專利名稱：：具有抗炎、抗真菌活性的6H-硫色烯并[4,3-d][1,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶類化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明專利涉及含氮硫的雜環(huán)化合物，特別是涉及一種6H-硫色烯并[4，3-d][l,2,4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶系列抗炎、抗真菌合成藥物。
背景技術(shù)：
：真菌是一種與宿主細(xì)胞有相似結(jié)構(gòu)和生理代謝過程的真核細(xì)胞生物，按照真菌引起的感染部位不同，分為淺部菌感染和深部菌感染。淺部真菌感染主要是由各種癬菌引起，如手足癬、頭癬、體癬等，目前常以灰霉菌素、制霉菌素、酮康唑等作為治療藥物。深部真菌感染危害大，甚至危機(jī)生命，它主要由致病真菌引起，它包括白色念珠菌、新型隱球菌、曲霉菌、毛霉菌等，這些真菌屬于正常機(jī)體內(nèi)菌群成員，正常情況下不引起疾病，但是，長期大量使用廣譜抗生素、激素和免疫抑制劑等可以導(dǎo)致發(fā)病。近年來，深部真菌感染的發(fā)病率有逐年上升的趨勢。由于真菌的生物特性，一般抗真菌藥物往往在破壞真菌細(xì)胞同時，又會損傷宿主細(xì)胞，再加上耐藥菌株的不斷出現(xiàn)，使得真菌感染疾病的治療陷于兩難之境。截至目前，可應(yīng)用于臨床的療效好、毒副作用小、安全系數(shù)(safetyIndex,LD5/ED95)高的藥物寥寥無幾。兩性霉素B和三唑類氟康唑類藥物也因其毒副作用大而在應(yīng)用方面受限。因此，開發(fā)和探求一種高效低毒、具有治療預(yù)防雙重功效的廣譜和窄譜抗真菌活性的新化合物，成為當(dāng)前一項(xiàng)具有重要意義的研究工作。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于彌補(bǔ)上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處，而提供合成方法簡單、效果好的6H-硫色烯并[4,3-d][l,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶系列抗真菌合成藥物。本發(fā)明目標(biāo)物可以通過如下措施來達(dá)到抗炎、抗真菌6H-硫色烯并[4,3-d][l,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶類化合物，其特征在于用通式(I)、(II)表示化合物3III其中當(dāng)R,、R2、R3中有一個或兩個為H時，另外兩個或一個分別為R,=X(卣素取代基)、-OH、-OMe、-OEt、-Me、-Et、-NMe2、-NEt2、C3-C6烴基或取代烴基R2=X(卣素取代基)、-OH、Me、-Et、-OMe、-OEt、-CF3、-NMe2、-NEt2、CrC6烴基或取代烴基R3=X(齒素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、Et、-NMe2、-NEt2、C3-CV烴基或取代烴基R4=H、d-C6的鏈烴基或環(huán)烴基、苯基或取代苯基、雜芳環(huán)基或取代雜芳R5=H、-Me、-Et鹵素取代基是指氟、氯、溴、碘。6H-硫色烯并[4,3-d][l,2，4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶類藥物的合成方法是將苯硫酚溶于2MNaOH溶液中(可加入適量的乙醇)。另將P-氯丙酸(或其甲基酯、乙基酯)溶于計(jì)算量的Na2C03溶液中，然后與上述溶液混合超聲，回流6~8小時，除盡醇后抽濾。濾液用4MH2S04酸化，然后抽濾。水洗得到的濾餅并將其干燥，得化合物i，化合物i再用濃硫酸(或聚磷酸)縮合，分離純化得到化合物ii的粗品。室溫下，在芳香醛(取代芳香醛)的乙醇和10。/bNaOH混合溶液中滴加上述得到的化合物ii，加完后繼續(xù)反應(yīng)l小時。將反應(yīng)液冷卻抽濾。水洗濾餅并將其干燥，得化合物m。在150154'C的DMF中，化合物iii與3-氨基-1,2，4-三氮唑分別反應(yīng)2和IO小時。然后向反應(yīng)2小時的反應(yīng)體系中加入苯，析出固體過濾；將濾餅用苯和DMF重結(jié)晶，得到固體化合物I;向反應(yīng)10小時的體系加入甲醇析出固體過濾，收集濾餅得到固體化合物II。6H-硫色烯并4，3-dl[l，2,41三氮唑并4，3-al嘧啶類化合物的合成方法如下IIIR卜R2、R3、R4、Rs定義同上。本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)具有如下優(yōu)點(diǎn)6H-硫色烯并[4，3-d][l,2，4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶類系列化合物是含有氮硫原子的雜環(huán)化合物，具有廣泛生物活性。