專利名稱：采用神經(jīng)保護(hù)劑治療耳鳴的方法
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本發(fā)明涉及采用下述式I表示的神經(jīng)保護(hù)劑治療耳鳴的方法。式I化合物已在下述文獻(xiàn)中公開美國專利5,185,343，5,272,160，5,338,754和5,356,905(分別于1993年2月9日；1993年12月21日；1994年8月16日和1994年10月18日出版)；美國專利申請順序號08/292,651(1994年8月18日申請)和08/189/497(1994年1月31日申請)；PCT國際申請?zhí)朠CT/IB95/00398，指定國美國(1995年5月26日申請)；美國臨時專利申請，名稱為“(1S，2S)-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇甲磺酸鹽三水合物”(以M.M.Andino，T.G.Sinay和E.F.Fiese的名義于1995年8月11日申請)；和名稱為“Process For The Resolution OfCis-Racemic 7-Benzyloxy-3-[4-(4-Fluorophenyl)-4-Hydroxy-Piperdin-l-yl]Chroman-4-ol Dibenzoyl-D-Tartrate”(以M.Meltz等的名義于1995年7月20日申請)。這里所有的上述專利、美國專利申請和PCT國際申請全文都作為參考文獻(xiàn)引入本文。
NMDA受體是由蛋白質(zhì)亞單位集合組成的大分子復(fù)合物，這種蛋白質(zhì)亞單位具有特異性結(jié)合位點，它把持著可通透鈉離子和鈣離子的離子通道。Hansen and Krogsgaard-Larson，Med.Res.Rev.，10，55-94(1990)。具有對于谷氨酸、甘氨酸和聚胺的結(jié)合位點，以及具有其中化合物如苯環(huán)己哌啶(PCP)可以發(fā)揮拮抗作用的、位于離子通道內(nèi)的位點。
式I化合物是NMDA拮抗劑。NMDA拮抗劑是通過與谷氨酸結(jié)合位點或受體分子上其它位點的相互作用阻斷NMDA受體的化合物。NMDA拮抗劑的實例包括D-2氨基5-膦?；焖?D-AP5)，和D-2-氨基-7-膦?；幔琒choepp et al.，J.Neur.Transm.，85，131-143(1991)。NMDA受體的神經(jīng)傳遞拮抗劑可用作治療神經(jīng)病的治療劑，J.Lehman，The NMDAReceptor，Drug of the Future，14(11)，1059(1989)。美國專利號4,902,695涉及一系列可用于治療神經(jīng)病的競爭性NMDA拮抗劑，有關(guān)的神經(jīng)病包括癲癇，中風(fēng)，焦慮，大腦局部缺血，肌肉痙攣和神經(jīng)變性疾病如早老性癡呆和杭廷頓氏病。據(jù)報道NMDA拮抗劑治療偏頭痛(Canadian J.of Neurological Science19(4)，487(1992))；藥物成癮(Science，251，85(1991))；和與AIDS有關(guān)的神經(jīng)精神疾病(PIPS，11，1(1990))也是有效的。
下面式I表示的化合物及其可藥用鹽由于它們的選擇性神經(jīng)保護(hù)活性，可用于治療耳鳴。典型的耳鳴情況被描述為“在耳中轟鳴”。通常耳鳴本身不是疾病，而是疾病(耳硬化癥、梅尼埃氏病和腫瘤)或損傷(藥物引起的耳毒、頭/耳創(chuàng)傷、暴露于噪音環(huán)境)對聽覺系統(tǒng)第二癥狀表現(xiàn)。耳鳴出現(xiàn)的嚴(yán)重程度不一，從輕微，低于-臨床煩擾到嚴(yán)重的失去功能狀態(tài)。
在成年人中耳鳴是很普遍的，一次對英國的普查報道10％成年人患有長時間的、自發(fā)性耳鳴，1-3％的成年人患有嚴(yán)重到足以造成喪失功能的耳鳴。A.C.Davis，International J.Epidemiology，18，911-917(1989)。估計在美國的發(fā)生率是10-15％的成年人患有經(jīng)常性耳鳴(據(jù)報道高達(dá)35％的人出現(xiàn)過暫時性耳鳴)，其中0.1-1％的人耳鳴嚴(yán)重，J.W.P.Hazell(Ed)，Tinnitus，New YorkChurchill Livingstone(1987)。嚴(yán)重耳鳴可以造成喪失功能是由于“連續(xù)聽見聲音或噪聲”的心理作用。耳鳴使注意力不能集中，擾亂或阻礙睡眠，并且癥狀嚴(yán)重的病人經(jīng)常心情壓抑，M.Sullivan et al.，Archives of InternalMedicine，153，2251-2259(1993)。
