專利名稱：吡啶酮化合物及其制備方法
喜樹堿是一種首次從中國植物喜樹(canptotheca acuminata)的葉和樹皮中分離出來的天然化合物(參見Wall等，美國化學會志883888(1966))。喜樹堿是由中氮茚并[1，2-b]喹啉碎片與六元α-羥基內酯稠合組成的五環(huán)化合物。帶有α-羥基的20位碳是非對稱的，它賦予分子旋光特性。天然喜樹堿的20位碳具有絕對“S”構型，可用下式表示 喜樹堿對包括人結腸、肺部和乳腺腫瘤細胞在內的數(shù)種癌細胞系表現(xiàn)出抗增殖活性系(Suffness，M等生物堿化學和藥理學，Bross，A.，ed.，Vol.25，p.73(Academic Press，1985))。據(jù)認為喜樹堿的抗增殖活性與其抑制DNA的拓撲異構酶I的活性有關。
人們認為α-羥基內酯結構為喜樹堿同時具備體內外活性的必要條件(喜樹堿新的抗癌藥物，Putmesil，M.等ed.，p.27(CRC Press.1995)Wall，M.等，癌癥研究55753(1995)；Hertzberg等，藥物化學雜志32715(1982)和Crow等，藥物化學雜志354160(1992))。本發(fā)明涉及一類新的喜樹堿化合物，其中β-羥基內酯代替了天然喜樹堿的α-羥基內酯。本發(fā)明化合物表現(xiàn)出現(xiàn)有技術中不曾預料到的強生物活性。
因此，本發(fā)明的目的是不同于所有已知喜樹堿化合物的新喜樹堿化合物，在一定意義上說它們包含代替α-羥基內酯(或其開環(huán)羥基羧酸形式)的β-羥基內酯(或其開環(huán)羥基羧酸形式)；或后者的可藥用鹽。應該清楚本發(fā)明的喜樹堿化合物與在骨架結構上帶有或不帶有(例如嘉樹堿化合物的)其它化學取代基的喜樹堿(即與六元α-羥基內酯稠合的中氮茚并[1，2-b]喹啉碎片)具有相同的結構骨架。如下所述，各種喜樹堿化合物是專業(yè)人員所熟知的。β-羥基內酯是指在α-羥基內酯的羧基碳原子和帶有羥基的α-碳原子之間還含有一個碳原子的內酯?？梢允瞧咴伴]合”或“開環(huán)”的β-羥基內酯(其中羰基與相鄰氧原子間的酯鍵被水解)通過羧基和羥基形成，這些基團可以是取代的或未取代的。
本發(fā)明的喜樹堿化合物可在中氮茚并[1，2-5]喹啉碎片上(例如為改善該化合物的溶解性)或在開環(huán)或閉合β-羥基內酯(例如為改善該化合物的穩(wěn)定性)上帶有取代基。閉合β-羥基內酯環(huán)上取代作用的實例包括在β-碳上的烷基取代(如乙基)。開環(huán)β-羥基內酯上取代作用的實例包括在β-碳上的烷基取代，羧酸上的取代(例如酰胺化作用)和對所形成的羥基的取代(例如和酯化)或抑制作用。
更具體地說，本發(fā)明的主題是外消旋形式、對映體形式或其組合形式的式(I)和式(II)化合物或后者的藥用鹽， 其中R1表示低級烷基，低級鏈烯基，低級炔基，低級鹵代烷基和低級烷氧基低級烷基或低級烷硫基低級烷基；R2，R3，R4獨立地表示H，鹵素，低級鹵代烷基，低級烷基，低級鏈烯基，氰基，低級氰基烷基，硝基，低級硝基烷基，酰氨基，低級酰氨基烷基，肼基，低級肼基烷基，疊氮基，低級疊氮基烷基，(CH2)mNR6R7，(CH2)mOR6，(CH2)mSR6，(CH2)mCO2R6，(CH2)mNR6C(O)R8，(CH2)mC(O)R8，(CH2)mOC(O)R8，O(CH2)mNR6R7，OC(O)NR6R7，OC(O)(CH2)mCO2R6或(CH2)n[N＝X]，OC(O)[N＝X]，(CH2)mOC(O)[N＝X](其中[N＝X]，在本發(fā)明中表示含有氮原子N的4-7元雜環(huán)基，它表示雜環(huán)的元數(shù)，并且X表示完全構成雜環(huán)基所需的其余單元，選自O、S、CH2、CH、N、NR9和COR10)，芳基或者取代(即，在雜環(huán)或芳基上取代一至四次)或未取代的低級芳烷基，其中取代基是低級烷基、鹵素、硝基、氨基、低級烷氨基、低級鹵代烷基、低級羥烷基、低級烷氧基或低級烷氧基低級烷基)或者R2和R3一起形成3或4鏈節(jié)的鏈，其中鏈的元素選自CH、CH2、O、S、N或NR9；R5表示H，鹵素，低級鹵代烷基，低級烷基，低級烷氧基，低級烷氧基低級烷基，低級烷硫基低級烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基低級烷基，氰基，氰基烷基，低級烷基低級磺酰烷基，低級羥烷基，硝基，(CH2)mC(O)R8，(CH2)mNR6C(O)R8，(CH2)mNR6R7，(CH2)mN(CH3)(CH2)nNR6R7，(CH2)mOC(O)R8，(CH2)mOC(O)NR6R7，(CH2)mS(O)qR11，(CH2)mP(O)R12R13，(CH2)2P(S)R12R13，(CH2)n[N＝X]，OC(O)[N＝X]，(CH2)mOC(O)[N＝X]，芳基或者取代(即，在芳基或雜芳基上取代一至四次)或未取代的芳基低級烷基，其中取代基是低級烷基、鹵素、硝基、氨基、低級烷氨基、低級鹵代烷基、低級羥烷基、低級烷氧基或低級烷氧基低級烷基；R6和R7獨立地表示H，和低級烷基，低級羥烷基，低級烷基低級氨基烷基，低級氨基烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基低級烷基，低級鏈烯基，低級烷氧基低級烷基，低級鹵代烷基，或者芳基或取代(即，在芳基上取代一至四次)或未取代的芳基低級烷基，其中的取代基是低級烷基、鹵素、硝基、氨基、低級烷氨基、低級鹵代烷基、低級羥烷基、低級烷氧基或低級烷氧基低級烷基；R8表示H，和低級烷基，低級羥烷基，氨基，低級烷氨基，低級烷基低級氨基烷基，低級氨基烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基低級烷基，低級鏈烯基，低級烷氧基，低級烷氧基低級烷基，低級鹵代烷基或者芳基或取代(即，在芳基上取代一至四次)或未取代的芳基低級烷基，其中取代基是低級烷基、鹵素、硝基、氨基、低級烷氨基、低級鹵代烷基、低級羥烷基、低級烷氧基或低級烷氧基低級烷基；R9表示H，低級烷基，低級鹵代烷基，芳基或者被一個或多個基團取代的芳基，所述基團選自低級烷基、鹵素、硝基、氨基、低級烷氨基、低級鹵代烷基、低級羥烷基、低級烷氧基或低級烷氧基低級烷基；R10表示H，低級烷基，低級鹵代烷基，低級烷氧基，芳基或被一個或多個取代基取代的芳基(即，在芳基上存在一至四個取代基)，所述取代基選自低級烷基、低級鹵代烷基、低級羥烷基或低級烷氧基低級烷基；R11表示低級烷基，芳基，(CH2)mOR14，(CH2)mSR14，(CH2)2NR14R15或(CH2)m[N＝X]；R12和R13獨立地表示低級烷基，芳基，低級烷氧基，芳氧基或氨基；R14和R15獨立地表示H和低級烷基或芳基；R16表示H或OR21；R17表示OR6或NR6R7；R18和R19獨立地表示H，鹵素，低級烷基，低級烷氧基或羥基；R20表示H或鹵素；R21表示H，低級烷基，CHO或C(O)(CH2)mCH3；m是包含0-6的整數(shù)；n是1或2；和q表示0-2的整數(shù)；并且[N＝X]表示4-7元雜環(huán)基，X表示補全所述雜環(huán)基所需的單元，選自O、S、CH2、CH、N、NR9和COR10。
具體地說，本發(fā)明的主題是例如上面定義的式I和式II化合物，其中R1表示低級烷基，低級鏈烯基，低級鹵代烷基，低級烷氧基低級烷基或低級烷硫基低級烷基；R5表示H，鹵素，低級鹵代烷基，低級烷基，低級烷氧基，低級烷氧基低級烷基，低級烷硫基低級烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基低級烷基，氰基，氰基烷基，低級羥烷基，硝基，(CH2)mC(O)R8，(CH2)mNR6C(O)R8，(CH2)mNR6R7，(CH2)mN(CH3)(CH2)nNR6R7，(CH2)mOC(O)R8，(CH2)mOC(O)NR6R7或(CH2)n[N＝X]，OC(O)[N＝X]，(CH2)mOC[N＝X]，芳基或者取代或未取代的芳基低級烷基；R12和R13獨立地表示低級烷基；R16表示OR21；并且R18、R19和R20表示H。
更具體地說，本發(fā)明的主題是如上所定義的式I和式II化合物，其中R1表示低級烷基，低級鏈烯基，低級鹵代烷基或低級烷氧基低級烷基；R2、R3和R4獨立地表示H，鹵素，低級鹵代烷基，低級烷基，硝基，酰氨基，低級酰氨基烷基，肼基，低級肼基烷基，疊氮基，低級疊氮基烷基，(CH2)mNR6R7，(CH2)mOR6，(CH2)mSR6，(CH2)mC(O)R8，OC(O)NR6R7，(CH2)n[N＝X]或取代或未取代的(CH2)mOC(O)[N＝X]，或者OC(O)[N＝X]；或者R2和R3一起形成3或4鏈節(jié)的鏈，其中所述鏈的元素選自CH、CH2、O、S、N或NR9；R5表示H，鹵素，低級鹵代烷基，低級烷基，低級烷氧基，低級烷氧基低級烷基，低級烷硫基低級烷基，低級羥烷基，硝基，(CH2)mC(O)R8，(CH2)mNR6C(O)R8，(CH2)mNR6R7，(CH2)mN(CH3)(CH2)nNR6R7，(CH2)mOC(O)R8，(CH2)mOC(O)NR6R7或者取代或未取代的OC(O)[N＝X]或(CH2)n[N＝X]，或(CH2)mOC(O)[N＝X]；R6和R7獨立地表示H，低級烷基，低級羥烷基，低級烷基低級氨基烷基，低級氨基烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基低級烷基，低級烷氧基低級烷基，芳基，芳基低級烷基或者低級鹵代烷基；R8表示H和低級烷基，低級羥烷基，低級烷基氨基，低級烷基低級氨基烷基，低級氨基烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基低級烷基，低級鏈烯基，低級烷氧基，低級烷氧基低級烷基，低級鹵代烷基，芳基或者芳基低級烷基；R9表示H，低級烷基或低級鹵代烷基；R10表示H，低級烷基，低級鹵代烷基或低級烷氧基；R11表示低級烷基；R14和R15獨立地表示H或低級烷基。
更具體地說，本發(fā)明的主題是如下定義的式I化合物，其中R1表示乙基；R2和R3獨立地表示H，低級烷基，鹵素，低級鹵代烷基或(CH2)mOR6，或者R2和R3一起形成亞甲二氧基或亞乙二氧基；并且R4和R5獨立地表示H和低級烷基，(CH2)mNR6R7或者未取代或被低級烷基取代的(CH2)n[N＝X]。優(yōu)選R4表示H或者(CH2)mNR6R7，其中R6和R7獨立地表示H或低級烷基，并且R5表示H和低級烷基或者未取代或被低級烷基取代的(CH2)n[N＝X]；取代或未取代[N＝X]的實例可列舉哌啶基，嗎啉基，哌嗪基，咪唑基和4-甲基哌嗪基。
更優(yōu)選地，R2表示H或鹵素，并優(yōu)選為H、氯或氟；且R3表示H，低級烷基，鹵素或OR6，其中R6表示H、低級烷基或芳基低級烷基并且優(yōu)選為H、氟、氯、甲基或甲氧基。同樣更優(yōu)選地，R2和R3一起形成亞甲二氧基或亞乙二氧基。
更具體地，本發(fā)明的主題是下文實施例中描述的產(chǎn)物，尤其是對應于下式的化合物或其藥用鹽-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5，12-二乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-8-乙基-2，3，8，9-四氫-8-羥基-10H，12H-[1，4]二氧雜環(huán)乙二烯并(dioxino)[2，3-g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-10，13(15H)-二酮-10-芐氧基-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，1 5(4H，13H)-二酮-5-乙基-4，5-二氫-5，10-二羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-11-(二甲氨基)甲基-5-乙基-4，5-二氫-5，10-二羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，1 3H)-二酮-9-氯-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-10-甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-9，10-二氟-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-7-乙基-7，8-二氫-7-羥基-9H，11H-[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯并[4，5-g]-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-9，12(14H)-二酮-9-氯-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-9，11-二氯-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-10-甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-10-氟-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-10-氯-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-10-氯-5-乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5，12-二乙基-4，5-二氫-5，10-二羥基-11-嗎啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5，12-二乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-12-甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-9-氯-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-9-氯-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-12-嗎啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-12-哌啶子基甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-12-嗎啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-10-氟-4，5-二氫-5-羥基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-10-氟-4，5-二氫-5-羥基-12-嗎啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-10-甲基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-10-甲基-12-嗎啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-5-乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-10-甲基-12-哌啶子基甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮-8-乙基-2，3，8，9-四氫-8-羥基-16-(4-甲基哌嗪甲基)-10H，12H-(1，4)二氧雜環(huán)乙二烯并[2，3-g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-10，13(15H)-二酮-9-氯-5-乙基-10-氟-4，5-二氫-5-羥基-12-嗎啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮。
更具體地，本發(fā)明的目的還在于上述式II化合物或其藥用鹽，其中R1表示乙基；R2和R3獨立地表示H，低級烷基，鹵素，低級鹵代烷基或(CH2)mOR6，或者R2和R3一起形成亞甲二氧基或亞乙二氧基；并且R4和R5獨立地表示H和低級烷基，(CH2)mNR6R7或者未取代或被低級烷基取代的(CH2)n[N＝X]；R20表示H并且R17表示OR6，其中R6表示H或低級烷基，或者NR6R7中的R6和R7獨立地表示H、低級烷基、芳基或芳基低級烷基。優(yōu)選地R4表示H或者(CH2)mNR6R7，其中R6和R7獨立地表示H或低級烷基；R5表示H和低級烷基或者未取代或被低級烷基取代的(CH2)n[N＝X]并且R17表示OR6，其中R6表示H或低級烷基。作為被取代或未被取代的[N＝X]的實例可列舉哌啶基，嗎啉基，哌嗪基，咪唑基和4-甲基哌嗪基。
