本發(fā)明屬于化學(xué)制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種高純度氨甲環(huán)酸注射劑及其制備方法以及在心臟外科手術(shù)體外循環(huán)圍術(shù)期適應(yīng)癥的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
術(shù)后出血是體外循環(huán)心臟外科手術(shù)最常見的并發(fā)癥之一，約有20％的病例術(shù)后出血顯著，需要大量應(yīng)用血制品，5％的病例需要二次開胸止血。大量出血是心臟外科手術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生的獨立風(fēng)險因素，可延長機(jī)械通氣時間，導(dǎo)致急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、敗血癥和房性心律失常，增加胸骨感染的比率、輸血相關(guān)并發(fā)癥和手術(shù)死亡率。
心臟外科手術(shù)后出血不僅增加了患者的圍術(shù)期并發(fā)癥和死亡率，更進(jìn)一步消耗了有限的醫(yī)療資源，文獻(xiàn)報道，心臟手術(shù)病人占所有手術(shù)病人的15～20％，然而卻消耗了超過80％的血液制品。
瓣膜性心臟病及冠狀動脈粥樣硬化性心臟病患者病情較重，手術(shù)時間較長，易發(fā)生大量出血和輸血，臨床圍術(shù)期迫切需要采用有效藥物減少出血和輸血。氨甲環(huán)酸適用于心血管外科圍術(shù)期的止血。氨甲環(huán)酸的臨床使用，可以明顯減少輸血用量。隨著使用劑量的加大，輸血量成比例下降。
氨甲環(huán)酸的不良反應(yīng)，包括頭痛、頭暈、惡心、嘔吐等，但是對于肝腎腦心臟等重要臟器的影響尚不清晰，無大劑量臨床試驗隨訪其長期預(yù)后和死亡率，缺乏權(quán)威性的安全數(shù)據(jù)。隨著氨甲環(huán)酸的常規(guī)應(yīng)用，關(guān)于其安全性和給藥劑量的問題越來越突出。雖然Meta分析顯示，死亡率、術(shù)后心肌梗死、神經(jīng)系統(tǒng)事件如中風(fēng)的發(fā)生率并未升高，但該分析是基于一些小樣本量研究，首要指標(biāo)也不是安全性，研究中所用的氨甲環(huán)酸劑量范圍很寬。研究發(fā)現(xiàn)，高劑量氨甲環(huán)酸(＞80mg/kg)可使術(shù)后驚厥的發(fā)生率增加。最近的一篇納入1萬余例患者的回顧性研究發(fā)現(xiàn)，使用氨甲環(huán)酸是術(shù)后發(fā)生驚厥的強(qiáng)烈的獨立預(yù)測因子(OR 14.3，95％CI 5.5-36.7；p＜0.001)。除神經(jīng)毒性外，仍需進(jìn)一步的研究明確氨甲環(huán)酸用于心臟手術(shù)的安全性，特別是能否增加各類栓塞事件的發(fā)生率。
目前關(guān)于副作用的觀察集中在神經(jīng)毒性方面，氨甲環(huán)酸對感染、腎功能衰竭、圍術(shù)期 心肌梗死和中風(fēng)等并發(fā)癥的發(fā)生率是否存在影響，特別是大劑量使用氨甲環(huán)酸的安全性需要進(jìn)一步明確(陸海松，不同劑量氨甲環(huán)酸在體外循環(huán)心臟手術(shù)應(yīng)用效果，中國分子心臟病學(xué)雜志，2015，15(02)，p1295-1297)。而且，根據(jù)文獻(xiàn)報道，部分患者在使用氨甲環(huán)酸后觀察到了血栓的形成，形成的時間有的為6～15天，個別患者甚至發(fā)生在給藥后2個月。發(fā)生這類不良反應(yīng)時間長，癥狀不明顯，不易被患者和醫(yī)務(wù)人員及時發(fā)現(xiàn)。一旦不良反應(yīng)發(fā)生后，對部分患者器官造成不可逆性損害，通過對癥治療，并不能完全恢復(fù)(串俊蘭等，氨甲環(huán)酸致不良反應(yīng)個例報道文獻(xiàn)分析，中國藥師，2013年16(3)，p456～458)。
