專利名稱：作為抗病毒劑的嘌呤非環(huán)核苷的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及嘌呤非環(huán)核苷作為治療和/或預(yù)防乙型肝炎藥劑的用途、用于此項(xiàng)治療的藥物組合物以及新型的嘌呤非環(huán)核苷。
感染了人類乙型肝炎病毒是一個(gè)相當(dāng)大的公眾健康問題，因?yàn)榇瞬《居幸鸺毙院吐愿腥镜哪芰?。慢性乙型肝炎感?以下簡(jiǎn)稱為HBV)會(huì)在人體中引起嚴(yán)重的肝臟疾病并常常導(dǎo)致肝硬化和肝細(xì)胞的癌變。目前還沒有能成功地控制慢性HBV感染的有效治療手段。全世界有超過2.5億的慢性HBV帶菌者無法從現(xiàn)有的商品疫苗中受益。
現(xiàn)有的HBV治療手段功效還不夠，或者是伴有毒副作用。因此，治療HBV的有效手段是當(dāng)務(wù)之急。
目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，結(jié)構(gòu)式(1)化合物是對(duì)抗乙型肝炎病毒的活性藥劑。因此，本發(fā)明一方面提供了結(jié)構(gòu)式(1)化合物或者鹽及其藥理許用的衍生物的用途
其中R1是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；R2是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；和R和R’互不相關(guān)地選擇自氫、烷基和芳基；用于治療和/或預(yù)防乙型肝炎病毒感染。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這些化合物在抗乙型肝炎檢驗(yàn)中顯示出相當(dāng)高的活性。
優(yōu)選的R1是羥基或能在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成羥基的基團(tuán)。
優(yōu)選的R2是氨基；或者是能在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成氨基的基團(tuán)。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療或預(yù)防乙型肝炎病毒感染的方法，其方法包括，給有需要的病人服用一種有效量的結(jié)構(gòu)式(1)化合物、鹽及其藥理許用的衍生物。
本發(fā)明也提供了一種結(jié)構(gòu)式(1)的化合物、其鹽以及藥理許用的衍生物，用于治療或預(yù)防HBV。
本發(fā)明化合物進(jìn)一步可用于制造治療或預(yù)防HBV的藥物。因此，本發(fā)明提供了用于所述治療或預(yù)防的藥物組合物，其包括一種結(jié)構(gòu)式(1)的化合物、其鹽或藥理許用的衍生物，連同一種藥理許用的載體或稀釋劑。
本發(fā)明也提供了結(jié)構(gòu)式(1)化合物、鹽或其藥理許用鹽的用途，用于制造治療或預(yù)防HBV用藥物。
結(jié)構(gòu)式(1)化合物的鹽優(yōu)選是藥理許用的，但是要知道其非藥理許用的鹽也是屬于本發(fā)明范圍之內(nèi)的，因?yàn)樗鼈冊(cè)谒幚碓S用鹽的制備過程中是有用的中間體。藥理許用的鹽包括，化合物的常見無毒鹽或季銨鹽，比如可制備自有機(jī)或無機(jī)酸或堿。酸加合鹽的例子包括，但并不限于，來自于藥理許用的酸如乙酸、丙酸、檸檬酸、乳酸、甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、水楊酸、抗壞血酸、鹽酸、正磷酸、硫酸和氫溴酸。堿鹽包括，但并不限于，來自于藥理許用的陽(yáng)離子如鈉、鉀、鋰、鈣、鎂、氨和烷胺。以適當(dāng)?shù)慕饘贇溲趸锾幚斫Y(jié)構(gòu)式(1)的化合物對(duì)其進(jìn)行制備。借助一些試劑，比如低級(jí)鹵代烷如氯代、溴代和碘代的甲烷、乙烷、丙烷和丁烷；硫酸二烷酯如硫酸二甲酯和二乙酯；及其它，也可將含氮的堿性基團(tuán)季銨化。
本發(fā)明化合物可以是晶態(tài)或溶劑化物(比如水合物)，兩種狀態(tài)都?xì)w屬于本發(fā)明的范圍。溶劑化方法在現(xiàn)有技術(shù)中是廣為人知的。
藥理許用的衍生物可包括任何藥理許用的鹽、水合物、藥物前體，或者是任何能在用藥者服藥過程中給出(直接或間接)結(jié)構(gòu)式(1)化合物或其抗病毒活性代謝物或產(chǎn)物的其它化合物。比如非環(huán)側(cè)鏈上的羥基為磷酸酯所代替的化合物，是屬于藥理許用衍生物的范圍的。
“藥物前體”一詞，取其最廣的意義并包括能在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成本發(fā)明化合物的衍生物。此類衍生物是本領(lǐng)域熟練的人員很容易想到的，比如化合物，其中R1是能在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成羥基的基團(tuán)；或者R2是能在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成氨基的基團(tuán)；或者是化合物，其中非環(huán)側(cè)鏈上的自由羥基基團(tuán)轉(zhuǎn)變成能在體內(nèi)轉(zhuǎn)回羥基基團(tuán)的酯、碳酸酯或氨基甲酸酯等基團(tuán)。藥物前體可包括對(duì)本發(fā)明化合物的一個(gè)或多個(gè)官能團(tuán)所做的改變。
縱觀本專述，“能在體內(nèi)發(fā)生轉(zhuǎn)變的基團(tuán)”這句話是同其它官能團(tuán)相比而言的，包括所有的官能團(tuán)或這些基團(tuán)的衍生物，其經(jīng)哺乳動(dòng)物服用后可轉(zhuǎn)變成所述的官能團(tuán)。借助常規(guī)的酶催化法或動(dòng)物試驗(yàn)，本領(lǐng)域熟練的人員很容易確定一種基團(tuán)是否能在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成所述的官能團(tuán)。
要知道的是，結(jié)構(gòu)式(1)化合物的一些衍生物可具有不對(duì)稱結(jié)構(gòu)，并因此會(huì)存在著超過一個(gè)的立體異構(gòu)體。本發(fā)明涵蓋了這些異構(gòu)體的每種形式及其混合物，包括外消旋物。異構(gòu)體一般可借助色譜法或者利用拆解試劑進(jìn)行分離?？蛇x地，各個(gè)異構(gòu)體的制備可通過應(yīng)用了手性中間體或酶的不對(duì)稱合成。
優(yōu)選R1是羥基或是能在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成羥基的基團(tuán)。
優(yōu)選R2是氨基，或是能在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成氨基的基團(tuán)。
有些結(jié)構(gòu)式(1)的化合物是新型的，因此本發(fā)明也提供了結(jié)構(gòu)式(1a)化合物
其中R1是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；R2是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；和R和R’互不相關(guān)地選擇自氫、烷基和芳基；和鹽及其藥理許用的衍生物；只是不包括如下的化合物9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-鳥嘌呤、9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-腺嘌呤、9-[(2-異丙基-1，3-二噁烷-5-基)甲基]-鳥嘌呤和9-[(2-異丙基-1，3-二噁烷-5-基)甲基]-腺嘌呤。
據(jù)Martin等人(1986)報(bào)道，R1是OH而R2是NH2的結(jié)構(gòu)式(1)化合物，對(duì)1型皰疹單病毒是非活性的，并且是此病毒胸苷激酶的不良底物。
縱觀本專述，烷基這個(gè)詞，無論是單獨(dú)使用還是用于復(fù)合詞中，比如說鹵代烷基或烷基酸，除非另有說明，指的都是直鏈C1-30烷基或支鏈C3-30烷基以及支化或非支化的C3-30環(huán)烷基。除非另有說明，這些基團(tuán)可以是飽和的或不飽和的。
此處所用的“芳基”一詞指的是包括或者由一個(gè)或多個(gè)芳香環(huán)構(gòu)成的任何化合物。芳香環(huán)可以是碳環(huán)、雜環(huán)或假芳香性的，并且可以是單或多環(huán)系統(tǒng)，而且優(yōu)選含有2～20個(gè)碳原子。芳香環(huán)也可含有一個(gè)或多個(gè)選擇自N、S、O和P的雜原子。適宜環(huán)的例子包括，但并不限于，苯、聯(lián)苯、三聯(lián)苯、四聯(lián)苯、萘、四氫化萘、1-芐基萘、蒽、二氫化蒽、苯并蒽、二苯并蒽、菲、苝、吡啶、4-苯基吡啶、3-苯基吡啶、噻吩、苯并噻吩、萘并噻吩、噻蒽、呋喃、芘、異苯并呋喃、苯并吡喃、咕噸、氧硫雜蒽、吡咯、咪唑、吡唑、吡嗪、嘧啶、噠嗪、吲哚、中氮茚、異吲哚、嘌呤、喹啉、異喹啉、2，3-二氮雜萘、喹喔啉、喹唑啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、吩嗪、異噻唑、異噁唑和吩噁嗪等，每種都可選被取代?！凹俜枷阈浴币辉~指的是一種環(huán)系統(tǒng)，雖然其芳香性不嚴(yán)格但卻因電子的離域化而得以穩(wěn)定并且與芳香環(huán)的行為相似。假芳香環(huán)的例子包括，但并不限于，呋喃、噻吩、吡咯等。