更優(yōu)選地R2表示H或鹵素并優(yōu)選為H、氯或氟；R3表示H，低級烷基，鹵素或OR6，其中R6表示H、低級烷基或芳基低級烷基并優(yōu)選為H、氟、氯、甲基或甲氧基。同樣更優(yōu)選地R2和R3一起形成亞甲二氧基或亞乙二氧基。
更具體地，本發(fā)明的目的是下文實施例中描述的產(chǎn)物，尤其是下式表示的產(chǎn)物或其藥用鹽-β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯-β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸乙酯-β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸-β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸甲酯-β-乙基-α，α-二氟-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸乙酯-β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸乙酯-β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯-β-乙基-γ-(12-乙基-8-羥甲基-9-氧(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-β-羥基-丙酸-γ-(12-芐氧基-8-羥甲基-9-氧(1 1H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-β-乙基-β-羥基--丙酸(E)。
如本文采用的涉及烷基、烷硫基和烷氧基的術語低級基團是指直鏈或支鏈、含有1-6個碳原子的飽和脂肪烴基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、甲硫基、乙硫基、甲氧基和乙氧基。涉及鏈烯基或炔基的術語低級基團是指含有2-6個碳原子并且有一個或多個雙鍵或三鍵的基團，例如乙烯基、烯丙基、異丙烯基、戊烯基、己烯基、丙烯基、乙炔基、丙炔基和丁炔基。術語環(huán)烷基是指含有3-7個碳原子的環(huán)，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。術語芳基是指含有至少一個芳環(huán)的單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)烴化合物，每個環(huán)最多包含7個環(huán)節(jié)，例如苯基、萘基、蒽基、聯(lián)苯基或茚基。術語鹵素是指氯、溴、碘或氟。相應的低級鹵代烷基、低級氰基烷基、低級硝基烷基、低級酰氨基烷基、低級肼基烷基、低級疊氮基烷基、芳基低級烷基、低級羥烷基、低級烷氧基低級烷基、低級烷硫基低級烷基和低級烷磺?；图壨榛謩e被一至三個取代基取代，所述取代基是鹵素、氰基、硝基、酰氨基、肼基、疊氮基、芳基、羥基、低級烷氧基、低級烷硫基或低級磺?；５图壨榘被珊幸粋€或兩個低級烷基，例如NHCH3、NHCH2CH3、N(CH3)2或N(CH3)(CH2CH3)。[N＝X]的實例包括哌啶基、嗎啉基、哌嗪基和咪唑基。
通過對喜樹堿的觀察，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物的β-羥基內酯或β-羥基羧酸根上帶有羥基的碳原子是非對稱的。因此，本發(fā)明的化合物具有兩種可能的對映體構型，即“R”和“S”構型。本發(fā)明包括這兩種對映體構型和這些構型的各種結合，以及“RS”外消旋混合物。為了簡便起見，當結構式中未給出具體構型時，應理解為表示兩種對映體構型和它們的混合物。
本發(fā)明的主題還包括從喜樹堿或取代的喜樹堿開始或者通過完全化學合成的方式制備通式I和II化合物的方法。
本發(fā)明涉及從喜樹堿或取代的喜樹堿開始制備本發(fā)明式I和II化合物的方法，其特征在于-將下式其中R1、R2、R3、R4、R5和R20具有上述定義的喜樹堿 的α-羥基內酯還原為通式A的α-羥基乳醇 其中R1、R2、R3、R4、R5和R20具有如上所示含義。-使用適宜的氧化劑處理，斷裂如此形成的化合物A的鍵合相鄰甲醇的碳-碳鍵，得到式B化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5和R20具有如上所示含義。-然后，使用功能烷基化試劑處理，開裂式B化合物的甲?；倌軋F得到通式C的β-羥基酯 其中R1、R2、R3、R4、R5、R18、R19和R20具有如上所示含義并且R17表示OR6，R6表示低級烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基低級烷基、低級鏈烯基、低級烷氧基低級烷基或者芳基或芳基低級烷基；-將所述通式C化合物環(huán)化，得到通式D的β-羥基內酯化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R18、R19和R20具有如上所示含義，-將通式D的內酯開環(huán)，得到式E化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R18、R19和R20具有如上所示含義；R16表示OR21，其中R21表示H或低級烷基；并且R17表示OR6或NHR6且R6表示H、低級烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基低級烷基、低級鏈烯基、低級烷氧基低級烷基、或者芳基或芳基低級烷基。
某些式E化合物也可通過水解相應式C化合物的酯官能團獲得。其中R16和/或R17獨立地表示羥基的通式E化合物可在本領域專業(yè)人員已知的常規(guī)條件下經(jīng)過酯化或酰胺化形成對應于式E的酯或酰胺。
在上面的方法中，如果需要，R1、R2、R3和R4基團可按照常規(guī)的保護方法加以保護(Greene，T.有機合成中的保護基10-86(JohnWiley&Sons 1981))。在該方法中，借助還原試劑在適宜的溶劑中，例如使用硼氫化鈉在甲醇中進行還原反應?；衔顰形成化合物B的步驟在氧化條件下，例如使用四乙酸鉛、高碘酸或偏高碘酸鈉在適宜的溶劑如乙酸中完成。用官能化烷基化試劑進行的處理步驟可借助金屬衍生物，例如鋰或鋅或者借助羧酸酯在無水非質子傳遞溶劑如四氫呋喃中完成。由化合物C獲得化合物D的內酯化步驟一般在酸性條件下進行，例如使用溶于無水溶劑如二氯甲烷或二惡烷的三氟乙酸或氯化氫氣處理。將化合物D的內酯環(huán)開環(huán)以獲得化合物E的步驟可通過例如在堿性條件下水解，然后中和來完成。
用作原料的取代喜樹堿的實例參見美國專利4473692，4604463，4894956，5162532，5395939，5315007，5264579，5258516，5254690，5212317和5341745，PCT專利申請US 91/08028，US 94/06451，US90/05172，US 92/04611，US 93/10987，US 91/09598，EP 94/03058和EP95/00393及歐洲專利申請325247，495432，321122和540099。
本發(fā)明還涉及式I和II化合物的制備方法，其特征在于-將通式M的化合物 其中R1、R18和R19具有上述含義并且R20表示氫或鹵原子，用通式N的2-鹵代-3-喹啉甲醇偶合 其中R2、R3、R4和R5具有上述含義并且X表示鹵原子，得到式O化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R18、R19、R20和X具有上述含義；-然后將通式O化合物環(huán)合，獲得如上定義的式D化合物。
在上面的方法中，如果需要，R1、R2、R3和R4基團可按照常規(guī)的保護方法加以保護(Greene，T.有機合成中的保護基10-86(JohnWiley&Sons 1981))。由通式M和N化合物形成化合物O的步驟可通過本領域專業(yè)人員公知的Mitsunobu反應(參考Mitsunobu，O等，合成反應P.1(1981))進行處理來完成。通過使用親核的例如化合物M或后者的脫質子衍生物，用膦如三苯基膦和偶氮二甲酸衍生物如偶氮二甲酸二乙酯在非質子傳遞溶劑如四氫呋喃或N，N-二甲基甲酰胺中處理脫去化合物N的羥基官能團。化合物O的環(huán)合優(yōu)選在鈀催化劑(如二乙酸鈀)的存在下，在堿性條件下(例如可與相轉移試劑例如四丁基溴化銨結合的堿金屬乙酸鹽)在非質子傳遞溶劑如乙腈或N，N-二甲基甲酰胺中，在50℃-120℃的溫度下進行(R.Grigg等，四面體46，p4003(1990))。
通式M化合物是新化合物。它們可按照如下方法制備，其特征在于-下式所示吡啶的羰基 其中R1和R20具有上述含義并且R2表示鹵原子或低級烷氧基，用醛縮醇官能團保護，得到通式F化合物 其中R1、R20和R22具有上述含義并且Z和Z’獨立地表示低級烷基或一起形成含2-4個碳原子的飽和烴鏈；-向通式F化合物中引入羥甲基官能團，得到通式G化合物 其中R1、R20、R22、Z和Z’具有上述含義，-隨后保護通式G化合物的醇官能團，得到通式H化合物 其中R1、R20、R22、Z和Z’具有上述含義且R23表示醇官能團保護基。-通式H的醛縮醇化合物脫保護，得到通式I’化合物 其中R1、R20、R22和R23具有上述含義，-用官能烷基化試劑處理式I’化合物，得到通式J的β-羥基酯 其中R1、R20、R22和R23具有上述含義，R18和R19如通式II中所定義且R17表示OR6，其中R6表示低級烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基低級烷基、低級鏈烯基、低級烷氧基低級烷基、或者芳基或芳基低級烷基-除去通式J化合物的保護基R23，得到通式K化合物 其中R1、R18、R19、R20和R22具有上述含義且R17表示OR6，其中R6表示低級烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基低級烷基、低級鏈烯基、低級烷氧基低級烷基、或者芳基或芳基低級烷基-通式K化合物環(huán)合形成通式L化合物 其中其中R1、R18、R19、R20和R22具有上述含義并且最后-將L化合物的基團R22轉化為羰基，得到通式M化合物 其中R1、R18、R19和R20具有上述含義。
4-酰基-2-吡啶(例如按照Lamattina，J.L.雜環(huán)化學雜志20，533頁(1983))的羰基優(yōu)選通過醛縮醇，優(yōu)選環(huán)醛縮醇，按照本領域專業(yè)人員所知的常規(guī)條件(Greene，T.，有機合成中的保護基10-86(John Wiley&Sons1981))加以掩蔽。當R22是氯或氟時，由此獲得的中間體用醇鈉或醇鉀在非質子傳遞溶劑(例如乙腈)或在(衍生所述醇鹽的)醇中在0℃-100℃處理，得到通式F化合物。通式F化合物用芳基-或烷基鋰(例如基鋰)在醚溶劑例如四氫呋喃中在-100℃-0℃處理可在3位鋰鹽化。將甲酰化親電子試劑例如N，N-二甲基甲酰胺加到如此獲得的鋰鹽化中間體中，所得的醛在水解后用還原試劑例如硼氫化鈉處理，得到通式G化合物。按照本領域專業(yè)人員所知的常規(guī)條件對化合物G的醇官能團進行掩蔽，得到通式H化合物。醇官能團保護基實例的包括形成醚的官能團[例如甲基、甲氧基甲基、四氫吡喃基、2-甲氧基乙氧基甲基、芐氧基甲基、叔丁基和芐基(取代或未取代的)]和酯(例如甲酸酯、乙酸酯和異丁酸酯)。其它伯羥基保護基的實例可參見Greene，T.，有機合成中的保護基10-86(John Wiley&Sons 1981)。通式H化合物在維持R23基團完整性的選擇性環(huán)境中例如通過在酸性條件下(例如用三氟乙酸)處理完成去保護步驟得到通式I，化合物。官能團的保護和脫保護的選擇性條件是本領域專業(yè)人員已知的(Greene，T.，有機合成中的保護基10-86(John Wiley&Sons 1981))。用功能化烷基試劑處理I，化合物得到通式J的β-羥基酯的反應可借助烯醇鋰或羧酸酯的鋅衍生物在非質子傳遞無水溶劑如四氫呋喃中進行。在本領域專業(yè)人員已知的脫保護條件下裂解通式J化合物的保護基R23可得到通式K化合物。例如，當R23是芐基時，通式J化合物與鈀催化劑的醇溶液被放置在0.5-10巴的氫氣壓下。如此獲得的通式K化合物的環(huán)化可在酸性條件下(例如用三氟乙酸或溶于無水溶劑如二氯甲烷或二惡烷的氯化氫氣處理)進行，得到如通式L化合物中的七元β-羥基內酯環(huán)。例如用熱鹽酸處理或者使用碘化三甲基硅烷可將通式L化合物轉化為通式M的吡啶酮。由通式P的N-乙酰苯胺 可獲得通式N的2-鹵代-3-喹啉-甲醇，通式P的R2、R3和R4具有通式I和II中所示的含義。在下文的方法中，如果需要R2、R3和R4基團可按照常規(guī)保護方法加以保護(Greene，T.，有機合成中的保護基10-86(JohnWiley&Sons 1981))。
然后可按照下述方法獲得式N化合物通過用乙酰化試劑如乙酐處理所述的式P苯胺進行N-乙?；?。如此獲得的N-乙酰苯胺在50℃-100℃下，優(yōu)選75℃下用Vilsmeyer試劑(通過磷酰氧氯與N，N-二甲基甲酰胺在0℃-10℃下反應獲得)處理，得到相應的2-氯-3-喹啉甲醛(參見例如Meth-Cohn.等，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.Ip.1520(1981)；Meth-Cohn等，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.I p25-9(1981)和Nakasimhan等，J.Am.Chem.Soc.，112，p4431(1990))。通過將產(chǎn)物在惰性溶劑如乙腈中、在碘鹽或溴鹽(例如碘化鈉或四丁基溴化銨)的存在下加熱，2-氯-3-喹啉甲醛的2位氯可被碘或溴取代。該轉化反應需痕量的酸如濃鹽酸催化。2-鹵代-3-喹啉甲醛在本領域專業(yè)人員已知的常規(guī)條件下例如在醇溶劑(如甲醇)中、用硼氫化鈉在0℃-40℃處理可容易地還原為對應于通式N的2-鹵代-3-喹啉甲醇。
式N化合物也可按照下述方法獲得將如上所定義的通式P苯胺與腈(如氯代乙腈或丙腈)在三氯化硼和其它路易斯酸如三氯化鋁、四氯化鈦或二乙基氯化鋁的存在下、在非質子溶劑或非質子溶劑的混合物中反應進行?；缓笏?參見Sugasawa，T.等，美國化學會志100，p4842(1078))。之后將所得的中間體用乙基丙二酰氯在非質子溶劑如乙腈中、在堿如三乙胺存在下處理，再用堿金屬醇鹽如甲醇鈉在甲醇中處理，得到4位取代的2-羥基-3-喹啉羧酸乙酯。后者用磷酰氧氯處理可轉化為2-氯-3-喹啉羧酸乙酯。當喹啉的4位帶有氯甲基時，用仲胺如二甲胺、N-甲基哌嗪、嗎啉或哌啶處理可進行親核取代。然后用二異丁基氫化鋁在非質子溶劑如二氯甲烷中還原2-氯-3-喹啉羧酸乙酯，得到通式N的2-氯-3-喹啉甲醇。中間體(N)化合物的類似物記載于文獻、尤其是PCT申請95/05427中。
本發(fā)明還涉及作為新型工業(yè)產(chǎn)物、尤其是用于制備式I和II產(chǎn)物的新工業(yè)產(chǎn)物的上述式I’和M產(chǎn)物。
本發(fā)明的某些化合物可按照常規(guī)方法制備成可藥用鹽的形式?？伤幱名}作為非限制性實例包括無機酸加成鹽如鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、二磷酸鹽、氫溴酸鹽和硝酸鹽，或者有機酸加成鹽如乙酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、檸檬酸鹽、甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、pamoate、水楊酸鹽、草酸鹽和硬脂酸鹽。由堿如氫氧化鈉或鉀形成的鹽也適用于本發(fā)明范圍內。對于其它可藥用鹽的實例，請參見“藥用鹽”，藥物科學雜志661(1977)。
本發(fā)明的化合物具有有益的藥理學特性。即本發(fā)明化合物具備抑制拓撲異構酶I和/或II的作用并具有抗腫瘤活性。本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出抗寄生蟲和/或抗病毒活性。本發(fā)明的化合物可用于不同的治療領域。
對患者例如哺乳動物(如人)施用有效治療量的式(I)或式(II)化合物，可抑制患者的如I和/或II型拓撲異構酶。
本發(fā)明的化合物還具有抗腫瘤活性。對患者施用治療有效量的式(I)或式(II)化合物，可以治療患者的腫瘤如拓撲異構酶表達的腫瘤。腫瘤或癌癥的實例包括食管、胃、小腸、直腸、口腔、咽、喉、肺、結腸、乳腺、子宮頸、子宮內膜體、卵巢、前列腺、睪丸、膀胱、腎、肝、胰腺、骨、結締組織、皮膚、眼、腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的癌癥，以及甲狀腺癌、白血病、何杰金氏病、除何杰金氏病以外的淋巴瘤和多發(fā)性骨髓瘤等。
它們不僅通過抑制血鞭毛蟲(如在錐蟲或利什曼原蟲感染中)或通過抑制瘧原蟲(例如在瘧疾中)用于治療寄生蟲感染，還可用于治療病毒感染和疾病。
