專利名稱：可從烏墨蒲桃籽分離得到的混合物,它們的制備,及這些混合物及其某些組分作為藥物的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及可從烏墨蒲桃(桃金娘科)(Eugenia Jambolana Lamarck)籽分離得到的混合物，含有這些混合物或它們的某些組分的藥物，這些混合物和組分在制備抗糖尿病藥物中的應用及它們的制備。
FR2465484專利描述了由烏墨蒲桃籽或果皮制得的植物提取物，這種提取物含有混合的多酚和甾醇復合物。
現在發(fā)現了可從烏墨蒲桃籽分離得到的新的混合物，這些混合物沒有多酚和甾醇復合物，及這些混合物中的某些組分具有降血糖的性能。
這些混合物的特征在于它們沒有多酚和甾醇衍生物，這些混合物可采用下述方法分離磨碎烏墨蒲桃籽、用熱的低級脂族醇浸泡該粉末、過濾、回收不再含有多酚和甾醇化合物的不溶部分、用含氨的溶液處理不溶部分、用熱的低級脂族醇處理含氨的混合物、過濾、回收不溶物以及干燥構成混合物Ⅰ的這種不溶物，然后任選地用水-低級脂族醇溶液處理混合物Ⅰ，過濾，部分濃縮濾液、用非極性吸附樹脂純化、部分濃縮、離心、超濾和分離混合物Ⅱ。
從混合物Ⅱ還可以分離出草氨酸鈉和具有下述化學式的化合物
式中或者R1代表氫原子，而R2代表下式的鏈-CH2-CHOH-CHOH-CH2OH (A)-CHOH-CHOH-CHOH-CH2OH (B)或者R1代表式(A)的鏈，而R2代表氫原子。
TOUSSAINT,Ann.,120,237(1861)已經描述過草氨酸鈉。
化學式(Ⅰ)的化合物已經在下述文獻中描述過KUHN等人.Ann.,644,122-127(1961)；TSUCHIDA等人.，Agr.Biol.Chem.,39(5),1143-1148(1975)；TSUCHIDA等人。,Agr.Biol. Chem.,40(5),921-925(1976)；TSUCHIDA等人.，Nippon Shokuhin Kogyo Gakkaishi,37,154-161(1990)以及AVALOS等人，四面體(tetrahedron),49,2655-2675(1993)。
本發(fā)明也涉及由已干燥并充分磨碎的烏墨蒲桃籽制備混合物Ⅰ的方法。
優(yōu)選地，用篩孔直徑為0.5微米的標準篩篩分這種粉末，然后進行以下處理a-在溫度40-70℃下在低級脂族醇中攪拌浸泡，b-真空過濾，并回收不溶物，c-在溫度40-70℃下用低級脂族醇在攪拌下浸泡不溶物，d-在真空下過濾，并除去主要含有不需要的多酚和甾醇的醇相，e-在溫度10-30℃下將不溶物懸浮在含氨的溶液中，f-在溫度40-70℃下將整個含氨濕潤物懸浮在水-低級脂族醇的溶液中，g-過濾并除去醇溶液，h-用低級脂族醇洗滌不溶物，過濾并除去醇溶液，I-回收不溶物，并干燥。
在步驟a中，一般是每公斤已篩分粉末使用2-10升如甲醇或乙醇之類的低級脂族醇浸泡。優(yōu)選地，在60℃使用5升濃度為93-95°Gay Lussac的乙醇浸泡1小時。
優(yōu)選地，在40千帕真空下進行步驟b的過濾。
在步驟c，一般是每公斤已篩分原料粉末使用2-10升如甲醇或乙醇之類的低級脂族醇浸泡。優(yōu)選地，在60℃溫度使用4升濃度為93-95°GayLussac的乙醇浸泡1小時。
優(yōu)選地，在40千帕真空下進行步驟d的過濾。
在步驟e，一般是每公斤已篩分原料粉末使用750-1250毫升含氨的水溶液，每1000毫升該溶液優(yōu)選地含有350毫升28％氨。特別有利的是，使用1升含氨的水溶液，并且在溫度約20℃下操作10-30小時，優(yōu)選地是20小時。
在步驟f，由1公斤已篩分原料粉末得到的含氨濕潤物，通常是在攪拌下，60℃下在2-10升低級脂族醇-水混合物(例如甲醇或乙醇)(以體積計70/30至80/20)中，優(yōu)選地在5升乙醇-水混合物(以體積計75/25)中懸浮1小時。
