1.一種聚多巴胺包覆的金納米棒材料的制備方法,其特征在于,具體步驟如下:
(1)金納米種子的合成:在室溫下,將1-10mL濃度為0.5-1 mM的氯金酸溶液同1-10mL濃度為0.2-0.5 M 的CTAB溶液充分混勻,隨后加入0.5-1mL濃度為0.01-0.05 M的預(yù)冷的硼氫化鈉溶液,28-37℃避光反應(yīng)2-5小時,得到棕色的金納米種子溶液;
(2)金納米棒的合成:將1-10mL濃度為1-2 mM的氯金酸溶液同1-10mL濃度為0.2-0.5M 的CTAB溶液充分混勻,加入0.1-0.5 mL濃度為5-20mM的硝酸銀溶液充分混勻,加入0.05-0.1 mL濃度為0.1-0.2 M的抗壞血酸溶液充分混勻,加入0.01-0.02 mL步驟(1)中合成的金納米種子溶液,充分混勻后28-37 ℃反應(yīng)過夜,得到長寬比為3-5的金納米棒材料,8000-10000rpm離心,用水洗滌2-3遍;
(3)金納米棒表面聚多巴胺包覆:將洗滌后的金納米棒材料重溶于濃度為10-20mM,pH值為8.0-10.0的Tris緩沖溶液中,加入0.01-0.02 mL濃度為10-20 mM的對巰基苯硼酸溶液,震蕩反應(yīng)1-2小時,隨后加入0.05-0.02mL濃度為1-2 mg/mL的多巴胺溶液,28-37℃震蕩反應(yīng)過夜,得到聚多巴胺包覆的金納米棒材料;
(4)抗體的修飾:采用醌基共價偶聯(lián)的方法將上皮細(xì)胞粘附分子抗體修飾于金納米棒材料表面,將聚多巴胺包覆的金納米棒材料重溶于濃度為0.02-0.05 mM PBS緩沖溶液中,加入0.02-0.05 mL抗體溶液,25-37 ℃偶聯(lián)12-20 h,即將抗體修飾到金納米棒材料表面,可實現(xiàn)對腫瘤靶細(xì)胞的特異性標(biāo)記。
2.由權(quán)利要求1所述制備方法得到的聚多巴胺包覆的金納米棒材料。
3.一種基于權(quán)利要求2所述的聚多巴胺包覆的金納米棒材料的腫瘤細(xì)胞拉曼成像檢測與實時光熱治療平臺,其特征在于,該平臺包括:
細(xì)胞培養(yǎng)基,用于孵育細(xì)胞;
抗體修飾的聚多巴胺包覆的金納米棒溶液,用于在近紅外激光的激發(fā)下,表面增強(qiáng)拉曼效應(yīng)與光熱轉(zhuǎn)化效應(yīng),并用作腫瘤靶細(xì)胞特異性標(biāo)記;
拉曼顯微鏡載物臺,用于放置細(xì)胞培養(yǎng)器皿;
裝備有近紅外激光的拉曼成像顯微鏡,其中,拉曼成像顯微鏡用于對細(xì)胞進(jìn)行快速拉曼掃描,并利用對巰基苯硼酸的特征拉曼信號峰的信號強(qiáng)度進(jìn)行成像,成像結(jié)果顯示腫瘤細(xì)胞的位置;近紅外激光用于照射腫瘤細(xì)胞,利用金納米棒的光熱轉(zhuǎn)化效應(yīng)使材料升溫,壞死腫瘤細(xì)胞。
4.一種如權(quán)利要求3所述的基于聚多巴胺包覆的金納米棒材料的腫瘤細(xì)胞拉曼成像檢測與實時光熱治療平臺的操作方法,其特征在于,具體步驟如下:
(1)材料與細(xì)胞孵育:首先在玻底培養(yǎng)皿中加入約105-106/mL的細(xì)胞,用細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)過夜,使細(xì)胞貼壁生長;取10-30 μL抗體修飾的聚多巴胺包覆的金納米棒溶液,加入培養(yǎng)皿中,37℃條件下輕微震蕩孵育1-2 h, 棄去上層培養(yǎng)基,用PBS洗滌三次后,并加入100 -200μL的PBS;
(2)腫瘤拉曼成像:將玻底培養(yǎng)皿放置于拉曼顯微鏡載物臺上,調(diào)整焦距使細(xì)胞可以清晰的顯現(xiàn)在視野中,選擇合適的激發(fā)光并調(diào)整相應(yīng)的測試參數(shù),利用拉曼顯微鏡點掃描的方法對細(xì)胞進(jìn)行快速拉曼掃描,利用對巰基苯硼酸的特征拉曼信號峰的信號強(qiáng)度進(jìn)行成像,成像結(jié)果顯示腫瘤細(xì)胞的位置;
(3)光熱殺傷:根據(jù)拉曼成像結(jié)果,將激光定點到腫瘤細(xì)胞表面,1-2分鐘/每個細(xì)胞,延長對靶細(xì)胞的激光照射時間,4-5分鐘/每個細(xì)胞,利用金納米棒的光熱轉(zhuǎn)化效應(yīng)使材料升溫,進(jìn)而引起細(xì)胞壞死,達(dá)到腫瘤細(xì)胞光熱殺傷的效果。