專利名稱：作為飼料添加劑的二肽的制作方法
作為飼料添加劑的二肽介紹本發(fā)明涉及新的甲硫氨酸結(jié)合的非天然和天然二肽，其為諸如賴氨酸、蘇氨酸和色氨酸的必需、限制性氨基酸以及含硫氨基酸半胱氨酸和胱氨酸的二肽，以及它們的合成和用作飼料添加劑用于飼養(yǎng)有益動物，如雞、豬、反芻動物，但是還特別是水產(chǎn)養(yǎng)殖中的魚和甲殼動物。
現(xiàn)有技術(shù)必需氨基酸(EAA)甲硫氨酸、賴氨酸、蘇氨酸、色氨酸、組氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸和精氨酸以及兩種含硫氨基酸半胱氨酸和胱氨酸是動物飼料的非常重要的成分，并且在諸如雞、豬和反芻動物的有益動物的經(jīng)濟飼養(yǎng)中起著重要作用。特別地，EAA 的優(yōu)化配置和充足供應是決定性的。因為來自諸如大豆、玉米和小麥的天然蛋白來源的飼料一般缺少某些EAA，所以用合成的EAA，例如DL-甲硫氨酸、L-賴氨酸、L-蘇氨酸或L-色氨酸進行特別補充一方面允許動物的更快生長或來自高產(chǎn)奶牛的更高牛奶產(chǎn)量，另一方面還更高效地利用總飼料。這提供了可觀的經(jīng)濟優(yōu)勢。飼料添加劑市場具有可觀的工業(yè)和經(jīng)濟重要性。此外，它們是強勁增長的市場，歸因于諸如中國和印度的國家增加的重要性。對于許多動物物種，L-甲硫氨酸((S)-2_氨基-4-甲硫基丁酸)代表所有 EAA的第一限制性氨基酸，并且因此在動物營養(yǎng)和作為飼料添加劑中具有最重要的作用 (Rosenberg et al.，J. Agr. Food Chem. 1957，5，694—700)。然而，在經(jīng)典化學合成中，甲硫氨酸是作為外消旋物形成的，是D-和L-甲硫氨酸的50 50混合物。然而，這種外消旋 DL-甲硫氨酸可以直接用作飼料添加劑，因為在一些動物物種中，在體內(nèi)條件下有將甲硫氨酸的非天然D-對映體轉(zhuǎn)變?yōu)樘烊籐-對映體的轉(zhuǎn)化機制。首先通過非特異性D-氧化酶將D-甲硫氨酸脫去氨基為α -酮-甲硫氨酸，然后通過L-氨基轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)化為L-甲硫氨酸(Baker,D. H. in" Amino acids in farm animal nutrition" ,D' Mello, J. P. F. (ed.), Wallingford(UK), CAB hternational，1994，37-61)。結(jié)果體內(nèi) L-甲硫氨酸的可用量增加，然后可供動物用于生長。D-甲硫氨酸至L-甲硫氨酸的酶促轉(zhuǎn)化已在雞、豬和牛中，而且特別在魚、蝦和對蝦中發(fā)現(xiàn)。例如，Sveier et al. (Aquacult. Nutr. 2001，7 (3)，169-181) 和 Kim et al. (Aquaculture 1992，101 (1-2)，95-103)顯示 D-甲硫氨酸至 L-甲硫氨酸的轉(zhuǎn)化在食肉的大西洋鮭和虹鱒中是可能的。Robinson et al. (J. Nutr. 1978，108 (12)， 1932-1936)和 Schwarz et al. (Aquaculture 1998，161，121-129)顯示對于諸如鯰魚和鯉魚的雜食魚種類是相同的。