專利名稱：一種含化療增效劑的抗實體腫瘤緩釋劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種抗實體腫瘤緩釋劑，屬于藥物技術領域。具體而言，本發(fā)明提供一種含化療增效劑的緩釋注射劑和緩釋植入劑。該抗癌緩釋劑中的化療增效劑可有效地抑制或破壞實體腫瘤間質(zhì)及腫瘤血管，不僅能抑制腫瘤的新生血管，有效降低腫瘤內(nèi)的張力、間質(zhì)壓力、間質(zhì)粘性，進而提高其間質(zhì)液導率，有利于藥物進入實體腫瘤以及在腫瘤內(nèi)的有效擴散，還可增加腫瘤對化療藥物的敏感性。
背景技術：
癌癥的治療主要包括手術、放療及化療等方法。其中手術治療不能清除散在的瘤細胞，因此常復發(fā)或?qū)е履[瘤細胞因手術刺激而擴散轉移；放療和傳統(tǒng)的化療不具選擇性，難于腫瘤局部形成有效藥物濃度或治療劑量，效果差，毒性大，單純提高藥物或放射劑量又受到全身毒性反應的限制。參見孔等“瘤內(nèi)放置順鉑加系統(tǒng)卡莫司汀治療大鼠腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》69期76-82頁，1998年(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2)76-82)。
低劑量的抗癌藥物治療不僅能夠增加癌細胞的藥物耐受性，而且還可促進其浸潤性生長”，參見梁等“抗癌藥物脈沖篩選后增加了人肺癌細胞的藥物耐受性及體外浸潤能力并伴有基因表達的改變”《國際癌癥雜志》111期484-93頁，2004年(Liang Y，et al.，Int JCancer.2004；111(4)484-93)。
抗腫瘤藥物局部放置能夠較好地克服以上缺陷，不僅能夠明顯提高腫瘤局部的藥物濃度，而且可以顯著降低全身毒性反應。大量體內(nèi)外試驗已顯示出對實體腫瘤的治療效果，參見孔慶忠等“瘤內(nèi)放置順鉑加系統(tǒng)卡莫司汀治療大鼠腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》69期76-82頁，1998年(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2)76-82)和孔慶忠等“瘤內(nèi)放置順鉑治愈大鼠原發(fā)腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》64期268-273頁(1997年)(Kong Q et al.，JSurg Oncol.1997 Oct；64268-273)。還可參見中國專利(ZL00111093.4；ZL96115937.5；申請?zhí)?01111264，001111272)及美國發(fā)明專利(專利號6,376,525B1；5,651,986；5,626,862)。
然而，實體腫瘤由腫瘤細胞和腫瘤間質(zhì)組成，其中腫瘤間質(zhì)中的血管不僅為腫瘤細胞的生長提供了支架及必不可少的營養(yǎng)物質(zhì)，還影響了化療藥物在腫瘤周圍及腫瘤組織內(nèi)的滲透和擴散，參見尼提等“細胞外間質(zhì)的狀況對實體腫瘤內(nèi)藥物運轉的影響”《癌癥研究》60期2497-503頁，2000年(Netti PA，Cancer Res.2000，60(9)2497-503)。
腫瘤間質(zhì)中的血管及結締組織中的纖維蛋白及膠原蛋白等成分與過度增生的腫瘤細胞導致實體腫瘤的間質(zhì)壓力(interstitial pressure)高、間質(zhì)粘性(interstitialviscosity)大、組織張力系數(shù)(tissue tensile modulus)大、間質(zhì)液導率(hydraulicconductance)低。以上諸因素大大限制了藥物進入實體腫瘤以及在腫瘤內(nèi)的有效擴散，因此構成腫瘤化療的主要障礙。
不僅如此，腫瘤間質(zhì)中的血管對常規(guī)化療藥物并不敏感，常導致腫瘤細胞對抗癌藥物，特別是單藥物化療的耐受性的增強，其結果是治療失敗。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種新的藥物組合物，含化療增效劑和抗癌藥物。更具體而言，是抗實體腫瘤的緩釋劑，主要為緩釋植入劑和緩釋注射劑。該抗癌緩釋劑中的化療增效劑可有效地抑制或破壞實體腫瘤間質(zhì)及腫瘤血管，不僅能抑制腫瘤的新生血管，有效降低腫瘤內(nèi)的張力、間質(zhì)壓力、間質(zhì)粘性，進而提高其間質(zhì)液導率，有利于藥物進入實體腫瘤以及在腫瘤內(nèi)的有效擴散，還可增加腫瘤對化療藥物的敏感性。
將化療增效劑和抗癌藥物制成緩釋劑(主要為緩釋注射劑和緩釋植入劑)不僅能夠極大地提高腫瘤局部的藥物濃度、降低藥物在循環(huán)系統(tǒng)中的藥物濃度、降低藥物對正常組織的毒性，還能夠極大方便藥物注射、減少手術操作的并發(fā)癥、降低病人的費用?；熢鲂┏芤种颇[瘤生長外，還能增加腫瘤細胞對抗癌藥物的敏感性。以上意外發(fā)現(xiàn)構成本發(fā)明的主要內(nèi)容。
本發(fā)明抗實體腫瘤緩釋劑包括抗癌有效成分和藥用輔料，抗癌有效成分選自抗腫瘤抗生素和/或抗代謝類藥物的抗癌藥物和化療增效劑?；熢鲂槔着撩顾兀哂幸种颇[瘤細胞生長的作用外，可有效地抑制或破壞腫瘤的血管并能抑制腫瘤的新生血管的形成，進而不僅使腫瘤細胞失去生長所需的支架及營養(yǎng)物質(zhì)的來源，還可明顯促進化療藥物進入腫瘤及在腫瘤周圍及腫瘤組織內(nèi)的滲透和擴散以上意外發(fā)現(xiàn)構成本發(fā)明的主要內(nèi)容。
本發(fā)明的復方藥物組合物可制成任意制劑形式，如，但不限于，膠囊、緩釋劑、顆粒劑、丸劑、片劑、散劑、注射劑、軟膏、貼劑、植入劑、緩釋劑植入劑、緩釋劑注射劑等。其中以緩釋劑為優(yōu)選，以緩釋劑植入劑和緩釋劑注射劑為最優(yōu)選。
本發(fā)明針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種新的含化療增效劑和抗癌藥物的緩釋注射劑。
本發(fā)明化療增效劑緩釋注射劑，由緩釋微球和溶媒組成。具體而言，該抗癌緩釋注射劑由以下成分組成(A)緩釋微球，包括抗癌有效成分 0.01-60％緩釋輔料 40-99.99％助懸劑0.0-30％以上為重量百分比和(B)溶媒，為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。
溶媒，分為普通溶媒和特殊溶媒。
抗癌有效成分為化療增效劑與抗腫瘤抗生素和/或抗代謝類藥物的組合。
化療增效劑、抗腫瘤抗生素和/或抗代謝類藥物制成的藥物主要經(jīng)口服或靜脈注射等常規(guī)途徑給藥。本發(fā)明的給藥方式為局部緩釋給藥，在顯著增強藥物的治療效果的同時明顯降低其全身的毒性作用。就具有抗癌活性的化療增效劑和抗癌藥物而言，并非所有緩釋輔料均可達到有效釋放的緩釋效果。藥用輔料有數(shù)百種以上，具有緩釋作用的藥用輔料，特別是能將本發(fā)明中所選的化療增效劑在人體或動物體內(nèi)于一定的時間內(nèi)緩慢釋放的藥用輔料必須經(jīng)過大量創(chuàng)造性的實驗才能獲得，特定的緩釋輔料與可被緩釋藥物的組合物的選擇及其配比需要經(jīng)過大量的創(chuàng)造性勞動才能確定。釋放過慢不足以獲得有效藥物濃度，因而不能有效殺死腫瘤細胞；若釋放過快會造成突釋，則容易像常規(guī)注射一樣引起全身毒性反應。相關數(shù)據(jù)，特別是動物體內(nèi)釋放特性的數(shù)據(jù)需要經(jīng)過體內(nèi)外大量創(chuàng)造性的實驗才能獲得，并非經(jīng)過有限的實驗就能確定，具有非顯而易見性。
化療增效劑主要選自雷帕霉素及其衍生物。雷帕霉素還包括它們的鹽，如，但不限于，硫酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、乳糖酸鹽、醋酸鹽、天冬酸鹽、硝酸鹽、枸櫞酸鹽、嘌呤或嘧啶鹽、琥珀酸鹽及馬來酸鹽等。
上述雷帕霉素在緩釋劑中所占的比例因具體情況而定，可為0.001％-50％，以0.01％-20％為佳，0.1％-10％為最佳。
