專利名稱：抗腫瘤劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及細(xì)胞毒性抗腫瘤劑。更具體來說，本發(fā)明涉及新的攜帶包括細(xì)胞毒性氮芥部分的取代基的(1，4-醌基)鏈烷酸衍生物。本發(fā)明還涉及制備所述(1，4-醌基)鏈烷酸衍生物的方法、含有它們的藥用組合物以及涉及它們在溫血動物如人類中產(chǎn)生抗腫瘤效應(yīng)的用途。
細(xì)胞增生性疾病如癌癥和牛皮癬的許多現(xiàn)有療法采用抑制DNA合成或細(xì)胞分裂的細(xì)胞毒性劑。這類化合物往往缺乏特異性并對所有細(xì)胞均有毒性，因?yàn)槟[瘤細(xì)胞通常只略微不同于正常細(xì)胞。細(xì)胞毒性劑對快速分裂的腫瘤細(xì)胞的毒性效應(yīng)是有利的，但是對持續(xù)細(xì)胞分裂的正常細(xì)胞如骨髓細(xì)胞和腸道上皮細(xì)胞可能產(chǎn)生不利的影響。
用細(xì)胞毒性劑的化學(xué)治療或放射治療在實(shí)體瘤的毛細(xì)血管網(wǎng)缺乏、細(xì)胞分裂緩慢或缺乏的腫瘤塊內(nèi)低氧區(qū)獲得實(shí)體瘤的有效治療特別困難。這樣的低氧區(qū)在大多數(shù)主要類型的實(shí)體瘤中均存在，例如膀胱癌、乳腺癌、宮頸癌、結(jié)腸直腸癌、頭頸部腫瘤、肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌和胃癌。特別是通過臨床樣品分析表明，較大部分的大多數(shù)頭頸部腫瘤、乳腺癌和宮頸癌例如所述腫瘤塊的10-30％嚴(yán)重低氧，氧張力低于5mmHg(0．0066巴)。
已知在實(shí)體瘤中存在這樣的低氧區(qū)可能為基于前體藥物或雙前體藥物(double-prodrug)法的選擇性更高的細(xì)胞毒性藥物療法提供了機(jī)會。例如，由B．D．Palmer等在J．Med．Chem_1992，35，3214-3222和涉及能夠還原為更有效的氨基取代苯胺氮芥的硝基取代苯胺基芥(anilino mustard)化合物的國際專利申請WO 93／11099中公開了前體藥物法。關(guān)于前體藥物法的問題是這些快速酶還原的硝基必需的另外的取代基趨向于使所產(chǎn)生的氨基取代的化合物的細(xì)胞毒性效力降低。以雙前體藥物法闡明該問題。例如，G．J．Atwell等在J．Med．Chem_1994，37，371-380中和B．M．Sykes等在J．Chem．Soc．Perkin Transact．Ⅱ，1995，337-342中公開某些N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-2-硝基苯乙酰胺衍生物能夠還原成為相應(yīng)的2-氨基苯乙酰胺衍生物，該衍生物可以環(huán)化釋放出苯胺基芥4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯胺。一種替代的雙前體藥物法涉及醌和氫醌部分的生物體系中的相互轉(zhuǎn)換。例如，由L．A．Carpino等在J．Org．Chem_1989，54，3303-3310中公開，某些(1，4-醌基)鏈烷酸衍生物能夠提供一種傳遞細(xì)胞毒性劑的可行方法。所制備的典型化合物包括用來釋放簡單的芥子雙-(2-氯代乙基)胺的N，N-雙-(2-氯代乙基)-3-(2-甲氧基-3，5-二甲基-1，4-醌基)-3-甲基丁酰胺和N，N-雙-(2-氯代乙基)-3-(2，3-二甲氧基-5-甲基-1，4-醌基)-3-甲基丁酰胺。還從Proceedings of the American Association for Cancer Research，1997，38，433-434(文摘第2894號)知道細(xì)胞毒性芥子藥物苯丙氨酸氮芥可以與(1，4-醌基)鏈烷酸連接。值得注意的是某些前體藥物的體外最快生物還原活化約為每小時(shí)25％即t1／2約2．5小時(shí)，這與還原電位范圍-480--520mV有關(guān)。相反，體外生物還原活化較慢(約每小時(shí)10％即t1／2約6小時(shí))的其它前體藥物與還原電位約-730mV有關(guān)。
本發(fā)明目的之一是提供還原為氫醌時(shí)快速分解釋放細(xì)胞毒性劑的雙前體藥物醌化合物。
按照本發(fā)明，提供下式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽
其中R1為氫、(1-4C)烷基、(3-4C)鏈烯基、(3-4C)鏈炔基、羥基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基-(1-4C)烷基、氨基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷基氨基-(1-4C)烷基、雙-[(1-4C)烷基]氨基-(1-4C)烷基、吡咯烷-1-基-(1-4C)烷基、哌啶子基-(1-4C)烷基、嗎啉代-(1-4C)烷基、哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、羧基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基羰基-(1-4C)烷基、氨基甲酰基-(1-4C)烷基、N-(1-4C)烷基氨基甲?；?(1-4C)烷基、N，N-雙-[(1-4C)烷基]氨基甲?；?(1-4C)烷基、羥基、(1-4C)烷氧基、羥基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷氧基-(2-4C)烷氧基、氨基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷基氨基-(2-4C)烷氧基、雙-[(1-4C)烷基]氨基-(2-4C)烷氧基、吡咯烷-1-基-(2-4C)烷氧基、哌啶子基-(2-4C)烷氧基、嗎啉代-(2-4C)烷氧基、哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基、4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷硫基、(1-4C)烷基亞磺酰基或(1-4C)烷基磺?；?；R2為氫、(1-4C)烷基、(3-4C)鏈烯基、(3-4C)鏈炔基、羥基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基-(1-4C)烷基、氨基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷基氨基-(1-4C)烷基、雙-[(1-4C)烷基]氨基-(1-4C)烷基、吡咯烷-1-基-(1-4C)烷基、哌啶子基-(1-4C)烷基、嗎啉代-(1-4C)烷基、哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、羧基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基羰基-(1-4C)烷基、氨基甲?；?(1-4C)烷基、N-(1-4C)烷基氨基甲?；?(1-4C)烷基、N，N-雙-[(1-4C)烷基]氨基甲?；?(1-4C)烷基、羥基、(1-4C)烷氧基、羥基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷氧基-(2-4C)烷氧基、氨基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷基氨基-(2-4C)烷氧基、雙-[(1-4C)烷基]氨基-(2-4C)烷氧基、吡咯烷-1-基-(2-4C)烷氧基、哌啶子基-(2-4C)烷氧基、嗎啉代-(2-4C)烷氧基、哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基或4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基；R3為氫、(1-4C)烷基、(3-4C)鏈烯基、(3-4C)鏈炔基、羥基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基-(1-4C)烷基、氨基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷基氨基-(1-4C)烷基、雙-[(1-4C)烷基]氨基-(1-4C)烷基、吡咯烷-1-基-(1-4C)烷基、哌啶子基-(1-4C)烷基、嗎啉代-(1-4C)烷基、哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、羧基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基羰基-(1-4C)烷基、氨基甲酰基-(1-4C)烷基、N-(1-4C)烷基氨基甲?；?(1-4C)烷基、N，N-雙-[(1-4C)烷基]氨基甲?；?(1-4C)烷基、羥基、(1-4C)烷氧基、羥基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷氧基-(2-4C)烷氧基、氨基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷基氨基-(2-4C)烷氧基、雙-[(1-4C)烷基]氨基-(2-4C)烷氧基、吡咯烷-1-基-(2-4C)烷氧基、哌啶子基-(2-4C)烷氧基、嗎啉代-(2-4C)烷氧基、哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基、哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基或4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基；R4為(1-4C)烷基；R5為(1-4C)烷基；R6為氫或(1-4C)烷基；R7為氫或(1-4C)烷基；X為N-(1-4C)烷基亞氨基、N-(3-4C)鏈烯基亞氨基或N-(3-4C)鏈炔基亞氨基；m為1或2，每個(gè)R8獨(dú)立為氫、鹵代、羥基、(1-4C)烷氧基、(2-4C)鏈烯氧基、(2-4C)鏈炔氧基、(1-4C)烷基、(3-4C)鏈烯基、(3-4C)鏈炔基、氨基、(1-4C)烷基氨基、雙-[(1-4C)烷基]氨基、氰基、(2-4C)鏈烷酰氨基、羧基、(1-4C)烷氧基羰基、氨基甲?；?、N-(1-4C)烷基氨基甲酰基或N N-雙-[(1-4C)烷基]氨基甲?；?；Y1是鹵代、(1-4C)烷基磺酰氧基、苯磺酰氧基或苯基-(1-4C)烷基磺酰氧基；和Y2是鹵代、(1-4C)烷基磺酰氧基、苯磺酰氧基或苯基-(1-4C)烷基磺酰氧基；其中R1、R2或R3中的任何雜環(huán)基團(tuán)任選被1、2或3個(gè)(1-4C)烷基取代基取代，其中當(dāng)Y1和Y2為苯磺酰氧基或苯基-(1-4C)烷基磺酰氧基時(shí)，在Y1或Y2中的任何一個(gè)苯基基團(tuán)任選被1、2或3個(gè)選自鹵代、硝基、氰基、三氟甲基、羥基、氨基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)烷基氨基和雙-[(1-4C)烷基]氨基的取代基取代；前提是R1、R2和R3中的至少一個(gè)不是氫。
在本發(fā)明中將觀察到，本發(fā)明的抗腫瘤劑可以具有一個(gè)或多個(gè)不對稱碳原子，所以它可能存在非對映異構(gòu)體、外消旋體和旋光性形式。應(yīng)該理解的是本發(fā)明包括任何具有抗腫瘤活性的所述形式的化合物，如何分離各種非對映異構(gòu)形式和如何將外消旋化合物分離為其旋光性形式是人所共知的。
還應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的化合物能夠以溶劑化或非溶劑化形式存在，例如水合形式。當(dāng)然本發(fā)明包括所有這類具有抗腫瘤活性的溶劑化形式。
