專利名稱：含有天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的食品和維生素制品的制作方法
本申請具有1996年1月31日申請的系列號為60/010,898的美國臨時專利申請的效果。
本發(fā)明涉及營養(yǎng)品領(lǐng)域，更具體地說，本發(fā)明涉及含有天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的食品和維生素制品。
葉酸鹽幾乎遍及所有生命體。人類和許多其它動物缺乏制備它們自己的葉酸鹽的能力，葉酸鹽是一種必需維生素，一類必需營養(yǎng)物。特別在懷孕期間和老年人中的貧血是其膳食需要葉酸鹽的預(yù)先暗示。葉酸鹽的主要功能是從將要代謝的分子移去一碳單元，然后把它們運(yùn)送到將要合成的分子上。作為一種例子，葉酸鹽參與核酸的形成。而且，部分通過甲基化作用控制DNA活性，并且在涉及葉酸鹽的代謝循環(huán)中制造主要的甲基化劑(S-腺苷甲硫氨酸)。因此，集中在葉酸鹽的狀態(tài)和癌癥，特別是結(jié)腸直腸腺瘤的易感性的關(guān)系上進(jìn)行了大量研究。
新生嬰兒中發(fā)生神經(jīng)管缺陷時清楚顯示了葉酸鹽對適宜成長的重要性。幾個國家的報告顯示這種情況的大多數(shù)與母體中的葉酸鹽含量低有關(guān)。當(dāng)懷孕初期給婦女服用葉酸(Ⅰ)時可顯著降低這些缺陷及裂唇/裂顎的發(fā)病率。最近，發(fā)現(xiàn)了維生素，特別是葉酸鹽的缺乏與主要致死的周圍血管疾病之間的重要關(guān)系。帶有這種痛苦的個體的高百分率具有異常高半胱氨酸的血含量，其是S-腺苷甲硫氨酸循環(huán)的依靠葉酸鹽步驟中甲硫氨酸的前體。缺乏葉酸鹽也與大量不同細(xì)胞類型的有缺陷的成熟階段、神經(jīng)系統(tǒng)疾病和降低的免疫反應(yīng)聯(lián)系在一起。
攝入葉酸鹽對于健康的明顯的關(guān)系使得全世界許多政府機(jī)構(gòu)(例如美國全國科學(xué)研究委員會)詳細(xì)說明了葉酸鹽的推薦日攝食量(″RDA")。在美國，食品和藥物管理局使用這些值建立推薦的每日營養(yǎng)攝入量標(biāo)準(zhǔn)(＂RDI")列在食品標(biāo)簽上，目前成年人為0.4mg。有一國家推薦的每日葉酸最高攝入量對健康成年人來說為2.0mg。許多含有RDI或接近RDI水準(zhǔn)的葉酸(Ⅰ)的產(chǎn)品是可以得到的，這些產(chǎn)品還包括大多數(shù)每日所需的多種維生素。既可不用處方也可用處方以固態(tài)(例如片、膠囊或粉)或液態(tài)購得這些產(chǎn)品。在美國，也可以購得以其自身一般一劑量0.4mg的葉酸(Ⅰ)，但是在保健食品商店也有高達(dá)0.8mg的。許多營養(yǎng)完全膳食、嬰兒膳食、膳食添加物和減肥制品也含有葉酸(Ⅰ)。在一些國家，添加葉酸到衛(wèi)生官員指定的特種食品類以向普通人群提供適量的葉酸鹽，但沒有過分消費(fèi)。許多早餐食品，例如谷類食物、糧谷制的條狀食品、早餐飲料混合物、早餐條狀食品和焙烤食品，具有以RDI的適宜量添加的葉酸(Ⅰ)，一般每份飲食成人值的10-50％。在這些用途中，葉酸(Ⅰ)與其它維生素一起，有時以RDI劑量，但有時也或低或高于該水準(zhǔn)。經(jīng)常，雖非總是，也存在必需礦物營養(yǎng)物。而且許多產(chǎn)品也包括假定具有保健價值的化合物，但是這些化合物或者官方不認(rèn)為其有效，或者其最佳量還沒有確定。如上述的那些產(chǎn)品意味著起到了滿足對葉酸鹽的重要并廣泛的需要，特別在那些除非防止攝入大量的這類維生素的膳食習(xí)慣的人群中。
葉酸(Ⅰ)為許多動物和寵物食品的一種組分。它也包括在用作動物飼料添加物的粉劑或流食中，經(jīng)常與其它營養(yǎng)物組合在一起。例如，美國全國科學(xué)研究委員會(NRC)推薦狗和貓飲食中每kg干飲食(假定5 kcal可代謝的能量/g)分別含0.2mg和1.0mg葉酸(Ⅰ)。對于雞，NRC推薦每kg干飲食含0.55mg葉酸，雖然最近文獻(xiàn)建議最佳值高于該值約三倍。
目前添加到所有市售維生素制品或添加到食品中的葉酸鹽的形式，葉酸(Ⅰ)(也是已知的蝶?；?L-谷氨酸)，不是天然生鮮食品中發(fā)現(xiàn)的主要形式之一。葉酸(Ⅰ)與最豐富的天然葉酸鹽存在幾個方面的不同。首先，在幾乎所有生鮮食品中天然葉酸鹽的側(cè)鏈含有不只一種L-谷氨酸部分。通常，5-7(但是占或多或少的很大數(shù)值范圍)個這樣的氨基酸鏈在一起成多谷氨酸鏈。然而，眾所周知，葉酸鹽能夠被吸收的主要形式具有僅僅單一谷氨酸鹽殘基。通常在消化道內(nèi)通過酶實(shí)現(xiàn)膳食葉酸鹽的剩余谷氨酸鹽的裂解。在這一點(diǎn)上，與天然存在的葉酸鹽相比，葉酸(Ⅰ)不處于不利地位。
葉酸(Ⅰ)和天然葉酸鹽之間的第二個不同點(diǎn)在于前者(Ⅰ)的蝶啶環(huán)被完全氧化，生鮮未加工的食品中的天然葉酸鹽大多數(shù)以四氫的形式存在。幾乎所有已知的葉酸鹽生理功能都通過四氫葉酸、(6S)-FH4(Ⅱ)或其一碳衍生物來實(shí)現(xiàn)，該一碳衍生物如下5-甲基-(6S)-FH4(Ⅲ)、5-甲?；?(6S)-FH4(Ⅳ)、10-甲?；?(6R)-FH4(Ⅴ)、5,10-亞甲基-(6R)-FH4(Ⅵ)、5,10-次甲基-(6R)-FH4(Ⅶ)和5-亞胺甲基-(6S)-FH4(Ⅷ)。這些化合物的結(jié)構(gòu)式列如下。
人體內(nèi)沒有葉酸(Ⅰ)自身的已知直接輔因子功能。在植物和動物內(nèi)發(fā)現(xiàn)了一些(6S)-四氫葉酸多谷氨酸鹽，但是大多數(shù)葉酸鹽為5-甲基-或5-甲酰基-(6S)-四氫葉酸的多谷氨酸鹽形式，有些情況下為10-甲酰基-四氫葉酸。據(jù)推測，在生物食物源中發(fā)現(xiàn)的大多數(shù)葉酸(Ⅰ)會氧化，特別是在貯存期間。當(dāng)葉酸(Ⅰ)被消化道吸收時，它最終通過二氫葉酸鹽還原酶還原成活性(6S)-四氫葉酸(Ⅱ)。
葉酸(Ⅰ)的口服生物利用率顯示出很大的可變性。文獻(xiàn)包括了具有腸內(nèi)對葉酸(Ⅰ)的攝入差的個體而對肌肉內(nèi)注射葉酸(Ⅰ)反應(yīng)正常，或在任何葉酸激發(fā)之前具有正常的血清葉酸鹽狀態(tài)的報導(dǎo)。幾個小范圍的調(diào)查，并平均其值，結(jié)果口服幾種還原葉酸鹽與口服葉酸(Ⅰ)相似。然而，有理由相信一部分人對還原葉酸鹽有適度的口服反應(yīng)，而對口服葉酸(Ⅰ)則沒有反應(yīng)。
已長期以治療劑量對幾種病人使用5-甲?；?四氫葉酸(也為公知的甲酰四氫葉酸或亞葉酸)。例子包括對氨甲蝶呤化學(xué)治療術(shù)的毒性的拯救，以及與氟尿嘧啶一起協(xié)同治療多種癌癥。它也用來治療非B12缺乏引起的急性貧血。用于治療抑郁癥(和其它神經(jīng)失調(diào))的高劑量的5-甲基-四氫葉酸(例如，50mg/day)已經(jīng)獲得專利(1990年Le Grazie的EP382019和EP388827，和1992年Le Greca的EP482493)。
