專利名稱：：用針對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的抗體和針對(duì)人表皮生長(zhǎng)因子2型受體的抗體進(jìn)行腫瘤治療的制作方法用針對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的抗體和針對(duì)人表皮生長(zhǎng)因子2型受體的抗體進(jìn)行腫瘤治療發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及使用抗HER2和抗VEGF抗體的組合治療。具體地，本發(fā)明涉及這樣的抗體用來治療在使用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患者的乳腺癌疾病的應(yīng)用。發(fā)明背景血管發(fā)生參與各種病癥的發(fā)病機(jī)理，其包括實(shí)體瘤、眼內(nèi)新血管綜合征如增殖性視網(wǎng)膜病或年齡相關(guān)的黃斑變性(AMD)，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)液，和銀屑病(Folkman,J.,等，J.Biol.Chem.(生物的化學(xué)雜志)267(1992)10931-10934;Klagsbrun,M.,等，Annu.Rev.Physiol.(物理學(xué)年度綜述)53(1991)217-239;禾口Garner,A，Vasculardiseases(血管疾病),在Pathobiologyofoculardisease,Adynamicapproach(目艮禾斗疾病，艮卩動(dòng)力學(xué)途，5的病理學(xué))，(eds.)Gamer和A,Klintworth，GK，第二版MarcelDekker，紐約，(1994),第1625-1710頁)。在實(shí)體瘤的情形中，與正常細(xì)胞相比較，新血管生成允許所述腫瘤細(xì)胞獲得生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)和增殖自主性。因此，在乳腺癌以及在一些其它腫瘤中，已經(jīng)觀察到在腫瘤切片中的微脈管密度與患者存活之間的相關(guān)性(Weidner,N.，等，N.Engl.J.Med.(新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志)324(1991)1-6;Horak,E,R.,等，Lancet340(1992)1120-1124;和Macchiarini,P.,等，Lancet340(1992)145-146)。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)參與與腫瘤和眼內(nèi)病癥相關(guān)的正常和異常的血管發(fā)生與新血管生成的調(diào)控(Ferrara，N.,等，Endocr.Rev.(內(nèi)分泌綜述)18(1997)4-25;Berkman，R.A"等，J.Clin.Invest,(臨床研究雜志)91(1993)153-159;Brown,L.F.,等，HumanPathol.(人類病理學(xué))26(1995)86-91;B畫n，L.F"等，CancerRes.(癌癥研究)53(1993)4727-4735;Mattem，J.，等，Brit.J.Cancer(英國(guó)癌癥學(xué)雜志)73(1996)931-934;和Dvorak,H.F.,等，Am.J.Pathol.(美國(guó)病理學(xué)雜志)146(1995)1029-1039)?？筕EGF中和抗體抑制各種人腫瘤細(xì)胞系在小鼠中的生長(zhǎng)(Kim,K.J.,等,Nature(自然)362(1993)841-844;Warren,R.S"等，J.Clin.Invest.(臨床研究雜志)95(1995)1789-1797;Borgstrom,P"等，CancerRes.(癌癥石開究)56(1996)4032-4039;和Melnyk，O.，等，CancerRes.(癌癥研究)56(1996)921-924)。WO94/10202，WO98/45332，WO2005/00900和WO00/35956提及針對(duì)VEGF的抗體。人源化的單克隆抗體貝伐單抗(以商標(biāo)Avastin⑧出售)是用于腫瘤治療的抗VEGF抗體，并且是批準(zhǔn)用于癌癥治療的唯一一種抗-血管發(fā)生劑(WO98/45331)。HER2是人表皮生長(zhǎng)因子受體家族的一員，并且在其細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域抑制蛋白激酶活性。HER2在腫瘤細(xì)胞中過量表達(dá)，并且與極低的預(yù)后和存活有關(guān)。因此，HER2是乳腺癌治療的有價(jià)值的靶標(biāo)。針對(duì)HER2的抗體從下列各項(xiàng)中己知Takai,N.,等，Cancer(癌癥)104(2005)2701-2708;Yeon,C.H.,等，Invest.NewDrugs(新藥物研究)23(2005)391-409;Wong,W.M.,等，CancerPract.(其中實(shí)踐)7(1999)48-50;Albanell,J"等，DrugsToday(今日藥物)(Bare).35(1999)931-46。曲妥單抗(以商標(biāo)Herceptin⑧出售)是用于治療HER2過表達(dá)的/HER2基因擴(kuò)增的轉(zhuǎn)移性乳腺癌的重組人源化抗HER2單克隆抗體。預(yù)臨床研究表明該抗體具有體內(nèi)和體外抗腫瘤活性。此外，在小鼠模型中，在各種抗腫瘤藥劑的組合中觀察到曲妥單抗抗腫瘤活性的附加的或協(xié)同增強(qiáng)。在臨床研究中，在HER2過表達(dá)轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者中觀察到存活的延長(zhǎng)。依據(jù)WO98/45331，抗VEGF抗體在預(yù)防或治療疾病中的效用可以通過連續(xù)或與對(duì)那些目的有效的另一種藥劑如能夠與HER2受體結(jié)合的抗體組合施用該抗體而提高。WO2005/012531描述了在結(jié)腸直腸癌、轉(zhuǎn)移性乳腺癌和腎癌的治療中可以與抗VEGF抗體(例如，Avastin⑧)和/或抗ErbB抗體(例如，Herceptin⑧)組合的抗體。依據(jù)WO2005/063816,在轉(zhuǎn)移性乳腺癌的治療中，抗VEGF抗體可以與抗ErbB抗體組合。WO2005/00090和WO2003/077841還公開了抗VEGF抗體與抗ErbB2抗體的組合用于腫瘤治療。臨床腫瘤學(xué)家一致認(rèn)為癌癥治療的失敗不必是由原發(fā)腫瘤的生長(zhǎng)引起，而是由向不同器官的轉(zhuǎn)移性擴(kuò)散引起，所述原發(fā)腫瘤通常用手術(shù)進(jìn)行處理。