目前，氨甲環(huán)酸注射制劑，其臨床使用方法為靜脈注射或滴注：一次0.25～0.5g，一日0.75～2g。靜脈注射液以25％葡萄糖液稀釋，靜脈滴注液以5％～10％葡萄糖液稀釋。目前，市場中其產(chǎn)品質(zhì)量一般僅控制順式-對氨甲基環(huán)己烷甲酸不高于0.2％，4-氨甲基-1-環(huán)己烯甲酸不高于0.1％，對氨甲基苯甲酸含量不高于0.1％，總雜質(zhì)不高于0.5％，全球上市的制劑基本上也只能達(dá)到這個質(zhì)量水平，包括歐洲及日本的上市的氨甲環(huán)酸制劑，最高標(biāo)準(zhǔn)也就是雜質(zhì)A反式-4，4-(二亞甲基)二(環(huán)烷酸)不高于0.1％，雜質(zhì)B順式-對氨甲基環(huán)己烷甲酸不高于0.2％，總雜質(zhì)不高于0.5％。但氨甲環(huán)酸注射制劑應(yīng)用于體外循環(huán)心臟外科手術(shù)圍術(shù)期適應(yīng)癥時，常常采用負(fù)荷量30mg/kg加維持量20mg/kg/h的方式給予，需要連續(xù)不斷的給藥，有時臨床中給藥量更高，總劑量會達(dá)到10g，甚至20g以上。單個雜質(zhì)即使按0.1％計算，每次臨床應(yīng)用時，進(jìn)入體內(nèi)的雜質(zhì)也高達(dá)10mg～20mg，存在重大安全隱患，也是導(dǎo)致臨床不良反應(yīng)發(fā)生的重要原因。
在氨甲環(huán)酸已知的雜質(zhì)中，4-氨甲基-1-環(huán)己烯甲酸大鼠(口服)LD50：＞15mg/kg，大鼠(靜脈)LD50：1,800mg/kg，小鼠(口服)LD50：＞15mg/kg小鼠(靜脈)LD50：1,600mg/kg。中國專利CN100579511C同樣顯示4-氨甲基-1-環(huán)己烯甲酸及順式-對氨甲基環(huán)己烷甲酸具有較大安全性問題。因此，臨床急需開發(fā)一種高純度低雜質(zhì)的氨甲環(huán)酸注射劑。
但根據(jù)中國專利CN100579511C即使控制注射用水的電導(dǎo)率，也不能較大幅度地降低氨甲環(huán)酸注射制劑中雜質(zhì)并使其達(dá)到理想的水平，當(dāng)大劑量臨床應(yīng)用時，其單個雜質(zhì)和總雜質(zhì)仍無法滿足臨床需求，存在嚴(yán)重用藥安全隱患。具體而言，按照中國專利CN100579511C中提到的，將注射用水電導(dǎo)率更嚴(yán)格地控制在20℃時不超過0.6μS.cm-1，可使相關(guān)雜質(zhì)控制在0.1％。但在后續(xù)生產(chǎn)中，發(fā)現(xiàn)了輸液制劑中，雖然采用同一批次原料，對所用注射用水的電導(dǎo)率加以控制，但制得成品制劑所含量雜質(zhì)量仍有不相同，有些批次成品的雜質(zhì)更接近于原料雜質(zhì)限度，而有些批次成品雜質(zhì)含量較高，換句話說，即使使用純度極高的氨甲環(huán)酸原料，也不能保證穩(wěn)定的生產(chǎn)出相應(yīng)的更高純度氨甲環(huán)酸制劑，在其 制劑生產(chǎn)過程中，成品中的雜質(zhì)仍會升高。按上述方法生產(chǎn)的制劑已是最嚴(yán)格的控制標(biāo)準(zhǔn)，窮盡任何手段，也不能再提高制劑純度，且雜質(zhì)變化極其不穩(wěn)定，根本無法滿足臨床中大劑量應(yīng)用本品的需求。截止目前，全世界仍沒有被藥監(jiān)當(dāng)局批準(zhǔn)可供工業(yè)化生產(chǎn)和商業(yè)化應(yīng)用的高純度注射制劑上市。而實際臨床中，由于不得已大劑量應(yīng)用較低純度的氨甲環(huán)酸注射劑時，往往發(fā)生一些不可控的不良反應(yīng)，比如各類栓塞，術(shù)后驚厥等，從而嚴(yán)重限制了氨甲環(huán)酸在體外循環(huán)心臟外科手術(shù)圍術(shù)期等大劑量的應(yīng)用，導(dǎo)致病人不必要的輸血增加，治療負(fù)擔(dān)加重，治療風(fēng)險增高。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，本申請的發(fā)明人經(jīng)過努力研究，出人意料地發(fā)現(xiàn)，除去電導(dǎo)率外，水的總有機(jī)碳(total organic carbon，簡稱為：TOC)居然是影響氨甲環(huán)酸雜質(zhì)變化的重要指標(biāo)，尤其在氨甲環(huán)酸注射劑產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)時。
因此，本發(fā)明的一個目的在于，提供一種氨甲環(huán)酸注射劑，該注射劑的純度更高。
本發(fā)明的另一個目的在于，提供一種上述氨甲環(huán)酸注射劑的制備方法。
本發(fā)明的又一個目的在于，提供一種上述氨甲環(huán)酸注射劑的用途。
本發(fā)明的上述目的是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的：