在步驟g，優(yōu)選地在約80千帕真空下用棉帆布進行過濾。
在步驟h，一般是每公斤已篩分原料粉末用500-1500毫升低級脂族醇(例如甲醇或乙醇)洗滌，優(yōu)選地用1升乙醇洗滌，再在約80千帕真空下用棉帆布進行過濾。
在步驟i，優(yōu)選地在自由流動空氣和避光的條件下進行干燥。
本發(fā)明還涉及混合物Ⅱ的制備方法。
前面得到的混合物Ⅰ進行下述操作j-用水-低級脂族醇溶液處理混合物Ⅰ，k-傾析，然后，一方面對抽出的上層相過濾，得到濾液1，另一方面，用水處理下層相，并過濾得到濾液2，合并濾液1和2，并濃縮成水相。
l-用非極性吸附樹脂處理，再過濾，m-濃縮濾液，過濾后再進行超過濾，n-凍干和分離提取物Ⅱ。
在步驟j，每公斤混合物Ⅰ一般使用10-25升水-低級脂族醇(例如甲醇或乙醇)(以體積計95/5至90/10)溶液。更可取的是在18升水-乙醇溶液(以體積計17.7-0.93)中操作。
在步驟k，更可取的是用棉帆布過濾上層相。有利的是在下層相中每公斤混合物Ⅰ添加10-25升水，具體是10升水，再用燒結玻璃過濾器過濾。
在步驟k，一般在熱虹吸管濃縮器中在35℃和0.4千帕真空條件下進行濃縮。
在步驟1，優(yōu)選地使用由Rhom & Hass公司銷售的S861樹脂或XAD型樹脂，再用燒結玻璃過濾器過濾。
在步驟m，一般在熱虹吸管濃縮器中在35℃與0.4千帕真空條件下進行濃縮。用10kd、3kd和1kd濾芯進行3次相繼超濾也是有利的。
本發(fā)明還涉及草氨酸鈉和化學式(Ⅰ)化合物的制備方法。
該方法是對混合物Ⅱ進行下述操作
o-用硅藻土柱色譜分離混合物Ⅱ，回收含有4種產物的級分，并將這些級分合并成一個級分，p-用葡聚糖凝膠(SephadexR)柱色譜分離前面所得到的級分，以得到草氨酸鈉，其式中R1代表氫原子，而R2代表(B)殘基的式(Ⅰ)化合物，以及其式中R1代表氫原子，而R2代表(A)殘基的式(Ⅰ)化合物與其式中R1代表(A)殘基，而R2代表氫原子的式(Ⅰ)化合物的混合物。
q-任選地用HPLC色譜分離其式中R1代表氫原子，而R2代表(A)殘基的式(Ⅰ)化合物與其式中R1代表(A)殘基，而R2代表氫原子的式(Ⅰ)化合物的混合物。
步驟o用如庚烷、乙酸乙酯或低級脂族醇之類的有機溶劑進行色譜分離。優(yōu)選地，使用用水飽和的Prolabo公司銷售的RCHEM ELUT柱，然后相繼用庚烷、庚烷-乙酸乙酯混合物(以體積計50/50)、乙酸乙酯、乙酸乙酯-正丁醇混合物(以體積計95/5；90/10；80/20；50/50；20/80)、正丁醇和正丁醇-水混合物(以體積計98/2，其后95/5)洗脫。
步驟p優(yōu)選地采用水-乙醇混合物(以體積計50/50)進行色譜分離。
步驟q一般使用由AIT公司銷售的YMC 180DS-AQ柱，用水與0.1％甲酸的混合物作為洗脫劑進行色譜分離。
在前面與下面的定義中，低級脂族醇優(yōu)選地含有1-4個碳原子。
含有混合物Ⅰ或混合物Ⅱ或草氨酸鈉或一種或多種式(Ⅰ)化合物的藥物也構成本發(fā)明的部分。
本發(fā)明還涉及混合物Ⅰ和混合物Ⅱ、草氨酸鈉和式(Ⅰ)化合物或它們的混合物，在制備治療或預防糖尿病和糖尿病并發(fā)癥藥物中的應用。
下述實施例說明本發(fā)明。實施例1混合物Ⅰ的制備JAMBOLANA LAMARCK烏墨蒲桃籽在避光的條件下在自由流動的空氣中進行干燥，然后充分磨碎。這樣得到的粉末用0.5微米篩孔的篩子篩分。1公斤篩分的粉末在5升濃度為93-95°Gay Lussac的乙醇中在60℃機械攪拌下浸泡1小時。在真空過濾之后，不溶物在相同的條件下用4升相同濃度的乙醇在60℃再處理1小時。棄去主要含有不需要的多酚和甾醇復合物的這兩次乙醇提取物。在完成過濾之后，不溶物用1升含氨的溶液(350毫升28％NH4OH和足夠量的蒸餾水以得到1升溶液)溶解，再讓該混合物在約20℃接觸約20小時。該含氨濕潤物在5升濃度為93-95°Gav Lussac的乙醇-水混合物(以體積計75/25)中在60℃機械攪拌浸泡1小時。