采用大量的藥物試圖治療耳鳴，包括靜脈注射的局部麻醉藥(利多卡因)；反-氣鼓注射的麻醉藥；鋅，膽固醇，抗驚厥藥(氨甲酰氮)，安定藥物(如三唑安定)，巴比妥類，抗抑郁劑(三甲丙咪嗪，nortryptyline)，和鈣通道阻斷劑(氟苯桂嗪)。前面所列的治療劑一般效果有限。雖然局部麻醉劑是有效的，但其施用途徑(靜脈或反-氣鼓注射)是不可接受的。具有某些有益治療作用的唯一治療劑是三唑安定。在對因其它情況服用三唑安定的病人的一次研究中，報道經(jīng)過12周試驗后服用了三唑安定(1.5mg/天)的病人有某些癥狀減輕，但沒有足夠的數(shù)據(jù)確定三唑安定是否對神經(jīng)末梢起作用從而減輕或調(diào)節(jié)病人的耳鳴，R.M.Johnson et al.，Archives of Otolaryngology，Head andNeck Surgery，119，842-845(1993)。然而，三唑安定本身還存在與長期服用苯并二氮類有關(guān)的問題(鎮(zhèn)靜，成癮)。
本發(fā)明涉及治療哺乳動物耳鳴的方法，該方法包括給所說的哺乳動物施用治療有效量的下式化合物或其可藥用鹽。 其中(a)R2和R5是分開的，R5是甲基或乙基，和R1，R2，R3和R4獨(dú)立地選自氫、C1-C6烷基、鹵素、羥基、三氟甲基和-OR7；或(b)R2和R5連接在一起表示 形成苯并二氫吡喃-4-醇環(huán)，以及R1，R3和R4各自獨(dú)立地表示氫，C1-C6烷基、鹵素、三氟甲基、羥基或-OR7；R6表示 R7表示甲基、乙基、異丙基或正丙基；R8表示可被至多三個獨(dú)立地選自C1-C6烷基、鹵素和三氟甲基的取代基任選取代的苯基；X表示O，S和(CH2)n；以及n是0，1，2或3。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及可治療耳鳴的藥物組合物，該組合物包含治療有效量的式I化合物或其可藥用鹽以及可藥用載體。
關(guān)于本發(fā)明采用的式I化合物或其可藥用鹽，應(yīng)當(dāng)理解由于不對稱碳原子的存在具有立體異構(gòu)形式例如光學(xué)和幾何異構(gòu)體，而且所述異構(gòu)體的應(yīng)用也包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
除非另外定義，這里所用的術(shù)語“鹵素”是指鹵原子如氟，氯，溴或碘。
除非另外定義，這里所用的術(shù)語“烷基”包括具有直鏈或支鏈部分的飽和單價烴基。
除非另外定義，這里所用的術(shù)語“對耳鳴的治療”包括治愈、減輕或預(yù)防哺乳動物如人類耳鳴(不論起因)的方法。預(yù)防耳鳴的一個實例是在采用與藥物-引起的耳毒有關(guān)的某癌癥治療藥物前或在治療中，應(yīng)用式I化合物或其可藥用鹽。
除非另外定義，這里所用的術(shù)語“治療有效量”如上所述，是指治療耳鳴有效的量。
除非另外定義，這里所用的術(shù)語“可藥用鹽”是指鹽例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、乙酸鹽、瑚珀酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽(mesylate)和對甲苯磺酸鹽(tosylate)。
本發(fā)明采用的優(yōu)選化合物包括其中R2和R5彼此分開；R2和R3是氫；R6是下式基團(tuán) 和R8是苯基，4-鹵苯基或4-三氟甲基苯基的式I化合物。在這組化合物中，更具體優(yōu)選的化合物是其中R5是具有1S*，2S*相對立體構(gòu)型的甲基的化合物。 本發(fā)明采用的其它優(yōu)選化合物包括其中R2和R5連接在一起為 形成苯并二氫吡喃-4-醇環(huán)的化合物。在這組化合物中，優(yōu)選的化合物也包括所述苯并二氫吡喃-4-醇的C-3和C-4位具有3R*，4S*相對立體構(gòu)型的化合物 在這一組中，優(yōu)選的化合物也包括其中R6是下列基團(tuán) 和R8是苯基或4-鹵代苯基的化合物。
本發(fā)明采用的具體的優(yōu)選化合物如下(3R，4S)-3-[4-(4-氟苯基)-4-羥基-哌啶-1-基]苯并二氫吡喃-4，7-二醇，(1S，2S)-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇和前述兩種化合物的可藥用鹽。
本發(fā)明采用的特別優(yōu)選化合物如下(1S，2S)-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇，所述化合物的酒石酸鹽和甲磺酸鹽，以及所述化合物甲磺酸鹽的三水合物。
本發(fā)明采用的其它特別優(yōu)選化合物如下(3R，4S)-3-[4-(4-氟苯基)-4-羥基-哌啶-1-基]苯并二氫吡喃-4，7-二醇，所述化合物的酒石酸鹽，乳酸鹽和扁桃酸鹽。
