專利名稱：(1－膦酰甲氧基－2－烷基環(huán)丙基) 甲基核苷衍生物的(+)－反式－異構(gòu)體、用于制備其 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及可用作抗病毒劑(特別是，抗乙型肝炎病毒)的由下列通式(1)代表的(1-膦酰甲氧基-2-烷基環(huán)丙基)甲基核苷衍生物的(+)-反式-異構(gòu)體，其藥學(xué)可接受的鹽、水合物、或溶劑化物 其中R1代表C1-C7烷基，R2和R3彼此獨立地代表氫，或代表被選自鹵素(特別是氟)、C1-C4-烷氧基、苯氧基、C7-C10-苯基烷氧基、和C2-C5-酰氧基的一個或多個取代基任選取代1的C1-C4-烷基，或代表C2-C7-?；?、C6-C12-芳基、C1-C7-烷基氨基羰基、二(C1-C7-烷基)氨基羰基)或C3-C6-環(huán)烷基氨基羰基，或代表-(CH2)m-OC(＝O)-R4，其中m表示1-12的整數(shù)且R4代表C1-C12-烷基、C2-C7-烯基、C1-C5-烷氧基、C1-C7-烷基氨基、二(C1-C7-烷基)氨基、C3-C6-環(huán)烷基、或具有1或2個選自氮和氧的雜原子的3-6元雜環(huán)，Q代表具有下列通式的基團 或 其中X1、X2、X3和X4彼此獨立地代表氫、氨基、羥基、或鹵素，或代表C1-C7-烷基、C1-C5-烷氧基、烯丙基、羥基-C1-C7-烷基、苯基、或苯氧基，其每一個均可被硝基或C1-C5-烷氧基任選取代，或代表C6-C10-芳硫基，其可被硝基、氨基、C1-C6-烷基、或C1-C4-烷氧基任選取代，或代表C6-C12-芳基氨基、C1-C7-烷基氨基、二(C1-C7-烷基)氨基、C3-C6-環(huán)烷基氨基、或 的結(jié)構(gòu)，其中n表示1或2的整數(shù)且Y1代表O、CH2或N-R(R代表C1-C7-烷基或C6-C12-芳基)，用于制備其立體異構(gòu)體的方法，以及用于治療病毒疾病(特別是，針對乙型肝炎病毒)的包含通式(1)化合物的(+)-反式-異構(gòu)體、其藥學(xué)可接受的鹽、水合物、或溶劑化物作為活性物質(zhì)的組合物。
背景技術(shù)：
嘌呤或嘧啶衍生物具有抗-癌和抗病毒活性，且有超過10種的化合物，包括AZT、3TC、和ACV已經(jīng)商業(yè)化。特別是，因為無環(huán)核苷膦酸酯衍生物顯示出有效的抗病毒作用，西多福韋、tenofovir、阿德福韋作為抗病毒劑已經(jīng)商業(yè)化，且很多化合物包括MCC-478現(xiàn)在已經(jīng)進入到臨床試驗階段。然而，早期研發(fā)的化合物在毒性或藥物活性方面并不理想。因此，仍然希望得到?jīng)]有毒性且具有良好活性的化合物。迄今報道的有關(guān)嘌呤或嘧啶衍生物或無環(huán)核苷膦酸酯衍生物的現(xiàn)有研究是專利如US 5817647；US 5977061；US5886179；US 5837871；US 6069249；WO99/09031；WO96/09307；WO95/22330；US 5935946；US 5877166；和US 5792756；以及雜志如International Journal of AntimicrobialAgents 12(1999)，81-95；Nature 323(1986)，464；Heterocycles 31(1990)，1571；J.Med.Chem.42(1999)，2064；Pharmacology & Therapeutics 85(2000)，251；Antiviral Chemistry & Chemotherapy 5(1994)，57-63；Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 10(2000)2687-2690；Biochemical Pharmacology 60(2000)，1907-1913；Antiviral Chemistry&Chemotherapy 8(1997)557-564；和Antimicrobial Agent andChemotherapy 42(1999)2885-2892。
此外，通式(1)化合物具有兩個或多個不對稱的碳，且因此具有個或更多異構(gòu)體。具有不對稱碳的化合物的異構(gòu)體彼此具有不同的生物學(xué)性質(zhì)以及不同的生理化學(xué)性質(zhì)。通過分離和拆分那些異構(gòu)體，用于研發(fā)更有效用于人類的新藥物的研究近來日益增加。那些異構(gòu)體的早期研究結(jié)果在專利如US 4,018,895；US 4,194,009；US 5,618,829；US5,204,446；US 5,719,104；EP 0545425A1；和EP 0369685A1；以及雜志如Antimicrobial Agents and Chemotherapy 35(1991)1386-1390；Antimicrobial Agents and Chemotherapy 36(1992)672-676；和J.Med.Chem.31，(1988)1412-1417中公開。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人已經(jīng)合成了由通式(1)代表的(1-膦酰甲氧基-2-烷基環(huán)丙基)甲基核苷衍生物，且發(fā)現(xiàn)了通過分離和拆分它們的混合物制備它們的光學(xué)異構(gòu)體的方法。且，本發(fā)明人成功地發(fā)現(xiàn)了在通式(1)化合物的立體異構(gòu)體中，(+)-反式-異構(gòu)體在作為抗病毒劑(特別是抗乙型肝炎病毒)的藥物活性方面優(yōu)于其它商業(yè)化的或正在研發(fā)的藥物，并由此完成了本發(fā)明。
因此，本發(fā)明其中一個目的是提供通式(1)化合物的(+)-反式-異構(gòu)體、其藥學(xué)可接受的鹽、水合物、或溶劑化物，它們作為抗病毒劑(特別是，抗乙型肝炎病毒)具有極佳的功效。
本發(fā)明另一目的是提供用于制備通式(1)化合物的立體異構(gòu)體的方法。
本發(fā)明另一目的是提供在制備通式(1)化合物時，可被用作起始物質(zhì)的通式(2)化合物的制備方法。
且，本發(fā)明另一目的是提供一種用于治療病毒疾病(特別是，抗乙型肝炎病毒)的包含通式(1)化合物的(+)-反式-異構(gòu)體、其藥學(xué)可接受的鹽、水合物、或溶劑化物作為活性物質(zhì)的組合物。
進行本發(fā)明的最佳方式下面所代表的通式(1)化合物或其衍生物是(1-膦酰甲氧基-2-烷基環(huán)丙基)甲基核苷衍生物類型，它具有天然的堿，如腺嘌呤、鳥嘌呤、尿嘧啶、胞嘧啶、胸腺嘧啶，并具有兩個或更多不對稱碳原子
其中，R1代表C1-C7烷基，R2和R3彼此獨立地代表氫，或代表被選自鹵素(特別是氟)、C1-C4-烷氧基、苯氧基、C7-C10-苯基烷氧基、和C2-C5-酰氧基的一個或多個取代基任選取代的C1-C4-烷基，或代表C2-C7-酰基、C6-C12-芳基、C1-C7-烷基氨基羰基、二(C1-C7-烷基)氨基羰基或C3-C6-環(huán)烷基氨基羰基，或代表-(CH2)m-OC(＝O)-R4，其中m表示1-12的整數(shù)且R4代表C1-C12-烷基、C2-C7-烯基、C1-C5-烷氧基、C1-C7-烷基氨基、二(C1-C7-烷基)氨基、C3-C6-環(huán)烷基、或具有1或2個選自氮和氧的雜原子的3-6-元雜環(huán)，Q代表具有下列通式的基團 或 其中，X1、X2、X3和X4彼此獨立地代表氫、氨基、羥基、或鹵素，或代表C1-C7-烷基、C1-C5-烷氧基、烯丙基、羥基-C1-C7-烷基、苯基、或苯氧基，其每一個均被硝基或C1-C5-烷氧基任選取代，或代表C6-C10-芳硫基，其被硝基、氨基、C1-C6-烷基、或C1-C4-烷氧基任選取代，或代表C6-C12-芳基氨基、C1-C7-烷基氨基、二(C1-C7-烷基)氨基、C3-C6-環(huán)烷基氨基、或 的結(jié)構(gòu)，其中n表示1或2的整數(shù)且Y1代表O、CH2、或N-R(R代表C1-C7-烷基或C6-C12-芳基)。
且，本發(fā)明的化合物可形成藥學(xué)可接受的鹽。這種鹽包括含有藥學(xué)可接受的陰離子的無毒酸加成鹽，例如無機酸如鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸、氫溴酸、氫碘酸等的鹽；有機羧酸如酒石酸、蟻酸、檸檬酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、葡萄糖酸、苯甲酸、乳酸、富馬酸、馬來酸等的鹽；或磺酸如甲磺酸、苯磺酸、對-甲苯磺酸、萘磺酸等的鹽，但優(yōu)選硫酸、甲磺酸、氫鹵酸等的鹽。
作為顯示出有效的藥物活性的通式(1)化合物的(+)-反式-異構(gòu)體，優(yōu)選是那些，其中R1代表C1-C3烷基，R2和R3彼此獨立地代表氫，或代表被選自氟、C1-C4-烷氧基和苯氧基任選取代的C1-C4-烷基，或代表-(CH2)m-OC(＝O)-R4，其中m表示1-12的整數(shù)，且R4代表C1-C5-烷基或C1-C5-烷氧基，Q代表 其中，X1代表氫、羥基、氨基、或4-甲氧基苯硫基，且X2代表氫或氨基。
本發(fā)明通式(1)化合物的(+)-反式-異構(gòu)體的典型例子在下列表1中描述。
表1a
表1b
本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)本發(fā)明通式(1)化合物的(+)-反式-異構(gòu)體的絕對構(gòu)型是(1S，2S)。
可用作抗病毒劑的通式(1)化合物可通過下列方法制備。
通式(1)化合物的制備方法特征在于(a)由下列通式(2)代表的化合物
其中R1、R2和R3是如前述所定義的，且L代表離去基團，優(yōu)選甲磺酰氧基、對-甲苯磺酰氧基、或鹵素，與由下列通式(3)代表的化合物反應(yīng)QH(3)其中Q是如前述所定義的，產(chǎn)生通式(1)的化合物，或(b)由下列通式(4)代表的化合物 其中R1和L是如前述所定義的，且R5和R6彼此獨立地代表C1-C7烷基，與通式(3)的化合物反應(yīng)，產(chǎn)生由下列通式(5)代表的化合物 其中R1、R5、R6和Q是如前述所定義的，且所得通式(5)化合物在有路易斯酸存在的條件下被水解，產(chǎn)生由下列通式(1a)代表的化合物 其中R1和Q是如前述所定義的，或(c)將基團R2′和R3′引入到通式(1a)的化合物中，產(chǎn)生由下列通式(1b)代表的化合物 其中R1和Q是如前述所定義的，且R2′和R3′分別代表除氫以外的R2和R3，或由此獲得的化合物進一步經(jīng)過常規(guī)轉(zhuǎn)化(見USP 6,037,335；5,935,946；和5,792,756)。
在上述用于制備通式(1)化合物的方法變型(a)-(c)中，所述反應(yīng)可在溶劑中和有堿存在的條件下進行。作為溶劑，可提及選自二甲基甲酰胺、二氯甲烷、四氫呋喃、氯仿、1-甲基-2-吡咯烷酮、和二甲基乙酰胺的一種或多種，且作為堿，可提及選自氫化鈉、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、叔-丁氧鉀、雙(三甲基甲硅烷基)氨基氫、氨基鈉、碳酸銫、和雙(三甲基甲硅烷基)氨基鉀的一種或多種?？捎糜诜椒ㄗ冃?b)中的路易斯酸包括鹵化三甲基甲硅烷。此外，在用于將基團R2′和R3′引入到通式(1a)化合物中的方法變型(c)中，該化合物在有堿存在的條件下與烷基鹵經(jīng)過醚化，或用亞硫酰氯、乙二酰氯、或五氯化磷處理產(chǎn)生二氯膦酸酯，然后其與適宜的醇或胺反應(yīng)得到所需化合物。
在上述方法中用作起始物質(zhì)的通式(2)膦酸酯化合物中包括兩個不對稱的碳，且因此具有4個立體異構(gòu)體，其每一個都是新的化合物。因此，本發(fā)明另一目的是提供通式(2)化合物的制備方法。
