本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體涉及藥物聯(lián)用在制備抗炎藥物中的應(yīng)用以及抗炎藥物組合物。

背景技術(shù)：

炎癥，就是平時(shí)人們所說的“發(fā)炎”，是機(jī)體對于刺激的一種防御反應(yīng)，表現(xiàn)為紅、腫、熱、痛和功能障礙?？寡姿幨怯糜谥委熃M織受到損傷后所發(fā)生的反應(yīng)—炎癥的藥物。目前常見的抗炎藥有兩大類：一類是甾體抗炎藥，即腎上腺皮質(zhì)所分泌的糖皮質(zhì)激素氫化可的松及其人工合成的衍生物。另一類是非甾體抗炎藥(nsaids，non-steroid-anti-inflammatorydrugs)，即醫(yī)療實(shí)踐中所指的解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥如阿司匹林、保泰松、塞來昔布等。

蟾酥是蟾蜍耳后腺及表皮腺體的分泌物，白色乳狀液體或淺黃色漿液，有毒。蟾酥提取漿液，干燥，上色，密封保存后可以入藥。具有解毒、鎮(zhèn)痛、開竅、抗腫瘤等多種功能而被廣泛應(yīng)用?，F(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)，蟾酥中含有大量的蟾蜍毒素類、甾體類以及生物堿類化學(xué)成分，也有報(bào)道一部分蟾蜍毒素類化合物具有抗炎作用，但要么一些化合物抗炎作用太弱，要么一些具有優(yōu)異抗炎作用的化合物毒性太強(qiáng)對人體損傷較大，所以導(dǎo)致蟾蜍毒素類化合物很難用于作為抗炎藥物使用。因此，以蟾蜍毒素類化合物為出發(fā)點(diǎn)，開發(fā)一種化學(xué)成分明確、高效、低毒的抗炎藥物具有廣闊的市場前景。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供一種抗炎藥物組合物。

本發(fā)明所要解決的上述技術(shù)問題，通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：

本發(fā)明首先提供蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精聯(lián)用在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。

優(yōu)選地，所述的蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精的重量比為1～5:1～4:1～2。

進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精的重量比為1～4:1～3:1。

更進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精的重量比為1.5～3:1～2:1。

本發(fā)明經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)研究表明，將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精聯(lián)用后能產(chǎn)生非常明顯的協(xié)同抗炎作用，且三者聯(lián)用后能夠相互減毒，實(shí)驗(yàn)表明其能有效的降低對細(xì)胞的毒性。因此，將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精三者組合后可以作為抗炎藥物使用。

本發(fā)明還提供一種抗炎藥物組合物，其包含蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精；所述的蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精的重量比為1～5:1～4:1～2。

優(yōu)選地，所述的蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精的重量比為1～4:1～3:1。

進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精的重量比為1.5～3:1～2:1。

優(yōu)選地，所述的抗炎藥物組合物還包含藥學(xué)上可接受的載體。

優(yōu)選地，所述的抗炎藥物組合物的劑型為液體注射劑、粉針劑、片劑、膠囊劑、軟膠囊、散劑、丸劑、口服液、膏劑、顆粒劑或敷料。

有益效果：本發(fā)明提供了一種全新組成的抗炎藥物組合物，組合物中蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精混合后能發(fā)揮協(xié)同抗炎作用，尤其是將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精按重量比1.5～3:1～2:1混合后其協(xié)同抗炎效果更明顯；此外，將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精三者混合后能夠發(fā)生相互減毒作用，實(shí)施例試驗(yàn)表明，三者混合后能明顯降低對細(xì)胞的毒性。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)一步解釋本發(fā)明，但實(shí)施例對本發(fā)明不做任何形式的限定。

實(shí)施例1蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精藥物聯(lián)用抗炎試驗(yàn)

取昆明種雄性小鼠160只，體重為20±2g，隨機(jī)分為空白對照組，陽性藥對照組(陽性藥為阿司匹林，給藥劑量為150mg/kg)，實(shí)驗(yàn)組1～14(給藥劑量為10mg/kg),將陽性對照藥以及實(shí)驗(yàn)組待測藥物加水配成溶液，進(jìn)行灌胃給藥，空白對照組給予生理鹽水，連續(xù)給藥5天，每天1次，末次給藥后1h于小鼠右耳涂抹二甲苯50μl致炎，左耳不做處理。1h后處死小鼠，沿耳廓基線剪下兩耳，用0.7cm打孔器在同一部位打成圓耳片，電子天平即時(shí)稱重，以左、右耳片重量之差作為腫脹度。

各實(shí)驗(yàn)組的用藥組成如下：

實(shí)驗(yàn)組1單獨(dú)使用蟾毒靈；

實(shí)驗(yàn)組2單獨(dú)使用酯蟾毒配基；

實(shí)驗(yàn)組3單獨(dú)使用遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組4使用重量比為2:1.5的蟾毒靈和酯蟾毒配基；

實(shí)驗(yàn)組5使用重量比為1.5:1的酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組6使用重量比為2:1的蟾毒靈和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組7使用重量比為2:1.5:1的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組8使用重量比為2:2:1的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組9使用重量比為2:1:1的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組10使用重量比為3:1.5:1的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組11使用重量比為3:1:1的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組12使用重量比為3:2:1的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組13使用重量比為1.5:1:1的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組14使用重量比為1.5:2:1的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組15使用重量比為4:2:1的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組16使用重量比為2:3:1的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組17使用重量比為5:3:1的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組18使用重量比為3:4:1的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組19使用重量比為1:1:2的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精；

實(shí)驗(yàn)組20使用重量比為1:2:2的蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精。