不同細(xì)胞毒性藥物對(duì)原發(fā)腫瘤的消退本身不總是抗轉(zhuǎn)移活性的指征。相反，在對(duì)一些抗癌藥物的反應(yīng)中，觀察到增強(qiáng)的轉(zhuǎn)移(Geldof,A.A.,等,AnticancerRes.(抗癌研究)8(1988)1335-1339;Murphy，S.B.，J.Clin.Oncol.(臨床腫瘤學(xué)雜志)11(1993)199-201;和DeLarco，J.E.，等，CancerRes.(癌癥研究)61(2001)2857-2861)。清楚地，存在發(fā)展不但靶向原發(fā)腫瘤而且抑制轉(zhuǎn)移的療法的需要。發(fā)明概述本發(fā)明包括抗HER2抗體和抗VEGF抗體用于制備用來治療在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患者中的乳腺癌疾病的藥物中的應(yīng)用，所述應(yīng)用包括給所述患者施用治療有效量的抗HER2抗體和抗VEGF抗體。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明包括曲妥單抗和貝伐單抗用于制備用來治療在用抗VEGF抗體如貝伐單抗的在先治療中失敗的患者中的乳腺癌疾病的藥物中的應(yīng)用，所述乳腺癌疾病特征在于HER2受體蛋白的過量表達(dá)，該應(yīng)用包括給所述患者施用治療有效量的曲妥單抗和貝伐單抗。本發(fā)明還包括治療在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患者中的乳腺癌疾病的方法，該方法包括在繼續(xù)所述抗VEGF抗體治療的同時(shí)給所述患者施用治療有效量的抗HER2抗體。本發(fā)明還包括治療在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患者中的乳腺癌疾病的方法，所述乳腺癌疾病的特征在于HER2受體蛋白的過量表達(dá)，該方法包括在繼續(xù)貝伐單抗治療的同時(shí)給所述患者施用治療有效量的曲妥單抗。本發(fā)明還包括用于增加在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患有乳腺癌疾病的患者的存活持續(xù)時(shí)間的方法，該方法包括給所述患者施用有效量的抗VEGF抗體和抗HER2抗體，由此所述抗VEGF抗體和所述抗HER2抗體的共同施用有效地增加存活的持續(xù)時(shí)間。本發(fā)明還包括用于增加在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患有乳腺癌疾病的患者的進(jìn)展性自由存活的方法，該方法包括給所述患者施用有效量的抗VEGF抗體和抗HER2抗體，由此所述抗VEGF抗體和所述抗HER2抗體的共同施用有效地增加進(jìn)展性自由存活的持續(xù)時(shí)間。本發(fā)明還包括用于治療一組患有乳腺癌疾病并且在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患者的方法，該方法包括給所述患者施用有效量的抗VEGF抗體和抗HER2抗體，由此所述抗VEGF抗體和所述抗HER2抗體的共同施用有效地增加在該患者組中的應(yīng)答率。本發(fā)明還包括用于增加在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患有乳腺癌疾病的患者的應(yīng)答持續(xù)時(shí)間的方法，該方法包括給所述患者施用有效量的抗VEGF抗體和抗HER2抗體，由此所述抗VEGF抗體和所述抗HER2抗體的共同施用有效地增加應(yīng)答的持續(xù)時(shí)間。本發(fā)明還包括治療在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患有乳腺癌疾病的患者的方法，該方法包括給所述患者施用有效量的抗VEGF抗體和抗HER2抗體，由此當(dāng)通過存活持續(xù)時(shí)間、進(jìn)展性自由存活、應(yīng)答率或應(yīng)答的持續(xù)時(shí)間測(cè)量時(shí)，所述抗VEGF抗體和所述抗HER2抗體的共同施用導(dǎo)致被治療的患者的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著和臨床有意義的改善。本發(fā)明還包括用于減少在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患有乳腺癌疾病的患者中的轉(zhuǎn)移的方法，該方法包括給所述患者施用有效量的抗VEGF抗體和抗HER2抗體，由此所述抗VEGF抗體和所述抗HER2抗體的共同施用有效減少轉(zhuǎn)移。本發(fā)明還包括用于治療患有乳腺癌疾病并且在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的一組患者的方法，該方法包括給所述患者施用有效量的抗VEGF抗體和抗HER2抗體，由此所述抗VEGF抗體和所述抗HER2抗體的共同施用有效地減少在該組患者中的轉(zhuǎn)移。本發(fā)明提供制品(anarticleofmanufacture),其包括容器，在所述容器內(nèi)的組合物，該組合物包括抗VEGF抗體，和藥品說明書，該藥品說明書指導(dǎo)該組合物的使用者將所述抗VEGF抗體和抗HER2抗體施用給在用所述抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患有乳腺癌疾病的患者。本發(fā)明還提供制品，其包括容器，在所述容器內(nèi)的組合物，該組合物包括抗HER2抗體，和藥品說明書，該藥品說明書指導(dǎo)該組合物的使用者將所述抗HER2抗體和抗VEGF抗體施用給在用所述抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患有乳腺癌疾病的患者。本發(fā)明還提供一種組合物，該組合物包括抗HER2抗體和抗VEGF抗體，其有效用于治療在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患者中的乳腺癌疾病。優(yōu)選地，所述抗HER2抗體是曲妥單抗。還優(yōu)選地，所述抗VEGF抗體是貝伐單抗。附圖簡(jiǎn)述圖1在貝伐單抗治療失敗后組合曲妥單抗和貝伐單抗治療對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抗腫瘤活性。腫瘤體積(mm"的平均值繪制在y-軸上；在腫瘤細(xì)胞注射后的天數(shù)繪制在x-軸上。賦形劑(圓圈)，以30mg/kg負(fù)荷劑量和15mg/kg維持劑量的曲妥單抗(正方形)，在治療還包括以15mg/kg的曲妥單抗時(shí)持續(xù)到第55天的以5mg/kg的貝伐單抗(三角形)。