專利名稱：一種馬來酰亞胺化磷脂酰乙醇胺的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化學(xué)合成領(lǐng)域，具體涉及一種馬來酰亞胺化磷脂酰乙醇胺的制備方法。
背景技術(shù)：
脂質(zhì)體是20世紀(jì)60年代由英國(guó)學(xué)者Bangham將磷脂分散在水中發(fā)現(xiàn)的。70年代 由Rymen等人開始將脂質(zhì)體用于藥物的載體。到了 80年代中期一些從事脂質(zhì)體開發(fā)的公 司相繼成立，開發(fā)了抗腫瘤藥、疫苗等新脂質(zhì)體。隨著高分子化學(xué)和分子生物學(xué)的發(fā)展與脂 質(zhì)體研究相結(jié)合，研制開發(fā)了具有長(zhǎng)循環(huán)和靶向性的功能性脂質(zhì)體。 磷脂是構(gòu)成脂質(zhì)體雙層膜的主要成分，包括天然磷脂和合成磷脂。馬來酰亞胺 化磷脂酰乙醇胺是一種合成磷脂，此功能性磷脂常用于制備靶向脂質(zhì)體，通過其含有的馬 來酰亞胺基團(tuán)與含有巰基的抗體反應(yīng)，而將抗體引入到脂質(zhì)體中，從而制備靶向脂質(zhì)體 (British journal of Cancer(2003)89，1545-1551)。 馬來酰亞胺化磷脂酰乙醇胺的合成方法已有文獻(xiàn)報(bào)道Martin等(Thejournal of Biologicai Chemistry. 1982. 257. 286-288)禾口Kitagawa等(Chemical & Pharmaceutical Bulletin. 1981. 29. 1130-1135)用間氨基苯甲酸在四氫呋喃溶媒中與馬來酸酐在常溫反 應(yīng)，通過脫水環(huán)合，再與N-羥基琥珀酰亞胺在脫水劑N， N- 二環(huán)己基碳二亞胺存在下，反應(yīng) 生成一種交聯(lián)劑，再利用此交聯(lián)劑與磷脂酰乙醇胺反應(yīng)生成馬來酰亞胺化磷脂酰乙醇胺。 該方法使用N，N-二環(huán)己基碳二亞胺所產(chǎn)生的副產(chǎn)物分離純化困難，最終產(chǎn)率只有約30%， 而且交聯(lián)劑與磷脂酰乙醇胺反應(yīng)生成馬來酰亞胺化磷脂酰乙醇胺的過程異常耗時(shí)費(fèi)力。
因此，本領(lǐng)域迫切需要提供一種如式I所示的馬來酰亞胺化磷脂酰乙醇胺的制備
方法，所述的方法是最終產(chǎn)物得率高，而且用時(shí)少。
RCOO——J RCOO— 其中R代表Cn、 C13、 C15、 C17的脂肪烴。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種式I化合物的新的制備方法。 本發(fā)明中，提供了一種如式I所示的化合物的制備方法，所述的方法包括步驟
(1)將問氨基苯甲酸和馬來酸酐混合，反應(yīng)得到如式II所示的化合物；
3
(2)將式II化合物和醋酸酐混合，反應(yīng)得到如式III所示的化合物； (3)將式III化合物、N-羥基琥珀酰亞胺、和1-乙基_3-(3- 二甲氨基丙基)_碳
酰二亞胺鹽酸鹽混合，反應(yīng)得到如式IV所示的化合物；禾口 (4)將式IV化合物和磷脂酰乙醇胺在混合溶媒中反應(yīng)得到如式I所示的化合物；
所述的混合溶媒由氯仿、甲醇和水組成，它們的體積比為9 : i : o. 1-9 : i : o.5。 在另一優(yōu)選例中，步驟(1)在常溫下、四氫呋喃溶劑中進(jìn)行反應(yīng)。 在另一優(yōu)選例中，間氨基苯甲酸和馬來酸酐的摩爾比1 : 0.75-1 : 2。 在另一優(yōu)選例中，步驟(2)在無水醋酸鈉存在下反應(yīng)，并且式II化合物、無水醋酸
鈉和醋酸酐的摩爾比為i : i : 15-1 : 3 : 50。 在另一優(yōu)選例中，步驟(3)中將有機(jī)堿作為催化劑進(jìn)行反應(yīng)；所說的有機(jī)堿選自 N-甲基嗎啉、三乙胺、吡啶、或二甲氨基吡啶。 在另一優(yōu)選例中，式III化合物、N-羥基琥珀酰亞胺、！-乙基-3-(3-二甲氨基丙