以下給出上述普通基團(tuán)的合適值。
術(shù)語“烷基”包括直鏈和枝鏈烷基，但是對單個(gè)烷基例如“丙基”僅特指直鏈型丙基。類似的常規(guī)適用于其它常用術(shù)語。
對于當(dāng)R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和R8中的每個(gè)為(1-4C)烷基時(shí)，或?qū)τ谠诒交螂s環(huán)基團(tuán)上的(1-4C)烷基取代基而言，其適當(dāng)涵義是例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或異丁基。
對于當(dāng)R1、R2、R3和R8為(1-4C)烷氧基時(shí)，或?qū)τ谠诒交系?1-4C)烷氧基取代基而言，其適當(dāng)涵義是例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基或異丁氧基。
對于當(dāng)R8為(1-4C)烷基氨基時(shí)，或?qū)τ谠诒交系?1-4C)烷基氨基取代基而言，其適當(dāng)涵義是例如甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、異丙基氨基、丁基氨基或異丁基氨基。
對于當(dāng)R8為雙-[(1-4C)烷基]氨基，或?qū)τ谠诒交系碾p-[(1-4C)烷基]氨基取代基而言，其適當(dāng)涵義是例如二甲基氨基、二乙基氨基、N-乙基-N-甲基氨基、二丙基氨基或二異丙基氨基。
對于每個(gè)R1、R2或R3基團(tuán)的適當(dāng)涵義包括例如-(3-4C)鏈烯基的涵義為烯丙基、甲基烯丙基、2-丁烯基和3-丁烯基；(3-4C)鏈炔基的涵義為2-丙炔基和2-丁炔基；羥基-(1-4C)烷基的涵義為 羥甲基、1-羥乙基、2-羥乙基和3-羥丙基；(1-4C)烷氧基-(1-4C)烷基的涵義為 甲氧基甲基、乙氧基甲基、1-甲氧基乙基、2-甲氧基乙基、2-乙氧基乙基和3-甲氧基丙基；氨基-(1-4C)烷基的涵義為 氨基甲基、1-氨基乙基、2-氨基乙基和3-氨基丙基；(1-4C)烷基氨基-(1-4C)烷基的涵義為甲基氨基甲基、乙基氨基甲基、1-甲基氨基乙基、2-甲基氨基乙基、2-乙基氨基乙基和3-甲基氨基丙基；雙-[(1-4C)烷基]氨基-(1-4C)烷基的涵義為二甲基氨基甲基、二乙基氨基甲基、1-二甲基氨基乙基、2-二甲基氨基乙基和3-二甲基氨基丙基；吡咯烷-1-基-(1-4C)烷基的涵義為 吡咯烷-1-基甲基和2-(吡咯烷-1-基)乙基；哌啶子基-(1-4C)烷基的涵義為 哌啶子基甲基和2-哌啶子基乙基嗎啉代-(1-4C)烷基的涵義為 嗎啉代甲基和2-嗎啉代乙基；哌嗪-1-基-(1-4C)烷基的涵義為哌嗪-1-基甲基和2-(哌嗪-1-基)乙基；4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(1-4C)烷4-甲基哌嗪-1-基甲基，4-乙基哌基的涵義為 嗪-1-基甲基，2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基和2-(4-乙基哌嗪-1-基)乙基；羧基-(1-4C)烷基的涵義為羧甲基，1-羧乙基，2-羧乙基和3-羧丙基；(1-4C)烷氧基羰基-(1-4C)烷基的涵義為 甲氧基羰基甲基，乙氧基羰基甲基，叔丁氧基羰基甲基，1-甲氧基羰基乙基，1-乙氧基羰基乙基，2-甲氧基羰基乙基，2-乙氧基羰基乙基，3-甲氧基羰基丙基和3-乙氧基羰基丙基；氨基甲酰基-(1-4C)烷基的涵義為 氨基甲?；谆?-氨基甲?；一?-氨基甲?；一?-氨基甲?；?；N-(1-4C)烷基氨基甲酰基-(1-4C)烷基的涵義為 N-甲基氨基甲?；谆?，N-乙基氨基甲酰基甲基，N-丙基氨基甲?；谆?，1-(N-甲基氨基甲?；?乙基，1-(N-乙基氨基甲?；?乙基，2-(N-甲基氨基甲酰基)乙基，2-(N-乙基氨基甲?；?乙基和3-(N-甲基氨基甲?；?丙基；N，N-雙-[(1-4C)烷基]氨基甲?；?(1-4C)烷基的涵義為 N，N-二甲基氨基甲?；谆?，N-乙基-N-甲基氨基甲?；谆琋，N-二乙基氨基甲酰基甲基，1-
(N，N-二甲基氨基甲?；?乙基，1-(N，N-二乙基氨基甲?；?乙基，2-(N，N-二甲基氨基甲酰基)乙基，2-(N，N-二乙基氨基甲?；?乙基和3-(N，N-二甲基氨基甲?；?丙基；羥基-(2-4C)烷氧基的涵義為2-羥基乙氧基，3-羥基丙氧基和4-羥基丁氧基；(1-4C)烷氧基-(2-4C)烷氧基的涵義為 2-甲氧基乙氧基，2-乙氧基乙氧基，3-甲氧基丙氧基和3-乙氧基丙氧基；氨基-(2-4C)烷氧基的涵義為2-氨基乙氧基和3-氨基丙氧基；(1-4C)烷基氨基-(2-4C)烷氧基的涵義為 2-甲基氨基乙氧基，2-乙基氨基乙氧基，2-丙基氨基乙氧基，3-甲基氨基丙氧基和3-乙基氨基丙氧基；二-[(1-4C)烷基]氨基-(2-4C)烷氧基的涵義為 2-二甲基氨基乙氧基，2-(N-乙基-N-甲基氨基)乙氧基，2-二乙基氨基乙氧基，2-二丙基氨基乙氧基，3-二甲基氨基丙氧基和3-二乙基氨基丙氧基；吡咯烷-1-基-(2-4C)烷氧基的涵義為 2-(吡咯烷-1-基)乙氧基和3-(吡咯烷-1-基)丙氧基；哌啶子基-(2-4C)烷氧基的涵義為 2-哌啶子基乙氧基和3-哌啶子基丙氧基；嗎啉代-(2-4C)烷氧基的涵義為2-嗎啉代乙氧基和3-嗎啉代丙氧基；哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基的涵義為 2-(哌嗪-1-基)乙氧基和3-(哌嗪-1-基)丙氧基；4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基的涵義為 2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基和3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基。
當(dāng)R8、Y1或Y2為鹵代時(shí)或?qū)υ诒交系柠u代取代基而言，其適當(dāng)涵義為例如氟代、氯代、溴代或碘代。
當(dāng)X為N-(1-4C)烷基亞氨基時(shí)，它的涵義為例如N-甲基亞氨基(即式-N(Me)-的二價(jià)基團(tuán))，N-乙基亞氨基或N-丙基亞氨基；當(dāng)其為N-(3-4C)鏈烯基亞氨基時(shí)，X的涵義為例如N-烯丙基亞氨基(即式-N(CH2-CH=CH2)-的二價(jià)基團(tuán))、N-甲基烯丙基亞氨基或N-(2-丁烯基)亞氨基；和當(dāng)其為N-(3-4C)鏈炔基亞氨基時(shí)，X的涵義為例如N-(2-丙炔基)亞氨基(即式-N(CH2-C≡CH)-的二價(jià)基團(tuán))或N-(2-丁炔基)亞氨基。
每個(gè)R8基團(tuán)的適當(dāng)涵義包括例如-(2-4C)鏈烯氧基的適當(dāng)涵義為乙烯氧基，烯丙氧基，甲基烯丙氧基和2-丁烯氧基；(2-4C)鏈炔氧基的適當(dāng)涵義為乙炔氧基和2-丙炔氧基；(3-4C)鏈烯基的適當(dāng)涵義為 烯丙基，甲基烯丙基，3-丁烯基和3-丁烯基；(3-4C)鏈炔基的適當(dāng)涵義為 2-丙炔基和2-丁炔基；(2-4C)鏈烷?；倪m當(dāng)涵義為乙酰基，丙?；投□；?；(1-4C)烷氧基羰基的適當(dāng)涵義為甲氧基羰基，乙氧基羰基和叔丁氧基羰基；N-(1-4C)烷基氨基甲?；倪m當(dāng)涵義為N-甲基氨基甲酰基和N-乙基氨基甲?；?；N，N-二-[(1-4C)烷基]氨基甲?；倪m當(dāng)涵義為 N，N-二甲基氨基甲?；蚇，N-二乙基氨基甲酰基。
當(dāng)Y1或Y2為(1-4C)烷基磺酰氧基時(shí)，其適當(dāng)涵義為例如甲基磺酰氧基、乙基磺酰氧基或丙基磺酰氧基；當(dāng)其為例如苯基-(1-4C)烷基磺酰氧基時(shí)，其適當(dāng)涵義為例如苯基甲基磺酰氧基或2-苯基乙基磺酰氧基。
應(yīng)該認(rèn)識到，一般認(rèn)為當(dāng)在R1、R2或R3中的雜環(huán)基團(tuán)可任選被取代時(shí)，所述雜環(huán)基團(tuán)包括在R1、R2和R3定義中規(guī)定的基團(tuán)例如吡咯烷-1-基、嗎啉代、哌啶子基-(1-4C)烷基或4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基基團(tuán)。
本發(fā)明抗腫瘤劑的合適的藥學(xué)上可接受的鹽為例如足夠堿性的本發(fā)明抗腫瘤劑的酸加成鹽，例如與如無機(jī)酸或有機(jī)酸(如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、三氟乙酸、檸檬酸或馬來酸)的酸加成鹽。另外，足夠酸性的本發(fā)明抗腫瘤劑的適當(dāng)?shù)乃帉W(xué)上可接受的鹽為堿金屬鹽例如鈉鹽或鉀鹽、堿土金屬鹽如鈣鹽或鎂鹽、銨鹽、或與提供生理上可接受的陽離子的有機(jī)堿的鹽如與甲胺、二甲胺、三甲胺、哌啶、嗎啉或三-(2-羥乙基)胺的鹽。
特別新的本發(fā)明抗腫瘤劑包括例如式Ⅰ的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中(a)R1、R2或R3獨(dú)立為氫、(1-4C)烷基、(3-4C)鏈烯基、(3-4C)鏈炔基、羥基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基-(1-4C)烷基、氨基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷基氨基-(1-4C)烷基、二-[(1-4C)烷基]氨基-(1-4C)烷基、吡咯烷-1-基-(1-4C)烷基、哌啶子基-(1-4C)烷基、嗎啉代-(1-4C)烷基、哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、羧基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基羰基-(1-4C)烷基、氨基甲?；?(1-4C)烷基、N-(1-4C)烷基氨基甲?；?(1-4C)烷基或N，N-二-[(1-4C)烷基]氨基甲?；?(1-4C)烷基，前提是R1、R2或R3中至少一個(gè)不是氫；而R4、R5、R6、R7、R8、m、X、Y1和Y2中的每一個(gè)具有此前或在涉及特別新的本發(fā)明抗腫瘤劑的部分所定義的任何涵義；(b)R1、R2或R3獨(dú)立為(1-4C)烷氧基、羥基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷氧基-(2-4C)烷氧基、氨基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷基氨基-(2-4C)烷氧基、二-[(1-4C)烷基]氨基-(2-4C)烷氧基、吡咯烷-1-基-(2-4C)烷氧基、哌啶子基-(2-4C)烷氧基、嗎啉代-(2-4C)烷氧基、哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基或4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(2-C)烷氧基；而R4、R5、R6、R7、R8、m、X、Y1和Y2中的每一個(gè)具有此前或在涉及特別新的本發(fā)明抗腫瘤劑的部分所定義的任何涵義；(c)每個(gè)R4和R5獨(dú)立為甲基、乙基、丙基或異丙基和R1、R2、R3、R6、R7、R8、m、X、Y1和Y2中的每一個(gè)具有此前或在涉及特別新的本發(fā)明抗腫瘤劑的部分所定義的任何涵義；(d)R6為氫、甲基、乙基、丙基或異丙基而R7為氫或甲基；R1、R2、R3、R4、R5、R8、m、X、Y1和Y2中的每一個(gè)具有此前或在涉及特別新的本發(fā)明抗腫瘤劑的部分所定義的任何涵義；(e)X為N-(1-4C)烷基亞氨基或N-(3-4C)鏈烯基亞氨基；R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、m、Y1和Y2中的每一個(gè)具有此前或在涉及特別新的本發(fā)明抗腫瘤劑的部分所定義的任何涵義；(f)m為1或2，每個(gè)R8獨(dú)立為氫、鹵代、羥基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)烷基、氨基、(1-4C)烷基氨基、二-[(1-4C)烷基]氨基或氰基；R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y1和Y2中的每一個(gè)具有此前或在涉及特別新的本發(fā)明抗腫瘤劑的部分所定義的任何涵義；(g)m為1而R8為氫、鹵代、羥基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)烷基、氨基、(1-4C)烷基氨基、二-[(1-4C)烷基]氨基或氰基；R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y1和Y2中的每一個(gè)具有此前或在涉及特別新的本發(fā)明抗腫瘤劑的部分所定義的任何涵義；
