限公司）;MDF-38沈超低溫冰 箱（日本SANYO公司）。
[0020] 1.3藥物與試劑:附桂骨痛顆粒(按照實施例1的制備方法進行制備）；二甲基亞諷 (DMS0，AR試劑）；3-(4,5-二甲基嚷挫-2)-2,5-二苯基四氮挫漠鹽(MTT，Sigma試劑）；替加弗 (FT-207);小鼠肉瘤S180細胞(腹水型）、小鼠肝癌細胞H22、小鼠黑色瘤細胞B16-F10、人肝 癌細胞化pG-2、艾氏腹水瘤細胞EAC，購自貴陽醫(yī)學院。
[0021] 2血清制備
[0022] 大鼠25只分為5組：陽性對照(FT-207，3ml/kg)組，附桂骨痛顆粒高劑量組（17ml/ kg)，附桂骨痛顆粒中劑量組(8.5ml/kg)，附桂骨痛顆粒低劑量組(4.3ml/kg)，陰性對照組 (蒸饋水)各5只。每天上、下午灌胃給藥兩次，共7次。末次給藥后1.化麻醉固定，手術(shù)暴露腹 主動脈，小屯、剝離結(jié)締組織，W IOml-次性注射器取血，迅速將血置于潔凈玻璃離屯、管中， 靜置化。離屯、（35(K)rpmX化），取血清。56°C水浴中靜置30min滅活，針式濾器(0.22皿)濾過 除菌。EP管無菌分裝，Iml/管，封口，-20°C冷凍保存。
[0023] 3MTT法測定附桂骨痛顆粒對腫瘤細胞的抑制備用
[0024] 腫瘤細胞(S180，H22，EAC，NKM，B16，HepG-2)懸浮液10化l(含2X104個細胞），加入 96孔板中，置37°C5%C02、飽和水汽細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2地;去除含加藥血清20iil，培養(yǎng)4她； 再加0.5%MTT液15iil，繼續(xù)培養(yǎng)地，取出，懸浮細胞2500rmp X 30min離屯、，小屯、去除上清，加 DMS020化1，置恒溫振蕩器中振搖lOmin，使甲臘顆粒溶解，于酶標儀上57化m波長處測光密 度(OD)值，并按下式計算各組抑制率：
[0026] 4統(tǒng)計分析
[0027] 數(shù)據(jù)表示。組間比較用方差分析法，p<0.05有統(tǒng)計學意義，采用SPSS軟件 進行分析。
[002引 5實驗結(jié)果
[0029] 由表1~表6可見，附桂骨痛顆粒(8.5ml/kg)可W抑制B16細胞的生長(p<0.01)， 附桂骨痛顆粒（17ml/kg)可W抑制S180和HepG-2細胞的生長(p<0.01)，附桂骨痛顆粒（17、 8.5ml/kg)可W抑制肥巧日NKM細胞的生長(9<0.01，9<0.05)。因此，附桂骨痛顆粒（即含附 桂骨痛顆粒的血清)對除EAC細胞外的其他五種細胞(S180,肥2，服1，816，胎96-2)均有一定 程度的抑制備用。
[0030] 表1含附桂骨痛顆粒血清對B16細胞的抑制備用（x+s，n = 8)
[0031]
[0032] 與陰性對照組比較，**p<0.0 l
[0033] 表2含附桂骨痛顆粒血清對S180細胞的抑制備用（X ±S，n = 8)
[0036] 與陰性對照組比較，叩<0.0 l
[0037] 表3含附桂骨痛顆粒血清對肥2細胞的抑制備用（X ±S，n = 8)
[0039] 與陰性對照組比較，叩<0.0 l
[0040] 表4含附桂骨痛顆粒血清對EAC細胞的抑制備用（X ±S，n = 8)
[0041]
[0042] 與陰性對照組比較，*p < 0.05，**p < 0.01
[0043] 表5含附桂骨痛顆粒血清對NKM細胞的抑制備用（X ±S，n = 8)
[0045] 與陰性對照組比較，*p<0.05，叩<0.0 l
