專利名稱：含有一種肽金屬鹽的緩釋制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種緩釋制劑，它包含一種具有水溶性肽的水不溶性或水微溶性多價金屬鹽的生理活性物質(zhì)，其中不包括內(nèi)皮素拮抗劑，以及包含一種可生物降解的高分子材料。
背景技術(shù)：
生理活性物質(zhì)，特別是肽或其衍生物，在體內(nèi)能顯示出各種藥理作用。通過化學(xué)合成，或利用諸如大腸桿菌類，酵母，動物細胞和倉鼠等生物體的基因工程和細胞工程技術(shù)，已能大量生產(chǎn)供藥用的某些生理活性物質(zhì)。但是，這些肽必需頻繁服用，因為它們一般具有短的生物半衰期，因此造成病人注射方面顯著的生理負擔(dān)。為解決該問題，進行了各種努力，以開發(fā)緩釋制劑。
在開發(fā)具有水溶性生理活性物質(zhì)的緩釋制劑，特別是水溶性肽(下文也稱為“肽”)，第一個要解決的問題是控制肽的溶解度，即調(diào)節(jié)肽的釋放速率。
國際專利申請?zhí)?00286/1991的日譯文出版物中披露了一種不溶性的鋅-魚精蛋白-α-干擾素復(fù)合物。
日本專利未審查出版物第2930/1988號披露一種包含聚交酯的系統(tǒng)，其中報道了一種大分子的多肽。
日本專利未審查出版物第221855/1993和第172208/1994號披露了一種技術(shù)，其中一種水溶性肽被轉(zhuǎn)變成水不溶性肽鹽，然后再將該鹽懸浮于含可生物降解的高分子材料的有機介質(zhì)中，以有效地完全包結(jié)水溶性的肽。在這些專利出版物中所用的水不溶性肽，是在水溶性肽分子的堿部分形成了一種有機酸鹽，例如帕莫埃特(pamoate)鞣酸，硬脂酸和軟脂酸。
雖然已經(jīng)作了多種努力以生產(chǎn)具有水溶性生理活性物質(zhì)的緩釋制劑，如上所述，但是尚未獲得滿意的緩釋制劑；因此需要開發(fā)一種緩釋制劑，它能有效包含水溶性生理活性物質(zhì)，抑制水溶性生理活性物質(zhì)的首次突然崩解效應(yīng)(initial burst)，提供水溶性生理活性物質(zhì)恒定釋放速率，并能保持水溶性生理活性物質(zhì)的生物活性。
本發(fā)明的描述本發(fā)明為解決上述問題進行了廣泛研究，發(fā)現(xiàn)一種緩釋制劑，其中當(dāng)將水溶性肽類的生理活性物質(zhì)，不包括內(nèi)皮素拮抗劑，與一種可生物降解的高分子材料合并后，能顯著具有增加效價的作用，并經(jīng)活的生物體服用后，幾乎不顯示出藥物的突然崩解。該制劑的制備是通過生長一種水溶性肽的水不溶性的或水微溶性的多價金屬鹽類生理活性物質(zhì)(下文也稱為“復(fù)合物”)，其中不包括內(nèi)皮素拮抗劑，而該鹽的形成是通過將具有酸基或水溶性鹽水溶性肽類的生理活性物質(zhì)(下文也稱為生理活性物質(zhì))，不包括內(nèi)皮素拮抗劑，與一種水溶性的多價金屬鹽相結(jié)合而成；再將該生理活性物質(zhì)分散或溶于生物可降解的高分子材料之中?；谏鲜霭l(fā)現(xiàn)進行深入研究后，發(fā)明人開發(fā)了本發(fā)明。
因此，本發(fā)明涉及以下方面(1)一種緩釋制劑，其包括(a)一種水溶性肽的水不溶性或水微溶性多價金屬鹽類生理活性物質(zhì)，不包括內(nèi)皮素拮抗劑，以及(b)一種生物可降解的高分子材料，(2)上述項目(1)中所述的一種制劑，其中生理活性物質(zhì)是一種水溶性肽或其衍生物，(3)上述項目(2)中所述的一種制劑，其中肽是一種激素，細胞因子，造血因子，生長因子，酶，可溶性或增溶化受體，抗體，含肽抗原，凝血因子或粘附分子，(4)上述項目(2)中所述的一種制劑，其中肽是一種激素，(5)上述項目(4)所述的一種制劑，其中的激素是一種生長激素，(6)上述項目(3)所述的一種制劑，其中的激素是一種胰島素，(7)上述項目(2)所述的一種制劑，其中的肽是一種細胞因子，(8)上述項目7所述的一種制劑，其中的細胞因子是一種干擾素，(9)上述項目2所述的一種制劑，其中的肽是一種生長因子，(10)上述項目1所述的一種制劑，其中的多價金屬鹽是一種過渡金屬鹽，(11)上述項目1所述的一種制劑，其中的多價金屬鹽是一種鋅鹽，(12)上述項目1所述的一種制劑，其中多價金屬鹽對水的溶解度在20℃時，從約為0至約為0.1％(w/w)，(13)上述項目1所述的一種制劑，其中多價金屬鹽對水的溶解度為約0至約0.01％(w/w)，(14)上述項目1所述的一種制劑，其含有約0.1％至約50％(w/w)多價金屬鹽，(15)上述項目1所述的一種制劑，其含有約1％至30％(w/w)多價金屬鹽，(16)上述項目1所述的一種制劑，其中可生物降解的高分子材料是一種脂肪族聚酯，(17)上述項目16所述的一種制劑，其中脂肪族聚酯是一種乳酸和乙醇酸的聚合物，(18)上述項目17所述的一種制劑，其中乳酸與乙醇酸組成比是從100/0至約40/60(摩爾％)，(19)上述第18項所述的一種制劑，其中的組成比從約90/10至約45/55(摩爾％)，(20)上述第17項所述的一種制劑，其中聚合物的加權(quán)平均分子量為約3,000至約20,000，(21)上述第17項所述的一種制劑，其中高分子材料的重量平均分子量為約3,000至約14,000，(22)上述第16項所述的一種制劑，其中脂肪族聚酯是一種乳酸的均聚物，(23)上述第22項所述的一種制劑，其中均聚物的重量平均分子量為約3,000至約20,000，(24)上述第22項所述的一種制劑，其中均聚物的重量平均分子量為約3,000至約14,000，(25)上述第1項所述的一種制劑，其中制劑是一種微囊，(26)上述第25項所述的一種制劑，其中微囊可供注射用，(27)上述第1項所述的一種制劑，它是一種可供注射的制劑，(28)水溶性肽的水不溶性或水微溶性多價金屬鹽類的生理活性物質(zhì)，其中不包括內(nèi)皮素拮抗劑，以及一種可生物降解的高分子材料在生產(chǎn)一種緩釋制劑的應(yīng)用，以及(29)生產(chǎn)一種緩釋制劑的方法，包括將一種水溶性肽的水不溶性或水微溶性多價金屬鹽類的生理活性物質(zhì)，其中不包括內(nèi)皮素拮抗劑，分散于含有可生物降解的高分子材料的油相中，以制備油包固體的乳劑，將該油包固體乳劑加至水相之中以制備水包油包固體的乳劑，然后再于水內(nèi)干燥水包油包固體的乳劑。