(h)Y1和Y2各為鹵代或Y1和Y2各為(1-4C)烷基磺酰氧基、苯磺酰氧基或苯基-(1-4C)烷基磺酰氧基；R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、m和X中的每一個(gè)具有此前或在涉及特別新的本發(fā)明抗腫瘤劑的部分所定義的任何涵義；本發(fā)明優(yōu)選的化合物為式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1、R2和R3獨(dú)立為氫、甲基、乙基、丙基、烯丙基、甲基烯丙基、2-羥基乙基、3-羥基丙基、2-甲氧基乙基、2-乙氧基乙基、3-甲氧基丙基、3-乙氧基丙基、2-羧乙基、3-羧丙基、2-甲氧基羰基乙基、2-乙氧基羰基乙基、3-甲氧基羰基丙基、3-乙氧基羰基丙基、2-(N-甲基氨基甲酰基)乙基、3-(N-甲基氨基甲酰基)丙基、2-(N，N-二甲基氨基甲?；?乙基、3-(N，N-二甲基氨基甲酰基)丙基、甲氧基或乙氧基；R4和R5中的每一個(gè)獨(dú)立為氫、甲基、乙基、丙基或異丙基；R6為氫、甲基、乙基、丙基或異丙基；R7為氫或甲基；X為N-甲基亞氨基、N-乙基亞氨基、N-丙基亞氨基或N-烯丙基亞氨基；m為1或2，每個(gè)R8獨(dú)立為氫、氟代、氯代、溴代、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、丙基、異丙基或氰基；和Y1和Y2中的各自獨(dú)立為氯代、溴代、碘代、甲磺酰氧基、苯磺酰氧基或苯基甲磺酰氧基；前提是R1、R2和R3中至少一個(gè)不是氫。
本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的化合物為式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽其中R1為氫、甲基、乙基、丙基、烯丙基、甲基烯丙基、甲氧基或乙氧基；R2為氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、烯丙基、甲基烯丙基、甲氧基或乙氧基；
R3為氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、烯丙基、甲基烯丙基、甲氧基或乙氧基；R4為甲基、乙基、丙基或異丙基；R5為甲基、乙基、丙基或異丙基；R6為氫、甲基、乙基、丙基或異丙基；R7為氫或甲基；X為N-甲基氨基、N-乙基亞氨基、N-丙基亞氨基或N-烯丙基亞氨基；m為1或2，每個(gè)R8獨(dú)立為氫、氟代、氯代、溴代、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、丙基或異丙基；Y1為氯代、溴代、碘代或甲磺酰氧基；和Y2為氯代、溴代、碘代或甲磺酰氧基；前提是R1、R2和R3中至少一個(gè)不是氫。
本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的化合物為式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽其中R1為氫、甲基、乙基、丙基、烯丙基、甲氧基或乙氧基；R2為氫、甲基、乙基、丙基、烯丙基、甲氧基或乙氧基；R3為氫、甲基、乙基、丙基、烯丙基、甲氧基或乙氧基；R4為甲基或乙基；R5為甲基或乙基；R6為氫、甲基或乙基；R7為氫；X為N-甲基亞氨基、N-乙基亞氨基、N-丙基亞氨基或N-烯丙基亞氨基；m為1，R8位于X的間位，而且R8為氫、氟代、氯代、甲基、乙基、丙基或異丙基；Y1和Y2各為氯代、溴代或碘代；前提是R1、R2和R3中至少一個(gè)不是氫。
本發(fā)明更優(yōu)選的化合物為式Ⅰ的抗腫瘤劑及其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1為氫、甲基或甲氧基；R2為氫、甲基、烯丙基或甲氧基；R3為甲基、乙基、丙基或烯丙基；R4和R5各為甲基；R6和R7各為氫；X為N-甲基亞氨基；m為1而R8為氫；和每個(gè)Y1和Y2均為氯代。
特別優(yōu)選的本發(fā)明化合物為式Ⅰ的以下抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-(5-甲基-3-丙基-1，4-醌-2-基)-3-甲基-N-甲基丁酰胺；3-(3-烯丙基-2，5-二甲基-1，4-醌基)-N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-甲基-N-甲基丁酰胺；N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-(2，5-二甲基-1，4-醌基)-3-甲基-N-甲基丁酰胺；3-(3-烯丙基-5-甲基-1，4-醌-2-基)-N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-甲基-N-甲基丁酰胺；N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-甲基-N-甲基-3-(2，3，5-三甲基-1，4-醌基)丁酰胺，N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-(2，3-二甲氧基-5-甲基-1，4-醌基)-3-甲基-N-甲基丁酰胺，或N-烯丙基-N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-(2，3-二甲氧基-5-甲基-1，4-醌基)-3-甲基丁酰胺。
本發(fā)明再一方面的目的是提供一組新的具有平衡還原電位(即還原電位既不是太低使得1．4-醌基還原率明顯減慢，也不是太高使得在腫瘤塊的低氧區(qū)發(fā)生大量還原)的(1，4-醌基)鏈烷酸衍生物。
按照本發(fā)明的這個(gè)方面，提供以上定義的式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述化合物的還原電位范圍為例如-300--600mV、優(yōu)選范圍-300--500mV、更優(yōu)選范圍為例如-300--475mV。
用來測定本發(fā)明化合物的還原電位的方法學(xué)在下文進(jìn)行詳細(xì)描述。
可以用任何用于制備化學(xué)相關(guān)的化合物的已知方法制備式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽。按照本發(fā)明的又一方面提供此后定義的用于制備式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽的方法，其中，除非另作說明，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、m、X、Y1和Y2中的每一個(gè)具有此前所定義的任何涵義。通過標(biāo)準(zhǔn)的有機(jī)化學(xué)方法可以獲得必需的原料。在此后的附屬實(shí)施例中描述這些原料的制備。通過類似于所述方法的方法可獲得替代的必需原料，而用有機(jī)化學(xué)家的一般技術(shù)就可獲得所述類似的方法。
按照本發(fā)明的這個(gè)方面，提供制備以上定義的式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽的方法，該方法包括-使式Ⅱ的酸或其活性衍生物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一個(gè)具有此前所定義的任何涵義，與式Ⅲ的化合物反應(yīng)， 其中X、R8、m、Y1和Y2中的每一個(gè)具有此前所定義的任何涵義。
式Ⅱ的酸的合適活性衍生物為例如酰鹵，例如所述酸與無機(jī)酸氯化物反應(yīng)形成的酰氯如亞硫酰氯；混合的酸酐，例如所述酸與氯甲酸酯反應(yīng)形成的酸酐如氯甲酸異丁酯；活性酯，例如所述酸與酚如五氟苯酚反應(yīng)形成的酯，如五氟苯基三氟乙酸酯的酯，如1-羥基苯并三唑的醇或如2-(1-苯并三唑基)-1，1，3，3-四甲基鈾六氟磷酸鹽(V)的鈾鹽；?；B氮，例如所述酸與疊氮化物反應(yīng)形成的?；B氮如二苯基磷酰疊氮；?；瑁缢岷颓杌锓磻?yīng)形成的氰化物如二乙基磷?；?；或所述酸與碳二亞胺反應(yīng)形成的產(chǎn)物如N，N’-二環(huán)己基碳二亞胺或1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺。
優(yōu)選在存在以下合適的堿的情況下進(jìn)行所述反應(yīng)，所述堿有例如堿金屬或堿土金屬的碳酸鹽、醇鹽、氫氧化物或氫化物，例如碳酸鈉、碳酸鉀、氫化鈉或氰化鉀；或有機(jī)金屬堿如烷基-鋰，例如二異丙基氨化鋰，或例如有機(jī)胺堿如吡啶、2，6-盧剔啶、可力丁、4-二甲基氨基吡啶、三乙胺、嗎啉或二氮雜二環(huán)-[5．4．0]十一碳-7-烯。所述反應(yīng)也可以優(yōu)選在合適的惰性溶劑或稀釋劑存在下于-78℃至-150℃溫度范圍、通常于室溫或接近室溫下進(jìn)行，所述惰性溶劑或稀釋劑有例如二氯甲烷、乙腈、四氫呋喃、1，2-二甲氧基乙烷、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷-2-酮、二甲亞砜或丙酮。
任選的是，當(dāng)在R1、R2、R3或R8中有氨基、烷基氨基、羥基或羧基基團(tuán)時(shí)，所述任何基團(tuán)可以在需要時(shí)用常規(guī)方法可以去除的常規(guī)保護(hù)基團(tuán)進(jìn)行保護(hù)。
氨基或烷基氨基的合適保護(hù)基團(tuán)有例如酰基基團(tuán)，例如鏈烷酰基如乙?；煌檠趸驶缂籽趸驶?、乙氧基羰基或叔丁氧基羰基；芳基甲氧基羰基如芐氧基羰基；或芳酰基如苯甲?；?。上述保護(hù)基團(tuán)的去保護(hù)條件當(dāng)然隨所選擇的保護(hù)基團(tuán)而不同。因此，例如諸如鏈烷?；蛲檠趸驶蚍减；孽；鶊F(tuán)可以通過例如與合適的堿如堿金屬氫氧化物(例如氫氧化鋰或氫氧化鈉)水解去除。另一方面，諸如叔丁氧基羰基的?；鶊F(tuán)可以例如用合適的酸(如鹽酸、硫酸或磷酸或三氟乙酸)處理去除，而諸如芐氧基羰基的芳基甲氧基羰基基團(tuán)可以例如通過催化劑(如披鈀碳)下的氫化作用去除或用Lewis酸如三(三氟乙酸)硼處理去除。伯氨基的合適替代保護(hù)基團(tuán)為例如可以用烷基胺(例如二甲基氨基丙胺)或肼處理去除的鄰苯二甲?；鶊F(tuán)。
羥基的合適保護(hù)基團(tuán)為例如?；缙S酰基，或芳基甲基基團(tuán)如芐基。上述保護(hù)基團(tuán)的去保護(hù)條件必然隨所選擇的保護(hù)基而不同。因此，例如諸如鏈烷?；蚍减；孽；鶊F(tuán)可以例如通過與合適的堿如堿金屬氫氧化物(例如氫氧化鋰或氫氧化鈉)水解去除。另一方面，諸如芐基的芳基甲基基團(tuán)可以例如通過在催化劑(如披鈀碳)上氫化去除。