此外，F(xiàn)orster 和 Dominy(J. World Aquacult. Soc. 2006,37(4), 474-480)能夠顯示，在用物種凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)的雜食蝦的飼養(yǎng)測試中，DL-甲硫氨酸與L-甲硫氨酸是同樣有效的。2007年，全世界生產(chǎn)了超過70000噸的結(jié)晶 DL-甲硫氨酸或外消旋、液體甲硫氨酸-羥基-類似物(MHA，rac-2-羥基-4-(甲硫基)丁酸(HMB))和固體鈣-MHA，并且成功地直接用作飼料添加劑用于單胃動物，例如家禽和豬。與甲硫氨酸相比，賴氨酸、蘇氨酸和色氨酸在各自情況下僅L-對映體可以用作飼料添加劑，因為這三種必需和限制性氨基酸分別的D-對映體不可以通過身體在生理條件下轉(zhuǎn)化為相應的L-對映體。因此，2007年例如對于豬的第一限制性氨基酸L-賴氨酸單獨的世界市場為超過1，000，000噸。對于另外兩種限制性必需氨基酸L-蘇氨酸和L-色氨酸， 2007年世界市場分別為超過100，OOOt和剛剛低于3000t。在單胃動物的情況下，例如家禽和豬，通常DL-甲硫氨酸、MHA,以及L-賴氨酸、 L-蘇氨酸和L-色氨酸直接用作飼料添加劑。相比之下，用諸如甲硫氨酸、賴氨酸、蘇氨酸的EAA或者還有MHA補充飼料對于反芻動物是無效的，因為大部分被反芻動物瘤胃中的微生物分解。由于這種降解，僅部分補充的EAA進入動物的小腸(吸收入血液一般在這里發(fā)生)。在EAA中，主要是甲硫氨酸在反芻動物中起著決定性作用，因為高產(chǎn)奶量僅由最佳供應保證。為了甲硫氨酸可供反芻動物高效利用，必需使用瘤胃抗性的保護形式。有幾種可能的方式將這些特性賦予DL-甲硫氨酸或rac-MHA。一種可能性是通過運用合適的保護層或者通過將甲硫氨酸分布在保護基質(zhì)中來獲得高瘤胃抗性。結(jié)果甲硫氨酸可以通過瘤胃， 幾乎沒有損失。隨后，例如在皺胃中通過酸水解去除保護層，然后釋放的甲硫氨酸可以在反芻動物的小腸中被吸收?？缮藤彽漠a(chǎn)品為例如來自Evonik Degussa公司的Mepron 和來自Adisseo公司的Smartamine 。甲硫氨酸的生產(chǎn)和/或包被一般是技術(shù)復雜和費力的過程，并且因此是昂貴的。此外，成品顆粒的表面包被可以很容易地被飼料加工期間的機械應力和磨損破壞，這可以導致保護的減少甚至完全喪失。因此也不可能將保護的甲硫氨酸顆粒加工為更大的混合飼料顆粒，同樣因為保護層會被機械加載破碎。這限制了這樣的產(chǎn)品的用途。增加瘤胃穩(wěn)定性的另一個可能性是甲硫氨酸和MHA的化學衍生。在這種情況下， 用合適的保護基衍生化分子的官能團。例如這可以通過用羧酸和醇酯化的功能來實現(xiàn)。結(jié)果，瘤胃中通過微生物的降解可以減少。具有化學保護的可商購的產(chǎn)品為例如MHA的外消旋異丙酯(HMBi)Metasmart 。W000/28835公開了反芻動物中HMBi至少50 %的生物利用率。甲硫氨酸或MHA的化學衍生常具有生物利用率較差和活性物質(zhì)含量相對較低的缺點。除了在反芻動物中諸如甲硫氨酸、賴氨酸或蘇氨酸的補充EAA的瘤胃降解問題， 在魚和甲殼動物中用EAA補充飼料也可以有各種問題。