抗腫瘤抗生素主要選自埃坡霉素(epothilone)、埃坡霉素B、鹽酸阿霉素(adriamycin)、三鐵阿霉素、表阿霉素(epiadriamycin)、7-O-甲基諾加-4’-表阿霉素(7-o-methylnogallol-4’-epiadriamycin)、二乙氧醋酰阿霉素、絲裂霉素(Mitomycin)、絲裂霉素C(mitomycin C)、絲林霉素、放線菌素D(Dactinomycin)、放線菌素C、環(huán)孢菌素A。其中以埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D、更生霉素為優(yōu)選。以上抗腫瘤抗生素藥物還包括其鹽，如，但不限于，硫酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、乳糖酸鹽、醋酸鹽、天冬酸鹽、硝酸鹽、枸櫞酸鹽、嘌呤或嘧啶鹽、琥珀酸鹽或馬來酸鹽。
上述抗癌抗生素在緩釋注射劑中所占的比例因具體情況而定，可為0.1％-50％，以1％-40％為佳，2％-30％為最佳。
抗代謝類藥物可以分別在不同環(huán)節(jié)阻止DNA的合成，抑制細胞分裂增殖，通過影響細胞周期和DNA合成而發(fā)揮作用。
抗代謝類藥物選自下列之一或組合氟脲苷(fluridine)、脫氧氟尿苷(Doxifloridine，氟鐵龍)、5-脫氧氟尿苷、丙硫氧嘧啶、氟尿嘧啶(Fluoracil，5-FU)、丁基氟尿嘧啶、雙喃氟啶、5-氟嘧啶醇、磺巰嘌呤鈉、巰嘌呤(Mercaptopurine，樂疾寧、6-MP)、巰咪嘌呤、6-巰基嘌呤、6-氨基嘌呤鹽酸鹽、甘氨硫嘌呤、硫鳥嘌呤(thioguanine，6-TG)、甲氨蝶呤methotrexate，MTX)，氟甲氨蝶呤、二氧甲氨蝶呤、葉酸、10-乙基去氮氨蝶呤(氨基撲發(fā)寧)、氟甲氨蝶呤、二氧甲氨蝶呤、5，10-雙去氮四氫葉酸、甲滿蝶呤、卡莫氟(Carmofur)、替加氟(Tegafur，喃氟啶、FT-207)、優(yōu)福定(Tegafur-Uracil，UFT)、尿嘧啶替加氟、8-氮鳥嘌呤(8-azaguanine)、尿嘧啶、巰甲脲嘧啶、左亞葉酸鈣、亞葉酸鈣(Calcium Levofolinate、甲酰四氫葉酸鈣)、托泊替康、鹽酸拓撲替康、阿糖胞苷(cytosine arabinoside、Cytarabine(Ara-C))、環(huán)胞苷(cyclotidine，Cyclocytidine)、環(huán)胞苷(cyclotidine，Cyclocytidine)、羥基脲(Hydroxycarbamide，hydroxyurea)、羥基胍。
以上抗代謝藥物中以氟脲苷、脫氧氟尿苷、5-脫氧氟尿苷、丙硫氧嘧啶、氟尿嘧啶、丁基氟尿嘧啶、雙喃氟啶、5-氟嘧啶醇、磺巰嘌呤鈉、巰嘌呤、巰咪嘌呤、6-巰基嘌呤、6-氨基嘌呤鹽酸鹽、甘氨硫嘌呤、硫鳥嘌呤、甲氨蝶呤，氟甲氨蝶呤、二氧甲氨蝶呤、10-乙基去氮氨蝶呤、二氧甲氨蝶呤、甲滿蝶呤、葉酸、5，10-雙去氮四氫葉酸、左亞葉酸鈣、亞葉酸鈣、卡莫氟、替加氟、優(yōu)福定、尿嘧啶替加氟、8-氮鳥嘌呤、尿嘧啶、巰甲脲嘧啶、托泊替康、鹽酸拓撲替康、阿糖胞苷、環(huán)胞苷、羥基脲、羥基胍為優(yōu)選。
上述抗代謝類藥物在緩釋注射劑中的重量百分比為0.1％-50％，以1％-40％為佳，2％-30％為最佳。
緩釋輔料粘度范圍IV(dl/g)為0.1～0.8，選自外消旋聚乳酸(D，L-PLA)、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物(D，L-PLGA)、單甲基聚乙二醇/聚乳酸(MPEG-PLA)、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物(MPEG-PLGA)、聚乙二醇/聚乳酸(PLA-PEG-PLA)、聚乙二醇/聚乳酸共聚物(PLGA-PEG-PLGA)、端羧基聚乳酸(PLA-COOH)、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA-COOH)、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]、乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)、聚對二氧環(huán)己酮(PDO)、聚三亞甲基碳酸酯(PTMC)、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、殼聚糖、泊洛沙姆、蛋白膠之一或其組合；助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
當藥物緩釋微球中的抗癌有效成分僅為化療增效劑或抗癌藥物時，抗癌緩釋注射劑主要用于增加其它途徑應用的化療增效劑或抗癌藥物的作用效果，或用于對放療或其它療法的增效。當藥物緩釋微球中的抗癌藥物僅為化療增效劑或抗癌藥物時，抗癌緩釋注射劑的應用及增效方式為(1)含化療增效劑的緩釋注射劑局部注射，而抗癌藥物經(jīng)其他途徑應用；(2)局部注射含抗癌藥物的緩釋注射劑，其他途徑應用化療增效劑；(3)局部注射含化療增效劑的緩釋注射劑與含抗癌藥物的緩釋注射劑；或(4)局部注射含化療增效劑和抗癌藥物的緩釋注射劑。
局部應用的抗癌緩釋注射劑還用于對放療或其它療法的增效。其他途徑指，但，不限于，動脈、靜脈、腹腔、皮下、腔內(nèi)給藥。
抗癌有效成分化療增效劑和/或抗癌藥物在藥物緩釋微球中的重量百分比為0.1％-50％，以1％-40％為佳，2％-30％為最佳?；熢鲂┡c抗癌藥物的重量比為1-99∶1到1∶1-19，以1-19∶1到1∶1-19為優(yōu)選。
本發(fā)明抗癌藥物組合物中抗癌有效成分為一種或數(shù)種化療增效劑和/或一種或數(shù)種抗癌藥的組合，抗癌有效成分優(yōu)選組合如下(1)0.01％-20％的雷帕霉素與1-40％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D或更生霉素的組合；或(2)0.01％-20％的雷帕霉素與1-40％的氟尿嘧啶(5-FU)、巰嘌呤、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤、葉酸、左亞葉酸鈣、亞葉酸鈣、卡莫氟、替加氟、優(yōu)福定、尿嘧啶替加氟、托泊替康、阿糖胞苷、環(huán)胞苷或羥基脲的組合。
本發(fā)明的緩釋輔料是可經(jīng)酶、酸堿或組織液水解或降解的，包括下列之一或其組合(1)生物相容性多聚物，包括生物可降解的或生物不可降解的多聚物及其混合物或共聚物；(2)水溶性低分子化合物；或/和
(3)用于實現(xiàn)針劑和緩釋劑等藥物劑型的合適的添加劑及賦型劑。
緩釋輔料可為各種水溶性或非水溶性高分子多聚物，緩釋輔料選自外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚體-癸二酸)、聚(富馬酸-癸二酸)、聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、殼聚糖、泊洛沙姆和蛋白膠之一或其組合。
本發(fā)明緩釋微球中緩釋輔料及其重量百分比最優(yōu)選如下(1)50-99％的PLA或PLGA或PLA與PLGA的共聚物或混合物；(2)50-99％的聚乙二醇與PLA或PLGA的共聚物；(3)50-99％的聚苯丙生；(4)55-99％的雙脂肪酸與癸二酸共聚物；(5)30-60％的聚苯丙生和30-60％的PLA或30-60％的PLGA；(6)40-95％的木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、殼聚糖、泊洛沙姆或白蛋膠；或(7)40-95％的外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、癸二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLA、PLGA、乙醇酸和羥基羧酸的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乙醇酸和羥基羧酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和羥基羧酸共聚時的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是聚苯丙生[聚(1，3-二(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸)(p(CPP-SA))、雙脂肪酸-癸二酸共聚物(PFAD-SA)]、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]和聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]等。對羧苯氧基丙烷(p-CPP)與癸二酸共聚時的含量分別為重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。