基)-碳酰二亞胺鹽酸鹽、和有機(jī)堿的摩爾比為i :i:i:3-i:3:3:9。 在另一優(yōu)選例中，步驟(3)在在四氫呋喃溶劑中進(jìn)行反應(yīng)。
在另一優(yōu)選例中，步驟(4)中混合溶媒中氯仿、甲醇和水的體積比為9 : i : o. i。
在另一優(yōu)選例中，步驟(4)中將有機(jī)堿作為催化劑進(jìn)行反應(yīng)；所說的有機(jī)堿選自
N-甲基嗎啉、三乙胺、吡啶、或二甲氨基吡啶。 在另一優(yōu)選例中，步驟(4)在通氮?dú)鈼l件下進(jìn)行反應(yīng)。 據(jù)此，本發(fā)明提供了一種如式I所示的馬來酰亞胺化磷脂酰乙醇胺的制備方法， 所述的方法是最終產(chǎn)物得率高，而且用時(shí)少。


圖1顯示了本發(fā)明提供的式I化合物的制備方法流程圖。
具體實(shí)施例方式
發(fā)明人經(jīng)過研究，發(fā)現(xiàn)了一種新的式I化合物的制備方法，所述的方法包括步驟 如圖l所示 (1)將間氨基苯甲酸和馬來酸酐混合，反應(yīng)得到如式II所示的化合物； (2)將式II化合物和醋酸酐混合，反應(yīng)得到如式III所示的化合物； (3)將式III化合物、N-羥基琥珀酰亞胺、和1-乙基_3-(3- 二甲氨基丙基)_碳
酰二亞胺鹽酸鹽混合，反應(yīng)得到如式IV所示的化合物；禾口 (4)將式IV化合物和磷脂酰乙醇胺在混合溶媒中反應(yīng)得到如式I所示的化合物；
所述的混合溶媒由氯仿、甲醇和水組成，它們的體積比為9 : i : o. l-9 : i : 0.5。 本發(fā)明步驟(3)中使用1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳酰二亞胺鹽酸鹽作為
脫水劑，可以得到較純的式iv化合物，從而無需特別的純化過程便可將式IV化合物和磷脂
酰乙醇胺反應(yīng)得到產(chǎn)率較高的式I化合物，降低了反應(yīng)成本；同時(shí)，本發(fā)明在步驟(4)中所 使用的混合溶媒可以使該步反應(yīng)的速度提高約1倍。
本文中所涉及的部分化合物如下表所示
4<image>image see original document page 5</image>
RCOO RCOO<formula>formula see original document page 6</formula>間氨基苯甲酸
馬來酸酐
l-乙基-3-(3-二甲氨 基丙基)-碳酰二亞 胺鹽酸鹽 (EDC.HC1)
磷脂酰乙醇胺 表中，r代表Cu、Cu、c『c^的脂肪烴，優(yōu)選<:15。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，提供了下述方法制備得到式I化合物
(1)、在四氫呋喃溶劑中，間氨基苯甲酸與馬來酸酐在常溫反應(yīng)，開環(huán)酯化，生成
(II) 的產(chǎn)物; (2)、在無水醋酸鈉存在下(II)與醋酸酐發(fā)生反應(yīng)，生成間馬來酰亞胺苯甲酸
(III) ; (3)、在四氫呋喃溶劑中，(III)跟N-羥基琥珀酰亞胺在脫水劑和有機(jī)堿存在下反 應(yīng)，得到結(jié)構(gòu)式為(IV)的化合物； (4)、在有機(jī)混合溶媒中，(IV)與磷脂酰乙醇胺在有機(jī)堿存在的條件，通氮?dú)獗Ｗo(hù)， 得到式(I)的化合物。 在合成(II)時(shí)，間氨基苯甲酸和馬來酸酐的摩爾比為1 : 0.75-1 : 2;優(yōu)選