由于在高度工業(yè)化的水產(chǎn)養(yǎng)殖中魚和甲殼動物飼養(yǎng)的快速經(jīng)濟發(fā)展，必需和限制性氨基酸的優(yōu)化、經(jīng)濟和高效補充方式在這個特定領域已變得越來越重要(Food and Agriculture Organization of the United Nations (FAO) Fisheries Department" State of World Aquaculture 2006" , 2006,Rome. International Food Policy Research Institute (IFPRI) " Fish 2020 :Supply and Demand in Changing Markets"，2003，Washington，D. C.)。然而，與雞和豬相比，當使用結(jié)晶EAA作為飼料添加劑用于某些種類的魚和甲殼動物時，可能出現(xiàn)各種問題。因此，Rumsey 和Ketola(J. Fish. Res. Bd. Can. 1975，32，422-426)報道了使用大豆粉聯(lián)合單獨補充的結(jié)晶氨基酸在虹鱒的情況下不導致生長的任何增加。Murai et al. (Bull. Japan. Soc. Sci. Fish. 1984，50 (11)，1957)能夠顯示具有高比例的補充的、結(jié)晶氨基酸的魚飼料的日常飼養(yǎng)在鯉魚中具有超過40 %的游離氨基酸通過腮和腎排泄的結(jié)果。由于食物攝入不久之后補充的氨基酸的快速吸收，在魚的血漿中氨基酸的濃度有非?？焖俚纳仙?快速響應)。然而， 在這個時候，來自諸如大豆粉的天然蛋白來源的其他氨基酸尚未在血漿中，這可以導致所有重要氨基酸的同時可用性的不同步。結(jié)果部分高度濃縮的氨基酸被快速地排泄或者迅速地在體內(nèi)代謝并且例如純粹作為能源利用。因此，在鯉魚中當用結(jié)晶氨基酸作為飼料添加劑時，生長即使有任何增加也是很少的(Aoe et al.，Bull. Japa. Soc. Sci. Fish. 1970，36，407-41 。在甲殼動物的情況下，補充的結(jié)晶EAA還可以導致其他問題。因為某些甲殼動物緩慢的攝食行為，例如物種凡納濱對蝦，飼料保持在水下的長時間導致補充的水溶性EAA 的浸出，這引起水的富營養(yǎng)化，而不是動物生長的增加Alam et al.，Aquaculture 2005， M8，13-16)。因此，對于某些物種和應用，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中對魚和甲殼動物的有效供應需要 EAA的特別的產(chǎn)物形式，例如適當化學或物理保護的形式。目的是，首先該產(chǎn)物在水環(huán)境中飼養(yǎng)期間應該保持足夠穩(wěn)定并且不從飼料浸出；第二，最終被動物攝入的氨基酸產(chǎn)物應該能夠在動物機體中被優(yōu)化和高效地利用。過去，在發(fā)展適合魚和甲殼動物的飼料添加劑，特別是基于必需氨基酸甲硫氨酸和賴氨酸，付出了很多努力。例如，W08906497描述了使用二肽和三肽作為飼料添加劑用于魚和甲殼動物。目的是為了促進動物的生長。然而，優(yōu)選使用來自非必需以及非限制性氨基酸的二肽和三肽，例如甘氨酸、丙氨酸和絲氨酸，其非常充足地存在于許多植物蛋白來源中。作為含有甲硫氨酸的二肽，僅描述了 DL-丙氨酰-DL-甲硫氨酸和DL-甲硫氨酰-DL-甘氨酸。然而，這表示該二肽僅有效地含有50%活性物質(zhì)(mol/mol)，從經(jīng)濟觀點這被視為是非常不利的。W002088667描述了來自MHA和諸如甲硫氨酸的氨基酸的寡聚物的對映選擇性合成和使用，其作為飼料添加劑用于魚和甲殼動物等。這應該導致更快的生長。所述寡聚物通過酶催化反應形成并且單個寡聚物的鏈長度分布很廣。因而該方法的實施和純化是非選擇性、昂貴和費力的。在US20030099689中Dabrowski et al.