本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及橙皮苷的新用途及含有橙皮苷的藥物組合物。
背景技術(shù)：
：代謝綜合征(MetabolicSyndrome，MS)，又稱為胰島素抵抗綜合癥，是指伴有胰島素抵抗的一組疾病的總稱，如高血脂、高血糖、肥胖、高血壓、脂肪肝等。代謝綜合征是血脂紊亂、高血壓、血糖異常肥胖癥等多種癥狀在人體內(nèi)集結(jié)的一種病理狀態(tài)，可導(dǎo)致嚴(yán)重的心血管疾病及其并發(fā)癥。大量的臨床和流行病學(xué)資料已證實(shí)，代謝綜合征引發(fā)的動(dòng)脈粥樣硬化與心腦血管病、腎病均密切相關(guān)，是心腦血管疾病最主要的危險(xiǎn)因素。它所包含的每一個(gè)組成因子都是獨(dú)立的危險(xiǎn)因素。一旦這些危險(xiǎn)因素聚集在一起，其威脅就更加突出。該病已嚴(yán)重威脅患者的生命，降低生活質(zhì)量，給家庭和社會(huì)帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。因而，研究和開發(fā)出一種可以有效治療代謝綜合征的藥物具有十分重要的臨床意義和社會(huì)意義。近年來，治療代謝綜合征藥物的研發(fā)引起了世界各國醫(yī)藥界的高度重視。隨著對(duì)代謝性疾病生理、生化、藥理方面的深入研究，相關(guān)治療代謝綜合征的藥物開發(fā)研究也取得了較大的進(jìn)步。目前，治療代謝綜合征的藥物主要有降糖藥物，例如：二甲雙胍、羅格列酮和α糖苷酶抑制劑藥物拜唐平等，降壓藥物，例如：鈣離子結(jié)抗劑、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑和利尿劑等，調(diào)脂藥物，例如：他汀類、貝特類和煙酸類等。雖然上述藥物在臨床應(yīng)用上已經(jīng)顯示出一定的療效，但整體效果不佳。因此，尋找一種治療代謝綜合征效果顯著、副作用小的藥物是目前亟需解決的難題。中國專利CN101896174B公開了一種用于治療代謝綜合征的珠氯米芬，所述珠氯米芬可以降低空腹血糖、膽固醇和甘油三酯的水平，對(duì)代謝綜合征具有較好的治療效果。但是珠氯米芬是一種抗性激素藥物，長期服用會(huì)對(duì)患者產(chǎn)生較大的副作用。中國專利CN102028900B公開了一種治療代謝綜合征的中藥及其制備方法，該藥物由黨參、茯苓、桂枝、白術(shù)、炙甘草、綿茵陳、法半夏、大黃、蒼術(shù)、薏米、陳皮等十一味中藥制備而成。制備得到的藥物具有健脾瀉濁、溫化痰飲的功效，可以用于防治超重/肥胖及與之相關(guān)的糖尿病、高血壓、高脂血癥、脂肪肝等代謝性疾病。但是高藥物在治療代謝綜合征的過程中存在起效時(shí)間，效果不顯著的缺陷，大大的限制了該中藥的推廣和使用。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明提供了橙皮苷的新用途及含有橙皮苷的藥物組合物，具體涉及到橙皮苷在制備治療代謝綜合征藥物中的用途，同時(shí)還提供了含有橙皮苷的藥物組合物。本發(fā)明提供了橙皮苷在制備治療代謝綜合征藥物中的用途。進(jìn)一步地，所述橙皮苷為口服制劑、外用制劑或注射劑。進(jìn)一步地，所述口服制劑包括片劑、膠囊、散劑、滴丸、丸劑、顆粒劑、混懸劑、糖漿、酏劑、茶或油；所述外用制劑包括酊劑、茶、油、霜?jiǎng)┗蚋鄤凰鲎⑸鋭┌ǚ坩槃┗蛩槃?。另外，本發(fā)明還提供了一種治療代謝綜合征的藥物組合物，所述藥物組合物包括橙皮苷和大薊苷。進(jìn)一步地，所述藥物組合物中橙皮苷與大薊苷的重量比為2-5:1。進(jìn)一步地，所述藥物組合物中橙皮苷與大薊苷的重量比為3:1。進(jìn)一步地，所述藥物組合物為口服制劑、外用制劑或注射劑。進(jìn)一步地，所述口服制劑包括片劑、膠囊、散劑、滴丸、丸劑、顆粒劑、混懸劑、糖漿、酏劑、茶或油；所述外用制劑包括酊劑、茶、油、霜?jiǎng)┗蚋鄤凰鲎⑸鋭┌ǚ坩槃┗蛩槃?。除此之外，本發(fā)明還提供了所述的治療代謝綜合征的藥物組合物在制備保健品或食品中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的橙皮苷的分子式為：C28H34O15，CAS號(hào)為：520-26-3；大薊苷的分子式為：C29H34O15，CAS號(hào)為：28978-02-1。