羧基的合適保護(hù)基為例如酯化基團(tuán)，如可以用堿如氫氧化鈉水解去除的甲基或乙基；或例如可以用酸(例如有機(jī)酸如三氟乙酸)處理去除的叔丁基；或例如可以通過催化劑(如披鈀碳)下的氫化去除的芐基。
式Ⅱ和Ⅲ的原料可以市售獲得或可以通過有機(jī)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)方法制得。例如，通過水解式Ⅳ的3，4-二氫香豆素及隨后氧化這樣形成的氫醌可以制備式Ⅱ的原料。
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一個(gè)具有此前所定義的任何涵義。
用于由式Ⅳ的3，4-二氫香豆素制備式Ⅱ的原料的水解和隨后的氧化反應(yīng)的合適條件包括例如本領(lǐng)域已知的關(guān)于這類轉(zhuǎn)化的任何試劑素。例如，可以用合適的堿例如堿金屬的氫氧化物如氫氧化鋰或氫氧化鈉進(jìn)行所述水解步驟。如果所述水解步驟在空氣或氧的氣氛下進(jìn)行，則所述氫醌的氧化作用自然發(fā)生。另外，在氧化劑例如鹵化鐵(如氯化鐵)存在下可以用水水解3，4-二氫香豆素。一般來說，在合適的惰性溶劑或稀釋劑例如水、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、甲醇或乙醇存在下于例如15℃-100℃溫度范圍、通常為例如20℃-80℃范圍內(nèi)進(jìn)行所述反應(yīng)。
當(dāng)需要式Ⅰ化合物的藥學(xué)上可接受的鹽時(shí)，例如采用常規(guī)的方法通過使所述化合物與合適的酸或堿反應(yīng)可以獲得。當(dāng)需要旋光性形式的式Ⅰ化合物時(shí)，可以通過用旋光性原料實(shí)施前述方法或通過用常規(guī)方法折分外消旋形式的所述化合物獲得。
如上所述，本發(fā)明式Ⅰ的化合物具有抗腫瘤活性、尤其是借助于在腫瘤塊的低氧區(qū)釋放細(xì)胞毒性劑的活性。例如利用一種或多種以下給出的方法可以評價(jià)本發(fā)明化合物的細(xì)胞毒性活性和抗腫瘤活性。
(a)一種體外檢測法，該方法利用從Sunter等(BiochemicalPharmacology，1992，44，59-64)的著作改進(jìn)的方法檢測試驗(yàn)化合物引起DNA片段交聯(lián)的能力。通過其使線性化32P標(biāo)記的質(zhì)粒的DNA鏈交聯(lián)的能力評價(jià)試驗(yàn)化合物的作用。使所述DNA變性并檢測其在中性瓊脂糖凝膠上的凝膠電泳的遷移率，從而檢測交聯(lián)。根據(jù)分子大小分離雙鏈和單鏈DNA片段。所述詳細(xì)方法學(xué)如下-用Hind Ⅲ限制性核酸內(nèi)切核酸酶使PBR322環(huán)形質(zhì)粒DNA(Pharmacia Biotech_St．Albans，Hertfordshire，UK)線性化，用堿性磷酸酶使末端去磷酸化后，用T4多核苷酸激酶(Biolads，Hitchin，Hertfordshire，UK)來將[γ-32P]ATP添加到所述DNA的5’端。
將每種試驗(yàn)化合物溶解于DMSO，并加入所述質(zhì)粒DNA(每次測定為12．5ng)和包括25mM三乙醇胺緩沖劑和1mM EDTA的pH7．2緩沖液的混合物中。在有氧(aerobic)條件(用空氣充氣溶液)或低氧條件(用氮?dú)夤呐葸^夜使溶液脫氣，然后保持在加入3-10倍超量的還原劑連二亞硫酸鈉的無氧室內(nèi))下于30℃-37℃溫度范圍處理長達(dá)3小時(shí)。加入0．6M乙酸鈉、20mM EDTA和100ug／mltRNA(Sigma，Poole，Dorset，UK)的冰冷混合物終止所述反應(yīng)。加入95％乙醇沉淀所述DNA，分離并貯藏于-20℃過夜。
將每一個(gè)質(zhì)粒DNA樣品重懸浮于30％DMSO水溶液和1mMEDTA的混合物中，并加熱至90℃變性2小時(shí)。所變性的DNA樣品與包括20％ Ficoll 400(Sigma，Poole，Dorset，UK)、0．1MEDTA和0．25％溴酚藍(lán)的pH8．0緩沖液混合，并加樣于電泳凝膠(0．8％瓊脂糖的pH8．2三硼酸鹽EDTA緩沖液)。各個(gè)凝膠于30伏(3v／cm)極化3小時(shí)或直到所述溴酚藍(lán)達(dá)到凝膠末端為止。干燥凝膠，用磷成像儀(phosphoimager)(Molecular Dynamics Limited，Kemsing，England)定量單鏈和雙鏈DNA。標(biāo)準(zhǔn)單鏈和雙鏈DNA樣品也在每個(gè)凝膠上電泳，并計(jì)算試驗(yàn)樣品中的雙鏈DNA的百分率。用不同濃度的各個(gè)試驗(yàn)化合物繪制劑量反應(yīng)曲線以確定產(chǎn)生50％雙鏈DNA的試驗(yàn)劑量。
(b)一種體外檢測法，該方法測定試驗(yàn)化合物在有氧(oxic)的條件下抑制細(xì)胞培養(yǎng)物中的T18小鼠乳腺癌細(xì)胞生長的能力。所述細(xì)胞單層生長于96孔板中，用化合物在90％空氣和10％CO2的氣氛下處理2小時(shí)。然后所述細(xì)胞繼續(xù)生長6天，用3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑鎓溴化物(MTT)終點(diǎn)評價(jià)增殖程度。該試驗(yàn)類似于J．Immunological Methods，1983，65，55-63中所述的方法。所述詳細(xì)方法學(xué)如下-從指數(shù)生長期的單層培養(yǎng)物收獲T18小鼠乳腺癌細(xì)胞(得自于Balb／c小鼠群中自然發(fā)生的乳腺腫瘤，Zeneca Pharmaceuticals，Mereside，Macclesfield，UK)。計(jì)數(shù)細(xì)胞，在RPMI 1640培養(yǎng)基(Gibco BRL，Life Technologies，Paisley，UK；添加15％胎牛血清、谷酰胺、丙酮酸、青霉素和鏈霉素)中稀釋細(xì)胞，并以500個(gè)細(xì)胞／每孔50ul轉(zhuǎn)移到96孔板。細(xì)胞在CO2培養(yǎng)箱(即在90％空氣和10％CO2的氣氛下)于37℃培養(yǎng)2天。再于每孔加入新鮮培養(yǎng)基。將每種試驗(yàn)化合物溶解于DMSO中，并在水中稀釋到所需要的試驗(yàn)濃度。每孔加入25ul的各個(gè)試驗(yàn)溶液。然后將板放回所述培養(yǎng)箱2小時(shí)。結(jié)束時(shí)，去除含有試驗(yàn)化合物的上清培養(yǎng)基。每孔中留下的細(xì)胞用200ul磷酸緩沖鹽溶液(PBSA)洗滌一次，加入新鮮的培養(yǎng)基(200ul)。再將板放回CO2培養(yǎng)箱中生長6天。每孔中加入50ul MTT(5mg／ml)，并將所述板再溫育4小時(shí)，在此期間活細(xì)胞將MTT轉(zhuǎn)化為不溶性、貯留在細(xì)胞內(nèi)的藍(lán)色甲_，轉(zhuǎn)化的程度與孔中的活細(xì)胞數(shù)成正比。去除含有過量MTT的上清培養(yǎng)基，加入DMSO(100ul)以溶解甲_，在540nm檢測光密度來確定其濃度。測定不同濃度的每個(gè)試驗(yàn)化合物以確定引起50％抑制(IC50)的濃度。
(c)一種體外檢測法，該方法測定試驗(yàn)化合物抑制EMT6小鼠乳腺癌細(xì)胞球形聚集物(直徑～400um)在充氧的培養(yǎng)基中生長的能力。因?yàn)橥ㄟ^組織的氧擴(kuò)散能距離約120-150微米，所以所述球形體具有慢性低氧中心細(xì)胞群和供氧充分的外細(xì)胞層。作為供氧充分的懸浮培養(yǎng)物，用試驗(yàn)化合物處理所述多細(xì)胞球體2小時(shí)。隨后在不含試驗(yàn)化合物的情況下洗滌球體，將選定的球體轉(zhuǎn)移到靜止培養(yǎng)物中，以便檢測對體積增長的處理效果。詳細(xì)的方法學(xué)如下-從指數(shù)生長期的單層培養(yǎng)物收獲EMT6小鼠乳腺癌細(xì)胞(得自于P．R．Twentyman，MRC Oncology and Radiotherpertics Unit，Cambridge，UK)，約1×106細(xì)胞用來接種到裝有Eagles基本必需培養(yǎng)基(200ml；添加10％胎牛血清、谷酰胺、非必需氨基酸、青霉素和鏈霉素)的旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)容器中。旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)容器用90％空氣和10％CO2的混合氣體充氣，密封，緩慢攪拌下(最初24小時(shí)為50rpm，此后為40rpm)于37℃培養(yǎng)4-5天。所述細(xì)胞聚集成團(tuán)塊，并生長為緊密的球體，平均直徑約400微米。將等份(5ml)含有球體的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶(已硅化，25ml)，用90％空氣和10％CO2的混合氣體充氣，用橡皮塞密封。將錐形瓶放于37℃的CO2培養(yǎng)箱中的軌道式搖動器中，并輕輕振搖至少15分鐘。將每種試驗(yàn)化合物溶解于DMSO中并用水稀釋到所需要的試驗(yàn)濃度。用注射器將200ul的每種試驗(yàn)溶液加入各個(gè)密封瓶。所得的混合物培養(yǎng)2小時(shí)，將每一個(gè)轉(zhuǎn)移到離心管并讓其沉降。傾析含有所述試驗(yàn)化合物的上清培養(yǎng)基，每管加入新鮮的培養(yǎng)基(5ml)。然后將每管內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到塑料培養(yǎng)皿(直徑35mm)，在配有校準(zhǔn)的目鏡測微尺的解剖顯微鏡下觀察。從每一處理組選擇6個(gè)形狀一致約400微米直徑的球體轉(zhuǎn)移到24孔板的單獨(dú)的孔中，此前24孔板的每孔中已經(jīng)加入了1％瓊脂(0．3ml；形成防止球體附著的基底層)和1ml培養(yǎng)基。用圖像分析儀測量每個(gè)球體的面積，將24孔板轉(zhuǎn)移到37℃的CO2培養(yǎng)箱中。然后每2-3天重復(fù)測量所述球體，持續(xù)長達(dá)21天，每3天向每孔中加入新鮮的培養(yǎng)基(250ul)。根據(jù)面積測量結(jié)果計(jì)算(假定為球形)球體體積并繪制體積增長曲線，據(jù)此評價(jià)處理效果。注意在2-3周內(nèi)引起停滯(無球體體積的增加或球體體積縮小)的試驗(yàn)劑量。
(d)在一組Balb／c小鼠中的體內(nèi)試驗(yàn)，該試驗(yàn)檢測試驗(yàn)化合物延遲T18小鼠乳腺腫瘤生長的能力。詳細(xì)方法學(xué)如下-
通過動物到動物的傳代常規(guī)維持T18小鼠乳腺腫瘤組織。為了制備一批試驗(yàn)用腫瘤，從幾只供體Balb／c小鼠取出腫瘤組織并放于鹽水中。去除外部組織，將看起來健康的腫瘤區(qū)域切割成約1mm3的腫瘤塊，用套管針將其皮下植入麻醉的雌性Bald／c小鼠的左側(cè)肋腹。2-3周后大多數(shù)植入物生長至約8mm直徑。隨機(jī)將動物分為6-7組，排除任何具有極大或極小腫瘤的動物。將各個(gè)試驗(yàn)化合物溶解于DMSO中，用Cremophor EL然后用鹽水稀釋，獲得DMSO、Cremophor EL和鹽水的1∶1∶3混合物。以單次大劑量(0．1ml／10g體重／動物)經(jīng)腹膜內(nèi)途徑給予每個(gè)試驗(yàn)化合物。對照動物只接受溶媒。所有小鼠每天稱重，用游標(biāo)雙腳規(guī)每2-3天測量各個(gè)腫瘤的大小(長和寬)。假定為長橢圓形(體積=π／6×長×寬2)，將所述測量結(jié)果用來估算每個(gè)腫瘤的體積。繪制生長曲線，用生長延遲終點(diǎn)評價(jià)處理效果。
