專利名稱：一種多酰化木藜蘆烷類二萜化合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種多?；巨继J烷類二萜化合物，尤其是一種新的具有3，4-開環(huán)、4，19-C-O-C三元環(huán)醚結(jié)構(gòu)的多?；巨继J烷類二萜化合物及其制備方法，屬于植物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：
我國杜鵑花科(Ericaceae)植物有毒品種甚多，有9屬100種以上，集中于金葉子屬(Cribiodendron)、米飯花屬(Lyonia)、馬醉木屬(Pieris)和杜鵑花屬(Rhododendron)。有毒成分主要為四環(huán)二萜毒素，這類化合物毒性大、數(shù)量多、分布廣泛，特別集中于某些屬或種，僅為本科所有，是一類很有特色的天然高毒性化合物，也是本科植物化學(xué)分類學(xué)的一個(gè)很有價(jià)值的信息。此外，其它成分有揮發(fā)油、黃酮、三萜、酚類和鞣質(zhì)等。上世紀(jì)80年代在研究治療慢性氣管炎的中草藥中發(fā)現(xiàn)不少杜鵑花科植物都有較好療效，其有效成分揮發(fā)油和黃酮，已臨床應(yīng)用。
根據(jù)不同的結(jié)構(gòu)類型，可將杜鵑花科植物毒素分為木藜蘆烷類，木藜蘆酚類，二萜苷等3類，其中最重要的是木藜蘆烷類化合物。杜鵑花科毒素多屬此類，該類物質(zhì)也主要在杜鵑花科植物中發(fā)現(xiàn)。團(tuán)花毒素(Rhodoanthin)是目前從杜鵑花科植物中分離出的毒性最大的成分。木藜蘆毒素類化合物有很強(qiáng)的心臟和神經(jīng)系統(tǒng)毒性，有強(qiáng)烈的降壓作用。它們直接作用于心臟，既能增加心肌的收縮力，也能因?qū)π呐K有觸發(fā)活性而產(chǎn)生快速心律失常以至抑制心臟跳動(dòng)而死亡。同時(shí)，它們也是一類影響運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)的高強(qiáng)度肌梭興奮劑。杜鵑花科二萜類毒素作用于膜上膽堿受體的離子調(diào)節(jié)部位，有可逆地去極化激活作用，特異地增加心肌、肌梭等部位的神經(jīng)細(xì)胞和肌肉細(xì)胞靜息膜對(duì)鈉離子的通透性，提高細(xì)胞膜內(nèi)鈉的濃度，從而影響神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)。
美麗馬醉木(Pieris formosa(Wall)D.Don)為杜鵑花科馬醉木屬有名的有毒植物，廣泛分布于浙江、云南等地。具有清熱消炎、散熱止痛、殺蟲止癢的功效。外用于乳腺炎、惡性潰瘍、跌打損傷、皮膚瘙癢、蕁麻疹、瘡癤。家畜誤食莖和葉會(huì)引起昏迷。小鼠腹腔注射葉水煎劑的氯仿提取物1000mg/kg，出現(xiàn)伸頭、呼吸困難、四肢外展、運(yùn)動(dòng)失調(diào)。鮮葉汁可殺蟲，用作洗劑可治人的癬疥和毒瘡。童德文等從美麗馬醉木的葉中分離得到了馬醉木毒素I(Asebotoxin I)，并通過小鼠毒性實(shí)驗(yàn)證明是其主要的毒性成分。汪禮權(quán)等人從美麗馬醉木的葉中發(fā)現(xiàn)了一系列5/7/6/5四環(huán)駢合而成的木藜蘆烷類二萜，具有生長抑制、拒食、肌梭興奮、殺蟲等活性。
迄今為止，本發(fā)明所涉及的具有3，4-開環(huán)、4，19-C-O-C三元環(huán)醚結(jié)構(gòu)的多?；巨继J烷類二萜，尚未發(fā)現(xiàn)有專利或文獻(xiàn)報(bào)道。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明之目的在于提供一種新的具有3，4-開環(huán)、4，19-C-O-C三元環(huán)醚結(jié)構(gòu)的多酰化木藜蘆烷類二萜化合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種從美麗馬醉木中提取分離具有3，4-開環(huán)、4，19-C-O-C三元環(huán)醚結(jié)構(gòu)的多?；巨继J烷類二萜化合物的方法。