i : 1.5。 在合成(in)時(shí)，(n)、無水醋酸鈉和醋酸酐的摩爾比為i : i : : 3 : 50 ; 優(yōu)選i : i. 5 : 25。 在合成(IV)時(shí)，所說的脫水劑選自1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳酰二亞胺 鹽酸鹽、N， N- 二異丙基碳二亞胺、或N， N- 二環(huán)己基碳二亞胺，優(yōu)選1-乙基-3-(3- 二甲氨 基丙基)-碳酰二亞胺鹽酸鹽；所說的有機(jī)堿選自N-甲基嗎啉、三乙胺、吡啶、或二甲氨基吡 啶，優(yōu)選N-甲基嗎啉。 在合成(IV)時(shí)，以1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳酰二亞胺鹽酸鹽為脫水劑， N-甲基嗎啉為有機(jī)堿，(III)與N-羥基琥珀酰亞胺、l-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳酰二
亞胺鹽酸鹽和N-甲基嗎啉的摩爾比為i :i:i:3-i:3:3: 9，優(yōu)選i :2:2:6。
在合成(i)時(shí)，所說的有機(jī)混合溶媒中各種溶劑的體積比為氯仿甲醇水= 9 : i : o. l-9 : i : o. 5 ;優(yōu)選9 : i : o. i。 本發(fā)明提到的上述特征，或?qū)嵤├岬降奶卣骺梢匀我饨M合。本案說明書所揭示 的所有特征可與任何組合物形式并用，說明書中所揭示的各個(gè)特征，可以任何可提供相同、 均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說明，所揭示的特征僅為均等或相似特 征的一般性例子。 本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)在于 1、本發(fā)明提供的制備方法得到式I化合物的產(chǎn)率高；
2、本發(fā)明提供的制備方法省時(shí)；
3 、本發(fā)明提供的制備方法降低了成本。 下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條 件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則所有的百分?jǐn)?shù)、比率、比例、或份數(shù)按
重量計(jì)。 本發(fā)明中的重量體積百分比中的單位是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，例如是指在 100毫升的溶液中溶質(zhì)的重量。 除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意 義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文 中所述的較佳實(shí)施方法與材料僅作示范之用。
實(shí)施例1
制備式I化合物A 第一步在500ml三頸瓶中加入300ml四氫呋喃、間氨基苯甲酸(20g，0. 146mol) 和馬來酸酐(15. 7g，0. 166mol)，常溫反應(yīng)lh，用布氏漏斗抽濾得到淡黃色固體，經(jīng)干燥得 到28. 76g式II化合物，收率87. 40%， m. p. :206-208°C。 第二步在250ml三頸瓶中加入150ml醋酸酐、第一步中得到的式II化合物(15g， 0. 0638mol)和無水醋酸鈉(7. 5g，0. 091mol) ， 90。C油浴高速攪拌3h，溶液變?yōu)樯铧S色，將反 應(yīng)液倒入含有300ml水的冰水中，攪拌3h，產(chǎn)生黃色沉淀，過濾得到式III化合物的粗品，用 無水乙醇重結(jié)晶得到式III化合物11. 35g，收率81. 23%， m. p. :226_228°C。
第三步在500ml三頸瓶中加入400ml四氫呋喃、第二步中得到的式III化合物 (4g， 18. 34mmol) 、N_羥基琥珀酰亞胺(4. 2g， 36. 5mmol) 、 1-乙基-3- (3- 二甲氨基丙基)_碳 酰二亞胺鹽酸鹽(7. 0g，36. 52mmol)、 N-甲基嗎啉(11. lg，O. 18mol)，常溫反應(yīng)3h，先用活 性炭脫色，再用無水乙醇進(jìn)行重結(jié)晶3次，得到白色針狀結(jié)晶(式IV化合物)2. 97g，收率 53. 33%， m. p. :180-182°C。第四步在50ml三頸瓶中加入50ml (氯仿甲醇水=9 : 1 : 0. l(體積
