一種用于制備axl抑制劑的高純度中間體的手性拆分方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用于制備Axl受體蛋白酪氨酸激酶抑制劑多環(huán)雜芳基取代三唑的中間體的高純度合成方法，該方法包含以下步驟：a)將消旋體化合物A溶于第一有機(jī)溶劑中，滴加手性酸的第二有機(jī)溶液，大量固體析出，滴加完畢后，升溫加熱至固體全溶，反應(yīng)液緩慢冷卻至室溫并攪拌過(guò)夜，大量光學(xué)化合物A?1的手性酸鹽呈固體析出；b)將步驟a中得到的體系減壓過(guò)濾，將所得固體在第三有機(jī)溶劑或第三有機(jī)溶劑與水的混合溶劑中，重結(jié)晶一次或兩次，得到高純度光學(xué)化合物A?1的手性酸鹽；c)將步驟b中得到的手性酸鹽用堿水解后制得光學(xué)化合物A?1；使用該方法能夠得到高純度的手性中間體A?1，其ee值高達(dá)99％，避免通過(guò)使用手性色譜分析方法制備單一異構(gòu)體，本方法操作簡(jiǎn)單、環(huán)境友好，節(jié)約成本、適合工業(yè)生產(chǎn)。
【專利說(shuō)明】
-種用于制備AXL抑制劑的高純度中間體的手性拆分方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種用于制備Axl抑制劑的中間體的高純度合成方法，具體的說(shuō)，本發(fā) 明設(shè)及可作為被稱Axl的受體蛋白酪氨酸激酶的抑制劑的多環(huán)雜芳基取代的Ξ挫的中間體 的高純度合成方法，本發(fā)明屬于有機(jī)合成領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] Axl (也稱為UF0、A服和Tyro7;核巧酸登錄號(hào)NM_021913和NM_001699;蛋白質(zhì)登錄 號(hào)NP_068713和NP_001690)是包含C-末端細(xì)胞外配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域和含有催化結(jié)構(gòu)域的N-末 端細(xì)胞質(zhì)區(qū)域的受體蛋白酪氨酸激酶。Axl受體酪氨酸激酶通過(guò)結(jié)合維生素 K依賴性蛋白 Gas 6(g;rowth arrest-specific 6)將細(xì)胞外基質(zhì)信號(hào)傳導(dǎo)到胞漿內(nèi)。Axl可參與多個(gè)細(xì)胞 內(nèi)進(jìn)程，包括細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移、聚集和抗炎活性。
[0003] 里格爾藥品股份有限公司在研的多環(huán)雜芳基取代的Ξ挫化合物R428(結(jié)構(gòu)式如下 式所示，CAS:1037624-75-4，l-(6,7-二氨-5H-苯并[6,7]環(huán)庚Ξ締并[l，2-c]化嗦-3-基)- N3-(7-(S)-(化咯燒-1-基)-6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締-2-基)-lH-l，2,4-Ξ挫-3,5- 二胺)是一種高選擇性的Axl抑制劑，IC5G值為14nM"R428在低納摩爾濃度下就可W阻斷Axl 的催化和前癌活性。納摩爾級(jí)R428抑制Axl活性并阻斷Axl依賴的過(guò)程，包括Akt憐酸化、乳 腺癌細(xì)胞入侵、促炎因子的產(chǎn)生。
[0004]
[0005] 對(duì)于 R428 的合成，胖02010005876、胖0201008：3465、胖02008083367、胖02008083356中 公開的方法均如下式所示：
[0006]