部分由于這些化合物的立體化學(xué)，忽視了這些還原葉酸鹽作為以RDA含量提供的改善源。除了葉酸(Ⅰ)中L-谷氨酸鹽鏈的單一手性中心外，四氫葉酸鹽在碳-6上含有第二個立體化學(xué)中心。葉酸(Ⅰ)的化學(xué)還原在該位置制得兩個異構(gòu)體的純外消旋混合物。這與天然發(fā)現(xiàn)的所有都是由單一非對映異構(gòu)體組成的還原葉酸鹽相反，該天然還原葉酸鹽在碳-6上都具有相同L-構(gòu)型。(化合物Ⅱ-Ⅷ顯示的是天然異構(gòu)體)。多年來，僅5-甲?；?四氫葉酸(甲酰四氫葉酸)的外消旋6(R,S)混合物用于治病。近來，Lederle針對非天然異構(gòu)體組分的可能效果得出該純天然異構(gòu)體的商業(yè)采納以這些高劑量治療疾病，雖然費(fèi)用很高。大多數(shù)利用甲酰四氫葉酸的食療法延續(xù)幾周或可能幾個月。長期使用非天然還原葉酸鹽異構(gòu)體的效果還不清楚。例如，盡管吸收了少量的5-甲?；?6(R)-四氫葉酸，但是通過腸道和身體的其它細(xì)胞吸收了相當(dāng)大量的非天然5-甲基-四氫葉酸，這種連續(xù)的攝入可能導(dǎo)致相反的效果。
直到現(xiàn)在，天然還原葉酸鹽異構(gòu)體的制備方法還是受到規(guī)模和/或費(fèi)用方面的限制。這些包括氣相四色譜分離，酶還原，和分級結(jié)晶。使用還原葉酸鹽作為每天的維生素源需要可大規(guī)模生產(chǎn)高純度的天然異構(gòu)體的方法，并且費(fèi)用不能使普通消費(fèi)者受不了。
本發(fā)明涉及一種包括一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的組合物和一種營養(yǎng)物。一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體選自(6S)-四氫葉酸、5-甲基-(6S)-四氫葉酸、5-甲?；?(6S)-四氫葉酸、10-甲?；?(6R)-四氫葉酸、5,10-亞甲基-(6R)-四氫葉酸、5,10-次甲基-(6R)-四氫葉酸、5-亞胺甲基-(6S)-四氫葉酸和其多谷氨酰基衍生物。營養(yǎng)物為食品制品、必需營養(yǎng)制品或其組合。當(dāng)營養(yǎng)物為食品制品時，食品制品包括兩種或多種食品組分。每克食品制品含一種或多種天然的還原葉酸鹽的異構(gòu)體的天然的摩爾量為N，N大于或等于零，每克該組合物中一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的總摩爾量為T,T大于N。當(dāng)營養(yǎng)物為必需營養(yǎng)制品時，必需營養(yǎng)制品包括除抗壞血酸之外的一種維生素。
本發(fā)明也涉及一種增加營養(yǎng)物的葉酸鹽含量的方法。該方法包括提供選自以下的營養(yǎng)物食品制品、必需營養(yǎng)制品和其組合。該方法還包括向營養(yǎng)物中力入摩爾量的一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體，該還原葉酸鹽異構(gòu)體選自(6S)-四氫葉酸、5-甲基-(6S)-四氫葉酸、5-甲?；?(6S)-四氫葉酸、10-甲?；?(6R)-四氫葉酸、5,10-亞甲基-(6R)-四氫葉酸、5,10-次甲基-(6R)-四氫葉酸、5-亞胺甲基-(6S)-四氫葉酸和其多谷氨?；苌铩．?dāng)營養(yǎng)物為食品制品時，食品制品包括兩種或多種食品組分。當(dāng)營養(yǎng)物為必需營養(yǎng)制品時，必需營養(yǎng)制品包括除抗壞血酸之外的一種維生素。
大量人群缺乏葉酸鹽；生活方式?jīng)]包含足夠的葉酸鹽生鮮食品源的人群特別易于缺乏葉酸鹽。本發(fā)明的目的提供一種營養(yǎng)組合物，其中用天然的四氫葉酸異構(gòu)體代替通用的葉酸(Ⅰ)以滿足或部分滿足對該維生素的膳食需要。然而，多種維生素制品和早餐谷類食物中的還原葉酸鹽內(nèi)含物可能對有些人的影響不大，但是對于葉酸(Ⅰ)的生物利用率則差的大多數(shù)人以及一般健康的人而言，可能通過滿足這些需要而得到改善。隨著消費(fèi)者了解到，除了有益的缺少多個谷氨酸鹽殘基外，該葉酸鹽組合物與該維生素最豐富的天然形式相同，消費(fèi)者對食品或其它營養(yǎng)制品消費(fèi)的信心將增加。另一種好處是當(dāng)廣泛地使用更均勻的吸收葉酸鹽的形式時，衛(wèi)生機(jī)構(gòu)將幫助推薦最佳含量。
本發(fā)明涉及一種包括一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的組合物和一種營養(yǎng)物。本發(fā)明中適宜使用的天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體包括，例如，(6S)-四氫葉酸、5-甲基-(6S)-四氫葉酸、5-甲?；?(6S)-四氫葉酸、10-甲?；?(6R)-四氫葉酸、5,10-亞甲基-(6R)-四氫葉酸、5,10-次甲基-(6R)-四氫葉酸和5-亞胺甲基-(6S)-四氫葉酸。本發(fā)明中適宜使用的另外的天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體包括(6S)-四氫葉酸、5-甲基-(6S)-四氫葉酸、5-甲?；?(6S)-四氫葉酸、10-甲?；?(6R)-四氫葉酸、5,10-亞甲基-(6R)-四氫葉酸、5,10-次甲基-(6R)-四氫葉酸和5-亞胺甲基-(6S)-四氫葉酸的多谷氨?；难苌铮缍劝滨；?、三谷氨?；?、四谷氨酰基、五谷氨?；土劝滨；难苌?。任何或所有天然的還原葉酸鹽的異構(gòu)體都可以以其手性純的形式存在，或者該組合物可以選擇性地包含1摩爾量的一種或多種非天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體，例如(6R)-四氫葉酸、5-甲基-(6R)-四氫葉酸、5-甲?；?(6S)-四氫葉酸、10-甲酰基-(6S)-四氫葉酸、5,10-亞甲基-(6S)-四氫葉酸、5,10-次甲基-(6S)-四氫葉酸和5-亞胺甲基-(6R)-四氫葉酸，和其多谷氨酰基衍生物。該天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的摩爾量可以等于其相應(yīng)的非天然異構(gòu)體的摩爾量(此時非天然和天然異構(gòu)體以外消旋混合物存在)，或者，優(yōu)選地，天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體可以以摩爾量大于相應(yīng)的非天然異構(gòu)體的摩爾量而存在。該組合物中存在的一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的總摩爾量可以以每次習(xí)慣消費(fèi)該組合物的量計(jì)為人體每天對葉酸鹽的所需量的5％-200％之間。這里所使用的一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的總摩爾量包括天然存在于營養(yǎng)物中的天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體，也包括可能添加到營養(yǎng)物中天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體。自然，各種組合物的習(xí)慣消費(fèi)量依賴該組合物的性質(zhì)。當(dāng)該組合物包括食品制品時，習(xí)慣消費(fèi)量為每次吃的習(xí)慣消費(fèi)的食品制品量，例如，美國食品和藥物管理局宣布的，目的在于用在食品標(biāo)簽上以建立實(shí)際可行的和一致的服用量?？梢栽?1 C.F.R.§101.12中找到不同食品的習(xí)慣消費(fèi)量的例子，該文獻(xiàn)引入本文作為參考。