描述了使用合成肽作為飼料添加劑用于促進水生動物的生長。在這種情況下，該肽可以占總飼料配方重量的6-50%。 該合成肽優(yōu)選由EAA組成。然而，這些合成寡肽和多肽的對映選擇性合成是非常費力、昂貴的，并且難以放大。此外，單個氨基酸的多肽的效果是有爭議的，因為通常在生理條件下它們僅非常緩慢地轉(zhuǎn)化為游離氨基酸，或者根本不轉(zhuǎn)化。例如，Baker et al. (J. Nutr. 1982， 112,1130-1132)顯示，因為在水中完全不溶，聚L-甲硫氨酸在雞中沒有生物利用率，因為其不可以被身體吸收。除了使用EAA的新化學衍生物之外，如含有甲硫氨酸的肽和寡聚物，已研究了各種物理保護方法，例如將EAA包被或包埋在保護基質(zhì)中。例如，Alam et al. (Aquacult. Nutr. 2004，10,309-316 and Aquaculture 2005，248，13-19)顯示包被的甲硫氨酸和賴氨酸與未包被的產(chǎn)物相比，對幼日本對蝦(kuruma shrimp)生長具有非常有益的影響。雖然使用特別包被能夠防止甲硫氨酸和賴氨酸從飼料顆粒浸出，其具有一些嚴重的缺點。氨基酸的生產(chǎn)和包被一般是技術(shù)復雜和費力的過程，并且因此是昂貴的。此外，成品包被氨基酸的表面包被可以很容易地被飼料加工期間的機械應力和磨損破壞，這可以導致物理保護的減少甚至完全喪失。此外，包被或使用基質(zhì)物質(zhì)降低了氨基酸的含量，使其經(jīng)常變得不經(jīng)濟。本發(fā)明要解決的技術(shù)問題普遍問題是為動物營養(yǎng)提供基于新的含有甲硫氨酸的取代物的飼料或飼料添加劑，其中甲硫氨酸共價結(jié)合至必需和限制性氨基酸，例如L-賴氨酸、L-蘇氨酸和L-色氨酸，并且其可以用作飼料添加劑用于飼養(yǎng)有益動物，如雞、豬、反芻動物，雖然特別還有水產(chǎn)養(yǎng)殖中的魚和甲殼動物。以現(xiàn)有技術(shù)的缺點為背景，問題主要是從DL-甲硫氨酸加上諸如L-賴氨酸、L-蘇氨酸和L-色氨酸的EAA的共價結(jié)合組合提供化學保護的產(chǎn)物用于各種有益動物，如雞、豬和反芻動物，還用于生活在咸水或淡水中的許多雜食、食草和食肉物種的魚和甲殼動物。除了其作為甲硫氨酸來源的功能之外，所述產(chǎn)物還應該作為所有其他EAA的來源發(fā)揮功能。 特別地，所述產(chǎn)物應該具有“緩釋”機制，并且因此在生理條件下提供游離甲硫氨酸和EAA 的緩慢和持續(xù)釋放。此外，由甲硫氨酸和EAA組成的該產(chǎn)物的化學保護形式應該是瘤胃抗性的，并且因此應該適合所有反芻動物。為了作為飼料添加劑用于魚和甲殼動物的應用，該產(chǎn)物的形式應該在水中具有從總飼料顆粒浸出或擠出的低趨勢。另一個問題是尋找具有非常高生物利用率的結(jié)晶EAA的取代物作為飼料或作為飼料添加劑，其應該在混合飼料加工，特別是制粒和擠壓的通常條件下具有良好的操作性能和儲存能力和穩(wěn)定性。這樣，例如應該向雞、豬、反芻動物、魚和甲殼動物提供結(jié)晶EAA和其他必需氨基酸的有效來源，盡可能沒有已知產(chǎn)物的缺點或者僅具有減少程度的缺點。此外，應該開發(fā)各種新的和靈活的合成路線用于僅含有一個甲硫氨酸殘基的二肽，特別是用于L-EAA-DL-甲硫氨酸(I)和DL-甲硫氨酰-L-EAA(II)。來自商業(yè)DL-甲硫氨酸生產(chǎn)過程的典型前體和副產(chǎn)物應該用作原材料用于合成路線。