本發(fā)明提供的具有3，4-開環(huán)、4，19-C-O-C三元環(huán)醚結(jié)構(gòu)的多酰化木藜蘆烷類二萜化合物，具有以下化學(xué)結(jié)構(gòu)式
式中R1，R2，R3，R4，R5為H、-OH、-OCOR、-OR、＝O中的任一種，R1R2，R4R5為雙鍵，氧橋中的任一種，R為烷基或芳基。
本發(fā)明的上述化合物優(yōu)選R1＝R3＝β-OCOCH3，R2＝α-OCOCH2CH3，R4＝R5＝α-OCOCH3時(shí)的化合物，即-3，4-seco-3，10-olide-5β-hydroxy-6β，14β，15α，16α-tetraacetoxy-7α-propionyloxygrayan-4(19)-tricyclic ether，命名為美麗馬醉木素M，其分子式為C31H42O14； 或者，R1＝R3＝β-OCOCH3，R2＝R4＝R5＝α-OCOCH3時(shí)的化合物，即-3，4-seco-3，10-olide-5β-hydroxy-6β，7α，14β，15α，16α-pentaacetoxygrayan-4(19)-tricyclic ether，命名為美麗馬醉木素N，其分子式為C30H40O14。
本發(fā)明提供的上述具有3，4-開環(huán)、4，19-C-O-C三元環(huán)醚結(jié)構(gòu)的多酰化木藜蘆烷型二萜化合物是從美麗馬醉木花中提取分離得到的，具體方法如下 A、將干燥的美麗馬醉木花粉碎后，按美麗馬醉木花∶丙酮水溶液＝0.25～0.5的質(zhì)量/體積比，將粉碎后的美麗馬醉木花放入體積濃度為75％的丙酮水溶液中，于室溫下浸泡48小時(shí)，得提取液，如此重復(fù)提取3次，合并提取液； B、將A步驟所得提取液濃縮至無丙酮味后，按提取液∶石油醚＝1∶1的體積比，于室溫下用石油醚對(duì)提取液進(jìn)行2～3次萃取，回收石油醚，得萃取液； C、按萃取液∶乙酸乙酯＝1∶1的體積比，于室溫下用乙酸乙酯對(duì)B步驟所得萃取液進(jìn)行2～3次萃取，回收乙酸乙酯，得浸膏； D、將C步驟所得浸膏上硅膠柱進(jìn)行層析分離，依次用氯仿、氯仿∶丙酮＝9∶1、8∶2、7∶3、6∶4和1∶1體積比的洗脫劑進(jìn)行洗脫，最后用甲醇洗脫，除去雜質(zhì)后，得粗分離物； E、將D步驟所得粗分離物依次以氯仿∶丙酮＝20∶1、15∶1、10∶1和5∶1體積比的洗脫劑進(jìn)行梯度硅膠柱層析，洗脫2～5次，除去雜質(zhì)后，得精分離物； F、將E步驟所得精分離物上硅膠柱進(jìn)行層析分離，用石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1體積比的混合劑洗脫，得化合物美麗馬醉木素M和美麗馬醉木素N。
所述步驟A中美麗馬醉木花粉末與丙酮水溶液的質(zhì)量/體積比為kg/L。
所述A、B、C、D、E、F步驟中的石油醚、乙酸乙酯、氯仿、甲醇、丙酮均為工業(yè)級(jí)溶劑，重蒸后使用。
所述D、E、F步驟中使用的硅膠柱均為現(xiàn)有技術(shù)中的常規(guī)設(shè)備。
本發(fā)明具有下列優(yōu)點(diǎn)和效果所提供的化合物為結(jié)構(gòu)新奇的木藜蘆烷型二萜，其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是在C-3和C-4之間發(fā)生裂環(huán)，并在C-3和C-10之間形成了一個(gè)五元內(nèi)酯環(huán)，較為少見的是在C-4與C-19之間形成了三元氧環(huán)。該種化合物從美麗麻醉木花中分離得到。該植物為常綠灌木或小喬木，云南資源豐富，且采集部位為花，植物資源可持續(xù)利用，不會(huì)對(duì)自然資源產(chǎn)生破壞?？蔀榻窈筮M(jìn)一步研究該化合物的藥理、毒理性能，以及臨床研究提供可靠依據(jù)，以發(fā)現(xiàn)其生物活性，為人類造福。



圖1為美麗馬醉木素M的化學(xué)結(jié)構(gòu)式； 圖2為美麗馬醉木素N的化學(xué)結(jié)構(gòu)式； 圖3為美麗馬醉木素M的異核多鍵相關(guān)HMBC圖； 圖4為美麗馬醉木素M的單分子立體結(jié)構(gòu)投影圖； 圖5為美麗馬醉木素M的分子晶胞堆積圖。

具體實(shí)施例方式 實(shí)施例1 將干燥的美麗馬醉木花粉碎后，按美麗馬醉木花體積濃度為75％的丙酮水溶液＝0.24的質(zhì)量/體積比，將10.5kg美麗馬醉木花粉末放入25L丙酮水溶液中進(jìn)行混合，于室溫下浸泡48小時(shí)，得提取液，如此重復(fù)提取3次后合并，得75L提取液； 用現(xiàn)有技術(shù)的減壓濃縮法減壓蒸餾至無丙酮味；按提取液∶石油醚＝1∶1的體積比，先用石油醚于室溫下對(duì)提取液萃取三次，回收石油醚后，得萃取液； 按萃取液∶乙酸乙酯＝1∶1的體積比，再用乙酸乙酯于室溫下對(duì)萃取液萃取三次，減壓濃縮后，得乙酸乙酯浸膏650g； 將乙酸乙酯浸膏上硅膠柱(粒度為80-100目)進(jìn)行層析分離，依次用氯仿、氯仿∶丙酮＝9∶1、8∶2、7∶3、6∶4和1∶1體積比的混合溶劑進(jìn)行洗脫，最后用甲醇洗脫，除去雜質(zhì)后，得粗分離物55g； 將上述的粗分離物依次用氯仿∶丙酮＝20∶1、15∶1、10∶1和5∶1體積比的洗脫劑進(jìn)行硅膠(粒度為200-300目)柱層析，洗脫2～5次，除去雜質(zhì)后，得精分離物10.3g；將所得精分離物再次上硅膠(粒度為200-300目)柱進(jìn)行層析分離，用石油醚∶丙酮＝5∶1體積比的混合溶劑洗脫，得到30mg美麗馬醉木素M化合物和25mg美麗馬醉木素N化合物。
美麗馬醉木素M化合物的物理性狀為白色粉末；根據(jù)HRESIMS(實(shí)測(cè)值m/z673.2275[M+Cl]-，計(jì)算值m/z 673.2263)和NMR譜提供的信息，確定其分子式為C31H42O14，不飽和度為11。
美麗馬醉木素M化合物的紅外光譜顯示，分子中存在羥基(3436-3519cm-1)和多個(gè)酯基(1714-1766cm-1)，進(jìn)一步分析其1H NMR譜，發(fā)現(xiàn)存在7個(gè)甲基單峰(δ1.32，1.56，1.65，1.97，2.02，2.06，2.10)，4個(gè)含氧次甲基(δ5.06，5.16，5.63，5.68)，一個(gè)丙酰氧基(δ1.16，t，3H，J＝6.0Hz；2.28，q，2H，J＝6.0Hz)和1組典型的AB亞甲基(δ2.87，2.35，each d，J＝4.0Hz)信號(hào)。13C譜顯示有31個(gè)碳信號(hào)，包括4個(gè)乙酰氧基和1個(gè)丙酰氧基。除去4個(gè)乙酰氧基和1個(gè)丙酰氧基所含的碳數(shù)目，分子中恰好剩下20個(gè)碳原子，包括3個(gè)甲基、4個(gè)亞甲基、7個(gè)次甲基(其中4個(gè)為含氧次甲基δ68.1，73.1，76.5，89.8)和6個(gè)季碳(包括3個(gè)含氧季碳δ71.8，89.1和87.9；1個(gè)酯基碳δ173.8)。1H-1H COSY譜中存在木藜蘆烷型二萜中較常見的片段CH-CH2，CH(OR)-CH(OR)以及CH-CH2-CH2-CH-CH(OR)；結(jié)合HMBC相關(guān)信號(hào)，表明分子中存在木藜蘆烷型二萜中的B，C，D環(huán)結(jié)構(gòu)。因此，美麗馬醉木素M化合物應(yīng)為木藜蘆烷型二萜。1H NMR中，Me-19和H-3信號(hào)的消失，而換之以一個(gè)新的ABq亞甲基信號(hào)(δH2.87，2.35，d，J＝4.0Hz)和1個(gè)酯基碳(δc為173.8)的出現(xiàn)，推測(cè)美麗馬醉木素M化合物為3，4開環(huán)的木藜蘆烷型二萜。