通式(2)化合物的制備方法特征在于，(a)乙醇酸乙酯，其醇基團被保護，如下列通式(6)所代表的 其中P1代表醇-保護基團，優(yōu)選，苯甲基(Bn)、四氫吡喃基(piranyl)(THP)、叔-丁二苯基甲硅烷基(TBDPS)、或叔-丁二甲基甲硅烷基(TBDMS)，在有四異丙氧化鈦[Ti(OiPr)4]存在的條件下，與由下列通式(7)代表的鹵化烷基鎂反應(yīng)R7-MgX (7)其中R7代表C3-C7烷基且X代表鹵素，(b)用硅膠柱分離所得由下列通式(8)和(9)代表的兩個環(huán)丙醇非對映異構(gòu)體 (±)-反式-異構(gòu)體(8)
(±)-順式-異構(gòu)體(9)其中R1和P1是如前述所定義的，(c)在步驟(b)中分離的各化合物在有堿存在的條件下與由下列通式(10)代表的化合物經(jīng)過醚化 其中R2、R3和L是如前述所定義的，產(chǎn)生分別由下列通式(11)或(12)代表的膦酸酯化合物 ±)-反式-異構(gòu)體(11) (±)-順式-異構(gòu)體(12)其中R1、R2、R3和P1是如前述所定義的，且(d)除去所得通式(11)或(12)化合物的醇-保護基團，并將離去基團(L)分別引入到由下列通式(2a)或(2b)代表的化合物中 (±)-反式-異構(gòu)體(2a) (±)-順式-異構(gòu)體(2b)其中L、R1、R2和R3是如前述所定義的。
特別是，通式(2)的化合物可如下制備，其中R1是甲基、乙基、或丙基、丁基和戊基，且R2和R3中的每一個是乙基或異丙基(i)在有四異丙氧化鈦[Ti(OiPr)4]存在的條件下，乙醇酸乙酯(其醇基團被保護)[反應(yīng)流程1中的化合物(6)]與C3-C7-烷基溴化鎂或C3-C7-烷基氯化鎂[反應(yīng)流程1中的化合物(7)]反應(yīng)，(ii)用硅膠柱分離所得兩個環(huán)丙醇非對映異構(gòu)體[反應(yīng)流程1中的化合物(8)和(9)]，然后使各分離的化合物與二烷基鹵甲基膦酸酯[反應(yīng)流程1中的化合物(10)]經(jīng)過醚-形成反應(yīng)，產(chǎn)生膦酸酯化合物[反應(yīng)流程1中的化合物(11)和(12)]，(iii)除去所得化合物的醇-保護基團并引入離去基團(L)，產(chǎn)生通式(2a)和(2b)的化合物[反應(yīng)流程1中的化合物(2a)和(2b)](參見，反應(yīng)流程1)反應(yīng)流程1 其中P1、R7、X、R1和L是如前述所定義的。
本發(fā)明另一目的是提供用于制備通式(1)化合物的對映異構(gòu)體的方法。
通式(1)化合物的對映異構(gòu)體的制備方法特征在于，(a)利用手性柱或手性試劑拆分通式(1)的化合物，產(chǎn)生它的對映異構(gòu)體；或
(b)用水解酶拆分由下列通式(13)或(14)代表的化合物 (±)-反式-異構(gòu)體(13) (±)-順式-異構(gòu)體(14)其中R1、R2和R3是如前述所定義的，產(chǎn)生分別由下列通式(13a)和(13b)、或(14a)和(14b)代表的化合物 (+)-反式-異構(gòu)體(13a) (-)-反式-異構(gòu)體(13b) (+)-順式-異構(gòu)體(14a)
(-)-順式-異構(gòu)體(14b)其中R1、R2和R3是如前述所定義的，并用離去基團(L)替換所得各化合物中的醇基團，且之后使由此獲得的各化合物與通式(3)的化合物反應(yīng)，產(chǎn)生通式(1)化合物的對映異構(gòu)體；或(c)通式(13a)、(13b)、(14a)或(14b)的化合物是通過對映異構(gòu)體選擇性合成制備的，并通過方法變型(b)中描述的過程被轉(zhuǎn)化成通式(1)化合物的對映異構(gòu)體。
特別是，可在下面更詳細地解釋方法變型(a)-(c)(a)由下列通式(4a)或(4b)代表的化合物 (±)-反式-異構(gòu)體(4a) (±)-順式-異構(gòu)體(4b)
其中R1、R5、R6和L是如前述所定義的，與通式(3)的化合物反應(yīng)，并通過手性柱拆分由此獲得的產(chǎn)物，產(chǎn)生(+)、(-)兩個光學(xué)異構(gòu)體，其每一個以富含對映異構(gòu)體的異構(gòu)體形式存在，并用溴化三甲基硅烷(TMSBr)處理該光學(xué)異構(gòu)體，產(chǎn)生通式(1a)化合物的相應(yīng)的(+)、(-)兩個光學(xué)異構(gòu)體，且如果需要，將基團R2′和R3′引入到由此獲得的化合物中，產(chǎn)生通式(1b)化合物的相應(yīng)光學(xué)異構(gòu)體，或(b)用水解酶(脂酶)拆分通過除去通式(11)或(12)化合物中醇-保護基團獲得的通式(13)或(14)化合物中的每一個，產(chǎn)生通式(13a)和(13b)、或(14a)和(14b)的相應(yīng)富含對映異構(gòu)體的化合物，并進一步用離去基團(L)替換由此獲得的通式(13a)、(13b)、(14a)或(14b)化合物中的醇基團，產(chǎn)生由下列通式(2aa)、(2ab)、(2ba)或(2bb)代表的化合物 (+)-反式-異構(gòu)體(2aa) (-)-反式-異構(gòu)體(2ab) (+)-順式-異構(gòu)體(2ba)
(-)-順式-異構(gòu)體(2bb)其中R1、R2、R3和L是如前述所定義的，并使所得化合物與通式(3)的化合物反應(yīng)，產(chǎn)生通式(1)富含對映異構(gòu)體的化合物；或(c)通式(13a)、(13b)、(14a)或(14b)的化合物還可通過對映異構(gòu)體選擇性合成從(+)-(亞甲基環(huán)丙基)甲醇或(-)-(亞甲基環(huán)丙基)甲醇制備，它的絕對構(gòu)型是已知的aa)將醇-保護基團(P2)引入到(+)-(亞甲基環(huán)丙基)甲醇或(-)-(亞甲基環(huán)丙基)甲醇中；bb)所得化合物經(jīng)過二羥基化反應(yīng)，cc)將醇-保護基團(P1)引入到在上述(bb)步驟中獲得的化合物的伯羥基中，并將醇-保護基團(P3)引入到叔羥基中，產(chǎn)生由下列通式(15a)、(15b)、(16a)或(16b)代表的化合物 (+)-反式-異構(gòu)體(15a) (-)-反式-異構(gòu)體(15b)
+)-順式-異構(gòu)體(16a) (-)-順式-異構(gòu)體(16b)其中P1是如前述所定義的，P2代表醇-保護基團，優(yōu)選苯甲基、苯甲?；?、4-甲氧苯甲基、甲氧基苯甲基、甲氧基甲基或三苯甲基，且P3代表醇-保護基團，優(yōu)選包括1-甲氧乙酰基、乙?；?、2-(三甲基甲硅烷基)-1-乙磺酰基等在內(nèi)的酯基團，dd)選擇性除去所得化合物中的保護基團P2，引入離去基團(L)，并用氫還原或用C1-C7-烷基取代由此獲得的化合物，ee)除去在上述dd)步驟中獲得的產(chǎn)物中的保護基團(P3)，產(chǎn)生由下列通式(8a)、(8b)、(9a)或(9b)代表的化合物 (+)-反式-異構(gòu)體(8a) (-)-反式-異構(gòu)體(8b)
(+)-順式-異構(gòu)體(9a) (-)-順式-異構(gòu)體(9b)其中R1和P1是如前述所定義的，ff)使上述步驟ee)中所得的化合物與通式(10)的膦酸酯化合物反應(yīng)，并除去由此獲得的化合物的保護基團(P1)，產(chǎn)生通式(13a)、(13b)、(14a)或(14b)的化合物，gg)用離去基團(L)替換各所得化合物的醇基團，產(chǎn)生通式(2aa)、(2ab)、(2ba)或(2bb)的化合物；并hh)使所得化合物與通式(3)化合物反應(yīng)，產(chǎn)生通式(1)富含對映異構(gòu)體的化合物。
通式(1)對映異構(gòu)體的制備方法變型(a)-(c)可通過下列反應(yīng)流程2、3和4詳細舉例說明。
下面簡單說明反應(yīng)流程2。通式(2)的化合物[反應(yīng)流程2中的化合物(4a)]與通式(3)的化合物在前述反應(yīng)條件下反應(yīng)，得到通式(5)的化合物[反應(yīng)流程2中的化合物(5a)]。通過手性柱拆分所得化合物，得到兩個富含對映異構(gòu)體的化合物[反應(yīng)流程2中的化合物(5b)和(5c)]。觀察由此獲得的各化合物的特定旋轉(zhuǎn)，以鑒定(+)-反式-光學(xué)異構(gòu)體(5b)和(-)-反式-光學(xué)異構(gòu)體(5c)。用溴化三甲基甲硅烷(TMSBr)處理各光學(xué)異構(gòu)體，得到通式(1a)化合物的相應(yīng)的富含對映異構(gòu)體的化合物[反應(yīng)流程2中的化合物(1c)和(1d)]。
反應(yīng)流程2 其中L、R1、Q、R2’和R3’是如前述所定義的。
下面簡單說明反應(yīng)流程3。通式(1a)化合物的富含對映異構(gòu)體的化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(1c)和(1d)]可通過使用水解酶(脂酶)制備。除去通式(11)化合物[反應(yīng)流程3中的通式(11)化合物]的醇-保護基團，得到通式(13)的化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(13)]。通式(13)的化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(13)]在非水有機溶劑中和有?；噭┐嬖诘臈l件下，通過使用水解酶(脂酶)選擇性經(jīng)過?；磻?yīng)，得到通式(13a)的化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(13a)]及?；幕衔颷反應(yīng)流程3中的化合物(17)]。此外，通過使用水解酶(脂酶)在含水溶劑中水解?；幕衔颷反應(yīng)流程3中的化合物(17)]，得到通式(13b)的化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(13b)]。由此獲得的通式(13a)和(13b)的化合物經(jīng)過前述過程，分別得到通式(1a)富含對映異構(gòu)體的化合物。上述方法的特定反應(yīng)條件可參考下列制備。
本發(fā)明中所用的水解酶(脂酶)是指從豬的肝臟或皺摺假絲酵母(Canadida rugosa)中提取的酯酶、或從Canadida antanrctica(A和B部分)、皺摺假絲酵母、假單胞菌屬(Pseudomonas sp.)、豬胰腺、腐質(zhì)霉(Humicola sp.)、Thermomyces、或米黑毛霉(Mucor miehei)提取的脂酶。本發(fā)明所用的?；噭┤缦?其中R9代表氫、C1-C7-烷基、C3-C7-環(huán)烷基、或C5-C10-環(huán)烯基，R10代表氫、C1-C7-烷基、或C1-C7-鏈烯基，且X5和X6彼此獨立地代表C、O或S。
反應(yīng)流程3
其中R1、R2、R3、P1和Q是如前述所定義的，且R11代表 下面簡單說明反應(yīng)流程4。通式(1a)富含對映異構(gòu)體的化合物[反應(yīng)流程4中的化合物(1c)和(1d)]可通過對映異構(gòu)體選擇性合成，另一制備方法制備。通過使用(+)-(亞甲基環(huán)丙基)甲醇或(-)-(亞甲基環(huán)丙基)甲醇，其是熟知的手性化合物，[反應(yīng)流程4中的化合物(18)][參考文獻Journalof Organic Chemistry，67，286-289(2002)，Journal of Organic Chemistry，58，5915-5917(1993)，Journal of Organic Chemistry，59，5483-5484(1994)]作為起始物質(zhì)，通式(1a)富含對映異構(gòu)體的化合物[反應(yīng)流程4中的化合物(1c)或(1d)]可按照反應(yīng)流程4中所述制備。將保護基團(P2)引入到(+)-(亞甲基環(huán)丙基)甲醇或(-)-(亞甲基環(huán)丙基)甲醇[反應(yīng)流程4中的化合物(18)]的醇基團中。將兩個羥基引入到所得化合物[反應(yīng)流程4中的化合物(19)]的雙鍵中，并將其它保護基團(P1和P3)選擇性引入到各羥基中，分別得到通式(15a)或(15b)的化合物[反應(yīng)流程4中的化合物(20)]。選擇性除去由此獲得的化合物[反應(yīng)流程4中的化合物(20)]的保護基團(P2)，得到醇化合物[反應(yīng)流程4中的化合物(21)]，并用離去基團(L)取代所得化合物[反應(yīng)流程4中的化合物(21)]的羥基，得到化合物[反應(yīng)流程4中的化合物(22)]。通過使用氫還原由此獲得的化合物或使用R8-M(R8代表C1-C6-烷基且M代表金屬化合物，包括MgBr和Li)對由此獲得的化合物進行烷基取代得到化合物[反應(yīng)流程4中的化合物(23)]。除去化合物(反應(yīng)流程4中的化合物(23))的保護基團(P3)，得到通式(8a)或(8b)的化合物[反應(yīng)流程4中的化合物(24)]。通式(8a)或(8b)的化合物[反應(yīng)流程4中的化合物(24)]與通式(10)的化合物(二烷基鹵甲基膦酸酯)經(jīng)過醚化，并除去醇-保護基團(P1)，獲得通式(13a)或(13b)富含對映異構(gòu)體的化合物[反應(yīng)流程4中的化合物(13a)或(13b)]。通式(13a)或(13b)的化合物可通過與前述相同的過程轉(zhuǎn)化成通式(1a)富含對映異構(gòu)體的化合物[反應(yīng)流程4中的化合物(1c)或(1d)]。上述方法的具體反應(yīng)條件可參考下列制備。