這些特性使得式I和II產(chǎn)物適于藥用。這些如上定義的式I和II產(chǎn)物、所述式I和II產(chǎn)物與可藥用有機或無機酸的加成鹽及含有至少一種如上定義的藥物作為活性成分的藥物組合物作為藥物的應用也是本發(fā)明的主題。
本發(fā)明涉及含有本發(fā)明化合物或其可藥用酸的加成鹽和可藥用載體的藥物組合物，所述載體的選擇取決于給藥方法(例如口服、靜脈內、腹膜內、肌內、經(jīng)皮或皮下)。藥物組合物(例如治療用)可以呈固體、液體、脂質體或脂質小球形式。
藥物組合物可以是固體形式的，例如粉末、丸劑、顆粒、片劑、脂質體、膠囊或栓劑。丸劑、片劑或膠囊可用使組合物免受患者胃中胃酸或酶的作用的物質包衣，以使組合物有足夠的時間通過胃，在不經(jīng)消化的情況下進入小腸?；衔锟删植拷o藥，如相鄰腫瘤植入?；衔镞€可以緩釋給藥(例如緩釋組合物或輸注泵)。適宜固體載體可以是例如磷酸鈣、硬脂酸鎂、碳酸鎂、滑石、蔗糖、乳糖、糊精、淀粉、明膠、纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮和蠟。含有本發(fā)明化合物的藥物組合物可以呈液體如溶液、乳液、懸浮液或控釋制劑形式。適宜的液體載體是例如水、有機溶劑如甘油或二元醇如聚乙二醇、以及它們以各種比例在水中的混合物。
本發(fā)明的主題還有如上定義的式I和II產(chǎn)物在制備用于抑制拓撲異構酶，尤其是I型和II型拓撲異構酶的藥物；用于治療腫瘤的藥物；用于治療寄生蟲感染的藥物以及用于治療病毒感染或疾病的藥物中的用途。
對于治療上述疾病或病癥，本發(fā)明化合物的劑量依給藥方法、患者的年齡和體重以及疾病的癥狀的不同而不同，當然由治療醫(yī)師或獸醫(yī)最終確定所謂“治療有效量”。
在下面的實驗部分說明化合物的藥理學特性。
本文采用的所有技術和科學術語除非另有特別說明，它們具有本發(fā)明相關領域的普通專業(yè)人員通常所理解的含義。同樣，所提及的出版物、專利申請、專利和其它文獻均引入本文以供參考。
下面的參考實例旨在說明上面的方法，而不應理解為以任何方式限定本發(fā)明的范圍。實驗部分實施例1β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯1.a.4-乙基-3，4-二羥基-1H-吡喃并[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-14(4H，12H)-酮將硼氫化鈉(14g，370mmol)分批加到可從不同市售途徑如AldrichChemical Co.(Milwaukee，WI)獲得的(S)-(+)-喜樹堿(14g，40mmol)的甲醇(750ml)懸浮液中，將所得混合物緩慢加熱到55℃得到澄清溶液，將該溶液在室溫攪拌16小時。減壓蒸發(fā)溶劑，在水(250ml)中溶解殘余物，加入乙酸(21ml)中和，在4℃放置2小時。將所得懸浮液過濾并依次用冷水、丙酮和乙醚洗滌，減壓干燥后，獲得白色固體狀目的化合物。熔點280℃。1.b.8-甲酰氧甲基-7-丙?；械岵1，2-b]喹啉-9(11H)-酮將偏高碘酸鈉(14g，65mmol)的水(140ml)溶液滴加到4-乙基-3，4-二羥基-1H-吡喃[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-14(4H，12H)-酮(13.4g，38mmol)的冰醋酸(720ml)懸浮液中，將所得溶液在室溫攪拌1小時。然后將該反應混合物傾入冰/水混合物(650ml)中，所得懸浮液攪拌半小時后過濾并依次用水、異丙醇和乙醚洗滌，減壓干燥后，獲得淺黃色固體狀目的化合物(11.5g)。熔點＞200℃(分解)。1.c.β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯通過在氬氣氛下向用磁力攪拌器攪拌的鋅(6.5g，100mmol)的無水乙醚(50ml)懸浮液中滴加氯代三甲基硅烷(0.75ml，5.7mmol)使其活化。在室溫再攪拌15分鐘后加熱至回流。然后移走加熱浴，以確保維持回流的速率滴加溴乙酸叔丁酯(15ml，100mmol)。重新進行外部加熱并維持1小時。將由Reformatsky試劑得到的醚溶液冷卻到室溫，然后借助引流管在氬氣氛下將其轉移至8-甲酰氧甲基-7-丙?；械岵1，2-b]喹啉-9(11H)-酮(1.6g，4.7mmol)的無水四氫呋喃(40ml)懸浮液中。該反應混合物在室溫下被攪拌回流1小時，然后冷卻到室溫，加入飽和氯化銨溶液(100ml)使反應停止，用氯仿萃取(3×100ml)。合并的氯仿萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，殘余物經(jīng)硅膠色譜純化(1-2％甲醇/二氯甲烷)，可獲得0.64g淺黃色固體狀目的產(chǎn)物(31％)。熔點146-149℃。RMN-1H(CDC13)0,93(t，3H)；1,37(s，9H)；1,99(m，2H)；2,97(dd，2H)；3,5(se，1H)；5,10(s，2H)；5,24(s，2H)；7,40(s，1H)；7,59(t，1H)；7,83(t，1H)；7,90(d，1H)；8,20(d，1H)8,34(s，1H).RMN-C13(CDCl3)8,18；27,9034,59；45,34；49,9158,55；77,39；82,42；100,52；127,67；127,97；128,10；128,64；129,44；129,79；130,42；130,99；142,86；148,69；152,75；155,16；162,38；172,24.IR(KBr)764；1016；1157；1580；1651；1726.實施例2β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9氧代(11H)-中氮茚并[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸乙酯在氬氣氛下，將含有10mg氫醌的鋅(500mg，7.64mmol)和8-甲酰氧甲基-7-丙酰中氮茚并[1，2-b]喹啉-9(11H)-酮(400mg，1.15mmol)的無水四氫呋喃(20ml)懸浮液加熱至回流。移走加熱浴，通過加入一滴溴乙酸乙酯和一小顆碘結晶引發(fā)放熱反應，通過滴加溴乙酸乙酯(500μl，4.48mmol)保持回流，然后該反應混合物再加熱回流1小時。待冷卻至室溫后，加入飽和氯化銨(10ml)和甲醇(30ml)使反應停止。將所得混合物攪拌5分鐘，然后過濾并蒸發(fā)。殘余物溶于二氯甲烷(30ml)，用水洗滌并經(jīng)硫酸鈉干燥。之后除去溶劑并經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，二氯甲烷/甲醇98/2)，得到230mg(49％)黃色固體狀目的化合物。熔點157-161℃。RMN-1H(CDCl3)0,93(t，3H)；1,20(t，3H)；2,02(m，2H)；3,07(dd，2H)；4,11(q，2H)；4,9(se，1H)；5,08(s，2H)；5,23(s，2H)；7,45(s，1H)；7,62(t，1H)；7,80(t，1H)；7,90(d，1H)；8,22(d，1H)；8,36(s，1H).RMN-C13(CDCl3)；8,09；14.01；34,67；44,85；49,94；58,31；61,09；77,21；100,78；127,78；127,96；128,11；128,72；129,16；129,65；130,60；131,32；142,76；148,28；152,55；155,09；162,22；172,59.IR(KBr)766；1009；1184；1582；1647；1750.實施例35-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮將β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯(1.45g，3.32mmol)溶于無水二氯甲烷(25ml)并用飽和鹽酸的二氯甲烷(100ml)溶液處理。使所得混合物在-20℃保持16小時。將沉淀過濾并用甲醇洗滌，減壓干燥，得到662mg(55％)黃色固體狀目的化合物。熔點＞300℃。RMN-1H(DMSO)0,90(t，3H)；1,20(q，2H)；3,27(dd，2H)；5,29(s，2H)；5,49(dd，2H)；7,42(s，1H)；7,73(t，1H)；7,90(t，1H)；8,16(t，2H)；8,71(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,45；36,48；42,54；50,68；61,44；73,34；99,78；122,71；127,83；128,15；128,75；129,08；130,07；130,61；131,81；144,66；148,04；152,80；155,91；159,26；172,08.IR(KBr)761；1127；1204；1285；1580；1653；1757.實施例4β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸將氫氧化鉀水溶液(0.1N，30ml)加到5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮(500mg，1.38mmol)中，室溫下將所得懸浮液攪拌16小時，得到基本上澄清的溶液，過濾。用1N鹽酸將濾液酸化到pH3.5，過濾收集黃色沉淀，用水和丙酮洗滌，然后減壓干燥。得到415mg(79％)呈一水合物形式的目的化合物。熔點165-167℃。RMN-1H(DMSO)0,82(t，3H)；2,10(m，2H)；2,83 (d，2H)；3,12(d，2H)；3,25(se，1H)；4,81(s，2H)；5,26 (s，2H)；5,76(se，1H)；7,38(s，1H)；7,71(t，1H)；7,84(t，1H)；8,10(d，1H)；8,18(d，1H)；8,34(s，1H)；12,15(se，1H).RMN-C13(DMSO)8,16；34,80；46,71；50,36；55,73；76,53；100,17；127,50；128,00；128,26；128,69；129,06；130,01；130,45；131,63；142,57；148,09；153,19；156,07；161,22；172,27.1R(KBr)；1020；1188；1413；1586；1651；1694.實施例5β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸甲酯將5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并-[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮(180mg，0.5mmol)的甲醇(50ml)懸浮液用6N干燥氯化氫的甲醇(0.5ml)溶液處理，并保持回流直至完全溶解(4小時)為止。蒸發(fā)揮發(fā)性化合物，將殘余物溶于二氯甲烷(50ml)，用稀氫氧化鈉溶液(0.05N，15ml)和鹽水(15ml)洗滌。有機餾分經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘留的固體經(jīng)硅膠柱色譜純化(3％甲醇/二氯甲烷)，純化產(chǎn)物被溶解于乙醚之中，過濾并干燥，得到120mg(58％)淺黃色固體狀目的化合物，熔點163-166℃。RMN-1H(CDCl3)0,93(t，3H)；2,2(m，2H)；3,05(dd，2H)；3,49(s，3H)；3,62(s，3H)；4,93(s，2H)；5,22(d，2H)；5,52(s，1H)；7,21(s，1H)；7,62(t，1H)；7,81(t，1H)；7,91(d，1H)；8,22(d，1H)；8,36(s，1H).RMN-C13(CDCl3)7,74；35,54；46,82；50,15；51,67；58,10；65,33；78,03；100,17；125,57；127,70；128,04；128,10；128,35；129,53；130,39；130,94；143,87；148,75；152,94；157,83；161,74；171,35.IR(KBr)1207；1595；2655；1709.實施例6β-乙基-α，α-二氟-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧代-(11H)-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸乙酯將總量溴二氟乙酸乙酯(1.8ml，14mmol)的約一半和如實施例1.b.)獲得的8-甲酰氧甲基-7-丙酰中氮茚并[1，2-b]喹啉-9-(11H)-酮(2.0g，5.75mmol)的無水THF(10ml)懸浮液在氬氣氛下滴加到回流的鋅(1.25g，17.2mmol)的無水THF(40ml)懸浮液中，然后加入剩余的溴二氟乙酸乙酯。將該反應混合物再回流半小時。冷卻至室溫后，通過加入飽和氯化銨溶液(20ml)使反應停止，該反應混合物用二氯甲烷萃取(3×20ml)。將合并的有機萃取物干燥并濃縮。殘余物被溶解到乙醚(10ml)中，過濾并經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，二氯甲烷/甲醇98/2)，得到664mg(26％)黃色固體狀目的化合物。熔點208-209℃。RMN-1H(CDCl3)0,91(t，3H)；1,38(t，3H)；2,32(m，2H)；4,8(se，1H)；4,38(q，2H)；5,09(d-2H)；5,13(dd，2H)；7,42(s，1H)；7,55(t，1H)；7,72(t，1H)；7,79(d，1H)；8,08(d，1H)；8,22(s，1H)RMN-C13(CDCl3)6,97；13,93；28,63；50,18；56,27；63,15；77,20；81,96(t)；101,27；116,40(t)；127,67；127,77；127,97；128,31；129,26；130,33；130,94；131,23；143,16；148,34；150,20；151,91；161,21；163,21(t).IR(KBr)1124；1308；1591；1647；1748.實施例7β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸乙酯將鋅(1.25g，19.1mmol)、8-甲基-7-丙酰基中氮茚并[1，2-b]喹啉-9-(11H)-酮(500mg，1.43mmol，例如按照Kingsbery，W.D.，四面體通訊296847(1988)獲得)和乙酸銀(250mg，1.50mmol)的無水四氫呋喃(10ml)懸浮液在室溫、氬氣氛下攪拌。10分鐘后，滴加氯二乙基鋁摩爾溶液(10ml，10mmol)，然后滴加溴乙酸乙酯(1.25ml，11.3mmol)活化反應混合物，使所得混合物再反應5小時。依次加入乙醇(10ml)和飽和酒石酸鉀鈉溶液(10ml)使反應停止。將所得混合物再攪拌1小時，過濾并減壓濃縮。殘余物回收到二氯甲烷(30ml)中，用水洗滌，干燥，濃縮并經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，二氯甲烷/甲醇98/2)，得到93mg(15％)淺黃色固體狀目的化合物。熔點185-188℃。RMN-1H(CDCl3)0,91(t，3H)；1,17(t，3H)；1,99(m，2H)；2,49(s，3H)；3,10(dd，2H)；4,11(q，2H)；4,6(se，1H)；5,25(s，2H)；7,65(t，1H)；7,67(s，1H)；7,80(t，1H)；7,90(d，1H)；8,22(d，1H)；8,34(s，1H).RMN-C13(CDCl3)8,02；13,39；14,72；33,14；43,97；50,02；61,0；76,54；101,90；127,65；127,84；128,08；128,81；128,88；130,74；131,59；131,65；140,33；147,64；152,96；153,61；162,11；172,91.IR(KBr)762；1192；1576；1653；1740.實施例8β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯將乙酐(70μl，0.7mmol)滴加到β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-丙酸叔丁酯(200mg，0.46mmol)和三乙胺(140μl，1mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中，將所得混合物在室溫攪拌21小時。蒸發(fā)揮發(fā)性組分，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化(1-2％甲醇/二氯甲烷)，得到152mg黃色固體狀的目的化合物。熔點195-196℃。