每天對葉酸鹽的需要因人而異，依賴于例如體重、年齡、健康狀況、性別等的因素。人每天對葉酸鹽的需要的適宜值包括分別由FDA和美國全國科學(xué)研究委員會(＂NRC＂)公布的RDI和RDA值。現(xiàn)在，RDI值，以葉酸的微克數(shù)(葉酸的納摩爾)表示，成年人為400μg(907nmol)和孕婦為800μg(1814nmol)。在這種情況下，本發(fā)明的組合物以每次習(xí)慣消費(fèi)的營養(yǎng)物的量計(jì)可以具有在45-1814nmol之間或91-3625nmol之間的葉酸鹽。目前的RDA值公布在National Research Council:RecommendedDaily Allowances，第10版，Washington,D.C.(1989)，該文獻(xiàn)引入本文作參考。它們也以葉酸的微克數(shù)(葉酸的納摩爾)表示，它們是，0-6個月的嬰兒為25μg(57nmol),6個月-1歲的嬰兒為35μg(79nmol),1-3歲的嬰兒為50(g(113nmol),7-10歲的兒童為100(g(227nmol)，男性成年人為200(g(454nmol)，女性非孕婦成年人為180(g(408nmol)，以及孕婦為400(g(907nmol)。在這種情況下，本發(fā)明的一般組合物以每次習(xí)慣消費(fèi)的營養(yǎng)物的量計(jì)可以具有在2.8-113nmol之間、4-159nmol之間、28-227nmol之間、11-454nmol之間、22-907nmol之間、20-816nmol之間或45-1812nmol之間的葉酸鹽。世界衛(wèi)生組織也建立了人每天對葉酸鹽的需要的適宜值，為7.03nmol/kg體重。對孕婦來說，以體重為基礎(chǔ)計(jì)算的值將增加到約454-680nmol。
或者，該組合物中存在的一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的總摩爾量可以以每次習(xí)慣消費(fèi)營養(yǎng)物的量計(jì)為動物每天對葉酸鹽的所需量的5％-3000％之間。每天對葉酸的需要量參照上面的動物可以是，例如，狗、貓、雞、牛、家畜、山羊、馬、貂、狐貍、綿羊或豬。由例如NRC在Nutrient Requirements of Domestic Animals(Washington:NationalAcademy Press)中頒布了動物每天所需葉酸鹽的適宜值，特別在那些具有以下副標(biāo)題的出版物中＂Nutrient Requirements of Beef Cattle，＂第七次修訂版(1986,ISBN 0-309-05426-5)；＂Nutrient Requirements of Cats,＂修訂版(1986,ISBN 0-309-03682-8)；＂Nutrient Requirements of DairyCattle，＂第六次修訂版，修訂(1989,ISBN 0-309-03826-X)；＂NutrientRequirements of Dogs，＂修訂過的(1985,ISBN 0-309-03496-5)；＂NutrientRequirements of Fish,＂(ISBN 0-309-04891-5)；＂Nutrient Requirements ofGoats:Angora,Dairy,and Meat Goats in Temperate and TropicalCountries,＂(ISBN 0-309-03185-0)；＂Nutrient Requirements of Horses,＂第五次修訂版(1989,ISBN 0-309-03989-4)；＂Nutrient Requirements ofLaboratory Animals，＂第四次修訂版(1995,ISBN 0-309-05126-6)；＂NutrientRequirements of Mink and Foxes，＂第二次修訂版(1982,ISBN 0-309-03325-X)；＂Nutrient Requirements of Poultry，＂第九次修訂版(1994,ISBN0-309-04892-3)；＂Nutrient Requirements of Sheep，＂第六次修訂版(1985,ISBN 0-309-03596-1)；和＂Nutrient Requirements of Swine，＂第九次修訂版(1988,ISBN 0-309-03779-4)(總的指＂NRC Animal NutrientRequirements″)，特此引用作參考。
上述的營養(yǎng)物可以是食品制品或必需營養(yǎng)制品。必需營養(yǎng)制品為含有一種或多種必需營養(yǎng)素的物料。其中在必需營養(yǎng)制品中僅存在一種必需營養(yǎng)素，該必需營養(yǎng)素可以是除抗壞血酸之外的一種維生素?；蛘?，必需營養(yǎng)制品可以包括除抗壞血酸之外的一種維生素以及另外的抗壞血酸。這里使用的＂必需營養(yǎng)素＂為那些維持身體健康所必需的但一種或多種動物或人類不能有效制得的。在許多出版物中收集了必需營養(yǎng)素的例子，這些出版物包括Modem Nutrition in Health and Disease，第八版，Shils等編輯，Philadelphia:Lea and Febiger(1994)，特此引用來作參考。所說的必需營養(yǎng)素包括必需維生素和其維生素前體、必需脂肪、必需礦物質(zhì)，例如推薦每天攝入量標(biāo)準(zhǔn)的那些礦物質(zhì)，和必需氨基酸。必需營養(yǎng)制品的一種例子為含有一種維生素和每克干物質(zhì)少于2.5cal的熱量的制劑，優(yōu)選每克干物質(zhì)少于2kal，最優(yōu)選每克干物質(zhì)少于1.8kal。必需營養(yǎng)制品也包括那些含有至少一種維生素，且其量大于每克必需營養(yǎng)制品中美國成人的必需營養(yǎng)素的RDA的15％的物質(zhì)，優(yōu)選大于20％，更優(yōu)選大于40％。但是其它營養(yǎng)適宜的必需營養(yǎng)制品包含至少兩種維生素，每個的量大于每克必需營養(yǎng)制品中美國成人的必需營養(yǎng)素的RDA的10％，優(yōu)選大于15％，更優(yōu)選大于20％。適宜必需營養(yǎng)制品通常指的是膳食添加物、維生素添加物和礦物添加物、多種維生素添加物等，一般可以以丸、片、膠囊、粉、漿和懸浮液商購得到。優(yōu)選地，以每次習(xí)慣消費(fèi)的必需營養(yǎng)制品的量計(jì)，該必需營養(yǎng)組合物含有至少一種含量大于每天必需營養(yǎng)素的需要量的25％的必需營養(yǎng)素，更優(yōu)選大于50％，而且最優(yōu)選大于或等于100％。