過濾不溶物，并用1升相同濃度的乙醇進行洗滌；除去濾液與洗液。最后的不溶物在自由流動的空氣中在避光的條件下進行干燥。這樣得到粉末狀的混合物Ⅰ，該混合物沒有多酚和甾醇衍生物。由粉碎篩分的籽計算的產率是80％。實施例2-混合物Ⅱ的制備1公斤實施例1得到的混合物Ⅰ在含有17.7升水和0.93升乙醇的溶液中攪拌3小時。在傾析一夜后，抽出上層相(13.5升)，然后在7升過濾器(Schott)中用棉帆布過濾得到濾液1(13.5升)，另外下層相與20升水一起攪拌1小時，用3號燒結玻璃過濾器過濾得到濾液2(24升)。合并濾液1和2，再在熱虹吸管濃縮器中在35℃與0.4千帕真空下濃縮成水相(33.5升)。該濃縮物與2.5升S861樹脂(Rhom & Haas)攪拌混合1小時，然后用3號燒結玻璃過濾器過濾。濾液在熱虹吸管濃縮器(Schott)中在35℃與0.4千帕真空下濃縮到5.5升。濃縮物用渦輪離心機離心(離心力62000克)，用0.22微米泵過濾器(Gelman型suporcap 100)過濾。在用10Kd、3Kd和1Kd濾芯3次相繼超濾和冷凍干燥之后，得到25克呈深褐色易吸濕粉末狀混合物Ⅱ。實施例3-由混合物Ⅱ得到的組分525毫克實施例2得到的混合物Ⅱ在1.1毫升milli Q過濾水中的溶液用PROLABO公司銷售的RCHEM ELUT柱色譜分離，其柱高50厘米，直徑1厘米，用milli Q過濾水飽和。用庚烷與梯度不斷增加的乙酸乙酯、然后用正丁醇、正丁醇/鹽酸和水進行洗脫(級分1庚烷；級分2庚烷/乙酸乙酯(以體積計50/50)；級分3-4乙酸乙酯；級分5-6乙酸乙酯/正丁醇(以體積計95/5)；級分7-8乙酸乙酯/正丁醇(以體積計90/10)；級分9-10乙酸乙酯/正丁醇(以體積計80/20)；級分11-12乙酸乙酯/正丁醇(以體積計50/50)；級分13-14乙酸乙酯/正丁醇(以體積計20/80)；級分15-16正丁醇；級分17-18正丁醇/水(以體積計98/2)；級分19-21正丁醇/水(以體積計95/5))。每個級分為50毫升。級分19-21合并，并在減壓下濃縮至干。這樣得到108毫克級分，這種級分可用Pharmacia銷售的Rsephadex LH20柱(高100厘米，直徑1厘米)，用甲醇-水混合物(以體積計50-50)進行色譜分離。用同樣的洗脫混合物進行洗脫；每個級分1毫升收集多個級分。
1-合并級分88-91，并濃縮至干。得到14.4毫克產品，在0.5毫升乙醇中結晶得到2毫克2,5-二-(四羥基丁基)吡嗪，呈白色晶體狀，其特征如下-[α]20(Na 589)旋光=-137°±2.0(二甲基亞砜；c=0.5)，-使用Nicolet 60SX-R儀器，在KBr中以溶液測定了紅外光譜，主要的特征吸收帶3281cm-1(與H2O相關的νOH),2972+2940+2901+2880cm-1(CH2和CHOH的νCH),2733cm-1(相關的νOH),1635cm-1(H2O的OH變形)，1491cm-1(吡嗪核的νC=C和C=N),1449cm-1(吡嗪核的νC=C和C=N+OH變形)，1413cm-1(OH變形)，1343cm-1(吡嗪核的νC=C和C=N),1309+1290+1251+1215+1181+1161+1123cm-1(CH變形)，1092cm-1(仲醇的νCO),1048+1035cm-1(伯醇+吡嗪核的νCO),947+899+854cm-1(仲醇)，877cm-1(吡嗪核的νCH),727cm-1(吡嗪核+OH變形)，639cm-1(吡嗪核)，寬的607+531cm-1(OH變形)，451+411cm-1(吡嗪核)，-用FINNIGAN TSQ46儀器測定了質譜，質荷比M/z=321(MH)+，-1H