3，5-二叔丁基水楊酸銅在制備用于治療高轉(zhuǎn)移性乳腺癌藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地指一種3,5-二叔下基水楊酸銅在制備用于治療 高轉(zhuǎn)移性乳腺癌藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 乳腺癌是目前全世界婦女中最常見(jiàn)的癌癥。全球每年大約有50萬(wàn)人死于乳腺癌， 對(duì)婦女的生命和生活質(zhì)量已經(jīng)構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅。乳腺癌也成為了中國(guó)女性最常見(jiàn)的癌 癥;每年中國(guó)乳腺癌新發(fā)數(shù)量和死亡數(shù)量分別占全世界的12.2%和9.6 %。隨著生活節(jié)奏加 快和工作壓力的加重，乳腺癌患者呈現(xiàn)低齡化和高發(fā)的態(tài)勢(shì)。目前對(duì)于乳腺癌的治療主要 采用手術(shù)切除、化療等方式，但對(duì)于高轉(zhuǎn)移性的乳腺癌，現(xiàn)有的治療手段均無(wú)法獲得良好的 治療效果。
[0003]抑制乳腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲是治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌的關(guān)鍵，因此有效抑制乳腺癌 細(xì)胞轉(zhuǎn)移和侵襲的藥物是治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌的希望。一種有效治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌的新藥將 會(huì)給轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者和家人帶來(lái)希望，并減輕患者的痛苦，提高生活質(zhì)量，另一方面還可 W減輕社會(huì)的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。
[0004]申請(qǐng)?zhí)枮?01410280227.6的中國(guó)專(zhuān)利中公開(kāi)了金屬絡(luò)合-(3,5-二叔下基水楊酸） (金屬為化、Fe、Al、化、化、Mg、化)作為一種常用的抗靜電劑和荷電控制劑，廣泛應(yīng)用于除靜 電領(lǐng)域和墨粉制造行業(yè)?，F(xiàn)有技術(shù)中報(bào)道，微量元素Cu的某些馨合物包括3,5-二異丙基水 楊酸銅化2(3,5-dips)2對(duì)腫瘤的促進(jìn)和形成過(guò)程具有抑制作用，但未披露該馨合物的具體 應(yīng)用，因此應(yīng)用于臨床需要進(jìn)一步研究。

【發(fā)明內(nèi)容】

[000引本發(fā)明的目的就是要解決上述【背景技術(shù)】的不足，提供一種3,5-二叔下基水楊酸銅 在制備用于治療高轉(zhuǎn)移性乳腺癌藥物中的應(yīng)用，有效抑制癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案為：
[0007]3,5-二叔下基水楊酸銅在制備用于治療高轉(zhuǎn)移性乳腺癌藥物中的應(yīng)用。
[000引3,5-二叔下基水楊酸銅的分子結(jié)構(gòu)式如下式(I)所示。
[0009]
[0010] 優(yōu)選的，所述3,5-二叔下基水楊酸銅的給藥劑量為離體時(shí)10-25μΜ。
[0011] 優(yōu)選的，3,5-二叔下基水楊酸銅制成的藥物類(lèi)型為注射劑、粉針劑、口服劑、口含 片、噴霧劑、膠囊、栓劑中的一種。
[0012] 所述的3,5-二異丙基水楊酸銅可W制成治療高轉(zhuǎn)移性乳腺癌復(fù)方藥物，也可W單 獨(dú)制成治療高轉(zhuǎn)移性乳腺癌藥物。
[0013] 本發(fā)明中高轉(zhuǎn)移性乳腺癌細(xì)胞是指MDA-MB-231和ΒΤ-20細(xì)胞。本發(fā)明中，通過(guò)"劃 痕愈合"法檢測(cè)了3，5-二叔下基水楊酸銅對(duì)MDA-MB-231和ΒΤ-20細(xì)胞遷移能力的影響，結(jié)果 顯示3,5-二叔下基水楊酸銅對(duì)104-18-231和81'-20細(xì)胞的遷移能力顯示濃度依賴(lài)性的抑 審IJ。然后，在高濃度血清誘導(dǎo)下，檢測(cè)高轉(zhuǎn)移性乳腺癌MDAMB-231細(xì)胞透過(guò)"Chamber小室"能 力的改變并給W藥物處理2地后，結(jié)果顯示藥物在10~25M濃度內(nèi)，濃度依賴(lài)性抑制MDA-MB-231 細(xì)胞侵襲能力 。綜合實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析 ，確定藥物 3 ， 5-二叔下基水楊酸銅可W用于特異性預(yù) 防和治療高轉(zhuǎn)移性乳腺癌。
