專利名稱：羥烷基取代的吡啶并－7－嘧啶－7－酮的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及吡啶并嘧啶及其衍生物。具體而言，本發(fā)明提供2，6-二取代的7-氧代-吡啶并[2，3-d]嘧啶，它們的制造方法，包含這些化合物的藥物制劑和使用它們的方法。
促分裂原活化蛋白激酶(MAP)是一類脯氨酸定向的絲氨酸/蘇氨酸激酶，這類激酶通過雙磷酸化活化它們的底物。所述激酶是通過多種信號活化的，這些信號包括營養(yǎng)和滲透應激、UV光、生長因子、內毒素以及炎性細胞因子。一組MAP激酶是p38激酶組，包括多種同工型(例如p38α、p39β、p38γ和p38δ)。p38激酶負責磷酸化和活化轉錄因子以及其它激酶，并且被物理和化學應激、促炎細胞因子和細菌脂多糖活化。
更為重要的是，據(jù)顯示p38磷酸化產(chǎn)物介導了炎性細胞因子，包括TNF、IL-1和環(huán)加氧酶-2的生成。這些細胞因子每一個都牽連許多疾病狀態(tài)和病癥。例如，TNF-α是主要由活化的單核細胞和巨噬細胞產(chǎn)生的細胞因子。過量或不受控制地產(chǎn)生TNF-α已經(jīng)被認為是類風濕性關節(jié)炎發(fā)病的起因之一。最近，抑制TNF的生成已經(jīng)顯示出在治療炎性病癥，炎性腸病，多發(fā)性硬化和哮喘中有廣泛應用。
TNF還涉及病毒感染，例如HIV，流感病毒和皰疹病毒，其中包括1-型單純皰疹病毒(HSV-1)，2-型單純皰疹病毒(HSV-2)，細胞肥大病毒(CMV)，水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)，EB病毒，人皰疹病毒-6(HHV-6)，人皰疹病毒-7(HHV-7)，人皰疹病毒-8(HHV-8)，假狂犬病和鼻氣管炎。
類似地，IL-1是由活化的單核細胞和巨噬細胞產(chǎn)生的，并且在許多病理生理響應包括類風濕性關節(jié)炎、發(fā)熱和骨再吸收的減少中起作用。
另外，p38的卷入已經(jīng)牽連到中風，阿爾茨海默氏病，骨關節(jié)炎，肺損傷，膿毒性休克，血管生成，皮炎，牛皮癬和特應性皮炎。J.Exp.Opin.Ther.Patents，2000，10(1)。
通過抑制p38激酶而抑制這些細胞因子將有益于控制、減輕和緩和許多這些疾病狀態(tài)。
WO 96/34867中公開了作為介導細胞增殖的蛋白酪氨酸激酶的抑制劑的某些6-芳基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮、-7-亞胺和7-硫酮。WO 96/15128中還公開了其它的6-芳基-吡啶并[2，3-d]嘧啶和二氮雜萘作為酪氨酸激酶抑制劑。WO 98/33798中公開了作為細胞周期蛋白依賴性激酶的抑制劑的6-烷基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。EP 0 278 686A1中公開了作為二氫葉酸還原酶抑制劑的某些4-氨基-吡啶并嘧啶。
本發(fā)明的一個實施方案提供式I化合物 其中X1是O、C＝O或S(O)n，其中n是0、1或2；Ar1是芳基或雜芳基；R1是烷氧基烷基，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，雜環(huán)基，羥烷基或羥基環(huán)烷基；并且R2是羥烷基、氧代烷基或羥基環(huán)烷基。
盡管已知某些取代的吡啶并-7-嘧啶-7-酮在體外抗p38試驗中具有酶活性(參見，例如US-2003-0171584-A1，該文獻通過引用以全文形式結合在此)，但是本發(fā)明的發(fā)明人卻令人驚奇和出乎意料地發(fā)現(xiàn)，與先前公開的化合物相比，式I化合物在脂多糖(LPS)誘導的人全血半胱氨酸生成試驗中具有明顯更高的活性。
式I化合物是蛋白激酶抑制劑，并且在體內表現(xiàn)出抗p38的有效活性。相對于細胞周期蛋白依賴性激酶和酪氨酸激酶，它們是選擇性的抗p38激酶。因此，本發(fā)明的化合物可用于治療由促炎細胞因子如TNF和IL-1介導的疾病。因而，本發(fā)明的另一方面提供一種治療p38介導的疾病或病癥的方法，其中將治療有效量的式I化合物給藥到患者。
除非另外聲明，在說明書和權利要求書中使用的如下術語具有下面所給的含義。
“烷氧基烷基”是指式Ra-O-Rb-部分，其中Ra是烷基并且Rb是此處定義的亞烷基。烷氧基烷基的示例包括，例如，2-甲氧基乙基，3-甲氧基丙基，1-甲基-2-甲氧基乙基，1-(2-甲氧基乙基)-3-甲氧基-丙基和1-(2-甲氧基乙基)-3-甲氧基丙基。
“烷基”是指1到6個碳原子的線性飽和一價烴基或者3～6個碳原子的支鏈飽和一價烴基，例如甲基，乙基，丙基，2-丙基，正丁基，異丁基，叔丁基，戊基等。
“亞烷基”是指1～6個碳原子的線性飽和二價烴基，或者3～6個碳原子的支鏈飽和二價烴基，例如，亞甲基，亞乙基，2，2-二甲基亞乙基，亞丙基，2-甲基亞丙基，亞丁基，亞戊基等。
“芳基”是指任選獨立地被一個或多個取代基，優(yōu)選1、2或3個取代基取代的一價單環(huán)或雙環(huán)芳族烴基，所述取代基優(yōu)選選自烷基，羥基，烷氧基，鹵代烷基，鹵代烷氧基，鹵代基，硝基，氰基，氨基，一烷基氨基，二烷基氨基，亞甲基二氧基，亞乙基二氧基和酰基。特別優(yōu)選的芳基取代基是鹵化物。更具體而言，術語芳基包括但不限于，苯基，氯苯基，氟苯基，二氟苯基(例如2，4-和2，6-二氟苯基)，甲氧基苯基，1-萘基，2-萘基和它們的衍生物。
“環(huán)烷基”是指3～7個環(huán)碳的飽和一價環(huán)狀烴基，例如環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)己基，4-甲基-環(huán)己基等。環(huán)烷基可以任選被一個或多個取代基，優(yōu)選1、2、或3個取代基取代。優(yōu)選環(huán)烷基的取代基選自烷基，羥基，烷氧基，鹵代烷基，鹵代烷氧基，鹵代基，氨基，一烷基氨基，二烷基氨基和?；?。特別優(yōu)選的環(huán)烷基的取代基包括烷基，羥基，烷氧基，鹵代烷基，鹵代烷氧基和鹵代基。尤其優(yōu)選的環(huán)烷基取代基包括烷基，羥基，烷氧基和鹵代基。
“環(huán)烷基烷基”是指式Rc-Rd-部分，其中Rc是此處定義的環(huán)烷基，Rd是此處定義的亞烷基。
“鹵代基”和“鹵化物”在此處可以交互使用，是指氟、氯、溴或碘。優(yōu)選的鹵化物是氟和氯，其中氟是特別優(yōu)選的鹵化物。
“鹵代烷基”是指被一個或多個相同或不同的鹵素原子取代的烷基，例如-CH2Cl，-CF3，-CH2CF3，-CH2CCl3等。
“雜芳基”是指含有至少一個芳環(huán)的5～12個環(huán)原子的一價單環(huán)或雙環(huán)基，所述的芳環(huán)含有1、2或3個選自N、O或S(優(yōu)選N或O)的環(huán)雜原子，剩余環(huán)原子為C，應當理解雜芳基的連接點在芳環(huán)上。雜芳環(huán)任選獨立地被一個或多個取代基，優(yōu)選1或2個取代基取代，所述的取代基選自烷基，鹵代烷基，羥基，烷氧基，鹵代基，硝基或氰基。更具體而言，術語雜芳基包括但不限于，吡啶基，呋喃基，噻吩基，噻唑基，異噻唑基，三唑基，咪唑基，異噁唑基，吡咯基，吡唑基，嘧啶基，苯并呋喃基，四氫苯并呋喃基，異苯并呋喃基，苯并噻唑基，苯并異噻唑基，苯并三唑基，吲哚基，異吲哚基，苯并噁唑基，喹啉基，四氫喹啉基，異喹啉基，苯并咪唑基，苯并異噁唑基或苯并噻吩基，咪唑[1，2-a]-吡啶基，咪唑[2，1-b]噻唑基，以及它們的衍生物。
“雜環(huán)基”是指3～8個環(huán)原子的飽和或不飽和非芳族環(huán)基，所述環(huán)原子中有1或2個環(huán)原子是選自N、O或S(O)n(其中n是0～2的整數(shù))，優(yōu)選N或O的雜原子，剩余環(huán)原子是C，其中1或2個碳原子可以任選被羰基取代。雜環(huán)基環(huán)可以任選獨立地被1、2或3個取代基取代，所述取代基選自烷基，鹵代烷基，羥烷基，鹵代基，硝基，氰基，氰基烷基，羥基，烷氧基，氨基，一烷基氨基，二烷基氨基，芳烷基，-(X)n-C(O)Re(其中X是O或NRf，n是0或1，Re是氫(其中X是NRf)，烷基，鹵代烷基，羥基(當n是0時)，烷氧基，氨基，一烷基氨基，二烷基氨基，或者任選取代的苯基，并且Rf是H或烷基)，-亞烷基-C(O)Rg(其中Rg是烷基，-ORh或NRiRj，Rh是氫，烷基或鹵代烷基，并且Ri和Rj獨立地為氫或烷基)，或者-S(O)nRk(其中n是0～2的整數(shù))，使得當n是0時，Rk是氫，烷基，環(huán)烷基或環(huán)烷基烷基，而當n是1或2時，Rk是烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，氨基，酰氨基，一烷基氨基或二烷基氨基。特別優(yōu)選的雜環(huán)基取代基包括烷基，鹵代烷基，羥烷基，鹵代基，羥基，烷氧基，氨基，一烷基氨基，二烷基氨基，芳烷基和-S(O)nRk。具體而言，術語雜環(huán)基包括但不限于，四氫呋喃基，吡啶基，四氫吡喃基，哌啶子基，N-甲基哌啶-3-基，哌嗪子基，N-甲基吡咯烷-3-基，3-吡咯烷基，嗎啉代，硫代嗎啉代，硫代嗎啉代-1-氧化物，硫代嗎啉代-1，1-二氧化物，4-(1，1-二氧代-四氫-2H-硫代吡喃基)，吡咯啉基，咪唑啉基，N-甲磺?；?哌啶-4-基，以及它們的衍生物，其中每一個都可以被任選取代。