盡管式Ⅰ化合物的藥理性質(zhì)隨預(yù)期的結(jié)構(gòu)變化而變化，但是一般來說在以上一種或多種試驗(yàn)方法中在以下濃度或劑量可以證實(shí)式Ⅰ化合物具有的活性-試驗(yàn)(a-在低氧條件下，例如IC50為1-20μM；在有氧條件下，一般IC50高3倍；試驗(yàn)(b)- 在低氧條件下，例如IC50為1-30μM；試驗(yàn)(c)- 對于生長停滯而言；例如ED50為1-16μM；和試驗(yàn)(d)- 例如腹膜內(nèi)30-100mg／kg劑量引起例如4-15天的生長延遲因此，作為實(shí)例，以下的實(shí)施例1的化合物在試驗(yàn)(c)中停滯的ED50劑量約4uM，在試驗(yàn)(d)中單次大劑量20mg／kg腹腔內(nèi)給予的生長延遲約9天。
如前所述，本發(fā)明的一個(gè)方面的目的是提供當(dāng)它們在低氧張力的區(qū)域如實(shí)體瘤的低氧區(qū)時(shí)快速釋放細(xì)胞毒性藥物的雙前體藥物化合物。例如用以下試驗(yàn)方法可以評價(jià)該性質(zhì)。
將每個(gè)試驗(yàn)化合物溶解于乙腈中(約2mg／ml)，并在pH7．4磷酸緩沖液中稀釋(如果遇到溶解困難，加入額外的最小量乙腈)，得到約5×10-5M的試驗(yàn)濃度。在氦氣下對每個(gè)試驗(yàn)溶液進(jìn)行充分脫氣，溫?zé)嶂?7℃的恒溫控制的反應(yīng)溫度。將連二亞硫酸鈉(NaS2O4)溶液(100ul 100mg／ml脫氣水溶液)加入到一部分(1．4ml)各個(gè)試驗(yàn)溶液。以規(guī)律的間隔取出等份的反應(yīng)溶液，用高效液相層析(HPLC)分析釋放的細(xì)胞毒性藥物部分和形成的合適的3，4-二氫香豆素。典型的HPLC條件包括使用S5ODS1反相柱(250×4．6mm，裝填5微米十八烷基硅烷包被的Spherisorb顆粒，得自Jones Chromatography，Hengoed，Glamorgan，UK)，采用乙腈、水和三氟乙酸的75∶25∶0．1混合物作洗脫劑，流速為1．5ml／分鐘。
一般來說，發(fā)現(xiàn)在還原條件下式Ⅰ的本發(fā)明化合物以t1／2低于2小時(shí)、優(yōu)選低于1小時(shí)、更優(yōu)選低于20分鐘而特別優(yōu)選低于10分鐘快速釋放細(xì)胞毒性藥物部分。一般對于其中X為烷基亞氨基的許多式Ⅰ的本發(fā)明化合物而言，發(fā)現(xiàn)還原條件引起細(xì)胞毒性藥物迅速釋放以至于檢測不到還原步驟的氫醌產(chǎn)物。在這樣的情況下，細(xì)胞毒性藥物釋放的t1／2顯著低于10分鐘。
如前所述，本發(fā)明另一方面的目的是提供具有平衡還原電位(即還原電位既不是太高使得大部分的還原發(fā)生于低氧張力區(qū)外也不是太低使得大部分的還原甚至不發(fā)生在低氧張力區(qū)內(nèi))雙-前體藥物化合物。例如用以下試驗(yàn)方法可以評價(jià)本發(fā)明化合物的還原電位-將每個(gè)試驗(yàn)化合物(2mg)溶解于DMF中，用配有鉑工作電極、第二電極和標(biāo)準(zhǔn)飽和甘汞參比電極(SCE)以及叔丁基溴化銨(在DMF中的0．1摩爾／L)作電解質(zhì)(參見例如G．A．Mabbott，J Chem Ed，1983，60，697和J．G．Dick等，Metrohm Monographs，Eletrode ReactionKinetics determined by Cyclic Sweep Triangular Wave Voltammetry，1983)的Luggin Cell進(jìn)行循環(huán)伏安法。在一般的試驗(yàn)中，例如，以每秒100mV從起始電位到切換電位再回到初始電位對相對于參比電極控制的工作電極電位進(jìn)行掃描。以所產(chǎn)生的電流作為電位的函數(shù)進(jìn)行繪圖，陰極峰電位(Epc)用來測定DMF溶液的還原電位。通過基于測定一組已知水溶液的pH7 Eaq值的標(biāo)準(zhǔn)醌化合物的DMF溶液的Epc值的校準(zhǔn)曲線，確定每個(gè)試驗(yàn)化合物水溶液的Eaq值(P．Wardman，J．Phys．Chem．參考資料，1989 18，1637)。校準(zhǔn)曲線使得確定了以下等式-Eaq(V)=1．23Epc(V)+0．62一般來說，所計(jì)算的式Ⅰ的本發(fā)明化合物Eaq值為例如-300--600mV、優(yōu)選為例如-300--500mV、更優(yōu)選為例如-300-475mV。
按照本發(fā)明的又一方面，提供包含以上定義的式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體的藥用組合物。
所述組合物可以是適合于經(jīng)口給予的形式，例如為片劑或膠囊劑；胃腸外注射(包括靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、血管內(nèi)或輸注)的形式如無菌溶液、懸浮液或乳液；局部給予形式如軟膏或霜劑；或直腸給予的形式如栓劑。
一般來說，可以用常規(guī)賦形劑以常規(guī)方式制備上述組合物。
所述抗腫瘤劑通常將以在每平方米動物體表面積50-10000mg范圍內(nèi)的單位劑量即約1-200mg／kg給予溫血動物，而且這通常提供治療有效量。單位劑型如片劑或膠囊劑將通常含有例如1-250mg活性成分。優(yōu)選使用的日劑量在1-50mg／kg范圍內(nèi)。然而，所述日劑量必然隨所治療的宿主、具體的給予途徑和需要治療的疾病的嚴(yán)重程度而定。因此，可以由治療任何具體病人的執(zhí)業(yè)醫(yī)師確定最適劑量。
按照本發(fā)明的再一方面提供在治療處理人體或動物體的方法中使用的以上定義的式Ⅰ的抗腫瘤劑。
我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的化合物具有抗增殖特性如認(rèn)為由所述式Ⅰ的雙-前體藥物低氧選擇性釋放細(xì)胞毒性劑產(chǎn)生的抗腫瘤特性。因此，預(yù)期本發(fā)明化合物可用于治療具有低氧區(qū)的足夠大小的腫瘤，以便1，4-醌基部分發(fā)生還原，因此迅速釋放細(xì)胞毒性部分。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該認(rèn)識到，本發(fā)明化合物抑制EMT6小鼠乳腺癌細(xì)胞的球形聚合物的上述抗增殖活性不僅證實(shí)了本發(fā)明化合物是低氧選擇性前體藥物的細(xì)胞毒性劑，而且證實(shí)了所述細(xì)胞毒性劑釋放后能夠擴(kuò)散入附近的細(xì)胞聚集物低氧區(qū)以持續(xù)破壞癌細(xì)胞。因此，能夠釋放足夠的細(xì)胞毒性活性使癌細(xì)胞球形聚集物生長停滯。
因此，按照本發(fā)明的該方面提供以上定義的式Ⅰ抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物用于在溫血動物如人類產(chǎn)生抗增殖效應(yīng)。
按照本發(fā)明該方面的又一特性，提供在需要該治療的溫血動物如人類中產(chǎn)生抗增殖效應(yīng)的方法，該方法包括給予所述動物有效量的以上定義的式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽。
如上所述，治療或預(yù)防治療具體增殖性疾病需要的劑量大小必然將隨所治療的宿主、給予途徑和需要治療的疾病的嚴(yán)重程度而不同。設(shè)計(jì)了例如1-200mg／kg、優(yōu)選1-100mg／kg、更優(yōu)選1-10mg／kg范圍內(nèi)的單位劑量。
本發(fā)明化合物的抗腫瘤作用可以用作唯一的治療或可以包括另外的一種或多種其它物質(zhì)和／或治療。通過同時(shí)、序貫或分開給予各個(gè)治療部分可以達(dá)到這樣的聯(lián)合治療。在醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)領(lǐng)域中，常規(guī)聯(lián)合使用不同形式的治療法治療各個(gè)癌癥病人，例如聯(lián)合外科手術(shù)、放射治療和／或化學(xué)治療。具體來說，已知輻射或用抗血管生成劑和／或血管滲透性減少劑(vascular permeability reducing agents)的治療能夠增加腫瘤中的低氧組織數(shù)量。因此，預(yù)期與放射治療和／或抗血管生成劑的聯(lián)合治療將提高本發(fā)明化合物的功效。
一般來說，所述化學(xué)治療包括三個(gè)主要類型的治療藥物-(ⅰ)抗血管生成劑包括認(rèn)為通過抑制血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)起作用的藥物的抗血管生成劑，例如國際專利申請WO 97／22596、WO97／30035和WO 97／32856中公開的化合物；以及通過不同機(jī)制起作用的抗血管生成劑例如linomide、具有整聯(lián)蛋白αvβ3功能的抑制劑、制管張素、razoxin和酞胺哌啶酮。
(ⅱ)細(xì)胞抑制劑例如抗雌激素(如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬和iodoxyfene)、孕激素(如甲地孕酮醋酸鹽)、芳香酶(aromatase)抑制劑(如anastrozole、letrazole、vorazole和依西美坦)、抗孕激素、抗雄激素(如氟利坦、尼魯米特、比卡魯胺和環(huán)丙孕酮醋酸鹽)、LHRH激動劑和拮抗劑(如戈舍瑞林醋酸鹽、luprolide和布舍瑞林)、睪酮5α-二氫還原酶抑制劑(如非那雄胺)、抗侵襲劑(例如金屬蛋白酶抑制劑如marimastat和尿激酶纖溶酶原激活物受體功能的抑制劑)和生長因子抑制劑(如表皮生長因子(EGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)、血小板衍生生長因子和肝細(xì)胞生長因子的抑制劑，例如EGF受體酪氨酸激酶抑制劑和絲氨酸／蘇氨酸激酶抑制劑)；和(ⅲ)用于醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)的抗增生、抗腫瘤藥物及其組合物例如抗代謝劑(例如抗葉酸鹽劑如氨甲喋呤和raltitrexed、氟嘧啶如5-氟尿嘧啶、嘌呤和腺苷類似物以及胞嘧啶和阿糖胞苷)；抗腫瘤抗生素(例如博來霉素和anthracycline如多柔比星、柔紅霉素、表柔比星、和伊達(dá)比星、絲裂霉素-C、放線菌素D(dactinomycin)和普卡霉素)；鉑衍生物(例如順鉑和卡鉑)；烷化劑(例如氮芥、苯丙氨酸氮芥、苯丁酸氮芥、白消安、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、亞硝脲和塞替派)；抗有絲分裂劑(例如長春花生物堿如長春新堿和taxoid如紫杉醇和taxotere)；拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑(例如表鬼臼毒素類如依托泊苷和替尼泊苷、安吖啶和托泊替堪)。
