本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種免疫增強(qiáng)中藥組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
：微生物感染嚴(yán)重影響動物包括人類的健康。致病微生物在動物體內(nèi)繁殖會給動物帶來疾病，擾亂機(jī)體代謝，產(chǎn)生毒素等。殺菌類藥物能夠殺滅特定的病原微生物，但微生物對機(jī)體的破壞還主要需要機(jī)體自行恢復(fù)。消炎藥可以抗炎以促進(jìn)機(jī)體恢復(fù)健康，但一般不會增強(qiáng)機(jī)體自身的抵抗力和免疫力。因此，醫(yī)療保健領(lǐng)域，就需要免疫增強(qiáng)劑。免疫增強(qiáng)劑是指凡能通過非特異性途徑提高機(jī)體對抗原或微生物特異性反應(yīng)的物質(zhì)。有時能非特異性的改變或增強(qiáng)抗原物質(zhì)特異性免疫應(yīng)答和發(fā)揮輔助作用的佐劑，也可稱作免疫增強(qiáng)劑，如干擾素、白細(xì)胞介素等生物制劑等。一些疫苗具有良好的免疫特異性和較低的毒性，但免疫原性較差，不能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生足夠的免疫應(yīng)答，需要配合高效的免疫增強(qiáng)劑以增強(qiáng)其免疫原性或增強(qiáng)宿主對抗原的保護(hù)性應(yīng)答。免疫增強(qiáng)劑在臨床上常用于治療與免疫功能低下有關(guān)的疾病及免疫缺陷病。免疫增強(qiáng)劑也有利于增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫能力。常用的免疫增強(qiáng)劑有:氫氧化鋁、蜂膠、弗氏佐劑、維生素e、左旋咪唑、轉(zhuǎn)移因子、卡介苗、干擾素、短小棒狀桿菌、內(nèi)毒素、免疫核糖核酸、胸腺素等。這些免疫增強(qiáng)劑或多或少有一些副作用，目前也開發(fā)了一些副作用更小甚至未見副作用的中藥免疫佐劑，如四君子湯、補(bǔ)中益氣湯和四物湯、六味地黃湯、參附湯、十全大補(bǔ)湯、玉屏風(fēng)散、八珍湯等。真菌被大量用于抗生素的開發(fā)中，但目前的中藥免疫增強(qiáng)劑主要利用植物藥，很少見到利用真菌藥物的報道，更未見報道高效無副作用的臨床使用的真菌藥與植物藥配合的組合物的免疫增強(qiáng)劑。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種中藥組合物，所述中藥組合物的活性藥物原料包括：黨參和白禿馬勃。在一些實(shí)施方式中，所述中藥組合物的活性藥物原料還包括：黃芪、冬蟲夏草、枸杞和靈芝中的任一種。在一些實(shí)施方式中，所述中藥組合物的活性藥物原料還包括：黃芪和冬蟲夏草。在一些實(shí)施方式中，所述中藥組合物的活性藥物原料還包括：枸杞和靈芝。在一些實(shí)施方式中，所述藥物組合物為粉劑，所述粉劑的制備步驟為：真菌藥材在100℃烘箱中烘干；植物藥材和真菌藥材混合后粉碎；過100目篩。在一些實(shí)施方式中，所述活性藥物原料以等重量比例制備成所述粉劑。在一些實(shí)施方式中，所述劑型為合劑，所述合劑的制備步驟為：取中藥材，加水浸泡；第一次煮沸，過濾；濾渣加水，第二次煮沸，過濾；濾渣加水，第三次煮沸，過濾；合并濾液，加熱濃縮。在一些實(shí)施方式中，其中，黨參和白禿馬勃按照重量份10-15:10-15制備組合物；或黨參、白禿馬勃、黃芪和冬蟲夏草按照重量份8-10:12-15:10-12:5-12制備組合物；或黨參、白禿馬勃、黃芪、冬蟲夏草、枸杞和靈芝按照重量份8-12:12-18:15-18：15-20:8-10制備組合物。