“羥烷基”是指被一個或多個，優(yōu)選1、2或3個羥基取代的此處定義的烷基部分，條件是同一碳原子攜帶的羥基數(shù)不超過1個。代表性實例包括但不限于，羥甲基，2-羥基乙基，2-羥基丙基，3-羥基丙基，1-(羥甲基)-2-甲基丙基，2-羥基丁基，3-羥基丁基，4-羥基丁基，2，3-二羥基丙基，2-羥基-1-羥甲基乙基，2，3-二羥基丁基，3，4-二羥基丁基和2-(羥甲基)-3-羥基丙基。
“羥基環(huán)烷基”是指此處定義的環(huán)烷基部分，其中環(huán)烷基中的1、2或3個氫原子已經(jīng)被羥基取代基取代。代表性的實例包括但不限于，2-、3-或4-羥基環(huán)己基等。
“離去基團”具有在合成有機化學中通常和其有關的含義，即能夠被親核試劑取代的原子或基團，包括鹵素(例如氯，溴，和碘)，烷磺酰氧基，芳磺酰氧基，烷羰基氧基(例如乙酰氧基)，芳羰基氧基，甲磺酰氧基，甲苯磺酰氧基，三氟甲磺酰氧基，芳氧基(例如2，4-二硝基苯氧基)，甲氧基，N，O-二甲基羥氨基等。
“任選取代的苯基”是指任選獨立地被一個或多個取代基，優(yōu)選1或2個取代基取代的苯環(huán)，所述取代基選自烷基，羥基，烷氧基，鹵代烷基，鹵代烷氧基，鹵代基，硝基，氰基，氨基，亞甲基二氧基，亞乙基二氧基和?；?。
“氧代烷基”是指被一個或多個羰基氧部分(即=O)取代的烷基，例如式Rz-C(＝O)-Ry-的部分，其中Ry是亞烷基，Rz是烷基。代表性的氧代烷基包括2-丙酮-3-基，2-甲基-3-丁酮-4-基等。
“可藥用的賦形劑”表示可用于制備藥物組合物的賦形劑，這些賦形劑通常安全，無毒，既無生物不適宜性也無其它不適宜性。該術語包括可用于獸藥和人用藥用途的賦形劑。說明書和權利要求書中使用的“可藥用的賦形劑”包括一種和一種以上的這樣的賦形劑。
化合物的“可藥用鹽”表示藥學上可接收的并且具有所需的母體化合物的藥理活性的鹽。這樣的鹽包括(1)和無機酸形成的酸加成鹽，無機酸如鹽酸，氫溴酸，硫酸，硝酸，磷酸等；或者和有機酸形成的酸加成鹽，有機酸如乙酸，丙酸，己酸，環(huán)戊烷丙酸，乙醇酸，丙酮酸，乳酸，丙二酸，琥珀酸，蘋果酸，馬來酸，富馬酸，酒石酸，檸檬酸，苯甲酸，3-(4-羥基苯甲?；?苯甲酸，肉桂酸，扁桃酸，甲磺酸，乙磺酸，1，2-乙烷-二磺酸，2-羥基乙磺酸，苯磺酸，4-氯苯磺酸，2-萘磺酸，4-甲苯磺酸，樟腦磺酸，4-甲基雙環(huán)[2.2.2]-辛-2-烯-1-羧酸，葡庚糖酸，3-苯基丙酸，三甲基乙酸，叔丁基乙酸，十二烷基硫酸，葡糖酸，谷氨酸，羥基萘甲酸，水楊酸，硬脂酸，粘康酸等；或者(2)當母體化合物中存在的酸性質子被金屬離子取代時形成的鹽，金屬離子如堿金屬離子，堿土金屬離子或鋁離子；或者和有機堿，例如乙醇胺，二乙醇胺，三乙醇胺，三甲胺(tromethamine)，N-甲基葡糖胺配位時形成的鹽。
術語“前藥”和“前體藥”在此處可互換使用，是指當將這種前藥向哺乳動物對象給藥時，在體內釋放出根據(jù)式I的活性母體藥物的任何化合物。式I化合物的前藥的制備方法是通過改性式I化合物中存在的一個或多個官能團，使改性物可以在體內分裂，釋放出母體化合物。前藥包括這樣的式I化合物，其中將式I化合物中的羥基，氨基，氫硫基，羧基或羰基結合到任何基團上，該基團可以在體內分裂，分別產(chǎn)生游離的羥基，氨基或氫硫基。前藥的實例包括但不限于，式I化合物中羥基官能團的酯(例如乙酸酯，二烷基氨基乙酸酯，甲酸酯，磷酸酯，硫酸酯和苯甲酸酯衍生物)和氨基甲酸酯(例如N，N-二甲基氨基羰基)，羧基官能團的酯基(例如乙基酯，嗎啉代乙醇酯)，氨基官能團的N-?；苌?例如N-乙酰基)，N-曼尼希堿，西佛堿和烯胺酮(enaminone)，酮和醛官能團的肟，醛縮醇，酮縮醇和烯醇酯，等等，參見Bundegaard，“Design of Prodrugs”p1-92，Elsevier，New York-Oxford(1985)。
“保護基”是指當連接到分子中活性基團上時掩蔽、減少或防止所連接基團的反應性的原子團。保護基的實例可以參見Green和Wuts，Protective Groups in Organic Chemistry(Wiley，1991年第二版)，以及Harrison和Harrison等，Compendium of Synthetic Organic Methods，1-8卷(John Wiley and Sons，1971-1996)。代表性的氨基保護基團包括甲?；?、乙?；⑷阴；?、芐基、芐氧羰基(CBZ)、叔丁氧羰基(Boc)、三甲代甲硅烷基(TMS)、2-三甲代甲硅烷基-乙磺酰基(SES)、三苯甲基和取代的三苯甲基、烯丙氧基羰基、9-芴基甲氧羰基(FMOC)、硝基-藜蘆基氧基羰基(NVOC)等。代表性的羥基保護基包括將羥基?；蛲榛幕鶊F，例如芐基和三苯甲基醚以及烷基醚類、四氫吡喃基醚類、三烷基甲硅烷基醚類和烯丙基醚類。
疾病的“治療”或“療法”包括(1)預防疾病，也就是使疾病的臨床癥狀不會在哺乳動物中發(fā)展，所述的哺乳動物可能與該疾病接觸或易感該疾病，但還沒有經(jīng)歷或顯現(xiàn)出該疾病癥狀；(2)抑制疾病，也就是阻止或減輕該疾病或其臨床癥狀的發(fā)展；和(3)緩解疾病，也就是引起疾病或其臨床癥狀的減退。
“治療有效量”是指當向哺乳動物給藥以治療疾病時，足以實現(xiàn)對該疾病的治療的化合物的量?！爸委熡行Я俊睉鶕?jù)化合物、疾病及其嚴重程度以及所治療哺乳動物的年齡、體重等的不同而改變。
術語“處理”、“接觸”或“反應”當其涉及化學反應時，是指在合適的條件下加入或混和兩種或多種試劑以制備指示的和/或所需的產(chǎn)物。應當理解，制備指示的和/或所需的產(chǎn)物的反應可以不必直接由最初加入的兩種試劑的組合產(chǎn)生，即在混合物中可以產(chǎn)生一種或多種中間體，最終導致指示的和/或所需的產(chǎn)物的生成。
本發(fā)明化合物的存在形式可以是非溶劑化的或者溶劑化的，包括水合形式。通常，溶劑化形式，包括水合形式，與非溶劑化形式是等價的，并且意在包含在本發(fā)明的范圍內。除了上述的化合物外，本發(fā)明的化合物包括所有的互變異構形式。此外，本發(fā)明還包括這些化合物的所有可藥用鹽形式以及所述化合物的前藥形式和純手性形式或外消旋混合物或其它混合物形式的所有立體異構體。
式I化合物還能夠形成可藥用的酸加成鹽。所有這些形式都在本發(fā)明的范圍內。
式I化合物的可藥用酸加成鹽包括衍生自無機酸的鹽以及衍生自有機酸的鹽，所述的無機酸如鹽酸，硝酸，磷酸，硫酸，氫溴酸，氫碘酸，亞磷酸等，所述有機酸如脂肪族一羧酸和二羧酸，苯基-取代的鏈烷酸，羥基鏈烷酸，鏈烷二酸，芳族酸，脂肪族和芳香族磺酸等。因此，這樣的鹽包括硫酸鹽，焦硫酸鹽，硫酸氫鹽，亞硫酸鹽，亞硫酸氫鹽，硝酸鹽，磷酸鹽，磷酸一氫鹽，磷酸二氫鹽，偏磷酸鹽，焦磷酸鹽，氯化物，溴化物，碘化物，乙酸鹽，丙酸鹽，辛酸鹽，異丁酸鹽，草酸鹽，丙二酸鹽，琥珀酸鹽，辛二酸鹽，癸二酸鹽，富馬酸鹽，馬來酸鹽，扁桃酸鹽，苯甲酸鹽，氯苯甲酸鹽，甲基苯甲酸鹽，二硝基苯甲酸鹽，鄰苯二甲酸鹽，苯磺酸鹽，甲苯磺酸鹽，苯基乙酸鹽，檸檬酸鹽，乳酸鹽，馬來酸鹽，酒石酸鹽，甲磺酸鹽等。還值得考慮的是氨基酸的鹽，如精氨酸鹽等，和葡糖酸鹽，半乳糖醛酸鹽(參見，例如，Berge等，J.ofPharmaceutical Science 661-19(1977)。
堿性化合物的酸加成鹽可以用以下方法制備讓游離堿形式與足量的所需酸接觸，從而以常規(guī)方式生成鹽。通過將鹽形式與堿接觸，并且以常規(guī)方式分離游離的堿，再次產(chǎn)生游離堿形式。該游離堿形式在某些物理性質方面如在極性溶劑中的溶解度與其相應的鹽形式不同，但是對于本發(fā)明的目的而言，這些鹽與它們的相應游離堿是等價的。
在一個實施方案中，Ar1是芳基。特別優(yōu)選的Ar1是任選取代的苯基。在某些實施方案中，Ar1是任選被烷基，鹵代基，鹵代烷基或烷氧基取代一次或多次的苯基。更優(yōu)選的Ar1是二取代的苯基，例如2，4-二取代的苯基。還更優(yōu)選Ar1是2，4-二鹵代基取代的苯基。特別優(yōu)選的Ar1是2，4-二氟苯基。
在另一實施方案中，X1是O。
在另一實施方案中，R1是烷氧基烷基，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，羥烷基或雜環(huán)基。在這組中，特別優(yōu)選的R1包括任選取代的四氫吡喃基、1-甲基-2-甲氧基乙基，任選取代的環(huán)戊基，任選取代的環(huán)丙基、異丙基，任選取代的環(huán)己基、1-(2-羥基乙基)-3-羥基丙基、1-羥甲基-2-羥基丙基、1-羥甲基-3-羥基丙基、1-甲基丙基、2-羥基-1-甲基乙基、1-(2-甲氧基乙基)-3-甲氧基丙基、N-甲磺?；哙せ?、乙基、甲基、2-羥基丙基、新戊基、1，1-二甲基-2-羥基乙基、1-(羥甲基)丙基、2-甲基丙基、環(huán)丙基甲基，任選取代的環(huán)丁基、1，2-二甲基-2-羥基丙基和1-(羥甲基)-2-羥基乙基。
在再一實施方案中，優(yōu)選的R1是羥烷基，其中2-羥基-1-甲基乙基是特別優(yōu)選的R1。尤其優(yōu)選的R1包括對映體富集的2-羥基-1-甲基乙基，即(R)-和(S)-2-羥基-1-甲基乙基。