順便提及的是，本發(fā)明中的氨基酸，肽等的縮寫是基于在相關(guān)領(lǐng)域所常用的，按照IUPAC-IUB委員會關(guān)于生化命名的規(guī)定而確定的，氨基酸的可能的光學(xué)異構(gòu)體，除非另有指明，一般為L-異構(gòu)體。
在水不溶性或水微溶性多價金屬鹽中的生理活性物質(zhì)，帶有一種酸基。在這里酸基例如可以是羧基或磺基。優(yōu)選的生理活性物質(zhì)是其帶有一個肽鍵或一個氨基酸和酸基。酸基也可以來自于氨基酸。更為優(yōu)選的是，生理活性物質(zhì)是一種具有酸基或衍生物的水溶性肽。生理活性物質(zhì)對水的溶解度在25℃時是1％(w/w)或更高。
優(yōu)選的生理活性物質(zhì)具有二個或更多的羧基。
生理活性物質(zhì)的分子量為約200至200,000，優(yōu)選的是約200至約50,000，更為優(yōu)選的是約500至約40,000。
代表性的生理活性物質(zhì)的活性是具有激素作用。生理活性物質(zhì)可以是中性的，合成的，半合成的或基因工程產(chǎn)品，或其衍生物。至于作用機理，這些生理活性物質(zhì)可以是激動劑或拮抗劑。
生理活性物質(zhì)，特別是本發(fā)明中的水溶性肽或其衍生物，包括激素，細胞因子，造血因子，生長因子，酶，可溶性或增溶化受體，一種抗體或其片斷，一種含肽抗原，一種凝血因子，一種粘附分子，能結(jié)合于生理活性物質(zhì)上受體的激動劑或拮抗劑，等等。
例如激素包括胰島素，生長激素，促尿鈉排泄肽，促胃酸激素，催乳激素，促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)，促甲狀腺激素(TSH)，黃體化激素(LH)，促卵泡激素(FSH)，人絨毛膜促性腺激素(HCG)，莫替林肽(motilin)，激肽釋放酶，等等。優(yōu)選的激素是胰島素和生長激素。
例如細胞因子包括淋巴因子，單因子等等。如淋巴因子包括干擾素(α，β，γ)，白介素(從IL-2至IL-12)等等。如單因子包括白介素-1(IL-1)，腫瘤壞死因子，等等。優(yōu)選的細胞因子是淋巴細胞，更為優(yōu)選的是干擾素(α，β，γ)。
例如造血因子包括紅細胞生長素，粒細胞促克隆因子(G-CSF)，巨噬細胞促克隆因子(M-CSF)，血小板生長素，促血小板生長因子，巨核細胞增效劑等。
例如生長因子包括堿性或酸性或纖維生長因子(FGF)，及其家族(例如FGF-9等)，神經(jīng)細胞生長因子(NGF)，或其家族，類胰島素生長因子(如IGF-1，IGF-2)，骨形態(tài)形成蛋白(BMP)，或其家族等。
例如酶包括超氧化物歧化酶(SOD)，組織纖維蛋白溶酶原活化因子(TPA)等。
例如可溶性受體包括可溶性IL-6受體，類胰島素生長因子結(jié)合蛋白(IGFBD)，可溶性TNF受體，可溶性EGF受體，可溶性IL-1受體等。
例如增溶化受體包括已知的受體，如IL-1受體，IL-6受體，TNF受體，或Fas配體等，通過基因工程的方法使其增溶化。
例如抗體包括人單克隆抗體，人-小鼠嵌合體的單克隆抗體，其中來源于小鼠的抗體變異區(qū)域結(jié)合于來源于人抗體的不變區(qū)域，及其片段等等?？贵w的類型如可包括IgM，IgG，IgE等等。可被上述抗體所識別的抗原，可包括如血小板，病毒，等等。
例如凝血因子包括因子VIII等等。
例如粘附分子包括纖維糖蛋白(fibronectin)，ICAM-1等等。
此外，例如生理活性物質(zhì)還包括內(nèi)皮素，Arg-Gly-Asp-Ser(RGDS)，垂體腺苷酸環(huán)化酶活化多肽(DACAP)等等。
通過將其與水溶性多價金屬相接觸，生理活性物質(zhì)被轉(zhuǎn)變成其水不溶性或水微溶性的多價金屬鹽。
水溶性多價金屬鹽，可以是如二價，三價或四價金屬等等，例如堿土金屬(即鈣，鎂等)，過渡金屬[即鐵(II，III)，銅(II)，鋅(II)等]，IIIb族金屬[即鋁(II，III)等]，IVb族金屬[即錫(II，IV)等]等等。優(yōu)選的多價金屬是堿土金屬鹽或過渡金屬鹽，較為優(yōu)選的是鈣或鋅鹽，更為優(yōu)選的是鋅。
水溶性多價金屬鹽，包括多價金屬與酸形成的鹽，例如多價金屬與無機酸形成的鹽，以及多價金屬與有機酸形成的鹽。
多價金屬與酸形成的鹽，優(yōu)選的是該鹽在通常溫度(20℃)下對水的溶解度不低于20mg/ml，更為優(yōu)選的是不低于100mg/ml，以及更為優(yōu)選的是不低于200mg/ml。
與多價金屬結(jié)合形成鹽的無機酸，包括鹽酸，硫酸，硝酸和硫氰酸等。
與多價金屬結(jié)合形成鹽的有機酸，包括脂肪族羧酸和芳香酸。脂肪羧酸優(yōu)選的是含2至9個碳原子的酸，包括脂肪族單羧酸，雙羧酸，三羧酸等。這些酸可以是飽和或不飽和的。