將美麗馬醉木素M化合物的1H和13CNMR數(shù)據(jù)與已知的木藜蘆烷型二萜相比，發(fā)現(xiàn)存在較大的差異，故其結(jié)構(gòu)的推導(dǎo)主要通過對(duì)1H-1HCOSY、HSQC和HMBC相關(guān)信號(hào)的分析得到。HMBC譜中，Me-18與C-4，C-5以及C-19的相關(guān)，H-19與C-4，C-5和C-18之間的相關(guān)可推測(cè)出Me-18和C-19連在同一個(gè)季碳上(δC59.4，s，C-4)。另外，Me-20的單峰信號(hào)(δH1.65)與C-1，C-9和C-10相關(guān)，H-2[δH2.89(dd，13.6，10.6)，2.58(dd，13.6，5.6)]與C-1，C-3，C-5和C-10相關(guān)，H-6(δH5.16，d，J＝7.6Hz)與C-4的相關(guān)，結(jié)合1H-1H COSY譜中觀察到的兩個(gè)片段(H-1-H-2，H-6-H-7)，可以確定片段1a的存在。Me-17(δH1.56，s)與C-13，C-15以及C-16相關(guān)，H-11(δH1.83，m，1.72，m)與C-8相關(guān)，H-14(δH5.68，br s)與C-9，C-12，C-13，C-15以及C-16相關(guān)，H-15(δH5.06，br s)與C-7，C-8，C-9，C-14，C-16以及C-17相關(guān)，結(jié)合1H-1HCOSY譜中觀察到的片段(H-9-H-11-H-12-H-13-H-14)，可以確定1b結(jié)構(gòu)片段的存在。H-7(5.63d，J＝8.0)與C-6，C-9，C-14以及C-15得相關(guān)信號(hào)，H-9與C-1，C-12，C-14，C-15以及Me-20的相關(guān)，以及H-6與C-7和C-8的相關(guān)，可確定1a和1b通過C-6和C-7相連。
此外，HMBC譜中H-6，H-14和H-15分別與化學(xué)位移在δ168.9，171.1和171.6的3個(gè)乙酰氧基的酯基碳相關(guān)，可以確定3個(gè)乙酰氧基分別連在C-6，C-14和C-15位上。H-7與丙酰氧基酯基碳(δ173.4)之間的HMBC相關(guān)表明丙酰氧基連在C-7位。
至此，美麗馬醉木素M化合物的基本骨架已確定，剩下的問題是確定3、4、10和16位含氧碳的連接方式。我們對(duì)文獻(xiàn)報(bào)道的100多個(gè)木藜蘆烷型二萜的13C-NMR化學(xué)位移值進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)C-10和C-16若被羥基取代，則C-10的化學(xué)位移值在78.0ppm左右，C-16在79.0ppm左右。而美麗馬醉木素M化合物的C-10和C-16的化學(xué)位移值分別為89.1和87.9ppm，與rhodomollein III相比分別向低場(chǎng)偏移了11.2和8.9ppm(章華平，中科院上海藥物所博士學(xué)位論文，2004，95-103)，故推測(cè)C-3與C-10之間形成了五元內(nèi)酯環(huán)，C-16位被乙酰氧基所取代。五元內(nèi)酯環(huán)的存在亦被紅外光譜中1776cm-1所證實(shí)。
觀察C-4和C-19的化學(xué)位移值，我們發(fā)現(xiàn)C-4化學(xué)位移為59.4，C-19為49.5，比一般的木藜蘆烷型二萜化學(xué)位移向低場(chǎng)偏移。結(jié)合分子的不飽和度和分子式組成，C-4與C-19之間應(yīng)該形成一個(gè)三元氧環(huán)，5位為羥基取代。
ROESY相關(guān)譜中，H-1與H-6，H-14以及Me-18的相關(guān)表明H-1，H-6，H-14以及Me-18均為α構(gòu)型；H-7與H-9和Me-20的相關(guān)，H-15與H-7，H-9以及Me-17的相關(guān)，表明H-7，H-9，H-15，Me-17和Me-20均為β構(gòu)型。
至此，新化合物的結(jié)構(gòu)被確定，命名為美麗馬醉木素M(Pierisformoside M)。根據(jù)2D NMR中的HSQC，HMBC，ROESY及1D NMR將其氫譜和碳譜數(shù)據(jù)歸屬于表1。
美麗馬醉木素M化合物的結(jié)構(gòu)最終經(jīng)單晶-X衍射實(shí)驗(yàn)所證實(shí)。衍射實(shí)驗(yàn)用晶體尺寸為0.19×0.27×0.41mm，屬單斜晶系，空間群為P21，晶胞參數(shù)a＝11.526(1)，b＝17.481(1)，

