阿掏比克酸三唑基與1h?四氮唑基衍生物的組合物用于制備抗炎藥物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物在抗炎藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物、制備方法及其在制備抗炎藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物及其制備方法。藥理學(xué)實驗表明，本發(fā)明的阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物具有抗炎的作用，具有開發(fā)抗炎藥物的價值。
【專利說明】
阿掏比克酸三唑基與1H-四氮唑基衍生物的組合物用于制備 抗炎藥物
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 炎癥發(fā)生在局部，同時也可影響全身。局部臨床特征是紅、熱、腫、痛和功能障礙。 紅、熱是由于炎癥局部血管擴張、血流加快所致。腫是由于局部炎癥性充血、血流成分滲出 引起。研發(fā)具有抗炎作用的藥物對于緩解驗證、減輕痛苦有重要意義。
[0003] 炎癥的治療目前已有的藥物存在毒性大、安全性低的問題，從天然產(chǎn)物中尋找化 合物或先導(dǎo)化合物并進行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物有重要價 值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個2011年發(fā)表（Antonella Maggio et al ·， 2011.Artalbic acid，a sesquiterpene with an unusual skeleton from Artemisia alba( As teraceae) from Sicily .Tetrahedron Letters ,52(2011 )4543-4545)的化合物，我 們對化合物I進行了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合 物III和化合物IV制備了組合物并對該組合物抗炎癥活性進行了評價，其具有抗炎癥活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物 中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為70%和30%。
[0006]
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可以制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0008] 本發(fā)明的目的是提供組合物在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。所述的炎癥為無菌性炎 癥。
[0009] 本發(fā)明組合物在制備抗炎藥物中應(yīng)用的有益效果如下：
[0010] 首先證明了本發(fā)明組合物具有有效抗炎作用。采用了經(jīng)典的二甲苯所致的小鼠耳 腫脹模型以及大鼠瓊脂性足腫脹模型，觀察本發(fā)明組合物在一定時間內(nèi)對實驗動物的抗炎 作用。研究表明：
[0011] 1、本發(fā)明組合物對二甲苯所致的小鼠耳腫脹有明顯抑制作用。
[0012] 2、本發(fā)明組合物對大鼠瓊脂性足腫脹有明顯抑制作用。
[0013] 以下通過實施例對本發(fā)明作進一步詳細的說明，但本發(fā)明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實施方式】
[0014] 實施例1化合物Artalbic acid的制備
[0015] 化合物Artalbic acid(I)的制備方法參照Antonella Maggio等人發(fā)表的文獻 (Antonella Maggio et al.,2011.Artalbic acid,a sesquiterpene with an unusual skeleton from Artemisia alba(Asteraceae)from Sicily. Tetrahedron Letters ,52 (2011 )4543-4545)的方法。
[0016]
[0017] 實施例2 Artalbic acid的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0018] 將化合物I(266mg，l.OOmmol)溶于IOmL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0.088)，1，2-二溴乙燒(3.76(^，20.00_〇1)和61]1]^的50%氫氧化鈉溶液。混合物在40攝氏 度攪拌iehieh之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機相溶液。然 后對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌5次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去除 溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100:1.0，v/V)， 收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(272mg，73% )。
[0019] 1H NMR(500MHz,DMS0-d6)5ll.41(s,lH),6.06(s,lH),5.76(s,lH),4.99(s,lH), 4.71(s,1H),4.56(s,1H),3.86(s,2H),3.54(s,2H),2.65(s,1H),2.43(s,2H),2.33(s,2H), 2.10(s,lH),1.64(s,3H),1.54(s,lH),1.44(s,2H),0.95(s,3H).
[0020] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)S201.95(s),175.93(s),149.13(s),148.15(s),117.05 (s),109.43(s),81.86(s),70.27(s),57.68(s),41.26(s),39.07(s),38.86(s),35.69(s), 33.36(s),30.72(s),20.44(s),18.42(s).
[0021] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for Ci7H26BrO4:373.1014；found 373.1017.
[0022]
[0023] 實施例3 Artalbic acid的0-(三唑基）乙基衍生物（III)的合成 [0024] 將化合物II(187mg，0.5mmo 1)溶于25mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無水碳酸鉀(345mg， 2 · 5mmol)，鵬化鉀（84mg，0 · 5mmol)和 1，2，3-三氮挫（2760mg，40mmol)，混合物加熱回流3h。 反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有機相。依次用水和飽和 食鹽水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn) 物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100: l.〇，v/v)，收集淡黃色集中洗脫 帶即得到化合物III的淡黃色膠狀固體(124.5mg，69% )。
[0025] 1H NMR(500MHz,DMS0-d6)5l6.23(s,lH) ,7.99(d,J = 29.4Hz,2H) ,6.11(s,lH), 5.82(s,lH),4.76(d J=17.3Hz,2H),4.62(s,1H),4.24(s,1H),4.18(s,1H),3.84(s,2H), 2.70(s,lH),2.52(d J=16.3Hz,4H),2.02(s,lH),1.69(s,3H),1.62(s,2H),1.51(s,lH), 1.02(s,3H).
[0026] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)5201.95(s),175.95(s),149.17(s),148.18(s),136.99 (s),120.76(s),117.09(s),109.44(s),81.89(s),65.54(s),57.72(s),46.43(s),41.30 (s),39.08(s),38.89(s),35.71(s),30.77(s),20.46(s),18.43(s).
[0027] HRMS(ESI) :m/z[M+H].calcd for Ci9H28N3〇4:362.2080;found:362.2085〇
[0028]
[0029] 實施例4 Artalbic acid的0_(IH-四氮唑基）乙基衍生物的合成 [0030] 將化合物II(187mg，0.5mmo 1)溶于20mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無水碳酸鉀(345mg， 2 · 5mmo 1)，碘化鉀（84mg，0 · 5mmo 1)和IH-四氮唑（140 Img，20mmo 1)，混合物加熱回流5h。反應(yīng) 結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有機相。依次用水和飽和食鹽 水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。因為互 變異構(gòu)作用，在反應(yīng)條件下會生成IH-四氮唑基和2H-四氮唑基兩種取代產(chǎn)物。產(chǎn)物粗品用 硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮= 100:1.5，v/v)，收集黃色集中洗脫帶，再將洗脫 帶濃縮，用硅膠柱層析純化(流動相為:石油醚/丙酮=100: 〇. 5，v/v)，依次收集兩個淡黃色 的洗脫帶，濃縮前1個洗脫帶即得到化合物IV的淡黃色固體(41.6mg，23%)。
[0031] 1H NMR(500MHz，DMS0-d6)Sll.50(s，lH)，10.04(s，lH)，6.07(s，lH)，5.78(s，lH)， 4.69(d ,J=11.0Hz,2H) ,4.58(s, 1H) ,4.22(s , 1H) ,4.15(s, 1H), 3.84(s , 2H), 2.66(s, 1H), 2.52(s，2H)，2.45(s，2H)，2.20(s，lH)，1.65(d，J=8.0Hz，5H)，1.44(s，lH)，0.98(s，3H).
[0032] 13C NMR(125MHz，DMS0-d6)S201.92(s),175.93(s),149.14(s),148.15(s),145.18 (s) ,117.08(s) ,109.40(s),81.85(s),65.53(s),57.68(s),46.71(s),41.29(s),39.04 (s),38.85(s),35.70(s),30.73(s),20.42(s),18.42(s).
