本發(fā)明屬于獸藥領(lǐng)域，具體涉及一種普魯卡因青霉素-硫酸雙氫鏈霉素油混懸劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：普魯卡因青霉素為青霉素的普魯卡因鹽，其抗菌活性成分為青霉素。青霉素對溶血性鏈球菌等鏈球菌屬、肺炎鏈球菌和不產(chǎn)青霉素酶的葡萄球菌、梭狀芽孢桿菌屬、消化鏈球菌和產(chǎn)黑色素?cái)M桿菌等厭氧菌等具有良好抗菌活性，另外淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、白喉棒狀桿菌、炭疽芽孢桿菌、牛型放線菌、念珠狀鏈桿菌、李斯特菌、鉤端螺旋體和梅毒螺旋體也對青霉素敏感。普魯卡因青霉素的抗菌譜和作用機(jī)理與青霉素相同，都是通過抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成發(fā)揮殺菌作用。青霉素因?yàn)榘胨テ诙檀x排泄快，藥效作用時間短，臨床治療時為達(dá)到治療效果需多次給藥。普魯卡因青霉素為長效青霉素，很好的彌補(bǔ)了青霉素的這一缺點(diǎn)。硫酸雙氫鏈霉素，屬于氨基糖苷類抗生素，通過干擾細(xì)菌蛋白質(zhì)合成過程，致使合成異常的蛋白質(zhì)，阻礙已合成的蛋白質(zhì)釋放，另外還可使細(xì)菌細(xì)胞膜通透性增強(qiáng)導(dǎo)致一些重要生理物質(zhì)的外漏，最終引起細(xì)菌死亡。硫酸雙氫鏈霉素對結(jié)核桿菌和多種革蘭氏陰性桿菌有抗菌作用。對金黃色葡萄球菌等多數(shù)革蘭氏陽性球菌的作用差。鏈球菌、銅綠假單胞菌和厭氧菌對本品固有耐藥。油混懸劑是將難溶性藥物分散于油相中形成的非均相液體制劑，其最大特點(diǎn)為使藥物作用時間延長，減少用藥次數(shù)，可降低勞動強(qiáng)度和減少對機(jī)體的應(yīng)激。然而，油混懸劑尤其是注射用油混懸劑的制備較為困難，要得到物理穩(wěn)定性、通針性和重分散性較好的產(chǎn)品，確定適宜的輔料種類及用量非常關(guān)鍵，而且，油混懸劑對貯存環(huán)境要求較高，提高其貯存穩(wěn)定性也是制備過程中需要考慮的因素。目前文獻(xiàn)報道的普魯卡因青霉素-硫酸雙氫鏈霉素混懸劑為水混懸劑，申請人在試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，用水制備的普魯卡因青霉素-硫酸雙氫鏈霉素混懸劑在60℃下會發(fā)生溶解，變?yōu)槌赛S色的粘稠液體，無分散性，質(zhì)量不佳。因此急需對普魯卡因青霉素-硫酸雙氫鏈霉素混懸劑進(jìn)行改進(jìn)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種普魯卡因青霉素-硫酸雙氫鏈霉素油混懸劑及其制備方法。本發(fā)明提供了一種油混懸劑，所述混懸劑每100mL含有如下原輔料：普魯卡因青霉素20g、硫酸雙氫鏈霉素20g、表面活性劑1g、膠體保護(hù)劑0.5-2g、助懸劑2-5g、抗氧化劑0.005-0.1g，余量為油相。其中，所述的表面活性劑為司班-80、吐溫-80、大豆磷脂中一種或兩種以上的混合物。其中，所述的表面活性劑由下述組分組成：司班-800.5g、大豆磷脂0.5g。其中，所述的膠體保護(hù)劑為硬脂酸鎂、硅酸鋁鎂、硬脂酸鋁中一種或兩種以上的混合物；優(yōu)選地，膠體保護(hù)劑的用量為0.5-1g。其中，所述的膠體保護(hù)劑為0.5g的硬脂酸鋁。