反應(yīng)流程4 其中P1、P2、P3、L、R1和Q是如前述所定義的。
用于制備方法和本發(fā)明化合物的分離和拆分方法中的條件，例如，反應(yīng)物、溶劑、堿、所用反應(yīng)物的量、硅膠柱、手性柱、洗脫劑等不限于此處說明的那些。本發(fā)明的化合物還可常規(guī)制備，并通過將各種方法，以及本說明書中所述或本領(lǐng)域已知的分離和拆分方法任選組合來分離并拆分，且它們的組合可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員很容易地進行以適合本發(fā)明。
上述方法的具體反應(yīng)條件可參考下列制備和實施例。
反應(yīng)完成后，可通過普通檢測方法，如色譜、重結(jié)晶、蒸餾等進一步分離和純化所得產(chǎn)物。
本發(fā)明通式(1)化合物的(+)-反式-異構(gòu)體可有效用作抗病毒劑。因此，本發(fā)明另一目的是提供一種用于治療病毒疾病(特別是，抗乙型肝炎病毒)的組合物，其包含作為活性成分的通式(1)化合物的(+)-反式-異構(gòu)體、其藥學(xué)可接受的鹽、水合物或溶劑化物以及藥學(xué)可接受的載體。
當本發(fā)明的活性化合物用于臨床目的時，優(yōu)選以每天0.01-10000mg、優(yōu)選0.05-100mg/kg體重的量給予它們?？偟拿咳談┝靠山o予一次或若干次。然而，患者的具體給藥劑量可根據(jù)所用的具體化合物、目標患者的體重、性別、或健康條件、飲食、給藥時間或方法、排泄速率、藥劑的混合比例、所治療疾病的嚴重程度等而變化。
本發(fā)明的化合物可以注射劑或口服制品的形式給藥。
注射劑、如用于注射無菌含水或含油混懸液可按照已知過程，使用適宜的分散劑、濕潤劑、或混懸劑制備。可用于制備注射劑的溶劑包括水、林格氏流體、及等滲NaCl溶液，且可將無菌的固定油常規(guī)用作溶劑或混懸介質(zhì)。任何無刺激性的固定油包括甘油單酯、甘油二酯也可用于此目的。脂肪酸，如油酸也可用于注射劑。
作為用于口服給藥的固體制品，可提及膠囊劑、片劑、丸劑、粉劑、顆粒劑等，優(yōu)選膠囊劑和片劑。且希望將片劑和丸劑配制成腸溶衣制品。所述固體制品可通過將本發(fā)明通式(1)化合物的(+)-反式-異構(gòu)體活性化合物與至少一種選自非活性稀釋劑、如蔗糖、乳糖、淀粉等，潤滑劑如硬脂酸鎂、崩解劑、和粘合劑的載體混合而制備。
當把本發(fā)明化合物臨床用于獲得所需抗病毒作用時，可將通式(1)化合物的(+)-反式-異構(gòu)體活性化合物聯(lián)合一種或多種選自已知抗癌或抗病毒劑的物質(zhì)給藥。作為可以這種方式與本發(fā)明化合物共同給藥的抗癌或抗病毒劑，可提到5-氟尿嘧啶、順鉑、阿霉素、紫杉醇、吉西他濱、拉夫米定等。
然而，包含本發(fā)明化合物的制品不限于上面說明的那些，且可包含用于治療或預(yù)防癌癥或病毒疾病的任何物質(zhì)。
將在下列制備、實施例、和實驗中更具體地解釋本發(fā)明。然而，應(yīng)當理解這些制備、實施例、和實驗是用于舉例說明本發(fā)明，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
制備1 (±)-反式-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-甲基丙醇(8-1)和(±)-順式-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-甲基環(huán)丙醇(9-1)的合成根據(jù)參考文獻中的描述(見Syn.Lett.07，1053-1054，1999)，標題化合物是如下制備的將50g(0.146摩爾)2-{[叔-丁基(二苯基)甲硅烷]氧基}乙酸乙酯溶于700ml四氫呋喃(THF)中，并向其中加入30ml四異丙氧化鈦。在-15℃時，向混合物中緩慢加入290ml氯化丙基鎂(2.0M，溶于THF中)，并在室溫下攪拌反應(yīng)溶液12小時。加入50ml飽和氯化銨以終止反應(yīng)。通過減壓蒸餾除去用作溶劑的約700ml四氫呋喃(THF)，并用700ml己烷萃取反應(yīng)混合物2次。減壓蒸餾己烷萃取物，并利用硅膠柱分離殘余物(洗脫劑1∶8/乙酸乙酯∶己烷)，得到兩個標題化合物(非對映異構(gòu)體非對映異構(gòu)體)，38g(8-1)和3.8g(9-1)。各化合物的結(jié)構(gòu)是利用NMR證實的。
標題化合物(8-1)1H NMR(CDCl3)δ0.08(t，1H)，0.90(q，1H)，0.96(d，3H)，1.08(s，9H)，1.14(m，1H)，2.79(s，1H)，3.70(d，1H)，3.84(d，1H)，7.43(m，6H)，7.70(m，4H)ESI363(M+Na)+，C21H28O2Si標題化合物(9-1)1H NMR(CDCl3)δ0.31(t，1H)，0.62(q，1H)，0.69(m，1H)，1.07(s，9H)，1.15(d，3H)，2.46(s，1H)，3.49(d，1H)，3.79(d，1H)，7.43(m，6H)，7.70(m，4H)
ESI363(M+Na)+，C21H28O2Si制備2 (±)-反式-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷]氧基}甲基)-2-乙基環(huán)丙醇(8-2)和(±)-順式-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷]氧基}甲基)-2-乙基環(huán)丙醇(9-2)的合成進行與制備1相同的過程，區(qū)別在于用氯化丁基鎂代替氯化丙基鎂，得到作為主要化合物的30g標題化合物(8-2)，但幾乎沒有獲得化合物(9-2)。
標題化合物(8-2)1H NMR(CDCl3)δ0.09(t，1H)，0.97(q，1H)，0.97(t，3H)，1.06(2H)，1.07(s，9H)，1.31(t，1H)，2.79(s，1H)，3.71(d，1H)，3.81(d，1H)，7.41(m，6H)，7.68(m，4H)ESI377(M+Na)+，C22H30O2Si制備3 (8-3)-(反式)
(±)-反式-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷]氧基}甲基)-2-丙基環(huán)丙醇(8-3)的合成進行與制備1相同的過程，區(qū)別在于用氯化戊基鎂代替氯化丙基鎂，得到作為主要化合物的25g標題化合物(8-3)。
標題化合物(8-3)1H NMR(CDCl3)δ0.09(t，1H)，0.68(1H)，0.70(t，3H)，0.82(m，1H)，1.09(s，10H)，1.32(m，1H)，1.40(m，2H)，2.90(s，1H)，3.73(d，1H)，3.85(d，1H)，7.45(m，6H)，7.74(m，4H)ESI391(M+Na)+，C23H32O2Si制備4 二異丙基{(±)-反式-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷]氧基}甲基)-2-甲基環(huán)丙}氧基}甲基膦酸酯的合成將在制備1中制備的化合物(8-1)(7.5g)溶于35ml二甲基甲酰胺中，并向其中加入9.7g二異丙基溴甲基膦酸酯，攪拌所得混合物10分鐘。在50℃下，向混合物中緩慢加入35ml叔-丁氧鋰(1.0M，溶于THF中)，攪拌混合物4個多小時。減壓蒸餾除去二甲基甲酰胺，向殘余物中加入40ml飽和氯化銨，然后用乙酸乙酯萃取。減壓蒸餾乙酸乙酯萃取物，利用硅膠柱色譜純化殘余物(洗脫劑乙酸乙酯/正-己烷＝1/1，v/v)，得到7.0g(產(chǎn)率61％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ0.13(t，1H)，0.96(m，1H)，0.97(d，3H)，1.05(m，1H)，1.06(s，9H)，1.30(t，12H)，3.70(d，1H)，3.98(d，2H)，4.00(d，1H)，4.75(m，2H)，7.42(m，6H)，7.70(m，4H)
制備5 二異丙基{(±)-反式-1-(羥甲基)-2-甲基環(huán)丙}氧基}甲基膦酸酯的合成將在制備4中制備的化合物(8.3g)溶于100ml甲醇中，向其中加入3.1g氟化銨，并加熱回流所得混合物2小時。反應(yīng)完成后，減壓蒸餾除去甲醇，通過硅膠柱色譜純化殘余物(洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝20/1，v/v)，得到3.6g(產(chǎn)率82％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ0.23(t，1H)，0.96(dd，1H)，1.12(d，3H)，1.23(m，1H)，1.32(d，12H)，3.59(d，1H)，3.82(d，2H)，3.96(d，1H)，4.01(s，1H)，4.82(m，2H)ESI303(M+Na)+，C12H25O5P制備6 二異丙基{(±)-順式-1-(羥甲基)-2-甲基環(huán)丙}氧基}甲基膦酸酯的合成使在制備1中制備的化合物(9-1)(3.0g)按照與制備4和5相同的過程連續(xù)反應(yīng)，得到1.2g標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ0.41(t，1H)，0.71(dd，1H)，0.89(m，1H)，1.13(d，3H)，1.33(d，12H)，3.50(m，1H)，3.65(m，1H)，3.81(dd，1H)，3.91(dd，1H)，4.29(s，1H)，4.76(m，2H)ESI303(M+Na)+，C12H25O5P制備7 二異丙基{(±)-反式-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷]氧基}甲基)-2-乙基環(huán)丙}氧基}甲基膦酸酯的合成使在制備2中制備的化合物(8-2)(4.2g)按照與制備4相同的過程反應(yīng)，得到3.6g標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ0.15(t，1H)，0.92(m，1H)，0.94(t，3H)，1.06(s，9H)，1.08(m，1H)，1.25(m，1H)，1.31(m，12H)，1.35(m，1H)，3.73(d，1H)，3.98(m，3H)，4.74(m，2H)，7.41(m，6H)，7.67(m，4H)制備8 二異丙基{(±)-反式-1-(羥甲基)-2-乙基環(huán)丙}氧基}甲基膦酸酯的合成使在制備7中制備的化合物(3.6g)按照與制備5相同的過程反應(yīng)，得到1.6g標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ0.27(t，1H)，0.95(dd，1H)，1.02(d，3H)，1.15(m，1H)，1.29(m，1H)，1.34(d，12H)，1.37(m，1H)，3.68(dd，1H)，3.84(d，2H)，3.88(dd，1H)，4.00(brt，1H)，4.77(m，2H).