[0007] 首先將1-(2-氨基-6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締 -7-基川比咯燒(化合物A)和二 苯基氯基碳亞胺醋的混合物在異丙醇中反應(yīng)制備得到外消旋的苯基Ν'-氯基-N-(7-川比咯 燒-1-基)-6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締 -2-基)碳亞胺酷胺醋(化合物B)，需要通過(guò)手性 柱色譜分離制備單一對(duì)映異構(gòu)體化合物B-1。將所得化合物B-1與化合物C反應(yīng)制備光學(xué)純 的R428。通過(guò)手性柱色譜分離制備單一對(duì)映異構(gòu)體的方法成本較高，不適于工業(yè)生產(chǎn)方法； 另外，W02008083367中指出化合物B的溶解性在甲醇中僅為30mg/mL，因此手性柱色譜分離 前，需要大量的溶劑溶解消旋體樣品，增加了成本、延長(zhǎng)了制備周期，運(yùn)些勢(shì)必將影響目標(biāo) 化合物的工業(yè)化的生產(chǎn)。
[0008] 本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)使用廉價(jià)的手性拆分試劑拆分消旋體化合物1-(2-氨基-6,7,8,9- 四氨-5H-苯并[7]輪締-7-基川比咯燒(化合物A)，制備高純度的關(guān)鍵中間體(S)-1-(2-氨基- 6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締-7-基）化咯燒(化合物A-1)，將化合物A-1按照上述專利中 的合成方法即可制備光學(xué)純的R428。高純度（S)-1-(2-氨基-6,7,8,9-四氨-5護(hù)苯并[7]輪 締-7-基)化咯燒的制備方法操作簡(jiǎn)便，收率高，安全性好，環(huán)境友好，成本低，有利于工藝化 生產(chǎn)。
[0009]


【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 本發(fā)明的目的是提供了一種用于制備Axl的受體蛋白酪氨酸激酶的抑制劑的多環(huán) 雜芳基取代的Ξ挫的中間體化合物A-1的合成方法。
[0011] 本發(fā)明的拆分方法，包含W下步驟：
[0012] 步驟a:將消旋體化合物A溶于第一有機(jī)溶劑中，滴加手性酸的第二有機(jī)溶液，大量 固體析出，滴加完畢后，升溫加熱至固體全溶，反應(yīng)液緩慢冷卻至室溫并攬拌過(guò)夜，大量光 學(xué)化合物A-1的手性酸鹽呈固體析出；
[0013] 步驟b:將步驟a中得到的體系減壓過(guò)濾，將所得固體在第Ξ有機(jī)溶劑或第Ξ有機(jī) 溶劑與水的混合溶劑中，重結(jié)晶一次或兩次，得到高純度光學(xué)化合物A-1的手性酸鹽；
[0014] 步驟C:將步驟b中得到的手性酸鹽用堿水解后制得光學(xué)化合物A-1;
[0015] 步驟a中，所述手性酸為本領(lǐng)域常用手性酸，優(yōu)選為D-(-)-酒石酸、R-扁桃酸、心焦 谷氨酸，更優(yōu)選為0-(-)-酒石酸;化合物A與手性酸的摩爾比為1:0.9~1.1;所述第一和第 二有機(jī)溶劑相同或不同的選自甲醇、乙醇、異丙醇、乙臘中的一種或多種混合溶劑，優(yōu)選的， 所述第一和第二有機(jī)溶劑相同或不同的選自甲醇、乙醇或兩者的混合溶劑。所述加熱反應(yīng) 溫度為60~90°C，優(yōu)選為65~80°C。
[0016] 步驟b中所述第Ξ有機(jī)溶劑相同或不同的選自甲醇、乙醇、異丙醇、乙臘中的一種 或多種，優(yōu)選為甲醇或乙醇或其混合溶劑。
[0017] 進(jìn)一步的，所述步驟C為將步驟b中得到的鹽溶于水或水與第四有機(jī)溶劑的混合溶 劑中，用堿調(diào)pH值至10~11，加入第五有機(jī)溶劑萃取，分液，有機(jī)相洗涂，干燥，過(guò)濾，濃縮； 所述第四有機(jī)溶劑選自甲醇、乙醇、異丙醇、乙臘中的一種或多種;所述第五有機(jī)溶劑選自 二氯甲燒、乙酸乙醋或W上兩種溶劑分別與甲醇或乙醇的混合溶劑;所述堿選自碳酸鋼、碳 酸鐘、碳酸氨鋼、碳酸氨鐘、28-30 %的氨水溶液，最優(yōu)選為28-30 %的氨水溶液；
[0018] 本發(fā)明方法中拆分用的手性酸的種類、溶劑與拆分的效果有很大的關(guān)系，具體拆 分結(jié)果見(jiàn)下表：
[0019]