β＝104.02(3)°，

晶胞內(nèi)分子數(shù)Z＝4。
使用Rigaku MicroMax 002+單品衍射儀收集衍射強(qiáng)度數(shù)據(jù)，CuKα輻射，共聚焦單色器，準(zhǔn)直光管直徑ф＝0.30mm，晶體與CCD探測(cè)器距離d＝50mm，管壓45kV，管流0.88mA，ω與κ掃描方式，最大2θ角141.58°，攝取1085幅衍射圖象，總衍射點(diǎn)22166個(gè)，獨(dú)立衍射點(diǎn)9897個(gè)，可觀察點(diǎn)(|F|2≥2σ|F|2)9394個(gè)，數(shù)據(jù)完整度為95.5％。
使用直接法(shelxs-97)解析晶體結(jié)構(gòu)，從E圖上獲得全部90個(gè)非氫原子位置，使用最小二乘法修正結(jié)構(gòu)參數(shù)和判別原子種類，用幾何計(jì)算法獲得全部氫原子位置，最終可靠因子R1＝0.0772，wR2＝0.1903，S＝1.020。最終確定不對(duì)稱單位化學(xué)計(jì)量式為(C31H42O14)2，計(jì)算單分子量為638.67，計(jì)算晶體密度1.236g/cm3。晶態(tài)下分子排列屬于第一類空間群，故樣品應(yīng)具有旋光活性。計(jì)算晶體結(jié)構(gòu)的Flack系數(shù)為0.0(3)，獲得化合物的相對(duì)構(gòu)型。
結(jié)構(gòu)分析表明美麗馬醉木素M化合物為木藜蘆烷型二萜類化合物。該分子骨架由1個(gè)七元環(huán)B，1個(gè)六元環(huán)C和2個(gè)五元環(huán)A(內(nèi)酯環(huán))和D，1個(gè)三元環(huán)E(含氧環(huán)丙烷)組成，其中A、D環(huán)呈信封式，B環(huán)呈椅式，C環(huán)呈船式，E環(huán)呈平面，A/B環(huán)為反式連接，B/C環(huán)為順式連接。結(jié)構(gòu)分析表明取代乙酰基鏈末端甲基C22A、C24A、C25A、C27A、C29A、C31A、C22B、C24B、C25B、C27B、C29B、C31B由于單鏈旋轉(zhuǎn)，導(dǎo)致其溫度因子值偏高。計(jì)算各環(huán)間二面角值分別為A/B14.1°，B/C51.6°，B/D56.9°，B/E27.9°，C/D35.3°。晶態(tài)下分子內(nèi)不存在氫鍵聯(lián)系，分子間存在氫鍵聯(lián)系為


晶態(tài)下分子以氫鍵作用力和范德華力維系其在空間的穩(wěn)定排列。(圖3為單分子的立體結(jié)構(gòu)投影圖，圖4為分子晶胞堆積圖。) 實(shí)施例2 化合物提取分離方法見實(shí)施例1。
美麗馬醉木素N化合物的物理性狀為白色粉末；根據(jù)HRESIMS(實(shí)測(cè)值m/z623.2338[M-H]-，計(jì)算值為623.2339)和NMR譜提供的信息，確定其分子式為C30H40O14，不飽和度為11。
1H NMR譜顯示8個(gè)甲基單峰(δ1.33，1.61，1.66，2.01，2.02，2.04，2.06，2.12)；4個(gè)含氧次甲基(δ5.07，5.23，5.80，5.68)和一組典型的AB亞甲基(δ2.33，2.95，d，J＝5.5Hz)信號(hào)。13C NMR譜顯示30個(gè)碳信號(hào)，DEPT譜表明含有3個(gè)甲基、4個(gè)亞甲基、7個(gè)次甲基(包括4個(gè)含氧次甲基δ73.8，67.9，77.4，91.3)、6個(gè)季碳(包括3個(gè)含氧季碳δ72.9，88.7和89.1；1個(gè)酯基碳δ174.2)和5個(gè)乙酰氧基。
仔細(xì)比較美麗馬醉木素M化合物和美麗馬醉木素N化合物的NMR數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)二者十分接近，區(qū)別僅在于美麗馬醉木素N化合物比美麗馬醉木素M化合物少了一個(gè)丙酰氧基，多了1個(gè)乙酰氧基。HMBC譜中H-7與該乙酰氧基的相關(guān)信號(hào)表明美麗馬醉木素N化合物的C-7位被乙酰氧基所取代。因此，美麗馬醉木素N化合物的結(jié)構(gòu)被確定，并命名為美麗馬醉木素N(Pierisformoside N)。