如上所述，營養(yǎng)物也可為食品制品。食品制品為含有一種或多種適宜人或動物消費(fèi)且不是必需營養(yǎng)制品的氨基酸、碳?xì)浠衔锘蛑镜奈镔|(zhì)。優(yōu)選食品制品為兩種或多種組分食品制品。例如，兩種或多種組分食品制品可以為兩種或多種單組分食品的混合物。單組分食品為由基本上單一天然源得到的食品。百分比小的單組分食品可從第二個天然源得到，但該百分比(重量比)優(yōu)選小于5％，更優(yōu)選小于1％，更優(yōu)選小于0.1％。單組分食品包括例如，糖、未加糖的果汁、花蜜或來自單一植物品種的果泥，例如未加糖的蘋果汁(包括不同品種的蘋果汁混合物)，葡萄汁、橙汁、蘋果醬、杏花蜜、土豆汁、土豆泥，等。單一品種的谷類植物和由單一品種的谷類植物制得的物質(zhì)，例如玉米漿、黑麥粉、小麥粉、燕麥麩，等也認(rèn)為時單一組分食品?；蛘?，兩種或多種組分的食品制品可以為一種或多種單一組分食品與一種或多種必需營養(yǎng)素的混合物。優(yōu)選地，雙組分食品中一種或多種必需營養(yǎng)素的至少一種的量大于至少一種天然地總存在于一種或多種單一組分食品中的必需營養(yǎng)素的量。例如，其中必需營養(yǎng)素為維生素X和維生素Y，而且其中單一組分食品為橙汁，并且橙汁天然含有維生素X和維生素Y，其含量分別為＂Nx＂和＂Ny＂，優(yōu)選組合物含有含量分別為＂Tx＂和＂Ty＂的維生素X和維生素Y，以便Tx大于Nx,Ty大于Ny，或者兩者同時成立。
特別適于實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的食品制品包括早餐食品、例如預(yù)制食品、烤焙制品和早餐飲料混合物；嬰兒食品；膳食添加物；完全食品；和減肥制品，例如減肥飲料和減肥條狀食品。
食品制品可以是天然地含有非天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的制品?；蛘?，它可以含有天然摩爾量的天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體。為了該應(yīng)用的目的，每克食品含有的天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的摩爾量(即，(6S)-四氫葉酸、5-甲基-(6S)-四氫葉酸、5-甲酰基-(6S)-四氫葉酸、10-甲?；?(6R)-四氫葉酸、5,10-亞甲基-(6R)-四氫葉酸、5,10-次甲基-(6R)-四氫葉酸、5-亞胺甲基-(6S)-四氫葉酸和其多谷氨?；苌锏目偰柫?定為＂N＂。對于有些食品，天然存在的天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的摩爾量為已知。對于其它的食品，天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的摩爾量可以由許多靈敏性和特異性方法確定，例如依賴微生物成長、以葉酸鹽結(jié)合蛋白為基礎(chǔ)測定、高性能液相色譜(＂HPLC")和氣相色譜(＂GC")。例如，在Cossins,E.A.,＂Folates in Biological Materials,″in Folates and Pterins,Vol.1,Blakley等，eds.,New York:John Wiley & Sons,pp.1-60(1984)描述了適宜的方法，特此引用作參考。
本發(fā)明的組合物中存在的天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的摩爾量大于食品制品中存在的天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的摩爾量。為了該應(yīng)用的目的，每克組合物中含有的天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的摩爾量(即，(6S)-四氫葉酸、5-甲基-(6S)-四氫葉酸、5-甲?；?(6S)-四氫葉酸、10-甲?；?(6R)-四氫葉酸、5,10-亞甲基-(6R)-四氫葉酸、5,10-次甲基-(6R)-四氫葉酸、5-亞胺甲基-(6S)-四氫葉酸和其多谷氨酰基衍生物的總摩爾量)定為＂T″。因此，T必需大于N。優(yōu)選地，T/N大于105％；更優(yōu)選地，T/N大于110％；最優(yōu)選地，T/N大于120％。
如上所述，組合物可以選擇性地包括一種或多種非天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體。當(dāng)存在于該組合物中時，該一種或多種非天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體優(yōu)選以其摩爾量小于T減去N的量存在。
本發(fā)明也涉及一種增加營養(yǎng)物的葉酸鹽含量的方法。營養(yǎng)物可以是食品制品、必需營養(yǎng)制品或食品制品和必需營養(yǎng)制品的組合。通過向營養(yǎng)物中或與營養(yǎng)物一起摻合一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體增加營養(yǎng)物的葉酸鹽含量。這可以通過食品技術(shù)領(lǐng)域中熟知的方法來完成，例如通過均質(zhì)、涂敷、噴涂粗混、拌勻、捏合、成丸和擠出單個或組合形式的一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體施加在營養(yǎng)物上或與營養(yǎng)物一起進(jìn)行處理。
根據(jù)本發(fā)明，加到營養(yǎng)物中的一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體中的一種或多種可以是基本手性純或一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的每一種可以是手性純。或者，一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的一種或多種可以與一種或多種非天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體一起以混合物存在。當(dāng)添加外消旋混合物的情況下，添加到營養(yǎng)物的混合物中的一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體和一種或多種非天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的摩爾量可以相同，否則它們可以不同。優(yōu)選天然異構(gòu)體的摩爾量大于非天然異構(gòu)體的摩爾量。另外，非天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體可以在一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體加入之后或之前分步加入營養(yǎng)物中。優(yōu)選在天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體加入之前、之間和/或之后加入的非天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的總摩爾量小于添加的天然異構(gòu)體總摩爾量。
基本手性純的天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體可以通過任何適宜方法制得，包括例如，Bailey等在美國專利No.5,350,851中描述的方法，特此引用作參考。