[0014] 本發(fā)明的有益效果為：
[0015] 1.對(duì)3,5-二叔下基水楊酸銅發(fā)掘了新的醫(yī)療用途，開(kāi)拓了一個(gè)新的應(yīng)用領(lǐng)域。
[0016]2.制備3，5-二叔下基水楊酸銅的原料3，5-二叔下基水楊酸、銅鹽來(lái)源廣泛，制得 的3，5-二叔下基水楊酸銅純度高，能夠保證工業(yè)化生產(chǎn)。
[0017] 3.3,5-二叔下基水楊酸銅配置成的藥物可為多種劑型，如:注射劑、粉針劑、口服 劑、口含片、噴霧劑、膠囊、栓劑等。
【附圖說(shuō)明】
[0018]圖1為3，5-二叔下基水楊酸銅對(duì)MDA-MB-231和BT-20細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力的影響
[0019] 圖2為3,5-二叔下基水楊酸銅對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞的侵襲能力的影響。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。
[0021 ] 3,5-二叔下基水楊酸銅對(duì)MDA-MB-231和BT-20細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力的影響
[002引 1.實(shí)驗(yàn)材料
[0023] 1.1細(xì)胞株
[0024] 人乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231和BT-20購(gòu)自中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中屯、（China CenterforTypeCultureCollection,CCTCC)〇
[002引1.2藥品及試劑 3, 5-二叔下基水楊酸銅 由鼎巧化學(xué)合成 DMSO 類(lèi)NSigma公I(xiàn)|:1廣|試
[0026]DMEM、1640及胎牛血清 美國(guó)訪bco產(chǎn)品 青霉素-鏈霉素溶液 安特捷生物技術(shù)有限公司 MTT 類(lèi)NSigma公lij產(chǎn)品 膜蛋白酶 碧云天生物技術(shù)研究所 超凈實(shí)驗(yàn)臺(tái)SZX型 上海浦東躍欣科儀廠
[0027] (:化培養(yǎng)箱HH，CP型 上海博迅實(shí)業(yè)有眼公司 微量移液槍 P2.5等 大龍醫(yī)療設(shè)備有限公司
[0028] 2.實(shí)驗(yàn)方法：
[0029] 2.1細(xì)胞培養(yǎng)
[0030] 人高轉(zhuǎn)移性乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231用含有10%FBS、青霉素100yg/ml、鏈霉素 100μg/ml的1640培養(yǎng)液于37°C，C〇2體積分?jǐn)?shù)為5 %的細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。
[0031 ] 2.2"劃痕愈合"法檢測(cè)不同濃度藥物對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞遷移能力的影響
[0032] 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期MDA-MB-231和BT-20細(xì)胞W2X105個(gè)/孔的細(xì)胞密度接種于6孔培養(yǎng) 板中，置于細(xì)胞C〇2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)6-化待細(xì)胞貼壁后，用白色槍頭劃痕，分別加入不同濃度 的3，5-二叔下基水楊酸銅，終濃度為ΙΟμΜ，25μΜ，對(duì)照組加同樣體積（1ml)的1640培養(yǎng)液，繼 續(xù)培養(yǎng)7化或96h，觀察處理后遷移速率的改變，并對(duì)獨(dú)立重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，
[0033] 如圖1所示，其中圖A和B均為MDA-MB-231細(xì)胞，C和D均為BT-20細(xì)胞，[Cu(salH)2化20)2]指3,5-二叔下基水楊酸銅溶解后形成的銅鹽，圖中control表示對(duì)照組，lOiiM和25μΜ 表示加入3,5-二叔下基水楊酸銅后溶液終濃度為lOiiM和25μΜ，結(jié)果顯示3,5-二叔下基水楊 酸銅抑制了MDA-MB-231和ΒΤ-20細(xì)胞遷移。
