丹精、磯松素。分子式C11H8O3，分子量 188. 18，化學(xué)名。為黃色針狀結(jié)晶(稀乙醇)，熔點78 79°C，可升華，有刺激性臭味，并可 隨蒸氣而揮發(fā)。微溶于熱水，溶于乙醇、丙酮、氯仿、苯和醋酸。白花丹醌的提取純化工藝研究的相關(guān)文獻較少，在對白花丹的化學(xué)成分分離鑒定 中常采用乙醇回流提取，氯仿萃取及硅膠柱層析分離得到白花丹醌(焦?jié)?，?白花丹的 化學(xué)成分研究.時針國醫(yī)國藥.2008，19(12) :2993.)，或采用石油醚浸泡、水浴加熱提取， 95%乙醇重結(jié)晶(趙鐵建，方卓.白花丹的藥學(xué)研究與臨床應(yīng)用概述.2006,4:51-54.)，劉 超等采用95%乙醇滲漉提取，浸膏拌硅藻土上硅膠柱，氯仿-甲醇洗脫。這些方法提取率均 較低，且純度不高，無法滿足研究的需要和未來市場的需求。近幾年白花丹正日益成為研究 和開發(fā)的熱點，白花丹科植物基本上均含有白花丹醌，尤其根部含量較高，發(fā)明人認(rèn)為其可作為白花丹科植物及白花丹制劑質(zhì)量的指標(biāo)性成分。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于通過對白花丹的提取工藝研究，提供一種簡單易操作、成本低、 高效制備白花丹醌的方法。為達到發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是白花丹醌的制備方法，所述的方法步驟如下(1)原料預(yù)處理將采購的原料粉碎成0. 5-lmm的原料品；(2)提取將上述原料品采用水蒸汽蒸餾法或有機溶劑浸提法進行提取，獲得白 花丹醌粗提物；(3)大孔樹脂吸附將上述粗提物真空濃縮干燥后用大孔樹脂吸附，去離子水沖 洗雜質(zhì)，用石油醚_丙酮、丙酮_甲醇洗脫，TLC監(jiān)測，收集目標(biāo)洗脫流分；(4)重結(jié)晶將上述洗脫液減壓回收溶劑，濃縮干燥得粗品；將粗品用乙醇加熱回 流飽和溶解，冷卻，緩慢滴加去離子水，靜置析晶，干燥即得產(chǎn)品。所述的原料為白花丹的根或莖葉。所采用的粉碎方法為可使用組織搗碎機、組織粉碎機或人工切碎進行粉碎。所述水蒸氣蒸餾法加入去離子水以重量計，水原料品為2-4 1，提取時間為 4-15小時。所述有機溶劑浸提法中，所用有機溶劑可選乙醇、氯仿、丙酮，用量為2-10倍(V/ W)，浸提時間為12-24小時，提取次數(shù)為3-4次。所述洗脫溶劑石油醚-丙酮體積比為0 1-20 1，丙酮-甲醇(1 1-1 3)， 洗脫用量各為3-8倍柱體積。所述重結(jié)晶溶劑乙醇濃度百分比為50% -80%。本發(fā)明所述的白花丹醌的制備方法的有益效果主要體現(xiàn)在(1)根據(jù)白花丹醌可 隨水蒸氣揮發(fā)的性質(zhì)采用水蒸氣蒸餾法，提取純度較高；(2)大孔樹脂吸附量大，可用于大 批量的生產(chǎn)制備；(3)工藝過程簡單，每段工序采用的方法均是常用方法，對設(shè)備要求較 低，降低了生產(chǎn)成本。