縱觀本專述，烷氧基這個(gè)詞，無論是單獨(dú)使用還是用于復(fù)合詞中，比如說鹵代烷氧基，除非另有說明，指的都是直鏈C1-30烷氧基或支鏈C3-30烷氧基以及支化或非支化C3-30的環(huán)烷氧基。除非另有說明，這些基團(tuán)可以是飽和的或不飽和的。
除非另有說明，“酯”一詞指的就是相當(dāng)于酯的化合物或衍生物，由醇與有機(jī)酸，優(yōu)選羧酸的反應(yīng)生成。特別優(yōu)選的成酯羧酸包括氨基酸和烷基酸。優(yōu)選的氨基酸是脂肪族氨基酸，比如纈氨酸和異亮氨酸，優(yōu)選其L構(gòu)型。優(yōu)選的烷基酸包括C2-C4烷基酸和C11-C22脂肪酸，如月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、山崳酸、肉豆蔻腦酸、肉豆蔻反油酸、棕櫚油酸、棕櫚反油酸、正6-十八烯酸、油酸、反油酸、芥酸或順蕪酸。
結(jié)構(gòu)式(1)和結(jié)構(gòu)式(1a)化合物以及結(jié)構(gòu)式(1)和結(jié)構(gòu)式(1a)化合物的藥理許用衍生物，其優(yōu)選類組是結(jié)構(gòu)式(4)的化合物
其中X是氫或羥基；R5和R6相同或不同，同與其相連的氧原子一起形成羥基基團(tuán)、酯、碳酸酯、氨基甲酸酯或硫代碳酸酯；優(yōu)選羥基或酯；及其鹽。一些結(jié)構(gòu)式(4)化合物的例子示于表1中。表1
再者，本發(fā)明另一方面提供了一種制備結(jié)構(gòu)式(1)化合物、鹽及其藥理許用衍生物的方法。這些化合物可通過嘌呤衍生物(2)與結(jié)構(gòu)式(3)化合物的反應(yīng)進(jìn)行制備。嘌呤衍生物(2)的基團(tuán)R1可以是結(jié)構(gòu)式(1)化合物R1所轄的任何基團(tuán)，或者是能借助現(xiàn)有技術(shù)已知的方法轉(zhuǎn)變成這些基團(tuán)的任何基團(tuán)，這些基團(tuán)包括氯、溴或碘；而R2可以是結(jié)構(gòu)式(1)化合物R2所轄的任何基團(tuán)，或者是能借助現(xiàn)有技術(shù)已知的方法轉(zhuǎn)變成這些基團(tuán)的任何基團(tuán)。在化合物(3)中，Z是任何適宜的離去基團(tuán)，比如硫酸甲酯或溴，而R3和R4是羥基或可轉(zhuǎn)變成羥基的基團(tuán)，此類基團(tuán)包括醚和酯。對(duì)本領(lǐng)域熟練的人而言，如何進(jìn)行轉(zhuǎn)變是已知的。R3和R4可彼此相連，構(gòu)成可選取代的5或6元環(huán)系統(tǒng)。
結(jié)構(gòu)式(2)的化合物可從市面購(gòu)得或者可按文獻(xiàn)方法制備。結(jié)構(gòu)式(3)化合物的制備是，可按文獻(xiàn)的方法或者遵照實(shí)施例1步驟A～C或?qū)嵤├?可選途徑的步驟A～E中所述方法的路線，分別參見方案1和2。本領(lǐng)域的人知道，可對(duì)具體的實(shí)施方法做出多種改變。
方案1的實(shí)施例1中所確定的結(jié)構(gòu)式(3)化合物的制備方法是特別有用的，并更可廣泛地適用于非環(huán)核苷同系物的合成，而不只限于特定的實(shí)施例。步驟B的一般方法體現(xiàn)了本發(fā)明的另一特點(diǎn)。因此，在適當(dāng)?shù)臈l件下，以約一個(gè)當(dāng)量的原酸三烷酯，優(yōu)選原乙酸三乙酯處理對(duì)稱的三醇(5)，優(yōu)選n為1或2，可將其轉(zhuǎn)變成二酯(6)，然后在適當(dāng)?shù)臈l件下以約一個(gè)當(dāng)量的水進(jìn)行處理，接著在適當(dāng)?shù)臈l件下以水處理。然后可將二酯經(jīng)常法分離出來，簡(jiǎn)單的辦法是，以弱堿如碳酸氫鈉小心地中和混合物，然后將其萃取到有機(jī)溶劑中。基于所選的特定三醇和原酸三烷酯，本領(lǐng)域熟練的人很容易確定什么樣的條件是適當(dāng)?shù)摹?
可將二酯(6)上的羥基殘基轉(zhuǎn)變成離去基團(tuán)Z，而得到通式(3)的二酯化合物，其中n為1。
結(jié)構(gòu)式(6)化合物如2-羥甲基-1，3-丙二醇二醋酸酯以及包括通式(3)的二酯化合物如硫酸甲3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-酯，都是新型的并構(gòu)成了本發(fā)明的進(jìn)一步的特點(diǎn)。在化合物(5)和(6)中，n優(yōu)選是1。
借助現(xiàn)有技術(shù)已知的常用方法，很容易將結(jié)構(gòu)式(1)化合物的非環(huán)羥基基團(tuán)在非環(huán)的側(cè)鏈上轉(zhuǎn)變成酯、醚、磷酸基團(tuán)或這些基團(tuán)的混合物。在某些情況下，為制備所需的目標(biāo)衍生物，采用結(jié)構(gòu)式(1)化合物的保護(hù)中間體是有用的。這類中間體可按標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行制備，并且當(dāng)不再需要保護(hù)基團(tuán)時(shí)可按標(biāo)準(zhǔn)方法將其除掉，如Greene所述。適宜的保護(hù)基團(tuán)例是三甲硅烷基和單甲氧基三苯甲游基基團(tuán)。
可借助任何常用的方法進(jìn)行酰化和烷基化，比如現(xiàn)有技術(shù)所公知的或在Wiley-Interscience出版的March’s Advanced OrganicChemistry第三版中所描述或引用的。適于結(jié)構(gòu)式(1)化合物?；幚淼孽；瘎├囚人?、酰鹵和酸酐。反應(yīng)可按常法進(jìn)行，比如在溶劑如吡啶、二甲基甲脒等中，可選在偶聯(lián)劑如N，N’-二環(huán)己基碳化二亞胺的存在下，并可選在堿催化劑如4-二甲基氨基吡啶的存在下。反應(yīng)產(chǎn)物可按常法分離。適于結(jié)構(gòu)式(1)化合物烷基化處理的烷基化劑例是鹵代烷如氯代、溴代和碘代的甲烷、乙烷、丙烷和芐；及硫酸二烷酯如硫酸二甲酯和二乙酯。
對(duì)于氨基酸或其官能等同物如鹵代酸，為避免副反應(yīng)，采用氨基酸或氨基酸等同物的氨基保護(hù)衍生物如芐氧基羰基衍生物是有利的。這類衍生物可從市面購(gòu)得。保護(hù)基團(tuán)可按標(biāo)準(zhǔn)方法除掉。
烷基化和?；磻?yīng)能制備化合物(1)的單純衍生物，引入一個(gè)或多個(gè)?；蛲榛鶊F(tuán)，也能夠制備引入多個(gè)?；蛲榛鶊F(tuán)的化合物的混合物。產(chǎn)量與許多因素有關(guān)，比如反應(yīng)試劑的相對(duì)量和化學(xué)結(jié)構(gòu)、反應(yīng)的物理?xiàng)l件及溶劑系統(tǒng)。如此制備的任何混合物都可按照標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行分離，優(yōu)選色譜法。
本領(lǐng)域熟練的人員知道，可制備出帶有不同?；?或烷基混合基團(tuán)的結(jié)構(gòu)式(1)化合物衍生物。此類衍生物屬于本發(fā)明的范圍。
結(jié)構(gòu)式(1)化合物的保護(hù)中間體也可用于制備含有磷酸酯的化合物(1)的衍生物。
本發(fā)明的化合物也可與已知的抗病毒劑或抗反轉(zhuǎn)錄病毒劑或用于治療病毒感染的其它藥物配合使用。此類其它藥物的代表例包括免疫調(diào)節(jié)劑、免疫刺激劑和抗生素。代表性的抗病毒劑包括AZT、3TC、Acyclovir、Famciclovir、ddI、ddC、Ganciclovir、Saquanivir、Loviride、其它的非核苷酸反轉(zhuǎn)錄酶(RT)抑制劑及蛋白酶抑制劑。代表性的免疫調(diào)節(jié)劑和免疫刺激劑包括各種白細(xì)胞間素、細(xì)胞分裂素、抗體制劑、輸血和細(xì)胞傳輸。代表性的抗生素包括殺真菌劑、滅菌劑和抗卡氏肺囊蟲劑。
如果配制成固定的劑量，復(fù)合制品按下述的劑量范圍選用本發(fā)明的化合物，而其它的藥理活性劑則取其適當(dāng)?shù)膭┝糠秶?。?dāng)復(fù)配不可行時(shí)，本發(fā)明的化合物可在已知的抗病毒劑、抗反轉(zhuǎn)錄病毒劑或藥劑之后服用。
有效量指的是活性化合物的量，在給病人單或多劑量用藥的過程中，會(huì)有效地控制病毒如HBV的感染，或在病人體內(nèi)達(dá)到血液或組織濃度，它等于在用以確定化合物臨床抗病毒活性的檢驗(yàn)中顯示出對(duì)病毒如HBV有抑制作用的活性化合物濃度。如Korba和Gerin所述的檢驗(yàn)法。
這里所說的控制病毒感染，指的是減慢、擾亂、捕獲或阻止其生長(zhǎng)或復(fù)制，而并不一定表示將病毒徹底地消滅了。
控制病毒感染在治療和/預(yù)防此類病毒感染中是有用的。
當(dāng)本發(fā)明化合物的服用對(duì)象是人時(shí)，每天的劑量通常由有關(guān)的藥劑師來決定，劑量經(jīng)常會(huì)隨年齡、體重和每個(gè)病人的反應(yīng)以及病人癥狀的輕重而變化。一般地，本發(fā)明化合物的適宜劑量為每天0.1～50mg/kg服藥者體重，優(yōu)選在每天0.5～10mg/kg體重的范圍內(nèi)。所需的劑量?jī)?yōu)選制成二、三、四、五、六或更多的分劑量，一天內(nèi)以適當(dāng)?shù)拈g次服用。分劑量可按單位劑型服用，比如每單位劑型含有1～1000mg，優(yōu)選10～500mg的活性成分。
本發(fā)明的化合物，此處也稱之為活性成分，可通過任何適宜的途徑服用用以治療，包括口、直腸、鼻、局部(包括口腔和舌下)、陰道和腸胃外用藥(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)和皮內(nèi))。優(yōu)選通過口途徑用藥，但是要知道的是，優(yōu)選的途徑要根據(jù)服藥者的狀態(tài)和年齡、本發(fā)明的藥性及所選的活性成分而定。當(dāng)通過口腔途徑用藥時(shí)，一般優(yōu)選活性化合物的藥物前體，它比未改性的化合物吸收得更有效。
