專利名稱：丙－谷二肽合成方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種含氨基酸的二肽合成方法，尤其是一種丙—谷二肽合成方法。
谷氨酰胺是人體中含量最多的氨基酸，谷氨酰胺在肌肉蛋白質(zhì)和血漿蛋白質(zhì)中含量約分別為75％和26％。
谷氨酰胺具有重要的生理作用。谷氨酰胺是生物合成核酸的必需前體物質(zhì)，是蛋白質(zhì)合成與分解的調(diào)節(jié)物，是氨基氮從外周組織轉(zhuǎn)動至內(nèi)臟的攜帶者，是腎臟排泄氨的重要基質(zhì)。谷氨酰胺是腸粘膜上皮細胞、腎小管細胞、巨噬細胞和成纖維細胞的重要能量物質(zhì)，在維持腸道機能，促進免疫功能，維持體內(nèi)堿平衡及提高機體對應激的適應等方面都發(fā)揮著極其重要的作用。
在臨床上的嚴重感染、復合性骨折、創(chuàng)傷、大手術、大面積燒傷與惡性腫瘤后期等應急和高分解代謝狀態(tài)下，谷氨酰胺的需要大大超過了機體合成谷氨酰胺的能力，使體內(nèi)谷氨酰胺的含量降低，從而使核酸、蛋白質(zhì)合成減少。若采用傳統(tǒng)的全靜脈營養(yǎng)液(TPN)，則可能導致腸粘膜萎縮，腸粘膜通透性升高和細菌易位，甚至導致敗血癥及多器官功能衰竭。大量的實驗表明，補充GLN的TPN對許多疾病的預防和恢復有顯著作用，若在TPN中加入一定量的谷氨酰胺，以提高血液和肌肉等組織中谷氨酰胺濃度，則對維持或恢復腸粘膜功能具有重要作用。給嚴重感染的病人輸入補充GLN的TPN，明顯保持正氮平衡和促進細胞GLN合成酶的表達，減輕肌細胞內(nèi)GLN濃度和核糖體濃度的降低。
近年來，因為谷氨酰胺重要的生理功能和藥理作用，使其在腸外營養(yǎng)中的應用受到人們普遍的重視。如上所述，在各種創(chuàng)傷(包括意外傷、手術傷、及輻射傷)、感染等應激條件下，血中和細胞中的谷氨酰胺濃度降低，而補給現(xiàn)有的氨基酸制劑(不含GLN)，不能使其逆轉(zhuǎn)；一些重要的細胞功能如蛋白質(zhì)的合成、細胞的吞噬作用和淋巴細胞的增殖，都必須依賴充足的GLN。但是由于它的溶解度低，而且溶液中不穩(wěn)定，在加熱滅菌的條件下，生成有毒的焦谷氨酸和氨，所以商品氨基酸制劑中部不含有GLN。目前GLN的應用主要有以下途徑(1)現(xiàn)配現(xiàn)用，把GLN晶體加到氨基酸溶液中，然后過濾除菌，在8h內(nèi)輸完。這一過程必須嚴格無菌操作且工作繁瑣，費力，適用范圍受到限制；(2)合成GLN衍生物，如乙酰谷酰胺。它容易合成，加熱穩(wěn)定，在體內(nèi)可形成GLN，便是它的利用率較低，攝入量的40％被從尿中排泄掉；(3)應用GLN的二肽。
目前，用于試驗研究的二肽主要有兩種甘氨酰谷氨酰胺(L-glynyl-L-glutamine，Gly-Gln)和丙—谷二肽(Ala-Gln)。動物和人體實驗證明，在體內(nèi)，這兩種二肽很快被分為其組成氨基酸，半衰期很短，血液中只能檢測到少量的二肽，僅有微量的二肽從尿中排出。說明GLN二肽可有效地利用而且不會在血積聚，避免了二肽可能產(chǎn)生的藥理及生理性損害。有實驗證明，健康人體長期靜脈注射滴注Ala-Gln二肽沒有任何副作用及不良反應，不影響正常的腎功能。用化學方法合成的Ala-Gln經(jīng)純化其溶解度是GLN單體的20倍，在儲存和加熱滅菌中也很穩(wěn)定，而進入體內(nèi)后即迅速分解成GLN而發(fā)揮作用，使GLN在TPN中的應用更加方便可行。