聚乳酸的分子量峰值可為，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000為優(yōu)選，以5,000-30,000為最優(yōu)選；聚乙醇酸的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以5,000-50,000為優(yōu)選，以10,000-30,000為最優(yōu)選；以上聚羥基酸可單選或多選。當單選時，以聚乳酸(PLA)或羥基羧酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)為優(yōu)選，共聚物的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000為優(yōu)選，以30,000-50,000為最優(yōu)選；當多選時，以高分子多聚物或不同高分子多聚物組成的復合多聚物或共聚物為優(yōu)選，以含不同分子量聚乳酸或癸二酸的復合多聚物或共聚物為最優(yōu)選，如，但不限于，分子量為1000到30000的聚乳酸與分子量為20000到50000的聚乳酸混合、分子量為10000到30000的聚乳酸與分子量為30000到80000的PLGA混合、分子量為20000到30000的聚乳酸與癸二酸混合、分子量為30000到80000的PLGA與癸二酸混合。所用聚乳酸以左旋聚乳酸(L-PLA)為優(yōu)選。左旋聚乳酸(L-PLA)粘度范圍IV(dl/g)為0.2～0.8，玻璃化轉變溫度范圍為55～65℃，熔點175～185℃。
除上述緩釋輔料外，還可選用其他物質(zhì)見美國專利(專利號4757128；4857311；4888176；4789724)及《藥用輔料大全》(第123頁，四川科學技術出版社1993年出版，羅明生和高天惠主編)中已有詳細描述。另外，中國專利(申請?zhí)?6115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美國發(fā)明專利(專利號5,651,986)也列舉了某些藥用輔料，包括充填劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻滯劑等。
為調(diào)節(jié)藥物釋放速度或改變本發(fā)明的其它特性，可以改變聚合物的單體成分或分子量、添加或調(diào)節(jié)藥用輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各種糖或鹽等。其中糖可為，但不限于，木糖醇、低聚糖、(硫酸)軟骨素及甲殼素等，其中鹽可為，但不限于，鉀鹽和鈉鹽等；也可添加其它藥用輔料，如但不限于，充填劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻滯劑等緩釋注射劑中，藥物緩釋系統(tǒng)可制成微球、亞微球、微乳、納米球、顆?；蚯蛐涡⊥瑁缓笈c注射溶媒混合后制成注射劑使用。在各種緩釋注射劑中以混懸型緩釋注射劑為優(yōu)選，混懸型緩釋注射劑是將含抗癌成分的藥物緩釋系統(tǒng)懸浮于注射液中所得的制劑，所用的緩釋輔料為上述緩釋輔料中的一種或其組合，所用溶媒為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。普通溶媒為，但不限于，蒸餾水、注射用水、生理沖液、無水乙醇或各種鹽配制的緩沖液。助懸劑的目的在于有效懸浮含藥微球，從而利于注射之用。為方便注射，助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時)，優(yōu)選1000cp-3000cp(20℃-30℃時)，最優(yōu)選1500cp-3000cp(20℃-30℃時)。助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
助懸劑在普通溶媒中的含量因其的特性而定，可為0.1-30％因具體情況而定。優(yōu)選助懸劑的組成為
A)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+0.1-0.5％土溫80；或B)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土溫80；或C)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土溫80。
溶媒的制備則取決于溶媒的種類，普通溶媒有市售，也可以自制，如蒸餾水、注射用水、生理沖液、無水乙醇或各種鹽配制的緩沖液，但必須嚴格按照有關標準。特殊溶媒需考慮到助懸劑的種類及其組成、溶媒所懸浮的藥物、緩釋微球(或微囊)的組成、性質(zhì)及其需要量及注射劑的制備方法，如將羧甲基纖維素鈉(1.5％)+甘露醇和/或山梨醇(15％)和/或吐溫80(0.1％)溶于生理鹽水中得相應的溶媒，黏度在10cp-650cp(20℃-30℃時)。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)影響藥物和/或緩釋微球懸浮和/或注射的關鍵因素是溶媒的黏度，黏度越大，懸浮效果越好，可注射性越強。這種意外發(fā)現(xiàn)構成了本發(fā)明的主要指數(shù)特征之一。溶媒的黏度取決于助懸劑的黏度，助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時)，優(yōu)選1000cp-3000cp(20℃-30℃時)，最優(yōu)選1500cp-3000cp(20℃-30℃時)。按照此條件所制得的溶媒的黏度為10cp-650cp(20℃-30℃時)，優(yōu)選20cp-650cp(20℃-30℃時)，最優(yōu)選60cp-650cp(20℃-30℃時)。
注射劑的制備有多種方法，一種是將助懸劑為“0”的緩釋微粒(A)直接混于特殊溶媒中，得到相應的緩釋微粒注射劑；另一種是將助懸劑不為“0”的緩釋微粒(A)混于特殊溶媒或普通溶媒中，得到相應的緩釋微粒注射劑；再一種是將緩釋微粒(A)混于普通溶媒中，然后加入助懸劑混勻，得到相應的緩釋微粒注射劑。除外，還可先將緩釋微粒(A)混于特殊溶媒中制得相應的混懸液，然后用真空干燥等辦法去除混懸液中的水分，之后再用特殊溶媒或普通溶媒混懸，得到相應的緩釋微粒注射劑。以上方法只是用于說明而非限制本發(fā)明。值得注意的是，懸浮藥物或緩釋微球(或微囊)在注射劑中的濃度因具體需要而定，可為，但不限于，10-400mg/ml，但以30-300mg/ml為優(yōu)選，以50-200mg/ml最優(yōu)選。注射劑的黏度為50cp-1000cp(20℃-30℃時)，優(yōu)選100cp-1000cp(20℃-30℃時)，最優(yōu)選200cp-650cp(20℃-30℃時)。此黏度適用于18-22號注射針頭和特制的內(nèi)徑更大的(至3毫米)注射針頭。
緩釋注射劑的制備方法是任意的，可用若干種方法制備如，但不限于，混合法、熔融法、溶解法、噴霧干燥法制備微球、溶解法結合冷凍(干燥)粉碎法制成微粉、脂質(zhì)體包藥法及乳化法等。其中以溶解法(即溶劑揮發(fā)法)、干燥法、噴霧干燥法和乳化法為優(yōu)選。微球則可用于制備上述各種緩釋注射劑，其方法是任意的。所用微球的粒徑范圍可在5-400um之間，以10-300um之間為優(yōu)選，以20-200um之間為最優(yōu)選。