在一具體的實施方案中，R2是2-羥基乙基，3-羥基丙基，2-羥基丙基，1-(2-羥基乙基)-3-羥基丙基或2-氧代丙基。
在另一實施方案中，R2是羥烷基。在這組中，特別優(yōu)選的R2是2-羥基乙基，3-羥基丙基，2-羥基丙基和1-(2-羥基乙基)-3-羥基丙基。尤其優(yōu)選的R2是2-羥基丙基。在另一實施方案中，R2是氧代烷基。
更進一步，此處描述的優(yōu)選基團的組合形成了其它優(yōu)選實施方案。例如，在一個特別優(yōu)選的實施方案中，R1是(R)-或(S)-2-羥基-1-甲基乙基，R2是(R)-或(S)-2-羥基丙基，或者2-氧代丙基，X1是O，并且Ar1是2，4-二氟苯基。
本發(fā)明的一個實施方案提供式I化合物，其中Ar1是芳基，并且X1是O。在本發(fā)明的另一實施方案中，提供一種式I化合物，其中Ar1是芳基，X1是O，并且R1是烷氧基烷基，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，羥烷基或雜環(huán)基。本發(fā)明的再一實施方案中，提供一種式I化合物，其中Ar1是芳基，X1是O，并且R1是四氫吡喃基，1-甲基-2-甲氧基乙基，環(huán)戊基，環(huán)丙基，異丙基，環(huán)己基，1-(2-羥基乙基)-3-羥基丙基，1-羥甲基-2-羥基丙基，1-羥甲基-3-羥基丙基，1-甲基丙基，2-羥基-1-甲基乙基，1-(2-甲氧基乙基)-3-甲氧基丙基，N-甲磺?；哙せ一?，甲基，2-羥基丙基，新戊基，1，1-二甲基-2-羥基乙基，1-(羥甲基)丙基，2-甲基丙基，環(huán)丙基甲基，環(huán)丁基，1，2-二甲基-2-羥基丙基或1-(羥甲基)-2-羥基乙基。本發(fā)明的又一實施方案提供式I化合物，其中Ar1是芳基，X1是O，R1是四氫吡喃基，1-甲基-2-甲氧基乙基，環(huán)戊基，環(huán)丙基，異丙基，環(huán)己基，1-(2-羥基乙基)-3-羥基丙基，1-羥甲基-2-羥基丙基，1-羥甲基-3-羥基丙基，1-甲基丙基，2-羥基-1-甲基乙基，1-(2-甲氧基乙基)-3-甲氧基丙基，N-甲磺?；哙せ一?，甲基，2-羥基丙基，新戊基，1，1-二甲基-2-羥基乙基，1-(羥甲基)丙基，2-甲基丙基，環(huán)丙基甲基，環(huán)丁基，1，2-二甲基-2-羥基丙基，或1-(羥甲基)-2-羥基乙基，并且R2是2-羥基乙基，3-羥基丙基，2-羥基丙基，1-(2-羥基乙基)-3-羥基丙基，或2-氧代丙基。
本發(fā)明的一個實施方案提供式I化合物，其中Ar1是芳基，X1是O，R1是(R)-2-羥基-1-甲基乙基或(S)-2-羥基-1-甲基乙基，并且R2是2-氧代丙基，(R)-2-羥基丙基或(S)-2-羥基丙基。
本發(fā)明的一個實施方案提供式I化合物，其中Ar1是芳基，X1是O并且R1是羥烷基。本發(fā)明的另一實施方案提供式I化合物，其中Ar1是芳基，X1是O，R1是羥烷基，并且R2是羥烷基。本發(fā)明的再一實施方案提供式I化合物，其中Ar1是芳基，X1是O，R1是羥烷基，并且R2是2-羥基乙基，3-羥基丙基，2-羥基丙基或1-(2-羥基乙基)-3-羥基丙基。
本發(fā)明的另一實施方案提供式I化合物，其中Ar1是芳基，X1是O，R1是(R)-2-羥基-1-甲基乙基并且R2是(R)-2-羥基丙基；R1是(R)-2-羥基-1-甲基乙基并且R2是(S)-2-羥基丙基；R1是(S)-2-羥基-1-甲基乙基并且R2是(R)-2-羥基丙基；或者R1是(S)-2-羥基-1-甲基乙基并且R2是(S)-2-羥基丙基。
本發(fā)明的一個實施方案提供式I化合物，其中R1是羥烷基。本發(fā)明的另一實施方案提供式I化合物，其中R1是羥烷基并且R2是羥烷基。本發(fā)明的再一實施方案提供式I化合物，其中R1是羥烷基，R2是羥烷基并且Ar1是芳基。
本發(fā)明的一個實施方案提供式I化合物，其中R2是羥烷基。
在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物可以是式II化合物 其中m是0～4；每個R3是烷基，鹵素，烷氧基或鹵代烷基；并且R1和R2如此處所定義。
在特定的實施方案中，m是1并且R3是鹵素。
在另一實施方案中，m是2并且R3是鹵素。
本發(fā)明的一個實施方案提供式II化合物，其中R1是烷氧基烷基，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，羥烷基，或雜環(huán)基。
本發(fā)明的一個實施方案提供式II化合物，其中R1是四氫吡喃基，1-甲基-2-甲氧基乙基，環(huán)戊基，環(huán)丙基，異丙基，環(huán)己基，1-(2-羥基乙基)-3-羥基丙基，1-羥甲基-2-羥基丙基，1-羥甲基-3-羥基丙基，1-甲基丙基，2-羥基-1-甲基乙基，1-(2-甲氧基乙基)-3-甲氧基丙基，N-甲磺?；哙せ一?，甲基，2-羥基丙基，新戊基，1，1-二甲基-2-羥基乙基，1-(羥甲基)丙基，2-甲基丙基，環(huán)丙基甲基，環(huán)丁基，1，2-二甲基-2-羥基丙基或1-(羥甲基)-2-羥基乙基。本發(fā)明的另一實施方案提供式II化合物，其中R1是四氫吡喃基，1-甲基-2-甲氧基乙基，環(huán)戊基，環(huán)丙基，異丙基，環(huán)己基，1-(2-羥基乙基)-3-羥基丙基，1-羥甲基-2-羥基丙基，1-羥甲基-3-羥基丙基，1-甲基丙基，2-羥基-1-甲基乙基，1-(2-甲氧基乙基)-3-甲氧基丙基，N-甲磺?；哙せ一?，甲基，2-羥基丙基，新戊基，1，1-二甲基-2-羥基乙基，1-(羥甲基)丙基，2-甲基丙基，環(huán)丙基甲基，環(huán)丁基，1，2-二甲基-2-羥基丙基，或1-(羥甲基)-2-羥基乙基，并且R2是2-羥基乙基，3-羥基丙基，2-羥基丙基，1-(2-羥基乙基)-3-羥基丙基或2-氧代丙基。
本發(fā)明的一個實施方案提供式II化合物，其中R1是(R)-2-羥基-1-甲基乙基或(S)-2-羥基-1-甲基乙基，并且R2是2-氧代丙基，(R)-2-羥基丙基或(S)-2-羥基丙基。
本發(fā)明的一個實施方案提供式II化合物，其中R1和R2都是羥烷基。
本發(fā)明的一個實施方案提供式II化合物，其中R1是(R)-2-羥基-1-甲基乙基并且R2是(R)-2-羥基丙基；R1是(R)-2-羥基-1-甲基乙基并且R2是(S)-2-羥基丙基；R1是(S)-2-羥基-1-甲基乙基并且R2是(R)-2-羥基丙基；或者R1是(S)-2-羥基-1-甲基乙基并且R2是(S)-2-羥基丙基。
本發(fā)明的另一實施方案提供式II化合物，其中R1和R2是羥烷基，n是1并且R3是鹵代基。
本發(fā)明的另一實施方案提供式II化合物，其中R1和R2是羥烷基，n是2并且R3是鹵代基。
根據(jù)本發(fā)明的代表性化合物示于表1中。
表1
盡管此處本發(fā)明的形式目前構成了優(yōu)選實施方案，但是許多其它方案也是可能的。本說明書不想提及所有這些可能的等價形式或者本發(fā)明的分支，應當理解此處使用的術語僅是描述性而非限制性的，可以在不背離本發(fā)明精神和范圍的情況下進行各種變化。
本發(fā)明的化合物可以用各種方法制備，包括在公知的US-2003-0171584-A1中公開的方法，該文獻先前通過引用而結合。在本發(fā)明的一個方面，一種制備式I化合物的方法示于下面的方案1中。應當理解，盡管所述方案經(jīng)常示出精確的結構，但是適當考慮通過有機化學領域中的標準方法進行活性官能團的保護和去保護，本發(fā)明的方法廣泛應用于類似的式I化合物。例如，在分子中其它位點的化學反應過程中，為了防止不希望有的副反應，有時需要保護羥基(例如轉化成醚或酯)。然后除去羥基保護基，得到游離的羥基。類似地，可以保護氨基和羧酸基(例如通過衍生)以防止它們發(fā)生不希望的副反應。典型的保護基以及連接和解離它們的方法在上面結合的參考文獻中有充分描述，如Greene和Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第三版，John Wiley & Sons，NewYork，1999，以及Harrison和Harrison等，Compendium of Synthetic OrganicMethods，Vols.1-8(John Wiley and Sons，1971-1996)。
方案1用羥烷基胺(R2-NH2)處理式Ia化合物，得到式Ib化合物。該反應按照常規(guī)在溶劑中進行，所述溶劑在反應條件是惰性的，優(yōu)選是鹵代脂族烴，特別是二氯甲烷，任選鹵代的芳族烴，或者開鏈的或環(huán)狀的醚如四氫呋喃(THF)，甲酰胺或者低級鏈烷醇。適宜的是，在約-20℃～約120℃，典型地在約0℃進行反應。經(jīng)常向反應混合物中加入堿，例如三烷基胺，優(yōu)選三乙胺。
還原式Ib化合物，得到式Ic的醇。該步還原典型地使用氫化鋁鋰以本領域技術人員熟知的方式進行(例如，在溶劑中，所述溶劑在反應條件是惰性的，優(yōu)選開鏈的或環(huán)狀的醚，特別是THF，在約-20℃～約70℃，優(yōu)選約0℃～約室溫(RT)下進行反應)。