在不存在技術(shù)障礙的情況下，該組合物組分還可以制備成其他任何本領(lǐng)域常規(guī)的劑型，如片劑、丸劑、膠囊、膏劑等。本發(fā)明還提供了上述任一種中藥組合物在制備免疫增強(qiáng)藥物中的用途。本發(fā)明還提供了上述任一種中藥組合物在制備能夠通過特異性或非特異性提高igg、il-2、ifn-γ中任一種、任兩種或其三種濃度而治療、預(yù)防或改善的疾病的藥物中的用途。用本發(fā)明的組合物能夠有效地提升免疫抑制模型小鼠體內(nèi)igg、il-2和ifn-γ的濃度，能夠增強(qiáng)新城疫疫苗的抗體效價因此，該組合物能夠作為增強(qiáng)免疫力的中藥組合物。具體實(shí)施方式為了更好的解釋本發(fā)明的技術(shù)方案，下面詳細(xì)介紹本發(fā)明的實(shí)施例。以下實(shí)施例用于進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不應(yīng)理解為對本發(fā)明的固定或限制。若未特別指明，實(shí)施例中所用的技術(shù)特征可以替換為具有在不背離發(fā)明構(gòu)思前提下等同或相似功能或效果的其他本領(lǐng)域已知的技術(shù)特征。實(shí)施例1：中藥材的初步篩選實(shí)驗(yàn)動物：小鼠，雄性，健康昆明鼠。檢測項(xiàng)目與檢測方法：動物(包括人)的免疫系統(tǒng)主要有特異性免疫和非特異性免疫，其中特異性免疫中主要是b細(xì)胞支持的體液免疫和t細(xì)胞支持的細(xì)胞免疫，非特異性免疫中重要的是自然殺傷細(xì)胞(nk細(xì)胞)。b細(xì)胞分泌多種抗體，其中igg的含量最高，因此，本發(fā)明用igg的含量來評估體液免疫的情況。t細(xì)胞分泌多種白細(xì)胞介素，其中il-2是最重要的白細(xì)胞介素之一，因此，本發(fā)明用il-2的含量來評估細(xì)胞免疫的情況。nk細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子，其中ifn-γ參與多種生理過程，因此，本發(fā)明用ifn-γ的含量來評估非特異性免疫的情況。上述三種細(xì)胞因子按照如下方法進(jìn)行檢測。igg的檢測：abcam公司生產(chǎn)，小鼠iggelisa試劑盒(ab151276)，按照試劑盒的說明書操作。il-2：杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份有限公司，小鼠白介素2試劑盒mouseil-2elisaki，目錄號：70-ek2022/2，按照試劑盒的說明書操作。ifn-γ：上海滬震實(shí)業(yè)有限公司，小鼠γ干擾素(ifn-γ)檢測試劑盒，按照試劑盒的說明書操作。免疫抑制動物模型的準(zhǔn)備以及試驗(yàn)方法選擇45日齡健康雄性昆明鼠，以下每組均分別用:10只小鼠。每組均按照上述方法測定igg、il-2和ifn-γ的指標(biāo)。對照組1：未做任何處理，正常飼養(yǎng)的小鼠10只，在實(shí)驗(yàn)開始進(jìn)行igg、il-2和ifn-γ指標(biāo)測定，記錄平均值(注：以下該三種指標(biāo)值均為平均值)，作為空白對照。對照組2：用環(huán)磷酰胺(購自上海華聯(lián)制藥有限公司)處理制備免疫抑制小鼠模型。按照80mg/kg體重的劑量在第1、3、5天分別腹腔注射環(huán)磷酰胺，第8天取10只小鼠進(jìn)行igg、il-2和ifn-γ的指標(biāo)檢測，作為免疫抑制初期的對照。對照組3：其他步驟與對照組2相同，于首次注射環(huán)磷酰胺起第15天測定igg、il-2和ifn-γ的指標(biāo)，作為免疫抑制劑處理后機(jī)體自行恢復(fù)免疫功能的對照。