丙—谷二肽合成方法有如下4種1、首先將GLN(谷氨酰胺)的氨基進行保護，形成Cbz-Gln；第二步，將Cbz-Gln的酰氨基保護形成Cbz-Gln(OC13H9)；第三步，將Cbz-Gln(OC13H9)的羧基保護形成Cbz-Gln(OC13H9)OMe；第四步，通氫氣形成Gln(OC13H9)OMe；第五步，加入CBZ-ALA；第六步，對CBZ-ALA活化；第七步，CBZ-ALA和Gln(OC13H9)OMe結合成肽；第八步，皂化脫甲酯；第九步，酸化脫去全部保護，形成丙—谷二肽。(文獻Yasutsugu Shimomishi，Studies onthe Synthesis of Peptides Containing Glutamine as the C-Terminal.Y.Bull.Chem.Soc.Jpn.1962，35，1966)該方法反應步驟太多，而且試劑昂貴，無實際應用價值。
2、利用Z-Ala與HOSu在DCC作用下，于20～25℃反應5h，過濾去二環(huán)己基脲，然后與未保護的Gln于碳酸氫鈉的水溶液中進行合成。產(chǎn)物在甲醇中還原氫化，脫去保護基，即可得到丙—谷二肽。(文獻Katoh，T.Kurauchi，M.Eur.Pat311，057，12Apr.1989)該方法的試劑昂貴，而且DCC反應后的產(chǎn)物難以除去，而且生產(chǎn)過程復雜。
3、利用COCl2與Ala反應生成混酐，然后與Gln在水中反應，pH保持在10.2。最后在酸溶液中脫去保護，即可得到丙—谷二肽。(文獻Frerst，P.Pfaendetr，P.Ger.Offen.DE3206，784.OlSep1983)此方法的反應步驟簡單，但光氣為劇毒氣體，而且該反應難以反應完全，對人體危害較大。
4、利用手性試劑氯代丙酸通過SOCl2活化，形成酰氯，然后與Gln在NaOH的水溶液中反應，pH保持在10。產(chǎn)物為氯代丙酰谷酰胺，再與液氨在一定的壓力下反應，即可得到丙—谷二肽。(文獻Takahiro Sano，Toru Sugaya，Process Research ang Development ofl-Alanyl-l-glutamine，a Component of Parenteral Nutrition.Oganic Process Researchand Development.2000，4，147-152)該反應的原料為手性試劑，極為昂貴，在合成酰氯步驟中，溫度較高，副反應較多。該合成用于生產(chǎn)，成本太高。
本發(fā)明的目的在于提供一種原料便宜、合成工藝簡單、設備簡單、成本低、產(chǎn)率高、有利于環(huán)保的丙—谷二肽合成方法。
丙—谷二肽合成方法的步驟1)N端保護的氨基酸(I)10mmol，與三苯基磷(Ph3P)10～30mmol，最佳15～20mmol，六氯乙烷(C2Cl6)10～30mmol，最佳15～20mmol，在有機溶劑(II)中反應20min～3h，最佳1.5～2h，反應溫度-5～30℃，最佳0～10℃，形成活潑酯；2)活潑酯與谷氨酰胺10～30mmol，最佳為15～20mmol，在有機溶劑(III)和無機堿水溶液(IV)的混合溶液中進行(III和IV的體積比值為0～4，最佳為0.5～2，)反應溫度為-5～30℃，最佳為5～10℃，pH控制在8.5～13，最佳為9.5～10.5；3)用無機酸(V)酸化至pH≤3.0，最佳為2.0～3.0，然后脫去N端保護基團(VI)，可得到丙—谷二肽，產(chǎn)率為30％～65％。