當(dāng)營養(yǎng)物為食品制品時，除了向食品制品中加入天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體之外，選擇性地可以加入一種或多種必需營養(yǎng)素。必需營養(yǎng)素例如可以在天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體加入之前、之間或之后加入到食品制品中。
本發(fā)明的組合物可以通過給施用對象服用該組合物增加施用對象對葉酸鹽的膳食吸收。該施用對象可以為例如狗或貓的動物；或者，該施用對象可以為人。通過增加葉酸鹽的膳食吸收，可以看到一定類別的個體的效果顯著。這些個體包括孕婦；有過流產(chǎn)的婦女；懷有神經(jīng)管缺陷、裂唇缺陷或裂鄂缺陷的胎兒的婦女；和有血管疾病的人。
也可以用該組合物治療有腸內(nèi)吸收障礙，特別是葉酸鹽吸收障礙的施用對象。當(dāng)治療有腸內(nèi)吸收障礙的施用對象時，該組合物的服用量優(yōu)選達(dá)到使施用對象的血液葉酸鹽含量增加的效果。更優(yōu)選，服用量使得血液葉酸鹽含量在正常范圍內(nèi)，該含量通過傳統(tǒng)的血液葉酸鹽分析法測定，例如用the Quanta Phase Ⅱ assay from BioRad Laboratories,Hercules,California。
該組合物可以通過腸溶服用，例如口服、胃或經(jīng)幽門。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以考慮到可以改變該組合物的作用的許多因素；例如，體重、性別、飲食、服用時間、服用途徑、排泄頻率、身體條件和反應(yīng)靈敏性和劇烈性。可以連續(xù)或周期性地服用，例如一天一次或一頓飯一次。
含有天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的組合物優(yōu)選腸溶食用(腸溶包括口腔、胃或經(jīng)幽門)，并且是任何食品制品、食品添加物必需營養(yǎng)制品或維生素制品。這樣的食品或維生素制品的一般例子為目前加有葉酸(Ⅰ)并用于人或其它動物的那些。天然異構(gòu)體意思是在谷氨酸鹽的(-和蝶啶的6-碳上具有天然構(gòu)型的四氫葉酸鹽。更具體地說，這些維生素是但不限于多種維生素(有或沒有礦物質(zhì)和其它營養(yǎng)素)制品(這樣的制品可以是固態(tài)、液態(tài)或懸浮液)；例如預(yù)制食品的早餐谷類食品、早餐飲料混合物、烤焙制品和早餐條狀食品；嬰兒食品；膳食添加物和完全食品和減肥制品和條狀食品；動物飼料或動物飼料添加物(例如，家禽的)，和寵物食品。該天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體也可以用在未來衛(wèi)生官員可能認(rèn)為用來滿足每天葉酸鹽需要的適當(dāng)載體的產(chǎn)品中。本發(fā)明的組合物可以包括天然的四氫葉酸鹽的異構(gòu)體，例如Ⅱ-Ⅷ，優(yōu)選單谷氨酸鹽形式，在維生素制劑中優(yōu)選含有至少一種除抗壞血酸(維生素C)以外的其它維生素(例如，如維生素B的其它維生素)，盡管抗壞血酸可以是添加組分。這些營養(yǎng)素或維生素可以是打算用于人或動物的那些。也可以有其它輔料，例如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的維生素制劑中采用的填料、粘合劑、穩(wěn)定劑、甜味劑包括營養(yǎng)甜味劑(例如蔗糖、山梨糖醇和其它多元醇)和非營養(yǎng)甜味劑(例如糖精、天冬甜素和雙氧惡噻嗪K)，著色劑、香料、緩沖劑、鹽、糖衣等。
所述的還原葉酸鹽(Ⅱ-Ⅷ)的應(yīng)用中，優(yōu)選5-甲基-(6S)-四氫葉酸(Ⅲ)、5-甲酰基-(6S)-四氫葉酸(Ⅳ)和5,10-次甲基-(6R)-四氫葉酸(Ⅶ)。所有這些還原葉酸鹽都不同程度地受到空氣的氧化。幾個因素影響該易感性，首先是相當(dāng)慢氧化的5-氮的衍生物。5-甲基-和5-甲酰衍生物是身體大多數(shù)組織中最富有的葉酸鹽形式。人體血液中的絕大多數(shù)葉酸鹽是5-甲基-(6S)-四氫葉酸(Ⅲ)。
在使用四氫葉酸鹽增加營養(yǎng)組合物中葉酸鹽時，要考慮幾個因素。許多營養(yǎng)素加工時不穩(wěn)定，包括幾種維生素。例如，維生素A、B1(硫胺素)和抗壞血酸在一些條件下特別不穩(wěn)定。已知許多方法用來強(qiáng)化不同營養(yǎng)素的穩(wěn)定性，例如控制組合物的pH和水分。彼此間達(dá)到不相容的程度的組分，例如抗壞血酸與最易被氧化的鐵或銅，可以使其在組合物中以多相形式存在。經(jīng)常在烤焙步驟之后加入熱不穩(wěn)定的營養(yǎng)素；例如，經(jīng)常在早餐谷類食物烤過之后噴上維生素。對空氣不穩(wěn)定的營養(yǎng)素可以在低氧條件下包裝，和/或在低氧或氧不可滲透的容器中包裝。對本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的這些和其它方法對保持葉酸鹽在其天然的還原形式時有用的。
在水溶液中空氣存在下的還原葉酸鹽的氧化速度將增加。如果液體制品優(yōu)選保持在密封容器中，它們的貯藏限期將大大延長。用例如氮?dú)饣驓鍤獯婵諝庖沧铚p失。用大量的還原劑和抗氧化劑也可防止葉酸鹽氧化，最適宜的那些是經(jīng)常包括在多種維生素混合物或營養(yǎng)組合物中的其它維生素。在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和生物樣品的實(shí)驗(yàn)室分析步驟中使用抗壞血酸來保護(hù)還原葉酸鹽。這種保護(hù)不必限于使用抗壞血酸或其它維生素；可使用適宜人或動物消費(fèi)的其它試劑，例如異抗壞血酸和某種硫醇，例如谷胱甘肽。已知的增加例如抗壞血酸或其它空氣不穩(wěn)定的物質(zhì)的化合物的包裝和配制技術(shù)(例如，涂敷形式、鼓泡塑料襯墊包裝和還原金屬或金屬復(fù)合物)用于保護(hù)還原葉酸鹽。還原葉酸鹽的鹽形式也或多或少影響穩(wěn)定性和溶解性，而且這可以根據(jù)每個產(chǎn)品的需要使其最佳化。也可以根據(jù)使用的具體還原葉酸鹽和存在的其它組分的穩(wěn)定性能使最終組合物的pH值最佳化，這在加工營養(yǎng)素和葉酸鹽化合物的技術(shù)中是很好理解的。例如，存在水分的條件下，依賴pH的方式，5,10-次甲基-(6R)-FH4(Ⅶ)可以變成10-甲酰基-(6R)-FH4和5-甲?；?(6S)-FH4(Ⅳ)(后者也為優(yōu)選化合物)。當(dāng)或者基本干和/或具有pH小于約4的酸性時，含有5,10-次甲基-(6R)-FH4(Ⅶ)的組合物對氧是最穩(wěn)定的。適當(dāng)留心上面的因素，還原葉酸鹽的易變性不必限制制品的壽命，特別是Ⅲ和Ⅳ比抗壞血酸對許多氧化反應(yīng)更穩(wěn)定。
還原葉酸鹽代替葉酸(Ⅰ)應(yīng)當(dāng)考慮不同形式的分子量不同。例如，目前美國推薦的每日葉酸(Ⅰ)攝入量標(biāo)0.4mg相應(yīng)于使用無水分子量441.4的0.91nmol。還原葉酸鹽的有效分子量依賴于使用的衍生物(即Ⅱ-Ⅷ)、鹽形式和水分含量。例如，0.91nmol的5-甲?；?(6S)-四氫葉酸(Ⅳ)鈣鹽-五水合物重0.545mg,0.91nmol的5-甲基-(6S)-四氫葉酸(Ⅲ)二鈉鹽重0.456mg。在文獻(xiàn)中描述了還原葉酸鹽的幾種鹽形式，例如鹽酸鹽、鈉、鉀、鎂、鈣和其它物并具有不同水分含量。對這些形式的每一種，可進(jìn)行相似的計(jì)算。實(shí)現(xiàn)RDI所需部分的摩爾當(dāng)量所需的量將是該新的重量部分。舉一種例子，25％RDI的5-甲基-(6S)-四氫葉酸(Ⅲ)二鈉鹽為0.25×0.456=0.114mg,0.10mg的葉酸(Ⅰ)的摩爾當(dāng)量。以前對幾組具有正常的葉酸(Ⅰ)攝入的個體的研究顯示還原葉酸鹽的生物利用率以摩爾計(jì)是相似的。