圖2組合曲妥單抗和貝伐單抗治療對(duì)肺轉(zhuǎn)移的作用。人AluDNA序列的平均值(ng/ml)用實(shí)時(shí)PCR從肺組織定量，并且繪制在y-軸上。發(fā)明詳述依據(jù)本發(fā)明，術(shù)語"VEGF"指血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(瑞士-Prot號(hào)P15692)，可變剪接形式(參見，例如，Leung,D.W.,等，Science(科學(xué)),246(1989)1306-1309;和Houck,K.A.,等，Mol.Endocrin.(分子內(nèi)分泌學(xué))5(1991)1806-1814)和活性片段，優(yōu)選其N端片段。依據(jù)本發(fā)明，術(shù)語"抗VEGF抗體"是與VEGF特異性結(jié)合的抗體。本文優(yōu)選的人源化抗VEGF抗體或變體抗VEGF抗體以不大于約lxl(^M并且優(yōu)選地不大于約5xlO—9M的Kd值結(jié)合人VEGF。優(yōu)選地所述抗VEGF抗體是單克隆抗體，其與依據(jù)Presta,LG,等，CancerRes.(癌癥研究)57(1997)4593-4599產(chǎn)生的重組人源化抗VEGF單克隆抗體結(jié)合相同的表位。優(yōu)選的抗體是貝伐單抗?？筕EGF抗體及其制備方法，例如，在US6,054,297,US2003/0190317,US6，632，926，US6，884,879，和US2005/0112126中描述。貝伐單抗包括突變的人IgGl構(gòu)架區(qū)和來自鼠源抗hVEGF單克隆抗體的抗原結(jié)合互補(bǔ)決定區(qū)，所述抗體阻礙人VEGF與其受體的結(jié)合。貝伐單抗約93%的氨基酸序列，包括大部分構(gòu)架區(qū)，是來源于人IgGl，并且約7%的序列是來自于鼠源抗體A4.6.1。貝伐單抗具有約149,000道爾頓的分子質(zhì)量，并且是糖基化的。貝伐單抗及其制備方法在EP1325932中描述。HER2是185-kDa的生長(zhǎng)因子受體，還叫作neu和c-erbB-2(Slamon，D.J.,等，Science(科學(xué))235(1987)177-182;瑞士-ProtP04626),其功能與人乳腺癌細(xì)胞中的腫瘤轉(zhuǎn)化相關(guān)。這種蛋白的過量表達(dá)已經(jīng)在20-30%的乳腺癌患者中鑒定到，其中它與地方性晚期疾病、腫瘤復(fù)發(fā)的增加的可能性和減少的患者存活相關(guān)。多如30-40%的患有胃癌、子宮內(nèi)膜癌、唾液腺癌、非小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、卵巢癌、腹膜癌、前列腺癌或結(jié)腸直腸癌的患者也可以表現(xiàn)出這種蛋白的過量表達(dá)?？笻ER2抗體及其制備方法，例如，在US6,054,297，WO89/06692,US6,953,842,US6,949,245，US6,399,063,US6,165,464,US6,054,297,US5,772,997，WO2003/087131,'WO01/00245,WO01/00238,WO00/69460，WO00/52054，WO99/31140和WO98/17797中所述。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，所述抗HER2抗體是曲妥單抗。曲妥單抗及其制備方法在EP0590058中描述。術(shù)語HER2受體蛋白的"過量表達(dá)"意欲指，相對(duì)于在來自組織或器官的正常細(xì)胞中的表達(dá)水平，HER2受體蛋白在來自患者的特異性組織或器官內(nèi)的腫瘤的細(xì)胞中的異常表達(dá)水平。患有特征在于所述HER2受體的過量表達(dá)的癌癥的患者可以通過本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定確定。優(yōu)選地，過量表達(dá)使用免疫組織化學(xué)(IHC)檢測(cè)在冷凍或石蠟-包埋的組織切片的固定的細(xì)胞中測(cè)量。當(dāng)與組織學(xué)染色結(jié)合時(shí)，可以確定被靶向的蛋白的位置，并且可以定量和半定量地測(cè)量其在腫瘤內(nèi)的表達(dá)程度。這樣的IHC測(cè)定在本領(lǐng)域內(nèi)是己知的，并且包括臨床試驗(yàn)測(cè)定(CTA)、可商購的LabCorp4D5檢測(cè)，和可商購的DAKOHercepTest(DAKO，Carpinteria，加利福尼亞州)。后一測(cè)試使用0到3+特定范圍的細(xì)胞染色(0是正常表達(dá)，3+表示最強(qiáng)的陽性表達(dá))，以鑒定具有HER2蛋白過量表達(dá)的癌癥(參見Herceptin⑧(曲妥單抗)完整處方信息，1998年9月，基因技術(shù)公司(GenentechInc.)，舊金山，加利福尼亞州)。因此，患有特征在于在l+,2+,或3+,優(yōu)選地2+或3+，更優(yōu)選3+范圍內(nèi)的HER2蛋白過量表達(dá)的癌癥的患者將受益于本發(fā)明的治療方法。術(shù)語"乳腺癌疾病"指異常乳腺細(xì)胞的不受控制的生長(zhǎng)。它包括原位導(dǎo)管癌、侵入性導(dǎo)管癌、原位小葉癌、侵入性小葉癌、髓樣癌、乳頭佩吉特病、和轉(zhuǎn)移性乳腺癌。當(dāng)用于本文時(shí)，術(shù)語"在用抗VEFG抗體的在先治療中失敗"或"治療失敗"指不能響應(yīng)用抗VEGF抗體的先前治療的腫瘤患者("無應(yīng)答者")或最初響應(yīng)先前的治療但是治療反應(yīng)沒有保持的腫瘤患者(叫作"復(fù)發(fā)者")。優(yōu)選地，術(shù)語"在用抗VEFG抗體的在先治療中失敗"指復(fù)發(fā)者。治療失敗(分別是應(yīng)答(RE)和無應(yīng)答(NR))基于從業(yè)者的醫(yī)學(xué)判斷而確定，所述醫(yī)學(xué)判斷是通過來自本領(lǐng)域已知的通常評(píng)估患者治療的臨床和實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)的結(jié)果而確定。例如，這樣的數(shù)據(jù)可以從臨床檢查、細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)技術(shù)、內(nèi)窺鏡檢査和腹腔鏡檢査、超聲、CT、PET和MRI掃描，胸腔X-射線和乳房X線攝影術(shù)、并且測(cè)量腫瘤標(biāo)記諸如CEA，Cyfra,CA15-3,白介素8和可溶HER2的濃度而獲得。在這種情形中，"治療失敗"定義為臨床改善的缺乏。