其中(I)，N端保護的氨基酸主要有N-(O，O-二異丙基)磷酰氨酸(DIPP-l-Ala)，N-(O，O-二乙基)磷酰丙氨酸(DEP-l-Ala)，N-(O，O-二甲基)磷酰丙氨酸(DMP-l-Ala)，芐氧羰基丙氨酸(Z-l-Ala)，(對甲氧羰基)芐氧羰基丙氨酸(MZ-l-Ala)，叔丁氧羰基丙氨酸(Boc-l-Ala)，2-(二連苯基)異丙氧羰基丙氨酸(Bpoc-l-Ala)，等；(II)有機溶劑主要有二氯甲烷，甲苯，四氫呋喃，乙腈，1，2-二氯乙烷，等；(III)有機溶劑主要有乙醇，乙酸乙酯，石油醚，環(huán)己烷，甲苯，二氯甲烷，等；(IV)無機堿主要有氫氧化鈉，氫氧化鉀，碳酸氫鈉，碳酸氫鉀，碳酸鈉，碳酸鉀，等；(V)無機酸主要有鹽酸，硫酸，硝酸，磷酸，等；(VI)脫保護基的方法主要有三氟乙酸，氯化氫/冰乙酸，溴化氫/冰乙酸，甲基磺酸，氫化還原，氯化氫/1、4二氧六環(huán)，溴化氫/1，4二氧六環(huán)，等。
與已有的丙—谷二肽合成方法相比，本發(fā)明的主要優(yōu)點是1)原料極為便宜，三苯基磷100g只需50元，六氯乙烷100g只需10元，而傳統(tǒng)方法中的HOBt每100g需1500元，DCC100g需400元，HOSU每100g需700元；R-2-氯代丙酸每1g需500元；2)合成工藝簡單，中間產(chǎn)物(活潑酯)不需要分離和提純處理，直接進行下一步反應，反應結束后，副產(chǎn)物(三苯基氧磷)在有機相，產(chǎn)物在水相，產(chǎn)物容易分離提純；3)第一步合成中省去了有機堿，通常有機堿易揮發(fā)，毒性大，很多有機堿容易引起二肽的消旋，而且一些有機堿難以除去，本方法在第一步合成中在酸性介質(zhì)中反應，形成活潑酯，而一般這類化合物的合成都需加入三乙胺等有機堿；4)在第二步反應中，采用了水相法，省去了谷氨酰胺氨基酸接保護基團保護和脫除保護基團，簡化了合成路線，節(jié)約了成本，縮短了時間，提高了產(chǎn)率，節(jié)省了溶劑和試劑，對環(huán)境友好；5)由于第二步中采用了水相法，用無機堿代替了有機堿，減少了毒性，產(chǎn)物二肽不容易消旋，而且產(chǎn)物可直接分液得到，簡化了生產(chǎn)設備，降低了生產(chǎn)成本，有利于環(huán)保；6)反應結束后，生成兩個產(chǎn)物，其一為所需的丙—谷二肽，另一個為副產(chǎn)物(三苯基氧磷)，三苯基氧磷為不揮發(fā)的固體，容易回收，可以作為一種試劑銷售，既不污染環(huán)境，又可以創(chuàng)造利潤；7)整個合成過程中所采用的試劑毒性均較小。
總之，本方法合成路線簡單，原料便宜易得，有利于環(huán)保，生產(chǎn)工藝簡單，成本低，有著很好的應用價值。
以下結合實施例對本發(fā)明作進一步的說明。
實施例1N-(O，O-二異丙基)磷酰丙氨酸，三苯基磷和六氯乙烷各10mmol分別加入圓底燒瓶，再加入20mL四氫呋喃，于30℃反應2h后，滴加到含有15mmol谷氨酰胺，水20mL，乙醇10mL的混合液中，反應中用氫氧化鈉調(diào)pH為10.5，反應溫度為-5℃，滴加后反應2h。然后用濃鹽酸酸化至pH為3.0，水相濃縮后用飽和氯化氫/冰乙酸室溫反應5h，反應結束后加入乙醚50mL，析出固體，將固體用乙醇—水重結晶得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率60％。
