專利名稱：取代的乙內(nèi)酰脲的制作方法
取代的乙內(nèi)酰脲 本發(fā)明涉及用于治療人類疾病如癌癥的乙內(nèi)酰脲衍生物和它們作為通常稱作 MEK1和MEK2的兩種蛋白激酶的抑制劑的應(yīng)用。MEK是MAP激酶/ERK激酶的通用簡寫，所 述的MAP激酶/ERK激酶又是促分裂原活化蛋白/胞外信號調(diào)節(jié)激酶激酶的簡寫。有時也 將MEK稱作MAPK激酶或MAP激酶激酶。 癌癥是以具有非限制性生長、局部膨脹和全身轉(zhuǎn)移潛力的惡性細(xì)胞和腫瘤增殖為 特征的疾病。這種不受控制的生長通常來源于與正常細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的那些不同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途 徑和對各種生長因子響應(yīng)的異常。異常包括在信號級聯(lián)放大中的一種或多種信號蛋白的內(nèi) 在活性或細(xì)胞濃度的改變。這些改變經(jīng)常是由可以導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)假的促細(xì)胞分裂信號的胞內(nèi) 信號蛋白的遺傳突變或過度表達(dá)所導(dǎo)致。 促分裂原活化蛋白(MAP)激酶途徑表示參與人類癌癥的發(fā)展和進(jìn)程的被最佳表 征的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑之一。該途徑，通過Ras/Raf/MEK/ERK信號級聯(lián)放大，負(fù)責(zé)將促細(xì)胞分裂 信號從細(xì)胞表面?zhèn)魉筒⑶曳糯蟮郊?xì)胞核，在此活化的轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)基因表達(dá)并且確定細(xì)胞 命運(yùn)。該途徑的組成型活化對于誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化是足夠的。由于異常受體酪氨酸激酶活化、 Ras突變或Raf突變導(dǎo)致的MAP激酶途徑的異常調(diào)節(jié)活化已經(jīng)經(jīng)常在人類癌癥中發(fā)現(xiàn)，并且 代表確定異常生長控制的主要因子。在人類癌中，Ras突變是常見的，已在約30X的癌癥中 被鑒定出。Ras族的GTP酶蛋白(將鳥苷三磷酸轉(zhuǎn)化為鳥苷二磷酸的蛋白)將信號從活化 生長因子受體轉(zhuǎn)播到下游的胞內(nèi)伙伴。由活性膜結(jié)合的Ras募集的靶點中占優(yōu)勢的是Raf 族絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶。Raf族由起Ras下游效應(yīng)物作用的三種相關(guān)激酶(A-、 B-和 C-Raf)構(gòu)成。Ras-介導(dǎo)的Raf活化又引發(fā)MEK1和MEK2 (MAP/ERK激酶1和2)的活化，其 又將同時在酪氨酸-185和蘇氨酸-183上將ERK1和ERK2 (胞外信號調(diào)節(jié)激酶1和2)磷酸 化?；罨腅RK1和ERK2在細(xì)胞核中移位和累積，在此它們可以磷酸化各種底物，包括控制 細(xì)胞生長和存活的轉(zhuǎn)錄因子?？紤]到Ras/Raf/MEK/ERK途徑在人類癌癥發(fā)展中的重要性， 此信號級聯(lián)放大中的激酶組分是作為用于調(diào)節(jié)癌癥和其它增殖性疾病中的疾病進(jìn)展的潛 在重要耙點而出現(xiàn)的。 MEK1和MEK2是磷酸化各種MAP激酶的蘇氨酸和酪氨酸殘基的更大家族的雙特異 性激酶(MEK1-7)的成員。MEK1和MEK2由不同的基因編碼，但它們共享在C-末端催化激酶 結(jié)構(gòu)域和大部分N-末端調(diào)節(jié)域兩者內(nèi)的高同源性(80%)。在人類癌癥中還沒有發(fā)現(xiàn)致癌 形式的MEK1和MEK2，但是已經(jīng)表明MEK的組成型活化導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化。除了 Raf之外，MEK 也可以被其它致癌基因活化。迄今為止，MEK1和MEK2唯一已知的底物是ERK1和ERK2。除 了同時磷酸化酪氨酸和蘇氨酸殘基的獨特能力外，這不常見的底物特異性將MEK1和MEK2 置于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)級聯(lián)系統(tǒng)中的關(guān)鍵點處，這使它們將許多胞外信號整合入MAPK途徑中。
用也稱作CI-1040 (PCT公布號WO 99/01426)的MEK抑制劑2_(2_氯+碘-苯 基氨基)-N-環(huán)丙基甲氧基_3，4- 二氟_苯甲酰胺的在先報道的研究提供了以下進(jìn)一步的 證據(jù)，即，對于以MEK的活性過高為特征的癌癥或其它人類疾病和由MAPK途徑調(diào)節(jié)的疾病 中的藥理干涉，MEK1和MEK2代表有吸引力的耙點。 取代的乙內(nèi)酰脲早先已經(jīng)報道為葡萄糖激酶活化劑(PCT公布號W001/83478)。
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仍需要發(fā)現(xiàn)新的和改進(jìn)的用于治療人類疾病如癌癥的MEK1和MEK2的抑制劑。 發(fā)明詳述 本發(fā)明涉及式I化合物 其中 Rl選自鹵素，乙炔基和環(huán)烷基；
R2選自氫禾口 CH (R3) (R4); R3選自低級烷基，低級烷氧基，任選取代的芳基，和任選取代的雜芳基；
R4選自氫和低級烷基； R5是氫，或者與R2以及R2和R5連接的碳一起形成低級環(huán)烷基；并且
R6選自氫，低級烷基，低級環(huán)烷基，任選取代的芳基，和任選取代的雜芳基；
及其藥用鹽或酯。 這些化合物抑制酶MEK 1和MEK2，即作為MAP激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的組成部分的蛋 白激酶，因此所述化合物具有抗_過增殖細(xì)胞活性。
在另一個方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中
R1選自溴，碘，乙炔基和C3至C6環(huán)烷基，
R2選自氫禾口 CH (R3) (R4); R3選自Cl至C3烷基，Cl至C3烷氧基，任選取代的苯基，和任選取代的雜芳基，其 中所述雜芳基含有至少一個硫原子或氮原子；
R4選自氫和Cl至C3烷基； R5是氫，或者與R2以及R2和R5連接的碳一起形成低級環(huán)烷基；并且
R6選自氫，低級烷基，低級環(huán)烷基，任選取代的芳基，和任選取代的雜芳基；
及其藥用鹽或酯。 在一個方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物及其藥用鹽或酯，其中Rl是碘，溴，乙炔基，
或環(huán)丙基。 在另一個方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物及其藥用鹽或酯，其中R2是CH(R3) (R4) 并且R3是甲基，甲氧基，苯基，4-氟苯基，4-甲氧基苯基，或噻吩。 在另一個方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物及其藥用鹽或酯，其中R2是CH(R3) (R4) 并且R4是氫或甲基。 在另一個方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物及其藥用鹽或酯，其中R5與R2以及R2 和R5連接的碳一起形成低級環(huán)烷基。 在另一個方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物及其藥用鹽或酯，其中R5與R2以及R2 和R5連接的碳一起形成環(huán)丙基。
R2 R5 O
6
在另一個方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物及其藥用鹽或酯，其中R6是2-丙基，環(huán) 己基，苯基，4-甲氧基苯基，4-(0((^2)2011)-苯基，4-(0((^2)20(^3)-苯基，4-(0CH2C(0) N (CH3) 2)-苯基，4- (0CH2C (0) N ((CH2) 20H) 2)-苯基。 在另一個方面，本發(fā)明涉及式(I)化合物及其藥用鹽或酯，其中
Rl是環(huán)丙基，乙炔，碘，或溴；
R2是H或CH (R3) (R4); 1 3是甲基，甲氧基，苯基，4-氟苯基，4-甲氧基苯基，或2-噻吩基；
R4是氫或甲基； R5是氫，或者與R2和它們連接的碳一起為環(huán)丙基； R6是氫，2_丙基，環(huán)己基，苯基，4_甲氧基苯基，4_(0((^2)2011)-苯基， 4- (0 (CH2) 20CH3)-苯基，4- (0CH2C (0) N (CH3) 2)-苯基，或4- (0CH2C (0) N ((CH2) 20H) 2) _苯基。 這些化合物是 (R)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基]_3_ [ (S) _1_ (6-碘_1H_苯并咪 唑-2-基)-2_苯基-乙基]-咪唑烷_2，4-二酮； (R) -5- [4- (2-羥基-乙氧基)_苯基]_3_ (5-碘_1H_苯并咪唑_2_基甲基)-咪 唑烷_2，4-二酮； (R)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)—苯基]-3-[(s)—卜(5—碘_1H_苯并咪 唑-2-基)-2_甲基-丙基]-咪唑烷_2，4-二酮； (R) -5- [4- (2-羥基-乙氧基)-苯基]_3_ [ (1R， 2R) _1_ (5-碘_1H_苯并咪 唑-2-基)-2-甲氧基-丙基]-咪唑烷_2，4-二酮； 3-[(5)-1-(5-碘_111-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-乙基]-咪唑烷-2，4-二酮； 與三氟_乙酸的復(fù)合物； (R)-3-[(S)-2-(4-氟-苯基)-1_(5_碘_1H_苯并咪唑-2-基)-乙 基]-5-[4- (2-羥基-乙氧基)_苯基]_咪唑烷_2， 4- 二酮； (R)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基]_3_ [ (S) _1_ (5-碘_1H_苯并咪 唑-2-基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-咪唑烷_2，4-二酮； (R)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基]_3_ [ (S) _1_ (5-碘_1H_苯并咪 唑-2-基)-2-噻吩-2-基-乙基]-咪唑烷-2， 4- 二酮； (R) -3- [ (1S， 2S) -1- (6-碘_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基-丙基]_5_苯基-咪