比))、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺(138mg，200ummo1)、第三步中得到的式IV化合物(78. 5mg，
250ummo1)和三乙胺(30mg， 300ummo1)，通氮?dú)夥磻?yīng)8h，再向反應(yīng)液中加入35ml甲醇和
30ml水，用分液漏斗分離出有機(jī)層，重復(fù)操作3次，蒸干有機(jī)層，用硅膠柱層析分離得到固
體式I化合物A(R = 15)125mg，收率70. 3%。 核磁共振譜 1HNMR譜(400M， DMS0_d6) S (ppm) :10. 44(s， 1H) ，9. 2(brs， 1H) ，8. 06(s， 1H) ，7. 8(d， 1H) ，7. 64(d， 1H)， 7. 35 (t， 1H) ， 6. 51 (d， 1H) ， 6. 39 (d， 1H) ， 5. 10—5. 09 (m. 1H) ， 4. 31—4. 29 (m， 1H) ， 4. 12—4. 09 (m， 1H) ， 3. 85-3. 83 (m， 4H) ， 3. 42-3. 41 (m， 2H) ， 2. 34-2. 21 (m， 4H) ， 1. 485 (s， 4H) ， 1. 23 (s， 48H)， 0. 86-0. 83(m，6H)質(zhì)譜TOF MS ES+(891， M+l) (922， M+CH30H) 實(shí)施例2 制備式I化合物B 第一步在500ml三頸瓶中加入300ml四氫呋喃、間氨基苯甲酸(20g，0. 146mol) 和馬來酸酐(21.4g，0.218mol)，常溫反應(yīng)lh，用布氏漏斗抽濾得到淡黃色固體，經(jīng)干燥得 到31. 22g式II化合物，收率91. 40%， m. p. :206-208。C。 第二步在250ml三頸瓶中加入100ml醋酸酐、第一步得到的式II化合物(15g， 0. 0638mol)和無水醋酸鈉(5. 21g，0. 064mol) ，90°C油浴高速攪拌3h，溶液變?yōu)樯铧S色，將 反應(yīng)液倒入含有300ml水的冰水中，攪拌3h，產(chǎn)生黃色沉淀，過濾得到式III化合物的粗品， 用無水乙醇重結(jié)晶得到式III化合物10. 38g，收率75. 13%， m. p. :226_228°C 。
第三步在500ml三頸瓶中加入400ml四氫呋喃、第二步得到的式III化合物(4g， 18. 34,1) 、 N-羥基琥珀酰亞胺(2. lg， 18. 2,1) 、 1-乙基-3- (3- 二甲氨基丙基)_碳酰 二亞胺鹽酸鹽(3. 5g，18. 3,1) 、N-甲基嗎啉(9. 21g，0. 0912mol)，常溫反應(yīng)3h，先用活 性炭脫色，再用無水乙醇進(jìn)行重結(jié)晶3次，得到白色針狀結(jié)晶(式IV化合物)1. 98g，收率 34. 35%， m. p. :180—182°C
第四步在50ml三頸瓶中加入50ml (氯仿甲醇水=9 : 1 : 0.5(體積比))、
磷脂酰乙醇胺(138mg，200ummol)、第三步得到的式IV化合物(78. 5mg， 250ummo1)和三乙
胺(30mg，300ummol)，通氮?dú)夥磻?yīng)8h，再向反應(yīng)液中加入35ml甲醇和30ml水，用分液漏斗
分離出有機(jī)層，重復(fù)操作3次，蒸干有機(jī)層，用硅膠柱層析分離得到固體式I化合物B(R =
15) 112mg，收率63. 0%。 實(shí)施例3 制備式I化合物C 第一步在500ml三頸瓶中加入300ml四氫呋喃、間氨基苯甲酸(20g，0. 146mol) 和馬來酸酐(29. 42g，0. 3mol)，常溫反應(yīng)lh，用布氏漏斗抽濾得到淡黃色固體，經(jīng)干燥得到 28. 34g式11化合物，收率82. 58 % ， m. p. : 206-208 。C 。 第二步在250ml三頸瓶中加入150ml醋酸酐、第一步中得到的式II化合物(15g，