例如脂肪族單羧酸包括，具有2至9個碳原子的飽和脂肪族單羧酸(如乙酸，丙酸，丁酸，戊酸，己酸，庚酸，辛酸，壬酸，癸酸等)以及具有2至9個碳原子的不飽和脂肪族單羧酸(如丙烯酸，丙炔酸，甲基丙烯酸，巴豆酸，異巴豆酸等)。
例如脂肪族二羧酸包括，具有2至9個碳原子的飽和脂肪族二羧酸(如丙二酸，丁二酸，戊二酸，己二酸，庚二酸，等等)以及具有2至9個碳原子的不飽和脂肪族二羧酸(如馬來酸，富馬酸，甲基馬來酸，甲基富馬酸等)。
例如脂肪族三羧酸包括，具有2至9個碳原子的飽和脂肪族三羧酸(如丙三羧酸，1，2，3-丁烷三羧酸等)。
上述脂肪族羧酸可含有1或2個羥基。這種脂肪族羧酸包括乙醇酸，乳酸，甘油酸，羥基丙二酸，蘋果酸，酒石酸，檸檬酸等等。
優(yōu)選的脂肪族羧酸是脂肪酸單羧酸，較優(yōu)選的是具有2至9個碳原子的脂肪族單羧酸，更為優(yōu)選的是含有2或3個碳原子的飽和脂肪族單羧酸。特別優(yōu)選的脂肪族羧酸的例子包括乙酸等等。
例如芳香族羧酸包括，苯甲酸，水楊酸，等。優(yōu)選的是苯甲酸。
多價金屬與無機酸制成的鹽，如無機酸的多價金屬鹽，例如可包括鹵化物(如氯化鋅，氯化鈣)，硫酸鹽，硝酸鹽，硫氰酸鹽等。
多價金屬與脂肪羧酸制成的鹽，如脂肪羧酸的多價金屬鹽，包括乙酸鈣，乙酸鋅，丙酸鈣，乙醇酸鋅，乳酸鈣，乳酸鋅，酒石酸鋅等。優(yōu)選的脂肪羧酸多價金屬鹽包括乙酸鈣和乙酸鋅。更為優(yōu)選的是乙酸鋅等。
多價金屬與芳香酸形成的鹽，如芳香酸多價金屬鹽，例子包括苯甲酸，水楊酸等，更為優(yōu)選的是苯甲酸鋅。
水不溶性或水微溶性多價金屬鹽類生理活性物質(zhì)的生產(chǎn)，是通過在一種溶劑中將水溶性生理活性物質(zhì)同水溶性多價金屬鹽混合而成。優(yōu)選的混合方法是在水中進行。
在水中生理活性物質(zhì)與水溶性多價金屬鹽的混合比(摩爾比)，例如可以從1∶1至1∶1000，優(yōu)選1∶1至1∶100，較為優(yōu)選為1∶1至1∶50，更為優(yōu)選的是1∶1至1∶10。兩種組分在水中的濃度可以任選，條件是在各自溶解度的范圍內(nèi)組分的濃度要超過復(fù)合物的溶解度。
從上述混合所得水溶液的pH值必須保證生理活性物質(zhì)的生理活性不受影響，以及生理活性物質(zhì)與水溶性多價金屬鹽的溶解度不致于降低得過多。雖然混合步驟一般是在蒸餾水中進行，也可以按需要將水溶液調(diào)至弱酸性，中性或弱堿性。
本文中提及的“為水不溶的或水微溶的”這句話并不意味著是不可逆的，而是指可逆的，它意味著水的溶解度很低。在一般溫度下(20℃)，水中的溶解度約從0至約0.1％(w/w)，優(yōu)選的是從約0至0.01％(w/w)。
如此方法獲得的水不溶性或水微溶性多價金屬鹽類的水溶性生理活性物質(zhì)，按需要可經(jīng)真空干燥或冰凍干燥后使用。
本發(fā)明中的緩釋制劑，水不溶性或水微溶性多價金屬鹽類生理活性物質(zhì)的含量，通常為約0.1至約50％(w/w)，優(yōu)選的是約1至約30％(w/w)。
可生物降解的聚合物，可用具有微溶或不溶于水的高分子量的聚合物來舉例實施，例如脂肪族聚酯(如從一個或多個α-羥基羧酸，如乙醇酸、乳酸、羥基丁酸等，所合成的均聚物，共聚物或其混合物)，羥基二元羧酸，如蘋果酸等，羥基三元羧酸如檸檬酸等等，以及其它的酯如聚α-氰基丙烯酸酯，聚氨基酸如聚γ-芐基-L-谷氨酸等。這些聚合物可按合適的比例，應(yīng)用于混合物中，聚合反應(yīng)的類型可以是無規(guī)的，嵌段的或接枝型的。
優(yōu)選的生物可降解的聚合物是脂肪族聚酯(例如均聚物，共聚物或其混合物)，該聚酯是從一個或多個α-羥基羧酸如乙醇酸，乳酸，羥基丁酸等，羥基二元羧酸如蘋果酸等，羥基三元羧酸如檸檬酸等以及其它羧酸合成而得。
在上述所提及的脂肪族聚酯中，按照易進行生物降解和生物相容性，優(yōu)選均聚物或共聚物，它們是從一個或多個α-羥基羧酸所合成的(例如乙醇酸，乳酸，羥基丁酸等)。更為優(yōu)選的是，脂肪族聚酯是一種共聚物，它是從一個或多個α-羥基羧酸所合成的(例如乙醇酸，乳酸，羥基丁酸等)。并且這些共聚物也可用于混合物中。
本發(fā)明中生物可降解的聚合物，是按通常已知的方法生產(chǎn)的。
雖然上述的α-羥基羧酸可以是D-，L-或D，L-構(gòu)型，優(yōu)選的是D-/L-構(gòu)型之比(摩爾％)在約75/25至約25/75范圍之內(nèi)。更為優(yōu)選的D-/L-構(gòu)型之比(摩爾％)為約60/40至約30/70。
例如上述的α-羥基羧酸共聚物，包括乙醇酸與另一個α-羥基酸所形成的共聚物，優(yōu)選乳酸或2-羥基丁酸。
α-羥基羧酸共聚物優(yōu)選的是，一種乳酸-乙醇酸共聚物或一種2-羥基丁酸-乙醇酸共聚物。
更為優(yōu)選的是，α-羥基羧酸共聚物為一種乳酸-乙醇酸共聚物。
關(guān)于乳酸-乙醇酸共聚物，優(yōu)選的含量比(乳酸/乙醇酸)(摩爾％)為約100/0至約40/60。較為優(yōu)選的比值為90/10至約45/55，更為優(yōu)選的是80/20至約45/55。乳酸-乙醇酸共聚物的重量平均分子量為約3,000至約20,000，優(yōu)選的是約3,000至約14,000，更為優(yōu)選的是約3,000至約12,000。
并且乳酸-乙醇酸共聚物的分散度(重均分子量/數(shù)均分子量)，優(yōu)選的是約1.2至約4.0，更為優(yōu)選的是約15至約3.5。
乳酸-乙醇酸共聚物可按已知方法合成，例如在日本專利未審查出版物第28521/1986號中所述的方法。優(yōu)選的是，共聚物通過無催化劑的脫水縮聚法合成。