微球還可用于制備其他緩釋注射劑，如凝膠注射劑、嵌段共聚物膠束注射劑。其中，嵌段共聚物膠束由疏水親水嵌段共聚物在水溶液中形成，具有球形內(nèi)核外殼結構，疏水嵌段形成內(nèi)核，親水嵌段形成外殼。載藥膠束注射進入體內(nèi)達到控制藥物釋放或靶向治療的目的。所用藥物載體為上述任意一種或其組合。其中優(yōu)選分子量為1000-15000的聚乙二醇(PEG)作為膠束共聚物的親水嵌段，優(yōu)選生物降解聚合物(如PLA、聚丙交酯、聚己內(nèi)酯及其共聚物(分子量1500-25000))作為膠束共聚物的疏水嵌段。嵌段共聚物膠束的粒徑范圍可在10-300um之間，以20-200um之間的為優(yōu)選。凝膠注射劑系將生物降解聚合物(如PLA、PLGA或DL-LA和ε-己內(nèi)酯共聚物)溶于某些兩親性溶媒，再加入藥物與之混溶(或混懸)后形成流動性較好的凝膠，可經(jīng)瘤周或瘤內(nèi)注射。一旦注入，兩親性溶媒很快擴散至體液，而體液中的水分則滲入凝膠，使聚合物固化，緩慢釋放藥物。
緩釋微球還可用于制備緩釋植入劑，所用的藥用輔料可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質(zhì)，但以水溶性高分子聚合物為主選，在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、葵二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLA、PLGA、PLA與PLGA的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物、雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]。聚乳酸(PLA)與聚乙醇酸的的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和乳酸共聚時的含量分別為重量百比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是對羧苯基丙烷(p-CPP)，對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸共聚時的含量分別為重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。
本發(fā)明抗癌藥物緩釋劑的又一種形式是抗癌藥物緩釋劑為緩釋植入劑?？拱┲踩雱┑挠行С煞挚删鶆虻匕b于整個藥用輔料中，也可包裝于載體支持物中心或其表面；可通過直接擴散和/或經(jīng)多聚物降解的方式將有效成分釋放。
緩釋植入劑的特點在于所用的緩釋輔料除高分子聚合物外，還含有上述任意一種或多種其它輔料。添加的藥用輔料統(tǒng)稱為添加劑。添加劑可根據(jù)其功能分為充填劑、致孔劑、賦型劑、分散劑、等滲劑、保存劑、阻滯劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑等。
緩釋植入劑的主要成份可制成多種劑型。如，但不限于，膠囊、緩釋劑、植入劑、緩釋劑植入劑等；呈多種形狀，如，但不限于，顆粒劑、丸劑、片劑、散劑、球形、塊狀、針狀、棒狀、柱狀及膜狀。在各種劑型中，以體內(nèi)緩慢釋放植入劑為優(yōu)選。可為0.1-5mm(粗)×1-10mm(長)的棒狀，也可為片狀等其它形狀。
緩釋植入劑的最佳劑型為生物相容性、可降解吸收的緩釋劑植入，可因不同臨床需要而制成各種形狀及各種劑型。其主要成份的包裝方法和步驟在美國專利中(US5651986)已有詳細描述，包括若干種制備緩釋制劑的方法如，但不限于，(i)把載體支持物粉末與藥物混合然后壓制成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然后固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解于溶劑中，把待包裝的藥物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸發(fā)溶劑，干燥，即所謂的溶解法；(iv)噴霧干燥法；及(v)冷凍干燥法等。所用的有機溶劑為公知的，可為，但不限于，無水乙醇、丙酮、氯仿、二氯甲烷。
緩釋植入劑的抗癌有效成分為雷帕霉素與上述的抗癌藥物的組合，但優(yōu)選如下，均為重量百分比(1)0.01％-20％的雷帕霉素與1-40％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D或更生霉素的組合；或(2)0.01％-20％的雷帕霉素與1-40％的氟尿嘧啶(5-FU)、巰嘌呤、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤、葉酸、左亞葉酸鈣、亞葉酸鈣、卡莫氟、替加氟、優(yōu)福定、尿嘧啶替加氟、托泊替康、阿糖胞苷、環(huán)胞苷或羥基脲的組合。
緩釋微球還可用于制備緩釋植入劑，所用的緩釋輔料可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質(zhì)，在各種高分子聚合物中以水溶性高分子聚合物為主選。
本發(fā)明緩釋植入劑中緩釋輔料及其重量百分比最優(yōu)選如下(1)50-99％的PLA或PLGA或PLA與PLGA的共聚物或混合物；(2)50-99％的聚乙二醇與PLA或PLGA的共聚物；(3)50-99％的聚苯丙生；(4)55-99％的雙脂肪酸與癸二酸共聚物；(5)30-60％的聚苯丙生和30-60％的PLA或30-60％的PLGA；(6)40-95％的木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、殼聚糖、泊洛沙姆或白蛋膠；或(7)40-95％的外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
給藥途徑取決于多種因素，為于原發(fā)或轉移腫瘤所在部位獲得有效濃度，藥物可經(jīng)多種途徑給予，如皮下、腔內(nèi)(如腹腔、胸腔及椎管內(nèi))、瘤內(nèi)、瘤周注射或放置、選擇性動脈注射、淋巴結內(nèi)及骨髓內(nèi)注射。以選擇性動脈注射、腔內(nèi)、瘤內(nèi)、瘤周注射或放置為優(yōu)選。
緩釋植入劑的應用及增效方式同抗癌緩釋注射劑，即局部放置的化療增效劑與其它途徑給藥的抗癌藥物的聯(lián)合、局部放置的抗癌藥物與其它途徑給藥的化療增效劑的聯(lián)合、局部放置的抗癌藥物與局部放置的化療增效劑的聯(lián)合。其中局部應用的抗癌藥物與化療增效劑可單獨或聯(lián)合生產(chǎn)、包裝、銷售、使用。包裝指藥物對輔料而言的載藥過程以及含藥緩釋劑對運輸和/或儲存而言的內(nèi)外包裝。載藥過程包括，但不限于，稱量、溶解、混合、干燥、成形、包衣、噴霧、制粒等。
本發(fā)明可以用于制備治療人及動物的各種腫瘤的藥物制劑，主要為緩釋注射劑或緩釋植入劑，所指腫瘤包括起源于大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、黏膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宮、卵巢、子宮內(nèi)膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結腸、直腸的原發(fā)或轉移的癌或肉瘤或癌肉瘤。
本發(fā)明所制的緩釋注射劑或緩釋植入劑中還可加入其它藥用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼藥、抗凝藥、止血藥等。