現(xiàn)在以下列非限制性實(shí)施例說明本發(fā)明，除非另作說明，否則其中-(ⅰ)通過真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)進(jìn)行蒸發(fā)和在通過過濾去除殘留的固體如干燥劑后進(jìn)行后處理方法；(ⅱ)除非另作說明，否則在室溫即在18-25℃范圍內(nèi)和惰性氣體如氬的氣氛下進(jìn)行操作；(ⅲ)在得自E． Merck，Darmstadt，德國的Merck Kieselgel二氧化硅(Art．9385)或Merek Lichroprep RP-18(Art．9303)反相二氧化硅上進(jìn)行柱層析(快速法)和中壓液相色譜法(MPLC)；(ⅳ)僅說明性給出得率而不一定是最大可獲得的得率；(ⅴ)利用Mettler SP62自動熔點(diǎn)裝置、油浴裝置或Koffler熱板裝置測定熔點(diǎn)；(ⅵ)用核(一般為質(zhì)子)磁共振(NMR)和質(zhì)譜技術(shù)確定式Ⅰ終產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)；以δ尺度檢測質(zhì)子核磁共振化學(xué)位移值，峰裂數(shù)表示如下s，單峰；d，雙峰；t，三重峰；m，多重峰；除非另作說明，否則將式Ⅰ的終產(chǎn)物溶解于CD3SOCD3以測定NMR值；(ⅶ)中間體一般未完全進(jìn)行特征鑒定，純度用薄層層析(TLC)、紅外(IR)或NMR分析評價(jià)；(ⅷ)使用了以下簡寫-DMFN，N-二甲基甲酰胺；DMAN，N-二甲基乙酰胺；DMSO 二甲基亞砜；EDTA 乙二胺四乙酸。
如下獲得用作原料的3-(5-甲基-3-丙基-1，4-醌-2-基)-3-甲基丁酸-將6-羥基-4，4，7-三甲基-3，4-二氫香豆素(J．Amer．Chem．Soc_1983，105，2752-2760；10g)、烯丙基溴(12．6ml)、碳酸鉀(20g)和DMF(100ml)的混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。所述混合物分配于乙醚和水之間。用飽和氯化物水溶液洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。因此獲得6-烯丙氧基-4，4，7-三甲基-3，4-二氫香豆素(12g)；NMR譜(CDCl3)1．32(s，6H)，2．22(s，3H)，2．58(s，2H)，4．53(m，2H)，5．35(m，2H)，6．05(m，2H)，6．71(s，1H)，6．85(s，1H)。
將由此獲得物質(zhì)的一部分(6g)和N，N-二甲基苯胺(96ml)的混合物攪拌并加熱至200℃5小時(shí)。蒸發(fā)混合物，殘留物利用石油醚(沸點(diǎn)40-60℃)和乙酸乙酯的4∶1混合物作洗脫劑在二氧化硅上經(jīng)柱層析純化。因此獲得5-烯丙基-6-羥基-4，4，7-三甲基-3，4-二氫香豆素(3．7g)；NMR譜(CDCl3)1．42(s，6H)，2．22(s，3H)，2．56(s，2H)，3．58(m，2H)，4．87(s，1H)，5．2(m，2H)，6．08(m，1H)，6．8(s，1H)。
將由此獲得物質(zhì)的一部分(1g)、10％披鈀木炭催化劑(0．15g)和乙醇(60ml)的混合物在3個(gè)大氣壓的氫下攪拌30分鐘。將混合物過濾，蒸發(fā)濾液得到6-羥基-5-丙基-4，4，7-三甲基-3，4-二氫香豆素(1g)；NMR譜(CDCl3)1．06(t，3H)，1．46(s，6H)，1．66(m，2H)，2．21(s，3H)，2．56(s，2H)，2．72(m，2H)，4．57(s，1H)，6．72(s，1H)。
將由此獲得的物質(zhì)的乙腈(12ml)溶液攪拌并加熱至回流。在2小時(shí)內(nèi)分批加入在乙腈(10ml)和水(10ml)的混合物中的氯化鐵六水合物(2．18g)溶液。將該混合物冷卻至室溫并分配在乙醚和5％碳酸氫鈉水溶液之間。水相加入2N鹽酸水溶液酸化并用乙醚提取。干燥(MgSO4)并蒸發(fā)生成的有機(jī)相。由此獲得作為油的3-(5-甲基-3-丙基-1，4-醌-2-基)-3-甲基丁酸(0．335g)；NMR譜(CDCl3)0．99(t，3H)，1．42(m，2H)，1．46(s，6H)，1．97(s，3H)，2．6(m，2H)，3．03(s，2H)，6．45(s，1H)。
如下獲得用作原料的3-(3-烯丙基-2，5-二甲基-1，4-醌基)-3-甲基丁酸-將烯丙基溴(8．45g)加入6-羥基-4，4，5，8-四甲基-3，4-二氫香豆素(J．Org Chem，1989，54，3303-3310；5g)、碳酸鉀(9．4g)和DMF(50ml)的混合物中。所生成的混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。所述混合物分配在乙醚和水之間。有機(jī)相用水和用飽和氯化鈉水溶液洗滌，干燥(硫酸鎂)并蒸發(fā)。由此獲得6-烯丙氧基-4，4，5，8-四甲基-3，4-二氫香豆素(5．2g)；NMR譜(CDCl3)1．48(s，6H)，2．28(s，3H)，2．34(s，3H)，2．57(s，2H)，4．5(m，2H)，5．36(m，2H)，6．07(m，1H)，6．63(s，1H)。
將由此獲得物質(zhì)的一部分(6g)和N，N-二甲基苯胺(40ml)的混合物攪拌并加熱至180℃18小時(shí)。將該混合物冷卻至室溫，加入5N鹽酸水溶液酸化并用乙酸乙酯提取。有機(jī)相用水和用飽和氯化鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。由此獲得7-烯丙基-6-羥基-4，4，5，8-四甲基-3，4-二氫香豆素(2．9g)；NMR譜(CDCl3)1．48(s，6H)，2．24(s，3H)，2．37(s，3H)，2．58(s，2H)，3．44(d，2H)，4．84(寬s，1H)，5．12(m，2H)，5．98(m，1H)。
將由此獲得物質(zhì)的一部分(2．6g)、1N氫氧化鈉水溶液(17．5ml)和乙腈(50ml)的混合物在室溫下的空氣中攪拌4天。加入5N鹽酸水溶液酸化該混合物并用乙酸乙酯提取。有機(jī)相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。由此獲得作為油的3-(3-丙烯基-2，5-二甲基-1，4-醌基)-3-甲基丁酸(2．7g)；NMR譜(CDCl3)1．44(s，6H)，1．95(s，3H)，2．14(s，3H)，3．0(s，2H)，3．19(d，2H)，5．0(m，2H)，5．77(m，1H)。
如下獲得用作原料的3-(2，5-二甲基-3-丙基-1，4-醌基)-3-甲基丁酸將7-烯丙基-6-羥基-4，4，5，8-四甲基-3，4-二氫香豆素(3g)、10％披鈀木炭催化劑(0．5g)和甲醇(75ml)的混合物在氫氣氛下攪拌1小時(shí)。過濾混合物，蒸發(fā)濾液。由此獲得6-羥基-4，4，5，8-四甲基-7-丙基-3，4-二氫香豆素(1．06g)；NMR譜(CDCl3)1．03 (t，3H)，1．46(s，6H)，1．57(s，2H)，2．23(s，3H)，2．36(s，3H)，2．6(m，4H)，4．58(s，1H)。
將由此獲得的物質(zhì)、1N氫氧化鈉水溶液(4．5ml)和乙腈(15ml)的混合物在室溫下的空氣中攪拌4天。加入2N鹽酸水溶液酸化該混合物并用乙酸乙酯提取。有機(jī)相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。由此獲得作為油的3-(2，5-二甲基-3丙基-1，4-醌基)-3-甲基丁酸(1．12g)；NMR譜(CDCl3)0．93(t，3H)，1．38-1．5(m，8H)，1．95(s，3H)，2．14(s，3H)，2．39(m，2H)，3．0(s，2H)。
如下獲得用作原料的3-(2，5-二甲基-1，4-醌基)-3-甲基丁酸-將6-羥基-4，4，5，8-四甲基-3，4-二氫香豆素(J．Org Chem，1989，54，3303-3310，2．2g)、1N氫氧化鈉水溶液(10ml)和乙腈(20ml)的混合物在室溫下的空氣中攪拌2天。加入5N鹽酸水溶液酸化該混合物并用乙酸乙酯提取。有機(jī)相用水和用飽和氯化鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。由此獲得所需要的不需要進(jìn)一步純化就可使用的原料(1．8g)；NMR譜(CDCl3)1 44(s，6H)，2．12(s，3H)，2．4(s，3H)，3．02(d，2H)，7．25(s，1H)。
如下獲得用作原料的3-(3-烯丙基-5-甲基-1，4-醌-2-基)-3-甲基丁酸將6-羥基-4，4，7-三甲基-3，4-二氫香豆素(J．Amer．Chem．Soc_1983，105，2752-2760；10g)、烯丙基溴(12．6ml)、碳酸鉀(20g)和DMF(100ml)的混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。所述混合物分配在乙醚和水之間。有機(jī)相用飽和氯化物水溶液洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。由此獲得6-烯丙氧基-4，4，7-三甲基-3，4-二氫香豆素(12g)；NMR譜(CDCl3)1．32(s，6H)，2．22(s，3H)，2．58(s，2H)，4．53(m，2H)，5．35(m，2H)，6．05(m，2H)，6．71(s，1H)，6．85(s，1H)。
將由此獲得物質(zhì)的一部分(6g)和N，N-二甲基苯胺(96ml)的混合物攪拌并加熱至200℃5小時(shí)。蒸發(fā)混合物，殘留物用石油醚(沸點(diǎn)40-60℃)和乙酸乙酯的4∶1混合物作為洗脫劑在二氧化硅上經(jīng)柱層析純化。由此獲得5-烯丙基-6-羥基-4，4，7-三甲基-3，4-二氫香豆素(3．7g)；NMR譜(CDCl3)1．42(S，6H)，2．22(s，3H)，2．56(s，2H)，3．58(m，2H)，4．87(S，1H)，5．2(m，2H)，6．08(m，1H)，6．8(s，1H)。
將由此獲得物質(zhì)的一部分(3g)的乙腈(30ml)溶液攪拌并加熱至回流。在2小時(shí)內(nèi)分批加入在乙腈(60ml)和水(60ml)的混合物中的氯化鐵六水合物(13g)溶液。將該混合物冷卻至室溫并分配在乙醚和5％碳酸氫鈉水溶液之間。水相加入2N鹽酸水溶液酸化并用乙醚提取。所生成的有機(jī)相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。由此獲得3-(3-烯丙基-5-甲基-1，4-醌-2-基)-3-甲基丁酸(0．97g)；NMR譜(CDCl3)1．47(s，6H)，1．99(s，3H)，3．04(s，2H)，3．48(m，2H)，5．02(m，2H)，5．85(m，1H)，6．49(s，1H)。
如下獲得用作原料的3-(2，3，5-三甲基-1，4-醌基)-3-甲基丁酸將3，3-二甲基丙烯酸甲酯(6g)加入2，3，5-三甲基氫醌(7．6g)和甲磺酸(40ml)的已經(jīng)加熱至75℃的攪拌混合物中，混合物在75℃攪拌1小時(shí)。將混合物傾入冰和水的混合物中，用乙酸乙酯的提取生成的混合物。有機(jī)相用5％碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。由此獲得6-羥基-4，4，5，7，8-五甲基-3，4-二氫香豆素(10．7g)；NMR譜(CDCl3)1．48(s，6H)，2．1 8(s，3H)，2．22(s，3H)，2．37(s，3H)，2．55(s，2H)，4．6(s，1H)。
將由此獲得物質(zhì)的一部分(5．85g)、0．5 N氫氧化鈉水溶液(50m1)和乙腈(100ml)的混合物在室溫下的空氣中攪拌18小時(shí)。加入5N鹽酸水溶液酸化并用乙酸乙酯提取混合物。有機(jī)相用水和用飽和氯化鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。由此獲得所需要的不需要進(jìn)一步純化就可使用的原料(4．1g)；NMR譜(CDCl3)1 46(s，6H)，1．93(s，3H)，1．96(s，3H)，2．15(s，3H)，2．15(s，3H)，3．02(s，2H)。