實施例2三苯基磷15mmol用20mL二氯甲烷溶解，滴加到N-(O，O-二異丙基)磷酰丙氨酸10mmol，和六氯乙烷20mmol，10mL二氯甲烷的混合體系內(nèi)，于10℃反應3h后，滴加到含有10mmol谷氨酰胺，水20mL，乙酸乙酯20mL的混合液中，反應中用氫氧化鈉10mmol，然后用碳酸氫鈉調(diào)pH為9.0，反應溫度為10℃，滴加后反應1h。然后用稀硫酸酸化至pH為2.0，水相濃縮后用20％溴化氫/冰乙酸室溫反應5h，反應結束后加入乙醚50mL，析出固體，將固體用甲醇—水重結晶得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率30％。
實施例3六氯乙烷15mmol用10mL1，2二氯乙烷，滴加到N-(O，O-二異丙基)磷酰丙氨酸10mmol，和三苯基磷15mmol，10mL1，2二氯乙烷的混合體系內(nèi)，于20℃反應。1.5h后，滴加到含有20mmol谷氨酰胺，水20mL中，反應中用氫氧化鉀調(diào)pH為13，反應溫度為10℃，滴加后反應2h。然后用稀硝酸酸化至pH為1.5，水相濃縮后用三氟乙酸室溫反應10h，反應結束后加入乙醚50mL，析出固體，將固體用異丙醇—水重結晶得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率52％。
實施例4N-(O，O-二乙基)磷酰丙氨酸10mmol，三苯基磷10mmol和六氯乙烷15mmol分別加入圓底燒瓶，再加入20mL乙腈，于15℃反應2.5h后，滴加到含有30mmol谷氨酰胺，水20mL，甲苯30mL的混合液中，反應中用碳酸鈉調(diào)pH為8.5，反應溫度為30℃，滴加后反應1h。然后用稀硫酸酸化至pH為2，水相濃縮后用飽和溴化氫/1，4二氧六環(huán)室溫反應5h，反應結束后加入乙醚50mL，析出固體，將固體用四氫呋喃—水重結晶得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率50％。
實施例5三苯基磷20mmol用10mL甲氫呋喃溶解，滴加到N-(O，O-二乙基)磷酰丙氨酸10mmol，和六氯乙烷30mmol，10mL的四氫呋喃混合體系內(nèi)，于-5℃反應2h后，滴加到含有10mmol谷胺酰胺，水20mL，乙醇20mL的混合液中，反應中用氫氧化鈉10mmol，然后用碳酸氫鈉設pH為9.5，反應溫度為-5℃，滴加后反應2h。然后用濃鹽酸酸化至pH為3，水相濃縮后用飽和氯化氫/冰乙酸室溫反應5h，反應結束后加入乙醚50mL，析出固體，將固體用乙醇—水重結晶得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率35％。
實施例6六氯乙烷30mmol用20mL二氯甲烷溶解，滴加到N-(O，O-二乙基)磷酰丙氨酸10mmol，和三苯基磷30mmol，10mL二氯甲烷的混合體系內(nèi)，于0℃反應40min后，滴加到含有30mmol谷氨酰胺，水20mL，環(huán)己烷10mL的混合液中，反應中用氫氧化鉀調(diào)pH為13，反應溫度為20℃，滴加后反應30min。然后用稀硝酸酸化至pH為1.5，水相濃縮后用三氟乙酸室溫反應10h，反應結束后加入乙醚50mL，析出固體，將固體用1，4二氧六環(huán)—水重結晶得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率60％。