[0020] 所述的消旋體化合物A參考W02010005876、W02010083465、W02008083367、 W02008083356中公開的方法制備得到。
[0021] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：
[0022] 利用手性酸成鹽的方法，對(duì)制備可作為Axl的受體蛋白酪氨酸激酶抑制活性的多 環(huán)雜芳基取代的Ξ挫類化合物的關(guān)鍵中間體A進(jìn)行手性拆分，得到高純度的手性中間體A- 1，其ee值高達(dá)99%。避免通過(guò)使用手性色譜分析方法制備單一異構(gòu)體，本方法操作簡(jiǎn)單、環(huán) 境友好，節(jié)約成本、適合工業(yè)生產(chǎn)。為類似化合物的手性合成提供方法學(xué)參考。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，運(yùn)些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條 件進(jìn)行。
[0024] 實(shí)施例中所用的原料或試劑除特別說(shuō)明之外，均市售可得。
[0025] 實(shí)施例中所述的室溫均指20-35Γ。除非特別指出，所述的試劑不經(jīng)純化直接使 用，所有溶劑均購(gòu)自商業(yè)化供應(yīng)商。反應(yīng)通過(guò)化C分析和/或通過(guò)LC-MS分析，通過(guò)起始材料 的消耗來(lái)判斷反應(yīng)的終止。分析用的薄層層析(TLC)是在預(yù)涂覆硅膠60F254 0.25毫米板的 玻璃板化MD化學(xué)品公司化MD化emical S))上進(jìn)行的，用UV光（254皿)和/或硅膠上的艦顯 象，和/或與化C染色物如醇制憐鋼酸、水合巧Ξ酬溶液、高儘酸鐘溶液或硫酸高姉溶液一起 加熱。
[00%] 1H-NMR譜是在萬(wàn)瑞安-默丘利-VX400 (Varian Mercu巧-VX400)儀上，在400MHz操 作下記錄的。
[0027]本發(fā)明中使用的縮寫具有本領(lǐng)域常規(guī)含義，如:DCM表示二氯甲燒。
[00%]實(shí)施例1 (S) -1-( 2-氨基-6，7，8，9-四氨-5H-苯并[7 ]輪締-7-基川比咯燒的制備
[0029] 將1 - (2-氨基-6，7，8，9-四氨-5H-苯并[7 ]輪締-7-基川比咯燒(65g，43.4mmo 1)溶解 于甲醇(300mL)中，滴加 D-(-)-酒石酸(40.3g，268mmo 1)的甲醇(300mL)溶液中，大量固體析 出，升溫至65Γ，待固體全部溶解，停止加熱，緩慢冷卻至室溫，攬拌過(guò)夜。大量固體析出，過(guò) 濾，真至干燥得到黃色固體顆粒(S)-1-(2-氨基-6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締-7-基）R比 咯燒的酒石酸鹽(56g)。
[0030] 將所得固體在甲醇/水(900ml，v/v = 9/l)的混合溶劑中重結(jié)晶兩次，過(guò)濾，真空干 燥得到黃色固體顆粒(S)-1-(2-氨基-6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締-7-基川比咯燒的酒石 酸鹽（50g，ee 值 99%)。
[0031 ] 將上述所得固體分散于水(500血)和甲醇（150mL)的混合體系中，緩慢加入28 %~ 30 %氨水溶液調(diào)節(jié)抑至10~11，用DCM巧00血X 4)萃取，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鋼干燥，過(guò)濾，濃 縮得到暗紅色油狀液體化合物A-1 (28.6g，ee值99 % )。
[0032] 1!1醒尺（4001監(jiān)，〔0(：13):56.89-6.87((1，^)，6.48((1，巧），6.45-6.42((1(1，^)， 3.51(br s,2H),2.81-2.57(m,9H),2.15-2.13(m,2H),1.82(m,4H),1.51-1.49(m,2H)；ESI/ MS:m/z = 231(M+H) + .