NMR譜(600MHz,DMSO，以ppm為單位的化學位移)3.40和3.61(2mt，每個2H在4’,4”位的CH2)；3.58(2mt，每個2H在2’,2”,3’,3”位的CH)；4.36(寬t,2H在4’,4”位的OH)；4.40(d,J=7.2Hz,2H在2’,2”位的OH)；4.63(d,J=4.8Hz,2H在3’,3”位的OH)；4.95(dd J=6.0和0.6Hz,2H在1’,1”位的CH)；5.30(d,J=6.0Hz,2H在1’,1”位的OH)；8.61(s,2H,在3和6位的CH)，-紫外光譜λ最大=275nm(ε=8260)；206nm(ε=10220)(c=19毫克/毫升；水)，λ最大=276nm(ε=7960)；206nm(ε=9920)(c=19毫克/毫升；0.1N HCl)，λ最大=275nm(ε=7690)(c=19毫克/毫升；0.1N KOH)，-用AIT公司銷售的150×4.6毫米Y.M.C.18ODS-AQ柱(貨號AIT/DE940377)進行HPLC，用H2O+0.1％甲酸以1毫升/分鐘流量等遞度洗脫，在270nm UV檢測，保留時間2分32秒。
2-合并級分92和93，并濃縮至干。得到9毫克級分，在0.5毫升乙醇中結晶得到1.2毫克草氨酸鈉，具有與TOUSSAINT,Ann.,120,237(1861)描述的相同特征。
3-合并級分94-97，并濃縮至干。得到25.9毫克級分，在0.5毫升乙醇中結晶得到6.2毫克2-(四羥基丁基)-5-(2’,3’,4’-三羥基丁基)吡嗪和2-(四羥基丁基)-6-(2’,3’,4’-三羥基丁基)吡嗪的混合物，該混合物用150×4.6毫米Y.M.C.18ODS-AQ柱(貨號AIT/DE940377)進行HPLC再分離；用H2O+0.1％甲酸以1毫升/分鐘流量等遞度洗脫，在270nm UV檢測。
這樣得到5.2毫克2-(四羥基丁基)-5-(2’,3’,4’-三羥基丁基)吡嗪，它具有下述特征-[α]20(Na 589)旋光=-116.3±1.7(二甲亞砜；c=0.5)，-使用Nicolet 60SX-R儀器，在KBr中以溶液測定了紅外光譜，主要的特征吸收帶3398cm-1(與H2O相關的νOH),2951十2922+2891cm-1(CHOH的νCH),2761cm-1(相關的νOH),1636cm-1(H2O的OH變形)，1483+1463cm-1(吡嗪核的νC=C和C=N),1411cm-1(OH變形)，1367+1328+1270+1227+1191cm-1(CH變形)，1071cm-1(仲醇的νCO),1041cm-1(伯醇+吡嗪核的νCO),943+897cm-1(仲醇)，869cm-1(吡嗪核的νCH),645cm-1(吡嗪核的CH)，寬的607cm-1(OH變形)，446+409cm-1(吡嗪核)，-用FINNIGAN TSQ46儀器測定了質譜，質荷比M/z=305(MH)+，-1H NMR譜(600MHz,DMSO，以ppm為單位的化學位移)2.70和3.04(2dd,J=9.0和15.0Hz和J=3.0和15.0Hz，每個1H在1”位的CH2)；330-3.45(多個mt，在3”,4’,4”位的CH)；3.53-3.65(多個mt,4H在2’,3’,4’,4”位的CH)；3.73(mt,1H:2”位的CH)；4.37(寬t,1H在4’位OH)；4.42(mt,2H在2’和4”位的OH)；4.60(d,J=6Hz,1H在2”位的OH)；4.63(d,J=6Hz,1H在3’位的OH)；4.67(d,J=6Hz,1H在3”位的OH)；4.92(dd J=6.0和0.6Hz,1H在1’位的CH)；5.30(d,J=6.0Hz,1H在1’位的OH)；8.39(s,1H，在6位的CH)；8.61(s,1H，在3位的CH)；-紫外光譜λ最大=276nm(ε=7756)；206nm(ε=8738)(c=19毫克/毫升；水)，λ最大=277nm(ε=7218)；208nm(ε=7171)(c=19毫克/毫升；0.1NHCl)，λ最大=276nm(ε=7467)(c=19毫克/毫升；0.1N KOH)，-用AIT公司銷售的150×4.6毫米Y.M.C.18ODS-AQ柱(貨號AIT/DE940377)進行HPLC，用H2O+0.1％甲酸以1毫升/分鐘流量等遞度洗脫，在270nm UV檢測，保留時間3分75秒。