如上所述，在加工過程中營養(yǎng)素的損失，特別是食品的營養(yǎng)素的損失是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。通常采取的步驟是添加特別是營養(yǎng)素的開始的過量物，一＂超過部分″，以便最終加工后的量為所需的含量。已知許多高靈敏性和特異性的方法(例如依靠微生物成長，以葉酸鹽粘合蛋白為基礎(chǔ)測定、HPLC和GC)用于葉酸鹽、還原和氧化的形式及其不同衍生物的分析。這些測定允許添加一定量的天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體來調(diào)整以便在加工和包裝后得到所需的最終量。天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體在本發(fā)明組合物中的范圍優(yōu)選實(shí)現(xiàn)RDI的人對葉酸鹽的約5％-約200％之間，而且應(yīng)該使其既包括彌補(bǔ)加工損失的允許量的情況，也包括沒有這樣的允許量的情況。對不同的人群具體說明了不同的RDA劑量，例如，孕婦和未懷孕的婦女。而且，雖然RDI含量依賴RDA值，但RDI可以與RDA值區(qū)別開。上面的范圍＂RDI對葉酸鹽的約5％-約200％之間＂應(yīng)該單獨(dú)地針對每個這些不同的RDA和RDI說明進(jìn)行，或者它們的外來當(dāng)量，如目前確定的或者未來改變了的。為了本發(fā)明目的，這幾個說明指的是葉酸每天所需量。除非推薦的人對葉酸鹽膳食限量增加，人使用每天所需葉酸量的組合物中天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的最終最大量優(yōu)選每劑量或每份普通消費(fèi)不超過約4.5(mol。然而，對于患腸內(nèi)吸收障礙，例如腹腔疾病或熱帶性斯?jié)姳R(tropical sprue)，的個體，含天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體量高的組合物是有效的。
為了本發(fā)明目的，必需營養(yǎng)組合物可以是膳食添加物或類似物，由基本上純的四氫葉酸或其衍生物得到的大量的葉酸鹽組分，例如化合物Ⅱ-Ⅷ。本發(fā)明包括的必需營養(yǎng)組合物包括優(yōu)選上述范圍內(nèi)的天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體和其它維生素和/或優(yōu)選每個用量認(rèn)為安全的其它營養(yǎng)素。動物消費(fèi)生產(chǎn)廠配制的組合物中經(jīng)常大大超過NRC推薦的葉酸鹽的劑量(10倍，20倍，或有時更多)，不僅克服了加工中的損失，而且包括了可能增加的對葉酸鹽需要的情況，例如在抗菌治療中。其它維生素和營養(yǎng)組分存在的量可以與NRC推薦的有很大的不同。以下的實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，而且無論如何不用來限定其范圍。
實(shí)施例1)普通即食性早餐谷類食物玉米(和/或其它谷物)、糖、鹽、麥芽粉，以便30g一份的食物提供約2g蛋白質(zhì)、26g總碳水化合物和330mg的鈉，也含有每份飲食量的維生素A棕櫚酸鹽(RDI的15％)、抗壞血酸(RDI的25％)、還原性鐵(RDI的45％)、維生素D(RDI的10％)、硫胺素鹽酸鹽(RDI的25％)、核黃素(RDI的25％)、煙酰胺(RDI的25％)、吡哆素鹽酸鹽(RDI的25％)和0.114mg的5-甲基-(6S)-四氫葉酸(Ⅲ)二鈉鹽(0.1mg葉酸的摩爾當(dāng)量，RDI的25％)。2)普通每天的多種維生素片劑碳酸鈣、抗壞血酸(60mg,100％RDI)、明膠、維生素E醋酸酯(30 I.U.,100％RDI)、淀粉、煙酰胺(20mg,100％RDI)、羥丙基-甲基纖維素、泛酸鈣(10mg,100％RDI)、硅酸鈣、羥丙基纖維素、吡哆素鹽酸鹽(2mg,100％RDI)、核黃素(1.7mg,100％RDI)、硫胺素單硝酯(1.5mg,100％RDI)、(-胡蘿卜素&維生素A醋酸酯(5000 I.U.,100％RDI)、六偏磷酸鈉、硬脂酸鎂、維生素D(400 I.U.,100％RDI)、維生素B12(6(g,100％RDI)、卵磷脂和0.437mg的5-甲基-(6S)-四氫葉酸(Ⅲ)鎂鹽(0.4mg葉酸的摩爾當(dāng)量，RDI的100％)。3)普通每天的多種維生素和礦物質(zhì)片劑磷酸鈣(130mg的元素鈣)、氫氧化鎂&硬脂酸鎂(100mg,25％RDI)、纖維素、氯化鉀、抗壞血酸(60mg,100％RDI)、明膠、富馬酸鐵(18mg元素鐵，100％RDI)、硫酸鋅(15mg,100％RDI)改性纖維素植物膠、維生素E醋酸酯(30 I.U.,100％RDI)、檸檬酸、煙酰胺(20mg,100％RDI)、硬脂酸鎂、羥丙基-甲基纖維素、泛酸鈣(10mg,100％RDI)、酵母硒、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基纖維素、硫酸錳、二氧化硅、氧化銅(2mg,100％RDI)、酵母鉻、酵母鉬、吡哆素鹽酸鹽(2mg,100％RDI)、核黃素(1.7mg,100％RDI)、硫胺素單硝酯(1.5mg,100％RDI)、(-胡蘿卜素&維生素A醋酸酯(5000I.U.,100％RDI)、碘化鉀(150(g,100％RDI)、六偏磷酸鈉、生物素(30(g,100％RDI)、維生素D(400 I.U.,100％RDI)、維生素B12(6(g,100％RDI)、卵磷脂和0.545mg的5-甲?；?(6S)-四氫葉酸(Ⅳ)鈣鹽-五水合物(0.4mg葉酸的摩爾當(dāng)量，RDI的100％)。4)用于老年人的普通每天多種維生素和礦物質(zhì)片劑碳酸鈣、磷酸鈣(200mg鈣，20％RDI；48mg三價磷，5％RDI)、氫氧化鎂、硬脂酸鹽(100mg,25％RDI)、氯化鉀(80mg,2％RDI)、微晶纖維素、抗壞血酸(60mg,100％RDI)、明膠、d1-(-生育酚硬脂酸酯(45 I.U.,150％RDI)、改性的食用淀粉、麥芽糊精、交聯(lián)吡咯烷酮、還原鐵(4mg,22 RDI)、羥丙基-甲基纖維素、煙酰胺(20mg,100％RDI)、氧化鋅(15mg,100％RDI)、泛酸鈣、硫酸鎂(3.5mg)、維生素D(400 I.U.,100％RDI)、二氧化鈦、維生素A和(-胡蘿卜素(5000 I.U.,100％RDI)、硬脂酸、吡哆素鹽酸鹽(3mg,150％RDI)、核黃素(1.7mg,100％RDI)、二氧化硅、氧化銅(2mg,100％RDI)、葡萄糖、硫胺素單硝酯(1.5mg,100％RDI)、檸檬酸三乙酯、聚山梨酸酯80、氯化鉻(130(g)、人工色素、碘化鉀(150(g,100％RDI)、偏硅酸鈉(2mg)、鉬酸鈉(160(g)、硼酸鹽、硒酸鈉(20(g)、生物素(30(g,10％RDI)、偏釩酸鈉(10(g)、氰鈷胺素(25(g,417％RDI)、硫酸鎳(5(g)和維生素K1和5,10-次甲基-(6R)-四氫葉酸鹽酸鹽(Ⅶ)(0.44mg,0.4mg葉酸的摩爾當(dāng)量，100％RDI)。