如下獲得用作原料的3-(5-烯丙基-2，3-二甲氧基-1，4-醌基)-3-甲基丁酸將連二亞硫酸鈉(N2S2O4，26g)分批加入在甲醇(50ml)和水(100ml)的混合物中的2，3-二甲氧基-1，4-苯醌(J．Med．Chem_1971，14，45；5g)的攪拌溶液中。生成的混合物在室溫下攪拌1小時(shí)?；旌衔镌谝宜嵋阴ズ退g分配。干燥(MgSO4)并蒸發(fā)有機(jī)相得到2，3-二甲氧基氫醌(2g)；NMR譜(CD3SOCD3)3．71(s，6H)，6．37(s，2H)，8．47(s，2H)。
將2，3-二甲氧基氫醌(3．6g)、3，3-二甲基丙烯酸甲酯(3．2ml)和甲磺酸(36ml)的混合物攪拌并加熱至70℃2小時(shí)。將混合物傾入冰和水的混合物中，用乙酸乙酯的提取生成的混合物。有機(jī)相用5％碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。殘留物用石油醚(沸點(diǎn)40-60℃)和乙酸乙酯的3∶2混合物作為洗脫劑在二氧化硅上經(jīng)柱層析純化。由此獲得6-羥基-7，8-二甲氧基-4，4-二甲基-3，4-二氫香豆素(2．3g)；NMR譜(CDCl3)1．3(s，6H)，2．59(s，2H)，3．95(s，6H)，5．58(s，1H)，6．64(s，1H)。
將6-羥基-7，8-二甲氧基-4，4-二甲基-3，4-二氫香豆素(1．6g)、烯丙基溴(1．65ml)、碳酸鉀(2．63g)和DMF(15ml)的混合物攪拌并加熱至70℃1小時(shí)。使混合物在乙醚和水之間分配。用飽和氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)相，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。殘留物用石油醚(沸點(diǎn)40-60℃)和乙醚的3∶2混合物作為洗脫劑在二氧化硅上經(jīng)柱層析純化。由此獲得6-烯丙氧基-7，8-二甲氧基-4，4-二甲基-3，4-二氫香豆素(1．51g)；NMR譜(CDCl3)1．31(s，6H)，2．59(s，2H)，3．9(s，3H)，3．95(s，3H)，4．57(d，2H)，5．37(m，2H)，6．08(m，1H)，6．58(s，1H)。
將由此獲得的物質(zhì)和N，N-二甲基苯胺(20ml)的混合物攪拌并加熱至200℃4小時(shí)。蒸發(fā)混合物，殘留物用石油醚(沸點(diǎn)40-60℃)和乙醚的1∶1混合物作為洗脫劑在二氧化硅上經(jīng)柱層析純化。由此獲得5-烯丙基-6-羥基-7，8-二甲氧基-4，4-二甲基-3，4-二氫香豆素(1．4g)；NMR譜(CDCl3)1．44(s，6H)，2．56(s，2H)，3．58(m，2H)，3．91(s，2H)，3．97(s，3H)，5．02(m，2H)，5．73(s，1H)，6．02(m，1H)。
將由此獲得物質(zhì)的一部分(0．65g)、2N氫氧化鈉水溶液(1ml)和水(50ml)的混合物在室溫下的空氣中攪拌1．5小時(shí)。用乙醚提取混合物。有機(jī)相用水和用飽和氯化鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。殘留物用石油醚(沸點(diǎn)40-60℃)、乙醚和乙酸的50∶50∶0．1混合物作為洗脫劑在二氧化硅上經(jīng)柱層析純化。由此獲得所需要的原料(0．112g)；NMR譜(CDCl3)1．46(s，6H)，3．03(s，2H)，3．44(s，2H)，3．9(s，3H)，3．95(s，3H)，5．02(m，2H)，5．83(m，1H)。
如下獲得用作原料的N-烯丙基-4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯胺二鹽酸鹽將2-(叔丁氧基羰基氧基亞氨基)苯基乙腈(BOC-ON；13．5g)加入4-[雙(2-羥乙基)氨基]苯胺[10g，通過中和相應(yīng)的二鹽酸鹽制備(J．Org．Chem_1961，26，1933)]、丙酮(100ml)和水(100ml)的混合物中，生成的混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。用乙酸乙酯提取混合物。有機(jī)相用2N鹽酸水溶液提取。加入2 N氫氧化鈉水溶液中和水相，并用乙酸乙酯提取。蒸發(fā)有機(jī)相，殘留物用乙酸乙酯作洗脫劑在二氧化硅上經(jīng)柱層析純化。由此獲得4-[雙(2-羥乙基)氨基]-N-(叔丁氧基羰基)苯胺(11．84g)；NMR譜(CDCl3)1．59(s，9H)，3．56(t，4H)，3．84(t，4H)，6．5(寬s，1H)，6．71(d，2H)，7．24(d，2H)。
將由此獲得物質(zhì)的一部分(2g)、叔丁基二甲基甲硅烷基氯(2．5g)、咪唑(2．3g)和DMF(20ml)的混合物在室溫下攪拌2天。加入水，并用乙酸乙酯提取混合物。蒸發(fā)有機(jī)提取物，殘留物用二氯甲烷和乙醚的19∶1混合物作洗脫劑在二氧化硅上經(jīng)柱層析純化。由此獲得4-[雙(2-叔丁基二甲基甲硅烷基氧基乙基)氨基]-N-(叔丁氧基羰基)苯胺(3．86g)；NMR譜(CDCl3)0．0(s，12H)，0．85(s，18H)，1．47(s，9H)，3．42(t，4H)，3．69(t，4H)，6．18(寬s，1H)，6．58(d，2H)，7．13(d，2H)。
將氫化鈉(在礦物油中的60％分散物；0．265g)加入在DMF(20ml)中的4-[雙(2-叔丁基二甲基甲硅烷基氧基乙基)氨基]-N-(叔丁氧基羰基)苯胺(3．15g)的已經(jīng)冷卻至0℃的攪拌溶液中。生成的混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。加入烯丙基溴(0．625ml)，混合物在室溫下攪拌12小時(shí)。加水(5ml)，混合物在乙醚和水之間分配。干燥(MgSO4)并蒸發(fā)有機(jī)相獲得N-烯丙基-4-[雙(2-叔丁基二甲基甲硅烷基氧基乙基)氨基]-N-(叔丁氧基羰基)苯胺(3．5g)；NMR譜(CDCl3)0．0(s，12H)，0．81(s，9H)，0．82(s，9H)，1．4(s，9H)，3．43(t，4H)，3．71(t，4H)，4．11(d，2H)，5．07(m，2H)，5．87(m，1H)，6．58(d，2H)，6．93(d，2H)。
將由此獲得的物質(zhì)和四正丁基氟化銨(1．1M在THF中；55ml)的混合物在室溫下攪拌30分鐘。蒸發(fā)溶劑，殘留物用乙酸乙酯作洗脫劑在二氧化硅上經(jīng)柱層析純化。由此獲得N-烯丙基-4-[雙(2-羥乙基)氨基]-N-(叔丁氧基羰基)苯胺(2．09g)；NMR譜(CDCl3)1．44(s，9H)，3．55(t，4H)，3．83(t，4H)，4．13(d，2H)，5．11(m，2H)，5．89(m，1H)，6．61(d，2H)，7．04(d，2H)。
將由此獲得的物質(zhì)、四氯化碳(12ml)、三苯基膦(4．92g)和乙腈(40ml)的混合物在室溫下攪拌30分鐘。蒸發(fā)溶劑，殘留物用石油醚(沸點(diǎn)40-60℃)和乙酸乙酯的17∶3混合物作洗脫劑在二氧化硅上經(jīng)柱層析純化。由此獲得N-烯丙基-4-[雙(2-氯乙基)氨基]-N-(叔丁氧基羰基)苯胺(1．49g)；NMR譜(CDCl3)1．44(s，9H)，3．61(t，4H)，3．7(t，4H)，4．14(d，2H)，5．12(m，2H)，5．88(m，1H)，6．61(d，2H)，7．08(d，2H)。
將在乙酸乙酯(6．5ml)中的氯化氫氣體的飽和溶液加入到由此獲得的物質(zhì)在乙酸乙酯(5ml)中的溶液中，在室溫下攪拌混合物30分鐘。分離沉淀物。由此獲得N-烯丙基-4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯胺二鹽酸鹽(0．56g)；NMR譜(CD3SOCD3)3．75(s，8H)，3．87(d，2H)，5．37(d，1H)，5．45(d，1H)，5．95(m，1H)，6．86(d，2H)，7．37(d，2H)。
硬脂酸鎂3．0(c) 片劑Ⅲ mg／片化合物Ⅹ1．0乳糖Ph．Eur． 93．25交聯(lián)羧甲基纖維素鈉 4．0玉米淀粉糊(5％(w／v)糊) 0．75硬脂酸鎂1．0(d)膠囊劑 mg／膠囊化合物Ⅹ10乳糖Ph．Eur． 488．5鎂 1．5(e) 注射劑Ⅰ(50 mg／ml)化合物Ⅹ5．0％(w／v)1M氫氧化鈉溶液 15．0％(v／v)0．1M鹽酸(調(diào)節(jié)pH至7．6)聚乙二醇400 4．5％(w／v)注射用水至100％(f) 注射劑Ⅱ(10mg／ml)化合物Ⅹ1．0％(w／v)磷酸鈉BP3．6％(w／v)0．1M氫氧化鈉溶液 15．0％(v／v)注射用水至100％(g) 注射劑Ⅲ(1mg／ml，緩沖至pH6)
化合物Ⅹ 0．1％(w／v)磷酸鈉BP 2．26％(w／v)枸櫞酸0．38％(w／v)聚乙二醇400 3．5％(w／v)注射用水至100％(h) 氣霧劑Ⅰ mg／ml化合物Ⅹ 10．0失水山梨醇三油酸酯13．5三氯氟甲烷910．0二氯二氟甲烷 490．0(i) 氣霧劑Ⅱ mg／ml化合物Ⅹ 0．2失水山梨醇三油酸酯0．27三氯氟甲烷70．0二氯二氟甲烷 280．0二氯四氟乙烷 1094．0(j) 氣霧劑Ⅲ mg／ml化合物Ⅹ 2．5失水山梨醇三油酸酯3．38三氯氟甲烷67．5二氯二氟甲烷 1086．0二氯四氟乙烷 191．6(k)氣霧劑Ⅳ mg／ml化合物Ⅹ 2．5
大豆卵磷脂 2．7三氯氟甲烷 67．5二氯二氟甲烷1086．0二氯四氟乙烷191．6(1) 軟膏 ml化合物Ⅹ 40mg乙醇 300ul水 300ul1-十二烷基氮雜環(huán)庚-2-酮 50ul丙二醇 至1ml注釋用藥學(xué)領(lǐng)域公知的常規(guī)方法可以獲得上述制劑?？梢杂美缣峁┍蕉姿岽姿崂w維素包衣的常規(guī)方法包衣片劑(a)-(c)。氣霧劑(h)-(k)可以與標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量劑量的氣霧劑儀器一起使用，而且懸浮劑失水山梨醇三油酸酯和大豆卵磷脂可以用替代的懸浮劑如山梨糖醇酐單油酸酯、失水山梨醇醇倍半油酸酯、聚山梨醇酯80、聚甘油油酸酯或油酸替代。
權(quán)利要求
1．式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1為氫、(1-4C)烷基、(3-4C)鏈烯基、(3-4C)鏈炔基、羥基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基-(1-4C)烷基、氨基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷基氨基-(1-4C)烷基、雙-[(1-4C)烷基]氨基-(1-4C)烷基、吡咯烷-1-基-(1-4C)烷基、哌啶子基-(1-4C)烷基、嗎啉代-(1-4C)烷基、哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、羧基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基羰基-(1-4C)烷基、氨基甲?；?(1-4C)烷基、N-(1-4C)烷基氨基甲酰基-(1-4C)烷基、N，N-雙-[(1-4C)烷基]氨基甲?；?(1-4C)烷基、羥基、(1-4C)烷氧基、羥基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷氧基-(2-4C)烷氧基、氨基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷基氨基-(2-4C)烷氧基、雙-[(1-4C)烷基]氨基-(2-4C)烷氧基、吡咯烷-1-基-(2-4C)烷氧基、哌啶子基-(2-4C)烷氧基、嗎啉代-(2-4C)烷氧基、哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基、4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷硫基、(1-4C)烷基亞磺?；?1-4C)烷基磺?