關(guān)于2-羥基丁酸-乙醇酸共聚物，優(yōu)選的乙醇酸的量從約10％至約75％(摩爾)，而剩余部分為2-羥基丁酸。較優(yōu)選的是，乙醇酸的量從約20至約75％摩爾，更為優(yōu)選的是約30至約70％摩爾。2-羥基丁酸-乙醇酸共聚物的重均分子量，優(yōu)選為2,000至20,000。2-羥基丁酸-乙醇酸共聚物的分散度(重均分子量/數(shù)均分子量)優(yōu)選為1.2至4.0，更為優(yōu)選的是約1.5至3.5，2-羥基丁酸-乙醇酸共聚物，可按已知的方法合成，如日本專利未審查出版物第28521/1986所描述的方法。共聚物的合成優(yōu)選無催化劑脫水縮聚法。
上述α-羥基羧酸均聚物，優(yōu)選的例子包括乳酸均聚物。乳酸均聚物重均分子量約為3,000至約20,000，優(yōu)選約3,000至約14,000。乳酸均聚物可按已知方法合成，如日本專利未審查出版物第28521/1986號所描述的方法。均聚物的合成優(yōu)選無催化劑的脫水縮聚法。
上述2-羥基丁酸-乙醇酸共聚物，可與聚乙酸混合使用。雖然聚乳酸可以是D-或L-構(gòu)型，或其混合物，優(yōu)選的D-/L-構(gòu)型的比例(摩爾％)應(yīng)在約75/25至約20/80。較為優(yōu)選的D-/L-構(gòu)型(摩爾％)的比例為約60/40至約25/75，優(yōu)選的是55/45至約25/75。聚乳酸重均分子量優(yōu)選約1,500至約20,000，更為優(yōu)選的是約1,500至10,000。并且聚乳酸的分散度，優(yōu)選1.2至4.0，更為優(yōu)選的為約1.5至3.5。
已知兩種方法之比聚乳酸交酯，即乳酸的一種二聚體，經(jīng)開環(huán)聚合；以及乳酸的脫水縮聚。為獲得本發(fā)明中的相對低分子量的聚乳酸，優(yōu)選乳酸的直接脫水縮聚法。該方法見日本專利未審查出版物第28521/1986號。
當(dāng)使用2-羥基丁酸-乙醇酸共聚物和聚乳酸的混合物時，它們的混合比約為10/90至約90/10(重量％)。優(yōu)選的混合比為約20/80至80/20，更為優(yōu)選的是30/70至70/30。
在本說明書中，重均分子量定義是，用9個聚苯乙烯作為參照物，以凝膠滲透色譜(GDC)測得的分子量，9個參照物的重均分子量是120,000，52,000，22,000，9,200，5,050，2,950，1,050，580和162?；贕PC的測定計算數(shù)均分子量。從重均分子量和數(shù)均分子量，計算分散度。用GPC柱KF 804L×2(由Showa Denko公司產(chǎn))和RI測檢儀L-3300(由Hitachi有限公司產(chǎn))及氯仿作為流動相進行測定。
由無催化劑脫水縮聚所合成的上述共聚物，通常具有一個末端羧基。
在本發(fā)明中，可生物降解的聚合物，優(yōu)選具有末端羧基。
具有末端羧基的可生物降解的聚合物，其由GPC測定出的數(shù)均分子量與由末端基團測定出的數(shù)分子量幾乎一致。
通過定量測定末端基團，再按下法計算數(shù)均分子量將約1至3g的可生物降解的聚合物，溶于丙酮(25ml)和甲醇(5ml)的混合溶劑中，將該溶液以0.05N氫氧化鉀醇溶液快速滴定，于室溫攪拌，用酚酞作為指示劑，測定末端羧基含量；利用下列方程式計算基于末端基定量法的數(shù)均分子量基于末端定量法的數(shù)均分子量＝20,000A/BA可生物降解的聚合物的重量B達到滴定終點后，加入的0.05N氫氧化鉀醇溶液的量(ml)。
例如，具有一個末端羧基并以無催化劑脫水縮聚法從一個或多個α-羥基酸合成的聚合物，其基于GPC測定法所得數(shù)均分子量與基于末端定量測定法所得數(shù)均分子量幾乎相同。另一方面，末端基本上無羧基，并且由催化劑經(jīng)開環(huán)聚合從環(huán)狀二聚體合成的聚合物，其基于末端定量測定法所得數(shù)均分子量，顯著高于基于GPC測定所得數(shù)均分子量。這一差別使得人們可能明確地區(qū)分具有一個末端羧基與不具有末端羧基的聚合物。
基于末端基團定量法所得的數(shù)均分子量是一個絕對值，而基于GPC測定所得的數(shù)均分子量是一個相對值，它隨各種分析方法的不同而變化(例如，流動相的種類，柱子的種類，參照物，峰寬的選擇，基線的選擇等)；因此將后者以絕對的數(shù)字來表示是困難的。但是，當(dāng)基于GPC測定所得數(shù)均分子量與基于末端基團定量而得數(shù)均分子量幾乎相同時，這意味著基于末端基團定量所得數(shù)均分子量，是在基于GPC測定所得數(shù)均分子量的約0.5至約2倍范圍內(nèi)，優(yōu)選的是從約0.8至約1.5倍。并且，當(dāng)基于末端基團定量法所得的數(shù)均分子量，顯著高于基于GPC測定法所得的分子量時，這意味著基于末端基團定量法所得數(shù)均分子量，為基于GPC測定所得數(shù)均分子量的約2倍以上。
本發(fā)明中緩釋制劑的制備，是將生理活性物質(zhì)和一種水溶性的多價金屬鹽混合而制成的一種水不溶性或水微溶性多價金屬鹽類的生理活性物質(zhì)，分散于可生物降解的聚合物中而成。制備緩釋制劑的方法，包括水內(nèi)干燥法，相分離法，噴霧干燥法，及其改良法。
下面介紹制備緩釋制劑的方法，例如微膠囊。(i)水內(nèi)干燥法(o/w法)在該方法中，首先制備溶于一種有機溶劑的可生物降解的聚合物的溶液。用來制備本發(fā)明中緩釋制劑的有機溶劑，最好具有不超過120℃的沸點。該有機溶劑包括鹵代烴(例如，二氯甲烷，氯仿，四氯化碳等)，醇(例如，乙醇，甲醇)，乙腈等。它們可按合適的比例混合使用。優(yōu)選的有機溶劑是二氯甲烷和乙腈，更為優(yōu)選的是二氯甲烷。在有機溶劑的溶液中，生物可降解的聚合物的濃度，通常為約0.01至約80％(w/w)，較為優(yōu)選的是0.1至約70％(w/w)，更為優(yōu)選的是約1至約60％(w/w)，這依賴于可降解聚合物的分子量，有機溶劑的種類等。