RMN-1H(CDCl3)0,88(t，3H)；1,32(s，9H)；1,93(m，2H)；2,07(s，3H)；2,97(dd，2H)；4,8(se，1H)；5,28 (s，2H)；5,59(dd，2H)；7,39(s，1H)；7,63(t，1H)；7,80(t，1H)；7,90(d，1H)；8,23(d，1H)；8,34(s，1H).RMN-C13(CDCl3)8,02；21,06；27,91；35,05；45,58；50,16；59,23；77,52；82,26；100,59；124,21；127,91；128,10；128,14；128,97；129,18；130,68；131,46；142,85；148,29；152,43；158,49；161,83；171,13；171,90.實施例95，12-二乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮除在1.a.步驟中使用7-乙基喜樹堿(Sawada等，Chem.Pharm，Bull.392574(1991))代替喜樹堿外，用類似于實施例1的方法制備該化合物。獲得亮黃色固體狀目的化合物，熔點＞270℃。RMN-1H(DMSO)0,92(t，3H)；1,39(t，3H)；1,93(q，2H)；3,08(d，2H)；3,25(q，2H)；3,51(d,2H)；5,32(s，2H)；5,52(dd，2H)；7,42(s，1H)；7,76(t，1H)；7,89(t，1H)；8,18(d，1H)B.32(d，1H).RMN-C13(DMSO)8,46；14,15；22,42；36,50；42,54；49,95；61,45；73,35；99,68；122,61；124,27126,76；127,70；128,27；129,92；130,18；145,17；145,82；148,57；152,15；155,89；159,26；172,08.實施例10β-乙基-γ-(12-乙基-8-羥甲基-9-氧代(11H)-中氮茚并-[1，2-b]喹啉-7-基)-β-羥基-丙酸除使用5，12-二乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮代替5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮外，以類似于實施例4的方法制備該化合物。獲得近乎白色的固體，熔點238-239℃。RMN-1H(DMSO)；0,82(t，3H)；1,35(t，3H)；2,01(m，2H)；2,85(d，2H)；3,18(d，2H)；3,22(q，2H)；4,81(s，2H)；5,00(se，1H)；5,24(s，2H)；5,78(se，1H)；7,38(s，1H)；7,77(t，1H)；7,86(t，1H)；8,18(d，1H)；8,28(d，1H)；12,10(se，1H).RMN-C13(DMSO)8,12；14,15；22,41；34,78；46,74；49,65；55,71；76,51；100,04；124,22；126,63；127,48；128,12；128,21；129,94；130,02；143,10；145,59；148,69；152,62；156,03；161,22；172,22.實施例118-乙基-2，3，8，9-四氫-8-羥基-10H，12H-[1，4]二氧雜環(huán)乙二烯并[2，3-g]庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-10，13(15H)-二酮11.a.2-乙基-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-1，3-二氧戊環(huán)(F)借助迪安-斯達克裝置用一整夜時間從2-氯-4-丙酰吡啶(10g，59mmol)(如Lamattina，J.L.，雜環(huán)化學雜志20，553頁(1983)獲得的)，乙二醇(20ml)和對甲苯磺酸(250mg)在甲苯(150ml)中的混合物中以共沸方式蒸餾出水。然后減壓蒸除溶劑，用飽和碳酸氫鈉水溶液(100ml)中和酸，產(chǎn)物用乙醚萃取。將合并的醚萃取液用鹽水洗滌、經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到13.3g(96％)羰基保護的粗產(chǎn)物，將該粗產(chǎn)物與3當量甲醇鈉的乙腈溶液回流直至反應完畢(用薄層色譜檢測；二氧化硅，叔丁基甲基醚/己烷TBMO/HX 50/50)。然后將該乙腈溶液過濾、并蒸發(fā)，將殘余物溶于乙醚，用水與鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥、蒸發(fā)，得到棕色油，將該油蒸餾(70-75℃，0.04毫巴)；回收得到10.7g(總收率81％)澄清液體狀產(chǎn)物(F)。11.b.2-乙基-2-(3-羥甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)-1，3-二氧戊環(huán)(G)在-78℃、氬氣氛下，使用引流管將叔丁基鋰(1.7M戊烷溶液，100ml，170mmol)滴加到溴代米(13ml，85mmol)的無水四氫呋喃(300ml)溶液中。將所得白色沉淀在-78℃攪拌一小時，然后加入2-乙基-2-(2-甲氧基-4-吡啶基)-1，3-二氧戊環(huán)(10g，44.8mmol)并將該反應混合物在-78℃攪拌15分鐘，在0℃攪拌1小時和在室溫攪拌1小時。再冷卻至-78℃后，加入無水N，N-二甲基甲酰胺(100mmol)，將該反應混合物加熱到室溫，然后攪拌16小時，進行薄層色譜分析(二氧化硅，TBMO/HX 50/50)確定原料化合物是否耗盡。加入飽和氯化銨使反應停止，該反應混合物用乙醚萃取(200ml，50ml，50ml)。合并的萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到黃色油，該油經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，TBMO/HX以0/100-5/95比例洗脫衍生物，然后用20/80-50/50洗脫產(chǎn)物)，得到中間體醛(7g)。將醛溶于甲醇(100ml)并用硼氫化鈉(5g，132mmol)處理，攪拌所得混合物直至中間體醛完全耗盡為止(約1小時，通過薄層色譜分析確定)。然后蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于乙醚中，用水和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)溶劑。殘余物經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，TBMO/HX10/90-50/50)，得到7g(總收率62％)黃色油狀產(chǎn)物(G)。11.c.2-(3-芐氧甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)-2-乙基-1，3-二氧戊環(huán)(H)將2-乙基-2-(3-羥甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)-1，3-二氧戊環(huán)(7g，30mmol)和芐基氯(5ml，45mmol)的無水四氫呋喃(50ml)溶液滴加到氫化鈉(80％的礦物油分散液，1.85g，61mmol)的無水四氫呋喃(100ml)懸浮液中，將該反應混合物回流16小時。然后使反應混合物冷卻到室溫，用水(50ml)使反應停止并減壓濃縮反應混合物。將殘余物溶于乙醚(150ml)并用水和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)。經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，TBMO/HX 5/95-20/80)，得到9g(87％)澄清油狀的芐基保護的產(chǎn)物(H)。11.d.1-(3-芐氧甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)-丙烷-1-酮(I’)在120℃浴溫下，將2-(3-芐氧甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)-2-乙基-1，3-二氧戊環(huán)(9g，27mmol)用三氟乙酸(10ml)和水(5ml)處理3小時。將反應混合物減壓濃縮，加入飽和碳酸氫鈉水溶液中和殘余的痕量酸。乙醚萃取后，經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，TBMO/HX 10/90)，得到5.5g(70％)產(chǎn)物(I)。11.e.β-乙基-β-羥基-γ-(3-芐氧甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)丙酸叔丁酯(J)將溴乙酸叔丁酯(13ml，80mmol)滴加到回流的鋅(5.3g，80mmol，預先用6N HCl處理10秒鐘活化，然后用水洗滌至中性pH，再依次用丙酮和乙醚洗滌)的無水四氫呋喃(60ml)懸浮液中。添加完畢后，使該反應物再回流10分鐘。加入1-(3-芐氧甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)-丙烷-1-酮(5.8g，20mmol)的無水四氫呋喃(20ml)溶液，將該反應混合物在回流下攪拌1個小時。在0℃使用飽和氯化銨水溶液(100ml)使反應停止并用乙醚萃取該反應混合物。合并的萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到黃色油，經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，TBMO/HX 5/95-10/90)，得到澄清油狀的叔丁酯(J)(7g，95％)。11.f.β-乙基-β-羥基-γ-(3-羥甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)丙酸叔丁酯(K)在大氣壓和室溫下，用5％鈀/炭(50mg)為催化劑和無水乙醇(10ml)為溶劑氫解β-乙基-β-羥基-γ-(3-芐氧甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)丙酸叔丁酯(1g，2.5mmol)。一旦反應完成(6小時)，過濾分離出催化劑并蒸發(fā)溶劑，得到純度足夠用于隨后合成反應的0.7g(90％)產(chǎn)物(K)。11.g.5-乙基-1，5-二氫-5-羥基-9-甲氧基-庚英[3，4-c]吡啶-3(4H)-酮(L)在室溫將β-乙基-β-羥基-γ-(3-羥甲基-2-甲氧基-4-吡啶基)丙酸叔丁酯(8.8g，28mmol)用三氟乙酸(30ml)處理3小時。蒸發(fā)揮發(fā)性成分，殘余物經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，二氯甲烷/甲醇100/0-98/2)，得到澄清的油，用甲苯處理后，得到5.9g白色結晶產(chǎn)物(L)(89％)，熔點97-98℃。11.h 5-乙基-1，5-二氫-5-羥基-庚英[3，4-c]吡啶-3，9(4H，8H)-二酮(M)將1N鹽酸(20ml)和5-乙基-1，5-二氫-5-羥基-9-甲氧基-庚英[3，4-c]吡啶-3(4H)-酮(0.5g，2.1mmol)加熱回流9小時。減壓濃縮該反應混合物，殘余物通過兩次加入甲苯干燥并蒸發(fā)，然后在五氧化磷的存在下減壓放置過夜。所得油溶于無水乙腈(5ml)并在氬氣氛下攪拌24小時。將沉淀過濾并干燥，得到0.23g(49％)白色固體(M)，熔點118-119℃。11.i.6，7-亞乙二氧基-2-碘-3-喹啉-甲醇(N)采用Meth-Cohn等在J.Chem.Soc.Perkin Trans.I，p.1520(1981)；Meth-Cohn，J.Chem.Soc.Perkin Trans.I，P.2509(1981)和Nakasinman等在J.Chem.Soc.112，p4431(1990)上描述的方法。將3，4-亞乙二氧基-N-乙酰苯胺(22g，113mmol)加到Vilsmeyer試劑中，后者的試劑是通過將磷酰氧氯(71ml，0.77mol)滴加到無水二甲基甲酰胺(23ml，0.28mol)中形成的，再在氬氣氛中在冰水浴中冷卻0.5小時。將所得混合物在75℃加熱16小時。待冷卻到室溫后，將反應混合物加到冰水混合物(300ml)中并用二氯甲烷萃取(5×200ml)。合并的有機萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。將固體殘余物懸浮于二氯甲烷(20ml)中，過濾并減壓干燥，得到10g(35％)黃色固體狀的2-氯-6，7-亞乙二氧基-3-甲醛，熔點222-224℃。該中間體用碘化鈉(30g，0.2mol)和濃鹽酸(1.5ml)在乙腈(150ml)中回流處理24小時。冷卻至室溫后，減壓除去溶劑，殘余物溶于50％四氫呋喃水溶液(200ml)中，過濾，用四氫呋喃洗滌并減壓干燥，得到12g黃色固體狀6，7-亞乙二氧基-2-碘代喹啉-3-甲醛，熔點155-157℃。將上述中間體用硼氫化鈉(2g，52mmol)在甲醇(200ml)中室溫下處理0.5小時。減壓除去溶劑，將殘余物溶于水中并過濾。將所得固體在五氧化磷存在下減壓干燥，得到11g黃色固體狀(6，7-亞乙二氧基-2-碘代喹啉-3-基)-甲醇，熔點178-180℃。11.j.5-乙基-8-(6，7-亞乙二氧基-2-碘代-3-喹啉甲基)-1，5-二氫-5-羥基-庚英[3，4-c]吡啶3，9(4H，8H)-二酮(O)用5分鐘將偶氮二甲酸二乙酯(570μl，3.6mmol)滴加到5-乙基-1，5-二氫-5-羥基-庚英[3，4-c]吡啶3，9(4H，8H)-二酮(400mg，1.79mmol)、前面11.i.步驟獲得的化合物(770mg，2.23mmol)和三苯基膦(934mg，3.58mmol)在無水THF/DMSO(8/1 v/v，45ml)中的溶液中，將所得混合物在氬氣氛下在室溫攪拌16小時，然后減壓濃縮該反應混合物，將殘余物溶于氯仿(100ml)。所得溶液用鹽水洗滌(4×50ml)，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘余物經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，二氯甲烷/甲醇；99/1-98/2)，得到650mg(66％)白色固體狀的產(chǎn)物(O)，熔點165-167℃。11.k.8-乙基-2，3，8，9-四氫-8-羥基-10H，12H-[1，4]二氧雜環(huán)乙二烯并[2，3-g]庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-10，13(15H)-二酮在氬氣氛下，將5-乙基-8-(6，7-亞乙二氧基-2-碘代喹啉-3-基)甲基-4，5-二氫-5-羥基(1H，3H)庚英[3，4-c]吡啶-3-二酮(600mg，1.1mmol)、四丁基溴化銨(352mg，1.1mmol)、乙酸鈉(359mg，4.4mmol)和乙酸鈀II(98mg，0.43mmol)溶于無水乙腈(40ml)并在90℃加熱16小時。待冷卻到室溫后，將白色沉淀與紅色溶液分離。將沉淀過濾并減壓干燥。將粗產(chǎn)物懸浮于水中，過濾并在五氧化二磷存在下減壓干燥，得到250mg透明的黃色固體狀目的產(chǎn)物，m.p，＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,91(t，3H)；1,87(m，2H)；3,08(d，1H)；3,51(d，1H)；4,45(s，4H)；5,19(s，2H)；5,47(dd，2H)；6,02(se，1H)；7,33(s，1H)；7,54(s，1H)；7,55(s，1H)；8,43 (s，1H).RMN-C13(DMSO)8,43；36,47；42,54；50,52；61,43；64,43(2C)；73,31；99,07；112,27；113,14；122,00；124,24；128,18；129,74；144,59；145,01；145,33；147,63；150,88；155,88；159,23；172,07.實施例1210-芐氧基-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮12.a.(6-芐氧基-2-碘代-3-喹啉)-甲醇以類似于實施例11的11.i.步驟描述的方法，但使用4-芐氧基-N-乙酰苯胺代替3，4-亞乙二氧基-N-乙酰苯胺制備該化合物。經(jīng)硅膠柱色譜純化，使用二氯甲烷為洗脫液分離(8％回收率)得到足夠純度的中間體6-芐氧基-2-氯代喹啉-3-甲醛，熔點180-182℃。然后，通過鹵素置換得到熔點為155～157℃的6-芐氧-2-碘代喹啉-3-甲醛，用硼氫化鈉還原，得到(6-芐氧基-2-碘代喹啉-3-基)-甲醇，熔點147-149℃。12.b.8-(6-芐氧基-2-碘代-3-喹啉甲基)-1，5-二羥基-5-乙基-5-羥基-庚英[3，4-c]吡啶-3，9(4H，8H)-二酮以類似于實施例11的11.j.