0. 0638mol)和無水醋酸鈉(3. 28g，0. 04mol) ， 9(TC油浴高速攪拌3h，溶液變?yōu)樯铧S色，將反
應(yīng)液倒入含有300ml水的冰水中，攪拌3h，產(chǎn)生黃色沉淀，過濾得到式III化合物的粗品，用
無水乙醇重結(jié)晶得到式III化合物7. 8g，收率56. 33%， m. p. :226-228。C。 第三步在500ml三頸瓶中加入400ml四氫呋喃、第二步中得到的式III化合物
(4g， 18. 34mmo1) 、 N-羥基琥珀酰亞胺(4. 2g， 36. 5mmo1) 、 N， N- 二環(huán)己基碳二亞胺(7. 54g，
36. 52mmo1)，常溫反應(yīng)3h，反應(yīng)產(chǎn)物有副產(chǎn)物出現(xiàn)，通過重結(jié)晶無法得到純度高的IV。 實(shí)施例4 制備式I化合物D 第一步在500ml三頸瓶中加入300ml四氫呋喃、間氨基苯甲酸(20g，0. 146mol) 和馬來酸酐(8. 82g，0. 09mol)，常溫反應(yīng)lh，用布氏漏斗抽濾得到淡黃色固體，經(jīng)干燥得到 19. 04g式II化合物，收率55. 48%， m. p. :206-208°C。 第二步在250ml三頸瓶中加入50ml醋酸酐、第一步中得到的式II化合物(15g， 0. 0638mol)和無水醋酸鈉(20. 5g，0. 25mol) ， 90。C油浴高速攪拌3h，溶液變?yōu)樯铧S色，將反 應(yīng)液倒入含有300ml水的冰水中，攪拌3h，產(chǎn)生黃色沉淀，過濾得到式III化合物的粗品，用 無水乙醇重結(jié)晶得到式III化合物9. 53g，收率68. 82%， m. p. :226-228°C 。
第三步在500ml三頸瓶中加入400ml四氫呋喃、第二步中得到的式III化合物 (4g， 18. 34mmol) 、N_羥基琥珀酰亞胺(1. 5g， 13. Ommol) 、 1-乙基-3- (3- 二甲氨基丙基)_碳 酰二亞胺鹽酸鹽(5. 75g，30. Ommol) 、 N-甲基嗎啉(9. lg，O. 09mol)，常溫反應(yīng)3h，先用活 性炭脫色，再用無水乙醇進(jìn)行重結(jié)晶3次，得到白色針狀結(jié)晶(式IV化合物)1. 66g，收率 28. 82%， m. p. :180-182°C。 第四步在50ml三頸瓶中加入50ml (氯仿甲醇=9 : 1 (體積比))、磷脂酰乙 醇胺(138mg，200ummol)、第三步得到的式IV化合物(62. 8mg， 200ummo1)和三乙胺(30mg， 300ummol)，通氮?dú)夥磻?yīng)16h，仍有部分原料磷脂酰乙醇胺懸浮與溶液中，濾除固體，再向反 應(yīng)液中加入35ml甲醇和30ml水，用分液漏斗分離出有機(jī)層，重復(fù)操作3次，蒸干有機(jī)層，用 硅膠柱層析分離得到固體式I化合物B(R = 15)86mg，收率48. 36%。
以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非用以限定本發(fā)明的實(shí)質(zhì)技術(shù)內(nèi)容范 圍，本發(fā)明的實(shí)質(zhì)技術(shù)內(nèi)容是廣義地定義于申請(qǐng)的權(quán)利要求范圍中，任何他人完成的技術(shù) 實(shí)體或方法，若是與申請(qǐng)的權(quán)利要求范圍所定義的完全相同，也或是一種等效的變更，均將被視為涵蓋于該權(quán)利要求范圍之中,
權(quán)利要求
