本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術領域：
，特別涉及聚普瑞鋅在制備根除幽門螺旋桿菌藥物中的應用。
背景技術：
：幽門螺旋桿菌是一種單極、多鞭毛、末端鈍圓、螺旋形彎曲的革蘭染色陰性菌，通常寄生于人胃小凹的黏液層內，依靠其尿素酶分解產生的氨來中和胃酸，從而在胃內定植。幽門螺旋桿菌分泌兩種毒素CagA和VacA，其中CagA能夠使與細胞增殖有關的蛋白質NFAT活性化，促使細胞異常增殖，并引起一系列炎癥反應，是急、慢性胃炎以及胃、十二指腸潰瘍的主要致病原因，與胃癌的發(fā)生也密切相關。目前，臨床上普遍采用國際標準三聯(lián)療法對幽門螺旋桿菌感染進行治療，即將鉍、甲硝唑與四環(huán)素或氨芐青霉素聯(lián)用，幽門螺旋桿菌根除率為50-90％，該療法副作用大，同時可能導致幽門螺旋桿菌耐藥株的產生，從而進一步增加治療難度，另外，幽門螺旋桿菌在抗生素和體內不利因素的誘導下可形成細胞壁缺陷的L型，這也是臨床上幽門螺旋桿菌感染治愈后易復發(fā)的主要因素之一。因此，尋找一種更加高效、安全的抗幽門螺旋桿菌的新藥物十分必要。聚普瑞鋅是鋅與L-肌肽的螯合物，L-肌肽是鋅理想的轉運體，能夠增加鋅在體內的吸收與代謝，它兼具抗炎和抗氧化的功能，對酒精，醋酸，鹽酸和非甾體抗炎藥等引起胃黏膜損傷具有顯著的保護和修復作用?，F有技術公開了許多聚普瑞鋅治療胃酸失衡等原因導致的消化道潰瘍的技術，如CN201310227401.6公開了一種聚普瑞鋅化合物，通過粘附在粘膜受損處，提高粘膜防御作用的功效。但是現有技術并沒有公開聚普瑞鋅在抑制和根除幽門螺旋桿菌上的用途。技術實現要素：本發(fā)明提供了聚普瑞鋅在制備根除幽門螺旋桿菌藥物中的應用。進一步的，所述藥物用于治療幽門螺旋桿菌引起的疾病。進一步的，所述疾病包括胃炎、胃潰瘍、胃癌、十二指腸炎、十二指腸潰瘍和十二指腸癌。本發(fā)明還提供了一種制劑，包括聚普瑞鋅和藥用載體。進一步的，所述制劑包括但不限于膠囊劑、顆粒劑、片劑、口服液或微丸制劑。進一步的，所述制劑優(yōu)選為片劑，所述片劑主要由重量份數比為1：14-20的聚普瑞鋅和藥用載體制備而成。進一步的，所述藥用載體包括如下重量份數的各成分：采用預凝膠淀粉、普魯蘭多糖、羥乙基甲基纖維素、聚甲基丙烯酸樹脂、乳糖醇、酒石酸鉀鈉和聚普瑞鋅一起制備的片劑可以延長其在消化道內的作用時間，提高治療效果。進一步的，所述藥用載體還包括如下重量份數的各成分：淀粉甘醇酸鈉0.6-1甲殼糖0.3-0.8煙酰胺0.1-0.2。在片劑中加入淀粉甘醇酸鈉、甲殼糖和煙酰胺可進一步延長片劑在消化道內的作用時間，延長片劑治療的有效時長，減少其中一個成分，或變化其中一個成分，片劑的有效作用時間變短。進一步的，所述藥用載體還包括如下重量份數的各成分：蔗糖單月桂酸酯0.2-0.4水楊酸甲酯鈉0.05-0.1。在片劑中加入蔗糖單月桂酸酯和水楊酸甲酯鈉可顯著提高片劑的穩(wěn)定性，減少其中一個成分，或變化其中一個成分，片劑的穩(wěn)定性下降。本發(fā)明還提供一種片劑的制備方法，包括如下步驟：S1.將普魯蘭多糖和羥乙基甲基纖維素溶解于8倍質量的蒸餾水中制得混合溶液；S2.將聚普瑞鋅、預凝膠淀粉與聚甲基丙烯酸樹脂混合均勻后與混合溶液混合均勻中，再經過制粒、干燥、整粒后制成藥物顆粒；S4.將藥物顆粒與乳糖醇、酒石酸鉀鈉加入混合機中混合10分鐘，再置于壓片機中壓片即可制得片劑。