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RGD及PEG共修飾的PAMAM樹狀大分子載三氧化二砷遞藥系統(tǒng)的制備方法與流程

文檔序號:11871436閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種RGD及PEG共修飾的PAMAM樹狀大分子載三氧化二砷遞藥系統(tǒng)的制備方法,其特征在于所述方法包括以下步驟:

(1)制作RGD-PEG-PAMAM:

以RGD環(huán)肽的巰基與雙功能聚乙二醇MAL-PEG-NHS的馬來酰亞胺基反應(yīng),生成RGD多肽修飾的聚乙二醇羥基琥珀酰亞胺活化酯RGD-PEG-NHS,然后與PAMAM的表面氨基反應(yīng),生成RGD-PEG修飾的PAMAM,記為RGD-PEG-PAMAM;

(2)制作RGD-PEG-PAMAM-mPEG:

將RGD-PEG-PAMAM與mPEG-NHS反應(yīng),使RGD-PEG-PAMAM在步驟(1)未反應(yīng)完的多余氨基進一步被PEG修飾,制得RGD-PEG-PAMAM-mPEG;

(3)三氧化二砷溶液與RGD-PEG-PAMAM-mPEG反應(yīng),制得負載有三氧化二砷的RGD-PEG-PAMAM-mPEG,即RGD及PEG共修飾的PAMAM樹狀大分子載三氧化二砷遞藥系統(tǒng)。

2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述RGD為RGDyC,RGDyK,RGDfC,RGDfK等含有RGD序列的環(huán)狀多肽,其結(jié)構(gòu)中含有游離巰基。

3.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述雙功能聚乙二醇MAL-PEG-NHS為分子量為1000-10000Da的雙功能聚乙二醇,其一端含有馬來酰亞胺基,另一端含有羥基琥珀酰亞胺活化酯。

4.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述PAMAM為整數(shù)代的聚酰胺-胺樹枝狀聚合物;所述mPEG-NHS為分子量為1000-10000Da單官能團的甲氧基聚乙二醇,一端為羥基琥珀酰亞胺活化酯。

5.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述步驟(1)按以下步驟進行:

將RGD溶于pH6.0的醋酸-醋酸鈉緩沖液中,作為溶液A,將PAMAM溶于pH9.2的硼砂-氫氧化鈉緩沖液中,作為溶液B,向溶液A中加入MAL-PEG-NHS,渦旋30s后,全部反應(yīng)液加入溶液B中,室溫下反應(yīng)8~20小時;調(diào)節(jié)反應(yīng)液pH值為7.0,加入β-巰基乙醇終止未反應(yīng)完全的馬來酰亞胺基團,超濾、離心、冷凍干燥,制得RGD-PEG-PAMAM;

所述PAMAM、RGD、MAL-PEG-NHS的物質(zhì)的量之比為1:20~50:20~50。

6.如權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于所述PAMAM、RGD、MAL-PEG-NHS的物質(zhì)的量之比為1:45:45。

7.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述步驟(2)按以下步驟進行:

將RGD-PEG-PAMAM復溶于pH值8.0的磷酸鹽緩沖液中,得到溶液C,向溶液C加入mPEG-NHS,使PAMAM與mPEG-NHS的物質(zhì)的量之比為1:60~70,室溫反應(yīng)40~60h,超濾、離心,除去未反應(yīng)的PEG,冷凍干燥,制得RGDyC-PEG-PAMAM-mPEG。

8.如權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于所述PAMAM與mPEG-NHS的物質(zhì)的量之比為1:64。

9.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述步驟(3)按以下步驟進行:

稱取RGD-PEG-PAMAM-mPEG溶于超純水中,得到溶液D,向溶液D中加入三氧化二砷溶液,室溫攪拌12~30小時,所得反應(yīng)液超濾除去未負載的游離的三氧化二砷,冷凍干燥,制得RGD及PEG共修飾的PAMAM樹狀大分子載三氧化二砷;所述RGD-PEG-PAMAM-mPEG、三氧化二砷的質(zhì)量用量比10:1~3。

10.如權(quán)利要求1~9之一所述的方法制得的RGD及PEG共修飾的PAMAM樹狀大分子載三氧化二砷遞藥系統(tǒng)。

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