唑烷_2，4-二酮； (R) -3-[ (1S， 2S) -1- (6-碘_1H_苯并咪唑-2-基)_2_苯基-丙基]_5_ (4-甲氧 基-苯基)-咪唑烷-2，4-二酮； (R)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基]_3_[ (1S， 2S) _1_ (6-碘_1H_苯并咪 唑-2-基)-2-苯基-丙基]-咪唑烷-2，4-二酮； (R) -3- [ (1S， 2S) + (6-碘_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基-丙基]_5_ [4- (2-甲
氧基_乙氧基)_苯基]_咪唑烷_2， 4_ 二酮； 2- (4- {(R) -1- [ (1S， 2S) + (6-碘_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基-丙基]_2， 5_ 二 氧代_咪唑烷-4-基}-苯氧基)-N， N- 二甲基-乙酰胺；
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N， N-雙-(2-羥基-乙基)-2-(4-{(R)-l-[(lS，2S) + (6-碘_1H_苯并咪 唑-2-基)-2-苯基-丙基]-2， 5- 二氧代-咪唑烷-4-基}-苯氧基)-乙酰胺；
(R) -3- [ (IS， 2S) _1_ (5_碘_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基-丙基]_5_異丙基_咪 唑烷_2，4-二酮； (R) -5-環(huán)己基-3- [ (IS， 2S) _1_ (5_碘_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基-丙基]-咪 唑烷_2，4-二酮； (R) -5- [4- (2-羥基-乙氧基)_苯基]_3_ [1_ (5_碘_1H_苯并咪唑_2_基)-環(huán)丙 基]-咪唑烷_2，4-二酮； (R) -3- [ (IS， 2S) + (6_溴_1H_苯并咪唑_2_基)_2
基-乙氧基)-苯基]-咪唑烷_2，4-二酮； (R) -3- [ (S) -1- (5-環(huán)丙基-1H-苯并咪唑_2_基)_2
基-乙氧基)-苯基]-咪唑烷_2，4-二酮； (R) -3- [ (S) -1- (5-乙炔基-1H-苯并咪唑-2-基)_2 基_乙氧基)_苯基]_咪唑烷-2， 4- 二酮；禾口
(R)-3-[(lS，2S)-l_(5-乙炔基_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基_丙 基]-5-[4- (2-羥基-乙氧基)-苯基]-咪唑烷-2， 4- 二酮。
另外優(yōu)選的本發(fā)明化合物如下面在實施例中所闡述。"芳基"是指一價的、單環(huán)或雙環(huán)的芳族碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)，優(yōu)選5-10元芳族環(huán)系統(tǒng)。 優(yōu)選的芳基包括但不限于苯基，萘基，甲苯基，二甲苯基，噻吩基，呋喃基，吲哚基，吡咯基， 吡啶基，羥吡啶基，吡嗪基，噁唑基，噻唑基(thiaxolyl)，喹啉基，嘧啶基，咪唑和四唑基。含 有雜原子如N， S和O的芳基在本文中也稱為"雜芳基"基團(tuán)。芳基或雜芳基可以任選地被 例如以下取代基單_、二 _或三_取代低級烷基，環(huán)烷基，例如環(huán)丙基，三鹵代_低級烷基， 例如，三氟甲基，羥基，烷氧基，特別是低級烷氧基， 一或二羥基_取代的烷氧基，乙酰氨基， 甲氧基乙酰氨基，二甲基氨基乙酰氨基，鹵素，例如氟，氯，或溴，苯胺衍生物，苯胺衍生物的 酰胺衍生物和甲磺?；?。當(dāng)兩個或多個取代基存在于芳環(huán)或雜芳環(huán)上時，它們也可以以稠 環(huán)形式存在。這樣的稠環(huán)包括但不限于3，4-亞甲二氧基苯基和3，4-亞乙二氧基苯基。
"雜原子"是指選自N， 0和S的原子。 術(shù)語"低級烷基"是指由1至8個，優(yōu)選1至6個，更優(yōu)選1至3個碳原子組成的 飽和的直鏈或支鏈烴。典型的低級烷基包括甲基，乙基，丙基，異_丙基，正_ 丁基，2- 丁基， 叔_ 丁基，正_戊基，2-戊基，新戊基，正-己基等。"烷氧基或低級烷氧基"是指與氧原子連接的上述低級烷級中的任何一種。典型的 低級烷氧基包括甲氧基，乙氧基，異丙氧基或丙氧基，丁氧基，環(huán)丙基甲氧基等。還包括在烷 氧基的含義中的有多烷氧基側(cè)鏈，如乙氧基乙氧基，甲氧基乙氧基，甲氧基乙氧基乙氧基， 甲基氧雜環(huán)丁烷基甲氧基等。還包括取代的烷氧基側(cè)鏈，例如羥基乙氧基，二羥基丙氧基， 二甲基氨基乙氧基，二乙基氨基乙氧基，磷?；籽趸籽趸?磷?；籽趸被??；籽趸?，甲基和二甲基氨基甲?；籽趸?，氨基甲?；已趸?，甲基和二甲基氨基甲酰 基乙氧基，氮雜環(huán)丁烷基氨基甲酰基乙氧基，氧代吡咯烷基乙氧基，二羥基乙基氨基甲?；?甲氧基，嗎啉基甲氧基，嗎啉基乙氧基，哌嗪基甲氧基，哌嗪基乙氧基，低級_烷基哌嗪乙氧 基，氧代-吡咯烷基乙氧基等。
-苯基-丙基]-5-[4-(2-羥 -苯基-乙基]-5-[4-(2-羥 -苯基-乙基]-5-[4-(2-羥
本文使用的術(shù)語"環(huán)烷基"是指含3至12個，優(yōu)選3至10個碳原子的飽和的、單 環(huán)-或雙環(huán)烴。含3至6個碳原子的這種飽和的、單環(huán)烴也稱作"低級環(huán)烷基"。典型的環(huán) 烷基包括環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，環(huán)辛基，二環(huán)庚烷，二環(huán)辛烷，二環(huán)壬烷， 十氫化萘，二環(huán)己基等。"雜環(huán)基"是指含有至少一個如上定義的"雜原子"的如上定義的"環(huán)烷基"。優(yōu)選 的"雜環(huán)基"是指含4至6個碳原子和至少一個雜原子的基團(tuán)。
"卣素"是指氟，氯，溴或碘。"藥用酯"是指常規(guī)酯化的含有羧基的式(I)化合物，該酯保留式(I)化合物的生 物學(xué)功效和性質(zhì)，并且在活體內(nèi)(在有機(jī)體內(nèi))裂解為相應(yīng)的活性羧酸。
關(guān)于酯和酯用于遞送藥物化合物的應(yīng)用的信息在Design of Prodrugs.(前藥設(shè) 計)B皿dgaard Hans編輯(Elsevier, 1985)中提供。還參見Ansel等，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (藥物劑型禾口藥物遞送系統(tǒng))(第6版，1995) 第108-109頁；Krogsgaard-Larsen，等，Textbookof Drug Design and Development (藥物 設(shè)計和開發(fā)教科書)(第2版，1996)第152-191頁。"藥用鹽"指保留了本發(fā)明化合物的生物學(xué)效力和性質(zhì)，并由合適的非毒性有機(jī)或 無機(jī)酸或有機(jī)或無機(jī)堿形成的常規(guī)酸加成鹽或堿加成鹽。酸加成鹽的實例包括從無機(jī)酸如 鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸衍生的那些鹽，和從有機(jī)酸如對-甲苯 磺酸、水楊酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、檸檬酸、蘋果酸、乳酸、富馬酸、三氟乙酸等衍生的那些 鹽。堿加成鹽的實例包括從銨、鉀、鈉和季銨氫氧化物，例如氫氧化四甲銨，衍生的那些鹽。 為了獲得改善的化合物的物理和化學(xué)穩(wěn)定性、吸濕性、流動性和溶解性，藥物化合物(即， 藥)形成鹽的化學(xué)修飾是藥物化學(xué)家公知的技術(shù)。參見，例如Ansel等，Pharmaceutical Dosage Forms and DrugDelivery Systems (藥物劑型和藥物遞送系統(tǒng))(第6版，1995)第 196禾口 1456-1457頁；禾口 Richard J. Bastin，Michael J. Bowker，Bryan J. Slater,Organic Process Research&Development (有機(jī)工藝研發(fā))2000， 4， 427-435。"藥用的"，如藥用載體、賦形劑等，指藥理學(xué)上可接受的、并對給藥具體化合物的 受試者基本上是無毒性的。"取代的"，如在取代的芳基或雜芳基中，是指取代可以發(fā)生在一個或多個位置，并 且除非另有說明，在每個取代位置的取代基獨立地選自規(guī)定的選項。"治療有效量"或〃 有效量"是指明顯抑制人腫瘤細(xì)胞，包括人類腫瘤細(xì)胞系的增 殖和/或防止人類腫瘤細(xì)胞，包括人類腫瘤細(xì)胞系的分化的至少一種指定化合物的量。
本發(fā)明的化合物可以用于治療或控制細(xì)胞增殖性疾病，如炎性/自身免疫疾病， 例如再狹窄，認(rèn)知障礙如癡呆和阿爾茨海默氏病，CNS病癥如神經(jīng)性疼痛，特別是腫瘤病癥。 這些化合物和含有所述化合物的制劑可以用于治療或控制實體瘤，如乳腺、直腸、肺和前列 腺腫瘤。 式(I)化合物以及它們的鹽具有至少2個不對稱碳原子，因此，可以以不同立體異
構(gòu)體的混合物形式存在?？梢杂杉褐姆蛛x方法如色譜法分離各種異構(gòu)體。 按照本發(fā)明的化合物的治療有效量指有效預(yù)防、減緩或改善被治療受試者的疾病
癥狀或延長被治療受試者的生存時間的化合物的量。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以確定治療有效量。
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按照本發(fā)明的化合物的治療有效量或劑量可以在很寬的范圍內(nèi)變化，并可以根據(jù) 本領(lǐng)域已知的方法確定。根據(jù)各具體病例的個體需要調(diào)節(jié)該劑量，所述個體需要包括給藥 的一種或多種具體化合物，給藥途徑，治療的疾病狀況，以及治療的患者。 一般說來，在對體 重約70Kg的成人口服或腸胃外給藥的情況下，日劑量約lOmg至約10， OOOmg，優(yōu)選約200mg 至約l，OOOmg將是合適的，但是當(dāng)需要時上限可以被超過。日劑量可以作為單劑量或以分 劑量給藥，或者對于腸胃外給藥，可以作為一次或多次推注或作為連續(xù)輸注提供。