步驟描述的方法，但使用(6-芐氧基-2-碘代喹啉-3-基)-甲醇代替(6，7-亞乙二氧基-2-碘代喹啉-3-基)-甲醇制備該化合物。該化合物呈白色固體狀，熔點197-199℃。12.c.10-芐氧基-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮以類似于實施例11的11.k.步驟所示的方法，但使用8-(6-芐氧基-2-碘代-3-喹啉甲基)-1，5-二羥基-5-乙基-5-羥基-庚英[3，4-c]吡啶-3，9(4H，8H)-二酮代替5-乙基-8-(6，7-亞乙二氧基-2-碘代喹啉-3-基)甲基-4，5-二氫-5-羥基-(1H，3H)庚英[3，4-c]吡啶-3-二酮制備該化合物。該目的化合物呈透明黃色固體狀，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,90(t，3H)；1,85(m，2H)；3,08 (d，1H)；3,50(d，1H)；5,25(s，2H)；5,30(s，2H)；5,50(dd，2H)；6,05(s，1H)；7,30-7,70(m，8H)；8,10(d，1H)；8,55(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,43；36,48；38,28；50,65；61,42；70,00；73,32；99,05；107,71；122,05；123,42；128,1812826；128,70；129,40；130,19；130,48；130,63；136,65；144,18；144,90；150,53；155,91；157,31；159,24；172,06.實施例13γ-(12-芐氧基-8-羥甲基-9-氧代(11H)-中氧茚并[1，2-h]喹啉-7-劑)-β-乙基-β-羥基-丙酸(E)以類似于實施例4描述的方法，但使用10-芐氧基-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮代替5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮制備該化合物。該化合物呈黃色固體狀，熔點171-173℃。RMN-1H(DMSO)0,80(t，3H)；2,00(m，2H)；2,85(d，1H)；3,15(d，1H)；4,80(s，2H)；5,25(s，2H)；5,30(s，2H)；5,75(se，1H)；7,30(s，1H)；7,35-7,70(m，7H)；8,10(d，1H)；8,55(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,11；34,75；46,68；50,35；55,70；69,97；76,51；99,45；107,78；123,28；127,64128,18(2C)；128,26；128,70(2C)；129,33；130,17；130,47；130,57；136,69；142,79；144,17；150,93；156,03；157,19；161,20.實施例145-乙基-4，5-二氫-5，10-二羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮在大氣壓、室溫下，使用10％鈀/炭(60mg)為催化劑和三氟乙酸(15ml)為溶劑，用氫處理10-芐氧基-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮(370mg，0.79mmol)。待反應結束(16小時)，往反應混合物中加入二氯甲烷(50ml)和甲醇(50ml)，濾除催化劑并減壓蒸發(fā)揮發(fā)性成分，獲得含有痕量三氟乙酸的目的化合物粗品。通過與1，4-二惡烷共蒸餾除去痕量酸。獲得的產(chǎn)物呈橙色固體狀，熔點150℃(分解)，其純度足以用于下步合成反應。RMN-1H(DMSO)0,89(t，3H)；1,85(q，2H)；3,02(d，1H)；3,45(d，1H)；5,19(s，2H)；5,37(d，1H)；5,50(d，1H)；5,98(se，1H)；7,26(s 1H)；7,31(s，1H)；7,40(d，1H)；8,00(d，1H)；8,42(s，1H)；10,32(s，lH).RMN-C13(DMSO)8,47；36,50；42,61；50,57；61,46；73,35；98,84；109,02；121,83；123,18；129,50；129,85；130,12；130,80；143,39；145,10；149,69；155,97；156,82；159,30；172,11.實施例1511-(二甲氨基)甲基-5-乙基-4，5-二氫-5，10-二羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮15.a.11-(二甲氨基)甲基-5-乙基-4，5-二氫-5，10-二羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮將10-芐氧基-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮(260mg，0.69mmol)的乙酸(15ml)懸浮液用37％甲醛水溶液(500μl)和40％二甲胺水溶液(500μl)處理，所得混合物在室溫攪拌16小時。將反應混合物濃縮至干，殘余物經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，二氯甲烷/甲醇；100/0-90/10)，然后用乙腈結晶，得到102mg目的產(chǎn)物。15.b.11-(二甲氨基)甲基-5-乙基-4，5-二氫-5，10-二羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮鹽酸鹽將1N稀鹽酸滴加到11-(二甲氨基)甲基-5-乙基-4，5-二氫-5，10-二羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮(102mg)的水懸浮液中直至完全溶解為止。減壓蒸發(fā)水，將殘余物懸浮在乙腈(5ml)中，過濾，得到103mg目的鹽，熔點248℃(分解)。RMN-1H(DMSO)；0,88(t，3H)；1,85(m，2H)；2,84(s，6H)；3,08(d，1H)；3,5(d，1H)；4,73(s，2H)；5,25(s，2H)；5,47(dd，2H)；7,33(s，1H)；7,38(s，1H)；7,72(d，1H)；8,19(d，1H)；8,99(s，1H)；9,92(se，1H)；11,45(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,46；34,36；42,44(3C)；50,61(2C)；61,42；73,35；99,19；108,63；122,21；122,36；126,86；129,13；130,61；133,09；143,53；144,70；149,76；155,98；157,17；159,27；172,06.實施例165-乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例11的11.i.、11.j.和11.k.步驟描述的方法，由3-氟-4-甲氧基苯胺制備該化合物。獲得黃色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)；0,89(t，3H)；1,85(q，2H)；3,08(d，1H)；3,49(d，1H)；4,00(s，3H)；5,25(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d，1H)；6,00(s，1H)；7,32(s，1H)；7,72(d，1H)；7,91(d，1H)；8,58(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,43；36,48；42,51；50,68；56,60；61,42；73,29；99,25；108,68；113,52；122,23；126,33；129,99；130,30；143,79；144,70；148,42；151,18；153,19；155,81；159,20；172,06.IR(KBr)1259；1503；1602；1737.實施例179-氯-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-10-甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例11的11.i.、11.j.和11.k.步驟描述的方法，由3-氯-4-甲氧基苯胺制備該化合物。獲得黃色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)1,85(q，2H)；2,55(s，3H)；3,07(d，1H)；3,45(d，1H)；5,25(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d，1H)；6,05(s，1H)；7,39(s，1H)；8,10(s，1H)；8,20(s，1H)；8,60(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,43；20,20；36,47；42,49；50,67；61,41；73,28；99,87；122,82；126,98；127,99；129,60；130,53；131,08；135,64；136,56；144,39；147,11；153,10；155,85；159,18；172,03.IR(KBr)；1208；1479；1606；1656；1724.實施例185-乙基-9，10-二氟-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例11的11.i.、11.j.和11.k.步驟描述的方法，由3，4-二氟苯胺制備該化合物。獲得黃色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,47(d，1H)；5,25(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d，1H)；6,05(s，1H)；7,39(s，1H)；8,15(q，1H)；8,25(q，1H)；8,68(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,41；36,45；42,48；50,68；61,40；73,25；99,92；114,44；115,42；115,58；122,96；125,52；130,56；131,46；144,21；145,25；142,36；153,41；155,85；159,15；172,00.IR(KBr)1266；1512；1581；1618；1751.實施例197-乙基-7，8-二氫-7-羥基-9H，11H-[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯并[4，5-g]庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-9，12(14H)-二酮按照實施例11的11.i.、11.j.和11.k.步驟描述的方法，由3，4-亞甲二氧基苯胺制備該化合物。獲得乳白色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,45(d，1H)；5,20(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d，1H)；6,00(s，1H)；6,30(s，2H)；7,30(s，1H)；7,49(d，2H)8,45(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,43；36,49；42,56；50,58；61,42；73,31；98,87；102,75；103,33；104,92；121,76；125,74；128,59；130,33；145,08；146,69；148,78；150,19；151,49；155,90；159,24；172,08.IR(KBr)1248；1459；1606；1731.實施例209-氯-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例11的11.i.、11.j.和11.k.步驟描述的方法，由3-氯-4-甲氧基苯胺制備該化合物。獲得白色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,45(d，1H)；4,01(s，3H)；5,22(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d，1H)；6,02(s，1H)；7,31(s，1H)；7,68(s，1H)；8,20(s，1H)；8,55(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,22；36,27；42,30；50,48；56,69；61,23；73,08；99,16；107,44；122,16；127,12；128,12；129,25；130,02；130,53；143,29；144,37；151,12；153,29；155,71；158,98；171,84.1R(KBr)；1056；1256；1483；1592；1657；1747.實施例215-乙基-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例11的11.i.、11.j.和11.k.步驟描述的方法，由4-甲氧基苯胺制備該化合物。獲得黃色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,45(d、1H)；3,95(s，3H)；5,28(s，2H)；5,40(d，1H)；5,51(d，1H)；6,00(s，1H)；7,38(s，1H)；7,51(d，2H) 8,07(d，1H)；8,55(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,45；36,48；42,51；50,64；55,92；61,42；73,33；99,01；106,49；122,02；123,19；129,59；130,20；130,43；144,17；144,94；150,40；155,92；158,31；159,26；172,07.IR(KBr)1251；1604；1655；1735.實施例229，11-二氯-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例11的11.i.、11.j.和11.k.步驟描述的方法，由3，5-二氯苯胺制備該化合物。獲得黃色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,45(d，1H)；5,30(s，2H)5,41(d，1H)；5,55(d，1H)；6,08(s，1H)；7,41(s，1H)；8,05(s，1H)；8,21(s，1H)；8,91(s,1H).RMN-C13(DMSO)8,39；36,45；42,51；51,03；61,39；73,25；100,62；123,55；124,63；127,60；128,08；128,56；132,06；132,19；134,53；143,77；148,80；154,88；155,82；159,13；171,98.IR(KBr)；1064；1275；1586；1651；1743.實施例235-乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-10-甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例11的11.i.、11.j.和11.k.步驟描述的方法，由3-氟-4-甲基苯胺制各該化合物。獲得黃色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,89(t，3H)；1,85(q，2H)；2,49(s，3H)；3,08(d，1H)；3,49(d，1H)；5,21(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d,1H)；6,05(s，1H)；7,39(s，1H)；7,87(d，1H)；8,05(d，1H)；8,61(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,40；15,14；36,45；42,52；50,60；61,41；73,28；99,71；112,00；122,66；125,38；127,66；129,59；130,28；144,49；147,88；152,88；155,85；159,18；162,25；172,02.IR(KBr)；1054；1580；1651；1760.實施例245-乙基-10-氟-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例11的11.i.