按需要將水不溶性或水微溶性多價金屬鹽類的生理活性物質(zhì)冰凍干燥或真空干燥后，再加到或溶解至含上述制備的可生物降解的聚合物的有機溶劑的溶液之中。在這一步操作中，設(shè)計加入復(fù)合物的量，使得復(fù)合物與可生物降解的聚合物的重量比達約1∶2，優(yōu)選的是約1∶3。
將所得有機溶劑的溶液加入至水相中，形成一種o/w乳劑，用闊錐形機械攪拌器或類似的裝置攪拌，再蒸去油相中的溶劑，得微膠囊。水相的體積通常選擇是油相體積的約1至約10,000倍范圍，優(yōu)選的是約2至約5,000倍，更為優(yōu)選的是約5至約2,000倍。
可以將乳化劑加入至外部水相中。乳化劑可任選，只要它能形成一種穩(wěn)定的o/w乳液。這種乳化劑的例子包括陰離子表面活性劑，非離子型表面活性劑，聚氧亞乙基蓖麻油衍生物，聚乙烯吡咯烷酮，聚乙烯醇，羧甲基纖維素，卵磷脂，明膠，透明質(zhì)酸等。這些也可按需要混合使用。在外部水相中乳化劑的濃度優(yōu)選的是約0.001至約20％(w/w)，較為優(yōu)選的是約0.01至約10％(w/w)，更為優(yōu)選的是約0.05至5％(w/w)。
在上面描述的o/w方法中，微膠囊的制備也可這樣進行，即將復(fù)合物分散于含可生物降解的聚合物的有機溶劑溶液之中，即s/o/w法。(ii)水內(nèi)干燥法(w/o/w法)在該方法中，首先制備可生物降解的聚合物在有機溶劑中的溶液。在有機溶劑的溶液中可生物降解的聚合物的濃度，通常約為0.01至約80％(w/w)，優(yōu)選約0.1至約70％(w/w)，更為優(yōu)選的是約1至60％，這要視可生物降解的聚合物的分子量，有機溶劑的種類等而定。用復(fù)合物的水分散體，作為內(nèi)層水相。復(fù)合物在水分散體中的濃度為，例如，約10至約90％(w/v)。用闊錐形機械攪拌器，均漿器等，按已知的分散方法，將上述復(fù)合物的水分散體乳化并分散于可生物降解的聚合物的有機溶劑溶液之中，制成w/o乳劑。這一操作步驟按照內(nèi)層水相與可生物降解聚合物之重量比達1∶2，優(yōu)選約達1∶3比例進行。內(nèi)層水相與可生物降解聚合物的有機溶劑溶液之比，為1∶1,000至1∶1(v/v)，優(yōu)選1∶100至1∶5(v/v)，更為優(yōu)選的是1∶50至1∶5(v/v)。
將如此制備的w/o乳劑，加入至另一水相之中，制成w/o/w乳劑，再蒸去油相中的溶劑，得到微膠囊。這一操作步驟按照上述的第(i)項進行。
本發(fā)明中緩釋制劑，優(yōu)選使用微粒形。這是因為當(dāng)病人以普通的皮下或肌肉注射給藥時，該緩釋制劑不會引起過于疼痛。緩釋制劑的平均粒徑，例如，可以是從約0.1至約300μm，優(yōu)選約1至約150μm，更為優(yōu)選的是約2至約100μm。
在本說明書中，微粒形的緩釋制劑也稱為微膠囊。
本文中使用的術(shù)語“微膠囊”也可以稱之為“微球”。
本發(fā)明中的緩釋制劑給藥方式，可以微膠囊的形式，或以各種非口服制劑的劑型(例如，肌肉內(nèi)，皮下或內(nèi)臟注射或其它可能的劑型，鼻腔，直腸或子宮等經(jīng)粘膜給藥的制劑)，或口服制劑(例如，膠囊如硬膠囊，軟膠囊等，固體制劑如顆粒和粉末等，液體制劑如懸浮液等)。
在本發(fā)明中，緩釋制劑優(yōu)選注射劑型。當(dāng)緩釋制劑是微膠囊時，例如，它可以通過微膠囊懸浮于水中，再加入分散劑(如表面活性劑吐溫80和HCO-60，多糖如羧甲基纖維素，藻酸鈉和透明質(zhì)酸鈉等)，防腐劑(如甲基帕洛賓(paraben)，丙基帕洛賓等)，等滲劑(如氯化鈉，甘露醇，山梨醇，葡萄糖等)等添加劑，制成緩釋制劑的水懸浮液，供注射用。或者，通過分散微膠囊，再加入植物油如芝麻油或玉米油，也可再添加或不添加磷脂，如卵磷脂，或中等鏈長的甘油三脂肪酸酯(如MIGLYOL812)，制備本發(fā)明中緩釋制劑的油懸浮液，以供注射用。
當(dāng)緩釋制劑是微膠囊時，只要其分散度和注射針頭滿足供注射懸浮液的需要，緩釋制劑的平均粒子大小可選擇在從0.1至約300μm的范圍之間。優(yōu)選的粒子大小在從1至約150μm范圍，更為優(yōu)選的是約2至100μm。
上述微膠囊可制成消毒制劑，消毒方法不受局限。該方法可以是整個生產(chǎn)過程是消毒的，可以用γ射線作為消毒源，也可以添加防腐劑。
本發(fā)明中的緩釋制劑，因其低毒性，可被安全用于哺乳動物上(例如，人，小牛，豬，狗，貓，小鼠，大鼠，兔等)。
按照所用的生理活性物質(zhì)，本發(fā)明中的緩釋制劑的適應(yīng)征可以變化。例如，當(dāng)所用的生理活性物質(zhì)是胰島素時，本發(fā)明中的緩釋制劑能有效用于治療與預(yù)防糖尿病；當(dāng)所用的生理活性物質(zhì)是α干擾素時，可用于腎癌和丙肝等的治療；當(dāng)生理活性物質(zhì)是紅細胞生長素時，可用于貧血等的治療；當(dāng)生理活性物質(zhì)是生長激素時，可用于生長障礙的治療；當(dāng)生理活性物質(zhì)為促粒細胞克隆因子時，可用于治療癌癥化療后的中性白細胞減少癥；當(dāng)生理活性物質(zhì)是紅細胞生長素時，本發(fā)明中的緩釋制劑，對于促進自體輸血后的造血也是有效的。