可用于本發(fā)明的實踐，即包含本發(fā)明化合物的藥物制劑可以內(nèi)部給藥，如經(jīng)口 (例如以片劑、包衣片劑、糖錠劑、硬和軟明膠膠囊、溶液劑、乳劑或混懸劑形式)，經(jīng)鼻(例 如以鼻噴入形式)或經(jīng)直腸(例如以栓劑形式)。然而，還可以進(jìn)行腸胃外給藥，如肌內(nèi)或 靜脈內(nèi)(例如以注射液形式)。此外，可以進(jìn)行局部給藥(例如以軟膏劑、乳膏劑或油劑形 式)。 可以將式(I)化合物和它們的藥用鹽和酯與制藥學(xué)上惰性的無機(jī)或有機(jī)輔劑一 起加工，以制備片劑、包衣片劑、糖錠劑和硬明膠膠囊。可以使用乳糖、聚乙烯吡咯烷酮、 羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、微晶纖維素、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽 等，例如，作為用于片齊U、糖錠劑和硬明膠膠囊的這種輔劑。 軟明膠膠囊的合適輔劑為，例如植物油、蠟、脂肪、半固體物質(zhì)和液體多元醇等。用 于制備溶液和糖漿的合適輔劑為，例如水、多元醇、蔗糖，轉(zhuǎn)化糖、葡萄糖等。注射液的合適 輔劑為，例如水，醇類，多元醇，甘油和植物油等。栓劑的合適輔劑為，例如天然或硬化油、 蠟、脂肪、半固體或液體多元醇等。局部制劑的合適輔劑為甘油酯類、半合成和合成甘油酯 類、氫化油、液態(tài)蠟、液體石蠟、液態(tài)脂肪醇、甾醇類、聚乙二醇和纖維素衍生物等。
此外，藥物制劑可以含有防腐齊U、增溶齊U、增粘齊IJ、穩(wěn)定齊IJ、濕潤齊IJ、乳化齊IJ、甜味 劑、著色劑、增香劑、用于改變滲透壓的鹽、緩沖物質(zhì)、掩蔽劑或抗氧化劑。它們還可以含有 其它治療物質(zhì)。 因此，在本發(fā)明的另一個實施方案中，提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含 至少一種式(I)化合物以及藥用賦形劑。 在本發(fā)明的另一個實施方案中，提供作為藥物的式(I)化合物。 在本發(fā)明的再一個實施方案中，提供作為藥物的式(I)化合物，所述藥物用于治
療癌癥，特別是實體瘤，更特別是乳腺、結(jié)腸、肺和前列腺腫瘤。 在本發(fā)明的還一個實施方案中，提供式(I)化合物在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥 物用于治療癌癥，特別是實體瘤，更特別是乳腺、結(jié)腸、肺和前列腺腫瘤。 本發(fā)明要求保護(hù)的化合物(通式(I)化合物)可以通過方案1中所示的通用路線
制備。
10<formula>formula see original document page 11</formula> 方案1 :制備苯并咪唑衍生物(I)的通用路線。 步驟A :通式2的含有a -氨基酸官能團(tuán)的化合物被轉(zhuǎn)化為通式3的反應(yīng)性?；?物種，通式3的反應(yīng)性?；锓N適于用于合成序列的步驟B。步驟A最便利地在a-氨基酸 上進(jìn)行，該a -氨基酸在a -胺的氮上攜帶保護(hù)基(PG1)。對于保護(hù)基PG1的一個適當(dāng)選擇 是以下保護(hù)基它使得所述a-胺的氮對于合成序列的步驟A、B和C期間采用的反應(yīng)條件 是惰性的，但是可以在合成序列的步驟D期間被去除，而當(dāng)暴露于去除該保護(hù)基所需的條 件時不對化合物的其余部分導(dǎo)致不希望有的改變。保護(hù)基PG1的優(yōu)選選擇可以通過參考有 機(jī)化學(xué)教科書(例如Greene的Protective Groups in OrganicSynthesis (有機(jī)合成中的 保護(hù)基)，第四版，Peter G. M. Wuts和Theodora W. Greene, ISBN 0-471-69754-0)、原始化 學(xué)文獻(xiàn)可以進(jìn)行或?qū)⑹橇私庥袡C(jī)合成領(lǐng)域的人所公知的。在具體的基于氨基甲酸酯的保護(hù) 基中，例如優(yōu)選叔丁氧羰基，但是其它胺保護(hù)基也是有效的。 選擇形成哪個通式3的反應(yīng)性酰化劑取決于以下兩者與存在于通式3化合物其 它地方的潛在反應(yīng)性官能團(tuán)的相容性和通式3的?；瘎τ邗；ㄊ?的1，2_ 二氨基苯 衍生物的反應(yīng)性和選擇性，該反應(yīng)產(chǎn)生存在于通式5的化合物中的所需的酰胺鍵?？梢杂糜诓襟EB的典型的反應(yīng)性?；瘎┦酋；u(3， X =鹵素)和酸酐(3， X = 0-C(0)R)。對于 通式3的?；瘎┑膬?yōu)選選擇是?；u，特別是?；?3，X =氟)。對于通式3的酰化劑的 另外的選擇也可以適合于用于步驟B中，并且對于了解有機(jī)合成領(lǐng)域的人而言是明顯的。
在通式2的化合物在a -碳上含有手性中心的情況下，優(yōu)選的立體化學(xué)是S型。
步驟B :將通式4的1， 2- 二氨基苯衍生物與預(yù)先形成的通式3的?；瘎┖喜?，形 成通式5的2-氨基酰替苯胺衍生物。 對于有機(jī)合成領(lǐng)域的技術(shù)人員而言明顯的是，通過使用已知的肽偶聯(lián)反應(yīng)技術(shù)， 可能可以從通式2和通式4的化合物直接制備通式5的2-氨基酰替苯胺衍生物，而不必 預(yù)先形成通式3的反應(yīng)性?；瘎??？梢杂糜趯⑼ㄊ?和通式4的化合物直接轉(zhuǎn)化為通式5 的化合物的典型的肽偶聯(lián)劑包括基于二酰亞胺的試劑，例如二環(huán)己基碳二亞胺，(3- 二甲基 氨基-丙基)-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽；或脲鎗基試劑，例如0-苯并三唑-1-基-N， N， N'， N'-雙(四亞甲基)脲鎗六氟磷酸鹽。備選的肽偶聯(lián)劑也可以有效進(jìn)行該轉(zhuǎn)化。備選的肽 偶聯(lián)劑的選擇可以參照原始化學(xué)文獻(xiàn)進(jìn)行或者對于了解有機(jī)合成領(lǐng)域的人員是公知的。
對于有機(jī)合成領(lǐng)域的技術(shù)人員而言明顯的是，當(dāng)存在另外的一個或多個取代基 (表示為通式4化合物和后續(xù)衍生物中的Rl)時，由步驟B得到的通式5的2-氨基酰替苯 胺衍生物可以形成為區(qū)域異構(gòu)體的混合物。通式5化合物的區(qū)域異構(gòu)體形式的分離不是必 須的或有價值的，因為所述合成方案中的后續(xù)步驟(步驟C)導(dǎo)致只有一種可能的區(qū)域異構(gòu) 體的通式6化合物的形成，不論起始的通式5的2-氨基酰替苯胺衍生物的區(qū)域化學(xué)如何。
步驟C :可以將通式5的2-氨基酰替苯胺衍生物環(huán)化以形成通式6的苯并咪唑衍 生物。環(huán)化發(fā)生在苯環(huán)2-位的氨基和酰替苯胺的羰基之間，并且伴隨有水的失去。在冰醋 酸中加熱通式5的2-氨基酰替苯胺衍生物是進(jìn)行該環(huán)化反應(yīng)以得到通式6的苯并咪唑衍 生物的有效途徑，該途徑不造成保護(hù)基團(tuán)如叔-丁氧羰基的明顯去除。
通式6的苯并咪唑衍生物在方案1中被描述為咪唑的單個互變異構(gòu)體以易于表 述，而實際上所述苯并咪唑?qū)⒆鳛檫溥颦h(huán)的2種可能的互變異構(gòu)體的平衡混合物存在。咪 唑環(huán)的互變異構(gòu)化是有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域中公知的現(xiàn)象。咪唑環(huán)的互變異構(gòu)現(xiàn)象還導(dǎo)致通式5化 合物的兩種潛在的區(qū)域異構(gòu)體形式，該通式5化合物產(chǎn)生通式6化合物，通式6化合物是單 個區(qū)域異構(gòu)體形式但是在咪唑環(huán)上是互變異構(gòu)的。 步驟D :在合成序列中的該步驟需要從通式6的化合物上去除保護(hù)基PG1，以形成 通式7的含游離胺的化合物以備隨后的加工。保護(hù)基PG1和實現(xiàn)其去除的最佳條件的選擇 可以參考標(biāo)準(zhǔn)有機(jī)化學(xué)教科書(如步驟A中所引)、原始化學(xué)文獻(xiàn)進(jìn)行或者對于了解有機(jī)合 成領(lǐng)域的人員是公知的。這種選擇受以下影響通式6的化合物中存在哪些其它的潛在反 應(yīng)性官能團(tuán)和要求避免在原材料或反應(yīng)產(chǎn)物(即分別地通式6和7的化合物)中其它地方 不希望有的反應(yīng)。在存在于通式5的化合物中的胺保護(hù)基PG1是叔丁氧羰基的情況下，保 護(hù)基可以在酸性條件下去除，所述酸性條件如在二氯甲烷中的三氟乙酸或在對-二噁烷中 的鹽酸。在酸性條件下去除叔丁氧羰基最初釋放通式7的胺的相應(yīng)鹽，在用堿處理后從中 可以釋放通式7的游離胺。 通式6和7化合物中的苯并咪唑部分在酸性條件下還經(jīng)歷可逆的鹽形成，在用足 夠量的堿處理以中和鹽形式時重新形成非離子化的苯并咪唑。 步驟E :通過將通式7的胺與含有a -氨基酸官能團(tuán)的化合物合并，獲得通式9的化合物。步驟E最便利地在通式8的化合物上進(jìn)行，通式8的化合物含有a -氨基酸，該 a _氨基酸在a -胺氮上攜帶保護(hù)基(PG2)。保護(hù)基PG2的選擇標(biāo)準(zhǔn)與關(guān)于步驟B中保護(hù) 基PG1的選擇所述的相同。具體地，優(yōu)選基于氨基甲酸酯的保護(hù)基，例如叔丁氧羰基，但是 其它胺-保護(hù)基也可以是有效的。 在通式8的化合物在a-碳上含有手性中心的情況下，優(yōu)選的立體化學(xué)是R型。