具體實施例方式參考下列實施例將更易于理解本發(fā)明，給出實施例是為了闡明本發(fā)明，而不是為 了限制本發(fā)明的范圍。實施例1 白花丹2千克，人工切碎成Imm的原料品，投入蒸餾釜中，往蒸餾釜中加入去離子 水，加入量以重量計為原料量的2倍，提取時間10小時，將油水分離，獲得白花丹醌粗品 32g，用少量乙醇溶解粗品，上大孔吸附樹脂柱D101，2倍柱體積去離子水洗脫雜質(zhì)，再分別 用的石油醚-丙酮(20 1)、石油醚-丙酮(10 1)、丙酮-甲醇(1 1)各3倍柱體積 洗脫，在薄層層析指導(dǎo)下收集目標(biāo)洗脫液并回收溶劑，濃縮干燥，加70%乙醇加熱回流飽和 溶解，冷卻，緩慢滴加去離子水，靜置析晶，干燥即得產(chǎn)品6g，含量達96%。用硅膠板檢查， 其中硅膠板用CMC-Na為粘合劑，硅膠G為吸附劑制成，以體積比4 1(石油醚丙酮)為展開劑，以濃氨水為顯色劑噴霧顯色。實施例2 白花丹2千克，用組織粉碎機粉碎成Imm的原料品，投入蒸餾釜中，往蒸餾釜中加 入去離子水，加入量以重量計為原料量的2. 5倍，提取時間8小時，將油水分離，獲得白花丹 醌粗品28g，用少量乙醇溶解粗品，上大孔吸附樹脂柱D101，2倍柱體積去離子水洗脫雜質(zhì)， 再分別用的石油醚-丙酮(10 1)、石油醚-丙酮(5 1)、丙酮-甲醇(1 3)各3倍柱 體積洗脫，在薄層層析指導(dǎo)下收集目標(biāo)洗脫液并回收溶劑，濃縮干燥，加80%乙醇加熱回流 飽和溶解，冷卻，緩慢滴加去離子水，靜置析晶，干燥即得產(chǎn)品5. 3g，含量達97%。用硅膠板 檢查，其中硅膠板用CMC-Na為粘合劑，硅膠G為吸附劑制成，以體積比4 1 (石油醚丙 酮)為展開劑，以濃氨水為顯色劑噴霧顯色。實施例3 白花丹2千克，用組織搗碎機粉碎成Imm的原料品，投入多功能提取罐中，加入4 倍量氯仿溶液，室溫浸泡，浸提時間至少12小時，反復(fù)提取4次，過濾，合并濾液真空濃縮 干燥后上大孔吸附樹脂柱AB-8，1. 5倍柱體積去離子水洗脫雜質(zhì)，再分別用的石油醚_丙 酮(10 1)、石油醚-丙酮(9 4)、丙酮-甲醇(1 2)各3倍柱體積洗脫，在薄層層析 指導(dǎo)下收集目標(biāo)洗脫液并回收溶劑，濃縮干燥，加75%乙醇加熱回流飽和溶解，冷卻，緩慢 滴加去離子水，靜置析晶，干燥即得產(chǎn)品6. 4g，含量達96 %。用硅膠板檢查，其中硅膠板用 CMC-Na為粘合劑，硅膠G為吸附劑制成，以體積比4 1 (石油醚丙酮)為展開劑，以濃氨 水為顯色劑噴霧顯色。實施例4 白花丹5千克，用組織粉碎機粉碎成Imm的原料品，投入多功能提取罐中，加入6 倍量80%乙醇水溶液，室溫浸泡，浸提時間18小時，反復(fù)提取3次，過濾，合并濾液真空濃 縮干燥上大孔吸附樹脂柱DlOl，1. 5倍柱體積去離子水洗脫雜質(zhì)，再分別用的石油醚_丙酮 (20 1)、石油醚-丙酮(10 1)、丙酮-甲醇(1 1)各4倍柱體積洗脫，在薄層層析指 導(dǎo)下收集目標(biāo)洗脫液并回收溶劑，濃縮干燥，加70%乙醇加熱回流飽和溶解，冷卻，緩慢滴 加去離子水，靜置析晶，干燥即得純品15. 8g，含量達95%。用硅膠板檢查，其中硅膠板用 CMC-Na為粘合劑，硅膠G為吸附劑制成，以體積比4 1 (石油醚丙酮)為展開劑，以濃氨 水為顯色劑噴霧顯色。實施例5 白花丹5千克，用組織搗碎機粉碎成Imm的原料品，投入多功能提取罐中，加入 4倍量丙酮溶液，室溫浸泡，浸提時間24小時，反復(fù)提取3次，過濾，合并濾液真空濃縮干 燥后上大孔吸附樹脂柱AB-8，2倍柱體積去離子水洗脫雜質(zhì)，再分別用的石油醚_丙酮 (10 1)、石油醚-丙酮(9 2)、丙酮-甲醇(1 2)各3倍柱體積洗脫，在薄層層析指 導(dǎo)下收集目標(biāo)洗脫液并回收溶劑，濃縮干燥，加75%乙醇加熱回流飽和溶解，冷卻，緩慢滴 加去離子水，靜置析晶，干燥即得產(chǎn)品15. 4g，含量達96%。用硅膠板檢查，其中硅膠板用 CMC-Na為粘合劑，硅膠G為吸附劑制成，以體積比4 1 (石油醚丙酮)為展開劑，以濃氨 水為顯色劑噴霧顯色。
