雷公藤紅素在制備防治視網(wǎng)膜退行性改變相關(guān)疾病藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及化合物的新醫(yī)藥用途，具體地說(shuō)，設(shè)及雷公藤紅素（Celastrol)在制 備防治W視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞死亡為核屯、病理的包括年齡相關(guān)性黃斑變性、Stargar化病、 視錐-視桿細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不良、視網(wǎng)膜色素變性及糖尿病視網(wǎng)膜病變?cè)趦?nèi)的視網(wǎng)膜退行性疾病 藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] W視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞死亡為核屯、病理的視網(wǎng)膜退行性疾病包括年齡相關(guān)性黃 斑變性、Stargar化病、視錐-視桿細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不良、視網(wǎng)膜色素變性及糖尿病視網(wǎng)膜病變等， 運(yùn)些疾病均可引起嚴(yán)重視力障礙甚至失明。
[0003] 年齡相關(guān)性黃斑變性是世界范圍內(nèi)最常見(jiàn)的嚴(yán)重危害視力健康甚至致盲的視網(wǎng) 膜退行性病變的主要類型之一。我國(guó)流行病學(xué)調(diào)查顯示，50歲W上人群年齡相關(guān)性黃斑變 性的患病率近15. 5%。人口老齡化直接導(dǎo)致年齡相關(guān)性黃斑變性的患病率逐年增加，已構(gòu) 成嚴(yán)重的社會(huì)公共衛(wèi)生問(wèn)題。年齡相關(guān)性黃斑變性的臨床表現(xiàn)一般分為"干性"和"濕性" 兩種類型。干性年齡相關(guān)性黃斑變性多發(fā)生于50歲W上，視力表現(xiàn)為緩慢進(jìn)行性下降或視 物變形，占年齡相關(guān)性黃斑變性發(fā)病的90%W上，目前尚無(wú)有效治療手段。視網(wǎng)膜色素上皮 細(xì)胞氧化應(yīng)激是年齡相關(guān)性黃斑變性發(fā)生的早期關(guān)鍵病理環(huán)節(jié)。
[0004] Stargar化病是黃斑變性的一種，多于6到20歲期間發(fā)病，常由于ABCA4基因的多 種突變導(dǎo)致，目前尚無(wú)有效治療手段。 陽(yáng)〇化]視錐-視桿細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不良是一組遺傳病，由ABCA4等基因突變引起，W視力減退、 夜盲、視野縮小、光感受器功能不良為主要特征，目前尚無(wú)有效治療手段。
[0006] 視網(wǎng)膜色素變性是一種W遺傳因素為主導(dǎo)的進(jìn)行性、營(yíng)養(yǎng)不良性的視網(wǎng)膜退行性 病變，設(shè)及基因多樣，甚至同一基因可在不同患者中表現(xiàn)為不同的突變。主要表現(xiàn)為慢性進(jìn) 行性視野缺失、夜盲、視網(wǎng)膜電流圖異常、視力障礙甚至失明，目前尚無(wú)有效治療手段。 陽(yáng)007] 糖尿病是高血糖引發(fā)的重大代謝性疾病之一。截止2012年9月，全世界范圍內(nèi)約 3億4千7百萬(wàn)人患有糖尿病。糖尿病已成為僅次于屯、血管疾病和腫瘤的第=大非傳染性 疾病。糖尿病視網(wǎng)膜病變是糖尿病并發(fā)癥中最為常見(jiàn)的一種，在糖尿病進(jìn)程的早期即可出 現(xiàn)，在全世界范圍內(nèi)是導(dǎo)致失明的第一位因素。糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)病率隨糖尿病病程的 加長(zhǎng)而逐漸升高，10年W上者發(fā)病率增至69 %~90 %，病程15年W上的糖尿病患者約2 % 因視網(wǎng)膜病變而失明，約10%的患者表現(xiàn)為嚴(yán)重的視力損傷。光感受器細(xì)胞死亡及其導(dǎo)致 感光功能障礙見(jiàn)于糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)病早期。針對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變的光感受器細(xì)胞死 亡的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療干預(yù)尚存在大量空白。
[0008] 綜上所述，針對(duì)光感受器細(xì)胞退行性改變及視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞氧化應(yīng)激的治療 對(duì)上述相關(guān)視網(wǎng)膜退行性疾病的發(fā)生發(fā)展將起到有效的干預(yù)作用。