步驟F :在合成序列中的該步驟需要從通式9的化合物上去除保護(hù)基PG2，以形成 通式10的含游離胺化合物，之后完成合成序列。保護(hù)基PG2和實現(xiàn)其去除的最佳條件的選 擇可以參考標(biāo)準(zhǔn)有機(jī)化學(xué)教科書(如步驟A中所引)、原始化學(xué)文獻(xiàn)進(jìn)行或者對于了解有 機(jī)合成領(lǐng)域的人員是公知的。這種選擇受以下影響通式9的化合物中存在哪些其它的潛 在反應(yīng)性官能團(tuán)和要求避免在原材料或反應(yīng)產(chǎn)物(即分別地通式9和10的化合物)中其 它地方不希望有的反應(yīng)。在存在于通式9的化合物中的胺保護(hù)基PG2是叔丁氧羰基的情況 下，該保護(hù)基可以在酸性條件下去除，所述酸性條件如在二氯甲烷中的三氟乙酸，在對-二 噁烷中的鹽酸。在酸性條件下去除叔丁氧羰基最初釋放通式10的化合物的相應(yīng)鹽，在用堿 處理后從中可以釋放通式10的游離胺。 通式9和IO化合物中苯并咪唑部分在酸性條件下還進(jìn)行可逆的鹽形成，其中非離 子化的苯并咪唑在用足夠量的堿處理以中和鹽形式時重整。 步驟G :根據(jù)本發(fā)明的通式(I)的化合物可以從通式10的化合物通過在光氣或等 價試劑(即直接與兩個可替換的基團(tuán)連接的羰基)的存在下環(huán)化而獲得。用于進(jìn)行通式10 的化合物環(huán)化為通式(I)的化合物的優(yōu)選試劑是氯甲酸三氯甲酯，其在反應(yīng)混合物中作為 兩當(dāng)量的光氣起作用。用氯甲酸三氯甲酯將通式10的化合物環(huán)化通常是迅速的，并且典型 地在低溫下(<0°C)和在小心控制量的堿的存在下進(jìn)行，所述堿中和在環(huán)化過程中形成的 酸，但是避免在新形成的乙內(nèi)酰脲環(huán)上潛在不穩(wěn)定手性中心的不需要的異構(gòu)化。
對于了解有機(jī)合成領(lǐng)域的人而言，明顯的是當(dāng)在反應(yīng)路線1中所示的化合物中標(biāo) 為Rl至R6的取代基中的一個或多個在化學(xué)反應(yīng)性基團(tuán)中或它們本身是化學(xué)反應(yīng)性基團(tuán)， 或含有化學(xué)反應(yīng)性基團(tuán)時，那么含有那些反應(yīng)性基團(tuán)的通式(I)至io的化合物的另外修飾 是可能的?？梢赃x擇化學(xué)反應(yīng)性基團(tuán)發(fā)生修飾的合成序列中的點，使得新加工的基團(tuán)對于 在合成序列的其它步驟期間使用的試劑是化學(xué)惰性的并且不干擾方案1所示的合成序列 中其余的步驟。備選地，如果新加工的基團(tuán)不是化學(xué)惰性的或者可以干擾合成序列的其余 步驟，可能需要用適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基暫時掩蔽反應(yīng)性官能團(tuán)。如果引入在最終的通式(I)的化 合物中不需要的保護(hù)基，那么可以將它在方案1所示的合成序列中其余的條件下去除或者 通過在合成序列中引入另外的去保護(hù)步驟來去除，這取決于所采用的保護(hù)基的性質(zhì)。
在MEK級聯(lián)分析中化合物IC^的測定 在使用MEK級聯(lián)組分的稱為IMAP分析的基于珠粒的FP分析中，進(jìn)行本發(fā)明化合 物作為MEK抑制劑的評估。簡言之，在含有10mM HEPES， pH 7. 0， 10mM MgCl2，50mM NaCl， 0. lmM NaV04和lmM DTT的反應(yīng)溶液中，在50 ii M ATP， lnM c-RAF， 22. 5nM MEK， 90. 5nM ERK 禾口 0. 5 ii MFITC-標(biāo)記的ERK(FITC-Aca-Ala-Ala-Ala-Thr-Gly-Pro-Leu-Ser-Pro-Gly-Pro-Phe-Ala-NH2)的存在下，進(jìn)行分析。將C-RAF，MEK，ERK和ERK肽底物相繼加入到反應(yīng)緩沖 液中?；罨腸-Raf磷酸化MEK，活化的MEK磷酸化ERK，并且隨后，活化的ERK磷酸化其肽 底物。FITC-標(biāo)記的肽底物，在由激酶磷酸化時，通過金屬-磷配體相互作用結(jié)合到衍生有三價金屬陽離子的納米粒子上。此結(jié)合熒光的磷酸化產(chǎn)物的結(jié)果是由結(jié)合產(chǎn)物分子遷移性 降低而引起的偏振信號的增強(qiáng)。將10點(ten-point)系列稀釋的化合物在與ERK和ERK 肽底物混合之前加入到MEK級聯(lián)分析中。將反應(yīng)混合物于37t:溫育lhr。通過將2 的 反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移到30iU的1 : 400IMAP珠粒緩沖液中終止反應(yīng)，然后于室溫溫育過夜，以 結(jié)合IMAP珠粒。在384-孔板格式中進(jìn)行IMAP分析。由L幾儀器，于485nm激發(fā)并且530 發(fā)射，測量熒光偏振的改變。偏振值(MP)計算如下 (MP) = 1000X(垂直強(qiáng)度-水平強(qiáng)度)/(垂直強(qiáng)度+水平強(qiáng)度)。
化合物IC50值是由板間一式三份數(shù)據(jù)組確定的。如下分析數(shù)據(jù)使用XLfit4并 且將數(shù)據(jù)擬合成4參數(shù)對數(shù)模型(Sigmoidal Dose-Response Model)，等式Y(jié)二 (A+((B-A)/ (1+ ((C/x) ~D))))，其中A和B是分別在沒有抑制劑化合物和無窮大的抑制劑化合物的存在 下的酶活性，C是IC50并且D是化合物響應(yīng)的希爾(hill)常數(shù)。 下面實施例中闡述的式(I)化合物在上述分析中顯示出低于7微摩爾的IC50值。
提供以下實施例和參考文獻(xiàn)以幫助理解本發(fā)明，而本發(fā)明的真實范圍在后附權(quán)利
要求書中闡述。
實施例1 (R)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基]-3-[(S)-l-(6-碘_1H_苯并咪 唑-2-基)-2_苯基-乙基]-咪唑烷_2，4-二酮 步驟1-A :在氮氣氣氛下，向-35°C的(S)_2-叔丁氧羰基氨基_3-苯基-丙酸 (1. 0g，3. 77,1)的二氯甲烷(18mL)溶液中加入無水吡啶(320y L，3. 96,1)和氰尿酰氟 (477 ii L， 5. 65mmol)。將混合物攪拌1. 5小時同時將溫度保持在_35和-25t:之間。將冰加 入到反應(yīng)混合物中并且將混合物攪拌15分鐘。分離有機(jī)層和用二氯甲烷(2X10mL)萃取 水層。將合并的有機(jī)萃取物用冰冷卻的水(15mL)洗滌，硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮，得 到((S) -1-氟羰基-2-苯基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯，其不經(jīng)進(jìn)一步純化地用于隨后的步 驟。 步驟l-B :向4-碘-苯-l，2-二胺(793mg，3. 39,1)的無水四氫呋喃(19mL)溶 液中加入((S)-l-氟羰基-2-苯基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯( 3.77mmo1)的無水四氫 呋喃(lOmL)溶液和催化量的二甲基-吡啶-4-基-胺。將混合物在氮氣氣氛下加熱至回 流7小時然后冷卻到環(huán)境溫度。將反應(yīng)混合物真空濃縮并且將殘余物置于乙酸乙酯中。將 有機(jī)溶液用水(1X20mL)、鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮。將粗產(chǎn)物通過用20 至50% v/v乙酸乙酯/己烷梯度洗脫的硅膠色譜純化，得到[(S) -1- (2-氨基-4-碘-苯基 氨基甲酰基)-2-苯基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯和[(S) -1- (2-氨基-5-碘-苯基氨基甲 ?；?-2-苯基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯的區(qū)域異構(gòu)體混合物(1. lg，60% )。
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HR-MS :C2。H24IN303[M+H+]計算值482. 0935，實測482. 0931。步驟1_C :將來自步 驟2的{[ (S) -1- (2-氨基-4-碘-苯基氨基甲?；?-2-苯基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯和 [(S) -1- (2-氨基-5-碘-苯基氨基甲酰基)-2-苯基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯}的區(qū)域異 構(gòu)體混合物(1.0g，2.08mmo1)溶解在冰醋酸(30mL)中并且加熱至65t: 1小時。將反應(yīng)物 冷卻，真空濃縮，用10% w/v碳酸氫鈉水溶液堿化并且用乙酸乙酯(2X20mL)萃取。將有機(jī) 萃取物合并，用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮。將粗產(chǎn)物通過用20% v/v乙酸 乙酯/己烷洗脫的硅膠色譜純化，得到[(S) -1- (5-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-乙 基]-氨基甲酸叔丁酯，為互變異構(gòu)體的混合物(950mg，99% )。
HR-MS :C2。H22IN302 [M+H+]計算值464. 0830，實測464. 0823。 步驟1-D :向在氮氣氣氛下、(TC的[(S)-l_(5-碘-1H-苯并咪唑-2-基)_2-苯 基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(1.0g，2. 16mmol)的二氯甲烷(llmL)溶液中加入三氟乙酸 (6. 0mL，81mmo1)，并將混合物在0°C以及溫?zé)嶂潦覝氐倪^程中攪拌2小時。將反應(yīng)混合 物真空濃縮，然后用飽和碳酸氫鈉水溶液堿化，并用乙酸乙酯(2X25mL)萃取。將有機(jī)萃 取物合并，用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮，得到(S)-l-(5-碘-1H-苯并咪 唑-2-基)-2-苯基-乙胺，其不經(jīng)進(jìn)一步純化地用于后續(xù)步驟(750mg，96% )。
HR-MS :C15H14IN3[M+H+]計算值364. 0305，實測364. 0302。 步驟1-E:向0。C的(5)-1-(5-碘-111-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-乙胺(161mg， 0.44mmol)的N， N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入(R)_叔丁氧羰基氨基_[4_(2_叔丁 氧基-乙氧基)-苯基]-乙酸(179mg，0. 49mmol)(如下所述制備)，N， N-二異丙基乙胺 (310ii L， 1. 77mmol) ， N-羥基苯并三唑(72mg，0. 53mmol) ， 0-苯并三唑-1-基_N， N， N'， N'-四甲基脲鎗六氟磷酸鹽(202mg，0.53mmo1)和催化量的二甲基_吡啶_4基-胺。將混 合物在氮氣氣氛下、在溫?zé)岬绞覝氐那闆r下攪拌3小時。將反應(yīng)物倒入冰/水(20mL)中 并且用乙酸乙酯(2X20mL)萃取。將有機(jī)萃取物合并，用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾并且 真空濃縮。將粗產(chǎn)物通過用20至35% v/v乙酸乙酯/己烷梯度洗脫的硅膠色譜純化，得 到{(R) - [4- (2-叔丁氧基-乙氧基)_苯基]_ [ (S) -1- (5-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯 基_乙基氨基甲?；鵠_甲基}_氨基甲酸叔丁酯(260mg，83% )。