備選地，RECIST標(biāo)準(zhǔn)可以用來確定腫瘤應(yīng)答(Therasse,P.,等，J.Nat.CancerInstitute(國(guó)家癌癥研究所雜志)92(2000)205-216)。在這種情形中，"治療失敗"定義為"不完全應(yīng)答/穩(wěn)定的疾病"或"進(jìn)展性疾病"。依據(jù)這些RECIST標(biāo)準(zhǔn)，依賴于腫瘤體積進(jìn)展或消退(例如，通過CT測(cè)量)，將實(shí)體腫瘤的腫瘤應(yīng)答(Therasse，R,等，J.Nat.CancerInstitute(國(guó)家癌癥研究所雜志)92(2000)205-216)歸類成4個(gè)水平完全應(yīng)答(CR)或部分應(yīng)答(PR)，穩(wěn)定疾病(SD)和進(jìn)展性疾病(PD)(參見表1)。此外，歐洲癌癥研究禾口治療組織(EuropeanOrganizationforResearchandTreatmentofCancer(EORTC))依賴于通過2-[18巧-氟-2-脫氧葡萄糖正電子發(fā)射體層攝影術(shù)(FDG-PET)測(cè)量的腫瘤的新陳代謝而提出分成4個(gè)水平的分類(YoimgH.，等，Eur.J.Cancer(歐洲癌癥雜志)35(1999)1773-1782和Kellof,G.J.,等，Clin.CancerRes.(臨床癌癥研究)11(2005)2785-2808):完全代謝應(yīng)答(CMR)或部分代謝應(yīng)答(PMR),穩(wěn)定代謝疾病(SMD)和進(jìn)展性代謝疾病(PMD)(參見表2)。表1:CT-標(biāo)準(zhǔn)(依據(jù)RECIST)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>因此，優(yōu)選地，依據(jù)本發(fā)明，"應(yīng)答(RE)"和"不應(yīng)答(NR)"是使用上述RECIST和FDG-PET標(biāo)準(zhǔn)基于這樣的數(shù)據(jù)而確定的，所述數(shù)據(jù)通過計(jì)算機(jī)體層攝影術(shù)(CT)和2-["F]-氟-2-脫氧葡萄糖正電子發(fā)射體層攝影術(shù)(FDG-PET)的結(jié)合而獲得(Kellof,G.J.，等，Clin.CancerRes.(臨床癌癥研究)11(2005)2785-2808，和YoungH"等，Eur.J.Cane.(歐洲癌癥研究)35(1999)1773-1782)。因此，依據(jù)本發(fā)明，應(yīng)答(RE)和不應(yīng)答(NR)優(yōu)選地如下確定應(yīng)答(RE):CR或PR通過CT-RECIST標(biāo)準(zhǔn)確立(表1)，并且同時(shí)CMR或PMR通過FDG-PET確立(表2)。因此，應(yīng)答(RE)意指下述關(guān)于組合的CT和PET測(cè)量的4種情形中的一種CR和CMR,PR和PMR，CR和PMR，以及PR和CMR。不應(yīng)答(NR):SD或PD通過CT-RECIST標(biāo)準(zhǔn)確立(表1)，并且同時(shí)SMD或PMD通過FDG-PET確立(表2)。因此，下述4種關(guān)于組合的CT和PET測(cè)量的情形表示不應(yīng)答(NR):SD和SMD,SD和PMD,PD和SMD,以及PD禾口PMD。通常所述應(yīng)答在治療開始后約3到8周確定，優(yōu)選地在約6周確定。這種應(yīng)答確定通常以4到8周，優(yōu)選地6到8周的時(shí)間間隔重復(fù)。當(dāng)在第一次確定鑒定了顯著的應(yīng)答(RE)時(shí)，那么復(fù)發(fā)(其意味著在第一次確定之后的不應(yīng)答(RE))可以在第二次應(yīng)答確定時(shí)最早確定。在這種情形中，術(shù)語"在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患者"指這樣的患者，即，在他們中在第一次反應(yīng)確定時(shí)確立為不應(yīng)答(NR)("不應(yīng)答者")或者在第一次應(yīng)答確定中確立為應(yīng)答(RE)，并且在第二次或隨后的應(yīng)答確定中確立為不應(yīng)答(NR)("復(fù)發(fā)者")。依據(jù)本發(fā)明，術(shù)語"轉(zhuǎn)移"指癌細(xì)胞從原發(fā)性腫瘤向患者中的一個(gè)或多個(gè)其它位點(diǎn)轉(zhuǎn)移引起繼發(fā)性腫瘤。由已經(jīng)擴(kuò)散的細(xì)胞形成的腫瘤叫作"轉(zhuǎn)移瘤"或"轉(zhuǎn)移"。所述轉(zhuǎn)移瘤包含與在原始(原發(fā)性)腫瘤中的細(xì)胞相似的細(xì)胞。確定癌癥是否轉(zhuǎn)移的方法在本領(lǐng)域內(nèi)是已知的，并且包括腫瘤標(biāo)記檢測(cè)、骨掃描、胸腔X-線、計(jì)算機(jī)體層攝影術(shù)(CT)、計(jì)算機(jī)軸向體層攝影術(shù)(CAT)、分子共振成像(MRI)、正電子發(fā)射體層攝影術(shù)(PET)、單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)體層攝影術(shù)(SPECT)、熒光成像(FI)、和生物發(fā)光成像(BLI)與腫瘤標(biāo)記檢測(cè)(參見，例如，Helms，M.W.,等，Contributionstomicrobiology(微生物學(xué)的貢獻(xiàn))13(2006)209-231,禾卩Pantel,K.，等，J.Nat.CancerInst.(國(guó)家癌癥研究所雜志)91(1999)1113-1124)。當(dāng)用于本文時(shí)，術(shù)語"患者"優(yōu)選地指需要治療癌癥、或癌癥前期病況或損害的治療的人。然而，術(shù)語"患者"還可以指非人動(dòng)物，優(yōu)選地哺乳動(dòng)物，其中諸如狗、貓、馬、母牛、豬、綿羊和非人靈長(zhǎng)類，其需要治療。術(shù)語"組"指一組患者以及亞組患者。術(shù)語"藥品說明書"指通常包含在治療產(chǎn)品的商業(yè)包裝中的說明，其可以包括關(guān)于適應(yīng)癥、使用、劑量、施用、禁忌癥和/或關(guān)于所述治療產(chǎn)品應(yīng)用的警告的信息。