測試各組的方法：在對照組2的基礎(chǔ)上，對于其他小鼠，從首次注射環(huán)磷酰胺起第8-14天分別給藥(即潛在的免疫增強(qiáng)劑)，每種測試均取10只小鼠，第15天測定igg、il-2和ifn-γ的指標(biāo)。挑選下面列出的10種植物來源中藥材，分別用中藥粉碎機(jī)粉碎，然后過100目篩，使用藥粉拌入飼料中，每天三次，每次50mg，連續(xù)飼喂7天。測試小鼠的三種指標(biāo)。本實(shí)施例所用中藥材分別為：肉桂、白術(shù)、甘草、金銀花、白芍、黨參、大黃、黃芪、枸杞、板藍(lán)根。挑選下面10種真菌藥材，采用整株菌體，分別在100℃烘箱中烘干3小時，用中藥粉碎機(jī)粉碎，然后過100目篩，使用藥粉拌入飼料中，每天三次，每次50mg，連續(xù)飼喂7天。測試小鼠的三種指標(biāo)。本實(shí)施例所用中藥材分別為：青霉菌、麥角、朱紅栓菌、茯苓、竹黃、靈芝、白禿馬勃、白靈菇、冬蟲夏草、釀酒酵母。上述各組測試的數(shù)據(jù)參見表1。表1組別igg(mg/ml)il-2(pg/ml)ifn-γ(pg/ml)對照18.3625.68450.28對照23.579.25183.82對照34.6012.54258.73植物藥：肉桂5.2923.35328.57白術(shù)5.0416.68461.89甘草5.7814.48289.64金銀花6.6018.45310.35白芍9.3713.38397.57黨參7.2727.45445.94大黃4.5822.91370.50黃芪6.3524.01479.63枸杞8.9726.08437.38板藍(lán)根8.2017.85430.25真菌藥：青霉菌7.7018.42363.52麥角7.2716.30348.49朱紅栓菌7.9224.84411.78茯苓8.8720.30373.63竹黃8.0118.15330.83靈芝9.0726.19377.45白禿馬勃6.9026.48389.05白靈菇6.4722.67358.78冬蟲夏草6.7319.91429.78釀酒酵母5.6214.43319.04本發(fā)明的目的在于篩選免疫增強(qiáng)劑，而不是針對具體免疫原的治療或預(yù)防制劑，因此，這里按照受到人工免疫抑制后反映非特異性免疫能力的ifn-γ濃度上升能力由大到小的順序?qū)⒏鱾€植物藥進(jìn)行排序：黃芪、白術(shù)、黨參、枸杞、板藍(lán)根、白芍、大黃、肉桂、金銀花、甘草。從表1中可以看出白術(shù)組反應(yīng)特異性免疫能力的igg和il-2上升的程度在這十種中藥材中位于后列，綜合各方面，對于單味藥，免疫增強(qiáng)的能力由大到小進(jìn)行下面的重新排序：黃芪、黨參、枸杞、白術(shù)、板藍(lán)根、白芍、大黃、肉桂、金銀花、甘草。與上述排序相似，按照ifn-γ濃度上升能力由大到小的順序?qū)⒏鱾€真菌藥進(jìn)行排序：冬蟲夏草、朱紅栓菌、白禿馬勃、靈芝、茯苓、青霉菌、白靈菇、麥角、竹黃、釀酒酵母。實(shí)施例2：中藥組方根據(jù)表1所示的數(shù)據(jù)，植物藥與真菌藥各取前三味進(jìn)行組方，各取一味藥組成九個藥方。下面采用與實(shí)施例1平行的實(shí)驗(yàn)方法，僅僅所用中藥是組合物，其中每種中藥每次飼喂中，各種成分均為50mg，其他方法和條件與實(shí)施例1中的相同。具體組方的成分如下所示：上述各組測試的數(shù)據(jù)參見表2。相關(guān)的測試數(shù)據(jù)參見表2。為了方便觀察與比較。表2中列出了表1中的對照和單味藥的數(shù)據(jù)。