氧化式Ic的醇得到式Id的醛。該氧化典型地用二氧化錳進行，盡管還可以采用多種其它的方法(參見，例如ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY，4THED.，March，John Wiley & Sons，New York(1992))。根據(jù)采用的氧化劑，反應便利地在溶劑中進行，所述溶劑在特定氧化條件下是惰性的，優(yōu)選是鹵代脂族烴，特別是二氯甲烷，或者任選鹵代的芳族烴。氧化適宜在約0℃～約60℃下進行。
式Id的醛與酯Ar1-X1CH2-CO2R’(其中R’是烷基，Ar1和X1如此處定義)在堿存在下的反應得到式Ie的化合物?？梢允褂萌魏蜗鄬Ψ怯H核性的堿，包括碳酸鹽，例如碳酸鉀，碳酸鋰和碳酸鈉；碳酸氫鹽，例如碳酸氫鉀，碳酸氫鋰和碳酸氫鈉；胺，例如仲胺和叔胺；以及樹脂結合的胺，例如1，3，4，6，7，8-六氫-2H嘧啶并[1，2-a]嘧啶。反應是在相對極性的但是在反應條件下是惰性的溶劑中，優(yōu)選在酰胺如二甲基甲酰胺、N-取代的吡咯烷酮，特別是1-甲基-2-吡咯烷酮中，并且在約25℃～約150℃的溫度下便利地進行的。
用氧化劑，例如過酸如3-氯過苯甲酸(即，MCPBA)或Oxone氧化Ie，得到砜(If)，該化合物可以轉化成多種目標化合物。典型地，在氧化條件下是惰性的溶劑中進行Ie的氧化。例如，當將MCPBA用作氧化劑時，優(yōu)選溶劑是鹵代脂族烴，特別是氯仿。當使用Oxone作為氧化劑時，溶劑優(yōu)選為甲醇，乙醇水溶液或者THF水溶液。反應溫度取決于使用的溶劑。對于有機溶劑，反應溫度通常在約-20℃～約50℃，優(yōu)選約0℃～約RT。當使用水作為溶劑時，反應溫度通常為約0℃～約50℃，優(yōu)選約0℃～約RT。備選地，可以在使用錸/過氧化物基的試劑的催化條件下進行氧化，參見(Lahti等，Inorg.Chem.，2000，39，2164-2167；Catal.Today，2000，55，317-363，和Coperet等，J.Org.Chem.，1998，63，1740-1741。
If化合物與胺(R1-NH2)反應得到式I化合物。反應可以在溶劑存在或不存在下進行。便利地，反應在約0℃～約200℃的溫度，更優(yōu)選在約RT～約150℃的溫度進行。備選地，在不使用砜If的某些情況下，可以將硫醚Ie或者相應的亞砜與胺(R1-NH2)直接反應，得到式I化合物。
本領域的技術人員將理解，上述方案的某些修改是預期的并且在本發(fā)明的范圍內。例如，某些步驟將涉及官能團保護基的使用，所述官能團與特定的反應條件不相容。
備選地，還可以采用下面方案2所示的方法制備式I化合物。盡管方案2的反應是以具體化合物形式顯示的，但是對于本領域技術人員顯而易見的是，對于本發(fā)明的所有化合物，都可以使用方案2的方法。
如方案2所示，用硫脲處理二乙基乙縮醛IIa，得到嘧啶化合物IIb。該反應是在堿如甲醇鈉存在下在醇溶劑中便利地進行的。然后用例如甲基碘甲基化硫醇基，得到硫醚IIc。
然后，可以用α-芳氧基酯IId如(2，4-二氟苯氧基)乙酸乙酯處理硫醚IIc，得到吡啶并-嘧啶酮硫醚IIe。該反應可以在以下條件下進行，例如，在碳酸鈉或其它弱堿存在下，在n-甲基吡咯烷酮或其它極性非質子溶劑中進行加熱。
硫醚IIe與碳酸異丙烯酯等碳酸酯在極性非質子溶劑條件下反應，得到N-羥烷基吡啶并-嘧啶酮硫醚IIf。通過在碳酸鉀存在下進行加熱可以促進該反應。
然后將硫醚IIf氧化，得到相應的吡啶并-嘧啶酮砜IIg。該氧化反應可以在乙酸存在下，在極性溶劑如二氯甲烷中使用過氧化氫進行。備選地，可以以上述方案1所述的方式使用Oxone或MCPBA進行該步氧化。
用其中羥基被適當保護的羥胺處理砜IIg，得到根據(jù)本發(fā)明的吡啶并-嘧啶酮化合物IIh。該反應可以如上所述參考方案1通過加熱而進行。
方案2還可以如下面方案3所示的，通過用環(huán)氧化物代替碳酸酯來烷基化吡啶并嘧啶酮IIe，制備吡啶并嘧啶酮IIf。方案3的反應可以在壓力下，過量環(huán)氧丙烷存在下，在N-甲基吡咯烷酮或其它極性非質子溶劑條件下，通過加熱化合物IIe而進行。
方案3可以將式I化合物用作藥物，例如以藥物制劑形式用作藥物。藥物制劑可以經(jīng)腸給藥，例如以片劑、包衣片劑、糖錠劑、硬或軟明膠膠囊、溶液、乳劑或懸浮劑形式口服，經(jīng)鼻給藥，例如以鼻噴霧劑形式，或者直腸給藥，例如以栓劑形式。但是還可以腸胃外給藥，例如以注射液形式。
本發(fā)明的另一方面提供包含式I化合物和可藥用載體、稀釋劑或賦形劑的藥物配方。
可以通過用藥學惰性的無機或有機載體加工式I化合物而制造藥物制劑。例如，可以使用乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石，硬脂酸或其鹽等，作為用于片劑、包衣片劑、糖錠劑和硬明膠膠囊的這種載體。軟明膠膠囊的合適載體為，例如植物油，蠟，脂肪，半固體和液體多元醇等；但是，根據(jù)活性成分的自身性質，軟明膠膠囊通常不需要載體。制造溶液和糖漿的合適載體為，例如水，多元醇，蔗糖，轉化糖，葡萄糖等。栓劑的合適載體為，例如天然或硬化油，蠟，脂肪，半液體或液體多元醇等。
藥物制劑還可以包含防腐劑，增溶劑，穩(wěn)定劑，濕潤劑，乳化劑，甜味劑，著色劑，食用香料，用于改變滲透壓的鹽，緩沖劑，掩蔽劑或抗氧化劑。還可以包含式I化合物以外的其它有治療價值的物質。
包含式I化合物與相容的藥物載體材料的藥物也是本發(fā)明的一個目的，作為這種藥物的生產(chǎn)方法，該方法包括將這些化合物或其鹽中的一種或多種，如果需要，還有一種或多種其他有治療價值的物質，連同相容的藥物載體，結合到蓋侖給藥形式中。
如前所述，根據(jù)本發(fā)明，可以將式I化合物用作治療活性物質，特別是作為抗炎藥或者用于移植手術后的移植排斥的預防。劑量可以在寬限度內變化，當然在每個具體病例中將被調整以適應個體需要。通常，在向成年人給藥的情況下，日劑量為約0.1mg/kg～約100mg/kg，優(yōu)選約0.5mg/kg～約5mg/kg應當是便利的。日劑量可以以單劑量或分劑量形式給藥，另外，當發(fā)現(xiàn)必須治療時，可以超過此前提及的劑量上限。
最后，式I化合物用于制備藥物的用途也是本發(fā)明的一個目的，所述的藥物具體地用于治療或預防炎癥，免疫的，腫瘤的，支氣管肺的，皮膚病學的和心血管疾病，治療哮喘，中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病或者糖尿病并發(fā)癥或者用于預防移植手術后的移植排斥。
式I化合物可用于但不限于治療人或其它哺乳動物的任何疾病或病癥，所述疾病或病癥是因該哺乳動物過量或不受控制的TNF或p38激酶產(chǎn)生而加劇或導致的。因此，本發(fā)明提供治療細胞因子介導的疾病的方法，該方法包括給藥細胞因子干涉有效量的式I化合物或其可藥用鹽或互變異構體。
式I化合物可用于但不限于治療對象的炎癥，并且用作治療發(fā)熱的退熱藥。本發(fā)明的化合物可用于治療關節(jié)炎，包括但不限于類風濕性關節(jié)炎，脊椎關節(jié)病，痛風性關節(jié)炎，骨關節(jié)炎，牛皮癬關節(jié)炎，強直性脊柱炎，系統(tǒng)性紅斑狼瘡和青少年關節(jié)炎，骨關節(jié)炎，痛風性關節(jié)炎和其它關節(jié)炎病癥。這樣的化合物可用于治療肺病或肺炎癥，包括成人呼吸窘迫綜合征，肺肉瘤病，哮喘，矽肺病和慢性肺炎。所述化合物還可用于治療病毒和細菌感染，包括膿毒病，膿毒性休克，革蘭氏陰性膿毒病，瘧疾，腦膜炎，惡病質繼發(fā)感染或惡性腫瘤，惡病質繼發(fā)獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)，AIDS，ARC(AIDS相關綜合征)，肺炎和皰疹病毒。本發(fā)明化合物還可用于治療骨吸收疾病如骨質疏松癥，內毒素性休克，中毒性休克綜合征，再灌注損傷，包括移植物抗宿主反應和同種異體移植排斥的自身免疫性疾病，心血管疾病，包括心肌梗死，動脈粥樣硬化，血栓形成，充血性心力衰竭，心臟再灌注損傷，腎再灌注損傷，肝病和腎炎，以及感染引起的肌痛。
本發(fā)明的化合物還可用于治療阿爾茨海默氏病，流感，多發(fā)性硬化，癌癥，糖尿病，系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)，皮膚相關性疾病，例如牛皮癬、濕疹、燒傷、皮炎、瘢痕形成和疤痕組織形成。此外，本發(fā)明的化合物還可用于治療胃腸疾病，例如炎性腸病，局限性回腸炎，胃炎，過敏性腸綜合征和潰瘍性結腸炎。本發(fā)明的化合物還可用于治療眼病，例如視網(wǎng)膜炎，視網(wǎng)膜病，葡萄膜炎，恐光癥和眼組織急性損傷。本發(fā)明的化合物還可以用于治療血管生成，包括瘤形成；轉移；眼科疾病，例如角膜移植排斥，眼新血管形成，視網(wǎng)膜新血管形成，包括損傷或感染后的新血管形成，糖尿病性視網(wǎng)膜病，晶狀體后纖維增生和新生血管性青光眼；潰瘍性疾病，例如胃潰瘍；病理性但非惡性病癥，例如血管瘤，包括新生兒血管瘤，鼻咽血管纖維瘤和骨無血管形成性壞死；糖尿病性腎病和心肌??；以及婦女生殖系統(tǒng)疾病，例如子宮內膜異位。所述化合物還可以用于防止環(huán)加氧酶-2的產(chǎn)生并且具有止痛劑性質。因此，式I化合物可用于治療疼痛。