制備9 二異丙基{(±)-反式-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷]氧基}甲基)-2-丙基環(huán)丙}氧基}甲基膦酸酯的合成使在制備3中制備的化合物(8-3)(1.2g)按照與制備4相同的過程反應(yīng)，得到1.1g標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ0.14(t，1H)，0.85(t，3H)，0.95(m，2H)，1.05(s，9H)，1.25(m，1H)，1.31(m，12H)，1.38(m，3H)，3.70(d，1H)，3.98(m，3H)，4.72(m，2H)，7.38(m，6H)，7.66(m，4H).
制備10 二異丙基{(±)-反式-1-(羥甲基)-2-丙基環(huán)丙}氧基}甲基膦酸酯的合成使在制備9中制備的化合物(1.2g)按照與制備5相同的過程反應(yīng)，得到0.5g標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ0.28(t，1H)，0.94(t，3H)，0.97(m，1H)，1.20(m，2H)，1.33(d，12H)，1.41(m，3H)，3.65(dd，1H)，3.82(d，2H)，3.87(dd，1H)，4.00(brt，1H)，4.77(m，2H)制備11 二異丙基({(±)-反式-1-[(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-甲基環(huán)丙}氧基)甲基膦酸酯的合成將在制備5中制備的化合物(2.3g)溶于75ml二氯甲烷中，向其中加入1.23g三乙胺和1.2g甲磺酰氯，室溫攪拌所得混合物30分鐘。加入飽和氯化銨以終止反應(yīng)。用二氯甲烷萃取產(chǎn)物，減壓蒸餾除去二氯甲烷，得到2.73g(產(chǎn)率94％)甲磺酸鹽化合物，其可用于下一步反應(yīng)而無需任何純化。
1H NMR(CDCl3)δ0.44(t，1H)，1.16(d，3H)，1.20(m，1H)，1.32(m，12H)，1.30(m，1H)，3.14(s，3H)，3.82(m，2H)，4.33(d，1H)，4.68(d，1H)，4.78(m，2H).
將所得甲磺酸鹽(430mg)溶于18ml二甲基甲酰胺中，并向其中加入57.6mg(60％純度)氫化鈉和162mg 6-氯鳥嘌呤(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤)。加熱回流反應(yīng)混合物4小時。加入飽和氯化銨以終止反應(yīng)。用乙酸乙酯萃取產(chǎn)物，并減壓蒸餾乙酸乙酯萃取物，通過硅膠柱色譜純化殘余物(洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝20/1，v/v)，得到201mg(產(chǎn)率44％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ0.50(t，1H)，1.12(m，1H)，1.16(d，3H)，1.21(dd 6H)，1.27(t，6H)，1.39(m，1H) 3.86(m，2H)，4.31(d，2H)，4.69(m，2H)，5.13(brs，2H)，8.32(s，1H)
ESI432(M+1)+，C17H27ClN5O4P制備12 二異丙基({(±)-瞬時-1-[(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-甲基環(huán)丙}氧基)甲基膦酸酯的合成使在制備6中制備的化合物(0.51g)按照與制備11相同的過程反應(yīng)，區(qū)別在于用腺嘌呤代替6-氯鳥嘌呤，得到250mg標題化合物。
ESI398(M+1)+，C17H28N5O4P制備13 二異丙基({(±)-反式-1-[(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-乙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸酯的合成使在制備8中制備的化合物(620mg)按照與制備11相同的過程進行反應(yīng)，得到330mg標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ0.53(t，1H)，0.97(t，3H)，1.08(m，1H)，1.25(dd 6H)，1.26(m，1H)，1.28(t，6H)，1.40(m，2H)，3.80(m，2H)，4.16(d，1H)，4.40(d，1H)，4.69(m，2H)，5.10(s，2H)，8.18(s，1H).
制備14 二異丙基({[(±)-(反式)]-1-[(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-乙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸酯的合成使在制備8中制備的化合物(210mg)按照與制備11相同的過程反應(yīng)，區(qū)別在于用腺嘌呤代替6-氯鳥嘌呤，得到95mg標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ0.58(t，1H)，0.98(t，3H)，1.12(m，1H)，1.28(dd 6H)，1.26(m，1H)，1.39(m，6H)，1.42(m，2H)，3.80(m，2H)，4.32(d，1H)，4.68(d，1H)，4.75(m，2H)，5.92(brs，2H)，8.29(s，1H)，8.34(s，1H).
制備15
二異丙基({[(±)-(反式)]-1-[(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-丙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸酯的合成使在制備10中制備的化合物(240mg)按照與制備11相同的過程反應(yīng)，得到110mg標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ0.55(t，1H)，0.93(t，3H)，1.13(m，1H)，1.25(dd 6H)，1.26(m，1H)，1.29(t，6H)，1.31(m，4H)，1.40(m，1H)，3.80(m，2H)，4.18(d，1H)，4.40(d，1H)，4.69(m，2H)，5.06(s，2H)，8.18(s，1H).
制備16 二異丙基({[(±)-(反式)]-1-[(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-丙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸酯的合成使在制備10中制備的化合物(105mg)按照與制備11相同的過程反應(yīng)，區(qū)別在于用腺嘌呤代替6-氯鳥嘌呤，得到45mg標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ0.59(t，1H)，0.91(t，3H)，1.12(m，1H)，1.31(m 12H)，1.32(m，5H)，3.80(m，2H)，4.32(d，1H)，4.50(d，1H)，4.72(m，2H)，5.80(brs，2H)，8.28(s，1H)，8.34(s，1H).
制備17 二異丙基({[(±)-(順式)]-1-[(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-甲基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸酯的合成使在制備6中制備的化合物(80mg)按照與制備11相同的過程反應(yīng)，得到35mg標題化合物。
ESI432(M+1)+，C17H27ClN5O4P制備18 二異丙基{[(+)-反式-1-(羥甲基)-2-甲基環(huán)丙基]氧基}甲基膦酸酯和二異丙基{[(-)-反式-1-(羥甲基)-2-甲基環(huán)丙基]氧基}甲基膦酸酯的合成將在制備5中制備的消旋體(51g)溶于200ml甲苯中，向其中加入1.5g脂酶(Canadida antanrctica B，固定化，Novozyme 435)和11.8ml乙酸乙烯酯，室溫攪拌所得混合物40小時。減壓蒸餾除去溶劑，通過色譜法分離混合物中的化合物(13a)和(17)，得到17.7g化合物(13a)和38.4g化合物(17)。將化合物(17)加入到100ml磷酸鹽緩沖液(0.3M，pH7.2)中，用多達60％的1.54g Novozyme 435水解該溶液，并用有機溶劑萃取。且，減壓蒸餾除去溶劑，并分離所得混合物，得到16.6g化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(13b)]和18.92g化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(17)]。根據(jù)與上述相同的過程水解該化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(17)]，并分離所得混合物，得到6.2g化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(13b)]和8.3g化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(17)]。通過與上述相同的過程完全水解由此獲得的8.3g化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(17)]，得到8g化合物(13a)。反應(yīng)流程3中的兩個化合物，化合物(13a)和(13b)的光學(xué)活性(比旋度)分別為[α]D＝+42.27和-46.50。為了測定上述兩個化合物的光學(xué)純度，通過在有堿存在的條件下，使上述兩個化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(13a)和(13b)]與s-(+)甲氧苯基乙酰氯反應(yīng)制備的產(chǎn)物純度是通過高壓液相色譜(HPLC，使用手性柱)證實的。所得兩種化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(13a)和化合物(13b)]的光學(xué)純度均超過95％。來源于反應(yīng)流程3中化合物(13a)的化合物的保留時間為13分鐘，而來源于反應(yīng)流程3中化合物(13b)的化合物的保留時間為14分鐘(0.9ml/分鐘，己烷∶異丙醇，95∶5)。
制備19 二異丙基({(+)-(反式)-1-[(2-氨基-6-氨-9H-嘌呤-9-基)甲基]-1-甲基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸酯和二異丙基({(-)-(反式)-1-[(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)甲基]-1-甲基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸酯的合成使在制備18中制備的化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(13a)]按照與制備11相同的過程反應(yīng)，得到所需標題化合物。1H NMR，質(zhì)量和光學(xué)活性與在實施例1中制備的化合物(5b-1)的那些相同。此外，通過將相同方法應(yīng)用于在制備18中制備的化合物(13b)上而獲得的化合物的1HNMR、質(zhì)量和光學(xué)活性與在實施例1中制備的化合物(5c-1)的那些相同。
制備20 1-({[(1R)-2-亞甲基環(huán)丙基]甲氧基}甲基)苯的合成將熟知的化合物[(2R)-亞甲基環(huán)丙基]甲醇(300mg)[參考文獻Journal of Organic Chemistry，67，286-289(2002)，Journal of OrganicChemistry，58，5915-5917(1993)，Journal of Organic Chemistry，59，5483-5484(1994)]溶于10ml二甲基酰胺(DMF)中，向溶液中加入214mg氫化鈉(NaH，溶于礦物油中，60％)和732.5mg芐基溴(BnBr)，攪拌混合物10小時。向其中加入水(20ml)和二乙醚(100ml)。分離有機層并減壓蒸餾除去，通過硅膠柱色譜純化殘余物(洗脫劑乙酸乙酯/正-己烷5/95，v/v)得到350mg(產(chǎn)率57％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)d0.97(m，1H)，1.35(tt，1H)，1.80(m，1H)，3.17(dd，1H)，3.53(dd，1H)，4.56(q，2H)，5.47(br s，1H)，5.46(br s，1H)，7.31(m，5H).
ESI175(M+1)+，C12H14O.
此外，使用[(2S)-亞甲基環(huán)丙基]甲醇作為起始物質(zhì)進行與上述相同的過程，得到1-({[(1S)-2-亞甲基環(huán)丙基]甲氧基}甲基)苯，且它的NMR數(shù)據(jù)與標題化合物相同。
制備21 (1R，2S)-2-[(芐氧基)甲基]-1-(羥甲基)環(huán)丙醇的合成將在制備20中制備的化合物(200mg)溶于水/THF(5ml/5ml)中，向其中加入1ml OsO4(四氧化鋨，2.5重量％叔-丁醇溶液)和NMO(4-甲基嗎啉N-氧化物)。攪拌該混合物24小時后，向其中加入水(20ml)和二氯甲烷(50ml)，分離有機層。減壓蒸餾除去有機層，通過硅膠柱色譜純化殘余物(洗脫劑二氯甲烷/甲醇95/5，v/v)得到220mg(產(chǎn)率92％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)d 0.47(t，1H)，1.10(dd，1H)，1.49(m，1H)，2.97(t，1H)，3.16(brd，1H)，3.40(d，1H)，3.67(br s，1H)，3.86(q，1H)，3.98(t，1H)，4.46(d，1H)，4.58(d，1H)，7.34(m，5H).
13C NMR(CDCl3)d 14.9，22.0，53.4，69.0，69.3，73.1，127.8，127.9(2C)，128.4(2C)，137.9. D＝(+)7.7(c＝0.013于CHCl3)ESI209(M+1)+，C12H16O3.
此外，使用1-({[(1S)-2-亞甲基環(huán)丙基]甲氧基}甲基)苯作為起始物質(zhì)進行與上述相同的過程，獲得(1S，2R)-2-[(芐氧基)甲基]-1-(羥甲基)環(huán)丙醇，且它的NMR數(shù)據(jù)與標題化合物相同。光學(xué)活性為[α]D＝(-)8.0(c＝0.01，溶于CHCl3中)。
制備22 (1R，2S)-2-[(芐氧基)甲基]-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-環(huán)丙醇的合成將在制備21中制備的化合物(250mg)溶于DMF(10ml)中，并在0℃下向其中緩慢滴加350mg咪唑和360mg氯化二苯基叔-丁基甲硅烷溶于DMF(5ml)中的溶液。室溫攪拌所得混合物10小時。向其中加入水(20ml)和二乙醚(50ml)。分離其中的有機層并通過減壓蒸餾除去，通過硅膠柱色譜純化殘余物(洗脫劑乙酸乙酯/正-己烷1/5，v/v)得到280mg(產(chǎn)率52％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)d 0.39(t，1H)，1.03(dd，1H)，1.08(s，9H)，1.52(m，1H)，2.83(s，1H)，3.27(dd，1H)，3.39(dd，1H)，3.80(q，2H)，4.50(s，2H)，7.31(m，5H)，7.36(m，10H)，7.68(m，4H).