按照生理或者物質(zhì)的含量和類型，生理活性物質(zhì)釋放的持續(xù)時間，作用于何種疾病，受試動物，以及其它因素的不同，來設(shè)定緩釋制劑的量，使得生理活性物質(zhì)能發(fā)揮作用。按照需要選擇生理活性物質(zhì)的給藥量，當(dāng)制劑是一周量時，每個成人的給藥范圍是每公斤體重從0.0001至約10mg。按照需要，更為優(yōu)選的范圍是每公斤體重約從0.0005至約1mg。
按需要，對每個成人緩釋制劑優(yōu)選的給藥范圍是約0.0005至約50mg/kg。按需要更為優(yōu)選的范圍是從約0.0025至約10mg/kg。按照生理活性物質(zhì)的類型，含量與劑型的不同，生理活性物質(zhì)釋放的持續(xù)時間，需治療的疾病，受試動物以及其它因素的不同，選擇合適的給藥次數(shù)，例如每周一次，每二周一次或每四周一次。
雖然本發(fā)明中的制劑，可以在普通溫度或在陰冷的地方貯藏，優(yōu)選的是將它貯藏于陰冷的地方。這里提到的普通的溫度和陰冷地方的定義，是按照日本藥典中指明的，普通溫度指15至25℃，陰冷的地方指15℃以下。
實施本發(fā)明的最佳方式下面的例子更詳細地描述了本發(fā)明的內(nèi)容，當(dāng)然并不局限于這些例子。參考例1將0.5g豬胰島素(27.3U/mg，產(chǎn)于荷蘭的DIOSYNTH公司)溶于22ml，100mM的氫氧化鈉水溶液之中，與1g乙酸鋅(二水合物)在10ml的蒸餾水的溶液混合，于室溫放置1小時。于約3,000 rpm(05PR-22型，日立有限公司產(chǎn))離心后，棄去上清液。將殘渣再分散于蒸餾水中，再進行離心。將上清液棄去后，將少量蒸餾水加至殘渣中，再冰凍干燥，得干粉狀豬胰島素的鋅鹽粗品約1g。
為了測定所獲得粉末中的胰島素的含量，將粉末用含30％乙腈的50mM EDTA溶液提取，振搖3小時，再用高效液相色譜法定量(HPLC)。結(jié)果表明，每100mg干粉含豬胰島素47.6mg。參考例2將104g亞硝基乙腈尿素，慢慢一點一點地加入至168ml 40％氫氧化鉀水溶液和1,000ml乙醚的混合物之中，同時將混合物于冰冷卻下攪拌。將得到的黃色醚層分出，加入粒狀氫氧化鉀干燥。再除去氫氧化鉀，得900ml重氮乙烷溶液。
將130g乳酸-乙醇酸共聚物(乳酸/乙醇酸＝50/50(摩爾％)，重均分子量約為5,800)溶于1,900ml的二氯甲烷中，攪拌，冷卻。在冰冷卻條件下，將上述重氮乙烷溶液逐滴加入，再于室溫攪拌2小時。將混合物放置過夜后，減壓蒸除溶劑；于室溫下將殘渣經(jīng)真空干燥，得131g乳酸-乙醇酸共聚物的乙酯。參考例3將1mg人生長激素(美國Biotechnology General公司產(chǎn))在0.9ml蒸餾水的溶液，與9.98，29.43，49.88，69.84，79.81或99.77μg乙酸鋅(＝水合物)在0.1ml蒸餾水的溶液混合。鋅原子與生長激素的摩爾比為1，3，5，7，8和10。在摩爾比為5時，約60％人生長激素沉淀出來，在摩爾比為7或更多時，幾乎100％人生長激素都沉淀出來。參考例4于70-80℃，將1g優(yōu)普拉德(leuprolide)乙酸酯(TAP-44)和157.5mg明膠，溶于1ml蒸餾水中。將21g乳酸-乙醇酸共聚物(由7.85g乳酸-乙醇酸共聚物溶于13.15g二氯甲烷制成，其中乳酸/乙醇酸為75/25，摩爾％，粘度為0.142至0.169cP)溶液，加入至上述溫?zé)岬乃芤褐?，其溫度比明膠水溶液的溫度稍高。將該混合物置于一個致密的勻漿器中乳化幾分鐘以上，得w/o型乳劑。將所得w/o型乳劑冷至10至20℃，倒入5000ml 0.1％(w/v)聚乙烯醇的水溶液中，其溶液的溫度調(diào)至10至20℃，將混合物用闊錐形混勻器乳化，得w/o/w型乳劑。將這種w/o/w型乳劑于室溫(15至30℃)攪拌，蒸去二氯甲烷，得固化的內(nèi)層w/o型乳劑，然后再以離心收集微膠囊。將這些微膠囊再分散于蒸餾水中，進一步離心，洗去過量的藥物和聚乙烯醇。將回收的微膠囊懸浮于少量蒸餾水中，將1.5g D-甘露醇加入并溶于該懸浮液之中。將所得的懸浮液減壓下冰凍干燥，得粉末狀微膠囊。
凍干后，將所得的粉末微膠囊進一步于50℃減壓干燥，即比在基質(zhì)成分乳酸-乙醇酸共聚物T mg溫度高3℃進行，共需24，48，96或120小時，得粉末狀緩釋微膠囊。例1將1ml乙酸鋅(二水合物)，(200mg/ml)和1ml 1N氫氧化鈉，加入至200mlα干擾素(含400億IU)水溶液之中；混勻后，將混合物于4℃放置過夜。于3,000rpm離心，收集不溶性的復(fù)合物，冰凍干燥，得約200mg干擾素α的鋅鹽粗品。
將上述200mgα干擾素鋅鹽粗品，加入至1.5g乳酸-乙醇酸共聚物(乳酸/乙醇酸之比為50/50，分子量為5,800，由Wako純化學(xué)工業(yè)公司生產(chǎn))和在參考例2中獲得的1.5g乳酸-乙醇酸共聚物的乙酯化產(chǎn)物，在4ml二氯甲烷中的溶液之中，再以均漿器(Polytron產(chǎn))攪拌約30秒鐘，得s/o型乳劑。將該乳液倒入預(yù)先調(diào)至18℃的700ml 0.1％(w/w)聚乙烯醇的水溶液之中(EG-40，由日本合成化學(xué)工業(yè)公司生產(chǎn))，再于一個闊錐形混勻器中以6,000 rpm攪拌，得s/o/w乳劑。將該乳劑于室溫攪拌3小時，使二氯甲烷揮發(fā)及油相固化。接下來于約2,000rpm(05PR-22，日立有限公司產(chǎn))離心，棄去上清液。將所得殘渣再一次分散于蒸餾水中，離心。收集微膠囊，再分散于含50mg D-甘露醇的少量蒸餾水中，將分散物凍干，得粉末狀微膠囊。例2將3.6g乳酸-乙醇酸共聚物(乳酸/乙醇酸為75/25，摩爾％，重均分子量13,585，數(shù)均分子量4,413，由Wako純化學(xué)工業(yè)公司生產(chǎn))溶于6.6g(5ml)二氯甲烷之中。