[0033] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for Ci8H27N4〇4:363.2032;found:363.2029〇
[0034]
[0035] 實施例5組合物抗炎藥效學(xué)研究
[0036] 試驗材料
[0037] 1.昆明(KM)種小鼠：雄性，6周，18.5-22.5g，由江蘇省實驗動物中心提供。
[0038] 2.大鼠(Wistar):雄性，體質(zhì)量140~160g，由江蘇省實驗動物中心提供。
[0039] 3.組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的70mg化合物III的粉末和研磨之后過 200目網(wǎng)的30mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到IOOmg組合 物，使用時用水溶解這I OOmg的組合物即得到組合物的溶液。
[0040]試驗方法
[0041 ] 1.灌胃組合物對小鼠耳部炎癥的作用:取體質(zhì)量18.5~22.5g健康雄性小鼠50只， 隨機分成5組，每組10只。分組為：組合物2.5mg · kg_\化合物III 2.5mg · kg_\化合物IV 2.5mg · kg'阿司匹林組(200mg · kg<)、空白對照組(生理鹽水）。各組分別灌胃給藥，連續(xù) 7d，第七天灌胃后lh，3組小鼠均在小鼠右耳前、后面均勻涂二甲苯0.02mL，制備耳廓炎癥模 型。Ih后后頸脫臼處死小鼠，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑8mm打孔器分別在兩耳的同一部 位打下圓耳片，稱重精確到O.OOOlg。立即用電子天平分別稱質(zhì)量，以左右兩耳質(zhì)量差作為 腫脹度，并計算其腫脹度。
[0042] 腫脹度=右耳片重一左耳片重
[0043] 2.灌胃組合物對大鼠瓊脂性足腫脹的作用：取體質(zhì)量140~160g健康雄性Wistar 大鼠40只，隨機分成5組。組合物2.5mg · kg-\化合物III 2.5mg · kg-\化合物IV 2.5mg · kg'阿司匹林組(200mg · kg^1)、空白對照組(生理鹽水）。分別灌胃給藥，連續(xù)7d，第七天灌 胃后lh，大鼠的右后足跎皮下注射10g/L瓊脂0.1 mL制備足腫急性炎癥模型，用大鼠足容量 測量儀測其右后足正常容積。致炎后l、5、8h分別測量各鼠右后足容積，并計算腫脹度。
[0044] 腫脹度=右后足容積一左后足容積
[0045] 試驗結(jié)果
[0046] 1、組合物對小鼠耳部炎癥的影響
[0047] 致炎后，各組小鼠右耳立刻出現(xiàn)高度紅腫現(xiàn)象。阿司匹林組和組合物組對二甲苯 所致的小鼠耳腫脹均有顯著抑制作用，而化合物III和化合物IV則對二甲苯所致的小鼠耳 腫脹沒有顯著抑制作用，結(jié)果見表1。
[0048] 表1組合物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響
[0050] 與模型組比較*Ρ〈0·01
[0051 ] 2、組合物對大鼠瓊脂性足腫脹的影響
[0052]注射瓊脂后，各組大鼠足爪均有一定程度的腫脹現(xiàn)象。在肉眼觀察下，模型組腫脹 發(fā)紅最明顯，阿司匹林組稍有腫脹無明顯發(fā)紅現(xiàn)象，組合物組有腫脹無明顯發(fā)紅現(xiàn)象。組合 物對大鼠足腫有顯著抑制作用，而化合物III和化合物IV則對大鼠足腫無顯著抑制作用， 見表2。
[0053]表2組合物對大鼠瓊脂性足趾腫脹度的影響
[0055] 與模型組比較*Ρ〈0·05
[0056] 結(jié)論:組合物對二甲苯所致的小鼠耳腫脹有明顯抑制作用；組合物對大鼠瓊脂性 足腫脹有明顯抑制作用。而化合物III和化合物IV則對二甲苯所致的小鼠耳腫脹無明顯抑 制作用;化合物III和化合物IV則對大鼠瓊脂性足腫脹無明顯抑制作用。組合物可以用于制 備抗炎藥物，化合物III和化合物IV不能用于制備抗炎藥物。
[0057]實施例6本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0058]取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機制成100片。
[0059] 實施例7本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0060] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物HI和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為70%和30%，2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分數(shù)分別為70%和30%充分混合。3. 如權(quán)利要求1所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述炎癥為無菌性炎 癥。5. 如權(quán)利要求4所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述無菌性炎癥為化 學(xué)品刺激引起的。6. 如權(quán)利要求5所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用，其特征為：所述化學(xué)品為二甲 苯。7. 如權(quán)利要求5所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述化學(xué)品為瓊脂。
【文檔編號】A61K31/4192GK106074508SQ201610347675
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年5月24日
【發(fā)明人】丁秋菊
【申請人】南京海澳斯生物醫(yī)藥科技有限公司