、11.i.和11.k.步驟描述的方法，由4-氟苯胺制備該化合物.獲得白色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)；0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,45(d，1H)；5,29(s，2H)；5,39(d，1H)5,55(d，1H)；6,30(s，1H)7,39(s，1H)；7,80(q，1H)；7,99(q，1H)；8,23(q，1H)；8,68(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,40；36,46；42,48；50,66；61,41；73,31；99,68；111,83；122,75；128,93；130,93；131,22；131,93；144,46；145,27；152,60；155,89；159,21；172,04.IR(KBr)1209；1589；1659；1739.實施例2510-氯-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例11的11.i.、11.j.和11.k.步驟描述的方法，由4-氯苯胺制備該化合物。獲得黃色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,47(d，1H)；5,25(s，2H)；5,39(d,1H)；5,51(d，1HD；6,05(s，1H)；7,39(s，1H)；7,89(d，1H)；8.19(d，1H)；8,29(s，1H)；8,67(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,40；36,46；42,47；50,70；61,42；73,31；100,000；122,96；127,31；127,42；128,87；131,11；132,12；144,34；146,53；153,38；155,88；159,20；172,04.IR(KBr)1069；1483；1606；1741.實施例2610-氯-5-乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例11的11.i.、11.j.和11.k.步驟描述的方法，由4-氯-3-氟苯胺制備該化合物。獲得黃色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,85(q，2H)；3,07(d，1H)；3,45(d，1H)；5,25(s，2H)；5,39(d，1H)；5,51(d，1H)；6,05(s，1H)；7,40(s，1H)；8,20(d，1H)；8,40(d，1H)；8,68(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,38；36,47；42,58；50,71；61,40；73,26；99,99；113,59；123,09；124,28；127,74；130,64；131,31；144,13；145,08；153,57；154,13；155,84；156,61；159,14；172,00.IR(KBr)1488；1583；1655；1743.實施例275，12-二乙基-4，5-二氫-5，10-二羥基-11-嗎啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例15.a.描述的方法，由嗎啉制備該化合物。獲得白色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,85(t，3H)；1,87(q，2H)；2,53(s，4H)；3,03(d，1H)；3,45(d，1H)；3,57(s，4H)；4,02(s，2H)；5,01(s，2H)；5,38(d，1H)；5,52(d，1H)；6,0(se，1H)；7,30(s，1H)；7,42(d，1H)；7,95(d，1H)；8,82(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,45；3,49；42,58；53,04；61,44；66,33；73,33；98,81；113,78；121,81；122,74；126,80；129,05；129,91；143,72；145,07；149,24；155,06；156,92；159,28；172,08.IR(KBr)；1515；1595；1654；1736.實施例285，12-二乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮28.a.5-氟-4-甲氧基-2-丙酰苯胺(該產(chǎn)物可按照Sugasawa T.；Toyoda T.；Adachi M.；Saskura K.，美國化學會志，100(1978)，p4842-4852所述的方法獲得)。在氬氣氛和0℃下，將3-氟-4-甲氧基苯胺(20g，142mmol)的無水二氯甲烷(200ml)溶液滴加到三氯化硼(1M庚烷溶液；156ml，156mmol)中。將如此獲得的粉色懸浮液攪拌5分鐘。然后分多次滴加丙腈(33ml，420mmol)和三氯化鋁(20.8g，156mmol)。將該反應物加熱回流3小時，冷卻到0℃，小心地加入2N鹽酸(100ml)使其水解，然后加熱回流45分鐘。冷卻到0℃后，過濾得到的沉淀，用二氯甲烷洗滌，然后回收到水(300ml)中。水相堿化為堿性pH，依次用二氯甲烷和乙酸乙酯萃取。將有機相干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，乙酸乙酯/庚烷1/99-20/80)。獲得15.3g黃色固體。RMN-1H(CDCl3)1,20(t，3H)；2,92(q，2H)；3,83(s，3H)；6,2(s，2H)；6,40(d，2H)；7,32(d，2H).IR(KBr)85,7；1148；1240；1561；1583；1662.28.b.4-乙基-7-氟-2-羥基-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯在氬氣氛和0℃下，將5-氟-4-甲氧基-2-丙酰苯胺(15.3g，77.5mmol)和三乙胺(13.9ml，100mmol)的無水乙腈(110ml)溶液滴加到乙基丙二酰氯(12.9ml，100mmol)的無水乙腈(30ml)溶液中。使該反應物升至室溫，用引流管氬氣氛下加乙醇鈉溶液(用1.8g，78mmol鈉在80ml乙醇中獲得)，然后將其在室溫攪拌12小時。將該反應混合物傾入冰水(100ml)中并攪拌2小時，然后將沉淀過濾并用水、乙醇和乙醚洗滌。獲得19.4g白色固體。RMN-1H(DMSO)1,25(m，6H)；2,78(q，2H)；3,92(s，3H)；4,30(q，2H)；7,15(d，2H)；7,40(d，2H)；11,93(s，1H).IR(KBr)；786；1083；1410；1521；1644；1725.28.c.2-氯-4-乙基-7-氟-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯將4-乙基-7-氟-2-羥基-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯(19.4g，0.066mol)在磷酰氯(243ml)中的懸浮液加熱回流6小時。蒸餾該磷酰氯。將反應混合物傾入冰水中。用二氯甲烷溶解。有機相用水洗滌，然后用飽和氯化鈉溶液洗滌。有機相經(jīng)硫酸鎂干燥并蒸發(fā)溶劑。將殘余物懸浮在乙醚中，過濾除去未轉化的原料(4g)。蒸發(fā)濾液，殘余物經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，乙酸乙酯/庚烷5/95-20/80)。獲得10.9g白色固體。RMN-1H(DMSO)1,30(t，3H)；1,39(t，3H)；3,08(q，2H)；4,09(s，3H)；4,49(q，2H)；7,64(d，2H)；7,86(d，2H).IR(KBr)865；1016；1082；1190；1224；1253；1272；1508；1571；1732.28.d.2-氯-4-乙基-7-氟-6-甲氧基-3-喹啉甲醇在室溫和惰性氣體氛圍下，往2-氯-4-乙基-7-氟-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯(10.8g，35mmol)的無水二氯甲烷(200ml)溶液中滴加二異丁基氫化鋁(1M二氯甲烷溶液，65ml，65mmol)，然后在40℃加熱4小時。冷卻到0℃，小心地加入20％(105ml)灑石酸鉀鈉鹽的水溶液和二氯甲烷(200ml)并攪拌1小時。潷析，用水洗滌三次，用硫酸鎂干燥有機相并蒸發(fā)溶劑。殘余物經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，乙酸乙酯/庚烷5/95-50/50)。獲得6g白色固體。RMN-1H(DMSO)1,28(t 3H)；3,25(q，2H)；4,04(s，3H)；4,77(d，2H)；5,27(t，1H)；7,55(d，2H)；7,73(d，2H).IR(KBr)；840；864；1023；1232；1267；1317；1444；1511；1569.28.e.5，12-二乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮如實施例11的11.j.步驟所述，將2-氯-4-乙基-7-氟-6-甲氧基-3-喹啉甲醇與化合物(M)偶合。按照11.k.步驟的方法環(huán)化所得的偶合產(chǎn)物。獲得黃色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(CF3COOD)1,07(m，3H)；1,62(m，3H)；2,27(m，2H)；3,44(d，1H)；3,54(m，2H)；3,91(d，1H)；4,25(s，3H)；5,60(d，1H)；5,74(s，2H)；5,98(d，1H)；7,85(m，1H)；8,16(m，1H)；8,31(s，1H).RMN-C13(CF3COOD)；9,03；14,20；26,68；38,77；43,98；53,79；58,27；64,73；77,93；106,85；109,24；110,15；128,99；129,20；131,61；137,32；141,23；144,13；154,79；158,32；160,25；160,81；179,30.IR(KBr)1013；1068；1265；1466；1514；1601；1655；1748.實施例295-乙基-4，5-二氫-5-羥基-12-甲基-1H-庚英[3’，4’；6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮使用實施例28.b.，28.c.和28.d.所述的方法，由2-乙酰苯胺得到2-氯-4-甲基-3-喹啉甲醇。如實施例11的11.j.步驟所述，將后者與化合物(M)偶合。按照11.k.步驟的方法環(huán)化所得的偶合產(chǎn)物。獲得黃色固體，熔點＞260℃。RMN1H(DMSO)；0,87(t，3H)；1,87(q，2H)；2,78(s，3H)；2,80(d，1H)；3,55(d，1H)；5,27(s，2H)；5,42(d，1H)；5,52(d，1H)；6,04(s，1H)；7,39(s，1H)；7,75(t，1H)；7,88(t，1H)；8,13(d，1H)；8,25(d，1H).RMN-C13(DMSO)8,23；36,26；42,36；62,00；73,11；78,65；79,13；79,25；99,52；122,36；124,30；127,67；129,54；129,55；129,56；140,11；145,06；148,07；152,00；155,79；159,09；171,89.IR(KBr)；1649；1751；3404.實施例309-氯-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮30.a.5-氯-2-氯乙酰基-4-甲氧基苯胺該產(chǎn)物按照Sugasawaa T.；Toyoda T.；Adachi M.；Sasakura K.在美國化學會志，100(1978)，p4842-4852描述的方法獲得。在惰性氣體氛圍和0℃下，將三氯化硼的己烷摩爾溶液(164ml，164mmol)、氯乙腈(11.4ml，180mmol)和二乙基氯化銨的己烷摩爾溶液(164ml，164mmol)依次滴加到3-氯-4-甲氧基苯胺(23.6g，150mmol)的溶液中。將該反應物加熱回流1小時，然后冷卻到0℃，小心地加入2N鹽酸(90ml)使其水解，然后繼續(xù)回流1小時。再次冷卻并加入濃碳酸氫鈉溶液直至pH達14。該溶液用乙酸乙酯萃取；有機相用水、然后用鹽水洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)。將殘余物溶于異戊烷中，潷析，然后將不溶物溶于最少量異丙醚中，通過加入異戊烷沉淀產(chǎn)物。過濾并真空干燥。獲得17.26g棕色固體。RMN-1H(CDCl3)3,82(s，3H)；4,60(s，2H)；6,11(s，2H)；6,78(s，1H)；7,11(s，1H).30.b.7-氯-4-氯代甲基-2-羥基-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯在氬氣氛和0℃下，將乙基丙二酰氯溶液(17ml，131mmo1)滴加到5-氯-2-氯乙?；?4-甲氧基苯胺(17g，73mmol)和三乙胺(18.5ml，131mmol)的無水乙腈(310ml)溶液中。在室溫攪拌2小時，然后在0℃滴加乙醇鈉的乙醇溶液(由1.88g，80mmol鈉在90ml乙醇中獲得)。在室溫攪拌12小時。加入300ml水后，再攪拌20分鐘。過濾沉淀；用水、乙醇和乙醚洗滌。真空干燥后，獲得16.7g黃色固體。RMN-1H(DMSO)1,31(t，3H)；3,95(s，3H)；4,36(q，2H)；4,95(s，2H)；7,46(s，1H)；7,49(s，1H).30.c.2，7-二氯-4-氯甲基-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯將7-氯-4-氯代甲基-2-羥基-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯(116.7g，50mmol)在磷酰氯(100ml)中的懸浮液加熱回流6小時。蒸發(fā)磷酰氯。將殘余物溶于水中，攪拌30分鐘。過濾沉淀并用水洗滌至中性為止。將沉淀溶于二氯甲烷并用飽和氯化鈉溶液洗滌。經(jīng)硅藻土層過濾，潷析濾液。有機相再次用飽和氯化鈉溶液洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)。獲得15.88g棕色油。RMN-1H(CDC13)1,47(t，3H)；4,08(t，3H)；4,55(q，2H)；4,87(s，2H)；7,35(s，1H)；8,09(s，1H).30.d.2，7-二氯-6-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪甲基)-3-喹啉羧酸乙酯將2，7-二氯-4-氯甲基-6-甲氧基-3-喹啉羧酸乙酯(6.9g，20mmol)和N-甲基哌嗪(9ml，80mmol)的混合物在60℃加熱30分鐘。該反應物用水稀釋，用乙酸乙酯萃取。潷析，有機相用水洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)。將殘余物溶于水中，攪拌15分鐘，過濾，用水洗滌并真空干燥。殘余物經(jīng)柱色譜純化(二氧化硅，甲醇/二氯甲烷；5/95-8/92)。獲得6.7g米色固體產(chǎn)物。RMN-1H(CDCl3)1,45(t，3H)；2,28(s，3H)；2,35-2,70(m，8H)；3,86(s，2H)；4,04(s，3H)；4,48(q，2H)；7,77(s，1H)；8,05(s，1H).30.e.2，7-二氯-6-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪甲基)-3-喹啉甲醇將2，7-二氯-6-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪甲基)-3-喹啉羧酸乙酯(6g，14.5mmol)溶于二氯甲烷(120ml)。緩慢地加入二異丁基氫化鋁的二氨甲烷摩爾溶液(60ml，60mmol)。在室溫攪拌1小時。將反應物緩慢地傾入300ml20％灑石酸鉀鈉鹽溶液中。攪拌1小時；濾過硅藻土；潷析，有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并進行減壓蒸發(fā)。獲得4.3g黃色固體狀的目的產(chǎn)物。RMN-1H(CDCl3)2,27(s，3H)；2,30-2,80(m，8H)；4,03(s，3H)；4,08(s，2H)；4,96(s，2H)；5,95(s，1H)；7,37(s，1H)；8,05(s，1H).30.f.9-氯-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮如實施例11的11.j.