發(fā)明描述用含有二肽或其鹽的飼料添加劑解決了問題，其中所述二肽的一個氨基酸殘基為 DL-甲硫氨酰殘基，并且所述二肽的另一個氨基酸殘基為L-構(gòu)型的氨基酸，其選自包含賴氨酸、蘇氨酸、色氨酸、組氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸和胱氨酸的組。優(yōu)選所述飼料添加劑含有通式DL-甲硫氨酰-L-EAA ( = D-甲硫氨酰-L-EAA和 L-甲硫氨酰-L-EAA的混合物)和/或L-EAA-DL-甲硫氨酸(=L-EAA-D-甲硫氨酸和 L-EAA-L-甲硫氨酸的混合物)的二肽，其中L-EAA為L-構(gòu)型的氨基酸，其選自包含賴氨酸、 蘇氨酸、色氨酸、組氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸和胱氨酸的組。本發(fā)明還涉及含有所述飼料添加劑的飼料混合物。含有L-EAA-DL-甲硫氨酸和/或DL-甲硫氨酰-L-EAA及其鹽的飼料添加劑適合在飼料混合物中作為飼料添加劑用于家禽、豬、反芻動物，而且特別是用于水產(chǎn)養(yǎng)殖中的魚和甲殼動物。 優(yōu)選所述飼料混合物含有0. 01-5wt. %，優(yōu)選0. 05-0. 5wt. % L-EAA-DL-甲硫氨酸和DL-甲硫氨酰-L-EAA。使用L-EAA-DL-甲硫氨酸和DL-甲硫氨酰-L-EAA已證實特別有利，因為由于低溶解度，這些二肽具有良好的浸出行為。此外，所述化合物在飼料生產(chǎn)中表現(xiàn)出良好的制粒和擠壓穩(wěn)定性。二肽 L-EAA-DL-甲硫氨酸和DL-甲硫氨酰-L-EAA在與通常組分和飼料的混合物中是穩(wěn)定的，例如谷物(例如玉米、小麥、小黑麥、大麥、小米等)、植物或動物蛋白載體(例如大豆和油菜以及來自它們深加工的產(chǎn)物，豆科植物(例如豌豆、菜豆、羽扇豆等)，魚粉等)和結(jié)合補充的必需氨基酸、蛋白質(zhì)、肽、碳水化合物、維生素、礦物質(zhì)、脂肪和油。另一個優(yōu)點是因為L-EAA-DL-甲硫氨酸和DL-甲硫氨酰-L-EAA每kg物質(zhì)的高比例活性物質(zhì)，與DL-甲硫氨酸和L-EAA相比，每摩爾L-EAA-DL-甲硫氨酸或DL-甲硫氨酰-L-EAA節(jié)約1摩爾水。
L-EAA-DL-甲硫氨酸(I)具有兩個非對映異構(gòu)體L-EAA-D-Met (LD-I)和 L-EAA-L-Met (LL-I)。相似地，二肽DL-甲硫氨酰-L-EAA (II)具有兩個不同的立體異構(gòu)體 D-Met-L-EAA(DL-II)和 L-Met-L-EAA (LL-II)。僅兩個非對映異構(gòu)體 L-EAA-L-Met (LL-I)和 L-Met-L-EAA (LL-II)是天然的，但是另外兩個 L-EAA-D-Met (LD-I)和 D-Met-L-EAA (DL-II) 是非天然的(參見方案1)。在一優(yōu)選應用中，所述飼料混合物含有蛋白質(zhì)和碳水化合物，優(yōu)選基于魚粉、大豆粉或玉米粉，并且可以補充必需氨基酸、蛋白質(zhì)、肽、維生素、礦物質(zhì)、碳水化合物、脂肪和油。特別地，對于DL-甲硫氨酰-L-EAA和L_EAA_DL_甲硫氨酸，優(yōu)選以單獨的D-甲硫氨酰-L-EAA、L-甲硫氨酰-L-EAA、L-EAA-D-甲硫氨酸或L-EAA-L-甲硫氨酸的形式，以彼此的混合物的形式，或者還以與D-甲硫氨酰-D-EAA、L-甲硫氨酰-D-EAA、D-EAA-D-甲硫氨酸或D-EAA-L-甲硫氨酸的混合物的形式存在于飼料混合物中，優(yōu)選在每種情況下額外地與DL-甲硫氨酸混合，優(yōu)選與0. 