它不但對常見淺表真菌感染具有較好的抑制活性，而且對深部真菌具有良好的殺菌活性。本發(fā)明原料易得、合成方法簡單、收率較高，有很好的研究價值和應(yīng)用前景。具體實(shí)施例方式下面列舉實(shí)施例，結(jié)合表A對本發(fā)明加以進(jìn)一步說明。實(shí)施例l(表A中化合物3的制備)表A中化合物1(6-氟-硫色滿酮)的制備將50mmol氟代苯硫酚溶于2mol/LNaOH溶液中(可加入適量的乙醇)。另將8.2gJ3-氯丙酸(或10g其甲基酯)溶于50mmolNa2CO3溶液中，然后與上述溶液混合，超聲，回流6-8小時。然后減壓蒸餾除去大部分溶劑，抽濾。濾液用4mol/LH2S04酸化，攪拌1~2小時后抽濾。水洗濾餅并干燥，得卩-(6-氟-苯硫基)-丙酸，產(chǎn)率6575%。在室溫下，將13mmol卩-(6-氟-苯硫基)-丙酸溶解于20ml濃硫酸，放置18h。然后將反應(yīng)液冰解，過濾，濾餅用5~10°/。NaHC03溶液洗滌，洗至中性，抽濾。濾餅干燥，得淺黃色固體6-氟-硫色滿酮，產(chǎn)率80~85%。表A中化合物2(3-次芐基-6-氟-硫色滿酮)的制備控制溫度在2230°C條件下，在38mmol10%KOH溶液和7.4ml無水乙醇中，攪拌下加入30mmol6-氟-硫色滿酮，然后加入30mmol苯甲醛，反應(yīng)3.5h。然后將反應(yīng)液在0'C冰箱中放置10h后，抽濾，水洗濾餅至中性。濾餅用乙醇/水重結(jié)晶干燥得淺黃色3-次芐基-6-氟-硫色滿酮，產(chǎn)率8592%。表A中化合物3(2-氟-7-(4-甲氧基苯基)-7，12-二氫-6H-硫色烯[4,3-d][1,2，4〗三氮唑f4，3-a〕嘧啶)的制備在150154'C的5mlDMF中，6mmol3-次芐基-6-氟-硫色滿酮和7mmol3-氨基1,2,4-三氮唑反應(yīng)2h。然后向反應(yīng)液中加入適量苯，至有大量固體析出，抽濾。濾餅干燥，用DMF和苯重結(jié)晶，得到固體化合物3。I類其他化合物的制備工藝同化合物3的制備工藝。實(shí)施例2(表A中化合物13的制備)表A中化合物13(2-氟-7-(4-甲氧基苯基)-6H-硫色烯[4,3-d][l，2，4]三氮唑[4,3-a]嘧啶)的制備方法l:6mmol3—次芐基一6—氟-硫色滿酮和7mmol3-氨基1,2,4-三氮唑在5mlDMF中加熱回流15h。然后向反應(yīng)液中加入適量甲醇，抽濾，得到的濾餅干燥，即化合物13。表A中化合物13(2-氟-7-(4-甲氧基苯基)-6H-硫色烯[4,3-d][l,2，4]三氮唑[4,3-a]嘧啶)的制備方法2:控制溫度在456(TC條件下，將2.5咖ol溴代丁二6酰亞胺加到2mmol化合物3的甲醇懸浮液中，加熱回流2h。反應(yīng)液冷卻至室溫，減壓蒸餾，除去大部分反應(yīng)液，至有大量固體析出，加入少量DMF重結(jié)晶，過濾，得到的濾餅干燥，即化合物13。II類其他化合物的制備工藝同化合物13的制備工藝1或工藝2。表A部分合成化合物的理化常數(shù)編號分子式結(jié)構(gòu)式'H-畫R(CDC13)ESI(m/z+1)1C9H7FOS2.96-2.99(q,2H)，3.22-3.25(q,2H),7.11-7.16(m,lH),7.25-7.28(m,lH)，7,78-7.81(q，lH)—2.C16HnFOS4.11(s,2H),7.12-7.18(m,lH),7.28-7.31(q,lH),7.37-7.47(m,5H),7.81(s,lH),7,86-7.卯(q,1H)—3C19H15FN4OSn一n、義》3.12-3.16(d,1H),3.19-3.23(d,lH)，3.80(s,3H),6.05(s,lH),6.90-6.93(d,2H),7.00-7.03(m,lH),7.32-7.41(s,4H),7.63(s,lH),10.85(s,1H;)3674Ci9H15FN4Sn-n乂》2.27(s,3H),2,95-2.98(d,lH)，3,38陽3.42(d,lH),3.94-3.99(q，lH),6.15(s,lH),7.13-7.23(m,5H),7.37-7.4l(m,lH),7.56-7.63(m，1H),7.95(s,1H),9.99(s,1H)3517<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>抑菌試驗(yàn)本發(fā)明6H-硫色烯并[4,3-d][1,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶系列藥物通過對10屬、18種18株真菌，采用二倍濃度稀釋法進(jìn)行體外抑菌實(shí)驗(yàn)，結(jié)果參見表B。