[0046] 表6含附桂骨痛顆粒血清對化pG-2細胞的抑制備用（X ±S，n = 8)
[004引與陰性對照組比較，*p<0 . Ol
[0049]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所述附桂骨痛顆粒制劑能治療腫瘤及其并發(fā)癥。其治療 腫瘤及其并發(fā)癥的作用可能與其在一定程度上抑制腫瘤細胞5180，肥2，服1，816，化96-2有 關(guān)，達到了發(fā)明目的。
【具體實施方式】 [(K)加]實施例1:
[0051 ] 處方:制附子26.6g、制川烏13.3g、肉桂6.7g、黨參20g、當歸20g、炒白巧20g、淫羊 蕾20g、醋乳香13.3g。
[0052]工藝：肉桂粉碎成細粉，制附子、制川烏、肉桂、黨參、當歸、炒白巧、淫羊蕾及醋乳 香加水，煎煮二次，每次1 h，煎煮液濾過，濾液合并，濃縮至適量，加入肉桂細粉和制成量 15 %的淀粉混合，制粒，干燥，即得。
[0053]規(guī)格:5g/袋。
[0化4] 用法用量：口服，10-15g，每天2-3次。
[0055]功能與主治:治療腫瘤及其并發(fā)癥。
【主權(quán)項】
1. 附桂骨痛制劑在制備預防或治療腫瘤及其并發(fā)癥的藥物中的應用。2. 如權(quán)利要求1所述的應用，其特征在于:所述的并發(fā)癥包括腫瘤急癥、癌癥疼痛或化 療后感染。3. 如權(quán)利要求1或2所述的應用，其特征在于:所述的附桂骨痛制劑按照重量組分計算， 由制附子16.6-36.6份、制川烏10.3-16.3份、肉桂5.7-7.7份、黨參10-30份、當歸10-30份、 炒白芍10-30份、淫羊藿10-30份、醋乳香10.3-16.3份及輔料制備而成。4. 如權(quán)利要求3所述的應用，其特征在于:所述的附桂骨痛制劑按照重量組分計算，由 制附子26.6份、制川烏13.3份、肉桂6.7份、黨參20份、當歸20份、炒白芍20份、淫羊藿20份、 醋乳香13.3份及輔料制備而成。5. 如權(quán)利要求4所述的應用，其特征在于:所述的附桂骨痛顆粒制劑這樣制備：取制附 子、制川烏、肉桂、黨參、當歸、炒白芍、淫羊藿、醋乳香，加入一種或多種藥學上可以接受的 輔料，再按照藥學領(lǐng)域的常規(guī)方法，制備成醫(yī)藥領(lǐng)域中可接受的劑型。6. 如權(quán)利要求5所述的應用，其特征在于:所述劑型包括口服制劑、注射制劑或外用制 劑。7. 如權(quán)利要求6所述的應用，其特征在于:所述口服制劑包括顆粒劑、片劑、膠囊劑、口 服液、糖漿劑或丸劑。8. 如權(quán)利要求7所述的應用，其特征在于:所述口服液制備方法為：肉桂粉碎成細粉，制 附子、制川烏、肉桂、黨參、當歸、炒白芍、淫羊藿及醋乳香加水，煎煮二次，每次lh，煎煮液濾 過，濾液合并，濃縮至適量，加入肉桂細粉和輔料，干燥，即得。
【專利摘要】本發(fā)明提供了附桂骨痛顆粒制劑在制備治療腫瘤及其并發(fā)癥的藥物中的應用。所述附桂骨痛顆粒制劑由制附子、制川烏、肉桂、黨參、當歸、炒白芍、淫羊藿、醋乳香及輔料制備而成，所述附桂骨痛顆粒制劑能有效治療腫瘤及其并發(fā)癥，所述并發(fā)癥包括腫瘤急癥、癌癥疼痛或化療后感染，具有良好的應用前景。
【IPC分類】A61P31/00, A61P35/00, A61P29/00, A61K36/714
【公開號】CN105535141
【申請?zhí)枴緾N201510989391
【發(fā)明人】韋卿, 游德仙, 吳鴻, 彭華, 曾海堃
【申請人】貴州華安堂藥業(yè)有限公司
【公開日】2016年5月4日
【申請日】2015年12月25日