5)普通完全膳食飲料水、糖、酪朊酸鈣和鈉、麥芽糊精、高油酸的紅花油、大豆蛋白、大豆油、canola油、可可、檸檬酸鈉和鉀、碳酸鈣和磷酸鈣(250mg鈣，25％RDI)、氯化鎂和磷酸鎂(100mg鈣，25％RDI)、氯化鈉、大豆卵磷脂、氯化膽堿、食用香精、抗壞血酸(30mg,50％RDI)、卡拉膠、硫酸鋅(5.6mg,37％RDI)、硫酸鐵(4.5mg鐵，25％RDI)、(-生育酚硬脂酸酯(11.3 I.U.,37.7％RDI)、煙酰胺(5mg,25％RDI)、泛酸鈣(2.5mg,25％RDI)、硫酸錳(1.3mg)、銅鹽(25％RDI)、維生素A棕櫚酸酯(1250 I.U.,25％RDI)、吡哆素鹽酸鹽(0.5mg,25％RDI)、核黃素(0.425mg,25％RDI)、生物素(75(g,25％RDI)、鉬酸鈉(38(g)、氯化鉻(25(g)、碘化鉀(37.5(g,25％RDI)、硒酸鈉(18(g)、葉綠醌(維生素K1)、氰鈷胺素(1.5(g,25％RDI)、維生素D3(100 I.U.,25％RDI)和0.136mg的5-甲?；?(6S)-四氫葉酸(Ⅳ)鈣鹽-五水合物(0.1mg葉酸的摩爾當(dāng)量，25％RDI)，包裝在密封容器中，并提供約225cals的熱量。6)普通強(qiáng)化B族維生素/四氫葉酸鹽片劑磷酸氫二鈣、吡哆素鹽酸鹽(50mg,2,500％RDI)、纖維素、硬脂酸、硬脂酸鎂和0.912mg的5-甲基-(6S)-四氫葉酸(Ⅲ)二鈉鹽(0.8mg葉酸的摩爾當(dāng)量，成人RDI的200％，孕婦RDA的100％)。7)普通家禽飼料維生素添加物(每kg飲食的量)維生素A(反式視黃基醋酸酯，5500 I.U.)、維生素E(11 I.U.)、甲基荼醌亞硫酸氫鈉(1.1mg)、維生素D3(1100 I.U.)、核黃素(4.4mg)、維生素B12(10(g)、維生素B6(3.0mg)、硫胺素單硝酯(2.2mg)、生物素(0.3mg)、乙氧基奎(125mg)和2.0mg的5-甲?；?(6S)-四氫葉酸(Ⅳ)鈣鹽-五水合物(1.45mg葉酸的摩爾當(dāng)量)。8)普通干貓食磨碎的黃玉米、玉米面筋粉、大豆粉、家禽副產(chǎn)品粉、動物脂肪、魚粉、肉和骨頭粉、磨碎的小麥、磷酸、碳酸鈣、干動物水解液、鹽、釀酒干酵母、氯化鉀、干乳清可溶物、氯化膽堿、干脫脂乳、?；撬帷-賴氨酸、氧化鋅、硫酸鐵、維生素PP、維生素A、維生素D3、維生素B12、泛酸鈣、檸檬酸、硫酸錳、核黃素添加物、生物素、銅鹽、硫胺素單硝酯、吡哆素鹽酸鹽、甲基荼醌亞硫酸氫鈉復(fù)合物，使得粗蛋白不少于31％、粗脂肪不少于8％、粗纖維不大于4.5％、水分不大于12％、鈣不少于1.2％、磷不少于1.0％、氯化鈉不大于1.5％、可代謝能量為約3,600kcal/kg，?；撬?、鐵、維生素A、D3、B12和E為美國飼料控制局協(xié)會(the Association of American Feed Control Officials)推薦的至少100％的水平，并且含有不少于0.97mg/kg飲食的5-甲基-6(S)-四氫葉酸(Ⅲ)鈣鹽二水合物(0.8mg/kg飲食的葉酸的摩爾當(dāng)量)。9)普通大豆為原料的嬰兒配方75.5％的水；13％的蔗糖；6.6％的含油酸的固定油椰子、高油酸(紅花或向曰葵)和大豆油；3.8％的大豆蛋白離析物；(蛋白2.7g，脂肪5.3g，碳水化合物10.2，亞油酸500mg)；檸檬酸鉀和碳酸氫鉀(105mg的鉀)；磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈣(63mg的磷酸)；大豆卵磷脂；牛磺酸、卡拉膠鈣；氫氧化鈣、氯化鈣和檸檬酸鈣(90mg的鈣)；氯化鈉(30mg的鈉)；L-甲硫氨酸；鋅(Zn0.8mg)、鐵(Fe1.8mg)和錳(Mn30(g)的硫酸鹽；銅鹽(Cu70(g)；?；撬幔籐-肉堿；碘化鉀(I9(g)；抗壞血酸(8.3mg)；氯化膽堿；(-生育酚醋酸酯(1.4 I.U.)；煙酰胺(750(g)；維生素A棕櫚酸酯和(-胡蘿卜素(300 I.U.)；泛酸鈣(450(g)；硫胺素鹽酸鹽(100(g)；核黃素(150(g)；吡哆素鹽酸鹽(62.5(g)；維生素K1(15(g)；生物素(5.5(g)；維生素D3(60 I.U.)；氰鈷胺素(0.3(g)；和9.1(g的5-甲基-6(S)-四氫葉酸(Ⅲ)鈣鹽二水合物(7.5(g葉酸的摩爾當(dāng)量)，包裝在密封容器(量為每150ml的1∶1稀釋配方)內(nèi)。
本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地理解，本發(fā)明可較好地實(shí)施，以實(shí)現(xiàn)其目的并得到所述的結(jié)果和好處。雖然上面的說明包括了許多特例，但這些不用來解釋作為本發(fā)明范圍的限制，只是作為其優(yōu)選實(shí)施方式的例證。對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，出現(xiàn)的其中的改變和其它用途都包括在權(quán)利要求書限定范圍內(nèi)的本發(fā)明宗旨內(nèi)而且其法律意義相同。
權(quán)利要求
1.一種組合物，其特征在于它包括一種或多種選自(6S)-四氫葉酸、5-甲基-(6S)-四氫葉酸、5-甲?；?(6S)-四氫葉酸、10-甲?；?(6R)-四氫葉酸、5,10-亞甲基-(6R)-四氫葉酸、5,10-次甲基-(6R)-四氫葉酸、5-亞胺甲基-(6S)-四氫葉酸和其多谷氨?；苌锏奶烊坏倪€原葉酸鹽異構(gòu)體；一種營養(yǎng)物，選自食品制品、必需營養(yǎng)制品，和其組合；其中，當(dāng)營養(yǎng)物為食品制品時，食品制品包括兩種或多種食品組分，并且每克的所述的食品制品具有所述一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的天然摩爾量為N，其中N大于或等于零，其中每克所述組合物具有大于N的所述一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體總摩爾量T；和其中，當(dāng)營養(yǎng)物為必需營養(yǎng)制品時，必需營養(yǎng)制品包括除抗壞血酸之外的一種維生素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體選自5-甲基-(6S)-四氫葉酸、5-甲?；?(6S)-四氫葉酸、5,10-次甲基-(6R)-四氫葉酸和其多谷氨?；苌?。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于以每次習(xí)慣消費(fèi)所述組合物的量計(jì)所述一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的總摩爾量為人每天所需葉酸鹽的5％-200％之間。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于以每次習(xí)慣消費(fèi)所述組合物的量計(jì)所述一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的總摩爾量為動物每天所需葉酸鹽的5％-3000％之間。