本發(fā)明提供了聚普瑞鋅在制備根除幽門螺旋桿菌藥物中的應用，臨床試驗證實，聚普瑞鋅具有很強的抗幽門螺旋桿菌活性，可以有效抑制幽門螺旋桿菌的活性，且其殺菌效能與藥物濃度成正相關，可用于制備用于治療幽門螺旋桿菌密切相關的胃炎、胃潰瘍、胃癌、十二指腸炎、十二指腸潰瘍和十二指腸癌等疾病的相關藥物。具體實施方式實施例1一種片劑，制備100粒該片劑所需各成分的重量如下：實施例2一種片劑，制備100粒該片劑所需各成分的重量如下：所述片劑的制備方法包括如下步驟：S1.將普魯蘭多糖和羥乙基甲基纖維素溶解于8倍質量的蒸餾水中制得混合溶液；S2.將聚普瑞鋅、預凝膠淀粉與聚甲基丙烯酸樹脂混合均勻后與混合溶液混合均勻中，再經過制粒、干燥、整粒后制成藥物顆粒；S4.將藥物顆粒與乳糖醇、酒石酸鉀鈉加入混合機中混合10分鐘，再置于壓片機中壓片即可制得片劑。實施例3一種片劑，制備100粒該片劑所需各成分的重量如下：實施例4一種片劑，制備100粒該片劑所需各成分的重量如下：實施例5一種片劑，制備100粒該片劑所需各成分的重量如下：實施例6一種片劑，制備100粒該片劑所需各成分的重量如下：實施例7一種片劑，制備100粒該片劑所需各成分的重量如下：對照例1一種片劑，制備100粒該片劑所需各成分的重量如下：對照例2一種片劑，制備100粒該片劑所需各成分的重量如下：對照例3一種片劑，制備100粒該片劑所需各成分的重量如下：對照例4一種片劑，制備100粒該片劑所需各成分的重量如下：對照例5一種片劑，制備100粒該片劑所需各成分的重量如下：對照例6一種片劑，制備100粒該片劑所需各成分的重量如下：下述試驗中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法；所用的試劑、生物材料等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。聚普瑞鋅治療或根除幽門螺旋桿菌的效果試驗1.供試菌株幽門螺旋桿菌標準菌株選擇NCTC11637，將NCTC11637均勻接種于含有8％脫纖維羊血的哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基中，采用抽氣換氣法，在37℃、微氧(5％O2、10％CO2和85％N2)的條件下培養(yǎng)2-3d，然后收集細菌，經涂片革蘭氏染色、氧化酶、觸酶和尿素酶鑒定為陽性后，再次涂布于含有8％脫纖維羊血的哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基，在37℃、微氧(5％O2、10％CO2和85％N2)的條件下培養(yǎng)2-3d，所得菌株作為標準菌株；幽門螺旋桿菌臨床菌株采取自幽門螺旋桿菌陽性的慢性胃炎或消化性潰瘍患者的胃黏膜組織，充分均漿，均勻涂布于幽門螺旋桿菌選擇性培養(yǎng)基，于37℃微需氧環(huán)境下培養(yǎng)3-5d，然后收集細菌，經涂片革蘭氏染色，氧化酶、觸酶和尿素酶鑒定為陽性后，再次涂布于含有8％脫纖維羊血的哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基，在37℃、微氧(5％O2、10％CO2和85％N2)的條件下培養(yǎng)2-3d，所得菌株作為臨床菌株。2.