供試菌株白色念珠菌(C.albicas)、熱帶念珠菌(C.tropicalis)、啤酒酵母菌(C.cecerisiae)、新生隱球菌(C.neoformans)、絮狀表皮癬菌(E.floccosum)、石膏樣毛癬菌(T,gypsoum)、紅色毛癬菌(T.vubrum)、斷發(fā)毛癬菌(T.tonsurans)、石膏樣小孢子菌(M.gypseum)、木霉菌(trichoderum)、黑曲霉菌(A.niger)、灰綠曲菌(A.glaucus)、普通青霉菌(P.commune)、裴氏瓶霉菌(P.pedrosoi)、卡氏枝孢霉菌(C.carionii)、緊密瓶霉菌(P.comaitum)、疣狀瓶霉菌(P.verrcosa)和申克包子絲菌(S.schenekn)。菌液配制將充分發(fā)育的供試菌種移至5ml無菌生理鹽水內(nèi)，搗碎后超聲充分震蕩，去除塊狀不溶物質(zhì)，混勻，作為原菌液，測試時調(diào)整其濃度為106個細(xì)胞/ml后使用。供試化合物為附表B中的化合物3~13。實(shí)驗(yàn)方法供試化合物用適量二甲亞砜溶解，再用無菌蒸餾水稀釋，加入滅過菌的1%(熱)的葡萄糖蛋白陳瓊脂培養(yǎng)基中，樣品濃度為200，100,50,25,12.5，6.25,3.12，1.60mg/mL。接種供試菌以后，置恒溫烘箱培養(yǎng)5-7日以無真菌生長的最高稀釋濃度為最小抑菌濃度MIC。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，6H-硫色烯并[4，3-d][l,2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶對真菌都有不同程度的抑制活性，其中一些化合物的抗真菌活性與對照品克霉唑相當(dāng)，有些甚至優(yōu)于克霉唑的抗真菌活性。總之，本發(fā)明涉及到的藥物，都是以苯硫酚作為原料合成出來的，合成反應(yīng)過程中用到的各種化學(xué)試劑都是常見和簡單易得的，反應(yīng)的收率也比較理想。通過藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)，表明系列化合物對真菌都有不同程度的抑制活性。本發(fā)明化合物廣泛應(yīng)用于抗真菌領(lǐng)域，有廣闊的研究價值和應(yīng)用前景。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>權(quán)利要求1.具有抗炎、抗真菌活性的6H-硫色烯并[4，3-d][1，2，4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶類化合物。2.根據(jù)權(quán)利要求l，6H-硫色烯并[4,3-d][l，2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶類化合物,其特征在于用通式(I)、(II)表示化合物其中當(dāng)R卜R2、R3中有一個或兩個為H時，另外兩個或一個分別為R尸X(^素取代基)、-OH、-OMe、-OEt、-Me、-Et、-NMe2、-NEt2、C3-C6烴基或取代烴基R2=X(卣素取代基)、-OH、Me、-Et、-OMe、-OEt、-CF3、-NMe2、-NEt2、C3-C6烴基或取代烴基R3=X(囪素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、Et、-NMe2、-NEt2、。3-(:6烴基或取代烴基R4二H、d-Q的鏈烴基或環(huán)烴基、苯基或取代苯基、雜芳環(huán)基或取代雜芳環(huán)基R5=H、-Me、-Et鹵素取代基是指氟、氯、溴、碘。3.根據(jù)權(quán)利要求l，6H-硫色烯并[4,3-d][l，2,4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶類化合物的特征在于具有抗炎、抗真菌活性。4.根據(jù)權(quán)利要求l,6H-硫色烯并[4,3-d][l，2,4]三氮唑并[4,3-a]嘧啶類化合物可用于抗炎、抗真菌藥物。全文摘要本發(fā)明公開了新的具有抗炎、抗真菌活性的含氮硫的并四環(huán)雜環(huán)化合物6H-硫色烯并[4，3-d][1，2，4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶類化合物。針對現(xiàn)有技術(shù)中抗真菌藥物少，毒性大的研發(fā)現(xiàn)狀，本發(fā)明進(jìn)行了新的6H-硫色烯并[4，3-d][1，2，4]三氮唑并[4，3-a]嘧啶類化合物的設(shè)計(jì)合成，并進(jìn)行了抗真菌實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明這一類化合物具有好的抗真菌活性。本發(fā)明化合物合成方法簡單，原料易得，合成方法詳見說明書。本發(fā)明產(chǎn)品可用于抗炎、抗真菌藥物。文檔編號C07D495/00GK101469001SQ200710301578公開日2009年7月1日申請日期2007年12月25日優(yōu)先權(quán)日2007年12月25日發(fā)明者楊更亮,祝士國,賈苗輝,郭蘭弟,馬正月,魏春亮申請人:楊更亮;馬正月