[0034] 3,5-二叔下基水楊酸銅對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞的侵襲能力的影響 [003引 2.實(shí)驗(yàn)材料
[0036] 1.1細(xì)胞株(上述轉(zhuǎn)移能力實(shí)驗(yàn)）
[0037] 1.2藥品及試劑 3, 5-二叔了基水楊酸銅 由鼎龍化學(xué)合成 Transwellchamber 尖間Comi口g公I(xiàn)ij DMSO 類(lèi)NSigma公！I'j產(chǎn)品 DMEM、1640及撇牛血請(qǐng) 美國(guó)G化co產(chǎn)品
[0038] 膜蛋白晦 碧云天生物技術(shù)研究所 PBS 博古德生物有限公司 壓力蒸汽滅菌鍋YX-400B 上海Η申醫(yī)療器械有限公司 焚光顯微鏡1X71 掃本餅ympus公司 倒置顯微鏡永新XD-2胞 南京江南永新光學(xué)有限公司
[0039] 2.1Transwell法檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力的改變
[0040]取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期MDA-MB-231細(xì)胞W2X105個(gè)/孔的細(xì)胞密度接種于6孔培養(yǎng)板中，置 于細(xì)胞C〇2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)6-化待細(xì)胞貼壁后，分別加入不同濃度的3，5-二叔下基水楊酸銅， 終濃度為1〇μΜ，25μΜ，對(duì)照組加同樣體積對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)24h，將細(xì)胞收集制成細(xì) 胞懸液并轉(zhuǎn)1XΙΟ5個(gè)細(xì)胞到Transwe11chamber上室中（上室為無(wú)血清培養(yǎng)基），下室中加 200μ1含10%FBS(胎牛血清）的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)2化后，棄去上室中的培養(yǎng)基并用棉簽擦拭 確保培養(yǎng)基清除完全，再每孔加入1〇化1甲醇，解育2min后，用5%的結(jié)晶紫溶液染色5min， 最后用PBS(憐酸緩沖液)漂洗兩次。拍照計(jì)數(shù)，如圖2所示，結(jié)果顯示3,5-二叔下基水楊酸銅 可W濃度依賴(lài)性的抑制MDA-MB-231細(xì)胞侵襲能力。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.3,5_二叔丁基水楊酸銅在制備用于治療高轉(zhuǎn)移性乳腺癌藥物中的應(yīng)用，所述3,5_二 叔丁基水楊酸銅的分子結(jié)構(gòu)式如下式(I)所示。2. 如權(quán)利要求1所述的3，5-二叔丁基水楊酸銅在制備用于治療高轉(zhuǎn)移性乳腺癌藥物中 的應(yīng)用，其特征在于，所述3，5-二叔丁基水楊酸銅的給藥劑量為離體時(shí)10-25μΜ。3. 如權(quán)利要求1所述的3，5-二叔丁基水楊酸銅在制備用于治療高轉(zhuǎn)移性乳腺癌藥物中 的應(yīng)用，其特征在于，所述3,5_二叔丁基水楊酸銅制成的藥物類(lèi)型為注射劑、粉針劑、口服 劑、口含片、噴霧劑、膠囊、栓劑中的一種。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了3，5-二叔丁基水楊酸銅在制備用于治療高轉(zhuǎn)移性乳腺癌藥物中的應(yīng)用及3，5-二叔丁基水楊酸銅的給藥劑量，本發(fā)明通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明了3，5-二叔丁基水楊酸銅可抑制乳腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，濃度依賴(lài)性的抑制乳腺癌細(xì)胞侵襲。本發(fā)明對(duì)3，5-二叔丁基水楊酸銅發(fā)掘了新的醫(yī)療用途，開(kāi)拓了一個(gè)新的應(yīng)用領(lǐng)域。
【IPC分類(lèi)】A61K31/60, A61P35/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105412125
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510780189
【發(fā)明人】徐金華, 柳昀熠, 范麗梅, 童玉華
【申請(qǐng)人】江漢大學(xué)
【公開(kāi)日】2016年3月23日
【申請(qǐng)日】2015年11月13日