所述癌癥可以是，例如，肺癌、非小細(xì)胞肺(NSCL)癌、支氣管(bronchioloalviolar)細(xì)胞肺癌、骨癌、胰腺癌、皮膚癌、頭或頸癌、皮膚或眼內(nèi)黑素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛門區(qū)癌癥、胃癌(stomachcancer)、胃癌(gastriccancer)、結(jié)腸癌、乳腺癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、陰道癌、外陰癌、霍奇金病、食道癌、小腸癌、內(nèi)分泌系統(tǒng)癌、甲狀腺癌、甲狀旁腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、膀胱癌、腎或尿道癌、腎細(xì)胞癌、腎盂癌、間皮瘤、肝細(xì)胞癌、膽囊癌、慢性或急性白血病、淋巴細(xì)胞淋巴癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)腫瘤、脊柱腫瘤、腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤、多形式成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、星形細(xì)胞瘤、神經(jīng)鞘瘤、室管膜瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、腦膜瘤、鱗狀細(xì)胞瘤、垂體腺瘤，包括上述癌癥中任一種的難控制的版本，或上述癌癥中一種或多種的組合。所述癌癥前期病況或損害包括，例如，由下列各項(xiàng)組成的組口白斑病、光化性角化病(actinickeratosis)(光化性角化病(solarkeratosis))、癌癥前期的結(jié)腸或直腸息肉、胃上皮發(fā)育不良、腺瘤狀發(fā)育不良、遺傳性非息肉結(jié)腸癌綜合征(HNPCC)、巴特雷食道病、膀胱發(fā)育不良、和癌癥前期子宮頸病癥。在優(yōu)選實(shí)施方案中，待治療的癌癥是乳腺癌疾病。也在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述癌癥的特征在于HER2受體蛋白的過量表達(dá)。本發(fā)明包括治療在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患者中的乳腺癌疾病的方法，該方法包括在繼續(xù)所述抗VEGF抗體治療的同時(shí)，給所述患者施用治療有效量的抗HER2抗體。當(dāng)用于本文時(shí)，除非另外指明，術(shù)語"治療"意指對(duì)患者中腫瘤生長(zhǎng)，腫瘤轉(zhuǎn)移，或其它引起癌癥或瘤性細(xì)胞的部分或完全逆轉(zhuǎn)、減輕、抑制發(fā)展，或者防止。當(dāng)用于本文時(shí)，除非另外指明，術(shù)語"治療"指治療的行為。短語"治療方法"或其等價(jià)體，例如，當(dāng)用于癌癥時(shí)，指設(shè)計(jì)成減少或消除患者中的癌細(xì)胞數(shù)目或減輕癌癥癥狀的作用方法或過程。"治療癌癥或另一種增殖性病癥的方法"不必意指所述癌細(xì)胞或其它病癥將實(shí)際上被消除，細(xì)胞數(shù)目或病癥將實(shí)際上被減少，或者癌癥或其它病癥的癥狀將實(shí)際上被減輕。通常，治療癌癥的方法將甚至以低成功可能性而進(jìn)行，但是，給出患者的醫(yī)療史和估計(jì)的存活預(yù)測(cè)，仍然認(rèn)為其是一種大體上有益的作用過程。術(shù)語"治療有效量"或"有效量"意指將引發(fā)組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人的生物或醫(yī)學(xué)應(yīng)答的受試化合物或組合的量，所述組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人是研究者、獸醫(yī)、醫(yī)學(xué)醫(yī)生或其他臨床醫(yī)師所尋找的。本發(fā)明還包括抗HER2抗體和抗VEGF抗體用于制備用來治療在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患者中的乳腺癌疾病的藥物中的應(yīng)用，該應(yīng)用包括在繼續(xù)所述抗VEGF抗體治療的同時(shí)，給所述患者施用治療有效量的抗HER2抗體。所述抗體可以分開或同時(shí)施用。術(shù)語"制備藥物的方法"涉及制備用于本文所述的適應(yīng)癥并且特別是通常用于治療腫瘤、腫瘤轉(zhuǎn)移或癌癥的藥物。該術(shù)語涉及所謂的在所述適應(yīng)癥中的"瑞士-型"要求形式。在本發(fā)明的上下文中，另外的其它細(xì)胞毒性的、化學(xué)治療的或抗癌藥劑、或增強(qiáng)所述藥劑作用的化合物可以用在抗VEGF抗體加抗HER2抗體組合中。這樣的藥劑包括，例如烷化劑或具有烷化作用的藥劑，諸如環(huán)磷酰胺(CTX;例如，Cytoxan),苯丁酸氮芥(CHL;例如leukeran),順鉑(CisP;例如，川鉑注射劑⑧(platino1⑧))，白消安(例如，馬利蘭⑧(myleran⑧))，美法侖，卡莫司汀(BCNU)，鏈脲霉素，曲他胺(TEM)，絲裂霉素C等；抗代謝物，諸如甲氨蝶呤(MTX)，依托泊苷(VP16;例如，凡必士⑧(vepesid)),6-巰嘌呤(6MP)，6-硫鳥嘌呤(6TG),阿糖胞苷(Ara-C)，5-氟尿嘧啶(5-FU)，卡培他濱(例如，適羅達(dá)⑧(Xeloda)),達(dá)卡巴嗪(DTIC)，等；抗生氣諸如放線菌素D,多柔比星(DXR;例如，阿霉素⑧)，柔紅霉素(道諾霉素),博來霉素，光輝霉等；生物堿，諸如長(zhǎng)春生物堿如長(zhǎng)春新堿(VCR)，長(zhǎng)春堿等；以及其它抗腫瘤藥，諸如紫杉醇(例如，泰素⑧)和紫杉醇衍生物，細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑，糖皮質(zhì)激素諸如地塞米松(DEX;例如，decadron⑧)和皮質(zhì)類固醇諸如潑尼松，核苷酶抑制劑諸如羥基脲，氨基酸耗盡酶如天冬酰胺酶,亞葉酸和其它葉酸衍生物，以及類似的、不同的抗腫瘤藥。下述藥劑也可以用作添加齊U:arnifostine(例如，ethyol),放線菌素D，氮芥(mechlorethamine)(氮芥(nitrogenmustard))，鏈佐星，環(huán)磷酰胺，洛莫司汀(CCNU),多柔比星脂質(zhì)體(例如，鹽酸多柔比星脂質(zhì)體⑧)，吉西他濱(例如，gemzar),柔紅霉素脂質(zhì)體(例如，daunoxome)，丙卡巴肼，絲裂霉氣多西他賽(例如，taxotere),阿地白介素，卡鉑，奧沙利鉑，克拉屈濱，喜樹堿，CPT11(伊立替康)，10-羥基7-乙基-喜樹堿(SN38),氟尿苷，氟達(dá)拉濱，異環(huán)磷酰胺，伊達(dá)比星，美鈉，干擾素(3,干擾素a,米托蒽醌，托泊替康，亮丙立德，甲地孕酮，美法侖，巰嘌呤，普卡霉素，米托坦，培門冬酶，噴司他丁，哌泊溴烷，普卡霉素，他莫昔芬，替尼泊苷，睪內(nèi)酯,硫鳥嘌呤，賽替哌，烏拉莫司汀，長(zhǎng)春瑞濱，苯丁酸氮芥。在本發(fā)明的情形中，抗激素藥可以用在抗VEGF抗體加抗HER2抗體組合中。