式I化合物的其它用途包括治療HCV，重哮喘，牛皮癬，慢性阻塞性肺病(COPD)，以及可以用抗-TNF化合物治療的其它疾病。
除了可用于人類的治療，本發(fā)明的化合物還可用于對動物的獸醫(yī)治療，所述動物如陪伴動物，外來動物和農(nóng)場動物，包括哺乳動物，嚙齒動物等。更優(yōu)選的動物包括馬，狗和貓。
另外，本發(fā)明的化合物還可用于共同治療，部分或完全代替其它常規(guī)抗炎藥，例如與類固醇、環(huán)加氧酶-2抑制劑、NSAIDs、DMARDS、免疫抑制劑、5-脂氧合酶抑制劑、LTB4拮抗劑和LTA4水解酶抑制劑共同使用。
此處所用的術語“TNF介導的疾病”指的是TNF通過TNF本身的控制或者通過TNF導致另一種單核因子(例如但不限于IL-1、IL-6或IL-8)被釋放而發(fā)揮作用的任何和所有疾病和病癥。例如在一種病癥中，其中IL-1是一種主要成分，且其產(chǎn)生或作用響應于TNF而加劇或分泌，這類疾病由此被認為是TNF介導的疾病。
此處所用的術語“p38介導的疾病”指的是通過p38本身的控制或者通過p38導致另一種因子(例如但不限于IL-1、IL-6或IL-8)被釋放而發(fā)揮作用的任何和所有疾病和病癥。例如，在一種病癥中，其中IL-1是一種主要成分，且其產(chǎn)生或作用響應于p38而加劇或分泌，這類疾病由此被認為是p38介導的疾病。
因為TNF-β與TNF-α(也稱為惡病質素)存在密切的結構同源性，并且由于它們均誘導類似的生物反應并結合同樣的細胞受體，所以，TNF-α和TNF-β的合成都被本發(fā)明的化合物所抑制。除非另有具體說明，在本說明書中通稱為“TNF”。
實施例對于本領域的技術人員而言，通過檢驗以下說明性實施例，本發(fā)明的另外的目的、優(yōu)點和新特征將變得顯而易見，但是以下的實施例無限制性意圖。
實施例16-(2，4-二氟-苯氧基)-2-((S)-(+)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-((S)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(化合物16)的制備步驟A4-((S)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯的制備向0℃的4-氯-2-甲基硫代嘧啶-5-羧酸乙酯(Aldrich，65g，280mmol)的500mL THF溶液中加入三乙胺(140mL 1000mmol)和(S)-1-氨基-2-丙醇(21g，280mmol)。攪拌4小時后，加入水(200mL)并且進行相分離。水層用二氯甲烷萃取。濃縮有機相，將殘余物溶解在二氯甲烷中，并且用鹽水洗滌，硫酸鎂干燥。過濾，減壓蒸發(fā)濾液，得到77g 4-(S)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯白色固體。
步驟B4-((S)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇的制備將氫化鋁鋰(5.7g，150mmol)在無水THF(500mL)中于5℃攪拌，并且滴加4-((S)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯(27g，100mmol)的無水THF(450mL)溶液進行處理。將反應混合物攪拌15分鐘，然后小心滴加水(18mL)。將反應物攪拌30分鐘，然后滴加氫氧化鈉水溶液(15％，8.5mL)，隨后是水(25.5mL)。將得到的懸浮液在RT下攪拌17小時，然后過濾。過濾殘余物用異丙醇(2X，100mL)洗滌，減壓蒸發(fā)合并的濾液和洗液，得到25.8g 4-((S)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇。
步驟C4-((S)-2-羥基丙氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛的制備將4-((S)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇(26g，100mmol)和1L二氯甲烷在攪拌下合并，并且用二氧化錳(102g，1mol)處理。將得到的懸浮液攪拌24小時，然后通過C鹽過濾。過濾殘余物用二氯甲烷(100mL)洗滌，減壓蒸發(fā)合并的濾液和洗液，得到16.5g 4-((S)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛白色固體。
砜步驟A6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((S)-2-羥基丙基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮的制備向4-((S)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(16.5g，73mmol)和(2，4-二氟苯氧基)乙酸甲酯(29.4g，145mmol)的無水二甲基甲酰胺(300mL)混合物中加入碳酸鉀(30g，218mmol)。將反應混合物加熱到60℃，18小時后冷卻反應混合物，并且在真空下蒸餾除去二甲基甲酰胺。將粗的殘余物懸浮在水(300mL)中，用二氯甲烷萃取，鹽水洗滌并且硫酸鎂干燥。過濾并且真空濃縮，得到41g粗品，將其進行硅膠柱色譜，用1％甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，得到30g 6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((S)-2-羥基丙基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(質譜M+1＝274)。
步驟B6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((S)-2-羥基丙基)-2-甲磺酰基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮的制備向5℃的6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((S)-2-羥基丙基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(29.7g，108mmol)的二氯甲烷(500mL)溶液中分批加入間氯過苯甲酸(55g，240mmol)并且攪拌24小時。將反應混合物用亞硫酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液洗滌，并且用硫酸鎂干燥。過濾并且蒸發(fā)，得到24g 6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((S)-2-羥基丙基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(質譜M+1＝412)。
步驟C6-(2，4-二氟-苯氧基)-2-((S)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-((S)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮的制備向6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((S)-2-羥基丙基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(400mg，1mmol)的THF(5mL)溶液中加入(S)-2-氨基-1-丙醇(0.38mL，5mmol)并且在RT下攪拌過夜。真空濃縮，進行硅膠色譜，用2％的甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，并且轉化成鹽酸鹽，得到320mg 6-(2，4-二氟-苯氧基)-2-((S)-(+)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-((S)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(質譜M+1＝407，MP＝175.1-179.1℃)。
實施例26-(2，4-二氟-苯氧基)-2-(R)-(-)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-((S)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(化合物17)的制備向6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((S)-2-羥基丙基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(400mg，1mmol)的THF(5mL)溶液中加入(R)-2-氨基-1-丙醇(0.38mL，5mmol)，并且在RT下攪拌過夜。真空濃縮，進行硅膠色譜，用2％的甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，并且轉化成鹽酸鹽，得到370mg 6-(2，4-二氟-苯氧基)-2-((R)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-((S)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(質譜M+1＝407，MP＝174.9-178.1℃)。