HR-MS :計算值C34H41IN405[M+H+]713. 2195，實測713. 2184。 (R)-叔丁氧羰基氨基_ [4- (2-叔丁氧基_乙氧基)_苯基]_乙酸的制備向裝備 有機(jī)械攪拌器，溫度傳感器，加料漏斗和氮氣鼓泡器的3升的3頸圓底燒瓶中裝入在1-甲 基-吡咯烷-2-酮(225mL)中的(R) _叔丁氧羰基氨基_ (4-羥基-苯基)-乙酸(67. 9g， 254mmo1) (Salituro， G. M. ;Townsend， C. A. J. Am. Chem. Soc. 1990， 112， 760-770)，然后冷卻 2t:的內(nèi)部反應(yīng)混合物。在10分鐘內(nèi)加入氫氧化鈉水溶液(50重量％ ) (43. 2g，0. 541mol) 同時保持內(nèi)部反應(yīng)混合物溫度低于14°C。將棕色溶液攪拌1小時同時保持內(nèi)部反應(yīng)混合物 溫度低于l(TC。在10分鐘內(nèi)加入含2-(2-碘-乙氧基)-2-甲基-丙烷(87. lg，382mmo1) 的2-甲氧基-2-甲基-丙烷(29mL)同時保持內(nèi)部反應(yīng)混合物溫度在3和5t:之間。在將 綠色反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌16小時后，HPLC分析顯示存在約20%的未反應(yīng)的(R)-叔 丁氧羰基氨基-(4-羥基-苯基)-乙酸。將反應(yīng)混合物冷卻到5t:的內(nèi)部溫度，并且在約2 分鐘內(nèi)加入含2-(2-碘-乙氧基)-2-甲基-丙烷(12. lg，53. lmmol)的2-甲氧基-2-甲 基_丙烷(4mL)，同時將內(nèi)部反應(yīng)混合物溫度保持在5和6t:之間，接著加入氫氧化鈉水溶
15液(50重量％ ) (9g， 113mmol)。使反應(yīng)混合物溫?zé)岵⑶以诃h(huán)境溫度攪拌2天。將反應(yīng)混合 物冷卻到4t:，在1.5小時內(nèi)加入水(1.5L)同時保持內(nèi)部反應(yīng)混合物溫度低于l(TC。加入 2-甲氧基-2-甲基-丙烷(1.5L)，將反應(yīng)混合物在2相之間分配并且分離各層。將黃色水 層冷卻到4t:并且在5分鐘內(nèi)加入6N鹽酸水溶液(450mL，2. 7mo1)以形成白色沉淀物。然 后用乙酸乙酯(2X1L)萃取水性混合物。將合并的乙酸乙酯萃取物用氯化銨水溶液(15重 量％ ) (175mL)，接著用氯化鈉水溶液(20重量％ ) (175mL)洗滌。然后將反應(yīng)混合物在減 壓下濃縮，得到黃色油狀的(R) _叔丁氧羰基氨基_[4- (2-叔丁氧基-乙氧基)-苯基]-乙 酸，其適于不經(jīng)另外純化地進(jìn)一步使用。 步驟l-F:向在氮氣氣氛下、(TC的{00-[4-(2-叔丁氧基-乙氧基)-苯 基]_[ (S) -1- (5-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-乙基氨基甲?；鵠_甲基} _氨基甲 酸叔丁酯(260mg，0. 36mmo1)在6 :lv/v乙腈/對-二噁烷(14mL)中的懸浮液中加入在 對_ 二噁烷中的4. 0M氯化氫(420 ii L， 1. 68mmo1)并且將得到的溶液在室溫攪拌1小時。加 入另外的4. 0M氯化氫(420iiL，1.68mmo1)并且繼續(xù)攪拌30分鐘。在真空中除去溶劑，并且 將殘余物用飽和碳酸氫鈉水溶液堿化。將水性混合物用乙酸乙酯(2X25mL)萃取，鹽水洗 滌，硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮，得到(R)_2-氨基-2-[4-(2-叔丁氧基-乙氧基)-苯 基]-N-[ (S) -1- (5-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-乙基]-乙酰胺，其不經(jīng)進(jìn)一步純 化地用于后續(xù)步驟(210mg，94% )。 步驟l-G:向在氮氣氣氛下、-78°C的雙光氣(29iiL，0.24mmo1)的1 : lv/ v甲苯/四氫呋喃(20mL)溶液中滴加00-2-氨基-2-[4-(2-叔丁氧基-乙氧基)-苯 基]-^[(5)-1-(5-碘-111-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-乙基]-乙酰胺(210mg，0. 34mmo1) 和N，N-二異丙基乙胺(239iiL，1.37mmo1)在四氫呋喃(6mL)中的溶液，同時攪拌。使反應(yīng) 物溫?zé)嶂?2(TC，然后用冰水(10mL)猝滅并且攪拌10分鐘。將混合物倒入乙酸乙酯(30mL) 中并且分離各層。用乙酸乙酯(20mL)萃取水層，并且將有機(jī)萃取物合并，用鹽水洗滌，硫酸 鈉干燥，過濾并且真空濃縮。將粗產(chǎn)物通過用20至60% v/v乙酸乙酯/己烷梯度洗脫的硅 膠色譜純化，得到(R) -5- [4- (2-叔丁氧基-乙氧基)-苯基]-3- [ (S) -1- (5-碘-1H-苯并 咪唑-2-基)-2-苯基-乙基]-咪唑烷-2，4-二酮(140mg，64% )。
HR-MS :C30H31IN404[M+H+]計算值639. 1463，實測639. 1454。 步驟l-H:向在氮氣氣氛下、(TC的00_5-[4-(2-叔丁氧基-乙氧基)-苯 基]-3- [ (S) -1- (5-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-乙基]-咪唑烷-2， 4- 二酮(140mg， 0. 22,1)的1 : lv/v二氯甲烷/乙月青(2mL)溶液中加入碘化鈉(62mg，0. 42mmo1)，接著力口 入氯三甲基硅烷(78ii L，O. 61mmo1)，將得到的溶液攪拌30分鐘。加入另外的碘化鈉(62mg， 0. 42mmo1)，接著加入氯三甲基硅烷(78 y L， 0. 61mmo1)，并且繼續(xù)攪拌另外45分鐘。將反應(yīng) 物倒入乙酸乙酯(30mL)中并且用10%硫代硫酸鈉水溶液洗滌。將有機(jī)萃取物用鹽水洗滌， 硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮。將粗產(chǎn)物通過用60至80% v/v乙酸乙酯/己烷梯度洗脫 的硅膠色譜純化，得到(R) _5- [4- (2-羥基-乙氧基)-苯基]-3- [ (S) -1- (5-碘-1H-苯并 咪唑-2-基)-2-苯基-乙基]-咪唑烷-2，4-二酮(83mg，65% )。
HR-MS :C26H23IN404[M+H+]計算值583. 0837，實測583. 0833。
實施例2 (R) -5- [4- (2-羥基-乙氧基)_苯基]-3- (5-碘_1H_苯并咪唑_2_基甲基)-咪唑烷_2，4-二酮
<formula>formula see original document page 17</formula>
采用與實施例1所述相同的程序制備，不同之處在于步驟2-A中使用叔丁氧基羰 乙酸代替(S) -2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酸，并且在步驟2-B中使用得到的 氨基甲酸叔丁酯代替((S)-l-氟羰基-2-苯基-乙基)_氨基甲酸叔丁酯。
HR-MS :C19H17IN404[M+H+]計算值493. 0367，實測493. 0368。
實施例3 (R)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基]-3-[(S)-l_(5-碘_1H_苯并咪
唑-2-基)-2-甲基-丙基]-咪唑烷-2，4-二酮(R05153383-000)<formula>formula see original document page 17</formula> 采用與實施例1所述相同的方法制備，不同之處在于步驟A和B被以下程序(步 驟3-A)代替，并且將產(chǎn)物用于步驟3-C中。 步驟3-A :向(S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基-丁酸(0. 33g， 1. 5mmo1)， 4-碘-苯-l，2-二胺(0. 35g，l. 5,1)和二異丙基乙胺(0. 8mL，4. 5mmo1)的N，N-二甲基 甲酰胺(6mL)溶液中滴加0-苯并三唑-1-基-N，N，N'N'-四甲基脲鎗六氟磷酸鹽(0. 71g， 1. 75mmo1)的N，N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌12小時。在加入碳 酸鈉水溶液后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取，并且將有機(jī)層用碳酸鈉水溶液和鹽水洗滌， 硫酸鈉干燥，過濾并且濃縮，得到[(S) -1- (2-氨基-4-碘-苯基氨基甲?；?-2-甲基-丙 基]_氨基甲酸叔丁酯和[(S) -1- (2-氨基-5-碘-苯基氨基甲?；?-2-甲基-丙基]-氨 基甲酸叔丁酯的區(qū)域異構(gòu)體混合物(0. 65g， 100% )。
LC-MS :C16H24N303[M+H+]計算值434，實測434。
LC-MS :C22H23IN404 [M+H+]計算值534，實測534。
實施例4 (R)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基]-3-[(lR，2R)-l_(5-碘_1H_苯并咪
唑-2-基)-2_甲氧基-丙基]-咪唑烷_2，4-二酮<formula>formula see original document page 18</formula> 采用與實施例3所述相同的方法制備，不同之處在于步驟4-A中使用(2S， 3R) -2-叔丁氧羰基氨基-3-甲氧基-丁酸代替(S) -2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基_ 丁酸。
LC-MS :C22H23IN405[M+H+]計算值551，實測551.