步驟描述的方法將2，7-二氯-6-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪甲基)-3-喹啉甲醇與化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法將所得偶合產(chǎn)物環(huán)化。獲得黃色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,87(t，3H)；1,84(q，2H)；2,53(s，4H)；3,08(d，1H)；3,47(d，1H)；3,58(s，4H)；4,06(s，5H)；5,30(s，2H)；5,42(q，2H)；6,03(s，1H)；7,31(s，1H)；7,91(s，1H)；8,16(s，1H).RMN-C13(DMSO)；8,42；36,53；50,65；5330；56,67；62,00；66,50；73,32；99,31；104,86；122,32；126,94；127,70；129,83；130,44；138,89；144,22；144,85；151,05；153,17；155,92；159,19；172,06.IR(KBr)；862；1063；1116；1248；1595；1655；1744；3449.實施例319-氯-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-12-嗎啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由3-氯-4-甲氧基苯胺獲得2，7-二氯-6-甲氧基-4-氯代甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照實施例30.d的方法用嗎啉代替N-甲基哌嗪處理所得產(chǎn)物，然后按照實施例30.e.的方法還原，獲得相應的喹啉甲醇。如實施例11的11.j.步驟所述，將后者與化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，將所得偶合產(chǎn)物環(huán)化。獲得米色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,87(t，3H)；1,84(q，2H)；2,15(s，3H)；2,32(s，4H)；2,50(s，4H)；3,08(d，1H)；3,47(d，1H)；4,06(s，5H)；5,29(s，2H)；5,46(q，2H)；6,06(s，1H)；7,31(s，1H)；7,92(s，1H)；8，17(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,42；36,51；42,57；45,93；50,66；52,83；55,05；56,09；56,72；61,44；73,29；99,30；104,89；122,32；126,89；127,63；129,85；130,16；138,78；144,18；144,81；151,03；153,10；155,10；159,17；172,07.IR(KBr)1055；1252；1596；1655；1747；3449.實施例325-乙基-4,5-二氫-5-羥基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由苯胺獲得2-氯-4-氯代甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照實施例30.d的方法用N-甲基哌嗪處理所得產(chǎn)物，然后按照實施例30.e.的方法還原，獲得相應的喹啉甲醇。如實施例11的11.j.步驟所述，將后者與化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，將所得偶合產(chǎn)物環(huán)化。獲得黃色固體，熔點＞260℃。RMN-1H(DMSO)0,86(t，3H)；1,87(q，2H)；2,14(s，3H)；2,32-2,60(m，8H)；3,05(d，1H)；3,48(d，1H)；4,09(q，2H)；5,42(d，1H)；5,52(d，1H)；6,03(se，1H)；7,40(s，1H)；7,72(t，1H)；7,85(t，1H)；8,16(d，1H)；8,45(d，1H).IR(KBr)1652；1735；3424.實施例335-乙基-4，5-二氫-5-羥基-12-哌啶子基甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由苯胺獲得2-氯-4-氯代甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照實施例30.d的方法用哌啶代替N-甲基哌嗪處理所得產(chǎn)物，然后按照實施例30.e.的方法還原，獲得相應的喹啉甲醇。如實施例11的11.j.步驟所述，將后者與化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，將所得偶合產(chǎn)物環(huán)化。獲得黃色固體，熔點＞260℃。RMN-1H(DMSO)0,86(t，3H)；1,40(se，2H)；1,48(se，4H)；1,87(q，2H)；2,50(s，4H)；3,05(d，1H)；3,48(d，1H)；4,04(q，2H)；5,33(s，2H)；5,42(d，1H)；5,51(d，1H)；6,07(se，1H)；7,75(t，1H)；7,85(t，1H)；8,15(d，1H)；8,45(d，1H).RMN-C13(DMSO)8,47；23,50；25,82；36,50；42,50；50,68；54,47；58,00；61,42；73,35；99,55；122,61；125,31；127,58；129,54；129,55；129,56；129,57；140,49；144,95；148,63；152,41；155,90；159,23；172,07.IR(KBr)1659；1727；3408.實施例34；5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-12-嗎啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由苯胺獲得2-氯-4-氯代甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照實施例30.d的方法用嗎啉代替N-甲基哌嗪處理所得產(chǎn)物，然后按照實施例30.e.的方法還原，獲得相應的喹啉甲醇。如實施例11的11.j.步驟所述，將后者與化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，將所得偶合產(chǎn)物環(huán)化。獲得黃色固體，熔點＞260℃。RMN-1H(DMSO)0,86(t，3H)；1,87(q，2H)；3,05(d，1H)；3,30(s，4H)；3,49(d，1H)；3,55(se，4H)；4,10(q，2H)；5,35(s，2H)；5,40(d，1H)；5,54(d，1H)；6,04(s，1H)；7,72(t，1H)；7,85(t，1H)；8,16(d，1H)；8,47(d，1H).RMN-C13(DMSO)8,42；36,51；42,57；50,68；53,51；56,06；61,42；66,41；73,34；99,56；122,64；125,25；127,56；129,81；139,55；144,92；148,62；152,39；155,89；159,21；172,05.IR(KBr)1657；1729；3347.實施例355-乙基-10-氟-4，5-二氫-5-羥基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由4-氟苯胺獲得2-氯-4-氯代甲基-6-氟-3-喹啉羧酸乙酯，按照實施例30.d的方法用N-甲基哌嗪處理所得產(chǎn)物，然后按照實施例30.e.的方法還原，獲得相應的喹啉甲醇。如實施例11的11.j.步驟所述，將后者與化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，將所得偶合產(chǎn)物環(huán)化。獲得黃色固體，熔點＞275℃。RMN-1H(DMSO)0,87(t，3H)；1,85(q，2H)；2,15(s，3H)；2,31(m，4H)；2,50(m，4H)；3,07(d，1H)；3,48(d，1H)；4,04(m，2H)；5,31(s,2H)；5,40(d,1H)；5,53(d,1H)；6,05(s,1H)；7,38(s,1H)；7,77(m，1H)；8,19(m,2H).RMN-C13(DMSO)；8,43；36,51；42,54；45,89；50,67；52,92；54,93；55,92；73,32；99,56；122,69；130,43；132,40；139,69；144,70；145,84；152,19；155,90；159,17；172,05.IR(KBr)836；1051；1217；1291；1612；1662；1726.實施例365-乙基-10-氟-4，5-二氫-5-羥基-12-嗎啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由4-氟苯胺獲得2-氯-4-氯代甲基-6-氟-3-喹啉羧酸乙酯，按照實施例30.d的方法用嗎啉代替N-甲基哌嗪處理所得產(chǎn)物，然后按照實施例30.e.的方法還原，獲得相應的喹啉甲醇。如實施例11的11.j.步驟所述，將后者與化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，將所得偶合產(chǎn)物環(huán)化。獲得米色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(DMSO)0,87(m,3H)；1,85(m,2H)；2,51(m,4H)；3,06(d，1H)；3,48(d，1H)；3,56(m，4H)；4,05(m，2H)；5,34(s,2H)；5,40(d，1H)；5,53(d，1H)；6,04(s，1H)；7,38(s，1H)；7,77(m，1H)；8,21(m，2H).RMN-C13(DMSO)8,40；36,47；42,52；50,59；53,40；56,14；61,44；66,41；73,29；99,58；109,05；109,28；120,11；120,37；122,68；128,53；130,53；132,43；139,13；144,62；145,79；152,07；155,94；159,14；161,59；172,04.IR(KBr)834；860；1061；1118；1215；1286；1516；1609；1658；1734.實施例375-乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-10-甲基-12-(4-甲基哌嗪甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由3-氟-4-甲基苯胺獲得2-氯-4-氯代甲基-7-氟-6-甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照實施例30.d的方法用N-甲基哌嗪處理所得產(chǎn)物，然后按照實施例30.e.的方法還原，獲得相應的喹啉甲醇。如實施例11的11.j.步驟所述，將后者與化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，將所得偶合產(chǎn)物環(huán)化。獲得黃色固體，熔點＞260℃。RMN-1H(CDCl3)1,00(t，3H)；2,00(q，2H)；2,35(s，3H)；2,50(s，3H)；2,61(m，8H)；3,33(d，1H)；3,39(d，1H)；3,97(d，1H)；4,07(d，1H)；5,17(d，1H)；5,38(d，1H)；5.52(d，1H)；5,63(d，1H)；7,13(d，1H)；7,28(s，1H)；7,99(d，1H).IR(KBr)；1652；1747；3430.實施例385-乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-10-甲基-12-嗎啉代甲基-1H-庚英[3’，4’；6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由3-氟-4-甲基苯胺獲得2-氯-4-氯代甲基-7-氟-6-甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照實施例30.d的方法用嗎啉代替N-甲基哌嗪處理所得產(chǎn)物，然后按照實施例30.e.的方法還原，獲得相應的喹啉甲醇.如實施例11的11.j.步驟所述，將后者與化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，將所得偶合產(chǎn)物環(huán)化。獲得黃色固體，熔點＞260℃。RMN-1H(DMSO+CDCl3)1,00(t，3H)；2,02(q，2H)；2,57(s，3H)；2,60(s，4H)；3,23(d，1H)；3,45(d，1H)；3,75(s，4H)；4,11(s，2H)；5,44(s，2H)；5,47(d，1H)；5,65(d，1H)；7,62(s，1H)；7,73(d，1H)；8，24(d，1H).RMN-C13(CF3CO2D)8,35；13,93；16,01；22,24；25,29；38,18；43,42；54,19；56,04；56,74；64,16；65,09；77,48；108,29；108,57；128,07；128,70；129,90；135,64；138,03；139,86；141,10；141,56；147,78；158,30；161,87；178,72.IR(KBr)；117；1609；1654；1750；3437.實施例395-乙基-9-氟-4，5-二氫-5-羥基-10-甲基-12-哌啶子基甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由3-氟-4-甲基苯胺獲得2-氯-4-氯代甲基-7-氟-6-甲基-3-喹啉羧酸乙酯，按照實施例30.d的方法用哌啶代替N-甲基哌嗪處理所得產(chǎn)物，然后按照實施例30.e.的方法還原，獲得相應的喹啉甲醇。如實施例11的11.j.步驟所述，將后者與化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，將所得偶合產(chǎn)物環(huán)化。獲得黃色固體，熔點＞260℃。RMN-1H(CF3CO2D)1,09(s，3H)；1,70(t，1H)；2,03(m，5H)；2,25(s，2H)；2,70(s，3H)；3,54(d，3H)；3,88(d，1H)；4,01(se，2H)；5,30(q，2H)；5,65(d，1H)；5,96(d，1H)；6,10(s，2H)；8,16(d，1H)；8,35(s，1H)；8,61(s，1H).RMN-C13(CF3CO2D)8,47；16,07；20,93；22,18；24,76；38,28；43,53；54,30；56,12；58,33；64,24；77,56；108,37；111,30；128,20；129,02；129,98；135,60；138,29；139,90；141,60；142,26；147,57；158,28；161,90；167,63；170,31；178,82.IR(KBr)1605；1657；1728；3399.實施例408-乙基-2，3，8，9-四氫-8-羥基-16-(4-甲基哌嗪甲基)-10H，12H-(1，4)二氧雜環(huán)乙烯并(2，3-g)庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-10，13(15H)-二酮按照實施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由3，4-亞乙二氧基苯胺獲得2-氯-4-氯代甲基-6，7-亞乙二氧基-3-喹啉羧酸乙酯，按照實施例30.d的方法用N-甲基哌嗪處理所得產(chǎn)物，然后按照實施例30.e.的方法還原，獲得相應的喹啉甲醇。如實施例11的11.j.步驟所述，將后者與化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，將所得偶合產(chǎn)物環(huán)化。獲得黃色固體，熔點＞260℃。RMN-1H(DMSO)；0,92(t，3H)；1,89(q，2H)；2,16(s，3H)；2,50(m，8H)；3,12(d，1H)；3,50(d，1H)；3,95(s，2H)；4,47(s，4H)；5,19(q，2H)；5,43(d，1H)；5,56(d，1H)；7,35(s，1H)；7,54(s，1H)；7,76(s，1H).RMN-C13(DMSO)8,45；24,80；36,51；42,4g；45,90；50,45；52,98；54,91；56,10；61,44；64,43；73,30；99,03；109,46；113,51；121,95；123,51；127,76；137,99；145,00；145,14；145,27；147,24；150,53；155,99；159,18；172,27；177,00.IR(KBr)1656；1743；3422.