通過如下試驗和實施例對本發(fā)明抗實體腫瘤組合物的技術作進一步的描述試驗一、化療增效劑(雷帕霉素)及抗癌藥物的體內(nèi)抑瘤作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個結腸癌腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表1)。第一組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為化療增效劑，第3到6組分別為阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D。第7到10組分別為化療增效劑與阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D的聯(lián)合。除化療增效劑經(jīng)瘤內(nèi)放置外，阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D均為腹腔給藥。除化療增效劑為0.5mg/kg外均為15mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表1)。
表1
注阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D均為抗癌抗生素。結果表明，與對照組相比，化療增效劑(第2組)及抗癌抗生素(第3到6組)單獨應用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)，特別是局部給藥。而聯(lián)合應用(第7到10組)具有明顯的增效作用(P＜0.001)。
試驗二、化療增效劑(雷帕霉素)及抗癌藥物的體內(nèi)抑瘤作用。
按照試驗一所述之方法測定化療增效劑及及抗癌藥物的體內(nèi)抑瘤作用，結果表明，埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D或更生霉素等抗癌藥物能夠明顯增強化療增效劑的抑瘤作用(P＜0.05)。二者單獨應用特別是局部給藥對胰腺癌均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)，而聯(lián)合應用具有明顯的增效作用(P＜0.001)。
試驗三、局部應用抗代謝類抗癌藥物和化療增效劑(雷帕霉素)的抑瘤作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個乳腺癌細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表2)。第一組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為化療增效劑，第3到6組分別為5-氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤和托泊替康。第7到10組分別為化療增效劑與5-氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤和托泊替康的聯(lián)合。所有藥物經(jīng)均為瘤內(nèi)放置，除化療增效劑為0.25mg/kg外均，抗代謝類抗癌藥物均為5mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表2)。
表2
注5-氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤和托泊替康均為抗代謝類抗癌藥物。結果表明，與對照組相比，化療增效劑(第2組)及抗代謝類抗癌藥物(第3到6組)單獨應用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)。然而聯(lián)合應用(第7到10組)具有明顯的增效作用(P＜0.001)。
試驗四、化療增效劑(雷帕霉素)及抗代謝類抗癌藥物的體內(nèi)抑瘤作用。
按照試驗三的方法檢測了化療增效劑及抗代謝類抗癌藥物的體內(nèi)抑瘤作用。結果表明化療增效劑及選自氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤，氟甲氨蝶呤、二氧甲氨蝶呤、左亞葉酸鈣、亞葉酸鈣、卡莫氟、替加氟、優(yōu)福定、拓撲替康、阿糖胞苷、環(huán)胞苷、環(huán)胞苷、羥基脲、羥基胍的抗代謝類抗癌藥物單獨應用對結腸癌均有明顯抑瘤作用(P＜0.05)。而聯(lián)合應用具有明顯的增效作用(P＜0.001)。
試驗五、化療增效劑(雷帕霉素)及抗代謝類抗癌藥物的體內(nèi)抑瘤作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個卵巢癌細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表3)。第1組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為化療增效劑；第3到6組分別為抗代謝抗癌藥物。第7到10組分別為化療增效劑與不同抗代謝抗癌藥物的聯(lián)合。除化療增效劑經(jīng)瘤內(nèi)放置外，卡莫氟、替加氟、優(yōu)福定和鹽酸拓撲替康均為腹腔給藥。除化療增效劑為5mg/kg外均為5mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表3)。
表3
注卡莫氟、替加氟、優(yōu)福定和鹽酸拓撲替康均為抗代謝類抗癌藥物。
試驗六、化療增效劑(雷帕霉素)及抗代謝類抗癌藥物的體內(nèi)抑瘤作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個肺癌細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表4)。第1組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為化療增效劑；第3到6組分別為抗代謝類抗癌藥物。第7到10組分別為化療增效劑與不同抗代謝類抗癌藥物的聯(lián)合。除化療增效劑經(jīng)瘤內(nèi)放置外，卡莫氟、替加氟、8-氮鳥嘌呤和阿糖胞苷均為腹腔給藥。除化療增效劑為4mg/kg外均為16mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表4)。
表4
注卡莫氟、替加氟、8-氮鳥嘌呤和阿糖胞苷均為抗代謝類抗癌藥物。
試驗七、化療增效劑(雷帕霉素)及抗癌藥物的體內(nèi)抑瘤作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個胃癌腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表5)。第一組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為化療增效劑，第3到6組分別為阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D。第7到10組分別為化療增效劑與阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D的聯(lián)合。除化療增效劑經(jīng)瘤內(nèi)放置外，阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D均為腹腔給藥。除化療增效劑為2.5mg/kg外均為15mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表5)。
表5
注阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D均為抗癌抗生素。結果表明，與對照組相比，化療增效劑(第2組)及抗癌抗生素(第3到6組)單獨應用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)，特別是局部給藥。而聯(lián)合應用(第7到10組)具有明顯的增效作用(P＜0.001)。