實施例7N-(O，O-二甲基)磷酰丙氨酸10mmol，三苯基磷20mmol和六氯乙烷30mmol分別加入圓底燒瓶，再加入20mL甲苯，于5℃反應1h后，滴加到含有10mmol谷氨酰胺，水20mL，乙醇5mL的混合液中，反應中用碳酸鈉調(diào)pH為9.5，反應溫度為5℃，滴加后反應10min。然后用磷酸化至pH為1.0，水相濃縮后用三氟乙酸室溫反應15h，反應結束后加入乙醚50mL，析出固體，將固體用乙醇—水重結晶得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率40％。
實施例8三苯基磷30mmol用30mL四氫呋喃溶解，滴加到N-(O，O-二甲基)磷酰丙氨酸10mmol，和六氯乙烷30mmol，10mL四氫呋喃的混合體系內(nèi)，于10℃反應20min后，滴加到含有30mmol谷氨酰胺，水20mL，環(huán)己烷20mL的混合液中，反應中用氫氧化鈉調(diào)pH為12，反應溫度為25℃，滴加后反應30min。然后用稀硝酸酸化至pH為1.5，水相濃縮后用20％溴化氫/冰乙酸室溫反應5h，反應結束后加入乙醚50mL，析出固體，將固體用甲醇—水得結晶得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率50％。
實施例9六氯乙烷20mmol用10mL二氯甲烷溶解，滴加到N-(O，O-二甲基)磷酰丙氨酸10mmol，和三苯基磷20mmol，20mL甲苯的混合體系內(nèi)，于0℃反應3h后，滴加到含有25mmol谷胺酰胺，水20mL中，石油醚60mL，反應中用氫氧化鉀20mmol，然后用碳酸鉀調(diào)pH為10，反應溫度為0℃，滴加后反應1.5h。然后用濃鹽酸酸化至pH為2.5，水相濃縮后用甲磺酸室溫反應20h，反應結束后加入乙醚50mL，析出固體，將固體用異丙醇—水重結晶得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率45％。
實施例10叔丁氧羰基丙氨酸(Boc-Ala)10mmol，三苯基磷15mmol和六氯乙烷20mmol分別加入圓底燒瓶，再加入20mL1，2二氯乙烷于10℃反應20min后，滴加到含有30mmol谷氨酰胺，水20mL，環(huán)己烷20mL的混合液中，反應中用氫氧化鉀調(diào)pH為11，反應溫度為20℃，滴加后反應30min。然后用稀硝酸酸化至pH為1.5，水相濃縮后用三氟乙酸室溫反應15h，反應結束后加入乙醚50mL，析出固體，將固體用四氫呋喃—水重結晶得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率40％。
實施例11三苯基磷10mmol用10mL甲苯溶解，滴加到10mmol叔丁氧羰基丙氨酸(Boc-A1a)，和六氯乙烷10mmol，20mL甲苯的混合體系內(nèi)，于5℃反應2h后，滴加到含有15mmol谷氨酰胺，水20mL，石油醚60mL的混合液中，反應中用氫氧化鈉調(diào)pH為12，反應溫度為10℃，滴加后反應1.5h。然后用稀硫酸酸化至pH為1.5，水相濃縮后用氯化氫/14氧六環(huán)室溫反應5h。反應結束后加入乙醚50mL，析出固體，將固體用1，4二氧六環(huán)—水重結晶得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率52％。