13C NMR(CDCl3)d 16.4，19.3，24.2，26.9(3C)，59.1，66.6，69.5，72.5，127.5(2C)，127.6(2C)，127.8(4C)，128.3(2C)，129.8(2C)，133.2，133.3，135.6(4C)，138.2.
ESI447(M+1)+，C28H34O3Si.
此外，使用(1S，2R)-2-[(芐氧基)甲基]-1-(羥甲基)環(huán)丙醇作為起始物質(zhì)進行與上述相同的過程，獲得(1S，2R)-2-[(芐氧基)甲基]-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-環(huán)丙醇，且它的NMR數(shù)據(jù)與標題化合物相同。
制備23 (1R，2S)-2-[(芐氧基)甲基]-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-環(huán)丙基2-甲氧基乙酸酯的合成將在制備22中制備的化合物(250mg)溶于二氯甲烷(10ml)中，并在0℃下向其中緩慢滴加1.0ml TEA(三乙胺)和400mg 2-甲氧基乙酰氯。室溫攪拌所得混合物10小時。向其中加入水(20ml)和二乙醚(50ml)。分離其中的有機層并通過減壓蒸餾除去，利用硅膠柱色譜純化殘余物(洗脫劑乙酸乙酯/正-己烷1/5，v/v)，得到200mg(產(chǎn)率69％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)d 0.86(t，1H)，1.03(s，9H)，1.15(tt，1H)，1.57(m，1H)，3.34(dd，1H)，3.38(s，3H)，3.73(dd，1H)，3.85(d，2H)，3.88(d，2H)，4.11(d，2H)，4.48(s，2H)，7.37(m，11H)，7.61(m，4H).
13C NMR(CDCl3)d 15.7，19.2，23.2，26.8(3C)，59.3，63.2，64.2，68.6，69.6，72.6，127.6(2C)，127.7(2C)，127.8(4C)，128.3(2C)，129.7(2C)，133.3，133.4，135.6(4C)，138.2，169.8.
ESI519(M+1)+，C31H38O5Si.
此外，使用(1S，2R)-2-[(芐氧基)甲基]-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-環(huán)丙醇作為起始物質(zhì)進行與上述相同的過程，獲得(1S，2R)-2-[(芐氧基)甲基]-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-環(huán)丙基2-甲氧基乙酸酯，且它的NMR數(shù)據(jù)與標題化合物相同。
制備24 (1R，2S)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-(羥甲基)環(huán)丙基2-甲氧基乙酸酯的合成將在制備23中制備的化合物(200mg)溶于甲醇(20ml)中，并向其中加入40mg的10％披鈀木炭。在1atm下，用氫氣還原所得混合物24小時。進一步向其中加入10％披鈀木炭(50mg)，再次還原所得混合物24小時。用硅藻土除去披鈀木炭，減壓蒸餾除去殘余溶液，通過硅膠柱色譜純化殘余物(洗脫劑乙酸乙酯/正-己烷1/2，v/v)得到160mg(產(chǎn)率98％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)d 0.81(t，1H)，1.10(s，9H)，1.11(m，1H)，1.73(m，1H)，3.19(d，1H)，3.26(t，1H)，3.36(s，3H)，3.72(dd，1H)，3.82(q，2H)，3.96(m，1H)，4.38(d，1H)，7.45(m，6H)，7.63(m，4H).
ESI429(M+1)+，C24H32O5Si.
此外，使用(1S，2R)-2-[(芐氧基)甲基]-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-環(huán)丙基2-甲氧基乙酸酯作為起始物質(zhì)進行與上述相同的過程，獲得(1S，2R)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-(羥甲基)環(huán)丙基2-甲氧基乙酸酯，且它的NMR數(shù)據(jù)與標題化合物相同。
制備25 (1R，2S)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-(溴甲基)環(huán)丙基2-甲氧基乙酸酯的合成將在制備24中制備的化合物(150mg)溶于10ml乙腈(AN)中，并在0℃下向其中緩慢滴加230mg三苯基膦(PPh3)和240mg四溴化碳(CBr4)。室溫攪拌所得混合物1小時。向其中加入水(20ml)和二乙醚(50ml)。分離其中的有機層并通過減壓蒸餾除去。利用硅膠柱色譜純化殘余物(洗脫劑乙酸乙酯/正-己烷1/8，v/v)，得到130mg(產(chǎn)率76％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)d 0.95(t，1H)，1.06(s，9H)，1.26(dd，1H)，1.77(m，1H)，3.25(t，1H)，3.39(s，3H)，3.74(dd，1H)，3.85(q，2H)，3.86(d，1H)，4.23(d，1H)，7.45(m，6H)，7.66(m，4H).
13C NMR(CDCl3)d 15.1，15.8，22.8，26.4(3C)，28.9，55.9，59.8，62.6，66.1，124.4(2C)，124.5(2C)，126.5(2C)，129.5，129.6，132.2(4C)，166.2.
ESI492(M+1)+，C24H31BrO4Si.
此外，使用(1S，2R)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-(羥甲基)環(huán)丙基2-甲氧基乙酸酯作為起始物質(zhì)進行與上述相同的過程，獲得(1S，2R)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-(溴甲基)環(huán)丙基2-甲氧基乙酸酯，且它的NMR數(shù)據(jù)與標題化合物相同。
制備26 (1R，2R)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷]氧基}甲基)甲基環(huán)丙基2-甲氧基乙酸酯的合成將在制備25中制備的化合物(120mg)溶于甲醇(20ml)中，并向其中加入20mg 10％披鈀木炭。在1atm下，用氫氣還原所得混合物24小時。進一步加入10％披鈀木炭(50mg)，再次還原所得混合物24小時。用硅藻土除去披鈀木炭，減壓蒸餾除去殘余溶液，通過硅膠柱色譜純化殘余物(洗脫劑乙酸乙酯/正-己烷1/8，v/v)得到80mg(產(chǎn)率79％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)d 0.53(t，1H)，1.01(dd，1H)，1.06(s，9H)，1.12(d，3H)，1.23(m，1H)，3.42(s，3H)，3.83(d，1H)，3.89(d，2H)，4.14(d，1H)，7.41(m，6H)，7.65(m，4H).
ESI413(M+1)+，C24H32O4Si.
此外，使用(1S，2R)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-(溴甲基)環(huán)丙基2-甲氧基乙酸酯作為起始物質(zhì)進行與上述相同的過程，獲得(1S，2S)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)甲基環(huán)丙基2-甲氧基乙酸酯，且它的NMR數(shù)據(jù)與標題化合物相同。
制備27
(1R，2R)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-甲基環(huán)丙醇的合成將在制備26中制備的化合物(15mg)溶于5ml氨的甲醇溶液中(2M，溶于MeOH中)，室溫攪拌所得混合物10小時。減壓蒸餾除去溶劑，通過硅膠柱色譜純化殘余物(洗脫劑乙酸乙酯/正-己烷1/8，v/v)得到12mg(產(chǎn)率98％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)d 0.06(t，1H)，0.88(dd，1H)，0.98(d，3H)，1.09(s，9H)，3.74(dd，1H)，3.87(d，1H)，7.42(m，6H)，7.71(m，4H).
ESI341(M+1)+，C21H28O2Si.
此外，使用(1S，2S)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)甲基環(huán)丙基2-甲氧基乙酸酯作為起始物質(zhì)進行與上述相同的過程，獲得(1S，2S)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-甲基環(huán)丙醇，且它的NMR數(shù)據(jù)與標題化合物相同。
制備28 二異丙基{[(1R，2R)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-甲基環(huán)丙]氧基}甲基膦酸酯的合成將在制備27中制備的化合物(9mg)溶于0.5ml含17.0mg二異丙基溴甲基膦酸酯的二甲基甲酰胺(DMF)溶液中，并向其中加入5mg碘化鋰(LiI)。在60-65℃下，向上述溶解有所述化合物的溶液中，緩慢加入800mg叔-丁氧鋰溶于10ml THF和10ml DMF的叔-丁氧鋰(LiOtBu)溶液(0.11ml)。室溫攪拌所得混合物10小時。將溶液冷卻至室溫，向其中加入水(5ml)和二乙醚(50ml)。分離其中的有機層并通過減壓蒸餾除去。利用硅膠柱色譜純化殘余物(洗脫劑乙酸乙酯/正-己烷1/4，v/v)得到8mg(產(chǎn)率65％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)d 0.11(t，1H)，0.93(m，1H)，0.97(d，3H)，1.04(s，9H)，1.26(d，6H)，1.29(d，6H)，3.68(d，1H)，3.96(d，2H)，3.99(d，1H)，4.72(m，2H)，7.40(m，6H)，7.66(m，4H).
ESI519(M+1)+，C28H43O5PSi.
此外，使用(1S，2S)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-甲基環(huán)丙醇作為起始物質(zhì)進行與上述相同的過程，獲得二異丙基{[(1S，2S)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-2-甲基環(huán)丙]氧基}甲基膦酸酯，且它的NMR數(shù)據(jù)與標題化合物相同。
制備29 二異丙基{[(1R，2R)-1-(羥甲基)-2-甲基環(huán)丙]氧基}甲基膦酸酯的合成將在制備28中制備的化合物(7mg)溶于1ml甲醇中，并向其中加入5mg氟化銨(NH4F)。加熱回流所得混合物4小時。減壓蒸餾除去醇，并通過硅膠柱色譜純化殘余物(洗脫劑甲醇/二氯甲烷5/95，v/v)得到3mg(產(chǎn)率85％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)d 0.23(t，1H)，0.95(m，1H)，1.13(d，3H)，1.30(d，12H)，3.60(d，1H)，3.83(d，2H)，3.96(d，1H)，4.00(s，1H)，4.78(m，2H).
ESI281(M+1)+，C12H25O5P.
按照與制備18中測量光學(xué)純度的化合物相同的過程生產(chǎn)后，測量由此獲得的化合物的保留時間。值為14分鐘(0.9ml/min，己烷∶異丙醇，95∶5)，與來源于化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(13b)]的化合物相同。因此，該化合物具有與制備18中制備的化合物[[(-)-反式-異構(gòu)體，反應(yīng)流程3中的化合物(13b)]相同的絕對構(gòu)型。
此外，使用二異丙基{[(1S，2S)-1-({[叔-丁基(二苯基)甲硅烷]氧基}甲基)-2-甲基環(huán)丙]氧基}甲基膦酸酯作為起始物質(zhì)進行與上述相同的過程，獲得二異丙基{[(1S，2S)-1-(羥甲基)-2-甲基環(huán)丙]氧基}甲基膦酸酯，且它的NMR數(shù)據(jù)與標題化合物相同。在按照與制備18中測量光學(xué)純度的化合物相同的過程生產(chǎn)后，測量化合物的保留時間。值為13分鐘(0.9ml/min，己烷∶異丙醇，95∶5)，與來源于化合物[反應(yīng)流程3中的化合物(13a)]的化合物相同。因此，該化合物具有與制備18中制備的化合物[[(+)-反式-異構(gòu)體，反應(yīng)流程3中的化合物(13a)]相同的絕對構(gòu)型。
實施例1 二異丙基({(±)-反式-1-[(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-甲基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸酯的拆分如上述反應(yīng)流程2所述，利用手性柱拆分消旋體獲得(±)-反式-光學(xué)異構(gòu)體和(-)-反式-光學(xué)異構(gòu)體。使從制備11獲得的(±)-反式-消旋體(50mg)通過用手性柱(商品名chiral pak AD，由DAICEL ChemicalIndustries，Ltd.提供)固定的高效液相色譜(洗脫劑己烷/異丙醇＝80/20)，獲得各20mg(+)-反式-光學(xué)異構(gòu)體，二異丙基({(1S，2S)-1-[(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-甲基環(huán)丙}氧基)甲基膦酸酯(化合物34)和(-)-反式-光學(xué)異構(gòu)體，并測量它們的光學(xué)活性(比旋度)。在前拆分的光學(xué)異構(gòu)體(5b-1)(保留時間7.8分鐘)為[α]D＝(+)16.35(c＝4.12，CHCl3)，在后拆分的光學(xué)異構(gòu)體(5c-1)(保留時間9.2分鐘)為[α]D＝(-)16.70(c＝1.92，CHCl3)。
實施例2 ({(1S，2S)-1-[(2-氨基-6-羥基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-甲基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物1)的合成將在實施例1中拆分的(+)-反式-光學(xué)異構(gòu)體(40mg)溶于8ml二氯甲烷中，向其中加入285mg溴化三甲基甲硅烷(TMSBr)回流4小時。減壓蒸餾二氯甲烷，獲得固體。將所得固體溶于1N-HCl(10ml)中回流4小時。反應(yīng)完成后，減壓蒸餾用作溶劑的水，使殘余物從甲醇/乙醚(10/1)中結(jié)晶，獲得25.4mg(產(chǎn)率83％)白色固體標題化合物。
D＝(+)18.93(c＝0.66于MeOH)1H NMR(MeOH-d4)δ0.71(t，1H)，1.13(dd，1H)，1.18(d，3H)，1.45(m，1H)，3.81(dd，1H)，3.98(dd，1H)，4.43(d，1H)，4.70(d，1H)，9.18(s，1H).