實施例5 3-[ (S) -1-(5-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-乙基]-咪唑烷_2， 4_ 二酮
與三氟_乙酸的復(fù)合物
OH
O 采用與實施例l所述相同的方法制備，不同之處在于(i)在步驟5-E中使用 叔丁氧基羰基氨基_乙酸代替(R)-叔丁氧羰基氨基_[4-(2-叔丁氧基_乙氧基)-苯 基]-乙酸；(ii)通過制備型反相HPLC色譜純化來自步驟5-G的粗制產(chǎn)物，并且將純化的 3- [ (S) -1- (5-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-乙基]-咪唑烷-2， 4- 二酮分離成相應(yīng) 的三氟乙酸鹽，和(iii)省略步驟H。HR-MS :C18H15IN402 [M+H+]計算值447. 0313，實測447. 0314。
實施例6 (R)-3-[(S)-2_(4-氟-苯基)-1_(5_碘_1H_苯并咪唑-2-基)-乙
基]-5-[4- (2-羥基-乙氧基)-苯基]-咪唑烷-2， 4- 二酮 采用與實施例1所述相同的方法制備，不同之處在于步驟6-A中使用(S)-2-叔丁 氧羰基氨基_3- (4-氟-苯基)-丙酸代替(S) -2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酸。
HR-MS :C26H22FIN404[M+H+]計算值601. 0743，實測601. 0745。
實施例7 (R)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基]-3-[(S)-l_(5-碘_1H_苯并咪
HN-
18唑-2-基)-2-(4_甲氧基-苯基)-乙基]-咪唑烷_2，4-二酮
OH 采用與實施例1所述相同的方法制備，不同之處在于步驟7-A中使用(S)-2-叔丁 氧羰基氨基_3- (4-甲氧基_苯基)_丙酸代替(S) -2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酸。
HR-MS :C27H25IN405[M+H+]計算值613. 0943，實測613. 0941。
實施例8 (R)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基]-3-[(S)-l_(5-碘_1H_苯并咪
唑-2-基)-2-噻吩-2-基-乙基]-咪唑烷-2， 4- 二酮 采用與實施例3所述相同的方法制備，不同之處在于步驟8-A中使用(S)-2-叔丁 氧羰基氨基_3-噻吩-2-基-丙酸代替(S) -2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基_ 丁酸。
LC-MS :C24H21IN404S[M+H+]計算值589，實測589。
實施例9 (R) -3- [ (1S， 2S) -1- (6-碘_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基-丙基]_5_苯基-咪 唑烷_2，4-二酮
米用與實施例l所述相同的方法制備，不同之處在于(i)在步驟9-A中使用(2S，
3S) -2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基-丁酸代替(S) -2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酸；(i i)
在步驟9-E中使用(R)-叔丁氧羰基氨基-苯基-乙酸代替(R)-叔丁氧羰基氨基-[4-(2-叔
丁氧基-乙氧基)-苯基]-乙酸，和(iii)省略步驟H。HR-MS :C25H21IN402 [M+H+]計算值537. 0782，實測537. 0780。 實施例10
19
(R) -3-[ (1S， 2S) -1- (6-碘_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基-丙基]_5_ (4_甲氧
基-苯基)-咪唑烷-2，4_二酮 采用與實施例9所述相同的方法制備，不同之處在于在步驟10-E中使用(R)-叔 丁氧羰基氨基_ (4-甲氧基-苯基)-乙酸代替步驟5中的(R)-叔丁氧羰基氨基_ [4- (2-叔 丁氧基-乙氧基)-苯基]-乙酸。(R)-叔丁氧羰基氨基-(4-甲氧基-苯基)-乙酸如實施 例14，步驟14-K中所述制備，不同之處在于使用碘甲烷代替N， N-雙_[2-(叔-丁基-二 甲基-硅烷基氧基)_乙基]_2-氯-乙酰胺。HR-MS :C26H23IN403[M+H+]計算值567. 0888，實測567. 0887。
實施例11 (R)-5-[4_(2-羥基-乙氧基)-苯基]-3-[(lS，2S)-l_(6-碘_1H_苯并咪
唑-2-基)-2-苯基-丙基]-咪唑烷-2， 4- 二酮 采用與實施例1所述相同的方法制備，不同之處在于在步驟ll-A中使用(2S， 3S) -2-叔丁氧羰基氨基_3-苯基-丁酸代替(S) -2-叔丁氧羰基氨基_3-苯基-丙酸。
HR-MS :C27H25IN404[M+H+]計算值597. 0993，實測597. 0992。
實施例12 (R) -3- [ (IS， 2S) -1- (6-碘_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基-丙基]_5_ [4_ (2_甲
氧基_乙氧基)_苯基]_咪唑烷-2， 4- 二酮
20
采用與實施例1所述相同的方法制備，不同之處在于(i)在步驟12-A中使用 (2S， 3S) -2-叔丁氧羰基氨基_3-苯基-丁酸代替(S) -2-叔丁氧羰基氨基_3-苯基-丙酸； (ii)在步驟12-E中使用(R)-叔丁氧羰基氨基_[4-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-乙酸 代替(R)-叔丁氧羰基氨基-[4-(2-叔丁氧基-乙氧基)-苯基]-乙酸，和(iii)省略步驟 H。 (R)-叔丁氧羰基氨基_ [4- (2-甲氧基-乙氧基)_苯基]_乙酸如實施例14，步驟14-K 中所述制備，不同之處在于使用1-溴_2-甲氧基乙烷代替N， N-雙-[2-(叔-丁基-二甲 基_硅烷基氧基)_乙基]_2-氯-乙酰胺。HR-MS :C28H27IN404[M+H+]計算值611. 1150，實測611. 1152。
實施例13 2- (4- {(R) -1- [ (IS， 2S) + (6_碘_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基-丙基]_2， 5_ 二
氧代_咪唑烷_4-基}-苯氧基)-N， N- 二甲基-乙酰胺<formula>formula see original document page 21</formula> 采用與實施例1所述相同的方法制備，不同之處在于(i)在步驟13-A中使用 (2S， 3S) -2-叔丁氧羰基氨基_3-苯基-丁酸代替(S) -2-叔丁氧羰基氨基_3-苯基-丙酸； (ii)在步驟13-E中使用(R)-叔丁氧羰基氨基_ (4- 二甲基氨基甲酰基甲氧基_苯基)_乙 酸代替(R)-叔丁氧羰基氨基-[4-(2-叔丁氧基-乙氧基)-苯基]-乙酸，和(iii)省略步 驟H。 (R)-叔丁氧羰基氨基_ (4- 二甲基氨基甲?；籽趸鵢苯基)_乙酸采用與實施例1 ， 步驟1-E為制備(R)-叔丁氧羰基氨基_ [4- (2-叔丁氧基-乙氧基)_苯基]_乙酸所述相同 的方法制備，不同之處在于使用2-氯-N， N- 二甲基-乙酰胺代替2- (2-碘-乙氧基)-2-甲 基_丙烷。2-氯-N， N- 二甲基-乙酰胺如實施例14，步驟14-J中所述制備，不同之處在于 使用二甲基胺代替雙_ [2-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基)_乙基]胺。
HR-MS :C29H28IN504[M+H+]計算值638. 1259，實測638. 1260。
實施例14 N， N-雙-(2-羥基-乙基)-2-(4-{(R)-l-[(lS，2S) + (6-碘_1H_苯并咪
唑-2-基)-2-苯基-丙基]-2， 5- 二氧代-咪唑烷-4-基}-苯氧基)-乙酰胺<formula>formula see original document page 22</formula>
采用與實施例1所述相同的方法制備，不同之處在于(i)在步驟14-A中使用 (2S， 3S) -2-叔丁氧羰基氨基_3-苯基-丁酸代替(S) -2-叔丁氧羰基氨基_3-苯基-丙 酸；(ii)在步驟14-E中使用(R)_[4-({雙_[2-(叔_ 丁基_ 二甲基_硅烷基氧基)_乙 基]_氨基甲酰基}_甲氧基)_苯基]_叔丁氧羰基氨基_乙酸(如以下包括的步驟14-1 至14-K所述制備)代替(R)-叔丁氧羰基氨基_[4- (2-叔丁氧基_乙氧基)_苯基]_乙 酸；(iii)如下面在步驟14-L中所述進(jìn)行在步驟14-F中的{[4- ({雙-[2-(叔-丁基-二 甲基-硅烷基氧基)-乙基]-氨基甲?；鶀_甲氧基)-苯基]-[l-(6-碘-lH-苯并咪 唑-2-基)-2-苯基-丙基氨基甲?；鵠_甲基}_氨基甲酸叔丁酯的去保護(hù)；(iv)在進(jìn)行 步驟14-6中的環(huán)化之前，將2-氨基-2-(4-{[雙-(2-羥基-乙基)-氨基甲?；鵠-甲 氧基}-苯基)-^[1-(6-碘-111-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-丙基]-乙酰胺的二醇官 能團(tuán)如下面步驟14-M中所述臨時保護(hù)；(v)在步驟14-G中的環(huán)化之后，采用下面在步驟 14-N中所述的改進(jìn)的后處理程序釋放N， N-雙-(2-羥基-乙基)-2-(4-KR)-l-[(lS， 2S) -1- (6-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-丙基]-2， 5- 二氧代-咪唑烷-4-基}-苯 氧基)-乙酰胺中的二醇官能團(tuán)，和(vi)省略步驟H。 步驟14-I :將二乙醇胺(5. 0g，46. 60mmol)，叔-丁基二甲基甲硅烷基氯(14. 33g， 93.20,1)和咪唑(6. 35g，93. 20,1)溶解在無水N， N-二甲基甲酰胺(60mL)中并且在 環(huán)境溫度攪拌16小時。然后將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(200mL)稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶 液(3X200mL)、飽和鹽水(200mL)洗滌，并且將水層用乙酸乙酯(200mL)反萃取。將合并的 乙酸乙酯萃取物用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮，得到雙_[2-(叔_ 丁基_ 二甲基_硅烷 基氧基)-乙基]-胺(10. 05g，64. 5% )。 步驟14-J :將氯乙酰氯(1. lg，9. 55,1)和碳酸鉀(2. 638g， 19. 09,1)溶解在 無水二氯甲烷(80mL)中并且在冰鹽浴中冷卻。向其中加入在無水二氯甲烷(10mL)中的 雙_[2-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基)_乙基]胺(3. 353g， 9. 545mmo1)，歷時10分鐘。 將反應(yīng)混合物在冰浴中攪拌2小時。將混合物過濾并且用二氯甲烷洗滌，然后用1. 5N的硫 酸氫鉀水溶液(2X100mL)和鹽水(lOOmL)洗滌。將水層用二氯甲烷(2X100mL)反萃取， 硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮，得到N， N-雙-[2-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙 基]-2-氯-乙酰胺(3.8g，87眉)。 步驟14-K:將(R)-叔丁氧羰基氨基-(4-羥基-苯基)-乙酸(1.0g，3. 741mmo1) 溶解在無水N，N-二甲基甲酰胺(lOmL)中并且在冰浴中冷卻。向其中分批加入氫化鈉在礦 物油(344mg，8. 604mmo1)中的60%分散體。然后將混合物溫?zé)嶂羖(TC 0. 