和1毫克2-(四羥基丁基)-6-(2’,3’,4’-三羥基丁基)吡嗪，它具有下述特征-1H NMR譜(600MHz,DMSO，以ppm為單位的化學位移)2.70和3.04(2dd,J=9.0和15.0Hz和J=3.0和15.0Hz，每個1H在1”位的CH2)；330-3.45(多個mt，在3”,4’,4”位的CH)；3.53-3.65(多個mt,4H在2’,3’,4’,4”位的CH)；3.73(mt,1H:2”位的CH)；4.37(寬t,1H在4’位OH)；4.42(mt,2H在2’和4”位的OH)；4.60(d,J=6Hz,1H在2”位的OH)；4.63(d,J=6Hz,1H在3’位的OH)；4.67(d,J=6Hz,1H在3”位的OH)；4.92(dd J=6.0和0.6Hz,1H在1’位的CH)；5.30(d,J=6.0Hz,1H在1’位的OH)；8.31(s,1H，在5位的CH)；8.53(s,1H，在3位的CH)；-用AIT公司銷售的150×4.6毫米Y.M.C.18ODS-AQ柱(貨號AIT/DE940377)進行HPLC，用H2O+0.1％甲酸以1毫升/分鐘流量等遞度洗脫，在270nm UV檢測，保留時間3分61秒。
根據下述方案，用鏈脲菌素致患糖尿病的鼠和餐后高血糖的正常鼠，確定混合物Ⅰ和Ⅱ、草氨酸鈉和化學式(Ⅰ)化合物的降血糖活性Ⅰ-用鏈脲菌素使鼠患糖尿病由腹膜內注射劑量為210或265毫克/公斤鼠的鏈脲菌素使體重22-25克白化Swiss鼠患糖尿病，其中鏈脲菌素稀釋在檸檬酸鹽中，而濃度是使每只鼠在第一天(D1)可接受注射0.2毫升。3-4天后，檢查2至3只鼠看是否建立了糖尿病(血糖高于7.2毫摩爾/升，即每100毫升為130毫克)。在禁食4小時后測定血糖。如果這些鼠患上糖尿病，它們按5-7只鼠一組分成數組。其中每一組由D1開始，每天接受一個選定的產品劑量。每天固定時間采用胃插管法給予鏈脲菌素一次，0.4毫升蒸餾水作為賦形劑。有兩組對照-一組未處理的患糖尿病的鼠-一組正常的鼠這兩對照組與處理鼠同時采用胃插管法給予0.4毫升賦形劑。
處理4天。第5天(D5)不給產品。在禁食4小時后，測定最后的血糖。
Ⅱ-餐后高血糖的正常鼠采用下述方案使體重22-25克白化Swiss鼠餐后高血糖-禁食2小時-1小時內食物過量-禁食2小時在禁食2小時后測定血糖，這是時間T0血糖。這時根據測定的血糖將這些鼠分成均勻的組。采用胃插管法立即喂0.4毫升蒸餾水中的待評價產品。對照組喂賦形劑(0.4毫升蒸餾水)。在一小時后，測定最后的血糖，這是時間T60血糖。
采用鏈脲菌素致糖尿病鼠的血糖結果
餐后高血糖正常鼠的血糖結果
本發(fā)明的混合物、草氨酸鈉和式(Ⅰ)化合物都具有低毒性。小鼠口服時，它們的LD50高于2000毫克/千克。
本發(fā)明的混合物、草氨酸鈉和式(Ⅰ)化合物可降低糖尿病患者的血糖，因此它們治療糖尿病和糖尿病并發(fā)癥是有效的。
當單獨使用這些產品治療糖尿病時沒有低血糖的危險。這是真正的抗糖尿病作用。這種效果看來是由外周葡萄糖增加造成的。這些產品對胰島素分泌沒有很大的刺激作用，但是有少量胰島素對于它們發(fā)揮作用又是必不可少的。
在患自發(fā)性糖尿病的籠禁沙鼠(Psammomys obesus)身上，這些產品可降低高血糖，預防和減少白內障，還帶來一定程度的生育力。