一種如式I所示的化合物的制備方法，其特征在于，所述的方法包括步驟(1)將間氨基苯甲酸和馬來酸酐混合，反應(yīng)得到如式II所示的化合物；(2)將式II化合物和醋酸酐混合，反應(yīng)得到如式III所示的化合物；(3)將式III化合物、N-羥基琥珀酰亞胺、和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳酰二亞胺鹽酸鹽混合，反應(yīng)得到如式IV所示的化合物；和(4)將式IV化合物和磷脂酰乙醇胺在混合溶媒中反應(yīng)得到如式I所示的化合物；所述的混合溶媒由氯仿、甲醇和水組成，它們的體積比為9∶1∶0.1-9∶1∶0.5。
2. 如權(quán)利要求l所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)在常溫下、四氫呋喃溶劑中進(jìn)行反應(yīng)。
3. 如權(quán)利要求l所述的制備方法，其特征在于，間氨基苯甲酸和馬來酸酐的摩爾比i : o.75-1 : 2。
4. 如權(quán)利要求l所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)在無水醋酸鈉存在下反應(yīng)，并且式ii化合物、無水醋酸鈉和醋酸酐的摩爾比為i : i : 15-1 : 3 : 50。
5. 如權(quán)利要求l所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中將有機(jī)堿作為催化劑進(jìn)行反 應(yīng)；所說的有機(jī)堿選自N-甲基嗎啉、三乙胺、妣啶、或二甲氨基吡啶。
6. 如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，式III化合物、N-羥基琥珀酰 亞胺、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳酰二亞胺鹽酸鹽、和有機(jī)堿的摩爾比為i : i : i : 3-i : 3 : 3 : 9。
7. 如權(quán)利要求l所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)在在四氫呋喃溶劑中進(jìn)行反應(yīng)。
8. 如權(quán)利要求l所述的制備方法，其特征在于，步驟(4)中混合溶媒中氯仿、甲醇和水的體積比為9 : i : o. i。
9. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(4)中將有機(jī)堿作為催化劑進(jìn)行反 應(yīng)；所說的有機(jī)堿選自N-甲基嗎啉、三乙胺、吡啶、或二甲氨基吡啶。
10. 如權(quán)利要求l所述的制備方法，其特征在于，步驟(4)在通氮?dú)鈼l件下進(jìn)行反應(yīng)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種如式I所示的化合物的制備方法，所述的方法包括步驟(1)將間氨基苯甲酸和馬來酸酐混合，反應(yīng)得到如式II所示的化合物；(2)將式II化合物和醋酸酐混合，反應(yīng)得到如式III所示的化合物；(3)將式III化合物、N-羥基琥珀酰亞胺、和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳酰二亞胺鹽酸鹽混合，反應(yīng)得到如式IV所示的化合物；和(4)將式IV化合物和磷脂酰乙醇胺在混合溶媒中反應(yīng)得到如式I所示的化合物；所述的混合溶媒由氯仿、甲醇和水組成，它們的體積比為9∶1∶0.1-9∶1∶0.5。其中R代表C11、C13、C15、C17的脂肪烴。
文檔編號(hào)C07F9/572GK101768188SQ20081020501
公開日2010年7月7日 申請(qǐng)日期2008年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月30日
發(fā)明者蔡正艷, 鄧家欣, 陶濤 申請(qǐng)人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院