實施例36-(2，4-二氟苯氧基)-2-(2-羥基-1，1-二甲基-乙氨基)-8-((S)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(化合物36)的制備向6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((S)-2-羥基丙基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(717mg，1.74mmol)的THF(10mL)溶液中加入2-氨基-2-甲基-1-丙醇(1.55g，17.43mmol)，并且在RT下攪拌過夜。真空濃縮，進行硅膠色譜，用4％的甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，在轉化成鹽酸鹽后，得到291mg 6-(2，4-二氟苯氧基)-2-(2-羥基-1，1-二甲基-乙氨基)-8-((S)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮白色固體(質譜M+1＝421，MP＝187.4-189.9℃)。
實施例46-(2，4-二氟-苯氧基)-2-((S)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-((R)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(化合物41)的制備步驟A4-((R)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-羧酸乙酯的制備向0℃下的4-氯-2-甲硫代嘧啶-5-羧酸乙酯(Aldrich，62.6g，269mmol)的1L THF溶液中加入三乙胺(135mL 1000mmol)和(R)-1-氨基-2-丙醇(30g，400mmol)。攪拌4小時后，減壓蒸發(fā)，得到66.6g 4-(R)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯白色固體。
步驟B4-((R)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇的制備將氫化鋁鋰(14g，368mmol)在5℃的無水THF(500mL)中攪拌，并且滴加4-(R)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基嘧啶-5-羧酸乙酯(66.6g，246mmol)的無水THF(150mL)溶液進行處理。將反應混合物攪拌15分鐘，然后小心滴加水(18mL)。將反應物攪拌30分鐘，然后滴加氫氧化鈉(15％，8.5mL)水溶液，隨后是水(25.5mL)。將得到的懸浮液在RT下攪拌17小時然后過濾。過濾殘余物用異丙醇(2X，100mL)洗滌，并且減壓蒸發(fā)合并的濾液和洗液，得到58.6g 4-(R)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇。
步驟C4-((R)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛的制備將4-(R)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基嘧啶-5-甲醇(58.6g，256mmol)和1L二氯甲烷在攪拌下合并，并且用二氧化錳(222g，2560mol)處理。將得到的懸浮液攪拌24小時，然后通過C鹽過濾。過濾殘余物用二氯甲烷(100mL)洗滌，并且減壓蒸發(fā)合并的濾液和洗液，得到34g 4-((R)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-醛白色固體。
砜步驟A6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((R)-2-羥基丙基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮的制備向4-((R)-2-羥基-丙氨基)-2-甲硫基-嘧啶-5-甲醛(17.7g，78mmol)和(2，4-二氟苯氧基)乙酸甲酯(31.6g，156mmol)的無水二甲基甲酰胺(300mL)混合物中加入碳酸鉀(30g，218mmol)。將反應混合物加熱到60℃，18小時后冷卻反應混合物，并且蒸餾除去DMF。將殘余物懸浮在水(300mL)中，用二氯甲烷萃取，鹽水洗滌并且硫酸鎂干燥。過濾并且真空濃縮，得到29.5g粗品，將其進行硅膠柱色譜，用1％的甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，得到17.5g 6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((R)-2-羥基丙基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(質譜M+1＝274)。
步驟B6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((R)-2-羥基丙基)-2-甲磺?；?H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮的制備向5℃的6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((R)-2-羥基丙基)-2-甲硫基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(9.38g，24.7mmol)的二氯甲烷(200mL)溶液中分批加入間氯過苯甲酸(12.5g，54mmol)并且攪拌24小時。將反應混合物用亞硫酸鈉水溶液和碳酸氫鈉水溶液洗滌，硫酸鎂干燥。過濾并且蒸發(fā)，得到10.7g 6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((R)-2-羥基丙基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(質譜M+1＝412)。
步驟C6-(2，4-二氟-苯氧基)-2-((S)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-((R)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮的制備向6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((R)-2-羥基丙基)-2-甲磺酰基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(615mg，1.5mmol)的THF(5mL)溶液中加入(S)-2-氨基-1-丙醇(1.2mL，15mmol)并且在RT下攪拌過夜。真空濃縮，進行硅膠色譜，用2％的甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，并且轉化成鹽酸鹽，得到295mg 6-(2，4-二氟-苯氧基)-2-((S)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-((R)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(質譜M+1＝407，MP＝186.0-189.1℃。
實施例56-(2，4-二氟-苯氧基)-2-(R)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-((R)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(化合物48)的制備向6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((R)-2-羥基丙基)-2-甲磺酰基-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(400mg，1mmol)的THF(5mL)溶液中加入(R)-2-氨基-1-丙醇(0.38mL，5mmol)并且在RT下攪拌過夜。真空濃縮，進行硅膠色譜，用2％的甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，并且轉化成鹽酸鹽，得到350mg 6-(2，4-二氟-苯氧基)-2-((R)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-((R)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(質譜M+1＝407，MP＝181.5-184.4℃)。
