1.一種多元聚合物人工角膜的制備方法,其特征在于,步驟包括:
1)合成多元共聚材料:取多種單體原料混合,加入催化劑,抽真空,充氮?dú)?,在密閉的容器中進(jìn)行反應(yīng),制備多元共聚物;
2)制備角膜三維支架:使用3D生物打印機(jī),將上述多元共聚物為原料置于打印機(jī)的料筒中,根據(jù)預(yù)先設(shè)定的模型,打印出角膜形狀的三維立體支架;
3)利用ECM對三維支架進(jìn)行功能修飾:取脫細(xì)胞角膜細(xì)胞外基質(zhì)干粉溶于蒸餾水中,制備成納米顆?;鞈乙海褂弥苯油扛驳姆绞綄⒒鞈乙褐械募?xì)胞外基質(zhì)顆粒均勻覆蓋到角膜三維支架表面;
4)殘余角膜微組織化方法的構(gòu)建:取患者角膜進(jìn)行微組織化處理,制備成均勻的細(xì)微顆粒,離心收集沉淀,在沉淀中加入生物蛋白膠,在無菌條件下,將其注入到被修飾支架材料中,制得人工角膜。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種多元聚合物人工角膜的制備方法,其特征在于,所述步驟1)中反應(yīng)溫度為130-160℃,反應(yīng)時間為10-24h。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種多元聚合物人工角膜的制備方法,其特征在于,所述步驟1)中多元共聚物的分子量為3000-50000。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種多元聚合物人工角膜的制備方法,其特征在于,所述步驟1)中單體選自ε-己內(nèi)酯、丙交酯、三亞甲基碳酸酯或乙二醇中的幾種組合,使用時的質(zhì)量比為,ε-己內(nèi)酯:丙交酯:三亞甲基碳酸酯:乙二醇=5-90:5-90:3-50:5-30。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種多元聚合物人工角膜的制備方法,其特征在于,所述步驟1)中催化劑為辛酸亞錫、有機(jī)胍、金屬鋅、三丁基氯化錫、乙酰丙酮鐵、乳酸鋅、納米氧化鋅、?;撬帷⒁掖艰F、正丙醇鐵或正丁醇鐵;催化劑的質(zhì)量為原料質(zhì)量的0.1%-1%。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項所述的一種多元聚合物人工角膜的制備方法,其特征在于,所述步驟2)中打印頭直徑為200μm,擠出速度為0.022-0.033mm/s,打印溫度為120℃-180℃,打印速度為6mm/s,打印層厚為0.01-0.1mm。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種多元聚合物人工角膜的制備方法,其特征在于,所述步驟2)中打印得到的角膜三維支架的孔隙率為90%,孔隙直徑為200-500μm。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種多元聚合物人工角膜的制備方法,其特征在于,所述步驟3)中脫細(xì)胞角膜細(xì)胞外基質(zhì)干粉的制備方法為:將新鮮動物眼角膜放于生理鹽水中洗凈瀝干后切成小塊,使用雙氧水浸泡;再使用蒸餾水和三蒸水清洗干凈,細(xì)菌培養(yǎng)呈陰性后,將小塊角膜使用超微濕法粉碎,離心分離,收集沉淀,冷凍干燥制備成脫細(xì)胞角膜細(xì)胞外基質(zhì)納米級干粉,在4℃下保存。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種多元聚合物人工角膜的制備方法,其特征在于,所述離心是在4℃條件下分三次離心,離心時間分別為10-20min,離心速度分別為1000rmp-8000rmp,且三次離心的速率是遞增的。