最低抑菌濃度的測定配置聚普瑞鋅濃度分別為10.0、8.0、6.0、5.0、4.0、3.5、3.0、2.5、2.0、1.5、1.0、0.5和0.25μg/mL的含藥瓊脂平皿；分別將幽門螺旋桿菌標準菌株和5組幽門螺旋桿菌臨床菌株(Hp01、Hp02、Hp03、Hp04、Hp05)采用腦心脊液稀釋至3×108cfu/ml，取稀釋后的菌液1μL分別接種于上述藥物濃度的含藥瓊脂平皿中，并同時接種于無藥培養(yǎng)基作為對照；接種后在37℃、微氧(5％O2、10％CO2和85％N2)的條件下培養(yǎng)72h后觀察結果，完全不出現菌落的瓊脂平皿的聚普瑞鋅濃度為聚普瑞鋅對該菌株的最低抑菌濃度(MIC)，結果見表1。表1聚普瑞鋅對幽門螺旋桿菌標準菌株和臨床菌株的MIC值(μg/mL)由上述結果可知：聚普瑞鋅對幽門螺旋桿菌的標準菌株NCTC11637和臨床菌株均具有顯著的抑菌效果，對幽門螺旋桿菌的標準菌株NCTC11637和臨床菌株的MIC值均為0.5μg/mL，其有效劑量低于臨床用藥劑量。3.殺菌效果評價設置空白對照組試驗和3組藥物殺菌試驗(0.5MIC藥物濃度組、1MIC藥物濃度組、2MIC藥物濃度組)，空白對照組是直接采用體積比為9:1的布氏肉湯與胎牛血清的混合液作為受試溶液，0.5MIC藥物濃度組、1MIC藥物濃度組、2MIC藥物濃度組是分別將聚普瑞鋅加入體積比為9:1的布氏肉湯與胎牛血清的混合液中配制成不同藥物濃度的受試溶液；收取新鮮培養(yǎng)的幽門螺旋桿菌的標準菌株NCTC11637于體積比為9:1的布氏肉湯與胎牛血清混合液中制成濃度為1×106cfu/ml的菌懸液，4組試驗的受試溶液中均加入菌懸液100μL，混勻后置于恒溫振搖床在37℃、微氧(5％O2、10％CO2和85％N2)的條件下振搖培養(yǎng)；準備若干布氏肉湯稀釋試管，分別于0、4、8、24h取4組試驗的菌液的母液100μL經數倍稀釋后，取100μL稀釋液接種于哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)皿中，置于恒溫培養(yǎng)箱，于37℃、微氧(5％O2、10％CO2和85％N2)的環(huán)境下培養(yǎng)72h后做菌落計數并按照稀釋倍數折算得出各個時間點的菌落數，計算出不同濃度的聚普瑞鋅在各個時間點的殺菌率，殺菌率＝(空白對照組菌落數-藥物組菌落數)/空白對照組菌落數×100％，結果見表2。表2不同濃度的聚普瑞鋅在各個時間點的殺菌率(％)時間(h)0.5MIC1MIC2MIC494.2299.92100898.3510010024100100100由上述結果可知，聚普瑞鋅對幽門螺旋桿菌具有顯著的殺菌作用，且殺菌效率與藥物濃度成正比，藥物濃度越大，起效越快，殺菌效果越好，當藥物濃度為0.5MIC值時，24h的殺菌率可以達到100％；當藥物濃度為1MIC值時，8h的殺菌率已經達到100％；當藥物濃度為2MIC值時，4h的殺菌率就已經達到100％。聚普瑞鋅與其他治療幽門螺旋桿菌的藥物在根除幽門螺旋桿菌效果上的比較試驗收取新鮮培養(yǎng)的幽門螺旋桿菌的標準菌株NCTC11637，于體積比為9:1的布氏肉湯與胎牛血清混合液中制成濃度為1×106cfu/ml的菌懸液，設置試驗1-4和對比試驗，試驗1-4分別將聚普瑞鋅、四環(huán)素、氨芐青霉素、甲硝銼按照0.5μg/mL的濃度加入菌懸液中，對比試驗的菌懸液中不加入治療藥物，將各組試驗的菌液置于恒溫振搖床在37℃、微氧(5％O2、10％CO2和85％N2)的條件下振搖培養(yǎng)；準備若干布氏肉湯稀釋試管，分別于0、4、8、24h取4組試驗的菌液的母液100μL經數倍稀釋后，取100μL稀釋液接種于哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)皿中，置于恒溫培養(yǎng)箱，于37℃、微氧(5％O2、10％CO2和85％N2)的環(huán)境下培養(yǎng)72h后做菌落計數并按照稀釋倍數折算得出各個時間點的菌落數，計算出不同藥物在各個時間點的殺菌率，殺菌率＝(對比試驗組菌落數-試驗組菌落數)/對比試驗組菌落數×100％，結果見表3。