當(dāng)用于本文時(shí)，術(shù)語"抗激素藥"包括天然的或合成的起作用調(diào)控或抑制激素對(duì)腫瘤的作用的有機(jī)或肽化合物?？辜に厮幇?，例如類固醇受體拮抗劑，抗雌激素如他莫昔芬，雷洛昔芬，芳香酶抑制性4(5)-咪唑，其它芳香酶抑制藥,42-羥基他莫昔芬，曲沃昔芬，keoxifene，LY117018,奧那司酮，和托瑞米芬(例如，F(xiàn)areston);抗雄激素藥如氟他胺，尼魯米特，比卡魯胺，亮丙立德，和戈舍瑞林；以及上述任一種的藥用鹽、酸或衍生物；糖蛋白激素的激動(dòng)劑和/或拮抗劑，如濾泡刺激激素(FSH)，甲狀腺刺激激素(TSH)，和黃體生成素(LH)與LHRH(促性腺激素釋放激素);LHRH激動(dòng)劑醋酸戈舍瑞林，可以Zoladex⑧(AstraZeneca)商購；LHRH拮抗劑D-丙氨酰胺(alaninamide)N-乙?；?3-(2-萘基)-D-丙氨酰-4-氯-D-苯丙氨酰-3-(3-吡啶基)-D-丙氨酰-L-絲氨酰-N6-(3-吡啶基羰基)-L-賴氨酰-兩-(3-吡啶基羰基)-D-賴氨酰-L-亮氨酰-N6-(l-甲基乙基)-L-賴氨酰-L-脯氨酸(例如，Antide,Ares-Serono);LHRH拮抗劑醋酸加尼瑞克；類固醇抗雄激素醋酸環(huán)丙孕酮(CPA)和醋酸甲地孕酮，可以Megace(Bristol-MyersOncology)商購；非類固醇抗雄激素氟他胺(2-甲基-N-[4，20-硝基-3-(三氟甲基)苯基丙酰胺)，可以Eulexin⑧(Schering公司)商購；非類固醇抗雄激素尼魯米特，(5，5-二甲基-3-[4-硝基-3-(三氟甲基-4，-硝基苯基)-4,4-二甲基-咪唑烷二酮)；和其它非許可的受體的拮抗劑，諸如RAR(視黃酸受體),RXR(類視黃醇X受體),TR(甲狀腺受體),VDR(維生素-D受體)等的拮抗劑。上述細(xì)胞毒性和其它抗癌藥在化學(xué)治療方案中的應(yīng)用通常特征充分在于癌癥治療技術(shù)，并且它們的應(yīng)用在這里是處于監(jiān)測(cè)耐受性和功效的考慮中和控制施用途徑和劑量的考慮中，具有一些調(diào)整。例如，細(xì)胞毒性劑的實(shí)際劑量可以隨著通過使用組織培養(yǎng)方法確定的患者的培養(yǎng)的細(xì)胞應(yīng)答而變化。通常，與不存在添加的其它藥劑時(shí)所用的量相比，劑量將是減少的。有效細(xì)胞毒性藥的典型劑量可以在供應(yīng)商推薦的范圍內(nèi)，和由體外應(yīng)答或在動(dòng)物模型中的應(yīng)答所指示的劑量，可以減少多至約一個(gè)數(shù)量級(jí)濃度或量。因此，基于原代培養(yǎng)的惡性細(xì)胞或組織培養(yǎng)的組織樣品的體外應(yīng)答或在適當(dāng)?shù)膭?dòng)物模型中觀察到的應(yīng)答，實(shí)際劑量將取決于醫(yī)師的判斷、患者的病況、和治療方法的功效。在本發(fā)明的情形中，其它的抗增殖藥可以用在抗VEGF抗體加抗HER2抗體組合中，其包括，例如酶法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶的抑制劑和受體酪氨酸激酶PDGFR的抑制劑，包括在美國(guó)專利號(hào)6,080,769;6,194,438;6,258,824;6，586，447;6,071,935;6,495,564;6,150，377;6,596,735和6,479,513,以及國(guó)際公布WO01/40217中公開和要求的化合物。在本發(fā)明的情形中，可以實(shí)行有效量的電離輻射和/或除了抗VEGF抗體加抗HER2抗體組合之外，可以使用放射藥物。放射源可以在被治療的患者的外部或內(nèi)部。當(dāng)所述放射源在患者外部時(shí)，該治療叫作外光束放射治療(EBRT)。當(dāng)放射源在患者內(nèi)部時(shí)，治療叫作近距放射治療(BT)。用于本發(fā)明情形中的放射活性原子可以選自包括但不限于下列各項(xiàng)的組鐳，銫-137，銥-192，镅-241，金-198，鈷-57，銅-67，锝-99，碘-123，碘-131，和銦-111。當(dāng)依據(jù)本發(fā)明EGFR激酶抑制劑是抗體時(shí)，將所述抗體用這樣的放射活性同位素標(biāo)記也是可能的。放射治療是用于控制不能切除的或不宜手術(shù)的腫瘤和/或腫瘤轉(zhuǎn)移的標(biāo)準(zhǔn)治療。當(dāng)放射治療與化學(xué)治療組合時(shí)，已經(jīng)觀察到改善的結(jié)果。放射治療是基于這樣的原理，即，遞送至靶點(diǎn)區(qū)域的高劑量的射線將導(dǎo)致腫瘤和正常組織中的生殖細(xì)胞的死亡。放射劑量方案通常關(guān)于吸收的射線劑量(Gy)、時(shí)間和級(jí)分而定義，并且必須由腫瘤學(xué)家認(rèn)真地定義。患者接受的射線的量將取決于各種考慮，但是兩種最重要的考慮是腫瘤關(guān)于機(jī)體的其它關(guān)鍵結(jié)構(gòu)或器官的位置，以及腫瘤擴(kuò)散的程度。關(guān)于進(jìn)行放射治療的患者的典型的治療療程應(yīng)該是持續(xù)1到6周時(shí)間的治療時(shí)間表，在10和80Gy之間的總劑量施用給患者，單次日常級(jí)分約1.8到2.0Gy，一周5天。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，當(dāng)人患者中的腫瘤用本發(fā)明的組合治療和放射進(jìn)行治療時(shí)，存在增效作用。換言之，當(dāng)與放射組合，任選地與其它化學(xué)治療或抗癌藥組合時(shí)，通過包括本發(fā)明的組合的藥劑方式對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制得以增強(qiáng)。輔佐的放射治療的參數(shù)，例如，包含在國(guó)際公布WO99/60023中。所述抗體按照己知的方法施用給患者，作為大丸劑(bolus)通過靜脈內(nèi)施用，或者通過在某一時(shí)間階段連續(xù)輸注，通過肌內(nèi)，腹膜內(nèi)，腦脊液內(nèi)(intracerobrospinal)，皮下，關(guān)節(jié)內(nèi)，滑膜內(nèi)，或鞘內(nèi)途徑施用。優(yōu)選靜脈內(nèi)或皮下施用抗體?？筕EGF和抗HER2抗體施用的量和施用的時(shí)間將取決于被治療的患者的類型(人種，性別，年齡，體重，等)和病況以及被治療的疾病或病況的嚴(yán)重性。使用本發(fā)明所述的抗體的劑量為約1pg/kg到50mg/kg(例如，0.1-20mg/kg)抗體，通過一次或多次分開的施用，或通過連續(xù)的輸注。典型的日常劑量可能在約1^g/kg到約100mg/kg范圍內(nèi)。在優(yōu)選的方面，所述抗體每?jī)傻饺苁┯?，以在約1mg/kg到約15mg/kg范圍內(nèi)的劑量。