其中，所述的助懸劑為泊洛沙姆188、聚乙二醇6000、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮K30中的至少一種；優(yōu)選地，助懸劑為2g的聚乙二醇6000。其中，所述的油相為大豆油與苯甲酸芐酯的混合物、大豆油與苯肉豆蔻酸異丙酯的混合物、或大豆油與油酸乙酯的混合物；其中，大豆油在所述混合物中的體積百分含量為10-20％。其中，所述的抗氧化劑為0.005-0.02g的叔丁基對羥基茴香醚、0.01～0.02g的維生素C棕櫚酯、0.05～0.1g的沒食子酸丙酯或0.05～0.075g的維生素E。其中，所述混懸劑每100mL含有如下原輔料：普魯卡因青霉素20g、硫酸雙氫鏈霉素20g、表面活性劑1g、膠體保護(hù)劑0.5-1g、助懸劑2-5g、抗氧化劑0.005-0.1g，余量為體積百分比為10-20％：80-90％的大豆油和苯甲酸芐酯的混合物；優(yōu)選地，所述混懸劑每100mL含有如下原輔料：普魯卡因青霉素20g、硫酸雙氫鏈霉素20g、司班-800.5g、大豆磷脂0.5g、硬脂酸鋁0.5g、聚乙二醇60002g、叔丁基對羥基茴香醚0.005-0.02g，余量為體積百分比為20％：80％的大豆油和苯甲酸芐酯的混合物。本發(fā)明還提供了上述油混懸劑的制備方法，包括如下步驟：取油相，加熱至60℃-70℃，加入膠體保護(hù)劑、助懸劑、表面活性劑和抗氧化劑，攪拌均勻，冷卻后加入普魯卡因青霉素、硫酸雙氫鏈霉素，攪拌均勻，均質(zhì)，即得。本發(fā)明提供了一種普魯卡因青霉素-硫酸雙氫鏈霉素油混懸劑，在采用特定輔料種類及用量配比的條件下，本發(fā)明制備得到的混懸劑沉降體積比高、通針性及重分散性良好，且在4℃～60℃環(huán)境中貯存3個月未見質(zhì)量下降，質(zhì)量穩(wěn)定。顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。以下通過實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。具體實(shí)施方式下面以實(shí)施例作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明不局限于這些實(shí)施例。本發(fā)明使用的原料、設(shè)備均為已知產(chǎn)品，通過購買市售產(chǎn)品獲得。下述實(shí)施例中，除了涉及油相/溶劑時％指的是體積比，其余均為重量體積百分比(w/v，g/ml)。實(shí)施例1本發(fā)明油混懸劑的制備取大豆油20ml，加入苯甲酸芐酯80ml，加熱(60℃-70℃)混合均勻后，加入膠體保護(hù)劑(硬脂酸鋁0.5g)溶解，再加入助懸劑(聚乙二醇60002.0g)熔化后攪拌均勻，加入表面活性劑(0.5g司班-80+0.5g大豆磷脂)、抗氧化劑叔丁基對羥基茴香醚0.02g，冷卻后加入普魯卡因青霉素20g、硫酸雙氫鏈霉素20g，攪拌均勻，均質(zhì)即得20％普魯卡因青霉素-20％硫酸雙氫鏈霉素油混懸液。以下通過試驗(yàn)例具體說明本發(fā)明的有益效果：1、材料普魯卡因青霉素、硫酸雙氫鏈霉素，華北制藥集團(tuán)；苯甲酸芐酯，上海皓月日化有限公司；聚乙二醇-6000，阿拉丁試劑有限公司；泊洛沙姆-188，北京鳳禮國際貿(mào)易有限公司；硬脂酸鋁，硬脂酸鎂，吐溫-80，司班-80、甲醇、磷酸二氫鈉等化學(xué)試劑，西隴化工有限公司；甲醇，賽默飛世爾(中國)有限公司，均質(zhì)機(jī)，上海恒川機(jī)械設(shè)備有限公司。