代謝綜合征(MS)是血脂紊亂、高血壓、血糖異常和肥胖癥等多種癥狀在人體內(nèi)集結(jié)的一種病理狀態(tài)。經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的橙皮苷可以顯著的降低MS大鼠的體重和腹圍。大鼠在高熱量飼料喂養(yǎng)12周后，模型組大鼠的體重、腹圍與對(duì)照組相比顯著增加。給藥后的第4周和第8周，與模型組大鼠相比，橙皮苷高劑量組和橙皮苷低劑量組可以顯著降低MS大鼠的體重和腹圍，具有較好的減肥作用。與橙皮苷高劑量組大鼠相比，本發(fā)明提供的橙皮苷與大薊苷組合物具有顯著的減肥作用，橙皮苷與大薊苷組合物可以極顯著的降低大鼠的體重、腹圍，說明本發(fā)明提供的橙皮苷與大薊苷在一定比例范圍內(nèi)組成的組合物相互協(xié)調(diào)起增強(qiáng)降低MS大鼠體重和腹圍的作用，具有顯著的減肥作用。進(jìn)一步地，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的橙皮苷具有降低MS大鼠的胰島素抵抗指數(shù)的作用。與MS模型大鼠組比，橙皮苷高劑量組和橙皮苷低劑量組可以顯著降低MS大鼠血清FBG、FINS和FI-IR水平，具有較好的降胰島素抵抗指數(shù)的作用。與橙皮苷高劑量組大鼠相比，本發(fā)明提供的橙皮苷與大薊苷組合物可以極顯著的降低MS大鼠血清FBG、FINS和FI-IR水平，說明本發(fā)明提供的橙皮苷與大薊苷在一定比例范圍內(nèi)組成的組合物相互協(xié)調(diào)起增強(qiáng)降低MS大鼠胰島素抵抗指數(shù)的作用，對(duì)代謝綜合征具有顯著的治療效果。進(jìn)一步地，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的橙皮苷具有顯著的降血脂作用。給藥8周后，與模型組大鼠相比，橙皮苷高劑量組和橙皮苷低劑量組可以顯著降低MS大鼠血清TC、TG水平，升高HDL-C水平，對(duì)MS大鼠具有顯著的降血脂作用。與橙皮苷高劑量組大鼠相比，本發(fā)明提供的橙皮苷與大薊苷組合物可以極顯著降低MS大鼠血清TC、TG水平，升高HDL-C水平，說明本發(fā)明提供的橙皮苷與大薊苷在一定比例范圍內(nèi)組成的組合物相互協(xié)調(diào)起增強(qiáng)降低MS大鼠血脂的作用，對(duì)代謝綜合征具有顯著的治療效果。進(jìn)一步地，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的橙皮苷可以顯著降低由LPS誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞產(chǎn)生胰島素抵抗模型的細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中葡萄糖的含量。與模型組大鼠相比，橙皮苷可以顯著降低HepG2細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中葡萄糖的含量。與橙皮苷和對(duì)比組大鼠相比，本發(fā)明提供的橙皮苷與大薊苷組合物可以極顯著降低由LPS誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞產(chǎn)生胰島素抵抗模型細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中葡萄糖的含量，說明本發(fā)明提供的橙皮苷與大薊苷在一定比例范圍內(nèi)組成的組合物相互協(xié)調(diào)起增強(qiáng)降低HepG2細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中葡萄糖含量的作用，增強(qiáng)胰島素抵抗，對(duì)代謝綜合征具有顯著的治療效果?？傊?，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的技術(shù)方案具有以下優(yōu)點(diǎn)：(1)本發(fā)明提供的橙皮苷在制備治療代謝綜合征藥物中的用途，為代謝綜合征患者提供了一種新的治療藥物。