實施例12六氯乙烷20mmol用10mL四氫呋喃溶解，滴加到叔丁氧基丙氨酸(Boc-Ala)10mmol，和三苯基磷20mmol，10mL四氫呋喃的混合體系內(nèi)，于0℃反應1.5h后，滴加到含有20mmol谷氨酰胺，水20mL中，二氯甲烷15mL，反應中用氫氧化鉀20mmol，然后用碳酸鈉調(diào)pH為10，反應溫度為8℃，滴加后反應2h，然后用濃鹽酸酸化至pH為2.0，水相濃縮后甲磺酸室溫反應20h，反應結束后加入乙醚50mL，析出固體，將固體用甲醇—水重結晶得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率45％。
實施例13芐氧羰基丙氨酸(Z-Ala)10mmol，三苯基磷10mmol和六氯乙烷10mmol分別加入圓底燒瓶，再加入30mL甲苯，于0℃反應3h后，滴加到含有25mmol谷氨酰胺，水20mL的混合液中，反應中用氫氧化鈉調(diào)pH為12，反應溫度為15℃，滴加后反應1.5h。然后用稀鹽酸酸化至pH為2.5，水相濃縮后用氫氣在甲醇中室溫反應15h，得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率48％。
實施例14三苯基磷15mmol用10mL四氫呋喃溶解，滴加到10mmol芐氧羰基丙氨酸(Z-Ala)，和六氯乙烷20mmol，10mL四氫呋喃的混合體系內(nèi)，于0℃反應1.5h后，滴加到含有18mmol谷氨酰胺，水20mL，二氯甲烷40mL的混合液中，反應中用氫氧化鉀調(diào)pH為13，反應溫度為0℃，滴加后反應2h。然后用稀硫酸酸化至pH為2.0，水相濃縮后氫氣在甲醇室溫反應15h，得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率65％。
實施例15六氯乙烷30mmol用10mL乙腈溶解，滴加到芐氧羰基丙氨酸(Z-Ala)10mmol，和三苯基磷20mmol，10mL乙腈的混合體系內(nèi)，于5℃反應1.0h后，滴加到含有10mmol谷按酰胺，水20mL中，反應中用氫氧化鈉20mmol，然后用碳酸氫鉀調(diào)pH為10，反應溫度為5℃，滴加后反應2h。然后用濃鹽酸酸化至pH為3.0，水相濃縮后用三氟乙酸室溫反應40h，反應結束后加入乙醚50mL，析出固體，將固體用1，4二氧六環(huán)—水重結晶得產(chǎn)物L-Ala-L-Gln。產(chǎn)率45％。
實施例16六氯乙烷30mmol用10mL乙腈溶解，滴加到芐氧羰基丙氨酸(Z-Ala)10mmol，和三苯基磷20mmol，10mL乙腈的混合體系內(nèi)，于10℃反應2h后，滴加到含有15mmol纈氨酸，水20mL中，用碳酸氫鈉調(diào)pH為9.5，反應溫度為10℃，滴加后反應20min。然后用鹽酸調(diào)至pH為2.5，濃縮后用氫氣脫保護基，得丙—纈二肽，產(chǎn)率60％。
實施例17三苯基磷10mmol，N-(O，O-二乙基)磷酰苯丙氨酸10mmol，六氯乙烷13mmol，加入20mL四氫呋喃，于10℃反應1h后，滴加到15mmol亮氨酸中，反應用氫氧化鈉調(diào)pH為11，反應溫度為5℃，滴加后，反應1h，然后用稀硫酸酸化至pH為2.0，濃縮后，用氯化氫/1，4-二氧六環(huán)脫保護，析出固體，將固體用乙醇—水重結晶，得產(chǎn)物苯—亮二肽，產(chǎn)率50％。