試驗八、局部應用抗代謝類抗癌藥物和化療增效劑(雷帕霉素)的抑瘤作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個肝癌細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表6)。第一組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為化療增效劑，第3到6組分別為5-氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤和托泊替康。第7到10組分別為化療增效劑與5-氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤和托泊替康的聯(lián)合。所有藥物經(jīng)均為瘤內(nèi)放置，除化療增效劑為2.5mg/kg外均，抗代謝類抗癌藥物均為17.5mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表6)。
表6
注5-氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤和托泊替康均為抗代謝類抗癌藥物。結果表明，與對照組相比，化療增效劑(第2組)及抗代謝類抗癌藥物(第3到6組)單獨應用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)。然而聯(lián)合應用(第7到10組)具有明顯的增效作用(P＜0.001)。
類似增效作用還見于其它化療增效劑與其它抗代謝類抗癌藥物的聯(lián)合，如氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤，氟甲氨蝶呤、左亞葉酸鈣、亞葉酸鈣、卡莫氟、替加氟、優(yōu)福定、托泊替康、鹽酸拓撲替康、阿糖胞苷、環(huán)胞苷、環(huán)胞苷、羥基脲或羥基胍等抗代謝類抗癌藥物與吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、伏他拉尼、培立替尼、羧基氨基三唑、反應停、雷諾胺、血管抑素、內(nèi)皮抑素或血管內(nèi)皮抑素的組合，以及埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D或更生霉素等抗生素類抗癌藥物與甲磺酸伊馬替尼、司馬斯尼、達薩替尼、阿瓦斯丁、卡那替尼、索拉非尼、蘇尼替尼、特奧斯塔、帕尼托馬或馬立馬司他的組合。所試腫瘤細胞包括腦腫瘤(CNS-1、C6、9L)、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)、肝癌、胰腺癌、腎癌及食管癌等。
試驗九、不同分子量聚乳酸制成的化療增效劑緩釋植入劑的體內(nèi)釋放比較以大白鼠為試驗對象，分組(3只/組)并于皮下給予含不同分子量(MW)的聚乳酸(PLA)承載的等量化療增效劑緩釋植入劑。然后分別于1、3、7、14、21、28和35天測藥物于植入劑內(nèi)的剩余量，進而得出其體內(nèi)釋放速度(％)。結果表明，分子量為20000的釋放為1天(8％)、3(28％)、7(56％)、14(82％)、21(90)、28(94)和35(98％)。比較不同分子量聚乳酸制成的化療增效劑(雷帕霉素)緩釋植入劑的體內(nèi)釋放發(fā)現(xiàn)，隨分子量增加而變慢，以第7天為例，與全身給藥組相比，腫瘤抑制率隨聚乳酸分子量增加而提高，依次為72％(MW5000)、68％(MW15000)、56％(MW25000)、52％(MW40000)和46(MW60000)。
試驗十、局部應用抗代謝類抗癌藥物和化療增效劑(雷帕霉素)的抑瘤作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個食道癌細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表7)。第一組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為化療增效劑，第3到6組分別為5-氟尿嘧啶、埃坡霉素B、甲氨蝶呤和托泊替康。第7到10組分別為化療增效劑與5-氟尿嘧啶、埃坡霉素B、甲氨蝶呤和托泊替康的聯(lián)合。所有藥物經(jīng)均為瘤內(nèi)放置，除化療增效劑為2.5mg/kg外均，抗代謝類抗癌藥物均為17.5mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表7)。
表7
注5-氟尿嘧啶、埃坡霉素、甲氨蝶呤和托泊替康均為抗代謝類抗癌藥物。結果表明，與對照組相比，化療增效劑(第2組)及抗代謝類抗癌藥物(第3到6組)單獨應用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)。然而聯(lián)合應用(第7到10組)具有明顯的增效作用(P＜0.001)。
試驗十一、局部應用抗代謝類抗癌藥物和雷帕霉素的抑瘤作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個食道癌細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其分為以下10組(見表8)。第一組為對照，第2到10組為治療組，其中，第2組為雷帕霉素，第3到6組分別為5-氟尿嘧啶、埃坡霉素B、甲氨蝶呤和托泊替康。第7到10組分別為化療增效劑(雷帕霉素)與5-氟尿嘧啶、埃坡霉素B、甲氨蝶呤和托泊替康的聯(lián)合。所有藥物經(jīng)均為瘤內(nèi)放置，除化療增效劑為5mg/kg外均，抗代謝類抗癌藥物均為15mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表8)。
表8
注5-氟尿嘧啶、埃坡霉素B、甲氨蝶呤和托泊替康均為抗代謝類抗癌藥物。結果表明，與對照組相比，化療增效劑(第2組)及抗代謝類抗癌藥物(第3到6組)單獨應用均有一定的抑瘤作用(P＜0.05)。然而聯(lián)合應用(第7到10組)具有明顯的增效作用(P＜0.001)。
同樣的結果還見于用聚乳酸為輔料制成的緩釋劑，包括氟尿嘧啶、巰嘌呤、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤、葉酸、亞葉酸鈣、卡莫氟、替加氟、優(yōu)福定、尿嘧啶替加氟、8-氮鳥嘌呤、托泊替康、鹽酸拓撲替康、阿糖胞苷、羥基脲或羥基胍等抗代謝類抗癌藥物與化療增效劑的組合，以及埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D或更生霉素等抗生素類抗癌藥物與化療增效劑的組合。
特別注意的是，本發(fā)明的緩釋劑，特別是緩釋注射劑操作簡單方便、重復性好。不僅療效好，毒副作用小。
不同的藥物包裝與不同的生物降解高分子的釋藥特性不同。進一步的研究發(fā)現(xiàn)，最適宜于本發(fā)明藥物緩釋的緩釋輔料為外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚體-癸二酸)、聚(富馬酸-癸二酸)、聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、殼聚糖、泊洛沙姆、白蛋白膠之一或其組合；最適宜的助懸劑為甲基纖維素、羥甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40、土溫80之一或其組合。
總之，實驗結果表明本發(fā)明中的化療增效劑對所列抗代謝類抗癌藥物或抗生素類抗癌藥物的增效作用。因此，本發(fā)明所述的抗癌復合物的有效成分為化療增效劑和任意一種(或多種)抗代謝類抗癌藥物或抗生素類抗癌藥物的聯(lián)合或單獨包裝。以上有效成分可制成任意劑型或形狀，但以緩慢釋放劑型為優(yōu)選，主要為緩釋注射劑或緩釋植入劑。
具體實施方式
實施例1.
將90mg分子量峰值為25000-40000的聚乳酸(PLGA，50∶50)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入2mg雷帕霉素和8mg甲氨蝶呤，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得含2％雷帕霉素和8％甲氨蝶呤的抗癌緩釋。均為重量百分比。該抗實體腫瘤藥物組合物在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為25-50天。
實施例2.