本發(fā)明的組合物包含了結(jié)構(gòu)式(1)的化合物，可選鹽或其它藥理許用的衍生物，配合以一個(gè)或多個(gè)藥理許用的載體、稀釋劑或賦形劑，以及可選其它的治療劑。每種載體、稀釋劑或賦形劑都必須是“藥理許用的”，意即與組合物的其它成分相容并且不對(duì)病人有害。組合物包括適于口腔、直腸、鼻、局部(包括口腔和舌下)、陰道或腸胃外用藥(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)和皮內(nèi))的用藥。組合物可方便地制成單位劑型并可借助制藥工業(yè)熟知的方法進(jìn)行制備。這些方法包括了將活性成分與含有一個(gè)或多個(gè)輔助成分的載體、稀釋劑或賦形劑接觸的步驟。一般地，組合物的制備是，將活性成分與液體載體或精細(xì)粉碎的固體載體或二者均勻且充分地接觸，然后如果有必要的話，將制品成型。
適于口腔用藥的本發(fā)明組合物可制成零散劑量，比如膠囊、藥袋或片劑，每種都含有預(yù)置量的活性成分；粉末或顆粒；水或非水性液體中的溶液或分散體；或者水包油乳液或油包水乳液。活性成分也可制成丸劑、藥糖劑或膏劑。
片劑可借助壓縮或模塑法制備，可選配以一或多種輔助成分。壓制片劑的制備是，在適當(dāng)?shù)脑O(shè)備中壓縮自由流動(dòng)狀態(tài)的活性成分，比如粉末或顆粒，可選與粘合劑(比如惰性稀釋劑，殺菌分解劑(如乙醇酸淀粉鈉鹽、交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)的羧甲基纖維素鈉)、表面活性劑或分散劑混合。模塑片劑的制備是，在適當(dāng)?shù)脑O(shè)備中模塑經(jīng)惰性液體稀釋劑潤(rùn)濕的化合物粉狀混合物。片劑可選被涂覆或處理并調(diào)配，以達(dá)到所含活性成分的緩釋或受控釋放，比如采用不同摻量的羥丙基甲基纖維素以實(shí)現(xiàn)所要求的釋放類型?？蛇x賦予片劑以腸體涂層，使其在腸內(nèi)而不是在胃中釋放。
適于口腔局部用藥的組合物包括菱形糖片，包含處于帶香味的基體，通常是蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍糖膠上的活性成分；菱形藥片，包含處于惰性基體如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠上的活性成分；及漱口藥，包含處于適宜的液體載體中的活性成分。
直腸用藥的組合物可制成栓劑，配以適宜的基體包含，比如可可脂。
適于陰道用藥的組合物可制成陰道藥栓、棉塞、霜?jiǎng)?、凝膠、藥膏、泡沫或噴劑，除了活性成分之外還含有比如現(xiàn)有技術(shù)已知的適當(dāng)載體。
適于腸胃外用藥的組合物包括水性和非水性的等滲消毒注射溶液，可含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和讓組合物與待服藥者血液保持等滲的溶劑；及水性和非水性的消毒懸浮體，可包括懸浮劑和增稠劑。組合物可制成單劑量或多劑量封裝容器的形式，比如，安瓿和管瓶，并可在冷凍干燥(凍干)的條件下貯存，注射時(shí)只需要在使用前臨時(shí)添加消毒的液體載體比如水即可。一次性注射溶液和懸浮體可制備自前述種類的消毒粉末、顆粒和片劑。
優(yōu)選的單位劑量組合物含有一天劑量或單位、一天分劑量，如本文上述，或者是適當(dāng)份量的活性成分。
本發(fā)明組合物也可制成獸藥組合物的形式應(yīng)用，比如可利用現(xiàn)有技術(shù)常用的方法制備。獸藥組合物的例子包括，適用于(a)口腔用藥，外用藥如服劑(比如水性或非水性溶液或懸浮體)；片劑或藥丸；可與飼料混合的粉末、顆粒或片劑；舌用藥膏；(b)腸胃外用藥，比如經(jīng)皮下、肌內(nèi)或靜脈內(nèi)注射，如消毒溶液或懸浮體；(c)局部用藥，比如皮膚用霜?jiǎng)④浉嗷驀妱?；?d)陰道內(nèi)，比如陰道藥栓、霜?jiǎng)┗蚺菽?br> 應(yīng)該明白的是，除了上述特指的成分外，本發(fā)明組合物可包括現(xiàn)有技術(shù)中常用的、與所述組合物類型有關(guān)的其它藥劑，比如適于口腔用藥的就可以包括進(jìn)一步的藥劑如甜味劑、增稠劑和香料。
實(shí)施例為了進(jìn)一步理解本發(fā)明，提供了實(shí)施例。特定的物質(zhì)及所用的條件是旨在說明本發(fā)明的，并不對(duì)其合理的范圍構(gòu)成限制。
從Chugai Boyeki Co.，Ltd.以98％的純度購(gòu)得2-氨基-6-氯嘌呤。按Bisacchi等的方法將2-氨基-6-氯嘌呤轉(zhuǎn)變成2-氨基-6-碘代嘌呤。未提到的試劑從市面購(gòu)得并以原樣應(yīng)用，除非另有說明。
所有的溫度都是攝氏度。實(shí)施例1方案1反應(yīng)流程在實(shí)施例1中有述。
步驟A2-羥甲基-1，3-丙二醇采用Harnden等的改良方法。將甲三酸三乙酯(9.68g，0.0417mol)在氮?dú)鈿夥蘸蜏睾偷幕亓飨碌渭拥郊着鹜榧谆蛎雅浜衔?10M)(14ml，0.14mol)的甲苯(65ml)溶液中。反應(yīng)混合物在二甲基硫醚的蒸餾下回流7.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫并滴加甲醇(40ml)。反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢柽^夜，然后除掉溶劑并將殘留物與甲醇反復(fù)共蒸發(fā)。以含25％甲醇的二氯甲烷經(jīng)二氧化硅色譜分離殘留物而得到2-羥甲基-1，3-丙二醇，一種淡檸檬色的油(3.18g，72％)。1H n.m.r.(DMSO-d6)1.60，七重峰，J＝5.5Hz，1H；3.40，t，J＝5.5Hz，2H；4.31，t，J＝5.5Hz，3H.步驟B2-羥甲基-1，3-丙二醇二醋酸酯將原乙酸三乙酯(6.09ml，0.033mol)在氮?dú)鈿夥障绿砑拥?-羥甲基-1，3-丙二醇(3.18g，0.03mol)、三氟乙酸(1.54ml，0.02mol)的N，N’-二甲基甲脒(35ml)溶液中。將反應(yīng)混合物攪拌1.5小時(shí)，然后添加水(0.63ml，0.035mol)。反應(yīng)混合物再攪拌1.5小時(shí)，然后添加原乙酸三乙酯(6.26ml，0.034mol)。反應(yīng)混合物再攪拌1.5小時(shí)，然后添加水(1.74ml，0.097mol)。1小時(shí)后，仔細(xì)添加碳酸氫鈉溶液，直到將反應(yīng)混合物中和。添加水并以二氯甲烷(3×)萃取溶液。以水洗滌集中的萃取物，以硫酸鎂干燥并濃縮而得到2-羥甲基-1，3-丙二醇二醋酸酯，一種無色的油(4.50g，79％)。1Hn.m.r.(CDCl3)2.06，s，6H；2.18，七重峰，J＝6Hz，1H，2.54，brs，1H，3.62，d，J＝6Hz，2H；4.15，d，J＝6Hz，4H.步驟C硫酸甲3-乙酰氧基-2-乙酰氧基甲基丙-1-酯將2-羥甲基-1，3-丙二醇二醋酸酯(4.49g，0.0236mol)的二氯甲烷(40ml)溶液在氮?dú)鈿夥障吕鋮s到-5°。添加三乙胺(4.39ml，0.0354mol)，隨后滴加甲磺酰氯(2.19ml，0.0283mol)的二氯甲烷(20ml)溶液。反應(yīng)在0°再攪拌2小時(shí)然后升到室溫。反應(yīng)混合物以1.5M鹽酸(3×30ml)、飽和碳酸氫鈉溶液(30ml)和濃鹽水(30ml)洗滌，以硫酸鎂干燥并濃縮而得到硫酸甲3-乙酰氧基-2-乙酰氧基甲基丙-1-酯，一種淡褐色的油(5.02g，79％)。1H n.m.r.(CDCl3)2.0，s，6H；2.48，七重峰，J＝6Hz，1H；3.03，s，3H；4.07-4.24，m，4H；4.29，d，J＝6Hz，2H.步驟D9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧基甲基丙-1-基]-2-氨基-6-碘代嘌呤硫酸甲3-乙酰氧基-2-乙酰氧基甲基丙-1-酯(5.02g，0.0187mol)、2-氨基-6-碘代嘌呤(4.66g，0.0178mol)和碳酸鉀(7.38g，0.0534mol)的N，N’-二甲基甲脒(250ml)混合物在氮?dú)鈿夥障掠?0°攪拌2天。借助真空除掉N，N’-二甲基甲脒，添加水并以醋酸乙酯(3×100ml)萃取殘留物。以水和濃鹽水洗滌萃取物，以硫酸鎂干燥，然后經(jīng)二氧化硅塞進(jìn)行過濾，以醋酸乙酯充分洗滌。濃縮濾液而得到粗產(chǎn)物，一種黃色固體(5.96g)。從甲醇和乙醚重結(jié)晶而得到9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧基甲基丙-1-基]-2-氨基-6-碘代嘌呤，一種淡檸檬色的晶體(4.43g，55％)。
1H n.m.r.(DMSO-d6)1.95，s，6H；2.56-2.78，m，1H；3.90-4.10，m，4H；4.12，d，J＝7Hz，2H；6.83，s，2H；8.09，s，1H.步驟E9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-鳥嘌呤將9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基-6-碘代嘌呤(2.5g，0.00576mol)在1.5M鹽酸中加熱回流3小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻到室溫并以氫氧化鈉將pH值調(diào)到14。反應(yīng)混合物再攪拌1.5小時(shí)，然后以濃鹽酸中和。過濾出得到的沉淀物并從水重結(jié)晶而得到9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-鳥嘌呤(1.267g，92％)，一種無色的羽狀晶體。M.p.294-296°.1H n.m.r.(DMSO-d6)1.9-2.05，m，1H；3.3，t，J＝5.5Hz，4H；3.95，d，J＝7.0Hz，2H；4.6，t，J＝5.5Hz，2H；6.5，s，2H；7.6，s，1H；10.1，s，1H.實(shí)施例1(可選的方法)方案2可選反應(yīng)流程的圖示。