(2)本發(fā)明提供的治療代謝綜合征的藥物組合物，該藥物組合物包括橙皮苷和大薊苷，所述藥物組合物可以有效提高代謝綜合征的治療作用，可以有效的減輕代謝綜合征患者的痛苦。具體實(shí)施方式：以下通過具體實(shí)施方式的描述對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但這并非是對(duì)本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的基本思想，可以做出各種修改或改進(jìn)，但是只要不脫離本發(fā)明的基本思想，均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。實(shí)施例1、橙皮苷片劑的制備稱取橙皮苷干粉1.5kg，加淀粉1.0kg，糊精0.5kg，混勻，加75％酒精制粒，干燥，整粒，加硬脂酸鎂適量，壓片，包歐巴代或其他薄膜衣，共制1萬片。每片重0.30g，每片含橙皮苷150mg。實(shí)施例2、橙皮苷組合物顆粒劑的制備稱取橙皮苷干粉3kg、大薊苷干粉1kg、白糖粉74kg、糊精25kg，混勻，加80體積％酒精適量，制粒，干燥、上機(jī)包裝成2萬小包，即得5g/包，每包含橙皮苷50mg。實(shí)施例3、橙皮苷組合物丸劑的制備稱取橙皮苷干粉1.0kg，大薊苷干粉0.5kg、加淀粉6.5kg，混勻，加蜂蜜6kg泛丸成水泛丸，干燥得10kg干燥丸，包裝成10000包，即得1g/包，每包含橙皮苷50mg。實(shí)施例3、橙皮苷組合物滴丸劑的制備稱取橙皮苷干粉2kg，大薊苷干粉0.5kg、加聚乙二醇40004.5kg，聚乙二醇20004.5kg混勻，90℃熔螎后在滴丸機(jī)上滴制成丸，干燥得10kg干燥滴丸，包裝成20萬包，即得0.5g/包，每包含橙皮苷50mg。實(shí)施例4、橙皮苷組合物乳劑的制備稱取橙皮苷干粉2.0kg，大薊苷干粉0.4kg、加聚乙二醇40001kg，甘油，十二烷基磺酸鈉，乳劑輔料，按常規(guī)乳劑方法混勻，90℃熔螎后在均質(zhì)機(jī)上制成橙皮苷含量為5％的油包水型橙皮苷乳劑，分裝。實(shí)施例5、橙皮苷組合物霜?jiǎng)┑闹苽浞Q取橙皮苷干粉3kg，大薊苷干粉1kg加聚乙二醇40001kg，甘油，十二烷基磺酸鈉，乳劑輔料，按常規(guī)乳劑方法混勻，90℃熔螎后在均質(zhì)機(jī)上制成橙皮苷含量為5％的水包油型橙皮苷霜?jiǎng)?，分裝。實(shí)施例6、橙皮苷組合物粉針劑的制備稱取橙皮苷鹽酸鹽干粉3kg，大薊苷干粉1kg加注射用水100L溶解，再加入附加劑混勻，調(diào)pH值至6.0-7.5，過濾，濾液再用微孔濾膜過濾，濾液無菌分裝于滅菌西林瓶中，冷凍干燥，壓塞，壓蓋，即得。實(shí)施例7、橙皮苷組合物注射液的制備稱取橙皮苷鹽酸鹽干粉3kg，大薊苷干粉1.0kg加注射用水加注射用水100L溶解，再加入附加劑混勻，調(diào)pH值至6.0-7.5，過濾，濾液再用微孔濾膜過濾，濾液無菌分裝于滅菌西林瓶中，封蓋即得。試驗(yàn)例一、橙皮苷及其組合物對(duì)代謝綜合征大鼠胰島素抵抗的影響試驗(yàn)1、試驗(yàn)對(duì)象：選取70只SPF級(jí)雄性SD大鼠，體質(zhì)量180-200g，許可證號(hào)：SCXK(粵)2008-0002，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。2、試驗(yàn)材料：橙皮苷，由中國生物樣品鑒定所提供(批號(hào)：151201)；大薊苷，由中國生物樣品鑒定所提供(批號(hào)：150612)；胰島素ELISA試劑盒(LOT13684547)，美國Linco公司，葡萄糖(GLU)試劑盒(批號(hào)：110621)、總膽固醇(TC)試劑盒(批號(hào)：110210)；甘油三酯(TG)試劑盒(批號(hào)：110301)；高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)試劑盒(批號(hào)：110326)，均為中生北控生物科技股份有限公司產(chǎn)品。3、試驗(yàn)方法：3.1高熱量飼料的制備高熱量飼料(highenergychows，HEC)，質(zhì)量構(gòu)成比為標(biāo)準(zhǔn)飼料占39％、熟豬油占25％、蔗糖占24％、蛋黃粉占9％、食鹽占3％，由廣州穗北實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖中心提供。