實施例66-(2，4-二氟苯氧基)-2-(2-羥基-1，1-二甲基-乙氨基)-8-((R)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(化合物31)的制備將6-(2，4-二氟苯氧基)-8-((R)-2-羥基丙基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(886mg，2.15mmol)和2-氨基-2-甲基-1-丙醇(5.15g，58mmol)的混合物在氮氣下于60℃加熱2小時。冷卻并且進行硅膠色譜，用2％的甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，在轉化成鹽酸鹽后得到385mg 6-(2，4-二氟苯氧基)-2-(2-羥基-1，1-二甲基-乙氨基)-8-((R)-2-羥基-丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(質譜M+1＝421，MP＝182.0-183.9℃)。
實施例76-(2，4-二氟苯氧基)-2-((S)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-(2-氧代丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(化合物45)的制備步驟a6-(2，4-二氟苯氧基)-2-甲磺?；?8-(2-氧代丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮的制備向-60℃的草酰氯(1.05mL，12mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中加入二甲亞砜(1.7mL，24mmol)和6-(2，4-二氟苯氧基)-8-(2-羥基丙基)-2-甲磺?；?8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(4.12g，10mmol)。向該混合物中加入三乙胺(7mL，50mmol)并且攪拌過夜。加入水(100mL)，用二氯甲烷萃取，鹽水洗滌，硫酸鎂干燥。過濾并且真空濃縮，經(jīng)過硅膠色譜，用2％的甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，得到1.0g 6-(2，4-氟苯氧基)-2-甲磺?；?8-(2-氧代丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(質譜M+1＝410)。
步驟b6-(2，4-二氟苯氧基)-2-((S)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-(2-氧代丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(化合物45)的制備在RT下向6-(2，4-二氟苯氧基)-2-甲磺?；?8-(2-氧代丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(412mg，1mmol)的THF懸浮液中加入(S)-2-氨基-1-丙醇(0.39mL，5mmol)并且攪拌過夜。真空濃縮并且進行硅膠色譜，用2％的甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，在轉化成鹽酸鹽后得到330mg 6-(2，4-二氟苯氧基)-2-((S)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-(2-氧代丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(質譜M+1＝405，MP＝207.9-214.6℃)。
實施例86-(2，4-二氟苯氧基)-2-((R)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-(2-氧代丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(化合物49)的制備在RT下向6-(2，4-二氟苯氧基)-2-甲磺?；?8-(2-氧代丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(417mg，1mmol)的THF(10mL)懸浮液中加入(R)-(-)-2-氨基-1-丙醇(0.40mL，5mmol)并且攪拌過夜。真空濃縮并且進行硅膠色譜，用2％的甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，在轉化成鹽酸鹽后得到330mg 6-(2，4-二氟苯氧基)-2-((R)-2-羥基-1-甲基-乙氨基)-8-(2-氧代丙基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮(質譜M+1＝405，MP＝207.8-216.4℃)。
實施例9體外試驗本發(fā)明化合物在體外的p38 MAP激酶抑制活性是使用Ahn等，J.Biol.Chem.Vol.2664220-4227(1991)中所述方法的微小改進的方法，通過測量γ-磷酸通過p-38激酶從γ-33P-ATP向髓鞘堿性蛋白(MBP)的轉移而測定的。
用SEK-1和MEKK在大腸桿菌中共同表達重組p38MAP激酶的磷酸化形式(參見，Khokhlatchev等，J.Biol.Chem.Vol.27211057-11062(1997))，然后用鎳柱通過親合色譜純化。
將磷酸化的p38MAP激酶在激酶緩沖液(20mM 3-(N-嗎啉代)丙磺酸，pH7.2、25mM β-磷酸甘油酯、5mM乙二醇-雙(β-氨基乙醚)-N，N，N′，N′-四乙酸、1mM原釩酸鈉、1mM二硫蘇糖醇、40mM氯化鎂)中稀釋。加入溶于DMSO的測試化合物或僅DMSO(對照)，并將樣品在30℃下溫育10分鐘。通過加入含有MBP和γ-33P-ATP的底物混合物引發(fā)激酶反應。在30℃下再溫育20分鐘后，加入0.75％磷酸終止該反應。利用磷酸纖維素膜(Millipore，Bedford，MA)從殘余γ-33P-ATP中分離出磷酸化MBP并且利用閃爍計數(shù)器(Packard，Meriden，CT)定量。
使用上述試驗，本發(fā)明化合物顯示為p38MAP激酶抑制劑。本發(fā)明化合物表現(xiàn)出的p38IC50值在小于0.001～0.1μM的范圍內。例如，6-(2，4-二氟-苯氧基)-8-(3-羥基-丙基)-2-(四氫吡喃-4-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮在上述試驗中的IC50為0.0008μM。
實施例10體外試驗該實施例舉例說明了用于評價本發(fā)明化合物和相應烷基類似物的比較結果的人全血(HWB)體外試驗(即，通過抑制p38MAP激酶在未稀釋的人全血中的LPS-誘導的IL-1β產(chǎn)生)。
人全血的LPS(脂多糖)處理誘導IL-1β(白介素-1β)生成，產(chǎn)生的IL-1β可以通過IL-1β特異性ELISA測量。將人全血用指示濃度的本發(fā)明化合物在0.5％DMSO中的溶液(最終濃度)在37℃下預溫育30分鐘。將樣品用0.5μg/mL的脂多糖(LPS，獲自Sigma)(終濃度)刺激18小時，以誘導用IL-1βELISA測量的IL-1β的合成和分泌。
化合物溶液將化合物溶解在449μL DMSO中制備DMSO(獲自Sigma)中的6mM儲液。從6mM儲液開始，在DMSO中進行6次半對數(shù)系列稀釋，得到以下濃度1.9mM，600，190，60，19和6μM。標記管1-7。6mM儲液置于管1中。將216μL DMSO置于管2-7每個之中。將100μL從管1轉移到管2。旋轉管2，并且從管2轉移100μL到管3。重復該過程直至管7。
使用如上制備的化合物的系列DMSO稀釋液，進行另外的稀釋1/20(10μL稀釋到190μL RPMI 1640培養(yǎng)基，獲自Gibco-BRL)，得到最終的化合物濃度曲線30，10，2.9，1，0.3，0.1，0.03μM。
LPS溶液LPS的重組在10mg LPS的小瓶中，加入10mL 1X磷酸鹽-緩沖的鹽水(即，1XPBS，獲自Gibco-BRL)，充分混和并且轉移到50mL管中。另外的10mL加入到LPS小瓶中，隨后沖洗，將該沖洗液加入到50mL管中并且混和。將溶液過濾并且滅菌，并且等分成所需的量(100μL等分試樣足以用于4個板)。如此得到0.5mg/mL儲液，將其稀釋1/100用于草案中。在即將使用前，稀釋LPS儲液1/100(100μL稀釋到10mL RPMI中)。
試驗程序在96孔U底板(獲自Costar)上進行試驗。每個試驗中包括兩個對照，其不含化合物，含有或不含有LPS。所有的樣品和對照均重復三次。