貝伐單抗的優(yōu)選劑量是以IV輸注5mg/kg每14天一次，直到檢測(cè)到疾病進(jìn)展。曲妥單抗的優(yōu)選劑量是在90分鐘的時(shí)間周期施用的4mg/kg的負(fù)載劑量，并且隨后在30分鐘的時(shí)間周期施用的每周2mg/kg的輸注。本發(fā)明還提供了包括抗VEGF抗體和藥品說明書的試劑盒，所述藥品說明書指示該組合物的使用者將所述抗VEGF抗體和所述抗HER2抗體施用給在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患有乳腺癌疾病的患者。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述試劑盒容器可以進(jìn)一步包括藥用載體。所述試劑盒可以進(jìn)一步包括無菌稀釋劑，其優(yōu)選地保存在獨(dú)立的另外的容器中。所述試劑盒可以進(jìn)一步包括藥品說明書，其包括指導(dǎo)將所述組合治療用作乳腺癌疾病的方法的印刷的指示。本發(fā)明還提供藥物組合物，特別用于治療在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的乳腺癌疾病，所述藥物組合物包括抗HER2抗體和抗VEGF抗體。這樣的組合物任選地包括藥用載體和/或賦形劑。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述抗VEGF抗體是貝伐單抗，并且所述抗HER2抗體是曲妥單抗。提供下述實(shí)驗(yàn)詳細(xì)資料以輔助對(duì)本發(fā)明的理解，本發(fā)明的真正的范圍是在后附的權(quán)利要求中提出的。應(yīng)該理解，所討論的具體的方法和結(jié)果只是舉例說明本發(fā)明，并不認(rèn)為是以任何方式限制本發(fā)明。導(dǎo)言本研究在人乳腺異種移植物模型中檢驗(yàn)了在單獨(dú)的貝伐單抗治療失敗后貝伐單抗和曲妥單抗組合的抗腫瘤活性。本研究的其它目的是檢驗(yàn)治療對(duì)轉(zhuǎn)移的作用。檢測(cè)藥劑曲妥單抗以在組氨酸-HCl，a-a海藻糖(60mM),0.01%藥用有機(jī)聚合物載體(Polysorb),pH6.0中的25mg/ml的儲(chǔ)液提供(Herceptin⑧)。貝伐單抗以在磷酸鈉，a-a海藻糖(60mM),0.01%藥用有機(jī)聚合物載體(Polysorb),pH6.0中的25mg/ml的儲(chǔ)液提供(Avastin⑧)。兩種溶液都適當(dāng)?shù)叵♂屧赑BS中用于注射。細(xì)胞系和培養(yǎng)條件人乳腺癌細(xì)胞系KPL-4建立自具有炎性皮膚轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者的惡性胸膜滲出液，并且過量表達(dá)ErbB家族受體。(Kurebayashi，J.,等，Br.J.Cancer(英國(guó)癌癥雜志)79(1999)707-17)腫瘤細(xì)胞通常在補(bǔ)充了10%胎牛血清(PAA)和2mML-谷氨酰胺(Gibco)中的DMEM培養(yǎng)基(PAA實(shí)驗(yàn)室，奧地利)中在37。C在水飽和的5%C02氛圍中培養(yǎng)。培養(yǎng)物的傳代用胰蛋白酶EDTAlx(PAA)進(jìn)行，分裂2次/周。細(xì)胞傳代P6用于體內(nèi)研究。動(dòng)物SCIDbeige(C.B.-17)小鼠；10-12周齡；體重18-20g(CharlesRiver，Sulzfeld,德國(guó))依據(jù)國(guó)際指南(GV-Solas;Felasa;TierschG)保持在無特異性病原體的條件下，每天周期12小時(shí)光照/12小時(shí)黑暗。在到達(dá)后，將動(dòng)物在動(dòng)物機(jī)構(gòu)的檢疫部門籠養(yǎng)1周，以適應(yīng)新環(huán)境和用于觀察。在常規(guī)基礎(chǔ)上進(jìn)行連續(xù)的健康監(jiān)測(cè)。飲食食品(Alltromin)和水(酸化pH2.5-3)隨意提供。體內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)抑制研究將腫瘤細(xì)胞從培養(yǎng)瓶(GreinerTriFlask)收集下來(胰蛋白酶-EDTA)，并且轉(zhuǎn)移到50ml培養(yǎng)基中，洗滌一次并重懸在PBS中。在用PBS的另一洗滌步驟和過濾(細(xì)胞過濾器；Falcon100pm)之后，將最終細(xì)胞滴度調(diào)整到0.75xl0Vml。將腫瘤細(xì)胞混懸液仔細(xì)用轉(zhuǎn)移移液管混合，以避免細(xì)胞聚集。使用用于小動(dòng)物的Stephens吸入部件進(jìn)行麻醉，其具有在封閉的循環(huán)系統(tǒng)中的預(yù)培育室(樹脂玻璃)，個(gè)體小鼠鼻面具(硅)和Isoflurane(Pharmacia-Upjohn,德國(guó))。在注射前兩天，將動(dòng)物的毛剃掉。對(duì)于乳房?jī)?nèi)脂肪墊(i.f.m.p.)注射，將細(xì)胞以20pl的體積同位(orthotopically)注射到每只麻醉小鼠的右側(cè)倒數(shù)第二個(gè)腹股溝乳房脂肪墊中。對(duì)于同位移植，將細(xì)胞混懸液通過在乳頭下的皮膚進(jìn)行注射。腫瘤細(xì)胞注射對(duì)應(yīng)于實(shí)驗(yàn)的第一天。監(jiān)細(xì)l每日控制動(dòng)物，以檢測(cè)不利作用的臨床癥狀。對(duì)于在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中的監(jiān)測(cè)，動(dòng)物的體重每周記錄兩次，并且腫瘤體積通過卡鉗每周測(cè)量?jī)纱?。原代腫瘤體積依據(jù)NCI方法(TW=1/2ab2,其中a和b是腫瘤尺寸的長(zhǎng)徑禾口短徑，單位為mm，Teicher,B,,Anticancerdrugdevelopmentguide(抗癌藥開發(fā)指南)，Humana出版社5(1997)92)計(jì)算。計(jì)算值記錄為平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差。動(dòng)物的治療當(dāng)腫瘤體積約100mmS時(shí)，將帶有腫瘤的小鼠隨機(jī)化(每組11=10)。在治療之前將每組緊密地匹配，其在腫瘤細(xì)胞注射后20天開始。賦形劑組(組l)腹膜內(nèi)接受10ml/kgPBS緩沖液，每周一次。曲妥單抗(組2)以30mg/kg的負(fù)荷劑量腹膜內(nèi)施用，而后以15mg/kg(維持劑量)的劑量每周一次。將抗VEGF抗體貝伐單抗以5mg/kg的劑量腹膜內(nèi)給與，每周兩次(組3)。