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于所述營養(yǎng)物為食品制品。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其特征在于營養(yǎng)物為食品制品，并且其中每克的所述食品制品還不包括選自(6R)-四氫葉酸、5-甲基-(6R)-四氫葉酸、5-甲?；?(6R)-四氫葉酸、10-甲酰基-(6S)-四氫葉酸、5,10-亞甲基-(6S)-四氫葉酸、5,10-次甲基-(6S)-四氫葉酸和5-亞胺甲基-(6R)-四氫葉酸和其多谷氨?；苌锏姆翘烊坏倪€原葉酸鹽異構(gòu)體，或者一種或多種所述非天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的摩爾量小于T減去N。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其特征在于食品制品選自早餐食物、嬰兒食品、膳食添加物、完全飲食食品和減肥制品。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的組合物，其特征在于早餐食物為預(yù)制食品、早餐飲料混合物或焙烤食品，并且其中減肥制品為減肥飲料或減肥條狀食品。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于營養(yǎng)物為包含除抗壞血酸之外的一種維生素的必需營養(yǎng)制品。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的組合物，其特征在于必需營養(yǎng)制品還包括抗壞血酸。
11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的組合物，其特征在于以每次習(xí)慣消費(fèi)所述必需營養(yǎng)制品的量計(jì)維生素以等于或大于每天所需該維生素的25％的量存在其中。
12.一種增加營養(yǎng)物的葉酸鹽含量的方法，其特征在于它包括提供選自食品制品、必需營養(yǎng)制品和其組合的營養(yǎng)物；和向營養(yǎng)物中加入摩爾量的一種或多種選自(6S)-四氫葉酸、5-甲基-(6S)-四氫葉酸、5-甲?；?(6S)-四氫葉酸、10-甲酰基-(6R)-四氫葉酸、5,10-亞甲基-(6R)-四氫葉酸、5,10-次甲基-(6R)-四氫葉酸、5-亞胺甲基-(6S)-四氫葉酸和其多谷氨?；苌锏奶烊坏倪€原葉酸鹽異構(gòu)體；其中，當(dāng)營養(yǎng)物為食品制品時，食品制品包括兩種或多種食品組分；和其中，當(dāng)營養(yǎng)物為必需營養(yǎng)制品時，必需營養(yǎng)制品包括除抗壞血酸之外的一種維生素。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于它還包括向營養(yǎng)物中加入摩爾量的一種或多種選自(6R)-四氫葉酸、5-甲基-(6R)-四氫葉酸、5-甲酰基-(6R)-四氫葉酸、10-甲酰基-(6S)-四氫葉酸、5,10-亞甲基-(6S)-四氫葉酸、5,10-次甲基-(6S)-四氫葉酸和5-亞胺甲基-(6R)-四氫葉酸和其多谷氨?；苌锏姆翘烊坏倪€原葉酸鹽異構(gòu)體，其中一種或多種非天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的摩爾量小于一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的摩爾量。
14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的每一種基本上為手性純。
15.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體選自5-甲基-(6S)-四氫葉酸、5-甲?；?(6S)-四氫葉酸、5,10-次甲基-(6R)-四氫葉酸和其多谷氨?；苌?。
16.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于營養(yǎng)物為包含除抗壞血酸之外的一種維生素的必需營養(yǎng)制品。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其特征在于必需營養(yǎng)制品還包括抗壞血酸。
18.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于其中營養(yǎng)物為食品制品，并且其中所述方法還包括把一種維生素加入食品制品中。
19.一種增加施用對象對葉酸鹽膳食吸收的方法其特征在于給施用對象服用權(quán)利要求1的組合物。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其特征在于所述的服用是通過腸溶服用的。
21.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其特征在于施用對象為動物。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的方法，其特征在于以每次習(xí)慣消費(fèi)所述組合物的量計(jì)所述一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的總摩爾量為動物每天所需葉酸鹽的5％-3000％之間。
23.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其特征在于施用對象為人。
24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，其特征在于以每次習(xí)慣消費(fèi)所述組合物的量計(jì)所述一種或多種天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體的總摩爾量為人每天所需葉酸鹽的5％-200％之間。
25.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，其特征在于人選自孕婦；流產(chǎn)的婦女；懷有有神經(jīng)管缺陷、裂唇缺陷或裂鄂缺陷的胎兒的婦女；和患有血管疾病的人。
26.對患有腸內(nèi)吸收障礙的施用對象治療的方法，其特征在于給該施用對象服用有效量的權(quán)利要求1的組合物以增加施用對象的血液葉酸鹽含量。
全文摘要
本發(fā)明公開一種用于人或動物消費(fèi)以提供葉酸鹽的組合物,該葉酸鹽包括天然的還原葉酸鹽異構(gòu)體,如(6S)－四氫葉酸、5－甲基－(6S)－四氫葉酸、5－甲?；?6S)－四氫葉酸、10－甲?；?6R)－四氫葉酸、5,10－亞甲基－(6R)－四氫葉酸、5,10－次甲基－(6R)－四氫葉酸、5－亞胺甲基－(6S)－四氫葉酸和其多谷氨?；苌?。該組合物有:多種維生素制品;早餐食物;嬰兒食品;動物飼料及其添加物等。組合物中用于人消費(fèi)的天然還原葉酸鹽異構(gòu)體的量以每份或劑量計(jì)可在每天所需葉酸的5%—200%。
文檔編號A61K31/519GK1209729SQ97191951
公開日1999年3月3日 申請日期1997年1月31日 優(yōu)先權(quán)日1996年1月31日
發(fā)明者S·W·貝利, J·E·艾林 申請人:南亞拉巴馬醫(yī)學(xué)科學(xué)基金會