步驟A5，5-二羧乙基-2-異丙基-1，3-二噁烷按Eliel等的改良方法制備5，5-二羧乙基-2-異丙基-1，3-二噁烷。將雙羥甲基丙二酸乙酯(25.0g，0.113mol)、異丁醛(0.226mol，20.6ml)和p-甲苯磺酸(0.300g)的溶劑油(50ml)溶液在回流下加熱并以Dean-Stark裝置收集水。除掉溶劑油并蒸餾產(chǎn)物而得到5，5-二羧乙基-2-異丙基-1，3-二噁烷(22.5g，73％)，一種無色的油。B.p.103/0.15mm Hg.1H n.m.r.(CDCl3)0.9，d，J＝6.9Hz，6H；1.2，t，J＝6.9Hz，3H；1.3，t，J＝6.9Hz，3H；1.7-1.85，m，1H；3.9，d，JAB＝11.5Hz，2H；4.15，q，J＝6.9Hz，2H；4.22，d，J＝4.8Hz，1H；4.3，q，J＝6.9Hz，2H；4.7，d，JAB＝11.5Hz，2H.步驟B5，5-二羧基-2-異丙基-1，3-二噁烷按照Eliel等的方法從5，5-二羧乙基-2-異丙基-1，3-二噁烷(20.0g，72.9mol)合成5，5-二羧基-2-異丙基-1，3-二噁烷。從醋酸乙酯和溶劑油重結(jié)晶粗產(chǎn)物而得到5，5-二羧基-2-異丙基-1，3-二噁烷(14.1g，80％)，一種無色的固體。M.p.143.5-145°.1H n.m.r.(DMSO-d6)0.8，d，J＝6.9Hz，6H；1.55-1.75，m，1H；3.8，d，JAB＝11.3Hz，2H；4.3，d，J，＝4.8Hz，1H；4.5，d，JAB＝11.3Hz，2H；12.8，brs，2H.步驟C5-羧基-2-異丙基-1，3-二噁烷按照Eliel等的方法從5，5-二羧基-2-異丙基-1，3-二噁烷(15.7g，64.8mol)合成5-羧基-2-異丙基-1，3-二噁烷。從醋酸乙酯和溶劑油重結(jié)晶粗產(chǎn)物而得到5-羧基-2-異丙基-1，3-二噁烷(9.75g，76％)，一種無色的固體。M.p.131-134°.1Hn.m.r.(DMSO-d6)0.8，d，J＝6.9Hz，6H；1.6-1.8，m，1H；2.7-2.85，m，1H；3.65，t，JAB＝11.5Hz，2H；4.15，t，JAB＝10.1Hz，2H；4.2，t，J＝4.8Hz，1H.步驟D5-羥甲基-2-異丙基-1，3-二噁烷將甲硼烷甲基硫醚配合物(9.0ml，10M，90mmol)在氮?dú)鈿夥障绿砑拥?-羧基-2-異丙基-1，3-二噁烷(8.75g，44.1mol)的無水乙醚(65ml)溶液中。反應(yīng)混合物加熱回流1小時(shí)，冷卻到室溫并以水(20ml)和甲醇(30ml)沖稀。除掉甲醇，水相以乙醚多次萃取。以水和濃鹽水洗滌集中的乙醚萃取物，以硫酸鎂干燥并除掉溶劑而得到5-羥甲基-2-異丙基-1，3-二噁烷(6.50g，80％)，一種無色的油。1H n.m.r.(DMSO-d6)0.85，d，J＝7Hz，6H；1.6-1.8，m，1H；1.85-2.05，m，1H；3.2，t，JAB＝11.3Hz，2H；3.3-3.45，m，4H；4.15，d，J＝4.8Hz，1H.步驟E2-異丙基-5-(硫酸甲酯基)甲基-1，3-二噁烷按照硫酸甲3-乙酰氧基-2-乙酰氧基甲基丙-1-酯的方法從5-羥甲基-2-異丙基-1，3-二噁烷(7.30g，39.6mmol)合成2-異丙基-5-(硫酸甲酯基)甲基-1，3-二噁烷而得到產(chǎn)物，一種無色的油(10.1g，97％)。1H n.m.r.(DMSO-d6)0.85，d，J＝6.9Hz，6H；1.6-1.8，m，1H；2.15-2.35，m，1H；3.2，s，3H；3.5，t，JAB＝11.3Hz，2H；4.0-4.15，m，4H；4.2，d，J＝4.8Hz，1H.步驟F2-氨基-6-氯-9-[(2-異丙基-1，3-二噁烷-5-基)甲基]嘌呤按照9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧基甲基丙-1-基]-2-氨基-6-碘代嘌呤的方法從2-異丙基-5-(硫酸甲酯基)甲基-1，3-二噁烷(10.1g，38.5mmol)合成2-氨基-6-氯-9-[(2-異丙基-1，3-二噁烷-5-基)甲基]嘌呤而得到產(chǎn)物，一種無色的固體(4.80g，40％)。M.p.204-205°.1H n.m.r.(DMSO-d6)0.85，d，J＝7Hz，6H；1.6-1.75，m，1H；2.4-2.55，m，1H；3.45，t，J＝11.3Hz，2H；3.85-4.0，m，4H；4.2，d，J＝5Hz，1H；6.9，s，2H；8.1，s，1H.13C n.m.r.(DMSO-d6)16.8，31.9，34.3，41.4，68.6，104.5，123.3，143.1，149.4，154.2，159.7.
質(zhì)譜m/z312((M+1)+，100％)，340((M+29)+，15)，314((M+3)+，30)，313((M+2)+，18)，276(20).精確質(zhì)量測(cè)量值312.1209(M+1)+，C13H19N5O2Cl，計(jì)算值312.1227.步驟G9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-鳥嘌呤按照9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-鳥嘌呤(上步驟E)的方法從2-氨基-6-氯-9-[(2-異丙基-1，3-二噁烷-5-基)甲基]嘌呤(1.28g，4.11mmol)合成9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-鳥嘌呤而得到產(chǎn)物，一種無色的固體(0.60g，61％)。M.p.285°分解1H n.m.r.(DMSO-d6)1.9-2.05，m，1H；3.3，t，J＝5.5Hz，4H；3.95，d，JJ＝7.0Hz，2H；4.6，t，J＝5.5Hz，2H；6.5，s，2H；7.6，s，1H；10.1，s，1H.13C n.m.r.(DMSO-d6)41.5，43.6，58.9，116.3，138.1，151.3，153.4，156.8. 質(zhì)譜m/z 340((M+1)+，100％)，368((M+29)+，20)，341((M+2)+，12).實(shí)施例29-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-2-氨基-6-甲氧基嘌呤將9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基-6-碘代嘌呤(307mg，0.708mmol)、氫氧化鈉(7.75g，194mmol)、甲醇(30ml)和水(3ml)的混合物在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。反應(yīng)混合物以HCl水溶液中和并借助旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除掉溶劑。添加熱甲醇到殘留物中并將溶劑潷析掉，經(jīng)二氧化硅短柱過濾。濃縮濾液并從水重結(jié)晶而得到9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-2-氨基-6-甲氧基嘌呤，一種無色的晶體(179mg，定量)。1H nmr(DMSO-d6)1.93-2.16，m，1H；3.22-3.40，m，4H；3.95，s，3H；4.19，d，J＝7Hz，2H；4.69，t，J＝5Hz，2H；6.45，s，2H；7.79，s，1H.實(shí)施例39-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基-6-肼基-嘌呤9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基-6-碘代嘌呤(300mg，0.69mmol)、水合肼(85％，210μl，6.68mmol)和乙醇(35ml)的混合物在氮?dú)鈿夥障禄亓鲾嚢?小時(shí)并隨后在室溫下16小時(shí)。過濾出得到的無色固體，以乙醇充分洗滌并借助真空干燥而得到9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基-6-肼基-嘌呤(196mg，84％)。1H n.m.r.(DMSO-d6)1.98，s，6H；2.54-2.77，m，1H；3.87-4.08，m，4H；4.05，d，J＝7Hz，2H；4.40，brs，2H；5.89，brs，2H；7.67，s，1H；8.40，s，1H.實(shí)施例42-氨基-6-肼基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-嘌呤9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基-6-碘代嘌呤(300mg，0.69mmol)、水合肼(85％，700μl，22.27mmol)和乙醇(35ml)的混合物在氮?dú)鈿夥障禄亓鲾嚢?小時(shí)并隨后在室溫下16小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物至干并從水重結(jié)晶殘留物而得到2-氨基-6-肼基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-嘌呤(86mg，49％)，一種膏狀的晶體。1H n.m.r.