ESI330(M+1)，C11H16N5O5P
實施例3 二異丙基({(±)-反式-1-[(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-乙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸酯的拆分如上面反應(yīng)流程2所述，利用手性柱拆分消旋體獲得(+)-反式-光學(xué)異構(gòu)體和(-)-反式-光學(xué)異構(gòu)體。使從制備13獲得的(±)-反式-消旋體(50mg)通過用手性拄(商品名手性pak AD，由DAICEL Chemical Industries，Ltd.提供)固定的高效液相色譜(洗脫劑己烷/異丙醇＝80/20)獲得各20mg的(+)-反式-光學(xué)異構(gòu)體，二異丙基({(1S，2S)-1-[(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-乙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸酯(化合物35)(5b-4)和(-)-反式-光學(xué)異構(gòu)體(5c-4)，并測量它們的光學(xué)活性(比旋度)。在前拆分的光學(xué)異構(gòu)體(保留時間24分鐘)為[α]D＝(+)14.1(c＝7.37，CHCl3)，在后拆分的光學(xué)異構(gòu)體(保留時間27分鐘)為[α]D＝(-)14.2(c＝4.13，CHCl3)。
實施例4 (+)-反式光學(xué)異構(gòu)體
({(1S，2S)-1-[(2-氨基-6-羥基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-乙基環(huán)丙}氧基)甲基膦酸(化合物12)的合成使實施例3中拆分的(+)-反式-光學(xué)異構(gòu)體(40mg)按照與實施例2相同的過程反應(yīng)，獲得25.0mg白色固體標題化合物。
D＝(+)14.06(c＝0.32于MeOH)1H NMR(MeOH-d4)δ0.76(t，1H)，1.03(t，3H)，1.10(m，1H)，138(m，1H)，1.47(m，2H)，3.80(dd，1H)，3.98(dd，1H)，4.33(d，1H)，4.75(d，1H)，9.20(s，1H).
ESI344(M+1)，C12H18N5O5P實施例5 ({(1S，2S)-1-[(2-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-甲基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物2)的合成將在實施例1中制備的(+)-光學(xué)異構(gòu)體(5b-1，1.8g)溶于20ml甲醇中，向其中加入0.46g三乙胺(TEA)和0.18g 10％披鈀木炭，25℃下，在氫(1atm)中還原所得混合物18小時。使反應(yīng)物通過C礦除去Pd，減壓蒸餾所得濾液，獲得100％產(chǎn)率的所需6-二氧胍。
1H NMR(CDCl3)δ0.37(t，1H)，0.96(m，1H)，1.00(d，3H)，1.12(m，1H)，1.14(m12H)，3.79(m，2H)，21(dd，2H)，4.51(m，2H)，5.27(brs，2H)，8.01(s，1H)，8.50(s，1H).
按照與實施例2相同的過程使上述所得6-二氧胍衍生物(1.8g)反應(yīng)，獲得1.3g標題化合物(產(chǎn)率100％)。
1H NMR(MeOH-d4)δ0.63(t，1H)，1.05(dd，1H)，1.20(d，3H)，1.43(m，1H)，3.80(m，1H)，3.98(m，1H)，4.47(d，1H)，4.63(d，1H)，8.30(s，1H)，8.80(s，1H).
實施例6 ({(1S，2S)-1-[(2-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-乙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物13)的合成使在實施例3中制備的(+)-光學(xué)異構(gòu)體(5b-4，400mg)按照與實施例5相同的過程反應(yīng)，獲得270mg標題化合物。
1H NMR(MeOH-d4)δ0.71(t，1H)，1.10(t，3H)，1.12(m，1H)，1.37(m，1H)，1.50(m，2H)，3.80(dd，1H)，4.04(dd，1H)，4.26(d，1H)，4.74(d，1H)，8.68(s，1H)，8.74(s，1H).
實施例7
({(1S，2S)-1-[(2-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-丙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物24)的合成使在制備15中制備的化合物(200mg)按照與實施例5相同的過程反應(yīng)，獲得110mg({(±)-反式-1-[(2-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-丙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物39)。
1H NMR(MeOH-d4)δ0.71(t，1H)，0.96(t，3H)，1.10(m，1H)，1.43(m，3H)，1.47(m，2H)，3.78(m，1H)，4.01(m，1H)，4.26(d，1H)，4.71(d，1H)，8.68(s，1H)，8.74(s，1H).
之后，按照與實施例1相同的過程拆分由此獲得的化合物，獲得標題化合物。
實施例8 ({(1S，2S)-1-[(2-氨基-6-羥基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-丙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物23)的合成使在制備15中制備的化合物(150mg)按照與實施例2相同的過程反應(yīng)，獲得110mg({(±)-反式-1-[(2-氨基-6-羥基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-丙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物40)。
1H NMR(MeOH-d4)δ0.74(t，1H)，0.96(t，3H)，1.11(m，1H)，1.42(m，5H)，3.79(m，1H)，3.96(m，1H)，4.32(d，1H)，4.75(d，1H)，9.17(s，1H).
之后，按照與實施例1相同的過程拆分由此獲得的化合物，獲得標題化合物。
實施例9 ({(1S，2S)-1-[(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-丙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物26)的合成將在制備16中制備的化合物(35mg)溶于10ml二氯甲烷中，并向其中加入280mg溴化三甲基甲硅烷(TMSBr)回流4小時。減壓蒸餾二氟甲烷，獲得固體。將所得固體在甲醇/乙醚(10/1)中重結(jié)晶，獲得23mg白色固體的({(±)-反式-1-[(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-丙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物41)。
1H NMR(MeOH-d4)δ0.69(t，1H)，0.97(t，3H)，1.07(m，1H)，1.41(m，3H)，1.47(m，2H)，3.78(m，1H)，4.01(m，1H)，4.37(d，1H)，4.82(d，1H)，8.38(s，1H)，8.56(s，1H).
之后，按照與實施例1相同的過程拆分由此獲得的化合物，獲得標題化合物。
實施例10 ({(1S，2S)-1-[(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-乙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物14)的合成使在制備14中制備的化合物(40mg)按照與實施例9相同的過程反應(yīng)，獲得25mg({(±)-反式-1-[(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-乙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物42)。
1H NMR(MeOH-d4)δ0.69(t，1H)，1.02(t，3H)，1.03(m，1H)，1.35(m，1H)，1.47(m，2H)，3.79(m，1H)，4.03(m，1H)，4.40(d，1H)，4.86(d，1H)，8.38(s，1H)，8.55(s，1H).
之后，按照與實施例1相同的過程拆分由此獲得的化合物，獲得標題化合物。
實施例11 -9H-嘌呤-9-基}甲基)-2-乙基環(huán)丙}氧基]甲基膦酸(化合物15)的合成將在制備13中制備化合物的6-氯胍衍生物(48mg)溶于9ml乙醇中，并向其中加入140mg三乙胺和290mg 4-甲氧基甲苯硫酚。在回流條件下使所得混合物反應(yīng)24小時，并通過加入20ml水完成該反應(yīng)。減壓蒸餾反應(yīng)物以除去甲醇，用二氯甲烷萃取蒸餾過的反應(yīng)物，并通過減壓蒸餾除去萃取液。通過硅膠柱純化殘余物，獲得化合物(40mg)，其6-位的鳥嘌呤被4-甲氧基苯硫基取代。
1H NMR(CDCl3)δ0.51(t，1H)，0.97(t，3H)，1.15(m，1H)，1.24(d，6H)，1.27(d 6H)，1.40(m，3H)，3.80(m，2H)，3.80(s，3H)，4.12(d，1H)，4.37(d，1H)，4.68(m，2H)，4.78(brs，2H)，6.93(m，1H)，7.19(m，2H)，7.28(m，2H)，8.04(s，1H).
使所得化合物(40mg)按照與實施例9相同的過程反應(yīng)，獲得25mg[{(±)-反式-1-({2-氨基-6-[(4-甲氧苯基)硫基]-9H-嘌呤-9-基}甲基)-2-乙基環(huán)丙基}氧基]甲基膦酸(化合物43)。
1H NMR(MeOH-d4)δ0.63(t，1H)，0.93(t，3H)，1.03(m，1H)，1.35(m，1H)，1.38(m，2H)，3.20(m，1H)，3.70(m，1H)，3.89(m，2H)，4.24(m，1H)，4.70(m，1H)，7.03(d，1H)，7.14(m，2H)，7.32(m，1H)，8.98(s，1H).
之后，按照與實施例1相同的過程拆分由此獲得的化合物，獲得標題化合物。
實施例12
(1S，2S)-3-[({1-[(2-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-甲基環(huán)丙基}氧基)甲基]-8，8-二甲基-3，7-二氧代-2，4，6-三噁-3λ5-磷氧(phosphanon)-1-基-新戊酸酯(化合物6)的合成將在實施例5中制備的化合物(600mg)加入到5ml 1-甲基-2-吡咯烷酮中。將所得混合物加熱至60℃，并攪拌30分鐘。向所得反應(yīng)物中加入0.58g三乙胺和0.86g新戊酸氯甲酯，并攪拌所得混合物27小時。在將它的溫度降至20℃后，用乙酸乙酯萃取反應(yīng)物，并通過加入20ml水而完成反應(yīng)。減壓蒸餾反應(yīng)物以除去萃取液。通過硅膠柱色譜純化殘余物，獲得250mg(產(chǎn)率24％)標題化合物。
D＝(+)20.57(c＝2.04于CHCl3)1H NMR(CDCl3)δ0.52(t，1H)，1.16(m，1H)，1.17(d，3H)，1.2(s，18H)，1.41(m1H)，3.97(m，2H)，4.30(q，2H)，4.00(brs，2H)，5.64(m，4H)，8.05(s，1H)，8.69(s，1H).
實施例13 (1S，2S)-雙{[(異丙氧羰)氧基]甲基}({1-[(2-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-甲基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸酯(化合物7)的合成將在實施例5中制備的化合物(0.98g)加入到5ml 1-甲基-2-吡咯烷酮中。將混合物加熱至50℃并攪拌30分鐘。向所得反應(yīng)物中加入0.96g三乙胺和1.44g碳酸氯甲基異丙酯，并攪拌所得混合物3小時。在將它的溫度降至20℃后，用乙酸乙酯萃取反應(yīng)物，并通過加入20ml水而完成反應(yīng)。減壓蒸餾反應(yīng)物以除去萃取液。利用硅膠柱色譜純化殘余物，獲得270mg(產(chǎn)率16％)標題化合物。
D＝(+)20.48(c＝1.14于CHCl3)1H NMR(CDCl3)δ0.49(t，1H)，1.15(m，1H)，1.16(d，3H)，1.29(m，12H)，1.45(mm，1H)，3.97(dd，1H)，4.05(dd，1H)，4.30(q，2H)，4.90(m，2H)，4.62(m，4H)，8.05(s，1H)，m，8.69(s，1H).