[0033] 實(shí)施例2(S)-1-(2-氨基-6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締-7-基川比咯燒的制備
[0034] 將1 - (2-氨基-6，7，8，9-四氨-5H-苯并[7 ]輪締-7-基川比咯燒（1 Og，43.4mmo 1)溶解 于乙醇(50ml)中，滴加 D-(-)-酒石酸(6.84g，45.6mmo 1)的甲醇(50mL)溶液，大量固體析出， 升溫至7(TC，待固體全部溶解，停止加熱，緩慢冷卻至室溫，攬拌過(guò)夜。大量固體析出，過(guò)濾， 真空干燥得到黃色固體顆粒(S)-1-(2-氨基-6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締-7-基)化咯燒 的酒石酸鹽(8g)。
[0035] 將所得固體在乙醇/水（lOOml/lOml)的混合溶劑中重結(jié)晶兩次，過(guò)濾，真空干燥得 到黃色固體顆粒(S)-1-(2-氨基-6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締-7-基川比咯燒的酒石酸鹽 (6.8g，ee 值 98%)。
[0036] 將上述所得所得固體分散于水(70mL)和乙醇（lOmL)的混合體系中，緩慢加入28% ~30 %氨水溶液調(diào)節(jié)抑至10~11，用DCM( lOOmL X 3)萃取有機(jī)層用無(wú)水硫酸鋼干燥，過(guò)濾， 濃縮得到暗紅色油狀液體化合物A-l(4g，ee值98% )。
[0037] 實(shí)施例3(S)-1-(2-氨基-6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締-7-基川比咯燒的制備 [003引將1-(2-氨基-6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締-7-基）化咯燒（5g，21.7mmol)溶解 于乙臘（1201111)中，滴加1?-扁桃酸(6.84邑，19.53111111〇1)的乙臘(501^)溶液中，升溫至80°(：，待 固體全部溶解，停止加熱，緩慢冷卻至室溫，攬拌過(guò)夜。大量固體析出，過(guò)濾，真空干燥得到 黃色固體顆粒(S)-1-(2-氨基-6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締-7-基川比咯燒的扁桃酸鹽 (3.0邑)。
[0039] 將所得固體在乙臘(50ml)中重結(jié)晶兩次，過(guò)濾，真空干燥得到黃色固體顆粒(S)- 1 -(2-氨基-6，7，8，9-四氨-5H-苯并[7]輪締-7-基川比咯燒的扁桃酸鹽(2.1 g，ee值97.5 % )。
[0040] 將上述所得固體溶于水(20mL)中，冰水浴條件下，緩慢加入飽和碳酸鋼溶液調(diào)節(jié) pH至10~11，用DCM-甲醇的混合溶液(v/v = 9:1，50mL X 4)萃取有機(jī)層用無(wú)水硫酸鋼干燥， 過(guò)濾，濃縮得到暗紅色油狀液體化合物A-1 (1.25g，ee值97.5 % )。
[0041 ]實(shí)施例4( S) -1-( 2-氨基-6，7，8，9-四氨-5H-苯并[7 ]輪締-7-基川比咯燒的制備
[0042] 將1 - (2-氨基-6，7，8，9-四氨-5H-苯并[7 ]輪締-7-基川比咯燒（1 Og，43.4mmo 1)分散 于異丙醇（150ml)中，滴加心焦谷氨酸(6.17g，47.74mmol)的異丙醇(50mU溶液中，大量固 體析出，升溫至8(TC，待固體全部溶解，停止加熱，緩慢冷卻至室溫，攬拌過(guò)夜。大量固體析 出，過(guò)濾，真空干燥得到黃色固體顆粒(S)-1-(2-氨基-6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締-7- 基川比咯燒的焦谷氨酸鹽(5.5g)。
[0043] 將所得固體在異丙醇（70ml)中重結(jié)晶兩次，過(guò)濾，真空干燥得到黃色固體顆粒 (S)-1-(2-氨基-6,7,8,9-四氨-5H-苯并[7]輪締-7-基）化咯燒的焦谷氨酸鹽(4.8g，ee值 92%)。