01-90wt. %，優(yōu)選0. l-50wt. %，特別優(yōu)選l-30wt. %比例的DL-甲硫氨酸混合，優(yōu)選在每種情況下額外地與諸如L-賴氨酸的L-EAA混合，優(yōu)選與 0. 01-90wt. %，優(yōu)選 0. l-50wt. %，特別優(yōu)選 l-30wt. % 比例的 L-EAA 混合。在一優(yōu)選應用中，水產(chǎn)養(yǎng)殖中的動物為淡水和海水魚和甲殼動物，其選自包含鯉魚、鱒魚、鮭魚、鯰魚、鱸魚、比目魚、鱘、金槍魚、鰻魚、鳊魚、鱈魚、蝦、磷蝦和對蝦的組， 特另1J 是鰱魚(Hypophthalmichthys molitrix)、草魚(Ctenopharyngodon idella)、錦鯉 (Cyprinus carpio)禾口纏魚(Aristichthysnobilis)、銅P魚(Carassius carassius)、厚唇魚巴 (Catla catla)、露斯塔野鯪(Labeo rohita)、太平洋和大西洋鮭(大西洋鮭(Salmo salar) 禾口銀鮭(Oncorhynchus kisutch))、虹鱒(Oncorhynchus mykiss)、美洲It魚(Ictalurus punctatus) > ^yiflltil (Clarias gariepinus) > IeLIt ( fl| 1 IeLIt (Pangasius bocourti) 禾口 Pangasius hypothalamus)、尼羅羅 __ 魚(Oreochromis niloticus)、遮巨魚(Chanos chanos)、軍曹魚(Rachycentron canadum)、南美白對蟲下(凡納濱對蟲下(Litopenaeus vannamei))、黑虎蟲下(斑節(jié)對蟲下(Penaeus monodon))禾口羅氏沼蟲下(Macrobrachium rosenbergii)。根據(jù)本發(fā)明，L-EAA-DL-甲硫氨酸(L-EAA-DL-Met) (I)和DL-甲硫氨酰-L-EAA(DL-Met-L-EAA) (II)或其堿和堿土鹽，例如微溶的鈣鹽或鋅鹽，以D-甲硫氨酰-L-EAA, L-甲硫氨酰-L-EAA、L-EAA-D-甲硫氨酸或L-EAA-L-甲硫氨酸的形式或者在各自的非對映異構(gòu)混合物中，單獨或與DL-甲硫氨酸混合，單獨或與L-EAA混合，在飼料混合物中用作添加劑，優(yōu)選用于家禽、豬、反芻動物，并且特別優(yōu)選用于魚和甲殼動物
權(quán)利要求
1.含有二肽或其鹽的飼料添加劑，其特征在于所述二肽的一個氨基酸殘基為DL-甲硫氨酰殘基，并且所述二肽的另一個氨基酸殘基為選自包含賴氨酸、蘇氨酸、色氨酸、組氨酸、 纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸和胱氨酸的組的L-構(gòu)型氨基酸。
2.權(quán)利要求1的飼料添加劑，其含有通式DL-甲硫氨酰-L-EAA和/或L-EAA-DL-甲硫氨酸的二肽，其特征在于L-EAA為選自包含賴氨酸、蘇氨酸、色氨酸、組氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸和胱氨酸的組的L-構(gòu)型氨基酸。
3.飼料混合物，其含有權(quán)利要求1或2的飼料添加劑。