如實施例1所述，所不同的是聚乳酸的分子量峰值為35000-60000的(PLGA，75∶25)，抗癌有效成分及重量百分比為下列之一(1)0.01-5％的雷帕霉素與5-20％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D或更生霉素的組合；或(2)0.01-5％的雷帕霉素與5-20％的氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤，氟甲氨蝶呤、左亞葉酸鈣、亞葉酸鈣、卡莫氟、替加氟、優(yōu)福定、托泊替康、鹽酸拓撲替康、阿糖胞苷、環(huán)胞苷或羥基脲的組合。
實施例3.
將80mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)為20∶80)共聚物放入容器中，加100ml二氯甲烷，溶解混勻后，加入1mg雷帕霉素和19mg氟尿嘧啶，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含1％雷帕霉素和19％氟尿嘧啶的注射用微球。然后將微球懸浮于含15％甘露醇的生理鹽水中，制得相應的混懸型緩釋注射劑，黏度為20cp-300cp(20℃-30℃時)。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為30-40天左右。
實施例4.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例3相同，但所不同的是所含抗癌有效成分及其重量百分比為5-20％的雷帕霉素與5-25％的氟尿嘧啶的組合；所用的緩釋輔料為聚苯丙生(50∶50)，外消旋聚乳酸(分子量峰值為20000-60000)、PLGA(75∶25或50∶50)、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。緩釋注射劑的黏度為200cp-600cp(20℃-30℃時)。
實施例5.
將70mg分子量峰值為20000-60000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入15mg阿霉素和15mg雷帕霉素，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的含藥固體組合物冷凍粉碎制成含15％阿霉素和15％雷帕霉素的微粉，然后懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉的生理鹽水中，制得相應的混懸型緩釋注射劑，黏度為200cp-360cp(20℃-30℃時)。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為20-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為20-30天左右。
實施例6加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例5相同，但所不同的是分子量峰值為10000-20000的聚乳酸，所含抗癌有效成分及其重量百分比為(1)5％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C或放線菌素D和10％雷帕霉素的組合；(2)10％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素或表阿霉素和10％的雷帕霉的組合；(3)15％的絲裂霉素C或放線菌素D和5％的雷帕霉素的組合；(4)25％的阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C或放線菌素D和1％的雷帕霉素的組合。
注射劑的黏度為10cp-650cp(20℃-30℃時)。
實施例7.
將30mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)為20∶80)和40mg分子量峰值為20000-40000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入25mg表阿霉素和5mg雷帕霉素，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含25％表阿霉素與5％雷帕霉素的注射用微球。然后將微球懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉和0.5％吐溫80的生理鹽水中，制得相應的混懸型緩釋注射劑，黏度為120cp-280cp(25℃-30℃時)。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為18-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為30-35天左右。
實施例8.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例7相同，但所不同的是所用輔料為50mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)為40∶60)和30mg分子量峰值為10000-20000的聚乳酸(PLA)，含抗癌有效成分為0.1-10％的雷帕霉素與1-19％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D或更生霉素的組合；緩釋注射劑黏度為440cp-650cp(25℃-30℃時)。
實施例9將40mg聚苯丙生(50∶50)和40mg分子量峰值為20000-40000的聚乳酸(PLGA，50∶50)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入7.5mg埃坡霉素和12.5mg溶菌酶，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含7.5％埃坡霉素和12.5％雷帕霉素的注射用微球。然后將微球懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉和15％山梨醇和0.2％吐溫80的生理鹽水中，制得相應的混懸型緩釋注射劑，黏度為100cp-160cp(25℃-30℃時)。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為20-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為20-30天左右。
實施例10加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例9相同，但所不同的是所用輔料為30mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)為40∶60)和50mg分子量峰值為20000-40000的聚乳酸(PLGA，75∶25)，所含抗癌有效成分為1-15％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D或更生霉素與1-5％的雷帕霉素的組合；黏度為560cp-640cp(25℃-30℃時)。
實施例11將50mg分子量峰值為10000-20000的PLGA(75∶25)和40mg分子量峰值為20000-40000的PLA放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入8mg阿霉素和2mg雷帕霉素，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含8％阿霉素和2％雷帕霉素的注射用微球。然后將微球經(jīng)壓片法制得相應的緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時間為30-40天左右。
實施例12加工成緩釋植入劑的方法步驟與實施例11相同，但所不同的是所用緩釋輔料為60-95％的單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸或聚乙二醇/聚乳酸共聚物，所含抗癌有效成分為10％阿霉素、埃坡霉素、埃坡霉素B和5-20％雷帕霉素的組合。
實施例13將70份雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)放入容器中，加適量二氯甲烷溶解混勻后，加入10份埃坡霉素和20份雷帕霉素，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含10％埃坡霉素和20％雷帕霉素的注射用微球。然后將微球經(jīng)壓片法制得相應的緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為15-20天，在小鼠皮下的釋藥時間為35-50天左右。
實施例14加工成緩釋植入劑的方法步驟與實施例11-13相同，但所不同的是所用輔料為聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]或聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]，含抗癌有效成分及重量百分比為(1)0.01％-20％的雷帕霉素與1-40％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D或更生霉素的組合；或(2)0.01％-20％的雷帕霉素與1-40％的氟尿嘧啶(5-FU)、巰嘌呤、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤、葉酸、左亞葉酸鈣、亞葉酸鈣、卡莫氟、替加氟、優(yōu)福定、尿嘧啶替加氟、托泊替康、阿糖胞苷、環(huán)胞苷或羥基脲的組合。
實施例15加工成緩釋劑的方法步驟與實施例1-14相同，但所不同的是所用的緩釋輔料為下列之一或其組合a)聚乳酸(PLA)，分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；b)聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)，其中，聚乙醇酸和羥基乙酸的比例為50-95∶50-50，分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；c)聚乳酸(PLA)與PLGA的混合物或共聚物；
d)聚苯丙生，對羧苯基丙烷(p-CPP)∶癸二酸(SA)為10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；e)雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)；f)聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]；g)聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]；h)木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、殼聚糖、泊洛沙姆或白蛋膠；i)外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
實施例16加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例1-10相同，但所不同的是所用的助懸劑分別為下列之一或其組合a)0.5-3.0％羧甲基纖維素(鈉)；b)5-15％甘露醇；c)5-15％山梨醇；d)0.1-1.5％表面活性物質(zhì)；e)0.1-0.5％吐溫20。
實施例17.