將人血(來自捐贈人，這些捐贈人至少14天沒有接受藥物，48小時沒有飲酒)收集到含有肝素(19單位/ml)的硅化vacutainers中。將5％DMSO在RPMI 1640中的25μL等分試樣加入到對照孔中(含有或不含有LPS對照)。將如上制備的每個化合物濃度的25μL等分試樣分配到指定的孔中。每個孔中加入200μL人全血，并且在37℃和5％CO2條件下溫育30分鐘。將25μL稀釋的LPS分配到除不含有LPS的對照孔外的所有孔中。向不含有LPS的對照孔中加入25μL RPMI。
將板在37℃和5％CO2條件下溫育18小時。溫育后，在400xg下離心板，使細胞成丸并且收集血漿，此時應小心不要擾動細胞丸。將血漿轉移到新的96孔聚丙烯板上。立即進行ELISA，剩余的血漿在-20℃儲存，以備需要時再次測試。
ELISA草案IL-1β ELISA使用兩種抗-IL-1β單克隆抗體ILβ1-H6(1mg/mL)和ILβ1-H67(2.71mg/mL)。
材料重組人IL-1β(rhuIL-1β，2.5μg/mL)獲自R&D Systems。磷酸鹽緩沖的鹽水-Dulbecco’s(1XPBS)獲自Gibco-BRL。磷酸鹽緩沖的鹽水(10XPBS)獲自Gibco-BRL。不含鈣和鎂的Dulbecco氏變體，pH為7.2。未打開的瓶子在RT下儲存。ELISA溫育緩沖液(EIB)-0.1％BSA/PBS；1g牛血清白蛋白(BSA)；100mL 10XPBS；加入去離子水至1升，并且在4℃下儲存。ELISA洗滌緩沖液(EWB)0.05％Tween/PBS；0.5mL Tween 20；100mL10xPBS；加入去離子水至1升，并且在4℃下儲存。封閉緩沖液-3％脫脂奶粉/PBS15g脫脂奶粉(Carnation)；50mL 10XPBS；加入去離子水至500mL，并且在4℃下儲存。過氧化物酶接合的鏈霉抗生物素(獲自Pharmingen)在EWB緩沖液中稀釋約1∶3000(10μL/30mL)。0.1M檸檬酸鹽緩沖液，pH4.59.6g檸檬酸(MW 192.1，獲自Sigma)；14.7g檸檬酸三鈉(MW 294.1，獲自Sigma)；用NaOH調節(jié)到pH 4.5，并且加入蒸餾水至500mL。在4℃儲存。OPD底物溶液1mg/mL OPD/0.03％H2O2/檸檬酸鹽緩沖液；1片鄰-苯二胺(OPD，獲自Zymed)；12μL 30％過氧化氫；12mL的0.1M檸檬酸鹽緩沖液。
標準物的制備(在放置在板上前新鮮制備)。
使用rhuIL-1β儲液(2.5μg/mL)構造標準曲線。曲線的濃度為12500，4167，1389，463，154，51和17pg/mL。管的標號為1-8。在管1中將rhuIL-1β儲液稀釋1/500(3μL儲液+597μL EWB)。將400μEWB分配到管2-8中。將200μL從管1轉移到管2并且旋轉。從管2轉移200μL到管3。重復該操作直到管7。使用管8作為ELISA試驗空白。
將血漿樣品在EWB中1∶4稀釋(20μL血漿+60μL EWB)。
抗體溶液的制備將抗體ILβ1-H6在1XPBS中1/100稀釋，得到10μg/mL溶液。對于每個板，將50μL抗體稀釋在5mL PBS中。將抗體ILβ1-H671/100稀釋在EWB中，得到2μg/mL溶液。對于每個板，將3.69μL抗體稀釋在5mLEIB中。
程序以每孔50μL的抗體ILβ1-H6(10μg/mL)涂覆96孔EIA板，溫和振動以除去任何氣泡，用板密封器密封并且在潮濕的室中于4℃溫育過夜。倒空該板，并且在不脫絨毛的紙巾上輕拍干燥。用每孔175μL的封閉緩沖液在RT下封閉非特異性結合位點1-2小時。用EWB洗滌板一次(即，空板，填充150μL EWB，倒空并且在不脫絨毛的紙巾上輕拍干燥)。
將一式三份的25μL的標準物等分試樣加入到合適的孔中。(每個板有其特有的標準曲線)。將25μL等分試樣的稀釋血漿加入到合適的孔中。向所有孔中加入25μL生物素化的單克隆抗體ILβ1-H67(2μg/mL)。用板密封器密封該板，并且在RT下溫育2小時(或者在4℃下過夜)，同時溫和搖動(Bellco Mini-Orbital Shaker，設置值3.5)。在溫育后，用EWB洗滌板3x(如上所述)。將1∶3000稀釋于EIB中的50μL等分試樣的過氧化物酶-鏈霉抗生物素加入到每孔中。用板密封器密封該板，并且在RT下溫育該板1小時同時搖動，并且如上所述地洗滌3x。
將OPD片溶解在檸檬酸鹽緩沖液中(1片/12mL檸檬酸鹽緩沖液)，并且向OPD/檸檬酸鹽緩沖液中加入12μL 30％H2O2。將50μL OPD底物溶液分配給每孔，將板在黑暗中RT下溫育30分鐘用于顯色。在雙波長下讀板樣品過濾器＝450nm/參考過濾器＝650nm。使用含有標準物的樣品的數(shù)值作出標準曲線(吸光度vs.濃度)，用于測定未知樣品的濃度。
統(tǒng)計方法如果濃度-抑制曲線的兩端均不包含50％的點，則將IC50報道為＞最高濃度或者＜最低濃度。另外，如果濃度數(shù)為≥5，則將數(shù)據(jù)擬合到以下的2-參數(shù)模型以估計IC50 該模型假設最小和最大響應分別為0％和100％，并且估計IC50和斜率參數(shù)。如果非線性回歸失敗或者如果測試濃度數(shù)＜5，使用位于側面50％處的2點，用線性回歸法估計IC50。
如果使用線性回歸法估計IC50，這是以試驗記錄形式輸出的，可以看到IC50標準誤差和斜率參數(shù)的存在(非線性回歸)或不存在(線性回歸)。
使用上述分析，本發(fā)明的化合物通過抑制p38MAP激酶而顯示對未稀釋的人全血中LPS-誘導的IL-1β生成的抑制作用，如上所述，p38MAP激酶介導IL-1β生成。本發(fā)明化合物對于未稀釋人全血中LPS-誘導的IL-1β生成表現(xiàn)出的IC50值在＜0.001μM到0.30μM范圍內。例如，6-(2，4-二氟-苯氧基)-8-((R)-2-羥基-丙基)-2-(四氫吡喃-4-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮顯示的IC50為0.001μM。
驚奇的是，使用其中式(I)中R2是羥烷基或烷氧基烷基的本發(fā)明化合物對LPS-誘導的IL-1β生成的抑制作用極大地大于其中R2是甲基或其它烷基的相應化合物。本發(fā)明的這種出乎意料的優(yōu)點更加完全地舉例說明于表2中，其中將其中R2(式I的)是羥烷基的本發(fā)明的代表性化合物與其中R2是甲基的相應類似物進行比較)。表1第一或最左欄中的化合物是如本說明書實施例中所述制備的，也示于表1中。表2第二或中心欄中的化合物是根據(jù)WO 02/064594報道的程序制備的。第三或最右欄中的數(shù)值對應于其比率(IL-1β生成的IC50抑制率，其中R2＝羥烷基)/(IL-1β生成的IC50抑制率，其中R2＝甲基)。
從表2可見，其中R2是羥烷基的化合物對未稀釋人全血中LPS-誘導的IL-1β生成的抑制作用比相應的甲基類似物(R2＝甲基)的抑制作用大2.7倍到＞100倍，即270％到＞10,000％。
表2

提供本發(fā)明的上述討論的目的在于解釋和描述。上述內容并非意在將本發(fā)明限制到此處公開的形式。盡管本發(fā)明的說明書已經(jīng)包括了一種或多種實施方案和某些變化形式和修改，但是例如其它變化形式和修改也屬于本發(fā)明的范圍，因為在理解了本公開內容后，它們屬于本領域技術人員的技能和知識范圍。其目的在于獲得包括所允許程度的可選實施方案的權利，包括可選的、可互換的和/或與所要求保護的等價的結構、功能、范圍或步驟，無論這類可選、可互換和/或等價結構、功能、范圍或步驟是否是在此公開，并且不在于明顯地提供任何可獲得專利權的主題。為了所有這些目的，將此處引述的所有公開文獻、專利和專利申請的全部內容通過引用結合在此。
權利要求
1.一種式I的化合物 其中X1是O，C＝O或S(O)n，其中n是0、1或2；Ar1是芳基或雜芳基；R1是烷氧基烷基，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，雜環(huán)基，羥烷基或羥基環(huán)烷基；并且R2是羥烷基，氧代烷基或羥基環(huán)烷基。
2.根據(jù)權利要求1的式I化合物，其具有式II 其中m為0到4；每個R3是烷基，鹵素，烷氧基或鹵代烷基；并且R1和R2如權利要求1所定義。
3.用作治療活性物質的根據(jù)權利要求1的化合物。
4.一種制備根據(jù)權利要求1的式I化合物的方法，該方法包括將式If的化合物 其中R是C1-C6烷基，并且X1、Ar1和R2具有如權利要求1所定義的含義，與式R1-NH2的胺反應。
5.按照權利要求4的方法制備的根據(jù)權利要求1的式I化合物。
6.根據(jù)權利要求1的式I化合物用于制造藥物的用途，所述藥物用于控制或預防由p38激酶介導的疾病。
7.一種組合物，其包含可藥用的賦形劑和權利要求1的式I化合物。
8.一種治療p38激酶介導的疾病的方法，該方法包括向患者給藥治療有效量的權利要求1的化合物。
9.權利要求8的方法，其中所述的p38激酶介導的疾病是關節(jié)炎，局限性回腸炎，過敏性腸綜合征，成人呼吸窘迫綜合征，慢性阻塞性肺病或者阿爾茨海默氏病。
10.如上描述的本發(fā)明。
全文摘要
本發(fā)明提供一種式(I)化合物，其中X
文檔編號C07D239/00GK1882585SQ200480033722
公開日2006年12月20日 申請日期2004年11月4日 優(yōu)先權日2003年11月13日
發(fā)明者D·M·戈爾茨坦 申請人:霍夫曼-拉曼奇有限公司