3.2動(dòng)物分組及處理將70只雄性SD大鼠隨機(jī)分為7組，分別為對(duì)照組、模型組、橙皮苷低劑量組、橙皮苷高劑量組、大薊苷組，試驗(yàn)組和對(duì)比組，每組10只。除對(duì)照組給予普通飼料外，其他各組均采用高熱量飼料喂養(yǎng)，連續(xù)12周，復(fù)制MS大鼠模型。從造模第5周開始，開始灌胃給藥，給藥量為10ml/kg，各組的給藥濃度如下：對(duì)照組：灌胃等量的生理鹽水；模型組：灌胃等量的生理鹽水；橙皮苷低劑量組：灌胃10ml/kg的0.3g/kg的橙皮苷；橙皮苷高劑量組：灌胃10ml/kg的0.9g/kg的橙皮苷；大薊苷組：灌胃10ml/kg的0.3g/kg的大薊苷；試驗(yàn)組：灌胃10ml/kg的0.9g/kg的橙皮苷+0.3g/kg的大薊苷；對(duì)比組：灌胃10ml/kg的0.9g/kg的橙皮苷+0.9g/kg的大薊苷；每天灌胃一次，連續(xù)給藥8周，給藥結(jié)束后，各組動(dòng)物禁食12小時(shí)，乙醚麻醉下眶動(dòng)，靜脈取血，在3000r/min離心10min，分離血清，-20℃保存?zhèn)溆谩?.3觀察指標(biāo)3.3.1體重及腹圍的測(cè)定：造模期間記錄大鼠體重、腹圍，每隔4周測(cè)量1次。腹圍為經(jīng)過大鼠劍突至后肢間垂直距離的中點(diǎn)。2.3.2生化檢測(cè)：采用葡萄糖氧化酶法測(cè)定空腹血糖(FBG)，采用放射免疫法測(cè)定大鼠空腹胰島素(FINS)，計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)，公式如下：FI-IR＝{(FBG×FINS)/22.5}。采用比色法測(cè)定血清TG、TC、HDL-C和LDL-C。以SPSS170軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示表示，采用單因素方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4、試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果如表1-表4所示。表1橙皮苷及其組合物對(duì)MS大鼠體重(g)的影響(n＝10)組別0周4周8周12周對(duì)照組180.5±20.1278.9±27.6405.3±31.4463.8±32.1模型組182.3±21.6361.3±31.3**480.4±32.1**558.9±38.1**橙皮苷低劑量組179.3±18.2363.9±29.4**418.3±29.3△△473.3±31.5△△橙皮苷高劑量組181.7±20.3365.4±30.7**411.7±28.9△△470.5±29.2△△大薊苷組181.8±19.3363.5±28.4**462.7±20.1536.2±32.7試驗(yàn)組182.4±19.6368.2±32.4**332.1±25.4△△383.3±28.1△△對(duì)比組180.6±18.6363.5±29.8**410.4±30.2△△468.2±28.2△△與對(duì)照組相比：*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組相比：△P＜0.05，△△P＜0.01；與對(duì)比組相比：P＜0.05，P＜0.01。表2橙皮苷及其組合物對(duì)MS大鼠腹圍(cm)的影響(n＝10)組別0周4周8周12周對(duì)照組14.2±1.216.1±0.720.1±1.221.7±1.5模型組14.6±0.920.4±0.6**28.8±1.4**35.6±2.0**橙皮苷低劑量組14.4±1.319.7±0.7**22.8±1.1△△26.1.±1.8△△橙皮苷高劑量組14.3±1.119.9±0.9**22.4±0.7△△25.3±1.9△△大薊苷組14.1±1.014.1±1.014.1±1.014.1±1.0試驗(yàn)組14.2±1.021.2±0.6**20.2±0.9△△20.5±1.2△△對(duì)比組14.2±1.219.5±0.6**22.1±0.8△△25.0±1.3△△與對(duì)照組相比：*P＜0.05；與模型組相比：△P＜0.05，△△P＜0.01；與對(duì)比組相比，P＜0.05，P＜0.01。