表3不同藥物在各個時間點的殺菌率(％)時間(h)聚普瑞鋅四環(huán)素氨芐青霉素甲硝銼499.386.191.763.2810095.297.580.82410099.410089.3由上述結果可知，聚普瑞鋅具有很強的抗幽門螺旋桿菌活性，在相同的藥物濃度條件下，聚普瑞鋅抑制幽門螺旋桿菌活性的能力強于四環(huán)素、氨芐青霉素和甲硝銼。片劑體外釋放度評價分別取本發(fā)明實施例3、實施例5、對照例1-4的片劑，置藥物溶出儀中，于1h、2h、4h、6h、12h、16h、24h分別取樣，用高效液相色譜法檢測片劑溶出百分率，并計算片劑的累積釋放百分率，結果見表4。表4片劑的累積釋放百分率(％)試驗結果時間(h)實施例3實施例6對照例1對照例2對照例3對照例400000001412047523640268336975606548748939882856925810010090921210072----10010016--90--------24--100--------由上述試驗結果可知，本發(fā)明實施例3提供的片劑可以持續(xù)在12h內緩慢釋放，而對照例1和對照例2提供的片劑在6h內就完全釋放完畢，說明本發(fā)明提供的片劑可延長其在消化道內的作用時間，提高治療效果。本發(fā)明實施例5提供的片劑可以在24h內持續(xù)緩慢釋放，而實施例3、對照例3和對照例4提供的片劑在12h內就完全釋放完畢，說明在片劑中加入淀粉甘醇酸鈉、甲殼糖和煙酰胺可進一步延長片劑在消化道內的作用時間，延長片劑治療的有效時長，減少其中一個成分，或變化其中一個成分，片劑的作用時間變短。片劑穩(wěn)定性評價1.加速試驗取實施例3、實施例7、對照例5-6的片劑，均在溫度40℃±2℃下，相對濕度為75％±5％的條件下放置6個月，在試驗期間1個月、2個月、3個月、6個月末分別取樣一次，檢測片劑的性狀、色澤、氣味、主成分含量(標示量％)和水分，結果發(fā)現，實施例7的片劑的各項指標均無明顯變化；而實施例3和對照例5-6的片劑出現水分含量增高和顏色變深的現象。2.長期試驗取實施例3、實施例7、對照例5-6的片劑，均在溫度25℃±2℃下，相對濕度為60％±10％的條件下放置12個月，在試驗期間0個月、3個月、6個月、9個月、12個月末分別取樣一次，檢測片劑的性狀、色澤、主成分含量(標示量％)和水分，結果發(fā)現，實施例7的片劑的各項指標均無明顯變化；而實施例3和對照例5-6的片劑出現不同程度的水分含量增高和顏色變深現象。從上述加速試驗和長期試驗的結果可知，在片劑中加入蔗糖單月桂酸酯和水楊酸甲酯鈉可顯著提高片劑的穩(wěn)定性，減少其中一個成分，或變化其中一個成分，片劑的穩(wěn)定性下降。最后應說明的是，以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術方案而非限制，盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術方案的精神和范圍，其均應涵蓋在本發(fā)明的權利要求范圍當中。當前第1頁1 2 3