實施例14 (1S，2S)-3-{[(1-{[2-氨基-6-(4-甲氧苯硫基)-9H-嘌呤-9-基]甲基}-2-甲基環(huán)丙)氧基]甲基}-8，8-二甲基-3，7-二氧代-2，4，6-三噁-3λ5-磷氧(phospanon)-1-基-新戊酸酯(化合物8)的合成將在實施例1中制備的6-氯胍衍生物(48mg)，(+)-光學(xué)異構(gòu)體化合物溶于9ml乙醇中，向其中加入140mg三乙胺和290mg 4-甲氧基甲苯硫酚。在回流條件下使所得混合物反應(yīng)24小時，并通過加入20ml水而完成反應(yīng)。減壓蒸餾反應(yīng)物以除去甲醇，并用二氯甲烷萃取蒸餾過的反應(yīng)物，通過減壓蒸餾除去萃取液。利用硅膠柱純化殘余物，獲得化合物，其6-位的鳥嘌呤被4-甲氧苯硫基取代。
使所得化合物(40mg)按照與實施例9相同的過程反應(yīng)，獲得膦酸衍生物(32mg)。
ESI452(M+1)+C18H22N5O5PS
使上述化合物(30mg)按照與實施例13相同的過程反應(yīng)，得到15mg(產(chǎn)率20％)標題化合物。
D＝(+)13.75(c＝2.36于CHCl3)1H NMR(CDCl3)δ0.63(t，1H)，0.93(t，3H)，1.03(m，1H)，1.35(m，1H)，1.38(m，2H)，3.20(m，1H)，3.70(m，1H)，3.89(m，2H)，4.24(m，1H)，4.70(m，1H)，7.03(d，1H)，7.14(m，2H)，7.32(m，1H)，8.98(s，1H).3)δ0.48(t，1H)，1.12(m，1H)，1.13(d，3H)，1.19(m，18H)，1.38(m 1H)，3.84(s，3H)，3.90(dd，1H)，3.98(dd，1H)，4.25(q，2H)，4.76(brs，2H)，5.62(m，4H)，6.95(d，2H)，7.54(d，2H)，7.91(s，1H).
比較實施例1 {(-)-反式-1-[(2-氨基-6-羥基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-甲基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物36)的合成使在實施例1中拆分的(-)-反式-光學(xué)異構(gòu)體(40mg)按照與實施例2相同的過程反應(yīng)，獲得20.1mg(產(chǎn)率80％)白色固體的標題化合物。
D＝(-)20.19(c＝1.21于MeOH)1H NMR(MeOH-d4)δ0.71(t，1H)，1.13(dd，1H)，1.18(d，3H)，1.45(m，1H)，3.81(dd，1H)，3.98(dd，1H)，4.43(d，1H)，4.70(d，1H)，9.18(s，1H).
ESI330(M+1)，C11H16N5O5P
比較實施例2 (-)-反式-光學(xué)異構(gòu)體({(-)-反式-1-[(2-氨基-6-羥基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-乙基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物37)的合成使在實施例3中拆分的(-)-反式-光學(xué)異構(gòu)體(40mg)按照與實施例2相同的過程反應(yīng)，獲得20.0mg白色固體的標題化合物。
D＝(-)13.47(c＝1.47于MeOH)1H NMR(MeOH-d4)δ0.76(t，1H)，1.03(t，3H)，1.10(m，1H)，1.38(m，1H)，1.47(m，2H)，3.80(dd，1H)，3.98(dd，1H)，4.33(d，1H)，4.75(d，1H)，9.20(s，1H).
ESI344(M+1)，C12H18N5O5P比較實施例3 ({(±)-順式-1-[(2-氨基-6-羥基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-甲基環(huán)丙基}氧基)甲基膦酸(化合物38)的合成使在制備17中制備的化合物(30mg)按實施例2反應(yīng)，獲得13mg標題化合物。
1H NMR(MeOH-d4)δ0.67(t，1H)，1.05(dd，1H)，1.13(d，3H)，1.38(m，1H)，3.90(dd，1H)，4.01(dd，1H)，4.22(d，1H)，4.58(d，1H)，9.17(s，1H).
ESI330(M+1)，C11H16N5O5P比較實施例4 [{(±)-順式-1-({2-氨基-6-[(4-硝基苯基)硫基]-9H-嘌呤-9-基}甲基)-2-甲基環(huán)丙}氧基]甲基膦酸(化合物44)的合成將在制備17中制備的化合物6-氯胍衍生物(48mg)溶于9ml乙醇中，并向其中加入140mg三乙胺和290mg 4-硝基甲苯硫酚。使所得混合物在回流條件下反應(yīng)24小時，并通過加入20ml水而完成反應(yīng)。減壓蒸餾反應(yīng)物以除去甲醇，用二氯甲烷萃取蒸餾過的反應(yīng)物，并通過減壓蒸餾除去萃取液。利用硅膠柱純化殘余物，獲得化合物(32mg)，其6-位的鳥嘌呤被4-硝基苯硫基取代。
1H NMR(CDCl3)δ0.62(t，1H)，0.93(m，1H)，1.16(d，3H)，1.26(d，6H)，1.30(d，6H)，1.36(m，1H)，3.79(m，1H)，3.92(m，1H)，3.98(d，1H)，4.38(d，1H)，4.74(m，2H)，4.83(brs，2H)，7.79(d，2H)，8.05(s，1H)，8.22(d，2H).
使所得化合物(32mg)按照與實施例9相同的過程反應(yīng)，獲得20mg所需標題化合物。
1H NMR(MeOH-d4)δ0.67(t，1H)，1.05(m，1H)，1.13(t，3H)，1.38(m，1H)，3.91(m，1H)，4.01(m，1H)，4.27(m，1H)，4.67(m，1H)，7.92(d，1H)，8.33(m，2H)，9.17(s，1H).
比較實施例5 ({[(±)-順式-[1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)甲基]-2-甲基環(huán)丙基}氧基]甲基膦酸(化合物45)的合成使在制備12中制備的化合物(50mg)按照與實施例9相同的過程反應(yīng)，獲得40mg標題化合物。
1H NMR(MeOH-d4)δ0.63(t，1H)，1.05(m，1H)，1.10(d，3H)，1.32(m，1H)，3.87(dd，1H)，4.03(dd，1H)，4.28(d，1H)，4.71(d，1H)，8.37(s，1H)，8.50(s，1H).
當靜脈內(nèi)或口服給藥時，本發(fā)明的化合物對乙型肝炎細胞系，HepG2.2.15和轉(zhuǎn)基因小鼠顯示出有效的藥理學(xué)作用，可廣泛用于乙型肝炎治療劑的研制。下面描述實驗過程和結(jié)果。
實驗1對乙型肝炎病毒(HBV)抑制作用的測量和分析(1)細胞培養(yǎng)和用藥物治療將HepG2.2.15細胞(M.A Shells等人，P.N.A.S.84，1005(1987))，一種產(chǎn)生乙型肝炎病毒的肝癌細胞系在T-75燒瓶的含有10％FBS(胎牛血清，GIBCO BRL，#16000-044)、1％ABAM(抗生素-抗真菌劑，GIBCOBRL，#16000-028)和400μg/ml的根他霉素(geneticin)(Sigma，#G-9516)的DMEM培養(yǎng)基(GIBCO BRL，#430-2200)中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為5％CO2培養(yǎng)箱和37℃，以1∶3的比例分開，間隔3天。以4×104/孔的量將細胞分配在96-孔平板中，然后當獲得80-90％細胞密度時，用200μl含2％FBS、1％ABAM和400μg/ml根他霉素的DMEM更換舊培養(yǎng)基。每次，從100μM-0.16μM將藥物溶液連續(xù)稀釋5倍。為使實驗誤差減到最小，針對每種藥物而言，每次處理重復(fù)2-3次。每兩天更換一次培養(yǎng)基。在用藥物處理后第10天，收集100μl培養(yǎng)基，并通過定量PCR(聚合酶鏈反應(yīng))測定藥物對病毒復(fù)制的抑制程度。
(2)細胞毒性的測定在從用藥物處理開始的第10天收集100μl培養(yǎng)基后，以30μl/孔的量向每個孔中加入7.5mg/ml MTT(Thiazolyl Blue TetrazoliumBromide，Amresco，#0793-5G)溶液，并在5％CO2培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)各細胞2小時。棄去溶液，以120μl/孔的量向各孔中加入含10％TritonX-100和0.4μl c-HCl的異丙醇溶液。將如此染色的細胞通過振搖2小時而轉(zhuǎn)移到異丙醇溶液中。利用Elisa Reader測量540nm處的吸光度。
(3)對乙型肝炎病毒復(fù)制的抑制作用的PCR評價藥物對乙型肝炎病毒復(fù)制的抑制程度是通過使用在用藥物處理后第10天收集的細胞培養(yǎng)液而測定的。用蒸餾水將用各藥物處理過的細胞培養(yǎng)液稀釋10-倍，并通過在95℃下加熱它們15分鐘而經(jīng)過預(yù)處理，以破壞細胞。對于約320bp的基因片段的PCR擴增而言，將在乙型肝炎病毒所有亞-株中保守的2001-堿基位置和核心抗原基因與聚合酶基因之間的2319-堿基位置分別用作5′-末端和3′-末端引物。然后，計算乙型肝炎病毒基因組DNA的量，并以其為基礎(chǔ)測定藥物對乙型肝炎病毒復(fù)制的抑制作用。
首先，連續(xù)稀釋沒有用藥物處理過的乙型肝炎病毒細胞培養(yǎng)液，并通過PCR擴增。使擴增的DNA在2％瓊脂糖凝膠上經(jīng)過電泳，并用溴化乙錠(EtBr)染色，通過IS-1000(Innotech Scientific Corporation)數(shù)字成像系統(tǒng)分析。然后，通過使用維持線性的稀釋倍數(shù)進行用藥物處理過的細胞培養(yǎng)液的分析。通過相同的PCR方法擴增從用藥物處理過的組獲得的DNA，在2％瓊脂糖凝膠上經(jīng)過電泳，用溴化乙錠染色，并通過IS-1000分析。藥物對病毒復(fù)制的抑制程度是通過計算試驗組與對照組的比值而量化的。表2概括了本發(fā)明典型化合物的抑制作用(藥物活性和毒性) 。
表2

從表2的結(jié)果可以看出，每個對映異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體作為抗病毒劑的藥物活性具有較高差異。在上述化合物之中，化合物1和12，(+)-反式-光學(xué)異構(gòu)體(對映異構(gòu)體)顯示出最佳的藥物活性。
實驗2對轉(zhuǎn)基因小鼠(T/G小鼠)進行的藥理學(xué)試驗在下列動物試驗中，經(jīng)由皮下和口服途徑給予化合物。
將試驗化合物給予4-5周大的HBV轉(zhuǎn)基因小鼠，它們是根據(jù)參考文獻中描述的方法從FVB株小鼠獲得的(見，Jone D.Morrey，Kevin W.Bailey，Brent E.Korba，Robert W.Sidwell，利用轉(zhuǎn)基因小鼠高水平復(fù)制乙型肝炎病毒用于拉米夫定的抗病毒評價，Antiviral research，1999，42，97-108)，分別以10mg/kg/天的量皮下給藥9天，以10、2和0.4mg/kg/天的量口服給藥9天，每天一次(使用相同數(shù)量的雌性和雄性小鼠)。采集小鼠尾部的血液，并在給藥過程中或給藥后獲得5μl血清。向該血清中加入15ml Genereleaser溶膠，然后在不同溫度下對其進行預(yù)處理。從預(yù)處理過的溶液中獲得HBV DNA。在有4μl 10x緩沖液(PerkinElmer)、0.8μl 10mM dNTP、在實驗1、2中使用的500ng相同HBV引物、125mM MgCl2、DMSO和Taq聚合酶存在的條件下，通過PCR(聚合酶鏈反應(yīng))擴增DNA。通過電泳分析HBV DNA的量，以評價本發(fā)明化合物的藥理學(xué)作用。結(jié)果在下列表3中描述。在下列表3中，「顯示藥理學(xué)作用的小鼠」是指血液不含HBV DNA的小鼠。