在人的治療方面，這些產品對預防和治療糖尿病是有效的，尤其是治療沒有丙酮尿的Ⅱ型糖尿病(NID糖尿病)、肥胖性糖尿病、五十歲糖尿病、多血后(metaplethorique)糖尿病、老年性糖尿病和輕型糖尿病。由于它們的胰島素增效作用，它們可作為胰島素療法的補充用于胰島素依賴型糖尿病(可以逐漸減少胰島素劑量)、不穩(wěn)定型糖尿病及耐胰島素型糖尿病中，當降血糖硫酰胺不能產生血糖足夠降低時，它們可以作為補充劑來使用。這些產品在糖尿病并發(fā)癥中也可使用，如高血脂癥和脂類代謝紊亂、血脂異常、肥胖。這些產品在預防與治療下述疾病時也是有效的，如動脈粥樣硬化損害及其并發(fā)癥(冠脈疾病、心肌梗塞、心肌病，這三種并發(fā)癥向左心室機能不全發(fā)展，各種動脈病、下肢關節(jié)炎致跛行并向潰瘍和壞疽發(fā)展，腦血管機能不全及其并發(fā)癥，血管源的性陽萎)、糖尿病性視網膜病及其任何癥狀(毛細血管的滲透性增加、毛細血管擴張與血拴形成、微動脈瘤、動靜脈分流、靜脈擴張、穿孔(ponctiformes)和黃斑出血、滲出物、斑疹水腫、增生性視網膜病癥狀新血管、增生性視網膜炎瘢痕、玻璃體出血、視網膜脫落)、糖尿病性白內障、各種形式的糖尿病性神經病(外周多發(fā)性神經病及其癥狀，如感覺異常、感覺過敏和疼痛、單一神經病、神經根病、自主神經病、糖尿病性肌萎縮)、糖尿病足癥狀(下肢和足潰瘍)、彌散和結狀兩種形式的糖尿病性腎臟病、動脈粥樣硬化(脂蛋白HDL升高有利于從動脈粥樣化斑除去膽甾醇，降低脂蛋白LDL、降低LDL/HDL比值，抑制LDL氧化作用、減低血小板附著性)、高血脂癥和血脂異常(高膽甾醇血癥、高甘油三酯血癥、脂肪酸比率正?；?、尿酸血癥正常化、脂蛋白A和B正常化)、白內障、動脈高血壓及其后果。
本發(fā)明的藥物是由本發(fā)明的混合物、草氨酸鈉、式(Ⅰ)化合物或這些產品的組合組成的，這些產品為純產品或呈組合物形式，該組合物中它與任何其他藥學上可接受的產品配合，這種產品可以是惰性的或生理學上活性的產品。本發(fā)明的這些藥物可以通過口服、腸胃道外、直腸或局部方式用藥。
作為口服的固體組合物，可以使用片劑、丸劑、粉劑(明膠膠囊、扁囊)或顆粒劑。在這些組合物中，將本發(fā)明的活性組分與一種或多種如淀粉、纖維素、蔗糖、乳糖或二氧化硅之類的惰性稀釋劑在氬氣流下進行混合。這些組合物還可以含有除這些稀釋劑之外的物質，例如一種或多種如硬脂酸鎂或滑石粉之類的潤滑劑，染料、糖衣(糖衣丸)或涂劑。
作為口服液體組合物，可以使用在藥學上可接受的含有如水、乙醇、甘油、植物油或石蠟油之類的惰性稀釋劑的溶液、懸液、乳液、糖漿和酏劑。這些組合物還可以含有除這些稀釋劑之外的物質，例如潤濕劑、甜味劑、增稠劑、香料或穩(wěn)定劑。
腸胃道外用的滅菌組合物優(yōu)選地可以是含水溶液或非水溶液、懸液或乳液。作為溶劑或賦形劑，可以使用水、丙二醇、聚乙二醇、植物油(特別是橄欖油)、可注射用的有機酯(例如油酸乙酯)或其他合適的有機溶劑。這些組合物還可以含有佐劑，具體是潤濕劑、等滲劑、乳化劑、分散劑和穩(wěn)定劑。可以采用多種方式滅菌，例如無菌過濾、在該組合物中加入滅菌劑、輻照或加熱。還可以將這些組合物制成無菌的固體組合物，在使用時可將該固體組合物溶解于無菌的水中或任何其他可注射用的無菌介質中。
直腸用的組合物是拴劑或直腸用膠囊，它們裝有除活性產品之外的賦形劑，如可可脂、半合成的甘油酯或聚乙二醇。
局部用的組合物例如可以是乳膏、洗液、眼藥水、漱口劑、滴鼻劑或氣霧劑。
劑量取決于所要達到的效果、治療時間與采用的用藥方式；這些劑量一般是成人口服每天150-600毫克，單位劑量是50-200毫克活性物質。
一般地，醫(yī)生可根據待治療病人的年齡、體重和任何其他固有的因素而確定合適的劑量。
下述實施例說明本發(fā)明的組合物實施例A
根據常規(guī)技術制備具有下述組成的劑量為50毫克活性產品的膠囊-活性產品 50毫克-纖維素18毫克-乳糖 55毫克-膠體二氧化硅 1毫克-羧甲基纖維素鈉10毫克-滑石粉10毫克-硬脂酸鎂 1毫克實施例B根據常規(guī)技術制備具有下述組成的劑量為50毫克活性產品的片劑-活性產品50毫克-乳糖104毫克-纖維素 40毫克-聚乙烯吡咯烷酮 10毫克-羧甲基淀粉鈉22毫克-滑石粉 10毫克-硬脂酸鎂2毫克-膠體二氧化硅2毫克-羥甲基纖維素、甘油、二氧化鈦混合物(72-3.5-24.5)適量至1個糖衣片為 245毫克實施例C制備具有下述組成的含有50毫克活性產品的可注射液-活性產品50毫克-苯甲酸 80毫克-苯甲醇 0.06毫升-苯甲酸鈉80毫克-95％乙醇0.4毫升-氫氧化鈉24毫克-丙二醇 1.6毫升-水適量至4毫升