4.權(quán)利要求3的飼料混合物，其含有DL-甲硫氨酰-L-EAA和/或L-EAA-DL-甲硫氨酸， 所述DL-甲硫氨酰-L-EAA和/或L-EAA-DL-甲硫氨酸的形式為單獨的D-甲硫氨酰-L-EAA、 L-甲硫氨酰-L-EAA、L-EAA-D-甲硫氨酸或L-EAA-L-甲硫氨酸，或者是彼此的混合物，還或者是與D-甲硫氨酰-D-EAA、L-甲硫氨酰-D-EAA、D-EAA-D-甲硫氨酸或D-EAA-L-甲硫氨酸的混合物，優(yōu)選在每種情況下額外地與DL-甲硫氨酸混合，優(yōu)選與0. 01-90wt. %, 優(yōu)選0. l-50wt. %，特別優(yōu)選l_30wt. %比例的DL-甲硫氨酸混合，優(yōu)選在每種情況下額外地與諸如L-賴氨酸的L-EAA混合，優(yōu)選與0. 01-90wt. %，優(yōu)選0. l-50wt. %，特別優(yōu)選 l-30wt. %比例的L-EAA混合。
5.通式DL-甲硫氨酰-DL-EAA或DL-EAA-DL-甲硫氨酸的二肽或其鹽，其特征在于EAA 為氨基酸，優(yōu)選為L-構(gòu)型，其選自包含賴氨酸、蘇氨酸、色氨酸、組氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸和胱氨酸的組。
6.產(chǎn)生式DD/LL/DL/LD-I或DD/LL/DL/LD-II的僅含有一個甲硫氨酰殘基的二肽的方法
7.權(quán)利要求6的方法，其特征在于甲硫氨酸乙內(nèi)酰脲或選自包含賴氨酸、蘇氨酸、色氨酸、組氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸、胱氨酸的組的氨基酸的乙內(nèi)酰脲被用作起始產(chǎn)物或形成為中間體。
8.權(quán)利要求6或7的方法，其特征在于含有甲硫氨酸乙內(nèi)酰脲和水的溶液與所述氨基酸在堿性條件下反應，或者含有選自包含賴氨酸、蘇氨酸、色氨酸、組氨酸、纈氨酸、亮氨酸、 異亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸、胱氨酸的組的氨基酸的乙內(nèi)酰脲和水的溶液與甲硫氨酸在堿性條件下反應。
9.權(quán)利要求6-8中任一項的方法，其特征在于將含有所述脲衍生物的溶液的pH值調(diào)整至7-14和/或在30-200°C的溫度下進行所述反應和/或在2-100巴的壓力下進行所述反應。
10.權(quán)利要求6-9中任一項的方法，其特征在于預先以化合物III、IV和V的一種或多種形成含有甲硫氨酸乙內(nèi)酰脲和水的溶液或者含有選自包含賴氨酸、蘇氨酸、色氨酸、組氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸、胱氨酸的組的氨基酸的乙內(nèi)酰脲和水的溶液。
11.權(quán)利要求6的方法，其包含以下步驟a)式III、IV或V的脲衍生物與所述氨基酸反應至哌嗪二酮VI，式為，
12.權(quán)利要求11的方法，其特征在于所述脲衍生物與所述氨基酸反應至所述哌嗪二酮的反應在20°C _200°C的溫度和/或在壓力下，優(yōu)選在2-90巴的壓力下發(fā)生。
13.權(quán)利要求11-12中任一項的方法，其特征在于所述脲衍生物與所述氨基酸反應至所述哌嗪二酮在堿存在下發(fā)生，所述堿優(yōu)選選自包含含氮堿、NH4HCO3、(NH4)2CO3^ KHCO3、 K2CO3> NH4OHAD2混合物、氨基甲酸鹽、堿和堿土堿的組。
14.權(quán)利要求11-13中任一項的方法，其特征在于至所述哌嗪二酮的反應通過脲衍生物與氨基酸反應來發(fā)生，其中脲衍生物式為，