[0009] 雷公藤紅素化合物英文簡(jiǎn)寫(xiě)為Celastrol,化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：
[0010]
[0011] 目前還未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道雷公藤紅素在治療W光感受器細(xì)胞死亡為核屯、病理W及有 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞或視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞氧化應(yīng)激參與的疾?。ò挲g相關(guān)性黃斑 變性、視網(wǎng)膜色素變性、Stargar化病、視錐-視桿細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不良、糖尿病視網(wǎng)膜病變等視網(wǎng) 膜退行性病變）方面的藥理活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種雷公藤紅素的新用途。
[0013] 本發(fā)明的再一的目的是，提供一種含有雷公藤紅素的組合物的新用途。
[0014] 為實(shí)現(xiàn)上述第一個(gè)目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是：
[0015] 第一方面，提供了雷公藤紅素在制備藥物中的用途，所述的藥物用于防治視網(wǎng)膜 退行性病變，所述的視網(wǎng)膜退行性病變是W視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞死亡為核屯、病理，或有視 網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞或光感受器細(xì)胞的氧化應(yīng)激參與。
[0016] 所述的視網(wǎng)膜退行性病變選自年齡相關(guān)性黃斑變性、Stargar化病、視錐-視桿細(xì) 胞營(yíng)養(yǎng)不良、視網(wǎng)膜色素變性和糖尿病視網(wǎng)膜病變等。
[0017] 第二方面，提供了雷公藤紅素在制備藥物或試劑中的用途，所述的藥物或試劑用 于保護(hù)視網(wǎng)膜的形態(tài)、結(jié)構(gòu)或功能。
[0018] 第=方面，提供了雷公藤紅素在制備藥物或試劑中的用途，所述的藥物或試劑用 于抑制視網(wǎng)膜光損傷。
[0019] 第四方面，提供了雷公藤紅素在制備藥物或試劑中的用途，所述的藥物或試劑用 于：
[0020] a)防治視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞死亡；
[0021] b)防治視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞或光感受器細(xì)胞過(guò)度氧化應(yīng)激；
[0022]C)維持視網(wǎng)膜外核層形態(tài)；
[002引d)防治視網(wǎng)膜外核層厚度降低；或
[0024] e)防治a-wave和b-wave振幅下降。
[0025] 為實(shí)現(xiàn)上述第二個(gè)目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是：
[00%] 第一方面，提供了含有雷公藤紅素的組合物在制備藥物中的用途，所述的藥物用 于防治視網(wǎng)膜退行性病變，所述的視網(wǎng)膜退行性病變是W視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞死亡為核屯、 病理，或有視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞或光感受器細(xì)胞的氧化應(yīng)激參與。
[0027] 所述的視網(wǎng)膜退行性病變選自年齡相關(guān)性黃斑變性、Stargar化病、視錐-視桿細(xì) 胞營(yíng)養(yǎng)不良、視網(wǎng)膜色素變性和糖尿病視網(wǎng)膜病變。
[0028] 第二方面，提供了含有雷公藤紅素的組合物在制備藥物或試劑中的用途，所述的 藥物或試劑用于保護(hù)視網(wǎng)膜的形態(tài)、結(jié)構(gòu)或功能。
[0029] 第=方面，提供了含有雷公藤紅素的組合物在制備藥物或試劑中的用途，所述的 藥物或試劑用于抑制視網(wǎng)膜光損傷。
[0030] 第四方面，提供了含有雷公藤紅素的組合物在制備藥物或試劑中的用途，所述的 藥物或試劑用于：
[0031] a)防治視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞死亡；
[0032] b)防治視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞或光感受器細(xì)胞過(guò)度氧化應(yīng)激；
[0033] C)維持視網(wǎng)膜外核層形態(tài)；
[0034] d)防治視網(wǎng)膜外核層厚度降低；或