在第40天，將組3的治療轉(zhuǎn)換成貝伐單抗(5mg/kg，每周兩次，腹膜內(nèi))和曲妥單抗(15mg/kg，每周一次，腹膜內(nèi))的組合治療。轉(zhuǎn)移的評(píng)估在處死的動(dòng)物中確定腫瘤細(xì)胞向肺部的擴(kuò)散。轉(zhuǎn)移依據(jù)Schneider,T.,等，Clin.Exp.Metastasis(轉(zhuǎn)移的臨床實(shí)驗(yàn))19(2002)571-582進(jìn)行測(cè)量。概言之，收集肺組織，并且通過實(shí)時(shí)PCR定量人Alu序列。通過實(shí)時(shí)PCR定量的更高的人DNA水平對(duì)應(yīng)更高的轉(zhuǎn)移水平。結(jié)果治療對(duì)原代腫瘤生長(zhǎng)的效果顯示在圖1和表3中。在賦形劑組(組1)中的腫瘤生長(zhǎng)迅速，并且由于腫瘤潰瘍和臨床癥狀的發(fā)展，在腫瘤細(xì)胞注射后38天將小鼠處死。使用曲妥單抗的單一治療(組2)對(duì)腫瘤體積沒有施加顯著的作用，并且因此將小鼠在第44天處死。用貝伐單抗治療顯著地抑制腫瘤生長(zhǎng)；然而，腫瘤大約在第44天開始重新生長(zhǎng)。在第55天開始的貝伐單抗和曲妥單抗組合治療在實(shí)驗(yàn)持續(xù)過程中(99天)導(dǎo)致對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的完全抑制，并且治療是很好耐受的。&1_在貝伐單抗治療失敗后組合的曲妥單抗和貝伐單抗治療對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抗腫瘤活性(圖1的數(shù)據(jù))。報(bào)道了以mi^為單位的平均腫瘤體積和標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD)。天賦形劑SD曲妥單抗SD曲妥單抗+貝伐單抗SD20118311203111935<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>治療對(duì)肺轉(zhuǎn)移的作用顯示在圖2和表4中。在貝伐單抗治療失敗后曲妥單抗和貝伐單抗組合導(dǎo)致轉(zhuǎn)移的急速降低。與在第28天處死的賦形劑治療的動(dòng)物相比，和與在第44天處死的曲妥單抗治療的動(dòng)物相比，在第99天，人Alu序列的水平(與腫瘤細(xì)胞向次級(jí)組織中的侵入相關(guān))在用組合治療處理的動(dòng)物中顯著更低。這種對(duì)轉(zhuǎn)移的令人吃驚的作用與用其它細(xì)胞毒性藥劑觀察到的作用(Geldof，A.A.,等，AnticancerRes.(抗癌研究)8(1988)1335-1339;Murphy，J.Clin.Oncol.(臨床腫瘤學(xué)雜志)11(1993)199-201,和DeLarco,J.E.,等，CancerRes.(癌癥研究)61(2001)2857-2861)相反。表4:治療對(duì)肺轉(zhuǎn)移的作用。對(duì)于每只動(dòng)物通過實(shí)時(shí)PCR定量AluDNA,并且記錄<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>權(quán)利要求1.抗HER2抗體和抗VEGF抗體用于制備用來治療患者中的乳腺癌疾病的藥物中的應(yīng)用，所述患者在用抗VEGF抗體的在先治療中是失敗的，該應(yīng)用包括給所述患者施用治療有效量的抗HER2抗體和抗VEGF抗體。2.權(quán)利要求l的應(yīng)用，其中用于所述藥物的所述抗VEGF抗體是貝伐單抗。3.權(quán)利要求1或2的應(yīng)用，其中所述患者是人。4.權(quán)利要求1到3任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述抗HER2抗體是曲妥單抗。5.權(quán)利要求1到4任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述乳腺癌疾病特征在于HER2受體蛋白的過量表達(dá)。6.治療在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患者中的乳腺癌疾病的方法，該方法包括給所述患者施用治療有效量的抗HER2抗體和抗VEGF抗體。7.權(quán)利要求6的方法，其中所述抗VEGF抗體是貝伐單抗。8.權(quán)利要求7或8的方法，其中所述患者是人。9.權(quán)利要求6到8任一項(xiàng)的方法，其中所述抗HER2抗體是曲妥單抗。10.權(quán)利要求6到9任一項(xiàng)的方法，其中所述乳腺癌疾病特征在于HER2受體蛋白的過量表達(dá)。11.一種制品，其包括容器，在所述容器內(nèi)的組合物，和藥品說明書，所述組合物包括抗VEGF抗體，所述藥品說明書指示所述組合物的使用者將所述抗VEGF抗體和抗HER2抗體施用給患有乳腺癌疾病的在用所述抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患者。12.權(quán)利要求ll的制品，其中所述抗VEGF抗體是貝伐單抗。13.權(quán)利要求11或12的制品，其中所述抗HER2抗體是曲妥單抗。14.一種制品，其包括容器，在所述容器內(nèi)的組合物，和藥品說明書，所述組合物包括抗HER2抗體，所述藥品說明書指示所述組合物的使用者將所述抗HER2抗體和抗VEGF抗體施用給患有乳腺癌疾病的在用所述抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患者。15.權(quán)利要求14的制品，其中所述抗VEGF抗體是貝伐單抗。16.權(quán)利要求14或15的制品，其中所述抗HER2抗體是曲妥單抗。17.—種藥物組合物，其包括抗HER2抗體和抗VEGF抗體，所述組合物有效用于治療在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的乳腺癌疾病。18.權(quán)利要求17的藥物組合物，其中所述抗VEGF抗體是貝伐單抗，和所述抗HER2抗體是曲妥單抗。全文摘要本發(fā)明提供治療在用抗VEGF抗體的在先治療中失敗的患者中的乳腺癌疾病的方法，該方法包括在繼續(xù)所述抗VEGF抗體治療的同時(shí)，給所述患者施用治療有效量的抗HER2抗體。本發(fā)明還提供相對(duì)應(yīng)的產(chǎn)品和藥物組合物的制品。文檔編號(hào)C07K16/00GK101405030SQ200780009928公開日2009年4月8日申請(qǐng)日期2007年3月20日優(yōu)先權(quán)日2006年3月22日發(fā)明者托馬斯·弗里斯,維爾納·朔伊爾,馬克斯·哈斯曼申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司