5小時，然后在冰 浴中冷卻，并且緩慢加入在無水N， N- 二甲基甲酰胺(5mL)中的N， N-雙-[2-(叔_ 丁基_ 二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-2-氯-乙酰胺(2. 13g，4. 67mmol)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂镰h(huán)境 溫度并且攪拌過夜。反應(yīng)混合物的1H NMR分析顯示75X的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率。將反應(yīng)混合物在 冰浴冷卻并且加入氫化鈉在礦物油(68mg，0. 748mmol)中的60%分散體。幾分鐘后，加入N， N-雙-[2-(叔_ 丁基_ 二甲基_硅烷基氧基)_乙基]_2-氯-乙酰胺(0. 46g， 0. 426mmol)。 將反應(yīng)混合物在1小時內(nèi)溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度。然后將反應(yīng)混合物倒入水(50mL)中并且用二 乙醚(2X50mL)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用水(50mL)和鹽水(50mL)洗滌。將有機(jī)溶液 用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮，得到(R) _[4- ({雙-[2-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧 基)-乙基]-氨基甲?；鶀-甲氧基)-苯基]-叔丁氧羰基氨基_乙酸(2. 2g， 45. 9 % )，其 不經(jīng)進(jìn)一步純化地用于步驟14-E中。 步驟14-L :將{[4- ({雙-[2-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基)_乙基]_氨基 甲?；鶀_甲氧基)-苯基]-[l-(6-碘-lH-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-丙基氨基甲酰 基]-甲基卜氨基甲酸叔丁酯(270mg，0.27mmo1)溶解在無水二氯甲烷(6mL)中并且在 冰浴中冷卻。向攪拌的溶液中加入三氟乙酸(3. 12mL，40. 5mmo1)。將反應(yīng)混合物在Ot: 攪拌1小時。將反應(yīng)混合物真空濃縮，溶解在二氯甲烷(lmL)中，并且用乙醚(5mL)和戊 烷(10mL)沉淀粗制三氟乙酸鹽。將沉淀物研磨然后過濾。將固體置于二氯甲烷(50mL) 中并且加入四氫呋喃以形成澄清溶液。用飽和碳酸氫鈉水溶液(2X50mL)洗滌溶液，分 離各層并且用二氯甲烷(4X50mL)萃取水層。將合并的有機(jī)萃取物用硫酸鈉干燥，過濾 并且真空濃縮。將得到的固體用乙醚(lmL)和戊烷(5mL)混合物研磨，過濾并且干燥，得 到(R) _2-氨基-2- (4- {[雙-(2-羥基-乙基)-氨基甲酰基]-甲氧基}-苯基)-N- [ (1S， 2S)-l-(6-碘-lH-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-丙基]-乙酰胺(170mg，93.8% )。
步驟14-M:將00-2-氨基-2-(4-{[雙-(2-羥基-乙基)-氨基甲?；鵠-甲 氧基}-苯基)-^[(化，25)-1-(6-碘-111-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-丙基]-乙酰胺 (170mg，0. 253mmo1)溶解在無水四氫呋喃(3. 4mL)中并且在冰浴中冷卻。向該溶液中加 入三乙胺(176. 3iiL，1.265mmol)，接著加入三甲基甲硅烷基氯(132 y L， 1. 012mmo1) 。 0.5 小時后，加入另外的2. 5當(dāng)量的三乙胺(88iiL，0.63mmo1)和2當(dāng)量的三甲基甲硅烷基氯 (66ii L，O. 506mmo1)。將反應(yīng)混合物在0。C攪拌另外的1. 5小時，然后將反應(yīng)混合物倒入 乙酸乙酯(40mL)中并且用鹽水(3X25mL)洗滌。然后將合并的水性洗滌物用乙酸乙酯 (2X25mL)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮，得到(R)-2-氨 基-2-(4-([雙-(2-三甲基甲硅烷基氧基-乙基)-氨基甲?；鵠-甲氧基卜苯基)-N-[(lS， 2S)-l-(6-碘-lH-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-丙基]-乙酰胺(190mg，92% )。
步驟14-N:在用雙光氣環(huán)化(R)-2-氨基-2-(4-([雙-(2-三甲基甲硅烷基 氧基-乙基)-氨基甲酰基]-甲氧基卜苯基)-N-[(lS，2S)-l-(6-碘-lH-苯并咪 唑-2-基)-2-苯基-丙基]-乙酰胺完成并且將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和冰/水(如實 施例l，步驟l-G所述)之間分配后，將1N鹽酸水溶液(20mL)加入到乙酸乙酯萃取物中并 且將混合物在環(huán)境溫度攪拌15分鐘。分離各層，并且將水層用乙酸乙酯(2X50mL)萃取 和用鹽水(50mL)洗滌。將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮。將粗產(chǎn)物通 過使用硅膠、用0至10% v/v在二氯甲烷中的甲醇洗脫的梯度快速色譜純化。將含產(chǎn)物的 部分合并和濃縮，得到固體，將其用1 : lv/v的二氯甲烷/乙醚混合物(lmL)研磨。將懸 浮液攪拌1小時，然后過濾并且干燥，得到N， N-雙-(2-羥基-乙基)-2-(4-{(R)-1-[ (1S，2S) -1- (6-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-丙基]-2， 5- 二氧代-咪唑烷-4-基}-苯 氧基)-乙酰胺(30mg，27.7% )。HR-MS :C31H32IN506[M+H+]計算值698. 1470，實測698. 1468。
實施例15 (R) -3- [ (IS， 2S) _1_ (5_碘_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基-丙基]_5_異丙基-咪
唑烷-2，4-二酮
I (R)-2


唑烷-
采用與實施例9所述相同的方法制備，不同之處在于在歩驟15-E中使用 -叔丁氧羰基氨基-3-甲基_ 丁酸代替(R)-叔丁氧羰基氨基-苯基-乙酸。 HR-MS :C22H23IN402 [M+H+]計算值503. 0939，實測503. 0936。 實施例16
(R) -5-環(huán)己基_3- [ (IS， 2S) -1- (5-碘-1H-苯并咪唑_2_基)-2-苯基-丙基]-咪 -2，4-二酮 采用與實施例9所述相同的方法制備，不同之處在于在步驟16-E中使用(R)-叔 丁氧羰基氨基-環(huán)己基-乙酸代替(R)-叔丁氧羰基氨基-苯基-乙酸。
HR-MS :C25H27IN402 [M+H+]計算值543. 1252，實測543. 1252。
實施例17 (R) -5- [4- (2-羥基_乙氧基)_苯基]_3- [1- (5_碘_1H_苯并咪唑_2_基)-環(huán)丙
基]-咪唑烷_2，4-二酮
OH 采用與實施例1所述相同的方法制備，不同之處在于在步驟17-A中使用1-叔丁
24氧羰基氨基_環(huán)丙烷甲酸代替(S)_2-叔丁氧羰基氨基_3-苯基_丙酸。
HR-MS :C21H19IN404[M+H+]計算值519. 0524，實測519. 0522。
實施例18 (R) -3- [ (1S， 2S) _1_ (6_溴_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基-丙基]_5_ [4_ (2_羥
基-乙氧基)-苯基]-咪唑烷_2，4-二酮 采用與實施例11所述相同的方法制備，不同之處在于在步驟18-B中使用
4-溴_苯-1， 2- 二胺代替4-碘-苯-1， 2- 二胺。HR-MS :C27H25BrN404 [M+H+]計算值549. 1132，實測549. 1132。 實施例19 (R) -3- [ (S) -1- (5-環(huán)丙基_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基-乙基]_5_ [4_ (2_羥
基-乙氧基)-苯基]-咪唑烷_2，4-二酮 采用與實施例1所述相同的方法制備，不同之處在于在步驟19-B中使用4-環(huán)丙 基-苯-1， 2- 二胺代替4-碘-苯-1， 2- 二胺。4-環(huán)丙基-苯-1， 2- 二胺如下面在步驟 19-1和19-J中所述制備。 步驟19-1 :將4-溴-2-硝基苯胺(2. 17g， lOmmol)，環(huán)丙基硼酸(1. 12g， 1.30mmol)，磷酸鉀(7. 42g， 35mmol)，乙酸鈀(II) (120mg， 0. 5mmo1)和環(huán)己基膦(280mg， lmmol)在甲苯(40mL)和水(2mL)中合并并且在油浴中于IO(TC加熱16小時。將混合物 冷卻，并且將混合物用二氯甲烷和水研磨。將得到的混合物通過硅藻土墊過濾。將濾液的 有機(jī)層分離并且用無水硫酸鈉干燥。濃縮得到油狀物，將該油狀物在硅膠上進(jìn)行色譜分離 (30% v/v在己烷中的二乙醚)。收集較快移動的化合物并且濃縮溶劑，得到橙色油狀物。 將該油狀物溶解在熱的己烷/乙酸乙酯中，冷卻得到4-環(huán)丙基-2-硝基苯胺，為橙色針狀 物(333mg， 1. 87,1， 19% )。 ^ NMR (300MHz ，CDC13) SH 7. 81 (s， 1H) ， 7. 13 (d， 1H) ， 6. 70 (d， 1H) ， 5. 91 (br s，2H)， 1. 81 (m， 1H) ， 0. 90 (m， 2H) ， 0. 61 (m， 2H)卯m。步驟19-J :將4-環(huán)丙基_2_硝基苯胺(178mg，
25lmmol)溶解在無水甲醇(6mL)中，并且加入鋅粉(200mg，3. lmmol)和氯化銨(800mg， 15mmol)。將混合物在室溫攪拌16小時。將混合物通過硅藻土墊過濾，并且將濾液真空濃 縮。將殘余物在水(30mL)和二氯甲烷(30mL)之間分配。分離有機(jī)層，并且將水層用二氯 甲烷(15mL)萃取兩次。將合并的有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥并且真空濃縮，得到4-環(huán)丙 基-苯-1，2- 二胺，為棕色固體，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化地使用(130mg，88% )。
力NMR (300MHz ，CDC13) SH 6. 61 (d， 1H) ， 6. 46 (m， 1H) ， 3. 10 (br s， 4H) ， 1. 76 (m， 1H)， 0. 84(m，2H) ，0. 58(m，2H)ppm。HR-MS :C29H28N404[M+H+]計算值497. 2184，實測497. 2182。
實施例20 (R) -3- [ (S) -1- (5-乙炔基_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基-乙基]_5_ [4_ (2_羥