權(quán)利要求
白花丹醌的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)原料預(yù)處理將采購的原料粉碎成0.5 1mm的原料品；(2)提取將上述原料品采用水蒸汽蒸餾法或有機溶劑浸提法進行提取，獲得白花丹醌粗提物；(3)大孔樹脂吸附將上述粗提物真空濃縮干燥后用大孔樹脂吸附，去離子水沖洗雜質(zhì)，用石油醚 丙酮、丙酮 甲醇洗脫，TLC監(jiān)測，收集目標(biāo)洗脫流分；(4)重結(jié)晶將上述洗脫液減壓回收溶劑，濃縮干燥得粗品；將粗品用乙醇加熱回流飽和溶解，冷卻，緩慢滴加去離子水，靜置析晶，干燥即得產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白花丹醌的制備方法，其特征在于所述步驟(1)采購白花丹 的根或莖葉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白花丹醌的制備方法，其特征在于所述步驟(1)所采用的粉 碎方法為可使用組織搗碎機、組織粉碎機或人工切碎進行粉碎。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白花丹醌的制備方法，其特征在于所述步驟(2)水蒸氣蒸餾 法加入去離子水以重量計，水原料品為2-4 1，加熱時間為4-15小時。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白花丹醌的制備方法，其特征在于所述步驟(2)有機溶劑浸 提法所用有機溶劑可選乙醇、氯仿、丙酮，用量為2-10倍(V/W)，浸提時間為12-24小時，提 取次數(shù)3-4次。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白花丹醌的制備方法，其特征在于所述步驟(3)所述洗脫溶 劑石油醚-丙酮體積比為0 1-20 1，丙酮-甲醇(1 1-1 3)，洗脫用量各為3-8倍 柱體積。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白花丹醌的制備方法，其特征在于所述步驟(4)所述重結(jié)晶 溶劑乙醇濃度百分比為50% -80%。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種白花丹醌的制備方法，包括以下步驟1)將白花丹藥材粉碎成0.5-1mm的原料備用；2)將上述原料采用水蒸氣蒸餾法或有機溶劑浸提法進行提??；3)提液真空濃縮干燥后用大孔樹脂富集純化，以石油醚-丙酮、丙酮-甲醇洗脫；4)洗脫液濃縮干燥，50-80％乙醇加熱回流飽和溶解，冷卻，緩慢滴加去離子水，靜置析晶，過濾干燥即得產(chǎn)品。該方法采用傳統(tǒng)粉碎方法及常規(guī)設(shè)備，成本低，方法簡單，可獲得高含量的白花丹醌，為白花丹的進一步深入研究及開發(fā)提供優(yōu)質(zhì)單體或原料。
文檔編號C07C50/32GK101967089SQ20101021027
公開日2011年2月9日 申請日期2010年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月28日
發(fā)明者劉東鋒, 楊成東, 郭琴 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司