表1.蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精藥物聯(lián)用的抗炎試驗(yàn)結(jié)果

注：表示與空白對照組相比##表示p＜0.01，#表示p＜0.05

從表1數(shù)據(jù)可以看出，單獨(dú)使用蟾毒靈、酯蟾毒配基或遠(yuǎn)華蟾蜍精時(shí)，能夠抑制二甲苯所致的小鼠右耳腫脹，說明其具有一定的抗炎作用，但從實(shí)驗(yàn)組1～3的腫脹度可以看出，在本實(shí)驗(yàn)中，其腫脹度大于陽性對照藥阿司匹林，這說明在本實(shí)驗(yàn)中阿司匹林的抗炎效果要優(yōu)于蟾毒靈、酯蟾毒配基或遠(yuǎn)華蟾蜍精。

從實(shí)施例4～6的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出，當(dāng)蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精兩兩混合時(shí)，其腫脹度和單獨(dú)使用時(shí)相差不大，這說明蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精兩兩混合時(shí)，對于并不能提升其抗炎作用。

實(shí)施例7～20為蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精三者的混合，從實(shí)施例7～20的腫脹度數(shù)據(jù)可以看出，其腫脹度數(shù)據(jù)均小于阿司匹林的8.56mg的腫脹度，遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精單獨(dú)使用或任意二者的混合，這說明蟾毒靈、酯蟾毒配基和遠(yuǎn)華蟾蜍精三者的混合后三者之間能產(chǎn)生協(xié)同抗炎作用，使得抗炎效果得到了大幅提升。尤其是實(shí)施例7～14的，其腫脹度最小，均小于3.27mg，遠(yuǎn)遠(yuǎn)小阿司匹林的8.56mg的腫脹度，這說明當(dāng)蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精的重量比為1.5～3:1～2:1范圍時(shí)，其協(xié)同抗炎效果最好，在本實(shí)驗(yàn)中遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于陽性對照藥阿司匹林。

實(shí)施例2蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精聯(lián)用細(xì)胞毒性測試

將hep-2細(xì)胞培養(yǎng)在96孔培養(yǎng)板中，待單層細(xì)胞長好后，加入用維持液稀釋好的系列濃度樣品溶液100μl，在5％co2、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天；然后加入10μlmtt溶液，mtt溶液的濃度為5mg/ml，用緩沖溶液配置，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)；吸出樣品溶液，加入二甲亞砜，室溫下，將96孔板置于微空孔板振蕩器中振蕩10分鐘；用酶標(biāo)儀測定各孔的od值，測量波長為570nm，參比波長為630nm，計(jì)算樣品對細(xì)胞的半數(shù)致死毒性濃度(cc50)。每組設(shè)4個(gè)平衡孔，每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。計(jì)算結(jié)果，畫出曲線，求出半數(shù)毒性濃度(cc50)。

待測樣品分別為：酯蟾毒配基；蟾毒靈；遠(yuǎn)華蟾蜍精；蟾毒靈：酯蟾毒配基(2:1.5)；酯蟾毒配基：遠(yuǎn)華蟾蜍精(1.5:1)；蟾毒靈：遠(yuǎn)華蟾蜍精(2:1)；蟾毒靈：酯蟾毒配基：遠(yuǎn)華蟾蜍精(2:1.5:1)；蟾毒靈：酯蟾毒配基：遠(yuǎn)華蟾蜍精(2:1:1)；蟾毒靈：酯蟾毒配基：遠(yuǎn)華蟾蜍精(3:2:1)；蟾毒靈：酯蟾毒配基：遠(yuǎn)華蟾蜍精(1.5:2:1)；蟾毒靈：酯蟾毒配基：遠(yuǎn)華蟾蜍精(4:2:1)；蟾毒靈：酯蟾毒配基：遠(yuǎn)華蟾蜍精(5:3:1)；蟾毒靈：酯蟾毒配基：遠(yuǎn)華蟾蜍精(1:2:2)；上述比例為重量比。

表2.細(xì)胞毒性測試測試結(jié)果

從表2數(shù)據(jù)中可以看出，單獨(dú)使用蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精或二者的組合，其對細(xì)胞的cc50值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精三者的組合，這說明蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精三者的組合后能發(fā)生相互減毒作用，使得三者組合后的細(xì)胞毒性大幅降低；這也說明蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精三者的組合后使用可以降低藥物對人體的傷害，有利于用藥安全。

實(shí)施例3抗炎藥物組合物

將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精按重量比2:1.5:1混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成粉針劑。

實(shí)施例4抗炎藥物組合物

將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精按重量比3:2:1混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成粉針劑。

實(shí)施例5抗炎藥物組合物

將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精按重量比3:2:1混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成液體注射劑。

實(shí)施例6抗炎藥物組合物

將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精按重量比3:1:1混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成片劑。

實(shí)施例7抗炎藥物組合物

將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精按重量比4:2:1混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成膠囊劑。

實(shí)施例8抗炎藥物組合物

將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精按重量比4:3:1混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成散劑。

實(shí)施例9抗炎藥物組合物

將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精按重量比2:3:1混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成丸劑。

實(shí)施例10抗炎藥物組合物

將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精按重量比5:3:1混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成口服液。

實(shí)施例11抗炎藥物組合物

將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精按重量比1:1:2混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成膏劑。

實(shí)施例12抗炎藥物組合物

將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精按重量比1:2:2混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成顆粒劑。

實(shí)施例13抗炎藥物組合物

將蟾毒靈、酯蟾毒配基以及遠(yuǎn)華蟾蜍精按重量比5:1:2混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成敷料。