2、混懸劑的檢測方法參考《中國獸藥典》對混懸液的要求，用以下方法檢查制備的普魯卡因青霉素-硫酸雙氫鏈霉素混懸液。2.1沉降體積比用具塞量筒量取供試品50ml，密塞，用力振搖1min，記下混懸物的開始高度H0，靜置3小時，記下混懸物的最終高度H，按下式計(jì)算：沉降體積比＝H/H0沉降體積比不小于0.90。2.2通針性取供試品，振搖后用12號針頭吸取，1分鐘內(nèi)吸取體積不少于2ml。2.3參考乳劑的離心標(biāo)準(zhǔn)，將供試品以4000r/min的轉(zhuǎn)速離心15min后振搖，應(yīng)易分散。3、混懸液的制備取溶劑適量，按擬定的比例加入表面活性劑、抗氧化劑、膠體保護(hù)劑溶解，冷卻后加入普魯卡因青霉素、硫酸雙氫鏈霉素?cái)嚢杈鶆颍镁|(zhì)機(jī)均質(zhì)，即得。試驗(yàn)例1溶劑(油相)對油混懸劑質(zhì)量的影響選擇大豆油、菜籽油、花生油、玉米油、白油、油酸乙酯、苯甲酸芐酯、肉豆蔻酸異丙酯、大豆油-油酸乙酯(不同體積配比的大豆油與油酸乙酯)、大豆油-苯甲酸芐酯(不同體積配比的大豆油與苯甲酸芐酯)、大豆油-肉豆蔻酸異丙酯(不同體積配比的大豆油與肉豆蔻酸異丙酯)作為溶劑，并配合表面活性劑司班-80(5％w/v，g/ml)、抗氧化劑叔丁基對羥基茴香醚(BHA)(0.02％w/v)，膠體保護(hù)劑硬脂酸鋁(1％w/v)及主藥普魯卡因青霉素(20％w/v)-硫酸雙氫鏈霉素(20％w/v)制備不同的混懸劑，考察其沉降體積比、通針性、離心后的分散情況，結(jié)果見表1。表1不同溶劑制備的混懸劑質(zhì)量評價結(jié)果溶劑沉降體積比通針性(ml)離心后再分散大豆油0.981.8不分散菜籽油0.981.7不分散花生油0.9817不分散玉米油0.981.6不分散白油0.981.7不分散油酸乙酯0.871.8不分散苯甲酸芐酯0.851.9不分散肉豆蔻酸異丙酯0.861.9不分散大豆油50％+油酸乙酯50％0.941.6不分散大豆油50％+苯甲酸芐酯50％0.941.8不分散大豆油50％+肉豆蔻酸異丙酯50％0.941.8不分散大豆油10％+苯甲酸芐酯90％0.961.9不分散大豆油20％+苯甲酸芐酯80％0.961.7不分散大豆油30％+苯甲酸芐酯70％0.951.4不分散大豆油10％+肉豆蔻酸異丙酯90％0.971.9不分散大豆油20％+肉豆蔻酸異丙酯80％0.981.6不分散大豆油30％+肉豆蔻酸異丙酯70％0.931.5不分散大豆油10％+油酸乙酯90％0.981.9不分散大豆油20％+油酸乙酯80％0.951.5不分散大豆油30％+油酸乙酯70％0.911.4不分散由表1可知，各種溶劑制備的普魯卡因青霉素-硫酸雙氫鏈霉素混懸液通針性和離心后的重分散性較差，均不符合《中國獸藥典》規(guī)定。其中，溶劑為大豆油與苯甲酸芐酯、肉豆蔻酸異丙酯或油酸乙酯混合，且大豆油體積比占總?cè)軇┑?0-20％時，制備的普魯卡因青霉素-硫酸雙氫鏈霉素油混懸劑通針性相對較好。試驗(yàn)例2表面活性劑對油混懸劑質(zhì)量的影響選用常用的油性表面活性劑吐溫-80、司班-80和卵磷脂作為表面活性劑，溶劑(大豆油20％-苯甲酸芐酯80％體積比)，膠體保護(hù)劑(硬脂酸鋁1％)、抗氧化劑(叔丁基對羥基茴香醚0.02％)，制備20％的普魯卡因青霉素-20％硫酸雙氫鏈霉素混懸液?？疾炱涑两刁w積比、通針性、離心后的分散情況，結(jié)果見表2。