表2組別igg(mg/ml)il-2(pg/ml)ifn-γ(pg/ml)對照18.3625.68450.28對照23.579.25183.82對照34.6012.54258.73黃芪6.3524.01479.63黨參7.2727.45445.94枸杞8.9726.08437.38冬蟲夏草6.7319.91429.78朱紅栓菌7.9224.84411.78白禿馬勃6.9026.48389.05黃芪+冬蟲夏草8.4028.46530.31黃芪+朱紅栓菌7.3827.95490.25黃芪+白禿馬勃7.2325.01523.86黨參+冬蟲夏草9.3242.34460.45黨參+朱紅栓菌11.0327.37478.23黨參+白禿馬勃10.0338.42597.24枸杞+冬蟲夏草12.0427.03453.07枸杞+朱紅栓菌7.6225.06402.47枸杞+白禿馬勃9.3827.20421.39從表2的數(shù)據(jù)中可以看出：枸杞+冬蟲夏草組合(組合1)igg濃度上升最多；黨參+冬蟲夏草組合(組合2)il-2濃度上升最多；黨參+白禿馬勃組合(組合3)ifn-γ濃度上升最多?？紤]到組合3的ifn-γ濃度上升幅度明顯大于組合1和組合2，而組合3僅il-2濃度略低于組合2，igg濃度略低于組合1。因此，認(rèn)為組合組合3的效果是最好的。基于表2的數(shù)據(jù)可知，黨參+白禿馬勃組合的組方是綜合免疫增強(qiáng)效果最好的免疫增強(qiáng)組合物。實(shí)施例3：中藥組方黨參+白禿馬勃作為本發(fā)明植物藥和真菌藥組方的基本藥物組方，接下來嘗試在此基礎(chǔ)上添加其他中藥材料的中藥組合物。測試方法與實(shí)施例2相同，僅所用藥材原料不同。在黨參+白禿馬勃的基礎(chǔ)上分別添加其他效果最好的前三味植物藥和前三味真菌藥。試驗(yàn)結(jié)果見表3。表3組別igg(mg/ml)il-2(pg/ml)ifn-γ(pg/ml)對照18.3625.68450.28對照23.579.25183.82對照34.6012.54258.73黨參+白禿馬勃10.0338.42597.24黨參+白禿馬勃+黃芪13.2143.26647.32黨參+白禿馬勃+枸杞13.9040.97637.29黨參+白禿馬勃+白術(shù)11.3040.35603.23黨參+白禿馬勃+冬蟲夏草13.6840.09630.25黨參+白禿馬勃+朱紅栓菌10.2736.35487.36黨參+白禿馬勃+靈芝13.0742.34615.32通過表3的數(shù)據(jù)可以看出，相比黨參+白禿馬勃的基礎(chǔ)組方，黨參+白禿馬勃+白術(shù)對三項(xiàng)指標(biāo)的影響不明顯，黨參+白禿馬勃+朱紅栓菌僅igg略有上升，因此，該兩個組方舍棄不再考慮。實(shí)施例4中藥組方通過表3的數(shù)據(jù)可知，在添加植物藥的其他組方中，添加黃芪比添加枸杞的效果更好；在添加真菌的其他組方中，添加冬蟲夏草比添加靈芝的效果更好。本實(shí)施例在其基礎(chǔ)組方中再添加一種植物藥和一種真菌藥，黨參+白禿馬勃+黃芪+冬蟲夏草的第二組方，在此基礎(chǔ)上分別及結(jié)合添加枸杞和靈芝，進(jìn)一步測試免疫增強(qiáng)效果。測試方法與實(shí)施例2相同，僅所用藥材原料不同。試驗(yàn)結(jié)果見表4。表4從表4的數(shù)據(jù)可以看出，黨參+白禿馬勃+黃芪+冬蟲夏草相對于黨參+白禿馬勃三種指標(biāo)具有明顯的上升，但黨參+白禿馬勃+黃芪+冬蟲夏草在添加一或兩種藥材則該三項(xiàng)指標(biāo)上升并不明顯。因此，沒有必要再嘗試添加更多的藥材。另一方面，免疫分子過多對機(jī)體是有害的，比如過敏反應(yīng)經(jīng)常ige過多相關(guān)。