將70份分子量峰值為20000-60000的聚乳酸(PLA)放入容器中，加適量二氯甲烷，溶解混勻后加入25份氟尿嘧啶和5份雷帕霉素，重新?lián)u勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的含藥固體組合物冷凍粉碎制成含25％氟尿嘧啶和5％雷帕霉素的微粉，然后懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉的生理鹽水中，制得相應的混懸型緩釋注射劑，黏度為220cp-340cp(20℃-30℃時)。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時間為20-30天左右。
實施例18加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例5相同，但所不同的是所含抗癌有效成分及其重量百分比為(1)0.1％-20％的雷帕霉素與1-40％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D或更生霉素的組合；或
(2)0.1％-20％的雷帕霉素與1-40％的氟尿嘧啶、巰嘌呤、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤、葉酸、左亞葉酸鈣、亞葉酸鈣、卡莫氟、替加氟、優(yōu)福定、尿嘧啶替加氟、托泊替康、阿糖胞苷、環(huán)胞苷或羥基脲的組合。
注射劑的黏度為200cp-650cp(20℃-30℃時)。
以上實施例僅用于說明，而并非局限本發(fā)明的應用。
本發(fā)明所公開和保護的內(nèi)容見權利要求。
以上結果表明本發(fā)明所用的化療增效劑與其抗癌藥物的組合以及由此產(chǎn)生的抗癌增效作用具有普遍意義，是用于各種實體腫瘤。因此，化療增效劑與其抗癌藥物聯(lián)合時的劑量選擇可以根據(jù)本發(fā)明的有關數(shù)據(jù)推出。
上述實施例對本發(fā)明的技術方法作了進一步的描述。是為了舉例說明而不是要限定本發(fā)明的范圍。實際上，除本文所示和所述之外的本發(fā)明的各種改變，對于本領域熟練技術人員來說都可從說明書和圖表中顯而易見。當然這些改變應在所附的權利要求的范圍內(nèi)。因此，應該認識到前面的說明書著重公開了本發(fā)明的某些特定實施方式及對其所做的等同改變或替換都是在所附權利要求書所述的構思和范圍內(nèi)。
權利要求
1.一種含化療藥物及其增效劑的抗實體腫瘤緩釋劑，其特征在于化療藥物選自抗腫瘤抗生素和/或抗代謝類藥物，增效劑為雷帕霉素。
2.根據(jù)權利要求1所述之抗實體腫瘤緩釋劑，其特征在于抗實體腫瘤緩釋劑為緩釋注射劑，由以下成分組成(A)緩釋微球，包括抗癌有效成分 0.01-60％緩釋輔料 41-99.99％助懸劑 0.0-30％以上為重量百分比和(B)溶媒，為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。其中，助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、碘甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合，助懸劑的黏度為100cp 3000cp(20℃30℃時)。
3.根據(jù)權利要求2所述之緩釋注射劑，其特征在于所用的助懸劑選自下列之一或其組合a)0.5-3.0％羧甲基纖維素(鈉)；b)5-15％甘露醇；c)5-15％山梨醇；d)0.1-1.5％表面活性物質(zhì)；e)0.1-0.5％吐溫20；f)(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇或卡波姆；g)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+0.1-0.5％土溫80；h)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土溫80；或i)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土溫80。
4.根據(jù)權利要求1所述之抗實體腫瘤緩釋劑，其特征在于抗實體腫瘤緩釋劑為緩釋植入劑，由抗癌有效成分和緩釋輔料組成。
5.根據(jù)權利要求1所述之緩釋劑，其特征在于所述抗腫瘤抗生素選自埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D、更生霉素及其鹽。
6.根據(jù)權利要求1所述之緩釋劑，其特征在于所述抗代謝類抗癌藥物選自氟脲苷、脫氧氟尿苷、5-脫氧氟尿苷、丙硫氧嘧啶、氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤、葉酸、卡莫氟、替加氟、優(yōu)福定、尿嘧啶替加氟、8-氮鳥嘌呤、托泊替康、鹽酸拓撲替康、阿糖胞苷、環(huán)胞苷、環(huán)胞苷、羥基脲、羥基胍及其鹽。
7.根據(jù)權利要求1所述之緩釋劑，其特征在于抗癌有效成分為下列之一(1)0.01％-20％的雷帕霉素與1-40％的埃坡霉素、埃坡霉素B、阿霉素、表阿霉素、絲裂霉素C、放線菌素D或更生霉素的組合；或(2)0.01％-20％的雷帕霉素與1-40％的氟尿嘧啶(5-FU)、巰嘌呤、6-巰基嘌呤、甲氨蝶呤、葉酸、左亞葉酸鈣、亞葉酸鈣、卡莫氟、替加氟、優(yōu)福定、尿嘧啶替加氟、托泊替康、阿糖胞苷、環(huán)胞苷或羥基脲的組合。
8.根據(jù)權利要求1所述之抗癌緩釋劑，其特征在于所述緩釋輔料選自下列之一或其組合(1)PLA或PLGA或PLA與PLGA的共聚物或混合物；(2)聚乙二醇與PLA或PLGA的共聚物；(3)聚苯丙生；(4)雙脂肪酸與癸二酸共聚物；(5)聚苯丙生和PLA或PLGA的組合；(6)木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠、殼聚糖、泊洛沙姆或白蛋膠；或(7)外消旋聚乳酸、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物、端羧基聚乳酸或端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物。
9.根據(jù)權利要求1所述之抗癌緩釋劑，其特征在于所述緩釋輔料選自下列之一或其組合a)聚乳酸的分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；b)聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物中，聚乙醇酸和羥基乙酸的比例為50-95∶50-50，分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；c)聚苯丙生中，對羧苯基丙烷癸二酸為10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40。
10.根據(jù)權利要求1所述之抗癌緩釋劑，其特征在于所述之緩釋劑用于制備治療起源于人及動物大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、粘膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宮、卵巢、子宮內(nèi)膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結腸或直腸的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤的緩釋劑，經(jīng)瘤內(nèi)或瘤周注射或放置給藥。
全文摘要
一種含化療藥物及其增效劑的抗實體腫瘤緩釋劑為緩釋注射劑，由緩釋微球和溶媒組成。其中緩釋微球包括抗癌有效成分和緩釋輔料，抗癌有效成分為化療增效劑和選自抗腫瘤抗生素和/或抗代謝類藥物的抗癌藥物的組合，溶媒為含助懸劑的特殊溶媒；化療增效劑選自雷帕霉素；緩釋輔料選自聚乳酸共聚物、單甲基聚乙二醇/聚乳酸、聚乙二醇/聚乳酸、乙醇酸共聚物、脂肪酸與癸二酸共聚物等；助懸劑的黏度為80cp－3000cp(20℃－30℃時)，選自羧甲基纖維素等；緩釋微球還可制成緩釋植入劑，腫瘤內(nèi)或瘤周注射或放置該緩釋劑，能于局部釋藥達約30－50天左右。緩釋劑單獨應用能有效抑制腫瘤生長，促進藥物瘤內(nèi)擴散，與化療和/或放療等非手術療法聯(lián)合應用還可顯著增強其療效。
文檔編號A61K45/00GK1973817SQ20061020133
公開日2007年6月6日 申請日期2006年12月20日 優(yōu)先權日2006年12月20日
發(fā)明者孔慶忠, 劉玉燕 申請人:山東藍金生物工程有限公司, 孔慶忠