表3

*結(jié)果是指「顯示出藥理學(xué)作用的小鼠數(shù)量/總的小鼠數(shù)量」從上面表3可以看出，當口服或皮下給藥時，本發(fā)明化合物可對試驗動物顯示出有效的乙型肝炎治療作用。因為當以1mpk或更低口服給藥時，化合物6和7的(+)-光學(xué)異構(gòu)體顯示出極佳的藥理學(xué)作用，因此預(yù)期本發(fā)明的化合物可非常有效地用于治療乙型肝炎。
權(quán)利要求
1.由下式(1)代表的(1-膦酰甲氧基-2-烷基環(huán)丙基)甲基核苷衍生物的(+)-反式-異構(gòu)體、其藥學(xué)可接受的鹽、水合物或溶劑化物 其中R1代表C1-C7烷基，R2和R3彼此獨立地代表氫，或代表可被選自鹵素、C1-C4-烷氧基、苯氧基、C7-C10-苯基烷氧基、和C2-C5-酰氧基的一個或多個取代基任選取代的C1-C4-烷基，或代表C2-C7-酰基、C6-C12-芳基、C1-C7-烷基氨基羰基、二(C1-C7-烷基)氨基羰基或C3-C6-環(huán)烷基氨基羰基，或代表-(CH2)m-OC(＝O)-R4，其中m表示1-12的整數(shù)且R4代表C1-C12-烷基、C2-C7-鏈烯基、C1-C5-烷氧基、C1-C7-烷基氨基、二(C1-C7-烷基)氨基、C3-C6-環(huán)烷基、或具有1或2個選自氮和氧的雜原子的3-到6-元雜環(huán)，Q代表具有下式的基團 或 其中，X1、X2、X3和X4彼此獨立地代表氫、氨基、羥基、或鹵素，或代表C1-C7-烷基、C1-C5-烷氧基、烯丙基、羥基-C1-C7-烷基、苯基、或苯氧基，其每一個均可被硝基或C1-C5-烷氧基任選取代，或代表C6-C10-芳硫基，其可被硝基、氨基、C1-C6-烷基、或C1-C4-烷氧基任選取代，或代表C6-C12-芳基氨基、C1-C7-烷基氨基、二(C1-C7-烷基)氨基、C3-C6-環(huán)烷基氨基，或 的結(jié)構(gòu)，其中n表示1或2的整數(shù)且Y1代表O、CH2、或N-R(R代表C1-C7-烷基或C6-C12-芳基)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中所述藥學(xué)可接受的鹽是硫酸鹽、甲磺酸鹽或氫鹵酸鹽。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中R1代表C1-C3烷基，R2和R3彼此獨立地代表氫，或代表可被選自氟、C1-C4-烷氧基、和苯氧基的一個或多個取代基任選取代的C1-C4-烷基，或代表-(CH2)m-OC(＝O)-R4，其中m表示1-12的整數(shù)，且R4代表C1-C5-烷基或C1-C5-烷氧基，Q代表 其中，X1代表氫、羥基、氨基或4-甲氧基苯硫基、或4-硝基苯硫基，且X2代表氫或氨基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其選自下列表1a和1b中描述的化合物表1a 表1b
5.一種用于制備由下式(2)代表的化合物的方法 其中R1、R2和R3是如權(quán)利要求1中所定義的，且L代表甲磺酰氧基、對-甲苯磺酰氧基、或鹵素，其特征在于(a)乙醇酸乙酯，其醇基團被保護，如下式(6)所代表的 其中P1代表選自苯甲基(Bn)、四氫吡喃基(piranyl)(THP)、叔-丁二苯基甲硅烷基(TBDPS)和叔-丁二甲基甲硅烷基(TBDMS)的醇保護基團，在有四異丙氧化鈦[Ti(OiPr)4]存在的條件下，與由下列通式(7)代表的烷基鹵化鎂反應(yīng)R7-MgX(7)其中R7代表C3-C7烷基且X代表鹵素，(b)用硅膠柱拆分所得由下式(8)和(9)代表的兩個環(huán)丙醇非對映異構(gòu)體 (±)-反式-異構(gòu)體(8) (±)-順式-異構(gòu)體(9)其中R1是如權(quán)利要求1中所定義的且P1是如前述所定義的，(c)在步驟(b)中拆分的各化合物在堿存在的條件下與由下式(10)代表的化合物經(jīng)過醚-形成反應(yīng)， 其中R2和R3是如權(quán)利要求1中所定義的，且L是如權(quán)利要求5中所定義的，產(chǎn)生由下列通式(11)或(12)代表的膦酸酯化合物 (±)-反式-異構(gòu)體(11) (±)-順式-異構(gòu)體(12)其中R1、R2和R3是如權(quán)利要求1所定義的，且P1是如前述所定義的，且(d)除去所得式(11)或(12)化合物的醇-保護基團并引入離去基團(L)，產(chǎn)生由下式(2a)或(2b)代表的化合物 (±)-反式-異構(gòu)體(2a) (±)-順式-異構(gòu)體(2b)其中R1、R2和R3是如權(quán)利要求1中所定義的，且L是如前述所定義的。
6.由下式(8)代表的化合物及其立體異構(gòu)體 (±)-反式-異構(gòu)體(8)其中R1是如權(quán)利要求1中所定義的，且P1是如權(quán)利要求5中所定義的。
7.一種用于制備如權(quán)利要求1中所定義的式(1)化合物的立體異構(gòu)體的方法，其特征在于由下式(4a)或(4b)代表的化合物 (±)-反式-異構(gòu)體(4a) (±)-順式-異構(gòu)體(4b)其中R1是如權(quán)利要求1中所定義的，L是如權(quán)利要求5中所定義的，且R5和R6彼此獨立地代表C1-C7-烷基，與由下式(3)代表的化合物反應(yīng)QH(3)其中Q是如權(quán)利要求1中所定義的，并用手性柱或手性試劑拆分由此獲得的各化合物，產(chǎn)生(+)、(-)兩個光學(xué)異構(gòu)體，其每一個均以富含對映異構(gòu)體的異構(gòu)體形式存在，且然后它們中的每一個均用溴化三甲基硅烷(TMSBr)處理產(chǎn)生由下式(1a)代表的化合物的相應(yīng)(+)、(-)兩個光學(xué)異構(gòu)體 其中R1和Q是如權(quán)利要求1中所定義的，且如果需要，將基團R2′和R3′引入到由此獲得的化合物中，產(chǎn)生由下式(1b)代表的化合物的相應(yīng)光學(xué)異構(gòu)體 其中R1和Q是如權(quán)利要求1中所定義的，且R2′和R3′分別代表除氫以外的R2和R3。
8.一種制備如權(quán)利要求1中所定義的式(1)化合物的立體異構(gòu)體的方法，其特征在于用水解酶(脂酶)拆分由下式(13)或(14)代表的化合物 (±)-反式-異構(gòu)體(13) (±)-順式-異構(gòu)體(14)其中R1、R2和R3是如權(quán)利要求1中所定義的，它是通過除去由下式(11)或(12)代表的化合物中的醇-保護基團而獲得的 (±)-反式-異構(gòu)體(11) (±)-順式-異構(gòu)體(12)其中R1、R2和R3是如權(quán)利要求1中所定義的，且P1是如權(quán)利要求5中所定義的，產(chǎn)生由下式(13a)和(13b)或(14a)或(14b)代表的富含對映異構(gòu)體的化合物 (+)-反式-異構(gòu)體(13a) (-)-反式-異構(gòu)體(13b) (+)-順式-異構(gòu)體(14a) (-)-順式-異構(gòu)體(14b)其中R1、R2和R3是如權(quán)利要求1中所定義的，并進一步用離去基團(L)替換由此獲得的式(13a)、(13b)、(14a)或(14b)化合物中的醇基團，產(chǎn)生由式(2aa)、(2ab)、(2ba)或(2bb)代表的化合物 (+)-反式-異構(gòu)體(2aa) (-)-反式-異構(gòu)體(2ab) (+)-順式-異構(gòu)體(2ba) (-)-順式-異構(gòu)體(2bb)其中R1、R2和R3是如權(quán)利要求1中所定義的，且L是如權(quán)利要求5中所定義的，且所得化合物與由式(3)代表的化合物反應(yīng)QH(3)其中Q是如權(quán)利要求1所定義的，產(chǎn)生富含對映異構(gòu)體的式(1)化合物。
9.一種用于制備如權(quán)利要求1定義的通式(1)化合物的立體異構(gòu)體的方法，其特征在于aa)將醇-保護基團(P2)引入到(+)-(亞甲基環(huán)丙基)甲醇或(-)-(亞甲基環(huán)丙基)甲醇中，它的絕對構(gòu)型是已知的，bb)所得化合物經(jīng)過二羥基化反應(yīng)，cc)將醇-保護基團(P1)引入到在上述bb)步驟中所獲化合物的伯羥基中，并將醇-保護基團(P3)引入到叔羥基中，產(chǎn)生由式(15a)、(15b)、(16a)或(16b)代表的化合物 (+)-反式-異構(gòu)體(15a) (-)-反式-異構(gòu)體(15b) (+)-順式-異構(gòu)體(16a) (-)-順式-異構(gòu)體(16b)其中P1是如權(quán)利要求7中所定義的，P2代表苯甲基、苯甲酰基、4-甲氧基苯甲基、甲氧基苯甲基、甲氧基甲基或三苯甲基且P3代表1-甲氧基乙酰基、乙?；?-(三甲基甲硅烷基)-1-乙磺?；琩d)選擇性除去所得化合物中的保護基團(P2)，引入離去基團(L)，且由此獲得的化合物經(jīng)過還原反應(yīng)或被C1-C7-烷基取代，ee)除去上述dd)步驟中獲得的化合物的保護基團(P3)，產(chǎn)生由下式(8a)、(8b)、(9a)或(9b)代表的化合物 (+)-反式-異構(gòu)體(8a) (-)-反式-異構(gòu)體(8b) (+)-順式-異構(gòu)體(9a) (-)-順式-異構(gòu)體(9b)其中R1是如權(quán)利要求1中所定義的，且P1是如權(quán)利要求5中所定義的，ff)上述步驟ee)中所得的化合物與由下式(10)代表的膦酸酯化合物反應(yīng) 其中R2和R3是如權(quán)利要求1中所定義的，且L是如權(quán)利要求5中所定義的，并除去由此獲得的化合物的保護基團(P1)，產(chǎn)生由下列通式(13a)、(13b)、(14a)或(14b)代表的化合物 (+)-反式-異構(gòu)體(13a) (-)-反式-異構(gòu)體(13b) (+)-順式-異構(gòu)體(14a) (-)-順式-異構(gòu)體(14b)其中R1、R2和R3是如權(quán)利要求1中所定義的，gg)用離去基團(L)替換所得化合物的醇基團，產(chǎn)生由下列通式(2aa)、(2ab)、(2ba)或(2bb)代表的化合物 (+)-反式-異構(gòu)體(2aa) (-)-反式-異構(gòu)體(2ab) (+)-順式-異構(gòu)體(2ba) (-)-順式-異構(gòu)體(2bb)其中R1、R2和R3是如權(quán)利要求1中所定義的，且L是如權(quán)利要求5中所定義的，且hh)所得化合物與由下式(3)代表的化合物反應(yīng)QH(3)其中Q是如權(quán)利要求1所定義的，產(chǎn)生富含對映異構(gòu)體的式(1)化合物。
10.一種用于治療病毒性疾病的組合物，其包含作為活性成分的如權(quán)利要求1中所定義的式(1)(1-膦酰甲氧基-2-烷基環(huán)丙基)甲基核苷衍生物的(+)-反式異構(gòu)體、其藥學(xué)可接受的鹽、水合物、或溶劑化物以及藥學(xué)可接受的載體。
11.一種用于治療乙型肝炎的組合物，其包含作為活性成分的如權(quán)利要求1中所定義的式(1)(1-膦酰甲氧基-2-烷基環(huán)丙基)甲基核苷衍生物的(+)-反式異構(gòu)體、其藥學(xué)可接受的鹽、水合物、或溶劑化物以及藥學(xué)可接受的載體。
全文摘要
本發(fā)明涉及可用作抗病毒劑(特別是，針對乙型肝炎病毒)的通式(1)的(1－膦酰甲氧基－2－烷基環(huán)丙基)甲基核苷衍生物的(+)－反式－異構(gòu)體，其藥學(xué)可接受的鹽、水合物、或溶劑化物，和用于制備通式(1)化合物的立體異構(gòu)體的方法，以及用于治療病毒疾病(特別是，針對乙型肝炎病毒)的含有通式(1)化合物的(+)－反式－異構(gòu)體、其藥學(xué)可接受的鹽、水合物、或溶劑化物作為活性物質(zhì)的組合物。
文檔編號C07F9/6512GK1684970SQ03822963
公開日2005年10月19日 申請日期2003年9月22日 優(yōu)先權(quán)日2002年9月26日
發(fā)明者崔鐘類, 黃載澤, 曹棟奎, 廬寄潤, 金天炯, 金清美, 韓旻俊, 金政民, 曹雨永, 金京圓, 安慎炳 申請人:株式會社Lg生命科學(xué)