表2不同表面活性劑制備的混懸劑質(zhì)量評價結(jié)果由表2可知，0.5％司班-80(w/v)+0.5％大豆磷脂(w/v)作為表面活性劑，制備的混懸劑沉降體積比、通針性、離心后的重分散性均較好，符合《中國獸藥典》規(guī)定，而使用其它表面活性劑制備的混懸劑離心后的重分散性較差，不符合《中國獸藥典》規(guī)定。試驗(yàn)例3膠體保護(hù)劑對油混懸劑質(zhì)量的影響分別采用硬脂酸鋁、硬脂酸鎂、硅酸鋁鎂及不同質(zhì)量配比的組合作為膠體保護(hù)劑，并按溶劑(大豆油20％+苯甲酸芐酯80％)，抗氧化劑(叔丁基對羥基茴香醚0.02％)，表面活性劑(0.5％司班-80+0.5％大豆磷脂)制備20％的普魯卡因青霉素-20％硫酸雙氫鏈霉素混懸液?？疾炱涑两刁w積比、通針性、離心后的分散情況，結(jié)果見表3。表3不同膠體保護(hù)劑制備的混懸劑質(zhì)量評價結(jié)果由表3可知，膠體保護(hù)劑用量控制在0.5-2％(w/v)時，制備的混懸劑沉降體積比、通針性、離心后的重分散性均較好，尤其在使用硬脂酸鋁0.5-1％(w/v)時，制備的混懸劑沉降體積比、通針性最佳。而膠體保護(hù)劑用量較高(5％w/v)時制備的混懸劑離心后的重分散性較差，不符合《中國獸藥典》規(guī)定。試驗(yàn)例4助懸劑對油混懸劑質(zhì)量的影響分別使用單一物質(zhì)在大豆油中的分散實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明泊洛沙姆188、聚乙二醇6000、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮K30四種物質(zhì)在大豆油中分散性較好，說明這四種物質(zhì)適宜作為助懸劑使用，而使用聚乙二醇4000在大豆油中的分散性較差。分別選擇不同用量的泊洛沙姆188、聚乙二醇6000、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮K30，并按溶劑(大豆油20％-苯甲酸芐酯80％體積比)，表面活性劑(0.5％司班-80+0.5％大豆磷脂)，抗氧化劑(叔丁基對羥基茴香醚為0.02％w/v)，膠體保護(hù)劑(硬脂酸鋁為1％w/v)，制備20％的普魯卡因青霉素-20％硫酸雙氫鏈霉素混懸液，考察其沉降體積比、通針性、離心后的分散情況，結(jié)果見表4。表4不同助懸劑制備的混懸劑質(zhì)量評價結(jié)果添加量沉降體積比通針性(ml)離心后再分散泊洛沙姆1882.0％0.962.5易分散泊洛沙姆1885.0％0.962.6易分散泊洛沙姆1888.0％0.992.1不易分散聚乙二醇60002.0％0.963.7易分散聚乙二醇60005.0％0.973.5易分散聚乙二醇60008.0％0.982.6不易分散羧甲基纖維素鈉2.0％0.973.0易分散羧甲基纖維素鈉5.0％0.932.2易分散羧甲基纖維素鈉8.0％0.931.9不易分散聚乙烯吡咯烷酮K302.0％0.962.7易分散聚乙烯吡咯烷酮K305.0％0.962.6易分散聚乙烯吡咯烷酮K308.0％0.991.9不易分散由表4可知，使用聚乙二醇6000，用量為2.0-5.0％(w/v)作為助懸劑時，制備的混懸劑沉降體積比、通針性、離心后的重分散性均較好，尤其在使用聚乙二醇用量為2.0w/v時，制備的混懸劑效果最佳。泊洛沙姆188(2.0-5.0％)、羧甲基纖維素鈉(2.0-5.0％)和聚乙烯吡咯烷酮(2.0％)對本混懸劑也有一定助懸作用。