[0044] 將上述所得所得固體分散于水(50mL)和甲醇(3mL)的混合體系中，0°C件下緩慢加 入28-30%氨水溶液調(diào)節(jié)pH至10~11，用乙酸乙醋（50mLX 4)萃取有機(jī)層用無(wú)水硫酸鋼干 燥，過(guò)濾，濃縮得到暗紅色油狀液體化合物A-1 (2g，ee值92 % )。
[0045] 在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請(qǐng)中引用作為參考，就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨(dú) 引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可 W對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，運(yùn)些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范 圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種卜(2-氨基-6，7，8，9-四氫-5H-苯并[7 ]輪烯-7-基)啦咯烷消旋體化合物A的拆 分方法，其特征在于，包含以下步驟： 步驟a:將消旋體化合物A溶于第一有機(jī)溶劑中，滴加手性酸的第二有機(jī)溶液，大量固體 析出，滴加完畢后，升溫加熱至固體全溶，反應(yīng)液緩慢冷卻至室溫并攪拌過(guò)夜，大量光學(xué)化 合物A-1的手性酸鹽呈固體析出； 步驟b:將步驟a中得到的體系減壓過(guò)濾，將所得固體在第三有機(jī)溶劑或第三有機(jī)溶劑 與水的混合溶劑中，重結(jié)晶一次或兩次，得到高純度光學(xué)化合物A-1的手性酸鹽； 步驟c:將步驟b中得到的手性酸鹽用堿水解后制得光學(xué)化合物A-1; 所述第一、第二和第三有機(jī)溶劑相同或不同的選自甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈中的一種 或多種； 所述手性酸為本領(lǐng)域常用手性酸。2. 如權(quán)利要求1所述拆分方法，其特征在于，所述步驟c為將步驟b中得到的鹽溶于水或 水與第四有機(jī)溶劑的混合溶劑中，用堿調(diào)pH值至10~11，加入第五有機(jī)溶劑萃取，分液，有 機(jī)相洗滌，干燥，過(guò)濾，濃縮； 所述第四有機(jī)溶劑選自甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈中的一種或多種； 所述第五有機(jī)溶劑選自二氯甲烷、乙酸乙酯或以上兩種溶劑分別與甲醇或乙醇的混合 溶劑。3. 如權(quán)利要求1-2所述拆分方法，其特征在于，步驟a中，所述手性酸選自D-(-)_酒石 酸、R-扁桃酸、L-焦谷氨酸，化合物A與手性酸的摩爾比為1:0.9~1.1。4. 如權(quán)利要求3所述拆分方法，其特征在于，所述手性酸選自D-(-)-酒石酸，所述第一 和第二有機(jī)溶劑相同或不同的選自甲醇、乙醇或兩者的混合溶劑。5. 如權(quán)利要求1-2所述拆分方法，其特征在于，步驟a中，所述升溫加熱溫度為60~90 Γ。6. 如權(quán)利要求1-2所述拆分方法，其特征在于，步驟b中，所述第三有機(jī)溶劑選自甲醇或 乙醇或其混合溶劑。7. 如權(quán)利要求1-2所述拆分方法，其特征在于，步驟c中所述堿選自碳酸鈉、碳酸鉀、碳 酸氫鈉、碳酸氫鉀、28-30 %的氨水溶液。
【文檔編號(hào)】C07D295/135GK106083764SQ201610542503
【公開日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年7月11日
【發(fā)明人】倪治中, 王業(yè)發(fā), 馬濤, 楊惠, 孫昱飛, 周治國(guó), 高強(qiáng), 鄭保富
【申請(qǐng)人】上海皓元生物醫(yī)藥科技有限公司