由表1和表2可知，大鼠在高熱量飼料喂養(yǎng)4周、8周、12周末，模型組大鼠的體重、腹圍與對(duì)照組大鼠相比顯著增加。給藥后的第4周、第8周(分別相當(dāng)于高熱量飼料喂養(yǎng)造模的第8周，12周)，與模型組大鼠相比，橙皮苷高劑量組、橙皮苷低劑量組、試驗(yàn)組和對(duì)比組可以顯著降低MS大鼠的體重、腹圍。與對(duì)比組大鼠相比，試驗(yàn)組可以極顯著的降低MS大鼠的體重、腹圍。說明本發(fā)明提供的橙皮苷與大薊苷在一定比例范圍內(nèi)組成的組合物相互協(xié)調(diào)起增強(qiáng)降低MS大鼠體重和腹圍的作用，具有顯著的減肥作用。表3橙皮苷及其組合物對(duì)MS大鼠血清胰島素抵抗指數(shù)(FI-IR)的影響(n＝10)組別FBG(mmol/L)FINS(mIU/L)FI-RI對(duì)照組5.10±0.733.51±0.480.79±0.23模型組8.99±0.83**8.86±1.28**3.54±0.66**橙皮苷低劑量組5.40±0.47△△5.95±1.24△△1.43±0.34△△橙皮苷高劑量組5.29±0.51△△5.58±1.14△△1.31±0.32△△大薊苷組7.95±0.897.97±1.852.82±0.45試驗(yàn)組5.02±0.42△△4.06±1.10△△0.91±0.39△△對(duì)比組5.27±0.38△△5.50±1.08△△1.29±0.24△△與對(duì)照組相比：**P＜0.01；與模型組比較：△P＜0.05，△△P＜0.01；與對(duì)比組相比，P＜0.05，P＜0.01。由表3可知，與對(duì)照組大鼠相比，模型組大鼠血清的FBG、FINS和FI-IR的含量均顯著升高，給藥8周后，與模型組大鼠比，橙皮苷高劑量組、橙皮苷低劑量組、試驗(yàn)組和對(duì)比組均可以顯著降低MS大鼠血清FBG、FINS和FI-IR水平；與對(duì)比組大鼠相比，試驗(yàn)組可以極顯著的降低MS大鼠血清FBG、FINS和FI-IR水平。說明本發(fā)明提供的橙皮苷與大薊苷在一定比例范圍內(nèi)組成的組合物相互協(xié)調(diào)起增強(qiáng)降低MS大鼠血清FBG、FINS和FI-IR水平的作用，對(duì)代謝綜合征具有顯著的治療效果。表4橙皮苷及其組合物對(duì)MS大鼠血脂水平的影響(n＝10)組別TC(mmol/L)TG(mmol/L)HDL-C(mmol/L)LDL-C(mmol/L)對(duì)照組1.81±0.120.68±0.230.79±0.211.42±0.25模型組5.63±1.62**1.68±0.51**0.41±0.19**1.98±0.30**橙皮苷低劑量組3.92±1.36△1.08±0.23△△0.61±0.19△1.73±0.68橙皮苷高劑量組3.23±1.21△△0.81±0.29△△0.68±0.20△△1.68±0.31△大薊苷組4.82±1.321.53±0.350.43±0.201.89±0.65試驗(yàn)組2.01±1.02△△0.72±0.21△△0.75±0.20△△1.44±0.18△△對(duì)比組3.19±1.18△△0.80±0.20△△0.68±0.16△△1.66±0.29△與對(duì)照組相比：**P＜0.01；與模型組相比：△P＜0.05，△△P＜0.01；與對(duì)比組相比，P＜0.05。由表4可知，與對(duì)照組大鼠相比，模型組大鼠血清TC、TG均顯著升高，HDL-C顯著降低。給藥8周后，與模型組大鼠相比，橙皮苷高劑量組、橙皮苷低劑量組、試驗(yàn)組和對(duì)比組均可以顯著降低MS大鼠血清TC、TG水平，升高HDL-C水平；與對(duì)比組大鼠相比，試驗(yàn)組可以極顯著的降低MS大鼠血清TC、TG水平，升高HDL-C水平。說明本發(fā)明提供的橙皮苷與大薊苷在一定比例范圍內(nèi)組成的組合物相互協(xié)調(diào)起增強(qiáng)降低MS大鼠血清TC、TG水平，升高HDL-C水平，對(duì)代謝綜合征具有顯著的治療效果。試驗(yàn)例二、橙皮苷及其組合物對(duì)胰島素抵抗細(xì)胞模型的影響試驗(yàn)1、試驗(yàn)對(duì)象：HepG2肝細(xì)胞(2-20代)，購自Landbiology(中國，廣州，lot：HB-8605TM)。