實施例419-氯-5-乙基-10-氟-4，5-二氫-5-羥基-12-嗎啉代甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮按照實施例30.a.，30.b.和30.c.描述的方法，由3-氯-4-氟苯胺獲得2，7-二氯-4-氯代甲基-6-氟-3-喹啉羧酸乙酯，按照實施例30.d的方法用嗎啉代替N-甲基哌嗪處理所得產(chǎn)物，然后按照實施例30.e.的方法還原，獲得相應的喹啉甲醇。如實施例11的11.j.步驟所述，將后者與化合物(M)偶合。按照11.k.描述的方法，將所得偶合產(chǎn)物環(huán)化。獲得米色固體，熔點＞250℃。RMN-1H(CF3COOD)；1,09(t，3H)；2,30(m，2H)；3,50(d，1H)；3,90(d，1H)；3,98(d，4H)；4,36(s，4H)；5,38(q，2H)；5,64(d，1H)；5,96(d，1H)；6,23(q，2H)；8,57(d，1H)；8,60(s，1H)；8,85(d，1H).RMN-C13(CF3COOD)；8,10；37,80；43,11；54,31；55,78；63,75；65,11；77,06；128,28；129,55；130,33；136,26；137,11；138,40；139,67；139,85；148,58；157,54；159,74；161,31；178,00.IR(KBr)848；1042；1230；1609；1658；1750；3310；3387.實施例425-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮的拆分將β-乙基-β-羥基-γ-(8-羥甲基中氮茚并[1，2-b]喹啉-9-(11H)-酮-7-基)-丙酸(19.5g，52mmol)和L-(-)-α-甲基芐胺(12.12g，100mmol)在無水乙醇(11)中的混合物加熱到沸騰，趁熱過濾并使其放置68小時。將沉淀過濾并用乙醇和乙醚洗滌，得到9.8g白色固體。經(jīng)手性固定相高壓液相色譜分析(Chiral-AGP柱(Chromthech，Stochkholm，瑞典)“HPLC”手性，100×4mm，以2％乙腈的10mM、pH6.9磷酸緩沖液洗脫，峰洗脫時間為4.5和7.5分鐘)顯示了兩個完整的峰，兩個峰的總面積分別為24％和76％。將固體溶解于回流的93％乙醇(350ml)中，然后放置48小時。過濾沉淀，然后用乙醇和乙醚洗滌，得到4.8g白色固體，經(jīng)手性HPLC分析得到兩個完整的峰，兩個峰的總面積分別為9％和91％。將固體回收到回流的50％乙醇(48ml)中，然后放置48小時。過濾沉淀，然后用乙醇和乙醚洗滌，獲得2.7g白色固體，經(jīng)手性HPLC分析得到兩個完整的峰，兩個峰的總面積分別為3％和97％。將該固體溶于50％(22ml)回流乙醇，隨后放置48小時。過濾沉淀用乙醇和乙醚洗滌，得到1.6g白色固體，經(jīng)手性HPLC分析得到兩個完整的峰，總面積分別為1％和99％。將所得鹽用乙酸(0.35ml，6.4mmol)處理15分鐘，使其以非對映異構體形式富集，并將其溶于蒸餾水(20ml)中。過濾獲得的沉淀，用水、丙酮和乙醚洗滌，然后在80℃真空干燥，得到1.1g白色固體。將其溶于加有濃鹽酸(11.5N，11ml)的無水乙醇(55ml)中，得到黃色溶液，將其在室溫攪拌68小時。過濾所得的沉淀并用水、乙醇和乙醚洗滌，然后在80℃真空干燥，得到770mg以對映體形式富集的5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮。經(jīng)手性HPLC分析(Chiral-AGP柱，以2％-5％乙腈的10mM、pH6.9磷酸緩沖液梯度洗脫，峰洗脫時間為15和20分鐘)顯示對映體含量超過98％。將L-(-)-α-甲基芐胺用D-(+)-α-甲基芐胺代替，重復上述方法。如此獲得5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮的另一種對映體。
采用上述方法制備下列產(chǎn)物，它們也是本發(fā)明一部分且是優(yōu)選產(chǎn)物10-芐氧基-5，12-二乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；5，12-二乙基-4，5-二氫-5，10-二羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；5，12-二乙基-4，5-二氫-5，10-二羥基-11-二甲氨基甲基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-9，10-二甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；10-溴-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；11-溴-5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-10-甲氧基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；5-乙基-12-二乙氨基甲基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H，3H-環(huán)戊烷并[g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，16(14H)-二酮；7-乙基-7，8-二氫-7-羥基-16-(4-甲基哌嗪甲基)-9H，11H-[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯并[4，5-g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-9，12(14H)-二酮；5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-12-(1-咪唑基甲基)-1H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮；8-乙基-8，9-二氫-8-羥基-10H，12H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]吡啶并[2，3-g]喹啉-10，13(15H)-二酮；5-乙基-4，5，9，10，11，12-六氫-5-羥基-1H，3H-苯并[g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，17(15H)-二酮；8-乙基-8，9-二氫-8-羥基-14H，10H，12H-[1，3]-二氧雜環(huán)乙烯并[4，5-g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-10，13(15H)-二酮；7-乙基-7，8-二氫-7-羥基-1H，9H，11H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]吡咯并[2，3-g]喹啉-9，12(14H)-二酮；7-乙基-7，8-二氫-7-羥基-1H，9H，11H-味唑并[4，5-g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-9，12(14H)-二酮；7-乙基-7，8-二氫-7-羥基-1H，9H，11H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]1，2，3-三唑并[4，5-g]喹啉-9，12(14H)-二酮；7-乙基-7，8-二氫-7-羥基-9H，11H-庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-b]噻唑并[4，5-g]喹啉-9，12(14H)-二酮；7-乙基-7，8-二氫-7-羥基-9H，11H-惡唑并[4，5-g]庚英[3’，4’6，7]-中氮茚并[1，2-bl喹啉-9，12(14H)-二酮。本發(fā)明產(chǎn)物的藥理學研究1.由拓撲異構酶1誘導的DNA松弛活性的活性試驗。
所有反應均在20μl反應緩沖液中進行，所述反應緩沖液由含或不含確定濃度待試驗化合物的50mM tris-HCl(pH7.5)，50mM KCl，0.5mM二硫蘇糖醇，10mM MgCl2，0.1mM乙二胺四乙酸(EDTA)，30μl/ml牛血清白蛋白和300ng螺旋pUC19(Pharmacia Biotech，Orsay，法國)組成。將所有待試驗化合物先以50mM濃度溶于二甲亞砜(DMSO)，其它稀溶液用蒸餾水配制。在DMSO中的終濃度不超過1％(v/v)。通過加入一單位純化牛胸腺DNA的拓撲異構酶I(Gibco-BRL，Paisley，英國)引發(fā)反應并使其在37℃進行15分鐘。通過加入3μl下列組成的混合物使反應停止1％十二烷基硫酸鈉，20mM EDTA和500μg/ml蛋白激酶K(Boehringer Mannheim，Meylan，法國)。再于37℃培養(yǎng)30分鐘后，往樣品中加入2μl含10mMNa2HPO4，0.3％溴酚藍和16％Ficoll的電荷分布緩沖液，然后在含36mMpH7.8 Tris-HCl，30mM Na2HPO4，1mM EDTA和2μg/ml氯喹的緩沖液中進行1.2％、1V/cm瓊脂糖凝膠電泳20小時。凝膠用2μg/ml啡啶溴紅染色，在312nm U.V.光下用顯影設備成像，用生物Profil照相機(VilberLourmat，Lyon，法國)測定熒光強度，由此確定松弛DNA的百分數(shù)。每個試驗重復進行至少三次。
在每個試驗中，將螺旋DNA質粒單獨或與拓撲異構酶I一起培養(yǎng)。反應需15分鐘完成，對于每種待試驗化合物或對照化合物而言，在500μM待試驗化合物存在下，與酶一起培養(yǎng)螺旋DNA質粒或者在無酶的條件下培養(yǎng)螺旋DNA質粒和濃度為10μM，100μM，200μM和500μM的待測試化合物。如表1所示，實施例2、3、4、9、10和11以劑量依賴方式抑制得益于拓撲異構酶I的松弛活性。
表I
2.細胞增殖試驗在該研究中試驗八個腫瘤細胞系L1210(小鼠淋巴白血病)，HCT15和LOVO(人結腸的腺癌細胞系)，A549(人肺癌)，A217，U373，U87(人成膠質細胞瘤)。所有這些細胞系均得自American Type CollectionCultures(ATCC)，Rockville，Md。將L1210細胞的懸浮培養(yǎng)物培養(yǎng)于改性Dulbecco的Eagle培養(yǎng)基(DMEM)(Bio Whitaker，Verviers，比利時)中，其中補充有加熱滅活的10％胎牛血清，2mM谷氨酰胺，50U/ml青霉素和50μg/ml鏈酶素。將HT29細胞以單層培養(yǎng)基培養(yǎng)于5aMcCoy培養(yǎng)基(Bibco，Paisley，英國)中，其中補充有加熱滅活的10％胎牛血清，然后加入2mM谷氨酰胺和50μg/ml慶大霉素。其它細胞在改性的Earle基本培養(yǎng)基(EMEM；Gibco，Paisley，英國)中培養(yǎng)，其中補充有加熱滅活的5％胎牛血清，2mM谷氨酰胺，50U/ml青霉素和50μg/ml鏈酶素。所有這些細胞系均在37℃、含95％空氣和5％二氧化碳的潮濕氣氛中培養(yǎng)。
通過MTT試驗測定腫瘤細胞系的抑制作用，在用待測試化合物處理前24小時，將培養(yǎng)基(所需的細胞培養(yǎng)基)中1500個L1210細胞接種到微滴定板(組織培養(yǎng)水平96孔，平底)的孔中。為進行劑量響應研究，將細胞與終濃度為1.10-10-1.10-4M的各種待試驗化合物或其相應的溶劑(對照物)一起培養(yǎng)48小時。臨用前將所有化合物均以50mM濃度溶于二甲亞砜(DMSO)。用培養(yǎng)基進一步稀釋藥物。DMSO的終濃度不超過0.2％(v/v)。用溶劑代替藥物溶液作為對照物，并以與待試驗化合物相同的方式依次稀釋。
培養(yǎng)后，以0.3mg/ml的終濃度向每孔中加入標記試劑MTT(3-[4，5-二甲基噻唑-2-基]-2，5-二苯基四唑翁溴化物；噻唑藍，Sigma M 565，Sigma，St.Louis MO)。將細胞在37℃、潮濕氣氛中培養(yǎng)4小時。該步驟使活細胞的線粒體脫氫酶將黃色四唑翁鹽MTT轉化為紫色甲結晶。除去上清液，將形成的甲結晶溶于DMSO。對所得的有色溶液使用掃描多池分光光度計測定570nm處的吸收度。與增殖有關的數(shù)據(jù)以處理孔的活細胞除以對照孔的活細胞的百分數(shù)表示。每個點表示三次獨立試驗的平均值，每個試驗測定六次。
對于其它細胞系(HCT15，LOVO，A549，A172，U373，U87)，在用藥物處理前24小時，將1000-2000個細胞接種到培養(yǎng)板的微孔中。將它們與終濃度為1.10-10-1.10-6M的各種待試驗化合物或其相應的溶劑(對照物)一起培養(yǎng)72小時。
結果以增殖百分數(shù)表示，該百分數(shù)由用藥物處理的細胞的旋光密度除以對照細胞(用DMSO處理的細胞)的OD計算得到。如表II所示，待試驗化合物對細胞增殖的抑制作用與劑量有關。
(P56-表II)
表II
1.體內發(fā)育試驗使用小鼠的成淋巴細胞白血病L1210細胞系在體內試驗本發(fā)明的化合物。通過對小鼠(DBA/2 Lafacedu，Lyon，法國)系列腹膜內注射維持腫瘤細胞。在試驗中，對雌性B6D2F1小鼠腹膜內注射106個細胞/0.2ml。在與白血病細胞培養(yǎng)后第1天開始處理并持續(xù)到第4或第8天。腹膜內或靜脈注射不同濃度的待試驗化合物，將注射體積調整到0.1ml/10g體重。未處理的小鼠在注射成淋巴細胞白血病L1210細胞后的第9-14天死亡，在長達60天的時間內觀察處理過小鼠的存活。
該試驗用5-乙基-4，5-二氫-5-羥基-1H-庚英[3’，4’6.7]-中氮茚并[1，2-b]喹啉-3，15(4H，13H)-二酮化合物進行。該化合物以0.32和2.5mg/kg的濃度腹膜內給藥4天和以0.32和5.0mg/kg的濃度靜脈給藥8天可將小鼠的壽命延長50％。
權利要求
1.具有下式M結構的吡啶酮化合物， 其中R1是低級烷基，低級鏈烯基，低級炔基，低級鹵代烷基，低級烷氧基低級烷基或低級烷硫基低級烷基；R18和R19獨立地表示H，鹵素，低級烷基，低級烷氧基或羥基；并且R20表示H或鹵素。
2.權利要求2的化合物，其特征在于R1表示乙基并且R18、R19和R20表示H。
3.權利要求1的化合物的制備方法，其特征在于-下式所示吡啶的羰基 其中R1和R20如權利要求1所定義并且R2表示鹵原子或低級烷氧基，用醛縮醇官能團保護，得到通式F化合物 其中Z和Z’獨立地表示低級烷基或一起形成含2-4個碳原子的飽和烴鏈；-向通式F化合物中引入羥甲基官能團，得到通式G化合物 其中R1、R20、R22、Z和Z’具有上述含義，-隨后保護通式G化合物的醇官能團，得到通式H化合物 其中R1、R20、R22、Z和Z’具有上述含義且R23表示醇官能團保護基；-通式H的醛縮醇化合物脫保護，得到通式I’化合物 其中R1、R20、R22和R23具有上述含義，-用官能烷基化試劑處理式I’化合物，得到通式J的β-羥基酯 其中R1、R20、R22和R23具有上述含義，R18和R19如權利要求1所定義且R17表示OR6，其中R6表示低級烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基低級烷基、低級鏈烯基、低級烷氧基低級烷基、或者芳基或芳基低級烷基；-除去通式J化合物的保護基R23，得到通式K化合物 其中R1、R18、R19、R20和R22具有上述含義且R17表示OR6，其中R6表示低級烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基低級烷基、低級鏈烯基、低級烷氧基低級烷基、或者芳基或芳基低級烷基；-通式K化合物環(huán)合形成通式L化合物 其中其中R1、R18、R19、R20和R22具有上述含義并且最后-將L化合物的基團R22轉化為羰基，得到通式M化合物 其中R1、R18、R19和R20具有上述含義。
全文摘要
本發(fā)明公開了具有下式M結構的新型吡啶酮化合物，及其制備方法，所述吡啶酮化合物可以用于制備成外消旋形式、對映體形式或其組合形式的式(I)化合物或其水解產(chǎn)物(II)的喜樹堿類似物。
文檔編號C07D491/22GK1432571SQ0215045
公開日2003年7月30日 申請日期1996年6月21日 優(yōu)先權日1995年6月21日
發(fā)明者D·比格, O·拉弗吉尼, F·普拉羅達斯, J·波邁爾, G·尤里巴里 申請人:科學研究與運用咨詢公司