(DMSO-d6)1.90-2.12，m，1H；3.20-3.40，m，4H；3.98，d，J＝7Hz，2H；4.42，brs，2H；4.74，t，J＝5Hz，2H；5.98，s，2H；7.62，s，1H；8.45，s，1H.實(shí)施例52-氨基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-6-碘代嘌呤9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基-6-碘代嘌呤(304mg，0.70mmol)和甲醇化氨(10ml)的混合物在具塞燒瓶中攪拌2小時(shí)。除掉塞子并將反應(yīng)混合物放置16小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物而得到2-氨基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-6-碘代嘌呤(201mg，82％)，一種無色的針。1H n.m.r.(DMSO-d6)1.96-2.19，m，1H；3.25-3.43，m，4H；4.01，d，J＝7Hz，2H；4.61，t，J＝5Hz，2H；6.84，s，2H；8.02，s，1H.實(shí)施例62，6-二氨基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]嘌呤9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基-6-碘代嘌呤(299mg，0.69mmol)和甲醇化氨(10ml)的混合物在高壓貯瓶中于100°攪拌18小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻到室溫，1小時(shí)后形成沉淀。過濾并借助真空干燥而得到2，6-二氨基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]嘌呤(128mg，78％)，一種無色的晶體。1H n.m.r.(DMSO-d6)1.90-2.10，m，1H；3.20-3.40，m，4H；3.96，d，J＝6.5Hz，4.75，t，J＝5Hz，2H；5.84，s，2H；6.70，s，2H；7.78，s，1H.實(shí)施例72-(二甲氨亞甲基)氨基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤(200mg，0.84mmol)、二甲基乙縮醛(1.5ml，11.3mmol)和N，N’-二甲基甲脒(20ml)的混合物在氮?dú)鈿夥障掠谑覝財(cái)嚢?天。在60°下借助真空除掉溶劑并從乙醇重結(jié)晶殘留物而得到2-(二甲氨亞甲基)氨基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤(180mg，73％)，一種無色的晶體。
1H n.m.r.(DMSO-d6)1.95-2.17，m，1H；3.03，s，3H；3.15，s，3H；3.21-3.47，m，4H；4.03，d，J＝7Hz，2H；4.62，t，J＝5Hz，2H；7.74，s，1H；8.53，s，1H；11.26，brs，1H.實(shí)施例82-氨基-9-[(2-異丙基-1，3-二噁烷-5-基)甲基]嘌呤2-氨基-6-氯-9-[(2-異丙基-1，3-二噁烷-5-基)甲基]嘌呤(350mg，1.12mmol)、三乙胺(172μl，1.23mmol)、10％碳載鈀(35mg)和乙醇(5ml)的混合物在氫氣氣氛下攪拌3天。然后經(jīng)GFA紙過濾反應(yīng)混合物，以二氯甲烷多次洗滌。濾液濃縮至干，溶解在二氯甲烷中，以水(2×)和濃鹽水洗滌，以硫酸鈉干燥并濃縮而得到2-氨基-9-[(2-異丙基-1，3-二噁烷-5-基)甲基]嘌呤(260mg，84％)，一種無色的固體。1H n.m.r.(DMSO-d6)0.83，d，J＝7Hz，6H；2.35-2.63，m，1H；3.45，t，J＝11Hz，2H；3.87，d，J＝7Hz，2H；3.82-3.95，m，2H；4.17，d，J＝5Hz，1H；6.53，s，2H；8.02，s，1H；8.57，s，1H.實(shí)施例92-氨基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]嘌呤2-氨基-9-[(2-異丙基-1，3-二噁烷-5-基)甲基]嘌呤(160mg，0.58mmol)在三氟乙酸(5ml)中攪拌2小時(shí)。然后，添加幾滴水并且將反應(yīng)混合物再攪拌3小時(shí)。借助真空除掉溶劑并以飽和碳酸氫鈉溶液中和殘留物。濃縮溶液至干并添加熱甲醇。潷析溶液并濾過二氧化硅短柱。然后以含2％乙腈的水作洗脫溶劑HPLC色譜分離粗料。集中含有所需產(chǎn)物的級(jí)份并凍干而得到2-氨基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]嘌呤(70mg，55％)，一種無色的羽狀固體。1H n.m.r.(DMSO-d6)2.00-2.20，m，1H，3.20-3.40，m，4H；4.06，d，J＝7Hz，2H；4.68，brs，2H；6.53，s，2H；8.00，s，1H；8.57，s，1H.實(shí)施例109-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤鈉鹽將9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤(147.5mg，0.616mmol)溶解在氫氧化鈉水溶液(1.0M，616μl，0.616mmol)中。過濾溶液，以少量水洗滌，然后凍干而得到9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤鈉鹽(160.7mg，定量)，一種無色的羽狀固體。
1H n.m.r.(DMSO-d6)1.78-2.02，m，1H；3.06-3.29，m，4H；3.91，d，J＝6Hz，2H；5.16，brs，2H；5.42，brs，2H；7.32，s，1H.實(shí)施例119-[3-乙酰氧基-2-羥甲基丙-1-基]-鳥嘌呤將三氟乙酸(510μl，6.63mmol)和原乙酸三乙酯(790μl，4.31mmol)在氮?dú)鈿夥罩刑砑拥?-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-鳥嘌呤(1.0g，4.18mmol)的N，N’-二甲基甲脒(5ml)溶液中，得到渾濁的混合物。以HPLC(含5％乙腈的水)監(jiān)測(cè)反應(yīng)，并且再分批添加原乙酸三乙酯(720μl，3.92mmol)直到反應(yīng)結(jié)束。添加水(243μl，13.5mmol)并且反應(yīng)再攪拌1.5小時(shí)。反應(yīng)混合物以碳酸氫鈉溶液中和并在室溫下除掉溶劑。從水重結(jié)晶粗產(chǎn)物而得到無色的產(chǎn)物(901mg)。經(jīng)二氧化硅進(jìn)行預(yù)吸附和快速色譜分離，以含10％、15％和17％甲醇的二氯甲烷洗脫。集中含有純產(chǎn)物的級(jí)份并濃縮而得到9-[3-乙酰氧基-2-羥甲基丙-1-基]-鳥嘌呤(520mg，44％)，一種無色的固體。1H n.m.r.(DMSO-d6)1.94，s，3H；2.20-2.40，m，1H；3.26-3.43，m，2H；3.84-4.03，m，4H；4.82，t，J＝5Hz，1H；6.46，s，2H；7.64，s，1H；10.58，s，1H.實(shí)施例129-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-鳥嘌呤三磷酸季銨鹽制備方法按Ludwig等。在約5分鐘內(nèi)將2-氯-4H-1，3，2-苯并二口惡膦-4-酮(150mg，0.74mmol)的無水二噁烷(2ml)溶液在攪拌下滴加到含有9-[3-乙酰氧基-2-羥甲基丙-1-基]-鳥嘌呤(187.8mg，0.668mmol，于85℃高真空干燥約7～8小時(shí))的無水N，N’-二甲基甲脒(10ml)和無水吡啶(2ml)中。繼續(xù)攪拌0.75小時(shí)。將焦磷酸雙[(三-n-丁基)銨]半DMF(590mg，1.0mmol)溶解在含有無水n-Bu3N(0.75ml)的無水N，N’-二甲基甲脒(2.5ml)中，并隨后添加到攪拌的溶液中。
約2.5小時(shí)后，于室溫?cái)嚢柘?，滴加由?3.56g)在吡啶(200ml)和水(5ml)中溶解而制備的碘溶液(9.5ml)，以處理黃色的反應(yīng)溶液。借幾滴5％NaHSO3溶液的添加來破壞所添加的稍過量碘。
于室溫?cái)嚢杓s1.5小時(shí)后，在低于30°下除掉溶劑而得到一種桔黃色的油，以25ml水在室溫下強(qiáng)力攪拌處理1小時(shí)。添加濃NH4OH(50ml)并在室溫下攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)，然后于25℃除掉NH4OH溶液。以丙酮處理半固體產(chǎn)物兩次而得到一種淡黃色的固體(0.56g)。
將產(chǎn)物(0.5g)溶解在少量水中、離心分離并補(bǔ)足體積5ml，以0.5ml為批多次HPLC色譜分離，以水洗脫(流動(dòng)速率12ml/min)。收集13～14分鐘和18～19分鐘的級(jí)份并凍干而得到一種淡黃色的固體(320mg)。
將其溶解在水(4ml)中并再次以0.5ml批量色譜分離。去掉每個(gè)級(jí)份含焦磷酸鹽的峰頭和峰尾部分。再重復(fù)4次。最后滲析產(chǎn)物(100條MWCO管，6.5小時(shí)，H2O)，然后再以HPLC純化。這種處理除掉了少量的磷雜質(zhì)(δ+0.93處的31Pnmr小峰)，據(jù)信是一些無機(jī)磷酸鹽造成的。
1H nmr(D2O)；δ2.41，s，1H；3.60，d，J＝5.38Hz，2H；重疊雙峰4.00，d，J＝4.98Hz和4.17，d，J＝5.76Hz，4H；7.87，s，0.8H.
31Pnmr(D2O)在粗三磷酸鹽的nmr中，磷酸鹽的峰是最容易確定的即Pβ(t，δ-21.16，JPP＝19.66Hz)；Pα(β-9.87處三重峰的雙峰，JPP19.40Hz；JPH5.39Hz)；Pα(d，δ-5.96；JPP20.01Hz)。31Pnmr峰因HPLC的純化而加寬和位移，從而純樣品在δ-9.96(Pα+Pα)和δ-22.07(Pβ)處有兩個(gè)強(qiáng)度比為2∶1的31P寬峰。實(shí)施例132-氨基-6-環(huán)丙氨基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]嘌呤9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基-6-碘代嘌呤(5.57mg，1.24mmol)和環(huán)丙胺(1.0ml，14.4mmol)的混合物在高壓貯瓶中于80°攪拌18小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻到室溫并濃縮而得到一種桔黃色的粗油(989mg)。然后將其一部分進(jìn)行HPLC色譜分離，以含3％乙腈的水為洗脫溶劑。集中含有所需產(chǎn)物的級(jí)份并凍干而得到2-氨基-6-環(huán)丙氨基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]嘌呤，一種黃色的油，在放置過程中固化。1H n.m.r.(DMSO-d6)0.55-0.76.m，4H；1.91-2.12，m，1H；2.95-3.13，m，1H；3.21-3.45，m，4H，3.37，d，J＝7Hz，2H；4.75，t，J＝5Hz，2H；5.91，brs，2H；7.09，d，J＝5Hz，1H；7.62，s，1H.實(shí)施例149-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基嘌呤按照實(shí)施例8的方法從9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基-6-碘代嘌呤(5.0g，11.5mmol)、三乙胺(1.76ml，12.65mmol)和10％碳載鈀(500mg)在乙醇(200ml)中制備9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基嘌呤。產(chǎn)率2.33g(66％)。1H n.m.r.(DMSO-d6)1.93，s，6H；2.59-2.80，m，1H；3.96，dd，J＝5.6&11.4Hz，2H；4.03，dd，J＝5.6&11.4Hz，2H；4.15，d，J＝7Hz，2H；6.49，brs，2H；8.04，s，1H；8.57，s，1H實(shí)施例159-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤(560mg，2.34mmol)和4-二甲基氨基吡啶(50mg)的混合物在醋酸酐(15ml)中于室溫?cái)嚢?6小時(shí)。反應(yīng)混合物濃縮至干并以水和氯仿配分殘留物。過濾出得到的固體并從甲醇重結(jié)晶而得到9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤，一種無色的晶體(593mg，78％)。
1H n.m.r.(DMSO-d6)1.97，s，6H；2.53-2.70，m，1H；3.87-4.09，m，6H；6.42，brs，2H；7.67，s，1H；10.56，brs，1H.實(shí)施例16和179-[2-L-纈氨酰氧甲基-3-L-纈氨酰氧丙-1-基]鳥嘌呤二鹽酸鹽和9-[3-羥基-2-L-纈氨酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤鹽酸鹽9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤(3.02g，12.36mmol)、N-芐氧基羰基-L-纈氨?；?N-羧酸酐(Z-L-纈氨?；?NCA)(購(gòu)自Isochem或SNPE North American Inc.)(3.69g，13.32mmol)和4-二甲基氨基吡啶(75mg)的N，N’-二甲基甲脒(75ml)混合物在氮?dú)鈿夥障掠谑覝財(cái)嚢?6小時(shí)。HPLC分析表明反應(yīng)不充分。又添加了部分Z-L-纈氨?；?NCA(1.84g，6.67mmol)并將反應(yīng)混合物再攪拌24小時(shí)。濃縮至干并添加醋酸乙酯以沉淀出未反應(yīng)的9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤。濃縮濾液，以二氧化硅預(yù)吸附并經(jīng)二氧化硅快速色譜分離，以含5％、7％、10％和15％甲醇的二氯甲烷為洗脫溶劑。集中TLC上的單色斑級(jí)份而得到9-[2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧甲基)-3-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧丙-1-基]鳥嘌呤，一種無色的固體(2.54g)。
1H n.m.r.(DMSO-d6)0.86，d，12H；1.85-2.15，m，2H；2.51-2.70，m，1H；3.80-4.18，m，8H；5.04，s，4H；6.41，brs，2H；7.31，brs，10H；7.59，s，1H；7.75，d，J＝8Hz，2H；10.62，s，1H.
集中剩余的級(jí)份并再次色譜分離，以含5％、7％、10％和15％甲醇的二氯甲烷為洗脫溶劑，再給出229mg的二纈氨?；衔锛耙环N無色的固體(880mg)。將其溶解在二氯甲烷中，然后以飽和碳酸氫鈉溶液(2×)和濃鹽水洗滌，接著以硫酸鎂干燥而得到9-[2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧甲基)-3-羥丙-1-基]鳥嘌呤，一種無色的泡沫狀固體(266mg)。1H n.m.r.(DMSO-d6)0.86，d，J＝6.8Hz，6H；1.88-2.11，m，1H；2.20-2.39，m，1H；3.21-3.43，m，2H；3.78-4.10，m，5H；4.82，t，J＝5Hz，1H；5.04，s，2H；6.46，brs，2H；7.34，brs，5H；7.61，d，J＝3Hz，1H；7.65-7.75，m，1H；10.59，brs，1H.9-[2-L-纈氨酰氧甲基-3-L-纈氨酰氧丙-1-基]鳥嘌呤二鹽酸鹽9-[2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧甲基)-3-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧丙-1-基]鳥嘌呤(858mg，1.22mmol)、1M鹽酸水溶液(2.44ml，2.43mmol)和10wt％碳載鈀(215mg)的乙醇(50ml)混合物在氫氣氣氛下攪拌3小時(shí)。反應(yīng)混合物經(jīng)GFA紙過濾，以乙醇多次洗滌。濾液在40°濃縮至干。將殘留物溶解在水中并經(jīng)填充GFA紙的短柱、Celite577和再次GFA紙進(jìn)行過濾。凍干濾液而得到9-[2-L-纈氨酰氧甲基-3-L-纈氨酰氧丙-1-基]鳥嘌呤二鹽酸鹽，一種膏狀的固體(517mg，83％)。1H n.m.r(DMSO-d6)0.87-1.02，m，12H；2.05-2.30，m，2H；2.60-2.80，m，1H；3.85，dd，J＝4.6&11.1Hz，2H；4.00-4.32，m，6H；6.59，s，2H；7.78.s，1H；8.63，brs，6H；10.78，brs，1H.9-[3-羥基-2-L-纈氨酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤鹽酸鹽按照實(shí)施例16的方法從9-[2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧甲基)-3-羥丙-1-基]鳥嘌呤(212mg，0.45mmol)、1M鹽酸水溶液(0.45ml，0.45mmol)和10％碳載鈀(56mg)在乙醇(15ml)中制備9-[3-羥基-2-L-纈氨酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤鹽酸鹽而得到產(chǎn)物，一種無色的羽狀固體(162mg，96％)。1H n.m.r.(DMSO-d6)0.96，dd，J＝7.2&11.9Hz，6H；2.00-2.25，m，1H；2.25-2.47，m，1H；3.31-3.51，m，2H；3.82，dd，J＝4，6&13.5Hz，1H；3.96-4.14，m，4H；4.91，brs，1H；6.59，brs，2H；7.69，s，1H；8.52，brs，3H；10.72，brs，1H.實(shí)施例189-[3-乙酰氧基-2-(L-纈氨酰氧甲基)丙-1-基]鳥嘌呤鹽酸鹽9-[3-乙酰氧基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤(330mg，1.17mmol)、Z-L-纈氨酰基-NCA(358mg，1.29mmol)和4-二甲基氨基吡啶(30mg)的N，N’-二甲基甲脒(20ml)混合物在氮?dú)鈿夥障掠谑覝財(cái)嚢?天。反應(yīng)混合物濃縮至干，殘留物經(jīng)二氧化硅預(yù)吸附并快速色譜分離，以含10％甲醇的二氯甲烷洗脫。集中含有所需產(chǎn)物的級(jí)份并濃縮而得到9-[3-乙酰氧基-2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧甲基)丙-1-基]鳥嘌呤，一種無色的固體(313mg，52％)。
1H n.m r.(DMSO-d6)0.87，d，J＝7Hz，6H；1.97，s，3H；1.88-2.13，m，1H；2.53-2.71，m，1H；3.82-4.15，m，7H；5.04，s，2H；6.43，brs，2H；7.35，brs，5H，7.63，d，J＝3.6Hz，1H；7.75，d，J＝8.1Hz，1H.
按照實(shí)施例16的方法從9-[3-乙酰氧基-2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧甲基)丙-1-基]鳥嘌呤(201mg，0.39mmol)、1M鹽酸水溶液(0.39ml，0.39mmol)和10％碳載鈀(62mg)在乙醇(10ml)中制備9-[3-乙酰氧基-2-(L-纈氨酰氧甲基)丙-1-基]鳥嘌呤鹽酸鹽而得到產(chǎn)物，一種無色的羽狀固體(162mg，定量)。1H n.m.r.(DMSO-d6)0.95，dd，J＝3.8&6.8Hz，6H；1.99，s，3H；2.03-2.25，m，1H；2.57-2.78，m，1H；3.84，dd，J＝4.7&10.2Hz，1H；3.93-4.23，m，6H；6.54，brs，2H；7.71，s，1H；8.33，brs，3H；10.71，brs，1H.實(shí)施例199-[3-羥基-2-棕櫚酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤將棕櫚酰氯(2.07g，7.53mmol)溶解在無水二氯甲烷中并補(bǔ)足體積10ml，用作儲(chǔ)液。
將棕櫚酰氯(3.5ml)的儲(chǔ)液溶液在氮?dú)鈿夥障绿砑拥?-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤(1.0mg，4.18mmol)的吡啶(20ml)和N，N’-二甲基甲脒(10ml)懸浮體中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物16小時(shí)并再添加等份的儲(chǔ)液溶液(3.5ml)。反應(yīng)混合物攪拌24小時(shí)并添加儲(chǔ)液溶液的最后等份。反應(yīng)混合物再攪拌2天，借助真空在60°除掉溶劑。粗固體(3.7g)經(jīng)二氧化硅預(yù)吸附和快速色譜分離，以含5％～23％甲醇的二氯甲烷洗脫。集中含有純產(chǎn)物的級(jí)份而得到9-[3-羥基-2-棕櫚酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤，一種無色的固體(595mg)。1H n.m.r(DMSO-d6)0.85，t，J＝6.8Hz，3H；1.12-1.38，m，24H；1.33-1.60，m，2H；2.19，q，J＝7.2Hz，2H；3.32-3.40，m，2H；3.95，t，J＝6Hz，2H；4.07-4.20，m，2H；4.87，brs，1H；6.65，brs，2H；7.63，s，1H；10.76，brs，1H實(shí)施例209-[3-棕櫚酰氧基-2-L-纈氨酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤鹽酸鹽9-[3-羥基-2-棕櫚酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤(534mg，1.12mmol)、Z-L-纈氨?；?NCA(620mg，2.24mmol)和4-二甲基甲脒(25mg)的N，N’-二甲基甲脒(25ml)混合物在氮?dú)鈿夥障掠谑覝財(cái)嚢?6小時(shí)。借助真空在60°除掉溶劑并以二氯甲烷和水配分殘留物。分離各層并再以二氯甲烷萃取水相兩次。以飽和碳酸氫鈉溶液(2×)和濃鹽水洗滌集中的有機(jī)層，以硫酸鎂干燥并濃縮而得到粗產(chǎn)物，一種無色的油(509mg)。經(jīng)二氧化硅快速色譜分離，以含5％甲醇的二氯甲烷洗脫。集中含有純產(chǎn)物的級(jí)份而得到9-[3-棕櫚酰氧基-2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧甲基)丙-1-基]鳥嘌呤，一種無色的泡沫狀固體(290mg)。1H n.m.r.
(DMSO-d6)0.75-0.95，m，9H；1.22，brs，24H；1.33-1.60，m，2H；1.90-2.15，m，1H；2.23，t，J＝7.2Hz，2H；2.50-2.75，m，1H；3.85-4.14，m，7H；5.04，s，2H；6.45，brs，5H；7.62，d，J＝3.8Hz，1H；7.74，d，J＝8.2Hz，1H；10.66，brs，1H.
按照實(shí)施例16的方法從9-[3-棕櫚酰氧基-2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧甲基)丙-1-基]鳥嘌呤(174mg，0.24mmol)、1M鹽酸水溶液(0.24ml，0.24mmol)和10％碳載鈀(50mg)在乙醇(10ml)中制備9-[3-棕櫚酰氧基-2-L-纈氨酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤鹽酸鹽而得到產(chǎn)物，一種無色的羽狀固體(124mg，84％)。1Hn.m.r.(DMSO-d6)0.78-0.98，m，9H；1.22，brs，24H；1.37-1.58，m，2H；1.99-2.22，m，1H；2.25，t，J＝7.2Hz，2H；2.55-2.76，m，1H；3.74，dd，J＝4.8&10.0Hz，1H；3.90-4.20，m，6H；6.51，brs，2H；7.30-8.10，brs，3H；7.69，s，1H；10.88，brs，1H.實(shí)施例219-[3-羥基-2-膽酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤將氯甲酸乙酯(400μl，4.18mmol)在氮?dú)鈿夥障掠?0°添加到膽酸(1.71g，4.18mmol)和二異丙基乙胺(567mg，4.39mmol)的N，N’-二甲基甲脒(25ml)溶液中。攪拌30小時(shí)，然后添加9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤(1.0g，4.18mmol)的N，N’-二甲基甲脒(100ml)混合物并將反應(yīng)混合物再攪拌2天。HPLC分析(含70％甲醇的水)表明，已生成～20-30％的產(chǎn)物。反應(yīng)混合物濃縮至干并添加甲醇以沉淀出未反應(yīng)的9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤。濾液濃縮至干而得到一種黃色的油(2.0g)，借助半制備HPLC進(jìn)行純化，以含70％甲醇的水洗脫。得到了9-[3-羥基-2-膽酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤，一種無色的玻璃狀固體(124mg)。1Hn.m.r.(DMSO-d6)0.57，s，3H；0.80，s，3H；0.70-2.40，m，27H；3.08-3.28，m，2H；3.37，d，J＝5.2Hz，2H；3.61，s，1H；3.78，s，
1H，3.87-4.05，m，5H；4.12，d，J＝3.4Hz，1H；4.33，d，J＝4.3Hz，1H；4.82，t，J＝4.5Hz，1H；6.52，s，2H；7.63，s，1H；10.74，brs，1H.實(shí)施例229-[3-膽酰氧基-2-L-纈氨酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤鹽酸鹽按照實(shí)施例20的方法從粗9-[3-羥基-2-膽酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤(1.21g，1.92mmol)、Z-L-纈氨酰基-NCA(0.99g，3.57mmol)和4-二甲基氨基吡啶(20mg)在N，N’-二甲基甲脒(10ml)中制備9-[2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧基-3-膽酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤。粗料經(jīng)二氧化硅快速色譜分離，以含10％甲醇的二氯甲烷洗脫。集中含有純產(chǎn)物的級(jí)份而得到9-[2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧基-3-膽酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤，一種無色的泡沫狀固體(258mg)。1H n.m.r.(DMSO-d6)0.57，s，3H；0.80，s，3H；0.74-2.40，m，34H；2.50-2.78，m，1H；3.05-3.30，m，2H；3.60，s，1H；3.77，s，1H；3.83-4.20，m，8H；4.33，d，J＝4.3Hz，1H；5.04，s，2H；6.44，brs，2H；7.34，brs，5H；7.62，d，J＝3.7Hz，1H；7.74，d，J＝8.2Hz，1H；10.61，brs，1H按照實(shí)施例16的方法從9-[2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧基-3-膽酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤(248mg，0.29mmol)、1M鹽酸水溶液(0.29ml，0.29mmol)和10％碳載鈀(30mg)在乙醇(10ml)中制備9-[3-膽酰氧基-2-L-纈氨酰氧甲基丙-1-基]鳥嘌呤鹽酸鹽而得到產(chǎn)物，一種膏狀的固體(185mg，84％).1H n.m.r.(DMSO-d6)0.57，s，3H；0.80，s，3H；0.74-2.40，m，34H；2.50-2.78，m，1H；3.05-3.30，m，2H；3.60，s，1H；3.77，s，1H；3.85，dd，J＝4.6&10.5Hz，1H；3.93-4.26，m，7H；4.34，d，J＝4.0Hz，1H；6.56，brs，2H；7.71，s，1H；8.25-8.80，brs，3H；10.72，brs，1H.實(shí)施例239-[2-反油酰氧基-3-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤按照實(shí)施例19的方法從9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤(1.3g，5.43mmol)和溶于無水二氯甲烷(7ml)的反油酰氯(3.1g，9.70mmol)在吡啶(25ml)和N，N’-二甲基甲脒(12ml)中制備9-[2-反油酰氧基-3-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤。完成后，通過蒸餾除掉一些反油酸而得到黃色的粗固體(2.14g)。經(jīng)二氧化硅色譜分離，以含7.5％甲醇的二氯甲烷洗脫。集中含有純產(chǎn)物的級(jí)份而得到9-[2-反油酰氧基-3-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤(640mg)。1H n.m.r.(DMSO-d6)0.84，t，J＝6.7Hz，3H；1.23，brs，20H；1.30-1.59，m，2H；1.85-2.00，m，4H；2.20，t，J＝7.3Hz，2H；2.22-2.41，m，1H；3.36，d，J＝5.4Hz，2H；3.85-4.07，m，4H；4.82，t，J＝5Hz，1H；5.23-5.48，m，2H；6.44，brs，2H；7.63，s，1H；10.58，brs，1H.實(shí)施例249-[2-硬脂酰氧基-3-(纈氨酰甲基)丙-1-基]鳥嘌呤鹽酸鹽9-[2-反油酰氧基-3-羥甲基丙-1-基]鳥嘌呤(200mg，0.40mmol)、Z-L-纈氨?；?NCA(121mg，0.44mmol)和4-二甲基氨基吡啶(5mg)的二氯甲烷(20ml)混合物在氮?dú)鈿夥障掠谑覝財(cái)嚢?天。再添加部分Z-L-纈氨?；?NCA(40mg，0.14mmol)并在40°攪拌反應(yīng)6小時(shí)，然后于室溫16小時(shí)。借助真空在60°除掉溶劑，經(jīng)二氧化硅預(yù)吸附和快速色譜分離殘留物，以含6％甲醇的二氯甲烷洗脫。集中含有純產(chǎn)物的級(jí)份而得到9-[2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧基-3-反油酰氧甲基)丙-1-基]鳥嘌呤，一種無色的泡沫狀固體(174mg，60％)。
1H n.m.r.(DMSO-d6)0.78-0.93，m，9H；1.22，brs，20H；1.30-1.59，m，2H；1.89-2.13，m，5H；2.23，t，J＝7.2，Hz，2H；2.50-2.72，m，1H；3.85-4.14，m，6H；5.04，s，2H；5.24-5.45，m，2H；6.43，s，2H，7.34，brs，5H；7.61，d，J＝3.9Hz，1H；7.74，d，J＝8.1Hz，1H；10.64，brs，1H.
按照實(shí)施例16的方法從9-[2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧基-3-反油酰氧甲基)丙-1-基]鳥嘌呤(162mg，0.22mmol)、1M鹽酸水溶液(0.22ml，0.22mmol)和10％碳載鈀(60mg)在乙醇(10ml)中制備9-[2-硬脂酰氧基-3-(纈氨酰氧甲基)丙-1-基]鳥嘌呤鹽酸鹽而得到產(chǎn)物，一種無色的羽狀固體(108mg，77％)。1H n.m.r.(DMSO-d6)0.84，t，J＝6.3Hz，3H；0.93，dd，J＝3.2&6.8Hz，6H；1.22 brs，28H；1.36-1.57，m，2H；1.98-2.23，m，1H；2.25，t，J＝7.3Hz，2H；2.55-2.75，m，1H；3.77，dd，J＝4.6&10，0Hz，1H；3.90-4.22，m，6H；6.51，brs，2H；7.69，s，1H；7.65-8.15，brs，3H；10.48-10.82，brs，1H.實(shí)施例252-氨基-9-[2-L-纈氨酰氧基-3-L-纈氨酰氧甲基丙-1-基]嘌呤二鹽酸鹽2-氨基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]嘌呤(9)(500mg，2.24mmol)、Z-L-纈氨?；?NCA(1.30g，4.70mmol)和4-二甲基氨基吡啶(5mg)的N，N’-二甲基甲脒(10ml)混合物在氮?dú)鈿夥障掠谑覝財(cái)嚢?8小時(shí)。反應(yīng)混合物濃縮至干并經(jīng)二氧化硅色譜分離殘留物，以醋酸乙酯為洗脫溶劑。集中含有純產(chǎn)物的級(jí)份并濃縮而得到2-氨基-9-[2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧基)-3-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧甲基)丙-1-基]嘌呤，一種蜜糖色的玻璃狀固體(1.12g，73％)。1H n.m.r.(DMSO-d6)0.86，d，J＝6.7Hz，12H；1.85-2.15，m，2H；2.57-2.78，m，1H；3.83-4.19，m，8H；5.04，s，4H；6.49，s，2H；7.34，brs，10H；7.76，d，J＝8.2Hz，2H；7.96，s，1H；8.59，s，1H.
按照實(shí)施例16的方法從2-氨基-9-[2-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧基)-3-(N-芐氧基羰基-L-纈氨酰氧甲基)丙-1-基]嘌呤(500mg，0.73mmol)、1M鹽酸水溶液(1.45ml，1.45mmol)和10％碳載鈀(90mg)在乙醇(25ml)中制備2-氨基-9-[2-L-纈氨酰氧基-3-L-纈氨酰氧甲基丙-1-基]嘌呤二鹽酸鹽而得到產(chǎn)物，一種無色的羽狀固體(319mg，89％)。1H n.m.r.(DMSO-d6)0.87-1.03，m，12H；2.03-2.27，m，2H；2.70-2.80，m，1H；3.83，dd，J＝4.8&amp;11.2Hz，2H；4.07-4.42，m，6H；6.50，s，2H；8.15-8.88，brs，3H；8.20，s，1H；8.60，s，1H.實(shí)施例269-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-6-硫代鳥嘌呤9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基-6-碘代嘌呤(576mg，1.33mmol)和硫脲(100mg，1.33mmol)的乙醇(7ml)混合物在氮?dú)鈿夥障录訜峄亓?小時(shí)。冷凍反應(yīng)混合物并過濾產(chǎn)物，以乙醇洗滌。借助真空在80°干燥此淡檸檬色的固體而得到9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-6-硫代鳥嘌呤(288mg，64％)。1H n.m.r(DMSO-d6)1.98，s，6H；2.52-2.74，m，1H；3.87-4.13，m，6H；6.77，s，2H；7.88，s，1H；11.89，s，1H.實(shí)施例27抗病毒活性按照Korba和Gerin的方法在感染有乙型肝炎病毒的人體細(xì)胞中實(shí)施抗病毒活性試驗(yàn)。從劑量反應(yīng)曲線確定50％和90％抑制病毒復(fù)制率的有效濃度。一些本發(fā)明化合物的結(jié)果示于表2中。表2<
>實(shí)施例28生物利用率試驗(yàn)以鼠來比較本發(fā)明各種化合物的口腔生物利用率。簡(jiǎn)單地說，按0.2mmol/kg體重以口腔填喂的方式服用化合物?；衔飸腋≡诤?％羧甲基纖維素和0.05％吐溫80的1ml水性和藥物中。過8小時(shí)后血漿取樣，母體化合物的濃度，這里是實(shí)施例1的化合物，以HPLC確定。
等份(150μl)鼠血漿以10％三氯醋酸(37.5μl)酸化并以3000rpm離心分離10分鐘。經(jīng)0.22μm的醋酸纖維素離心分離器過濾上層清液。然后將樣品(100μl)注射到40℃平衡的C18 Waters Symmetry HPLC柱(3.9和150mm，5μm)中。在0.5ml/min下泵送兩組分的移動(dòng)相(A-蒸餾、去離子水中的0.05％三氟乙酸和20mM庚烷磺酸；B-蒸餾、去離子水中的0.05％三氟乙酸、20mM庚烷磺酸和70％乙腈)，移動(dòng)相組分B的百分?jǐn)?shù)在25分鐘內(nèi)從0線性增加至25％。分析所借助的是254nm的紫外檢測(cè)。洗脫母體化合物17分鐘。描出藥物濃度對(duì)時(shí)間的曲線，確定曲線所涵面積。對(duì)比母體化合物鈉鹽的靜脈內(nèi)用藥方式所給出的曲線所涵面積而給出總體生物利用率的標(biāo)度，以百分?jǐn)?shù)表示。結(jié)果示于表3。
本領(lǐng)域熟練人員所諳熟的是，對(duì)所述本發(fā)明所做的各種修改和/或變更并不違背本發(fā)明的精神或范圍。因此，現(xiàn)有實(shí)施例和特定細(xì)節(jié)可認(rèn)為在所有方面都是說明本發(fā)明的而并不構(gòu)成限制。
此處公開或者在本申請(qǐng)的特定例和/或權(quán)利要求中提及或意指的各種步驟、特性、組合物和化合物，單獨(dú)、籠統(tǒng)以及任意兩個(gè)或多個(gè)所述步驟或特性的任意和所有組合。
縱觀本特定例及后繼的權(quán)利要求，除非在其它方面全文有要求，將“包含”一詞及其變體如“包含了”和“包含有”理解為，表示包括了所敘述的總體或分步或者是總體或分步的組合但并不排除任何其它的總體或分步或者總體或分步的組合。
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權(quán)利要求
1.結(jié)構(gòu)式(1)化合物或者其鹽及其藥理許用的衍生物的用途
(1)其中R1是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；R2是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；和R和R’互不相關(guān)地選擇自氫、烷基和芳基；用于治療和/或預(yù)防乙型肝炎病毒感染。
2.權(quán)利要求1的用途，其中R1是羥基或者是能在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成羥基的基團(tuán)。
3.權(quán)利要求1或2的用途，其中R2是氨基或者是能在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成氨基的基團(tuán)。
4.權(quán)利要求1～3任意一項(xiàng)的用途，其中結(jié)構(gòu)式(1)化合物或其鹽或其藥理許用的衍生物是結(jié)構(gòu)式(4)的化合物
其中X是氫或羥基；R5和R6相同或不同，同與其相連的氧原子一起形成羥基基團(tuán)、酯、碳酸酯、氨基甲酸酯或硫代碳酸酯；及其鹽。
5.權(quán)利要求4的用途，其中R5和R6相同或不同，同與其相連的氧原子一起形成羥基基團(tuán)或酯。
6.權(quán)利要求1的用途，其中R1是羥基而R2是氨基。
7.一種治療或預(yù)防乙型肝炎病毒感染的方法，其方法包括，給有需要的病人服用一種有效量的結(jié)構(gòu)式(1)化合物
其中R1是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；R2是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；和R和R’互不相關(guān)地選擇自氫、烷基和芳基；或者其鹽及其藥理許用的衍生物。
8.結(jié)構(gòu)式(1)化合物的用途
其中R1是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；R2是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；和R和R’互不相關(guān)地選擇自氫、烷基和芳基；或者其鹽及其藥理許用的衍生物；用于制造治療或預(yù)防乙型肝炎病毒感染的藥物。
9.一種用于治療或預(yù)防乙型肝炎病毒感染的藥物組合物，包括結(jié)構(gòu)式(1)的化合物
其中R1是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；R2是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；和R和R’互不相關(guān)地選擇自氫、烷基和芳基；或者其鹽及其藥理許用的衍生物；連同一種藥理許用的載體或稀釋劑。
10.結(jié)構(gòu)式(1a)的化合物
其中R1是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；R2是氫、鹵素、羥基、疊氮基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、氨基、烷氨基、肼基、羥氨基、芐氧基、NRR’或NRCOR’；和R和R’互不相關(guān)地選擇自氫、烷基和芳基；或者其鹽及其藥理許用的衍生物；只是不包括如下的化合物9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-鳥嘌呤、9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]-腺嘌呤，9-[(2-異丙基-1，3-二噁烷-5-基)甲基]-鳥嘌呤和9-[(2-異丙基-1，3-二噁烷-5-基)甲基]-腺嘌呤。
11.權(quán)利要求10的化合物，是2-氨基-9-[3-羥基-2-羥甲基丙-1-基]嘌呤、9-[3-乙酰氧基-2-乙酰氧甲基丙-1-基]-2-氨基嘌呤或其鹽或其藥理許用的衍生物。
12.一種藥物組合物，包括權(quán)利要求10的結(jié)構(gòu)式(1a)化合物，連同一種藥理許用的載體或稀釋劑。
13.權(quán)利要求7的一種方法，其中結(jié)構(gòu)式(1)化合物或鹽或其衍生物與其它的治療病毒感染用藥物一起服用。
14.權(quán)利要求7的一種方法，其中通過口腔途徑用藥。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種結(jié)構(gòu)式(1)化合物或者鹽及其藥理許用的衍生物的用途其中:R
文檔編號(hào)A61K31/522GK1269801SQ98809019
公開日2000年10月11日 申請(qǐng)日期1998年9月11日 優(yōu)先權(quán)日1997年9月11日
發(fā)明者S·M·馬庫(kù)西歐, K·E·扎維斯 申請(qǐng)人:聯(lián)邦科學(xué)和工業(yè)研究組織