15.權(quán)利要求11-14中任一項的方法，其特征在于所述哌嗪二酮至式I和II的二肽混合物的反應通過酸水解發(fā)生，優(yōu)選在選自包括無機酸、HCUH2CO3^ C02/H20、、磷酸、羧酸和羥基羧酸的組的酸存在下。
16.權(quán)利要求11-14中任一項的方法，其特征在于所述哌嗪二酮至式I和II的二肽混合物的反應通過堿水解發(fā)生，優(yōu)選在PH 7-14下，并且優(yōu)選利用選自包含含氮堿、NH4HC03、 (NH4)2CO3^ NH4OHAD2混合物、氨基甲酸鹽、KHC03、K2CO3、碳酸鹽、堿和堿土堿的組的堿進行。
17.權(quán)利要求6-16中任一項的方法，其特征在于所述脲衍生物III至V為D-構(gòu)型、 L-構(gòu)型或者D-和L-構(gòu)型的混合物，如果所述脲衍生物來源于甲硫氨酸(ΙΠη至Vn)，優(yōu)選為D-和L-構(gòu)型的混合物，或者其特征在于所述脲衍生物III至V為D-構(gòu)型、L-構(gòu)型或者D-和L-構(gòu)型的混合物，如果所述脲衍生物III至V來源于選自包含賴氨酸、蘇氨酸、色氨酸、組氨酸、纈氨酸、亮氨酸、 異亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸、胱氨酸的組的氨基酸，優(yōu)選為L-構(gòu)型。
18.通過從根據(jù)權(quán)利要求16獲得的堿性反應溶液結(jié)晶來分離式I和II的二肽的非對映異構(gòu)混合物的方法，優(yōu)選其中將所述溶液用酸調(diào)整至PH值為2-10，特別優(yōu)選至ρΗ值為 3-9，尤其特別優(yōu)選至式I或II各自二肽的相應等電點，并且ρΗ調(diào)整優(yōu)選用選自包含無機酸、HCUH2CO3^ C02/H20、、磷酸、羧酸和羥基羧酸的組的酸進行。
19.通過從根據(jù)權(quán)利要求15獲得的酸性反應溶液結(jié)晶來分離式I和II的二肽的非對映異構(gòu)混合物的方法，優(yōu)選其中通過加入堿將所述溶液調(diào)整至PH值為2-10，特別優(yōu)選至ρΗ 值為3-9，尤其特別優(yōu)選至式I或II各自二肽的相應等電點，其特征在于所述堿優(yōu)選選自包含NH4HC03、(NH4)2CO3、含氮堿、ΝΗ40Η、氨基甲酸鹽、KHC03、K2CO3、碳酸鹽、堿和堿土堿的組。
20.權(quán)利要求6的化合物I和II的用途，其作為飼料添加劑用于有益動物，優(yōu)選用于家禽、豬、反芻動物、淡水或海水魚、甲殼動物或?qū)櫸铩?br> 全文摘要
本發(fā)明涉及包含二肽或其鹽的飼料添加劑，其中所述二肽的一個氨基酸殘基為DL-甲硫氨酰殘基，并且所述二肽的另一個氨基酸殘基為L-構(gòu)型的氨基酸，其選自包含賴氨酸、蘇氨酸、色氨酸、組氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸和胱氨酸的組。本發(fā)明還涉及包含所述添加劑的飼料混合物以及產(chǎn)生所述二肽的方法。
文檔編號A23K1/165GK102378580SQ201080015021
公開日2012年3月14日 申請日期2010年3月22日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月31日
發(fā)明者C·科布勒, C·韋克貝克, K·克爾姆, T·豪斯納爾 申請人:贏創(chuàng)德固賽有限公司