權利要求
1.丙—谷二肽合成方法，其特征在于1)N端保護的氨基酸10mmol，與三苯基磷10～30mmol，六氯乙烷10～30mmol，在有機溶劑中反應20min～3h，反應溫度-5～30℃，形成活潑酯；2)活潑酯與谷氨酰胺10～30mmol，在有機溶劑和無機堿水溶液的混合溶液中進行，有機溶劑和無機堿水溶液的體積比值為0～4，反應溫度為-5～30℃，pH控制在8.5～13；3)用無機酸酸化至pH≤3.0，然后脫去N端保護基團，可得到丙—谷二肽。
2.如權利要求1所述的丙—谷二肽合成方法，其特征在于1)N端保護的氨基酸10mmol，與三苯基磷15～20mmol，六氯乙烷15～20mmol，在有機溶劑中反應1.5～2h，反應溫度0～10℃，形成活潑酯；2)活潑酯與谷氨酰胺15～20mmol，在有機溶劑和無機堿水溶液的混合溶液中進行，有機溶劑和無機堿水溶液的體積比值為0.5～2，反應溫度為5～10℃，pH控制在9.5～10.5；3)用無機酸酸化至pH為2.0～3.0，然后脫去N端保護基團，可得到丙—谷二肽。
3.如權利要求1所述的丙—谷二肽合成方法，其特征在于N端保護的氨基酸有N-(O，O-二異丙基)磷酰氨酸(DIPP-l-Ala)，N-(O，O-二乙基)磷酰丙氨酸(DEP-l-Ala)，N-(O，O-二甲基)磷酰丙氨酸(DMP-l-Ala)，芐氧羰基丙氨酸(Z-l-Ala)，(對甲氧羰基)芐氧羰基丙氨酸(MZ-l-Ala)，叔丁氧羰基丙氨酸(Boc-l-Ala)，2-(二連苯基)異丙氧羰基丙氨酸(Bpoc-l-Ala)。
4.如權利要求1所述的丙—谷二肽合成方法，其特征在于有機溶劑有二氯甲烷，甲苯，四氫呋喃，乙腈，1，2-二氯乙烷。
5.如權利要求1所述的丙—谷二肽合成方法，其特征在于有機溶劑有乙醇，乙酸乙酯，石油醚，環(huán)己烷，甲苯，二氯甲烷。
6.如權利要求1所述的丙—谷二肽合成方法，其特征在于無機堿有氫氧化鈉，氫氧化鉀，碳酸氫鈉，碳酸氫鉀，碳酸鈉，碳酸鉀。
7.如權利要求1所述的丙—谷二肽合成方法，其特征在于無機酸有鹽酸，硫酸，硝酸，磷酸。
8.如權利要求1所述的丙—谷二肽合成方法，其特征在于脫保護基的有三氟乙酸，氯化氫/冰乙酸，溴化氫/冰乙酸，甲基磺酸，氫化還原，氯化氫/1、4二氧六環(huán)，溴化氫/1，4二氧六環(huán)。
全文摘要
涉及一種丙－谷二肽合成方法，N端保護的氨基酸與三苯基磷、六氯乙烷在有機溶劑中反應形成活潑酯；活潑酯與谷氨酰胺在有機溶劑和無機堿水溶液的混合溶液中進行，用無機酸酸化，然后脫去N端保護基團。其原料極為便宜，合成工藝簡單，中間產(chǎn)物不需要分離和提純處理，產(chǎn)物容易分離提純；省去了有機堿、谷氨酰胺氨基酸接保護基團保護和脫除保護基團，簡化了合成路線，節(jié)約了成本，縮短了時間，提高了產(chǎn)率，節(jié)省了溶劑和試劑，對環(huán)境友好；而且產(chǎn)物可直接分液得到，簡化了生產(chǎn)設備，降低成本，有利環(huán)保；反應結束生成兩個產(chǎn)物，丙－谷二肽和副產(chǎn)物三苯基氧磷，后者為不揮發(fā)的固體，容易回收，整個合成過程中所采用的試劑毒性均較小。
文檔編號C07K5/00GK1392156SQ02123369
公開日2003年1月22日 申請日期2002年6月17日 優(yōu)先權日2002年6月17日
發(fā)明者趙玉芬, 唐果, 周寧 申請人:廈門大學