權利要求
1.沒有多酚和甾醇衍生物并可采用下述方法分離的混合物磨碎烏墨蒲桃(Eugenia Jambolana Lamarck)籽、用熱的低級脂族醇浸泡、過濾、回收不再含有多酚和甾醇化合物的不溶部分、用含氨的溶液處理不溶部分、用熱的低級脂族醇處理含氨的混合物、過濾、回收不溶物以及干燥構成混合物Ⅰ的這種不溶物，然后任選地用水-低級脂族醇溶液處理混合物Ⅰ，過濾，部分濃縮濾液、用非極性吸附樹脂純化、部分濃縮、離心、超濾和分離混合物Ⅱ。
2.權利要求1所述混合物Ⅰ的制備方法，其特征在于烏墨蒲桃籽經干燥、磨細、篩分，所得到的粉末再進行下述處理a-在溫度40-70℃下在低級脂族醇中攪拌浸泡，b-在真空下過濾，并回收不溶物，c-在溫度40-70℃下在低級脂族醇中在攪拌下浸泡不溶物，d-在真空下過濾，并除去主要含有不需要的多酚和甾醇的醇相，e-在溫度10-30℃下將不溶物懸浮在含氨的溶液中，f-在溫度40-70℃下將整個含氨濕潤物懸浮在水-低級脂族醇的溶液中，g-過濾并除去醇溶液，h-用低級脂族醇洗滌不溶物，過濾并除去醇溶液，i-回收不溶物，并干燥混合物Ⅰ。
3.根據權利要求2所述的方法，其中在步驟a，每千克已篩分的粉末使用2-10升低級脂族醇進行操作。
4.根據權利要求2或3中任一權利要求所述的方法，其中在步驟a，使用5升濃度為93-95°Gay Lussac的乙醇在60℃浸泡1小時。
5.根據權利要求2-4中任一權利要求所述的方法，其中步驟b和d是在40千帕真空下進行過濾的。
6.根據權利要求2-5中任一權利要求所述的方法，其中在步驟c，每公斤已篩分原料粉末使用2-10升低級脂族醇進行操作。
7.根據權利要求2-6中任一權利要求所述的方法，其中在步驟c，使用4升濃為93-95°Gay Lussac的乙醇在溫度60℃浸泡1小時。
8.根據權利要求2-7中任一權利要求所述的方法，其中在步驟e，每公斤已篩分原料粉末使用750-1250毫升含氨的水溶液。
9.根據權利要求2-8中任一權利要求所述的方法，其中在步驟e，每公斤已篩分原料粉末使用1升含氨的水溶液，該溶液含有35毫升28％氨水，并且在溫度約20℃下操作10-30小時。
10.根據權利要求2-9中任一權利要求所述的方法，其中在步驟f，由1公斤已篩分原料粉末得到的含氨濕潤物懸浮在2-10升水-低級脂族醇溶液中。
11.根據權利要求2-10中任一權利要求所述的方法，其中在步驟f，在60℃在5升乙醇-水混合物(以體積計75/25)中操作1小時。
12.根據權利要求2-11中任一權利要求所述的方法，其中在步驟h，每公斤已篩分原料粉末使用500-1500毫升低級脂族醇洗滌。
13.根據權利要求2-12中任一權利要求所述的方法，其中在步驟h，用1升乙醇洗滌，再在約80千帕真空下用棉帆布進行過濾。
14.根據權利要求2-12中任一權利要求所述的方法，其中在步驟i，在自由流動的空氣和避光的條件下進行干燥。
15.權利要求1所述混合物Ⅱ的制備方法，其中權利要求1所述混合物Ⅰ進行下述操作j-用水-低級脂族醇溶液處理權利要求1所述的混合物Ⅰ，k-傾析，然后，一方面對抽出的上層相過濾得到濾液1，另一方面，用水處理下層相，并過濾得到濾液2，合并濾液1和2，并濃縮成水相。l-用非極性吸附樹脂處理，再過濾，m-濃縮濾液，過濾后再進行超過濾，n-凍干和分離提取物Ⅱ。
16.根據權利要求15所述的方法，其中在步驟j，每公斤混合物Ⅰ使用10-25升水-低級脂族醇(以體積計95/5至90/10)溶液。
17.根據權利要求15或16中任一權利要求所述的方法，其中在步驟j，使用18升水-乙醇溶液(以體積計17.7-0.93)。
18.根據權利要求15-17中任一權利要求所述的方法，其中在步驟k，用棉帆布過濾上層相，在下層相中每公斤混合物Ⅰ添加10-25升水，再用燒結玻璃過濾器過濾。
19.根據權利要求15-18中任一權利要求所述的方法，其中在步驟k，一般在熱虹吸管濃縮器中在溫度35℃與0.4千帕真空條件下進行濃縮。
20.根據權利要求15-19中任一權利要求所述的方法，其中在步驟l，使用由Rhom & Hass公司銷售的S861樹脂或XAD型樹脂，再用燒結玻璃過濾器過濾。
21.根據權利要求15-20中任一權利要求所述的方法，其中在步驟m，在熱虹吸管濃縮器中在溫度35℃與0.4千帕真空條件下進行濃縮。
22.根據權利要求15-21中任一權利要求所述的方法，其中在步驟m，用10kd、3kd和1kd濾芯相繼進行3次超濾。
23.草氨酸鈉和具有下述化學式的化合物的制備方法
式中或者R1代表氫原子，而R2代表下式鏈-CH2-CHOH-CHOH-CH2OH (A)-CHOH-CHOH-CHOH-CH2OH (B)或者R1代表式(A)鏈，而R2代表氫原子，其中權利要求1所述的混合物Ⅱ進行下述操作o-用硅藻土柱色譜分離本發(fā)明的混合物Ⅱ，回收含有4種產物的級分，并將這些級分合并成一個級分，p-用SephadexR柱色譜分離前面所得到的級分，以得到草氨酸鈉，其式中R1代表氫原子，而R2代表(B)殘基的式(Ⅰ)化合物，以及其式中R1代表氫原子，而R2代表(A)殘基的式(Ⅰ)化合物與其式中R1代表(A)殘基，而R2代表氫原子的式(Ⅰ)化合物的混合物，q-任選地用HPLC色譜分離其式中R1代表氫原子，而R2代表(A)殘基的式(Ⅰ)化合物與其式中R1代表(A)殘基，而R2代表氫原子的式(Ⅰ)化合物的混合物。
24.根據權利要求23所述的方法，其中步驟o使用用水飽和的Prolabo公司銷售的RCHEM ELUT柱，然后相繼用庚烷、庚烷-乙酸乙酯(以體積計50/50)、乙酸乙酯-正丁醇混合物(以體積計95/5；90/10；80/20；50/50；20/80，然后0/100)、和正丁醇-水混合物(以體積計98/2，其后95/5)洗脫進行色譜分離。
25.根據權利要求24所述的方法，其中步驟p采用水-乙醇混合物(以體積計50/50)進行色譜分離。
26.根據權利要求24所述的方法，其中步驟q使用由AIT公司銷售的YMC 180DS-AQ柱，用水與0.1％甲酸的混合物作為洗脫劑進行色譜分離。
27.藥物，其特征在于它們含有權利要求1所述的混合物Ⅰ或權利要求1所述的混合物Ⅱ或草氨酸鈉或具有下述化學式的化合物作為活性組分
式中或者R1代表氫原子，而R2代表下式鏈-CH2-CHOH-CHOH-CH2OH (A)-CHOH-CHOH-CHOH-CH2OH (B)或者R1代表式(A)鏈，而R2代表氫原子，和一種或多種賦形劑。
28.權利要求1所述的混合物Ⅰ或權利要求1所述的混合物Ⅱ或草氨酸鈉或具有下述化學式的化合物
式中或者R1代表氫原子，而R2代表下式鏈-CH2-CHOH-CHOH-CH2OH (A)-CHOH-CHOH-CHOH-CH2OH (B)或者R1代表式(A)鏈，而R2代表氫原子，用于制備預防和治療糖尿病和糖尿病并發(fā)癥的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及可由烏墨蒲桃籽分離得到的混合物,它們的制備,含有這些混合物或這些混合物中的一些組分的藥物,以及這些混合物與組分在制備藥物方面的應用。
文檔編號A61K36/61GK1210469SQ9719211
公開日1999年3月10日 申請日期1997年2月3日 優(yōu)先權日1996年2月6日
發(fā)明者A·拉科托拉特斯馬曼加, S·拉科托拉特斯馬曼加, P·拉索納沃, J·萊波爾, J·普羅沃斯特, D·里斯多夫 申請人:馬達加斯加應用研究所, 羅納-布朗克羅萊爾股份有限公司