基-乙氧基)-苯基]-咪唑烷_2，4-二酮<formula>formula see original document page 26</formula> 采用與實施例1所述相同的方法制備，不同之處在于在進(jìn)行步驟20-C之后，并且 在進(jìn)行步驟20-D之前，進(jìn)行以下2個步驟(步驟20-1和步驟20-J)。 步驟20-I :將在密封管裝置中的[(S)-l-(5-碘-lH-苯并咪唑-2-基)-2-苯 基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(lOOmg，O. 216mmol)，碘化銅(I) (8mg，0. 043mmol)和二氯雙 (三苯基膦)鈀(II) (15mg，0.022mmo1)的N，N-二甲基甲酰胺(7mL)溶液用干燥氮氣脫氣。 將黃色混合物在室溫攪拌另外的5分鐘，然后加入三乙胺(90iiL，0.648mmo1)和三甲基甲 硅烷基乙炔(92 ii L，O. 648mmo1)，并且將得到的溶液再次脫氣。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌5 分鐘后，得到深紅色至黑色溶液。將該混合物在室溫攪拌過夜，然后倒入含水(50 mL)和乙 酸乙酯(50mL)的分液漏斗中。將水層分離并且用乙酸乙酯(20mL)萃取兩次。將合并的有 機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮。使用二氯甲烷(lOmL)將殘余物應(yīng)用于硅膠柱，并 且用在己烷中的10至100% v/v乙酸乙酯梯度洗脫，得到[(S) -2-苯基-1- (6-三甲基甲硅 烷基乙炔基-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基]_氨基甲酸叔丁酯(90mg，96% )。
步驟20-J:向在室溫的[(S)-2-苯基-l-(6-三甲基甲硅烷基乙炔基-lH-苯并咪 唑-2-基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(90mg，0. 208mmo1)的甲醇(10mL)溶液中加入細(xì)粉狀 的無水碳酸鉀(258mg， 1. 87mmo1)。將得到的非均相混合物在室溫攪拌，直至LC/MS顯示反 應(yīng)完全。然后使溶劑蒸發(fā)，將得到的殘余物在l : lv/v水/乙酸乙酯(50mL總體積)中分 配，并且將水層分離和用乙酸乙酯(20mL)萃取兩次。將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾 并且真空濃縮。使用二氯甲烷(lOmL)將帶黃色的殘余物應(yīng)用于硅膠柱，并且用在己烷中的 10至75% v/v乙酸乙酯梯度洗脫，得到[(S)-l-(6-乙炔基-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯 基_乙基]-氨基甲酸叔丁酯(54mg，72% )。 HR-MS :C28H24N404 [M+H+]計算值481. 1871，實測481. 1870。
實施例21 (R)-3-[(lS，2S)-l_(5-乙炔基_1H_苯并咪唑_2_基)_2_苯基_丙
基]-5-[4- (2-羥基-乙氧基)-苯基]-咪唑烷-2， 4- 二酮 采用與實施例20所述相同的方法制備，不同之處在于在步驟21-A中使用(2S， 3S) -2-叔丁氧羰基氨基_3-苯基-丁酸代替(S) -2-叔丁氧羰基氨基_3-苯基-丙酸。
HR-MS :C29H26N404 [M+H+]計算值495. 2027，實測495. 2028。
權(quán)利要求
一種式I化合物其中R1選自鹵素，乙炔基和環(huán)烷基；R2選自氫和CH(R3)(R4)；R3選自低級烷基，低級烷氧基，任選取代的芳基，和任選取代的雜芳基；R4選自氫和低級烷基；R5是氫，或者與R2以及R2和R5連接的碳一起形成低級環(huán)烷基；R6選自氫，低級烷基，低級環(huán)烷基，任選取代的芳基，和任選取代的雜芳基；及其藥用鹽或酯。FPA00001022410300011.tif
2. 根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Rl選自溴，碘，乙炔基，和C3至C6環(huán)烷基； R2選自氫和CH(R3) (R4);R3選自Cl至C3烷基，Cl至C3烷氧基，任選取代的苯基，和任選取代的雜芳基，其中所 述雜芳基含有至少一個硫原子或氮原子； R4選自氫和C1至C3烷基；R5是氫，或者與R2以及R2和R5連接的碳一起形成低級環(huán)烷基；R6選自氫，低級烷基，低級環(huán)烷基，任選取代的芳基，和任選取代的雜芳基；及其藥用鹽或酯。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R6選自2-丙基，環(huán)己基，苯基，4-甲氧基苯基，4-(0((^2)2011)-苯基， 4- (0 (CH2) 20CH3)-苯基，4- (0CH2C (0) N (CH3) 2)-苯基，禾口 4- (0CH2C (0) N ((CH2) 20H) 2) _苯基。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中 Rl選自環(huán)丙基，乙炔基，-I和-Br ; R2選自氫和-CH(R3) (R4);R3選自甲基，甲氧基，苯基，4-氟苯基，4-甲氧基苯基和2-噻吩基； R4選自氫和甲基；R5是氫，或者與R2以及R2和R5連接的碳一起為環(huán)丙基；R6選自氫，2-丙基，環(huán)己基，苯基，4-甲氧基苯基，4-(0((^2)2011)-苯基， 4- (0 (CH2) 20CH3)-苯基，4- (0CH2C (0) N (CH3) 2)-苯基，禾口 4- (0CH2C (0) N ((CH2) 20H) 2) _苯基。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其選自(R) -5- [4- (2-羥基-乙氧基)-苯基]-3- [ (S) -1- (6-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯 基-乙基]-咪唑烷_2，4-二酮；(R) -5- [4- (2-羥基-乙氧基)-苯基]-3- (5-碘-1H-苯并咪唑-2-基甲基)-咪唑烷-2，4-二酮；(R) -5- [4- (2-羥基-乙氧基)-苯基]-3- [ (S) -1- (5-碘-1H-苯并咪唑-2-基)_2_甲 基-丙基]-咪唑烷_2，4-二酮；(R)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基]-3-[(lR，2R)-l-(5-碘-1H-苯并咪 唑-2-基)-2-甲氧基-丙基]-咪唑烷_2，4-二酮；3-[ (S) -1- (5-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-乙基]-咪唑烷-2， 4- 二酮；與三 氟_乙酸的復(fù)合物；(R) -3- [ (S) -2- (4-氟-苯基)-1- (5-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-乙基]-5- [4- (2-羥 基_乙氧基)_苯基]_咪唑烷_2，4- 二酮；(R)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基]-3-[(S)-l-(5-碘-1H-苯并咪 唑-2-基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-咪唑烷_2，4-二酮；(R) -5- [4- (2-羥基-乙氧基)-苯基]-3- [ (S) -1- (5-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-噻 吩-2-基_乙基]-咪唑烷_2，4-二酮；(R)-3-[(化，25)-1-(6-碘-lH-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-丙基]_5_苯基-咪唑烷-2，4-二酮；(R) -3- [ (1S， 2S) -1- (6-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-丙基]-5- (4-甲氧基-苯 基)-咪唑烷_2，4-二酮；(R)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基]-3-[(lS，2S)-l-(6-碘-1H-苯并咪 唑-2-基)-2-苯基-丙基]-咪唑烷-2，4-二酮；(R) -3- [ (1S， 2S) -1- (6-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-丙基]-5- [4- (2-甲氧 基-乙氧基)-苯基]-咪唑烷_2，4-二酮；2- (4- {(R) -1- [ (1S， 2S) -1- (6-碘-1H-苯并咪唑_2_基)-2-苯基-丙基]-2， 5- 二氧 代_咪唑烷_4-基}-苯氧基)-N， N- 二甲基-乙酰胺；N， N-雙-(2-羥基-乙基)-2-(4-{(R)-l-[(lS，2S)-l-(6-碘-1H-苯并咪 唑-2-基)-2-苯基-丙基]-2， 5- 二氧代-咪唑烷-4-基}-苯氧基)-乙酰胺；(R) -3- [ (IS， 2S) -1- (5-碘-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-丙基]-5-異丙基-咪唑烷-2，4-二酮；(R) -5-環(huán)己基-3-[ (IS， 2S) -1- (5-碘-1H-苯并咪唑_2_基)-2-苯基-丙基]-咪唑烷-2，4-二酮；(尺)-5-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基]-3-[l-(5-碘-lH-苯并咪唑-2-基)-環(huán)丙 基]-咪唑烷_2，4-二酮；(R) -3- [ (1S， 2S) -1- (6-溴-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-丙基]-5- [4- (2-羥基-乙 氧基)-苯基]-咪唑烷-2，4- 二酮；(R) -3- [ (S) -1- (5-環(huán)丙基-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-乙基]-5- [4- (2-羥基-乙 氧基)-苯基]-咪唑烷-2，4- 二酮；(R) -3- [ (S) -1- (5-乙炔基-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-乙基]-5- [4- (2-羥基-乙 氧基)-苯基]-咪唑烷-2， 4- 二酮；禾口(R) -3- [ (1S， 2S) -1- (5-乙炔基-1H-苯并咪唑-2-基)-2-苯基-丙基]-5- [4- (2-羥基-乙氧基)-苯基]-咪唑烷_2，4-二酮。
6. —種用于制備根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物的方法，所述方法包括將式IO化合物在氯甲酸三氯甲基酯存在下反應(yīng)，得到相應(yīng)的式(I)化合物，其中所有取代基具有權(quán) 利要求1中給出的含義。
7. —種藥物組合物，所述藥物組合物包含至少一種根據(jù)權(quán)利要求1至5中任何一項的 化合物以及藥用賦形劑。
8. 作為藥物的根據(jù)權(quán)利要求1至5中任何一項的化合物。
9. 作為藥物的根據(jù)權(quán)利要求1至5中任何一項的化合物，所述藥物用于治療癌癥，特別 是實體瘤，更特別是乳腺、結(jié)腸、肺和前列腺腫瘤。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1至5中任何一項的化合物在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于治療 癌癥，特別是實體瘤，更特別是乳腺、結(jié)腸、肺和前列腺腫瘤。
11. 基本上如上文所述的新化合物、工藝、方法和應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的化合物或其藥用鹽，其中R1，R2，R3，R4，R5和R6在本申請中描述。這些化合物抑制酶MEK 1和MEK 2，即作為MAP激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的組分的蛋白激酶。因為這種化合物具有抗-過增殖細(xì)胞活性，因此可用于治療細(xì)胞增殖疾病，如癌癥。
文檔編號C07D403/06GK101778839SQ200880102760
公開日2010年7月14日 申請日期2008年8月6日 優(yōu)先權(quán)日2007年8月16日
發(fā)明者奧馬爾·約斯·莫拉雷斯, 尼古拉斯·約翰·西爾韋斯特·于比, 約翰·安東尼·莫利泰爾尼, 諾爾曼·孔, 陳少清 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司