試驗(yàn)例5抗氧化劑對油混懸劑質(zhì)量的影響分別以維生素C棕櫚酯(0.01％-0.02％w/v)、叔丁基對羥基茴香醚(0.005％-0.02％w/v)、沒食子酸丙酯(0.05％-0.1％w/v)、維生素E(0.05％-0.075％w/v)作為抗氧化劑，溶劑(大豆油20％-苯甲酸芐酯80％體積比)，表面活性劑(0.5％司班-80+0.5％大豆磷脂)，膠體保護(hù)劑(硬脂酸鋁為1％w/v)制備20％的普魯卡因青霉素-20％硫酸雙氫鏈霉素混懸液，空白對照(不加入抗氧化劑，于60℃水浴中放置12小時，結(jié)果加入抗氧化劑的混懸液均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，空白對照溶液顏色加深，說明其中成分發(fā)生了氧化或降解。因此，本發(fā)明上述四種物質(zhì)均適宜作為抗氧化劑在本發(fā)明混懸劑中使用。試驗(yàn)例6制備工藝對油混懸劑質(zhì)量的影響本次試驗(yàn)比較了將聚乙二醇6000與油相混合(a)，或直接加入油相中均質(zhì)的助懸效果(b)。具體實(shí)驗(yàn)方法如下：制備工藝a：取大豆油20ml，加入苯甲酸芐酯80ml，加熱(60℃-70℃)混合均勻后，加入膠體保護(hù)劑(硬脂酸鋁0.5g)溶解，再加入助懸劑(聚乙二醇60002.0g)熔化后攪拌均勻，加入表面活性劑(0.5g司班-80+0.5g大豆磷脂)，并加入抗氧化劑叔丁基對羥基茴香醚0.02g，冷卻后加入普魯卡因青霉素20g、硫酸雙氫鏈霉素20g，攪拌均勻，均質(zhì)即得20％普魯卡因青霉素-20％硫酸雙氫鏈霉素油混懸液。制備工藝b：取大豆油20ml，加入苯甲酸芐酯80ml，加熱(60℃-70℃)混合均勻后，加入膠體保護(hù)劑(硬脂酸鋁0.5g)溶解，加入表面活性劑(0.5g司班-80+0.5g大豆磷脂)，并加入抗氧化劑叔丁基對羥基茴香醚0.02g，冷卻后加入助懸劑(聚乙二醇60002.0g)攪拌均勻，加入普魯卡因青霉素20g、硫酸雙氫鏈霉素20g，攪拌均勻，均質(zhì)即得20％普魯卡因青霉素-20％硫酸雙氫鏈霉素油混懸液。結(jié)果見表5。表5不同制備工藝的混懸劑質(zhì)量評價結(jié)果制備工藝沉降體積比通針性離心后分散性a1.002.8易分散b0.801.5不易分散可見，制備工藝a的得到的混懸劑質(zhì)量優(yōu)于制備工藝b。試驗(yàn)例7本發(fā)明混懸劑的穩(wěn)定性試驗(yàn)將試驗(yàn)例6中工藝a制備得到的普魯卡因青霉素-硫酸雙氫鏈霉素油混懸液，分別置于4℃、25℃、40℃和60℃環(huán)境中放置3個月，參照中國獸藥典參照普魯卡因青霉素和硫酸鏈霉素的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(中國獸藥典委員會.中華人民共和國獸藥典:一部[S].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，2005.12)測定20％普魯卡因青霉素-20％硫酸雙氫鏈霉素注射液的含量，結(jié)果見表6。表6本發(fā)明混懸劑的穩(wěn)定性試驗(yàn)由表6可知，本發(fā)明混懸液在4-60℃環(huán)境下放置3個月，其沉降體積比、通針性、離心后再分散性、普魯卡因青霉素含量、硫酸雙氫鏈霉素含量均較好，各組間差異不明顯，說明本發(fā)明混懸劑穩(wěn)定性好。綜上，本發(fā)明通過特定輔料種類、用量的篩選，得到了沉降體積比、通針性、離心后再分散性好、普魯卡因青霉素和硫酸雙氫鏈霉素含量穩(wěn)定的油混懸劑，臨床應(yīng)用前景良好。當(dāng)前第1頁1 2 3