[0035]e)防治a-wave和b-wave振幅下降。
[0036] 本發(fā)明中，雷公藤紅素化合物可單獨(dú)使用或者與其它藥學(xué)上可接受的藥用輔料、 藥用載體或其它治療眼部疾病的藥物混合使用。所述藥用載體可選自眼用溶劑的附加劑、 注射用附加劑、片劑用附加劑、表面活性劑和穩(wěn)定劑等。
[0037] 本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)在于：
[003引本發(fā)明采用視網(wǎng)膜光損傷的小鼠模型，模擬多種視網(wǎng)膜退行性病變發(fā)生過(guò)程中的 共同病理環(huán)節(jié)，即光感受器細(xì)胞死亡，對(duì)雷公藤紅素抗光感受器細(xì)胞死亡、防治視網(wǎng)膜退行 性病變發(fā)生的作用進(jìn)行了研究，結(jié)果表明雷公藤紅素對(duì)光損傷誘導(dǎo)的光感受器細(xì)胞大量死 亡、視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)及功能的損傷具有抑制作用，能治療并改善視網(wǎng)膜退行性病變，且效果十分 顯著，因此可用于制備治療包括年齡相關(guān)性黃斑變性、視網(wǎng)膜色素變性、Stargar化病、視 錐-視桿細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不良、糖尿病視網(wǎng)膜病變等在內(nèi)的多種視網(wǎng)膜退行性病變藥物，或制備 用于相關(guān)科學(xué)研究的試劑。
【附圖說(shuō)明】
[0039] 圖1.正常小鼠視網(wǎng)膜光學(xué)相干斷層掃描（OCT)成像：取正常小鼠1%戊己比妥鋼 麻醉后散瞳進(jìn)行OCT成像分析。RPE，視網(wǎng)膜色素上皮；OS,外節(jié)；IS，內(nèi)節(jié)；0LM，外界膜；CC， 連接纖毛；0NL，外核層；0PL，外網(wǎng)層；INL，內(nèi)核層；IPL，內(nèi)網(wǎng)層；GC，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。
[0040] 圖2.雷公藤紅素視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞保護(hù)效應(yīng)的OCT鑒定：正常對(duì)照組小鼠僅 接受50y1DMSO溶劑處理，光損傷模型對(duì)照組小鼠和Celastrol處理組各接受50y1溶劑 DMSO或Celastrol處理，劑量均為5mg/kg體重，所有治療均采用腹腔注射給藥，治療后30 分鐘除正常對(duì)照組小鼠外，其它各組小鼠接受白光照射，光照條件為10,OOOLux,持續(xù)120 分鐘。光照后7天，小鼠分別用1%戊己比妥鋼麻醉后散瞳，采用OCT進(jìn)行視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)成像 分析。Normalcontrol:正常對(duì)照組，未接受光照；Ligh_DMS0 :光損傷模型對(duì)照組；1^;[曲1:_ Celastrol:Celast;rol處理組。
[0041] 圖3.雷公藤紅素視網(wǎng)膜保護(hù)效應(yīng)的免疫組織化學(xué)研究：所有小鼠于7天OCT成像 后處死，解剖取眼球，分離并剔除角膜及晶狀體，其余含視網(wǎng)膜部分進(jìn)行4%多聚甲醒固定， 冰凍包埋及切片。取12ym厚的冰凍切片進(jìn)行化odopsin、opsinM、opsinS及DAPI免疫 染色，分別對(duì)視桿細(xì)胞外節(jié)、視錐細(xì)胞基質(zhì)銷W及細(xì)胞核進(jìn)行免疫標(biāo)記。免疫組織化學(xué)結(jié)果 進(jìn)行顯微鏡觀察拍照及分析。
[0042] 圖4.雷公藤紅素視網(wǎng)膜保護(hù)效應(yīng)的定量分析：免疫組織化學(xué)染色后，對(duì)厚度 進(jìn)行了定量分析。No Ii曲t :正常對(duì)照組；DMSO :光損傷模型對(duì)照組；Celastrol :Celast;rol處理組。
[0043] 圖5.雷公藤紅素抗視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞和光感受器細(xì)胞氧化應(yīng)激的分析：采用 過(guò)氧化物生成的探針D肥，對(duì)視網(wǎng)膜氧化應(yīng)激進(jìn)行了分析。
[0044] 圖6.雷公藤紅素視網(wǎng)膜保護(hù)效應(yīng)的ERG功能研究：各組小鼠在光照后3天，分別 1 %戊己比妥鋼麻醉后散瞳，采用邸G進(jìn)行視網(wǎng)膜功能分析。
【具體實(shí)施方式】
[0045] 下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明提供的【具體實(shí)施方式】作詳細(xì)說(shuō)明。
[0046] 實(shí)施例1
[0047] 在本實(shí)施方案中，我們通過(guò)非侵入性的視網(wǎng)膜眼底