式I化合物很容易制備。其中R2和R5連接在一起形成苯并二氫吡喃-4-醇環(huán)，以及R1，R3和R4表示氫的式I的化合物，可以根據(jù)US專利5,356,905中描述或提及一種或多種合成方法制備。其中R2和R5彼此分離，以及R1，R2，R3和R4表示氫的式I化合物，可以根據(jù)US專利5,185,343；5,272,160和5,338,754中描述或提及一種或多種合成方法制備。式I化合物也可以通過下述文獻(xiàn)產(chǎn)描述或提及的一種或多種合成方法制備US專利甲請?zhí)?8/292,651和08/189,479；美國臨時專利申請，名稱為“(1S，2S)-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇甲磺酸鹽三水合物”；和PCT國際申請?zhí)朠CT/IB95/00398，指定國美國；和美國臨時專利申請，名稱為“Process For The Resolution Of Cis-Racemic 7-Benzyloxy-3-[4-(4-Fluorophenyl)-4-Hydroxy-Piperdin-l-yl]Chroman-4-ol Dibenzoyl-D-Tartrate”。這里所有的美國專利、美國專利申請和PCT國際申請是指前面提到的文獻(xiàn)。
優(yōu)選的化合物(1S，2S)-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇((1S，2S)游離堿)及其酒石酸鹽可以根據(jù)上述美國專利5,272,160所述方法制備。對外消旋的1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇進(jìn)行的拆分得到(1S，2S)游離堿和相應(yīng)的(1R，2R)對映體，可以根據(jù)上述名稱為“(1S，2S)-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇甲磺酸鹽三水合物”，的美國臨時專利申請所述的方法進(jìn)行，并在下面實施例1中舉例說明。
(1S，2S)游離堿的無水甲磺酸鹽可以根據(jù)上述美國專利5,272,160所述的方法制備，當(dāng)在81％相對濕度環(huán)境中平衡后，轉(zhuǎn)化為(1S，2S)對映體甲磺酸鹽的三水合物。
(1S，2S)-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇甲磺酸鹽的三水合物，以根據(jù)上述名稱為“(1S，2S)-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇甲磺酸鹽三水合物”的美國臨時專利申請所述的方法制備。在這個方法中，在30℃將(1S，2S)游離堿溶于水中，向此溶液中加入至少1當(dāng)量的甲磺酸并使得到的溶液溫?zé)岬?0-65℃。將溫?zé)岬玫降娜芤哼^濾以除去顆粒，濃縮溶液至約原體積的40％，冷卻到10℃以下，通過過濾分離并干燥到含水量(通過Karl Fischer滴定法測量)為約11.3％。通過重結(jié)晶進(jìn)一步純化所得的甲磺酸鹽三水合物晶體。
另一個優(yōu)選化合物(3R，4S)-3-[4-(4-氟苯基)-4-羥基-哌啶-1-基]苯并二氫吡喃-4，7-二醇((3R，4S)苯并二氫吡喃醇)可以通過下述文獻(xiàn)中所述的方法制備US專利5,356,905，US專利申請?zhí)?8/189,479；美國臨時專利申請，名稱為“Process For The Resolution Of Cis-Racemic 7-Benzyloxy-3-[4-(4-Fluorophenyl)-4-Hydroxy-Piperdin-1-yl]Chroman-4-ol Dibenzoyl-D-Tartrate”，所有這三篇文獻(xiàn)都曾在前面提及。合成(3R，4S)苯并二氫吡喃醇所需的起始原料和反應(yīng)物不論從市場上，根據(jù)文獻(xiàn)公開的合成方法，或通過下面敘述中例舉的方法都很容易得到。
可以根據(jù)美國專利申請?zhí)?8/189,479所述的方法，通過分級結(jié)晶外消旋的順式-7-芐氧基-3-[4-(4-氟苯基)-4-羥基-哌啶-1-基]苯并二氫吡喃-4-醇的L-脯氨酸酯制備。優(yōu)選的方法是在名稱為“ProcessFor The Resolution Of Cis-Racemic 7-Benzyloxy-3-[4-(4-Fluorophenyl)-4-Hydroxy-Piperdin-l-yl]Chroman-4-ol Dibenzoyl-D-Tartrate”的上述美國臨時專利申請中記載的，和在實施例3中舉例說明的方法。在這個方法中，母體苯并二氫吡喃醇的制備是將外消旋的順式-7-芐氧基-3-[4-(4-氟苯基)-4-羥基-哌啶-1-基]苯并二氫吡喃-4-醇與等摩爾量的二苯甲酰基-D-酒石酸溶于沸騰的含水乙醇中。外消旋的順式-7-芐氧基-3-[4-(4-氟苯基)-4-羥基-哌淀-1-基]苯并二氫吡喃-4-醇的制備如前面美國專利申請?zhí)?8/189,479所述。含水乙醇的濃度不是關(guān)鍵并可在75％-95％乙醇(ETOH)范圍內(nèi)變化。發(fā)現(xiàn)9∶1/ETOH∶H2O的濃度是有效的并且是優(yōu)選的，需要足夠量的含水乙醇溶劑以溶解外消旋化合物，我們發(fā)現(xiàn)該量為17ml/g的外消旋化合物。
在加熱回流攪拌下，外消旋化合物溶解形成一渾濁溶液，將其在攪拌下冷卻使(3R，4S)-7-芐氧基-3-[4-(4-氟苯基)-4-羥基-哌啶-1-基]苯并二氫吡喃-4-醇二苯甲?；鵇-酒石酸酯的(+)異構(gòu)體沉淀出來，通過過濾收集并用含水乙醇洗滌，此即(3R，4S)苯并二氫吡喃醇的酒石酸鹽。按類似的方法可以制備(3R，4S)苯并二氫吡喃醇的乳酸鹽和扁桃酸鹽。開始得到的產(chǎn)物的光學(xué)純度約為90％，如果需要更高的光學(xué)純度，可使產(chǎn)物再與含水乙醇加熱，冷卻并收集和洗滌產(chǎn)物。發(fā)現(xiàn)經(jīng)過兩次這樣的處理得到光學(xué)純度達(dá)到99.4％的(+)異構(gòu)體，而總產(chǎn)率為74％。這個方法優(yōu)于上述美國專利申請08/189,479所述方法之處在于，它避免了用氫化鋁鋰還原的步驟因而更適合于大規(guī)模操作。這個方法也可制備產(chǎn)量較高的所需產(chǎn)物。
采用標(biāo)準(zhǔn)的方法，可以將上述(+)異構(gòu)體轉(zhuǎn)化為(3R，4S)-3-[4-(4-氟苯基)-4-羥基-哌啶-1-基]苯并二氫吡喃-4，7-二醇。例如，可用稀堿處理以釋放出哌啶基堿，隨后氫化以除去7-芐基得到(3R，4S)-苯并二氫吡喃醇。
總的來說，式I化合物的可藥用酸加成鹽可以通過生成的堿與合適的酸反應(yīng)很容易地制備。當(dāng)鹽是一元酸鹽(例如鹽酸鹽，氫溴酸鹽，對甲苯磺酸鹽，乙酸鹽)，二元酸的氫鹽形式(例如磷酸二氫鹽和檸檬酸鹽)時，采用至少1摩爾當(dāng)量的酸，通常采用摩爾量過量的酸。然而，當(dāng)需要的鹽是諸如硫酸鹽，半瑚珀酸鹽，磷酸氫鹽或磷酸鹽時，通常應(yīng)當(dāng)采用合適和確定當(dāng)量數(shù)據(jù)的酸。通常將游離的堿和酸在共-溶劑中混合，從此溶劑中產(chǎn)物可沉淀出來，或者可通過濃縮和/或加入非-溶劑使產(chǎn)物分離。
式I化合物及其可藥用鹽具有選擇性神經(jīng)保護(hù)活性，這是建立在其抗局部缺血活性和阻斷被激活氨基酸受體的能力的基礎(chǔ)上的。評估這種化合物神經(jīng)保護(hù)活性的優(yōu)選的方法如下文所述Ismail A.Shalaby，et al.，J.Pham.andExperimental Therapeutics，260，925(1992)。這篇文章全文引作參考并在下面加以描述。
細(xì)胞培養(yǎng)，將17天大鼠胎兒(CD，Charles River Breeding Laboratories，Inc.，Wilmington，MA)海馬細(xì)胞在PRIMARIA培養(yǎng)盤(Falcon Co.，LincolnPark，NJ)中在含培養(yǎng)基(含有非必需氨基酸的最少的必要的培養(yǎng)基，含2mM谷胺酰胺，21mM葡萄糖，盤尼西林/鏈霉素(各5000U)，10％牛胎兒血清(1-7天)和10％馬胎兒(1-21天))的血清中培養(yǎng)2-3周。或者以80,000細(xì)胞/孔的密度將細(xì)胞置于96-孔微量滴定盤中，或以250,000細(xì)胞/孔的密度置于24-孔培養(yǎng)盤中。培養(yǎng)物在含5％CO2-95％空氣的增濕CO2組織培養(yǎng)孵育器中在37℃生長。在培養(yǎng)的第6-8天通過加入20μM尿苷和20μM5-氟-2-脫氧尿苷(Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO)控制非神經(jīng)元細(xì)胞的增生。培養(yǎng)基每2-3天更換新的原料。
谷氨酸毒性。在置入盤中2-3周后評估培養(yǎng)物的谷氨酸毒性。移去培養(yǎng)基并用CSS(以mmol)漂洗兩次NaCl，12-；KCl，5.4；MgCl2，0.8；CaCl2，1.8；葡萄糖，15；和4-(2-羥基乙基)-1-哌嗪基乙磺酸，25mM(PH7.4)。然后培養(yǎng)物與各種濃度谷氨酸接觸15分鐘(37℃)。在這次孵育后，用不含CSS的谷氨酸漂洗培養(yǎng)物3次并用不含血清的新鮮培養(yǎng)基漂洗2次。然后在不含血清的培養(yǎng)基中孵育20-24小時，試驗化合物在2分鐘之前加入并且在與谷氨酸接觸的15分鐘內(nèi)加入。在一些試驗中，化合物是在與谷氨酸接觸后和在隨后的20-24小時中不同的時間加入的。
細(xì)胞存活率通常是在暴露于興奮毒素(excitotoxin)20-24小時后，通過測定胞液(cytosolic)酶LDH的活性來評估的。LDH活性由微量滴定盤96孔各個孔的培養(yǎng)基測定。將50μl培養(yǎng)基樣品加到含有1.32mM丙酮酸鈉和2.9mM NADH的等體積的磷酸鈉緩沖液(0.1M，PH7.4)中。對于96孔的每孔反應(yīng)混合物在340nm的吸收度是通過自動分光光度微量滴定板讀數(shù)器(Molecular Devices；Menlo Park，CA)監(jiān)測的，每5秒一次共計2分鐘。采用IBMSOFTmax程序(version 1.01；Molecular Deveces)自動計算吸收率，并將此作為LDH活性的指數(shù)。
神經(jīng)元存活率的形態(tài)學(xué)評估是采用相差顯微鏡測定的。由于96-孔培養(yǎng)盤不會產(chǎn)生很好的相差-對照影象，所以在24-孔盤上培養(yǎng)的細(xì)胞被用于這一目的。定量來說，兩種平板培養(yǎng)物對谷氨酸毒性同樣敏感，并且在與0.1-1.0mM谷氨酸接觸24小時后表現(xiàn)為LDH活性增加了2至3倍。
反應(yīng)物，DTG可由Aldrich Chemical Co.(Milwaukee，WI)購買，和鹵哌啶醇可由Research Biochemicals Inc.(Natick，MA)購買。精素可由SigmaChemical(St.，Louis，MO)購買。馬和牛胎兒血清可由Hyclone(Logan，UT)購買。培養(yǎng)基，谷胺酰胺和盤尼西林/鏈霉素可由Gibco Co.(Grand Island，NY)購買。
數(shù)據(jù)分析，神經(jīng)毒性可在接觸谷氨酸20-24小時后測量存在于培養(yǎng)基中的LDH活性而定量。培養(yǎng)基中LDH活性的增加是與神經(jīng)元(Koh和Choi，1987)的破壞和退化相關(guān)的。由于實際的LDH水平隨著不同的培養(yǎng)基變化，通常數(shù)據(jù)的表示是相對于用緩沖液處理過的同樣培養(yǎng)盤的姐妹孔的。為了得到谷氨酸和用藥物處理的培養(yǎng)物的LDH活性數(shù)據(jù)，要從處理組中減去對照組的LDH值。藥物處理組的數(shù)據(jù)表示為在每個試驗中由1mM谷氨酸(或NMDA)引起的LDH增長百分比。興奮毒素引起的回復(fù)LDH增長50％所需的NMDA拮抗劑濃度(IC50)，是采用從三個獨(dú)立試驗匯集結(jié)果的log-probit分析計算的。
式I化合物及其可藥用鹽的神經(jīng)保護(hù)活性使得它們可用于治療耳鳴。
在采用式I化合物或其可藥用鹽治療耳鳴時，不論施用的途徑，在以單一或分劑量形式時典型的劑量在約0.02-20mg/kg/天(對典型的體重50kg的人為0.001-1g/天)。更優(yōu)選的劑量范圍是在約0.15mg/kg/天-約20mg/kg/天。當(dāng)然，由于疾病的特定性質(zhì)或病人的病情，超過這一范圍的劑量也可由主治醫(yī)生處方?？诜ǔＪ莾?yōu)選的。然而，如果病人已不能咽或者口服吸收不好，其它的施用途徑如栓劑，或非腸道(肌肉或靜脈)或局部施用都是合適的。
式I化合物或其可藥用鹽可采用與可藥用載體或稀釋劑混合的藥物組合物的形式施用。通常，采用適合于所需施用形式的固體或液體載體或稀釋劑，將這樣的藥物組合物制劑以常規(guī)方法制成方便應(yīng)用的形式對口服采用片劑，硬或軟明膠膠囊，懸浮液，顆粒，粉末等形式；對非腸道施用采用注射溶液或懸浮液等形式；對局部施用采用溶液，洗劑，膏劑，軟膏等形式。
口服時，可以采用含有賦形劑如檸檬酸鈉，碳酸鈣和磷酸氫二鈣以及多種崩解劑如淀粉和優(yōu)選為土豆淀粉和木薯淀粉，藻酸和特定的復(fù)合硅酸鹽，以及結(jié)合劑如聚乙烯基吡咯烷酮，蔗糖和金合歡的片劑。此外制作片劑時，潤滑劑常常是很有用的，潤滑劑例如但不限于下述化合物硬脂酸鎂，月桂基硫酸鈉和滑石。類似形式的固體組合物也可作為填料填充入軟和硬-明膠膠囊中；此時優(yōu)選的物質(zhì)也包括，通過實施例說明但不局限于此乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇。當(dāng)口服施用需要的含水懸浮液和/或酏劑時，必須的活性成分可與多種甜味劑或調(diào)味劑，著色劑或染料混合，如果有需要，可有乳化劑和/或懸浮劑，以及稀釋劑如水，乙醇，丙二醇，甘油和多種類似的組合。
實施例1外消旋的(1S，2S)和(1R，2R)-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇將(+)-酒石酸(300mg，2mmol)溶于30ml溫?zé)峒状贾?，一次加入所有外消旋?S*，2S*-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇(655mg，2mmlo)，在攪拌和溫和加熱下得到無色均勻的溶液。在室溫放置24小時后，得到319mg(66％)松散的白色沉淀。用甲醇將得到的產(chǎn)物重結(jié)晶，得到263mg左旋標(biāo)題產(chǎn)物的(+)-酒石酸鹽，為白色固體；熔點206.5-207.5℃；[α]D＝-36.2°。將此鹽(115mg)加到50ml飽和碳酸氫鈉中，加入乙酸乙酯(5ml)并劇烈攪拌混合物30分鐘，用乙酸乙酯重復(fù)提取水相。合并有機(jī)層并用鹽水洗滌，用硫酸鈣干燥并濃縮。用乙酸乙酯-己烷重結(jié)晶得到的褐色殘留物，得到32mg(39％)白色，左旋的標(biāo)題產(chǎn)物；熔點203-204℃。[α]D＝56.9°。C20H25NO3的理論計算值C，73.37；H，7.70；N，4.28.實測值C，72.61；H，7.45；N，4.21。
用100ml飽和碳酸氫鈉水溶液處理前面(+)-酒石酸鹽制備中得到的濾液，并用乙酸乙酯充分提取，用鹽水洗滌合并的有機(jī)提取物，用硫酸鈣干燥并濃縮得到380mg回收的起始原料(部分溶解的)。如上所述用(-)-酒石酸(174mg)的30ml甲醇溶液處理所得的物質(zhì)。在室溫放置24小時后，過濾得到320mg(66％)，用甲醇將其進(jìn)一步重結(jié)晶得到239mg右旋標(biāo)題產(chǎn)物的(-)酒石酸鹽。熔點206.5-207.5℃；[α]D＝+33.9°。根據(jù)上述方法可將后者轉(zhuǎn)化為右旋標(biāo)題產(chǎn)物，產(chǎn)率49％；熔點204-205℃；[α]D＝+58.4°。實測值C，72.94；H，7.64；N，4.24。
實施例2(1S，2S)-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇甲磺酸鹽三水合物步驟1 在50加侖玻璃連接的反應(yīng)器中裝入17.1加侖丙酮，8.65kg(千克)(57.7mol)的4′-羥基苯基乙基酮，9.95kg(72.0mol)的碳酸鉀和6.8升(1)(57.7mol)的芐基溴。加熱回流(56℃)混合物20小時，薄層色譜(TLC)分析表明反應(yīng)基本完成?？諝鉂饪s懸浮液達(dá)到體積10加侖并裝入17.1加侖的水，在25℃?；玫膽腋∫?小時，在30″lapp上過濾產(chǎn)物并用4.6加侖水，接著用6.9加侖己烷和2.3加侖異丙醇洗滌。在45℃真空干燥后，得到13.35kg(96.4％)前面所述的產(chǎn)物。
第二步操作是根據(jù)前面所述的方法，采用9.8kg(65.25mol)的4′-羥基苯基乙基酮進(jìn)行的。干燥后得到15.1kg(96.3％)前面所述的產(chǎn)物。步驟2 在氮?dú)鈿夥罩?，?00加侖玻璃連接的反應(yīng)器中裝入75加侖二氯甲烷和28.2kg(117.5mol)步驟1產(chǎn)物。攪拌所得的溶液5分鐘，然后加入18.8kg溴，在22℃攪拌反應(yīng)0.5小時，TLC分析表明反應(yīng)基本完成。向此溶液中加入37加侖水并攪拌混合物15分鐘。分離二氯甲烷并用18.5加侖飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，分離二氯甲烷，空氣濃縮至體積40加侖并加入60加侖異丙醇。繼續(xù)濃縮至罐溫度為80℃和最終體積達(dá)到40加侖。將懸浮液冷卻到20℃并?；?8小時，在30″lapp上過濾產(chǎn)物并用10加侖異丙醇洗滌。在45℃真空干燥后，得到29.1kg(77.6％)前面描繪的產(chǎn)物。步驟3 在氮?dú)鈿夥罩?，?0加侖玻璃連接的反應(yīng)器中裝入4.90kg(15.3mol)步驟2產(chǎn)物，7.0加侖乙酸乙酯，2.70kg(15.3mol)4-羥基-4-苯基哌啶和1.54kg三乙胺(15.3mol)。加熱回流(77℃)溶液18小時，將所得的懸浮液冷卻到20℃。TLC分析表明反應(yīng)基本完成。在30″lapp上過濾副產(chǎn)物(三乙胺氫溴酸鹽)并用4加侖乙酸乙酯洗滌，真空濃縮濾液至體積為17升，將濃縮物加于48升己烷中并在20℃?；玫降膽腋∫?小時。在30″lapp上過濾產(chǎn)物并用4加侖己烷洗滌。在50℃真空干燥后，得到4.9kg(77％)上述描繪的產(chǎn)物。
第二步操作是根據(jù)前面所述的方法，采用3.6kg(11.3mol)的步驟2產(chǎn)物進(jìn)行的。干燥后得到4.1kg(87％)前面描繪的產(chǎn)物。步驟4 在氮?dú)鈿夥罩?，?00加侖玻璃連接的反應(yīng)器中裝入87.0加侖的2B乙醇和1.7kg(45.2mol)硼氫化鈉，在25℃攪拌所得的溶液并加入9.4kg(22.6mol)步驟3產(chǎn)物，在25-30℃攪拌所得的懸浮液18小時，TLC分析表明反應(yīng)基本完成得到所需蘇式非對映體。向此懸浮液中加入7.8升水，真空濃縮所得的懸浮液至體積40加侖。?；?小時后將產(chǎn)物在30″lapp上過濾產(chǎn)物并用2加侖2B乙醇洗滌。將濕產(chǎn)物，9.4加侖2B-乙醇和8.7加侖水裝入100加侖玻璃連接的反應(yīng)器中，在回流(78℃)攪拌懸浮液16小時。將得到的懸浮液冷卻到25℃，在30″lapp上過濾，用7加侖水接著用4加侖2B-乙醇洗滌。在50℃空氣干燥后得到8.2kg(86.5％)上述描繪的產(chǎn)物。根據(jù)下述方法將此物質(zhì)重結(jié)晶。
在100加侖玻璃連結(jié)的反應(yīng)器中裝入7.9kg(18.9mol)步驟3產(chǎn)物，20加侖2B乙醇和4加侖丙酮。加熱所得的懸浮液至70℃得到溶液，空氣濃縮所得的溶液至體積為15加侖。將懸浮液冷卻到25℃并?；?小時，產(chǎn)物在30”Lapp上過濾。濕產(chǎn)物和11.7加侖2B乙醇加入100加侖的玻璃連結(jié)的反應(yīng)器中，加熱回流(78℃)所得的懸浮液18小時。將所得到的懸浮液冷卻到25℃，在30”Lapp上過濾并用2加侖2B乙醇洗滌。在50℃空氣干燥后得到5.6kg(70.6％)前面描述的產(chǎn)物。步驟5 在氮?dú)鈿夥罩?，?0加侖玻璃連接的反應(yīng)器中裝入825g10％鈀/炭(50％水濕)，5.5kg(13.2mol)步驟4產(chǎn)物和15.5加侖四氫呋喃(THF)。在40-50℃氫化所得的反應(yīng)混合物2小時，此時，TLC分析表明還原反應(yīng)基本完成。通過用硅藻土預(yù)涂的14″sparkler過濾反應(yīng)混合物并用8加侖THF洗滌。將濾液轉(zhuǎn)移到干凈的100加侖玻璃連接的反應(yīng)器中，真空濃縮至體積為7加侖并裝入21加侖乙酸乙酯。在空氣中濃縮得到的懸浮液至體積為10加侖和罐反應(yīng)溫度為72℃。將懸浮液冷卻到10℃，在30″Lapp上過濾并用2加侖乙酸乙酯洗滌。在50℃空氣干燥后得到3.9kg(90％)前面描繪的產(chǎn)物(即游離堿)。步驟6 在100加侖玻璃連接的反應(yīng)器中裝入20加侖甲醇和3.7kg(11.4mol)步驟5產(chǎn)物(即游離堿)，將懸浮液加熱到60℃并裝入1.7kg(11.4mol)的D-(-)酒石酸。加熱回流(65℃)所得的溶液3小時，之后生成懸浮液。將所得的懸浮液冷卻到35℃，在30″Lapp上過濾并用1加侖甲醇洗滌。將濕潤的固體與10加侖甲醇裝入100加侖玻璃連接的反應(yīng)器中，在25℃攪拌所得的懸浮液18小時，在30″Lapp上過濾得到的懸浮液并用2加侖甲醇洗滌。在50℃空氣干燥后得到2.7kg(101％)前面描述的產(chǎn)物(即游離堿(R-(+)-對映體)的酒石酸鹽)。根據(jù)下述方法將此物質(zhì)純化。
在100加侖玻璃連接的反應(yīng)器中裝入10.6加侖甲醇和2.67kg(5.6mol)上述酒石酸鹽。加熱回流(80℃)所得的懸浮液18小時，將懸浮液冷卻到30℃，在30”Lapp上過濾并用4加侖甲醇洗滌。在50℃空氣干燥后得到2.05kg(76.7％)前面描述的產(chǎn)物(即游離堿的酒石酸鹽)。步驟7 20℃下在55升nalgene管中裝入30升水和1056g(12.6mol)碳酸氫鈉，向所得的溶液中加入2.0g(4.2mol)步驟6產(chǎn)物(即游離堿的酒石酸鹽)。攪拌所得的懸浮液4小時，在此過程中產(chǎn)生大量的泡沫。停止產(chǎn)生泡沫后，通過32cm漏斗過濾并用1加侖水洗滌。在50℃空氣干燥后得到1.28kg(93.5)上述描述的產(chǎn)物(即游離堿)。步驟8 在22升燒瓶中裝入1277g(3.9mol)步驟7產(chǎn)物和14升水。將懸浮液溫?zé)岬?0℃并加入375g(3.9mol)甲磺酸。將得到的溶液溫?zé)岬?0℃，利用硅藻土(Celite)過濾使其澄清并用2升水洗滌。真空濃縮無雜質(zhì)(speck-free)濾液至體積6升。將懸浮液冷卻到0-5℃并粒化1小時。在18＂過濾漏斗上過濾產(chǎn)物并用635ml無雜質(zhì)水洗滌。在25℃空氣干燥18小時后，得到1646g(88％)前面描述的產(chǎn)物(即甲磺酸鹽三水合物)。
實施例3(3R，4S)-7-芐氧基-3-[4-(4-氟苯基)-4-羥基-哌啶-1-基]苯并二氫吡喃-4-醇二苯甲酰基-D-酒石酸鹽A.將外消旋順式-7-芐氧基-3-[4-(4-氟苯基)-4-羥基-哌啶-基]苯并二氫吡喃-4-醇(2.07g，4.6mmol0和二苯甲?；?D-酒石酸(1.65g，4.6mmol)懸浮于30ml，90％乙醇/水中，攪拌所得的混合物并加熱回流；加入另外的5ml，90％乙醇/水得到渾濁溶液。在室溫攪拌得到的溶液過夜，通過過濾收集得到的固體并用3ml，95％乙醇洗滌兩次，得到1.55g(83.4％)標(biāo)題化合物，通過HPLC表明純度為87％。
B.將上述產(chǎn)物(1.2g)懸浮于21.4ml 90％EtOH(乙醇)∶H2O中，攪拌并加熱回流1.5小時，然后冷卻到室溫。通過過濾收集固體產(chǎn)物并每次用3ml90％EtOH∶H2O洗滌兩次，產(chǎn)率為1.1g，光學(xué)純度98.0％。
C.使步驟B產(chǎn)物重復(fù)進(jìn)行步驟B的過程，得到97％產(chǎn)率，光學(xué)純度為99.4％的產(chǎn)物。
采用250×4.6mm ChiralpakAD柱(Chiral Technologies，Exton，PA)通過HPLC測定光學(xué)純度，所用的流動相含600ml己烷，400ml異丙醇，1ml三氟乙酸和0.5ml二乙胺。流速為0.7ml/分鐘，注射體積20μl，其中含0.1-0.4mg樣品/ml。設(shè)定在220nm測定。
權(quán)利要求
1.下式化合物或其可藥用鹽在制備治療哺乳動物耳鳴的藥物組合物中的應(yīng)用， 其中(a)R2和R5是分開的，并且R1，R2，R3和R4獨(dú)立地選自氫、C1-C6烷基、鹵素、三氟甲基、羥基或-OH7和R5表示甲基或乙基；或(b)R2和R5連接在一起表示 形成苯并二氫吡喃-4-醇環(huán)，以及R1，R3和R4各自獨(dú)立地表示氫、C1-C6烷基、鹵素、三氟甲基、羥基或-OR7；R6表示 R7表示甲基、乙基、異丙基或正丙基；R8表示可被至多三個獨(dú)立地選自C1-C6烷基、鹵素或三氟甲基的取代基任選取代的苯基；X表示O，S和(CH2)n；以及n是0，1，2或3。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其R2和R5彼此分開；R2和R3是氫；R6是下式基團(tuán) 和R8是苯基，4-鹵苯基或4-三氟甲基苯基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的應(yīng)用，其中R5是具有1S*，2S*相對立體構(gòu)型的甲基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中R2和R5連接在一起為 形成苯并二氫吡喃-4-醇環(huán)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的應(yīng)用，其中所述苯并二氫吡喃-4-醇的C-3和C-4位具有3R*，4S*相對立體構(gòu)型
6.根據(jù)權(quán)利要求5的應(yīng)用，其中R6是下列基團(tuán) 和R8是苯基或4-鹵代苯基。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中所說的化合物選自(3R，4S)-3-[4-(4-氟苯基)-4-羥基-哌啶-1-基]苯并二氫吡喃-4，7-二醇，(1S，2S)-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇和前述兩種化合物的可藥用鹽。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的應(yīng)用，其中所述的化合物是(1S，2S)-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇，所述化合物的酒石酸鹽或甲磺酸鹽。
9.根據(jù)權(quán)利要求7的應(yīng)用，其中所述的化合物是(1S，2S)-1-(4-羥基苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇甲磺酸鹽三水合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求7的應(yīng)用，其中所述的化合物選自(3R，4S)-3-[4-(4-氟苯基)-4-羥基-哌啶-1-基]苯并二氫吡喃-4，7-二醇，及所述化合物的酒石酸鹽，乳酸鹽和扁桃酸鹽。
全文摘要
治療哺乳動物耳鳴的方法，該方法包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的下式化合物或其可藥用鹽；其中R
文檔編號A61K31/407GK1149454SQ9611232
公開日1997年5月14日 申請日期1996年9月13日 優(yōu)先權(quán)日1995年9月15日
發(fā)明者斯蒂文·B·桑茲 申請人:美國輝瑞有限公司