表1.化合物1的1H-NMR(400MHz)和13C-NMR(100MHz)數(shù)據(jù) (δppm，JHz，C5ND5)
表2.化合物2的1H-NMR(400MHz)和13C-NMR(100MHz)數(shù)據(jù)(δppm，JHz，C3D6O)

權(quán)利要求
1.一種多?；巨继J烷類二萜化合物，具有以下化學(xué)結(jié)構(gòu)式
式中R1，R2，R3，R4，R5為H、-OH、-OCOR、-OR、＝O中的任一種，R1R2，R4R5為雙鍵，氧橋中的任一種，R為烷基或芳基。
2.如權(quán)利要求1所述的多?；巨继J烷類二萜化合物，其特征在于優(yōu)選R1＝R3＝β-OCOCH3，R2＝α-OCOCH2CH3，R4＝R5＝α-OCOCH3時(shí)的化合物，命名為美麗馬醉木素M，其分子式為C31H42O14。
3.如權(quán)利要求1所述的多?；巨继J烷類二萜化合物，其特征在于優(yōu)選R1＝R3＝β-OCOCH3，R2＝R4＝R5＝α-OCOCH3時(shí)的化合物，命名為美麗馬醉木素N，其分子式為C30H40O14。
4.如權(quán)利要求1所述的多酰化木藜蘆烷類二萜化合物的制備方法，其特征在于經(jīng)過下列步驟
A、將干燥的美麗馬醉木花粉碎后，按美麗馬醉木花∶丙酮水溶液＝0.25～0.5的質(zhì)量/體積比，將粉碎后的美麗馬醉木花放入體積濃度為75％的丙酮水溶液中，于室溫下浸泡48小時(shí)，得提取液，如此重復(fù)提取3次，合并提取液；
B、將A步驟所得提取液濃縮至無丙酮味后，按提取液∶石油醚＝1∶1的體積比，于室溫下用石油醚對(duì)提取液進(jìn)行2～3次萃取，回收石油醚，得萃取液；
C、按萃取液∶乙酸乙酯＝1∶1的體積比，于室溫下用乙酸乙酯對(duì)B步驟所得萃取液進(jìn)行2～3次萃取，回收乙酸乙酯，得浸膏；
D、將C步驟所得浸膏上硅膠柱進(jìn)行層析分離，依次用氯仿、氯仿∶丙酮＝9∶1、8∶2、7∶3、6∶4和1∶1體積比的洗脫劑進(jìn)行洗脫，最后用甲醇洗脫，除去雜質(zhì)后，得粗分離物；
E、將D步驟所得粗分離物依次以氯仿∶丙酮＝20∶1、15∶1、10∶1和5∶1體積比的洗脫劑進(jìn)行梯度硅膠柱層析，洗脫2～5次，除去雜質(zhì)后，得精分離物；
F、將E步驟所得精分離物上硅膠柱進(jìn)行層析分離，用石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1體積比的混合劑洗脫，得化合物美麗馬醉木素M和美麗馬醉木素N。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種多?；巨继J烷類二萜化合物及其制備方法，具體涉及從美麗馬醉木中提取分離該多酰化木藜蘆烷型二萜化合物的方法。所提供的化合物結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是在C-3和C-4之間發(fā)生裂環(huán)，并在C-3和C-10之間形成了一個(gè)五元內(nèi)酯環(huán)，較為少見的是在C-4與C-19之間形成了三元氧環(huán)。所述多?；巨继J烷類二萜化合物具有以下化學(xué)結(jié)構(gòu)式，式中R1，R2，R3，R4，R5為H、-OH、-OCOR、-OR、＝O中的任一種，R1R2，R4R5為雙鍵，氧橋中的任一種，R為烷基或芳基。
文檔編號(hào)C07D407/04GK101805331SQ201010146068
公開日2010年8月18日 申請(qǐng)日期2010年4月14日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月14日
發(fā)明者李蓉濤, 汪偉光, 李海舟, 李洪梅, 吳兆園 申請(qǐng)人:昆明理工大學(xué)