2、試驗(yàn)材料：橙皮苷，由中國生物樣品鑒定所提供(批號(hào)：151201)；大薊苷，由中國生物樣品鑒定所提供(批號(hào)：150612)；羅格列酮，國藥準(zhǔn)字H20030569，由成都恒瑞制藥有限公司提供。3、試驗(yàn)方法：用含滅活的體積分?jǐn)?shù)10％FBS的高糖DMEM完全培養(yǎng)基，在37℃，體積分?jǐn)?shù)5％CO2條件下培養(yǎng)第2代HepG2細(xì)胞，待細(xì)胞長滿培養(yǎng)瓶瓶底后，先用PBS液洗1次，再加0.05％胰酶和體積分?jǐn)?shù)0.2％EDTA的消化液消化1-2min，細(xì)胞脫落后加FBS數(shù)滴終止反應(yīng)，細(xì)胞懸液倒入離心管中離心1000r/min，5min，棄上清，加入下述培養(yǎng)基中，分別對(duì)相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)分組：對(duì)照組：無FBS的DMEM完全培養(yǎng)基；模型組：100ng/mLLPS+無FBS的DMEM完全培養(yǎng)基；橙皮苷組：添加100ng/mLLPS+27μmol/mL橙皮苷+無FBS的DMEM完全培養(yǎng)基；大薊苷組：添加100ng/mLLPS+27μmol/mL大薊苷+無FBS的DMEM完全培養(yǎng)基；試驗(yàn)組：添加100ng/mLLPS+27μmol/mL橙皮苷+9μmol/mL大薊苷+無FBS的DMEM完全培養(yǎng)基；對(duì)比組：添加100ng/mLLPS+27μmol/mL橙皮苷+27μmol/mL大薊苷+無FBS的DMEM完全培養(yǎng)基；孵育24h后,棄去培養(yǎng)基,先用PBS洗滌1次,再用無血清培養(yǎng)基37℃孵育20min。重復(fù)上述過程1次,最后用PBS洗滌后,換上無血清無酚紅的培養(yǎng)基,孵育24h。采用葡萄糖測(cè)定試劑盒測(cè)定培養(yǎng)液上清液中葡萄糖含量。在酶標(biāo)儀上于505nm處測(cè)定各孔吸光度。將此培養(yǎng)液上清液中葡萄糖含量作為考察藥物對(duì)HepG2細(xì)胞胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)影響的指標(biāo)。4、試驗(yàn)結(jié)果：試驗(yàn)結(jié)果如表5所示。表5橙皮苷及其組合物對(duì)胰島素抵抗細(xì)胞模型的影響試驗(yàn)組別HepG2細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中葡萄糖含量(mM)對(duì)照組16.05±0.43模型組18.96±0.49**橙皮苷組17.25±0.41△大薊苷組18.32±0.47試驗(yàn)組16.08±0.35△△對(duì)比組17.23±0.40△與對(duì)照組相比：**P＜0.01；與模型組相比：△P＜0.05，△△P＜0.01；與對(duì)比組相比，P＜0.01。由表5可知，LPS可誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞產(chǎn)生胰島素抵抗。與對(duì)照組相比，模型組細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中葡萄糖含量顯著高于對(duì)照組。與模型組相比，橙皮苷組、試驗(yàn)組和對(duì)比組均可以顯著降低細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中葡萄糖的含量；與對(duì)比組相比，試驗(yàn)組可以極顯著的降低細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中葡萄糖的含量。說明本發(fā)明提供的橙皮苷與大薊苷在一定比例范圍內(nèi)組成的組合物相互協(xié)調(diào)起增強(qiáng)降低細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中葡萄糖的含量，具有增加胰島素敏感性的作用，對(duì)代謝綜合征具有顯著的治療效果。當(dāng)前第1頁1 2 3