將從參考例1中所獲得的420mg豬胰島素鋅鹽粗品(含200mg豬胰島素)分散于6.6g(5ml)二氯甲烷中。將上述兩種溶液混合，并置一均漿器(Dolytron)攪拌約10秒鐘，得s/o型乳劑。將該乳劑倒入預(yù)先調(diào)至18℃的800ml 0.1％(w/w)聚乙烯醇(EG-40，由日本合成化學(xué)工業(yè)公司生產(chǎn))水溶液中，再于一個闊錐形混勻器中于6,000rpm攪拌，得s/o/w乳劑。將該乳劑于室溫攪拌3小時，使二氯甲烷蒸發(fā)以及使油相固化。于約2,000rpm離心(05PR-22型，日立有限公司產(chǎn))后，棄去上清液。將殘渣再分散于蒸餾水中，離心。將收集得的微膠囊，再重新分散于含50mg D-甘露醇的少量蒸餾水中，將分散物冰凍干燥，得粉末狀微膠囊(約回收3g)。
為了測定所得微膠囊中胰島素的含量，將該粉末以含30％乙腈的50mM EDTA溶液振搖提取3小時，再以高效液相色譜法(HPLC)定量。結(jié)果表明，每100mg微膠囊中含6.2mg胰島素。例3將1g氯化鋅一點一點地加入至8ml紅細胞生長素注射溶液中(EspoTM注射液3000，由Sankyo公司生產(chǎn))(含12,000IU)。將混合物于室溫放置1小時。于3,000rpm離心，將沉淀物再分散于蒸餾水中，離心得沉淀。將少量蒸餾水加入到沉淀中，再凍干，得60mg紅細胞生成素鋅鹽粗品和白蛋白鋅鹽粗品混合物，為粉末狀。
將上述紅細胞生成素鋅鹽粗品和白蛋白鋅鹽粗品混合物60mg，加入至在1.5ml二氯甲烷中的0.5g乳酸-乙醇酸共聚物溶液(乳酸/乙醇酸之比為50/50，分子量14,000，由wako純化學(xué)工業(yè)公司生產(chǎn))，再用均漿器(Polytron)攪拌約30秒，得s/o型乳劑。將該乳劑按例1中所述的相同方式處理，得125mg粉狀微膠囊。例4將人生長因子(GenotropinTM16IU，由Sumitomo制藥公司生產(chǎn))溶于1ml蒸餾水中。將100μl氯化鋅水溶液(10mg/ml)加入至該溶于之中；將該混合物于室溫放置1小時，然后離心；將沉淀再分散于蒸餾水中，離心得沉淀。將少量蒸餾水加至該沉淀之中，再冰凍干燥，得粉末狀人生長激素鋅鹽粗品5.6mg。
將5.6mg上述人生長激素鋅鹽粗品，加入至0.5g乳酸-乙醇酸共聚物(乳酸/乙醇酸之比為75/25，分子量9,800，由Wako純化學(xué)工業(yè)公司生產(chǎn))在1.5ml二氯甲烷的溶液之中，再用一個均漿器(Polytron)攪拌約30秒，得s/o型乳劑。再按例1中相同的方法處理，得121mg粉末狀微膠囊。例5將10ml(含3×108IU)促粒細胞克隆因子(G-CSF)注射溶液(產(chǎn)于美國Amgen，商標(biāo)名Filgrastm Neupogen)，用氫氧化鈉稀水溶液中和后，加入1ml氯化鋅(10mg/ml)水溶液；將該混合物于室溫放置1小時。然后再離心；將沉淀再分散于蒸餾水中，離心得沉淀。將少量蒸餾水加入至沉淀之中，再冰凍干燥，得粉末狀促粒細胞克隆因子鋅鹽粗品4mg。
將4mg促粒細胞克隆因子鋅鹽粗品，加入至0.5g乳酸-乙醇酸共聚物(乳酸-乙醇酸之比為50/50，分子量8,000，由Wako純化學(xué)工業(yè)公司生產(chǎn))在1.5ml的二氯甲烷的溶液中，在用一個均漿器(Polytron)攪拌約30秒，得s/o型乳劑。將該乳劑按例1中所數(shù)的相同方法處理，得粉末狀微膠囊110mg。例6將5.21mg(26U/mg)人胰島素(人重組胰島素，購自Wako純化學(xué)工業(yè)公司)溶于0.63ml的57mM鹽酸水溶液中后，將0.35ml 0.05N氫氧化鈉水溶液加入，得幾乎為中性pH的人胰島素溶液。將0.2ml乙酸鋅(20mg/ml)水溶液加至上述溶液之中，于4℃放置過夜。然后將混合物于約3,000 rpm離心；將沉淀再分散于蒸餾水中，離心得沉淀。加入少量蒸餾水至該沉淀之中，再凍干，得11mg粉末狀人胰島素鋅鹽粗品。
將上述11mg人胰島素鋅鹽粗品，加入至0.5g乳酸-乙醇酸共聚物(乳酸/乙醇酸之比為50/50，分子量為6,000，購自Wako純化學(xué)工業(yè)公司)在1.5ml二氯甲烷的溶液之中，用一均漿器(Ploytron)攪拌約30秒，得s/o乳液。將該乳劑按例1中所述的相同方法處理，得粉末狀微膠囊105mg。比較例將將100mg無鋅人胰島素[鋅含量低于0.0001％(w/w)]加入至0.9g乳酸-乙醇酸共聚物[乳酸/乙醇酸之比為50/50，摩爾％，重均分子量為6,000，由Wako純化學(xué)工業(yè)公司生產(chǎn)]在1.5ml二氯甲烷中的溶液，再用一均漿器(Polytron)攪拌約10秒鐘，得s/o乳劑。將該乳劑按例1中所述的相同方法處理，得粉末狀微膠囊(470mg)。
為測定所獲得微膠囊中胰島素的含量，將粉末以含乙腈的50mMEDTA溶液提取振搖3小時，再用高效液相色譜(HPLC)法定量。結(jié)果表明，每100mg微膠囊含胰島素8.7mg。實驗例1
將例2中所得粉末狀微膠囊323mg，分散于1ml分散劑中，供注射用(每ml蒸餾水中溶解5mg羧甲基纖維素，1mg聚乙氧基醚80，和50mg甘露醇)。將所得分散液經(jīng)皮下注射至6周齡雄性大鼠的后背(每只大鼠注射胰島素約20mg)。注射后，于恒定時間間隔從尾部收采血樣，并以酶免疫試劑盒(EIA法)(由Sanko Junyaku公司生產(chǎn))測試血清中豬胰島素的濃度。注射后一周后，可測出血清中具有活性的豬胰島素。實驗例2將例4所得粉末狀微膠囊70mg，分散于0.5ml分散劑中，以供注射用(每升蒸餾水含5g羧甲基纖維素，2g聚乙氧基醚80，和50g甘露醇)。將所得分散液，經(jīng)皮下注射至6周齡雄性SD大鼠的后背(每只大鼠約注射3mg生長激素)。注射后，于恒定時間間隔，采集尾血樣，以放射免疫學(xué)試驗法測定血清中生長激素的濃度。注射一周以上，可測出血清中的活性生長激素。比較實驗例將上述比較例中所獲的粉末狀微膠囊154.7mg，分散于1.75ml分散劑之中，以供注射用(每ml蒸餾水中溶解5mg羧甲基纖維素，1mg聚乙氧基醚80，和50mg甘露醇)。將所得分散液經(jīng)皮下注射至6周齡雄性SD大鼠的后背(每只大鼠約注射44mg胰島素)。注射后，于恒定時間間隔，采集尾血樣，以酶免疫試驗法(EIA)測定血清中胰島素的濃度。注射后僅1天，即測出活性胰島素。工業(yè)實用性按照本發(fā)明，可提供一種能高效包含生理活性物質(zhì)，并抑制生理活性物質(zhì)首次突然崩解效應(yīng)的緩釋制劑。本發(fā)明中的緩釋制劑，在體內(nèi)給藥后，能釋放出生理活性物質(zhì)，同時能保留其生物活性。此外，緩釋制劑中的生理活性物質(zhì)能長期保持穩(wěn)定，而其生物活性不會喪失。
權(quán)利要求
1.一種緩釋制劑，包括(a)一種水溶性肽的水不溶性或水微溶性多價金屬鹽類的生理活性物質(zhì)，其中不包括內(nèi)皮素拮抗劑，以及(b)一種可生物降解的聚合物。
2.權(quán)利要求1的一種制劑，其中生理活性物質(zhì)是水溶性肽或其衍生物。
3.權(quán)利要求2的一種制劑，其中肽是一種激素，細胞因子，造血因子，生長因子，酶，可溶性或增溶化受體，抗體，含肽抗原，凝血因子或粘附分子。
4.權(quán)利要求2的一種制劑，其中肽是一種激素。
5.權(quán)利要求4的一種制劑，其中激素是一種生長激素。
6.權(quán)利要求4的一種制劑，其中激素是一種胰島素。
7.權(quán)利要求2的一種制劑，其中肽是一種細胞因子。
8.權(quán)利要求7的一種制劑，其中細胞因子是一種干擾素。
9.權(quán)利要求2的一種制劑，其中肽是一種生長因子。
10.權(quán)利要求1的一種制劑，其中多價金屬鹽是一種過渡金屬鹽。
11.權(quán)利要求1的一種制劑，其中多價金屬鹽是一種鋅鹽。
12.權(quán)利要求1的一種制劑，其中在20℃時多價金屬鹽對水的溶解度從約0至約0.1％(w/w)。
13.權(quán)利要求1的一種制劑，其中多價金屬鹽對水的溶解度約為0至約0.01％(w/w)。
14.權(quán)利要求1的一種制劑，其含有約0.1至約50％(w/w)多價金屬鹽。
15.權(quán)利要求1的一種制劑，其含有約1至約30％(w/w)多價金屬鹽。
16.權(quán)利要求1的一種制劑，其中可生物降解的聚合物是一種脂肪族聚酯。
17.權(quán)利要求16的一種制劑，其中脂肪族聚酯是乳酸與乙醇酸的聚合物。
18.權(quán)利要求17的一種制劑，其中乳酸與乙醇酸的組成比為100/0至約40/60(摩爾％)。
19.權(quán)利要求18的一種制劑，其中的組成比為約90/10至約45/55(摩爾％)。
20.權(quán)利要求17的一種制劑，其中聚合物的重均分子量為約3,000至約14,000。
21.權(quán)利要求17的一種制劑，其中聚合物的重均分子量為約3,000至約14,000。
22.權(quán)利要求16的一種制劑，其中脂肪族聚酯是一種乳酸的均聚物。
23.權(quán)利要求22的一種制劑，其中均聚物的重均分子量為約3,000至約20,000。
24.權(quán)利要求22的一種制劑，其中均聚物的重均分子量為約3,000至約14,000。
25.權(quán)利要求1的一種制劑，其中制劑是一種微膠囊。
26.權(quán)利要求25的一種制劑，其中微膠囊可供注射用。
27.權(quán)利要求1的一種制劑，它是一種可供注射的制劑。
28.水溶性肽的水不溶性或水微溶性金屬鹽類的生理活性物質(zhì)，其中不包括內(nèi)皮素拮抗劑，以及一種可生物降解的聚合物在制備緩釋制劑的應(yīng)用。
29.制備緩釋制劑的方法，包括將一種水溶性肽的水不溶性或水微溶性多價金屬鹽類的生理活性物質(zhì)，其中不包括內(nèi)皮素拮抗劑，分散于含有一種可生物降解的聚合物的油相之中，制備油包固體型乳劑，將該油包固體型乳劑加入至水相之中，制備水包油包固體型乳劑。然后再于水內(nèi)干燥該水包油包固體型乳劑。
全文摘要
一種緩釋制劑，它包含一種具有水溶性肽的水不溶性或水微溶性多價金屬鹽類的生理活性物質(zhì)，其中不包括內(nèi)皮素拮抗劑，以及包含一種具有生物可降解的高分子材料。本發(fā)明是一種緩釋制劑，該制劑很有效地合并了一種具有水溶性肽類的生理活性物質(zhì)，其中不包括內(nèi)皮素拮抗劑，并能抑制該水溶性肽類的生理活性物質(zhì)的首次突然崩解效應(yīng)，其中不包括內(nèi)皮素拮抗劑。本發(fā)明中的緩釋制劑經(jīng)體內(nèi)服用后能釋放水溶性肽類的生理活性物質(zhì)，其中不包括內(nèi)皮素拮抗劑，而同時能保留其生物活性。此外，在緩釋制劑中的水溶性肽類的生物活性物質(zhì)，其中不包括內(nèi)皮素拮抗劑，能長時間保持穩(wěn)定，而生物活性幾乎沒有喪失。
文檔編號A61K9/50GK1157562SQ9519496
公開日1997年8月20日 申請日期1995年9月6日 優(yōu)先權(quán)日1994年9月9日
發(fā)明者豬狩康孝, 山縣豐, 飯沼智, 岡田弘晃 申請人:武田藥品工業(yè)株式會社