；籖2為氫、(1-4C)烷基、(3-4C)鏈烯基、(3-4C)鏈炔基、羥基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基-(1-4C)烷基、氨基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷基氨基-(1-4C)烷基、雙-[(1-4C)烷基]氨基-(1-4C)烷基、吡咯烷-1-基-(1-4C)烷基、哌啶子基-(1-4C)烷基、嗎啉代-(1-4C)烷基、哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、羧基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基羰基-(1-4C)烷基、氨基甲酰基-(1-4C)烷基、N-(1-4C)烷基氨基甲?；?(1-4C)烷基、N，N-雙-[(1-4C)烷基]氨基甲?；?(1-4C)烷基、羥基、(1-4C)烷氧基、羥基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷氧基-(2-4C)烷氧基、氨基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷基氨基-(2-4C)烷氧基、雙-[(1-4C)烷基]氨基-(2-4C)烷氧基、吡咯烷-1-基-(2-4C)烷氧基、哌啶子基-(2-4C)烷氧基、嗎啉代-(2-4C)烷氧基、哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基或4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基；R3為氫、(1-4C)烷基、(3-4C)鏈烯基、(3-4C)鏈炔基、羥基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基-(1-4C)烷基、氨基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷基氨基-(1-4C)烷基、雙-[(1-4C)烷基]氨基-(1-4C)烷基、吡咯烷-1-基-(1-4C)烷基、哌啶子基-(1-4C)烷基、嗎啉代-(1-4C)烷基、哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(1-4C)烷基、羧基-(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基羰基-(1-4C)烷基、氨基甲?；?(1-4C)烷基、N-(1-4C)烷基氨基甲酰基-(1-4C)烷基、N，N-雙-[(1-4C)烷基]氨基甲?；?(1-4C)烷基、羥基、(1-4C)烷氧基、羥基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷氧基-(2-4C)烷氧基、氨基-(2-4C)烷氧基、(1-4C)烷基氨基-(2-4C)烷氧基、雙-[(1-4C)烷基]氨基-(2-4C)烷氧基、吡咯烷-1-基-(2-4C)烷氧基、哌啶子基-(2-4C)烷氧基、嗎啉代-(2-4C)烷氧基、哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基、哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基或4-(1-4C)烷基哌嗪-1-基-(2-4C)烷氧基；R4為(1-4C)烷基；R5為(1-4C)烷基；R6為氫或(1-4C)烷基；R7為氫或(1-4C)烷基；X為N-(1-4C)烷基亞氨基、N-(3-4C)鏈烯基亞氨基或N-(3-4C)鏈炔基亞氨基；m為1或2，每個(gè)R8獨(dú)立為氫、鹵代、羥基、(1-4C)烷氧基、(2-4C)鏈烯氧基、(2-4C)鏈炔氧基、(1-4C)烷基、(3-4C)鏈烯基、(3-4C)鏈炔基、氨基、(1-4C)烷基氨基、雙-[(1-4C)烷基]氨基、氰基、(2-4C)鏈烷酰氨基、羧基、(1-4C)烷氧基羰基、氨基甲?；?、N-(1-4C)烷基氨基甲酰基或N，N-雙-[(1-4C)烷基]氨基甲酰基；Y1是鹵代、(1-4C)烷基磺酰氧基、苯磺酰氧基或苯基-(1-4C)烷基磺酰氧基；和Y2是鹵代、(1-4C)烷基磺酰氧基、苯磺酰氧基或苯基-(1-4C)烷基磺酰氧基；其中R1、R2或R3中的任何雜環(huán)基團(tuán)任選被1、2或3個(gè)(1-4C)烷基取代基取代，其中當(dāng)Y1和Y2為苯磺酰氧基或苯基-(1-4C)烷基磺酰氧基時(shí)，在Y1或Y2中的任何苯基基團(tuán)任選被1、2或3個(gè)選自鹵代、硝基、氰基、三氟甲基、羥基、氨基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基、(1-4C)烷基氨基和雙-[(1-4C)烷基]氨基的取代基取代；前提是R1、R2和R3中的至少一個(gè)不是氫。
2．權(quán)利要求1要求保護(hù)的式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽其中R1、R2和R3中的每一個(gè)獨(dú)立為氫、甲基、乙基、丙基、烯丙基、甲基烯丙基、2-羥基乙基、3-羥基丙基、2-甲氧基乙基、2-乙氧基乙基、3-甲氧基丙基、3-乙氧基丙基、2-羧基乙基、3-羧基丙基、2-甲氧基羰基乙基、2-乙氧基羰基乙基、3-甲氧基羰基丙基、3-乙氧基羰基丙基、2-(N-甲基氨基甲?；?乙基、3-(N-甲基氨基甲?；?丙基、2-(N，N-二甲基氨基甲酰基)乙基、3-(N，N-二甲基氨基甲?；?丙基、甲氧基或乙氧基；R4和R5中的每一個(gè)獨(dú)立為氫、甲基、乙基、丙基或異丙基；R6為氫、甲基、乙基、丙基或異丙基；R7為氫或甲基；X為N-甲基亞氨基、N-乙基亞氨基、N-丙基亞氨基或N-烯丙基亞氨基；m為1或2，每個(gè)R8獨(dú)立為氫、氟代、氯代、溴代、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、丙基、異丙基或氰基；和Y1和Y2中的每一個(gè)為氯代、溴代或碘代、甲基磺酰氧基、苯磺酰氧基或甲苯磺酰氧基、前提是R1、R2和R3中至少一個(gè)不是氫。
3．權(quán)利要求1要求保護(hù)的式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽其中R1為氫、甲基、乙基、丙基、烯丙基、甲基烯丙基、甲氧基或乙氧基；R2為氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、烯丙基、甲基烯丙基、甲氧基或乙氧基；R3為氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、烯丙基、甲基烯丙基、甲氧基或乙氧基；R4為甲基、乙基、丙基或異丙基；R5為甲基、乙基、丙基或異丙基；R6為氫、甲基、乙基、丙基或異丙基；R7為氫或甲基；X為N-甲基氨基、N-乙基亞氨基、N-丙基亞氨基或N-烯丙基亞氨基；m為1或2，每個(gè)R8獨(dú)立為氫、氟代、氯代、溴代、甲氧基、乙氧基、甲基、乙基、丙基或異丙基；Y1是氯代、溴代、碘代或甲磺酰氧基；和Y2是氯代、溴代、碘代或甲磺酰氧基；前提是R1、R2和R3中的至少一個(gè)不是氫。
4．權(quán)利要求1要求保護(hù)的式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽其中R1為氫、甲基、乙基、丙基、烯丙基、甲氧基或乙氧基；R2為氫、甲基、乙基、丙基、烯丙基、甲氧基或乙氧基；R3為氫、甲基、乙基、丙基、烯丙基、甲氧基或乙氧基；R4為甲基或乙基；R5為甲基或乙基；R6為氫、甲基或乙基；R7為氫；X為N-甲基亞氨基、N-乙基亞氨基、N-丙基亞氨基或N-烯丙基亞氨基；m為1，R8位于X的間位而且R8為氫、氟代、氯代、甲基、乙基、丙基或異丙基；Y1和Y2中的每一個(gè)為氯代、溴代或碘代；前提是R1、R2和R3中的至少一個(gè)不是氫。
5．權(quán)利要求1要求保護(hù)的式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽其中R1為氫、甲基或甲氧基；R2為氫、甲基、烯丙基或甲氧基；R3為甲基、乙基、丙基或烯丙基；R4和R5各為甲基；R6和R7各為氫；X為N-甲基亞氨基；m為1，R8為氫；和Y1和Y2各為氯代。
6．權(quán)利要求1要求保護(hù)的式Ⅰ的抗腫瘤劑選自-N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-(5-甲基-3-丙基-1，4-醌-2-基)-3-甲基-N-甲基丁酰胺；3-(3-烯丙基-2，5-二甲基-1，4-醌基)-N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-甲基-N-甲基丁酰胺；N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-(2，5-二甲基-1，4-醌基)-3-甲基-N-甲基丁酰胺；3-(3-烯丙基-5-甲基-1，4-醌-2-基)-N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-甲基-N-甲基丁酰胺；N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-甲基-N-甲基-3-(2，3，5-三甲基-1，4-醌基)丁酰胺，N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-(2，3-二甲氧基-5-甲基-1，4-醌基)-3-甲基-N-甲基丁酰胺，或N-烯丙基-N-{4-[雙(2-氯代乙基)氨基]苯基}-3-(2，3-二甲氧基-5-甲基-1，4-醌基)-3-甲基丁酰胺；或它們的藥學(xué)上可接受的鹽。
7．權(quán)利要求1-6中的任一項(xiàng)要求保護(hù)的式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述化合物的還原電位的范圍為-300--475mV。
8．制備權(quán)利要求1要求保護(hù)的式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽的方法，該方法包括-使式Ⅱ的酸或其活性衍生物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一個(gè)具有權(quán)利要求1所定義的任何涵義，與式Ⅲ的化合物反應(yīng)， 其中X、R8、m、Y1和Y2中的每一個(gè)具有權(quán)利要求1所定義的任何涵義；當(dāng)需要式Ⅰ化合物的藥學(xué)上可接受的鹽時(shí)，可以采用常規(guī)方法通過使所述化合物與合適的酸或堿反應(yīng)獲得；當(dāng)需要旋光性形式的式Ⅰ化合物時(shí)，可以通過用旋光性原料實(shí)施前述方法或通過用常規(guī)方法折分外消旋形式的所述化合物獲得。
9．包含權(quán)利要求1要求保護(hù)的式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體的藥用組合物。
10．權(quán)利要求1要求保護(hù)的式Ⅰ的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽在生產(chǎn)在溫血動物產(chǎn)生抗增殖效應(yīng)的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(Ⅰ)的抗腫瘤劑或其藥學(xué)上可接受的鹽,其中R
文檔編號A61P35/00GK1293656SQ99804090
公開日2001年5月2日 申請日期1999年3月16日 優(yōu)先權(quán)日1998年3月20日
發(fā)明者F·T·波伊勒 申請人:阿斯特拉曾尼卡英國有限公司