這也可能體現(xiàn)出中藥對機(jī)體免疫能力的調(diào)節(jié)，不至于使免疫反應(yīng)能力過強(qiáng)。本發(fā)明將黨參+白禿馬勃稱為組方1；將黨參+白禿馬勃+黃芪+冬蟲夏草稱為組方2；將黨參+白禿馬勃+黃芪+冬蟲夏草+枸杞+靈芝稱為組方3。實(shí)施例5：免疫增強(qiáng)試驗(yàn)動物實(shí)驗(yàn)：海蘭白雞，雄性。取14日齡180只，隨機(jī)分12組，每組15只，空白組常規(guī)飼養(yǎng)，不接種疫苗也不使用中藥。其他各組用新城疫iv苗滴鼻、點(diǎn)眼免疫，3羽份/羽。對照組1僅接種疫苗不使用中藥。其他組所用中藥配方見下面的記載。使用中藥組的用藥方法為：每日每羽飲水中混入2ml相應(yīng)中藥原液，連續(xù)引用20天。在試驗(yàn)的第7、14、21天分別羽翼下靜脈才血，用β-微量法檢測nd-hi抗體效價，結(jié)果參見表5?？瞻捉M不使用中藥，正常飼喂，不接種疫苗對照組1不使用中藥，正常飼喂。對照組2取甘草30g，其他步驟與組方1-1相同。組方1-1合劑的制備：取黨參10g，白禿馬勃10g，加入500ml水浸泡1小時，煮沸1.5小時，過濾后藥渣加入500ml水煮沸1.5小時，過濾后藥渣再加入500ml水煮沸1.5小時，合并三次濾液。將上述合并的濾液加熱濃縮至200ml，形成中藥原液。組方1-2合劑的制備：取黨參10g，白禿馬勃15g，其他步驟與組方1-1相同。組方1-3合劑的制備：取黨參15g，白禿馬勃10g，其他步驟與組方1-1相同。組方2-1合劑的制備：取黨參10g，白禿馬勃15g，黃芪12g，冬蟲夏草8g，其他步驟與組方1-1相同。組方2-2合劑的制備：取黨參8g，白禿馬勃15g，黃芪10g，冬蟲夏草12g，其他步驟與組方1-1相同。組方2-3合劑的制備：取黨參10g，白禿馬勃12g，黃芪12g，冬蟲夏草5g，其他步驟與組方1-1相同。組方3-1合劑的制備：取黨參12g，白禿馬勃15g，黃芪18g，冬蟲夏草12g，枸杞20g，靈芝10g，其他步驟與組方1-1相同。組方4-2合劑的制備：取黨參10g，白禿馬勃18g，黃芪15g，冬蟲夏草10g，枸杞:15g，靈芝10g，其他步驟與組方1-1相同。組方4-3合劑的制備：取黨參8g，白禿馬勃12g，黃芪18g，冬蟲夏草12g，枸杞20g，靈芝8g，其他步驟與組方1-1相同。表5各組血清抗體效價統(tǒng)計(jì)表(log2)組別d7d14d21空白組2.432.121.93對照組13.764.715.98對照組23.854.966.83組方1-14.817.758.42組方1-24.767.788.52組方1-34.927.668.60組方2-15.488.218.64組方2-25.618.328.93組方2-35.488.128.75組方3-15.858.679.02組方3-25.758.608.87組方3-36.018.778.92從表5的數(shù)據(jù)可以看出，上述九個組方均能提高nd-hi抗體效價。黨參和白禿馬勃兩味藥組成的組合物就能夠相對于空白組和對照組提高h(yuǎn)i抗體效價，增強(qiáng)動物免疫力，黨參，白禿馬勃，黃芪，冬蟲夏草四味藥的免疫增強(qiáng)能力明顯增加，黨參，白禿馬勃，黃芪，冬蟲夏草，枸杞，靈芝六味藥比上述四味藥的免疫增強(qiáng)能力略有增加。綜上所述，本發(fā)明的中藥組合物具有免疫增強(qiáng)的效果。上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，基于本發(fā)明的構(gòu)思所作出的等同變換及對本發(fā)明的各個技術(shù)方案顯而易見的改進(jìn)，均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁12