專(zhuān)利名稱(chēng)：：具有抗炎、抗真菌活性的[1,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶類(lèi)化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明專(zhuān)利涉及含氮的雜環(huán)化合物，特別是涉及一種[l,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶系列抗炎、抗真菌合成藥物。
背景技術(shù)：
：真菌是一種與宿主細(xì)胞有相似結(jié)構(gòu)和生理代謝過(guò)程的真核細(xì)胞生物，按照真菌引起的感染部位不同，分為淺部菌感染和深部菌感染。淺部真菌感染主要是由各種癬菌引起，如手足癬、頭癬、體癬等，目前常以灰霉菌素、制霉菌素、酮康唑等作為治療藥物。深部真菌感染危害大，甚至危機(jī)生命，它主要由致病真菌引起，它包括白色念珠菌、新型隱球菌、曲霉菌、毛霉菌等，這些真菌屬于正常機(jī)體內(nèi)菌群成員，正常情況下不引起疾病，但是，長(zhǎng)期大量使用廣譜抗生素、激素和免疫抑制劑等可以導(dǎo)致發(fā)病。近年來(lái)，深部真菌感染的發(fā)病率有逐年上升的趨勢(shì)。由于真菌的生物特性，一般抗真菌藥物往往在破壞真菌細(xì)胞同時(shí)，又會(huì)損傷宿主細(xì)胞，再加上耐藥菌株的不斷出現(xiàn)，使得真菌感染疾病的治療陷于兩難之境。截至目前，可應(yīng)用于臨床的療效好、毒副作用小、安全系數(shù)(safetyIndex,LD5/ED95)高的藥物寥寥無(wú)幾。兩性霉素B和三唑類(lèi)氟康唑類(lèi)藥物也因其毒副作用大而在應(yīng)用方面受限。因此，開(kāi)發(fā)和探求一種高效低毒、具有治療預(yù)防雙重功效的廣譜和窄譜抗真菌活性的新化合物，成為當(dāng)前一項(xiàng)具有重要意義的研究工作。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于彌補(bǔ)上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處，而提供合成方法簡(jiǎn)單、效果好的[l,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶系列抗炎、抗真菌合成藥物。本發(fā)明目標(biāo)物可以通過(guò)如下措施來(lái)達(dá)到抗炎、抗真菌[l，2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶類(lèi)化合物，其特征在于用通式I表示化合物3Ri=-CH2-、-CH2CH2-、-CH=CH-CH2-、-CH2CH2CH2-、C4陽(yáng)Ci。烷烴基(烯烴基或炔烴基)R2=-NH2、-NMe2、-NEt2、-NMe、-NEt、U、、>^^、C3-C,c的伯胺或仲胺基、五元/六元環(huán)烴基胺或雜環(huán)烴基胺基、Q-C10的烴氧基。當(dāng)R4、R5、R6、R7中有一個(gè)或兩個(gè)為H時(shí)，其它的取代基分別為R4=H、X(鹵素取代基)、掘e、-OEt、-Me、-Et、-NMe2、-CF3、C3-C6的烴基或取代烴基R5=H、X(卣素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、陽(yáng)Et、-NMe2、-CF3、C3-C6的烴基或取代烴基R6=H、X(鹵素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、-Et、-NMe2、-CF3、C3-C6的烴基或取代烴基R7=H、X(卣素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、-Et、-NMe2、-CF3、CVC6的烴基或取代烴基R『d-C6的烴基或取代烴基鹵素取代基是指氟、氯、溴、碘。三氮唑并[4，3-a]嘧啶系列藥物的合成方法是在乙酰乙酸乙酯(或取代乙酰乙酸乙酯)的乙醇鈉乙醇容液中滴加芐氯(或取代芐氯)，邊滴加邊攪拌，減壓蒸餾除去大部分乙醇后加水調(diào)PH二4-6，乙酸乙酯萃取。有機(jī)相減壓蒸餾除去溶劑得中間體，中間體不進(jìn)行分離純化，直接在醋酸中與l.l倍(摩爾比)的3-氨基-l，2，4-三氮唑反應(yīng)5h。然后加水稀釋過(guò)濾，濾餅用堿性溶液溶解，過(guò)濾。濾液酸化過(guò)濾，濾餅即化合物i。化合物i與P0C13反應(yīng)3h，減壓蒸餾除去P0C13，將殘余物溶于二氯甲烷與冰水的混合溶液。分液，二氯甲烷相減壓蒸餾除去溶劑，得化合物ii?；衔飅i與胺或醇在THF或乙醇中加熱回流5h，減壓蒸餾除去大部分溶劑析出固體，過(guò)濾得到化合物I<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>IR卜R2、R3、R4、R5、R、R7、Rs定義同上。三氮唑并[4,3-a]啼啶類(lèi)系列化合物是含有氮原子的雜環(huán)化合物，具有廣泛生物活性。它不但對(duì)常見(jiàn)淺表真菌感染具有較好的抑制活性，而且對(duì)深部真菌具有良好的殺菌活性。本發(fā)明原料易得、合成方法簡(jiǎn)單、收率較高，有很好的研究?jī)r(jià)值和應(yīng)用前景。具體實(shí)施例方式下面列舉實(shí)施例，結(jié)合表A對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例1(表A中化合物3的制備)表A中化合物l的制備40mmolEtONa溶于300ml乙醇，然后加入20mmol的乙酰乙酸乙酯，室溫下滴加20mmo1的芐氯。加完后繼續(xù)反應(yīng)4h，減壓蒸餾除去大部分乙醇，加入150ml水，調(diào)pH二46，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相減壓蒸餾除去溶劑，得到淺黃色液體。將淺黃色液體和22.5mmol3-氨基-l,2,4-三氮唑加到150ml醋酸中，加熱回流18h。然后將反應(yīng)液倒入冰水中，過(guò)濾。收集濾餅加到200ml飽和碳酸鈉溶液中，攪拌，過(guò)濾。濾液調(diào)pH^5，過(guò)濾，收集濾餅得化合物l，收率10-15%。表A中化合物2的制備將10mmo1化合物l加到10mlPOCl3中，加熱回流2.5h。然后減壓蒸餾除去POCl3，殘余物用200ml二氯甲垸和150ml冰水溶解，水相用200ml二氯甲烷萃取，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸餾除去溶劑，得到化合物2，收率92-95%。表A中化合物3的制備將5mmol化合物2、10mmol二甲胺鹽酸鹽、20mmol三乙胺加到30ml無(wú)水乙醇中，加熱回流5h。然后減壓蒸餾除去大部分乙醇，直至析出大部分固體。殘余物冷至(TC，抽濾，濾餅即為化合物3，收率卯-95%。表A中化合物6的制備將5mmo1化合物2，20mmol三乙胺加到30ml無(wú)水甲醇(或甲醇的THF溶液)中，加熱回流5h。然后減壓蒸餾除去大部分溶劑，直至析出大部分固體。殘余物冷至(TC，抽濾，濾餅即化合物6，收率90-95%。其它化合物的制備工藝同化合物3和6的制備工藝。6<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>抑菌試驗(yàn)本發(fā)明[l,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶系列藥物通過(guò)對(duì)10屬、18種18株真菌，采用二倍濃度稀釋法進(jìn)行體外抑菌實(shí)驗(yàn)，結(jié)果參見(jiàn)表B。供試菌株白色念珠菌(C.albicas)、熱帶念珠菌(C.tropicalis)、啤酒酵母菌(C.cecerisiae)、新生隱球菌(C.neoformans)、絮狀表皮癬菌(E.floccosum)、石膏樣毛癬菌(T.gypsoum)、紅色毛癬菌(T.vubrum)、斷發(fā)毛癬菌(T.tonsurans)、石膏樣小孢子菌(M.gypseum)、木霉菌(trichoderum)、黑曲霉菌(A.niger)、灰綠曲菌(A.glaucus)、普通青霉菌(P.commune)、裴氏瓶霉菌(P.pedrosoi)、卡氏枝孢霉菌(C.carionii)、緊密瓶霉菌(P.comaitum)、疣狀瓶霉菌(P.verrcosa)和申克孢子絲菌(S.schenekn)。菌液配制將充分發(fā)育的供試菌種移至5ml無(wú)菌生理鹽水內(nèi)，搗碎后超聲充分震蕩，去除塊狀不溶物質(zhì)，混勻，作為原菌液，測(cè)試時(shí)調(diào)整其濃度為106個(gè)細(xì)胞/ml后使用。供試化合物為II:IIII—1:Ri=-NHMe1I-2:Ri=-NMe2Rf——NO1I-3:\~/II-4:R產(chǎn)-OMe實(shí)驗(yàn)方法供試化合物用適量二甲亞砜溶解，再用無(wú)菌蒸餾水稀釋?zhuān)尤霚邕^(guò)菌的1%(熱)的葡萄糖蛋白陳瓊脂培養(yǎng)基中，樣品濃度為200，100,50,25,12.5,6.25,3.12,1.60mg/mL。接種供試菌以后，置恒溫烘箱培養(yǎng)5-7日以無(wú)真菌生長(zhǎng)的最高稀釋濃度為最小抑菌濃度MIC。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，[1,2，4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶系列化合物對(duì)真菌都有不同程度的抑制活性，其中一些化合物的抗真菌活性與對(duì)照品克霉唑相當(dāng)；有些甚至優(yōu)于克霉唑的抗真菌活性?？傊?，本發(fā)明涉及到的藥物，都是以乙酰乙酸乙酯(或取代乙酰乙酸乙酯)作為原料合成出來(lái)的，合成反應(yīng)過(guò)程中用到的各種化學(xué)試劑都是常見(jiàn)和簡(jiǎn)單易得的，反應(yīng)的收率也比較理想。通過(guò)藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)，表明該系列化合物對(duì)真菌都有不向程度的抑制活性。本發(fā)明化合物廣泛應(yīng)用于抗真菌領(lǐng)域，有廣闊的研究?jī)r(jià)值和應(yīng)用前景。表B體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果表MIC(mg/L)II-II-2II-3TT,clotrim3zo16II-4DMSO20%1A.glaucus502510010025一2A.niger1002510010025_3C.albicas25251005012.5—4C.carionii5010020010012.5—C加picalis2512.550502.12—6C.neoformans50252510012.5了E.floccosum12.5255010012.5—8T.gypsoum255025256.25—9P.commun6100502005050—10P.comaitum502520010012.5-11P.pedrosoi502510010012.5-12P.verrcosa2512.5505012.5-13C.cecerisiae506.25100謂2.12-14S.schenekn200501005025—15E.floccosum10025200謂25-16T.gypsoum5012.51005012.5-17T.tonsurans505020020025-18T.vubrum252510010012.5-9權(quán)利要求1.具有抗炎、抗真菌活性的[1，2，4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶類(lèi)化合物；2.根據(jù)權(quán)利要求l，[1，2，4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶類(lèi)化合物，其特征在于用通式(I)表示化合物其中R尸-CH2-、-CH2CH2-、-CH=CH-CH2-、-CH2CH2CH2-、Crdo烷烴基(烯烴基或炔烴基)R2=-NH2、-NMe2、-NEt2、-NMe、-NEt、、、N~~^、C3-do的伯胺或仲胺基、五元/六元環(huán)烴基胺或雜環(huán)烴基胺基、d-do的烴氧基。當(dāng)R4、R5、R6、R7中有一個(gè)或兩個(gè)為H時(shí)，其它的取代基分別為R4二H、X(卣素取代基)、-OMe、誦OEt、-Me、-Et、-NMe2、-CF3、C3-C6的烴基或取代烴基R5=H、X(1^素取代基)、-OMe、陽(yáng)OEt、-Me、-Et、-NMe2、-CF3、C3-C6的烴基或取代烴基R6=H、X(卣素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、誦Et、-NMe2、-CF3、C3-C6的烴基或取代烴基R7=H、X(卣素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、-Et、-NMe2、-CF3、C3-C6的烴基或取代烴基R^d-C6的烴基或取代烴基鹵素取代基是指氟、氯、溴、碘。3.根據(jù)權(quán)利要求1，[1,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶類(lèi)化合物的特征在于具有抗炎、抗真菌活性。4.根據(jù)權(quán)利要求1，[1,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶類(lèi)化合物可用于抗炎、抗真菌藥物。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了新的具有抗炎、抗真菌活性的含氮的并二環(huán)雜環(huán)化合物[1，2，4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶類(lèi)化合物。針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中抗真菌藥物少，毒性大的研發(fā)現(xiàn)狀，本發(fā)明進(jìn)行了新的[1，2，4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶類(lèi)化合物的設(shè)計(jì)合成，并進(jìn)行了抗真菌實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明這一類(lèi)化合物具有好的抗真菌活性。本發(fā)明中化合物的合成方法簡(jiǎn)單，原料易得。本發(fā)明產(chǎn)品可用于抗炎、抗真菌藥物。文檔編號(hào)C07D487/00GK101468989SQ20071030157公開(kāi)日2009年7月1日申請(qǐng)日期2007年12月25日優(yōu)先權(quán)日2007年12月25日發(fā)明者楊更亮,祝士國(guó),馬正月申請(qǐng)人:楊更亮