一方面，本發(fā)明提供一種氨甲環(huán)酸注射劑，該注射劑中的雜質(zhì)A：反式-4，4-(二亞甲基)二(環(huán)烷酸)的含量不高于0.05％，雜質(zhì)B：順式-對氨甲基環(huán)己烷甲酸的含量不高于0.05％，雜質(zhì)C：4-氨甲基-1-環(huán)己烯甲酸的含量不高于0.05％，雜質(zhì)D：對氨甲基苯甲酸的含量不高于0.05％，其他任何一個單雜含量均不高于0.05％，總雜質(zhì)不高于0.25％。
優(yōu)選地，所述注射劑以氨甲環(huán)酸作為活性組分，使用含總有機(jī)碳在0.4mg/L以下的注射用水來配制。
優(yōu)選地，所述注射劑以氨甲環(huán)酸作為活性組分，使用含總有機(jī)碳在0.35mg/L以下的注射用水來配制。
優(yōu)選地，上述注射劑中，所述注射用水的電導(dǎo)率在20℃時不超過0.6μS.cm-1。
優(yōu)選地，所述注射劑包括活性成分氨甲環(huán)酸、除必要時加入的pH值調(diào)節(jié)劑外無其他輔料以及含總有機(jī)碳在0.4mg/L以下，優(yōu)選在0.35mg/L以下的注射用水。
優(yōu)選地，所述注射劑包括活性成分氨甲環(huán)酸、藥學(xué)上可接受的輔料以及含總有機(jī)碳在0.4mg/L以下，優(yōu)選在0.35mg/L以下的注射用水。
優(yōu)選地，上述注射劑中可加入調(diào)節(jié)等滲的藥學(xué)上可接受的輔料選自氯化鈉、依地酸二 鈉、甘露醇中的一種或多種。
優(yōu)選地，所述注射劑包括氨甲環(huán)酸、氯化鈉以及含總有機(jī)碳在0.4mg/L以下的注射用水。
優(yōu)選地，所述注射劑包括氨甲環(huán)酸、氯化鈉以及含總有機(jī)碳在0.35mg/L以下的注射用水。
優(yōu)選地，所述注射劑包括：5-10重量份的氨甲環(huán)酸、7-9重量份氯化鈉以及1000重量份的含總有機(jī)碳在0.4mg/L以下的注射用水。
優(yōu)選地，所述注射劑包括：5-10重量份的氨甲環(huán)酸、7-9重量份氯化鈉以及1000重量份的含總有機(jī)碳在0.35mg/L以下的注射用水。
在一個具體實施方案中，所述注射劑的配方如下：
10g的氨甲環(huán)酸；
7g氯化鈉；以及
1000mL的含總有機(jī)碳在0.35mg/L或0.4mg/L以下的注射用水。
在另一優(yōu)選的實施方案中，所述注射劑的配方如下：
5g氨甲環(huán)酸；
8.5g氯化鈉；以及
1000mL的含總有機(jī)碳在0.35mg/L或0.4mg/L以下的注射用水。
優(yōu)選地，所述注射劑包括氨甲環(huán)酸、依地酸二鈉以及含總有機(jī)碳在0.4mg/L以下的注射用水。
優(yōu)選地，所述注射劑包括氨甲環(huán)酸、依地酸二鈉以及含總有機(jī)碳在0.35mg/L以下的注射用水。
優(yōu)選地，所述注射劑包括：90-110重量份的氨甲環(huán)酸、0.01-0.05重量份依地酸二鈉以及1000重量份的含總有機(jī)碳在0.4mg/L以下的注射用水。
優(yōu)選地，所述注射劑包括：90-110重量份的氨甲環(huán)酸、0.01-0.05重量份依地酸二鈉以及1000重量份的含總有機(jī)碳在0.35mg/L以下的注射用水。
在一個具體實施方案中，所述注射劑的配方如下：
100g氨甲環(huán)酸；
0.01g依地酸二鈉；以及
1000mL的含總有機(jī)碳在0.35mg/L或0.4mg/L以下的注射用水。
優(yōu)選地，所述注射劑包括氨甲環(huán)酸、甘露醇以及含總有機(jī)碳在0.4mg/L以下的注射用 水。
優(yōu)選地，所述注射劑包括氨甲環(huán)酸、甘露醇以及含總有機(jī)碳在0.35mg/L以下的注射用水。
優(yōu)選地，所述注射劑包括：200-300重量份的氨甲環(huán)酸、450-550重量份甘露醇以及1000重量份的含總有機(jī)碳在0.4mg/L以下的注射用水。
優(yōu)選地，所述注射劑包括：200-300重量份的氨甲環(huán)酸、450-550重量份甘露醇以及1000重量份的含總有機(jī)碳在0.35mg/L以下的注射用水。
在一個具體實施方案中，所述注射劑的配方如下：
250g氨甲環(huán)酸；
500g甘露醇；以及
1000mL的含總有機(jī)碳在0.35mg/L或0.4mg/L以下的注射用水。
另一方面，本發(fā)明提供一種上述氨甲環(huán)酸注射劑的制備方法，該制備方法包括使用含總有機(jī)碳在0.4mg/L以下或0.35mg/L以下的注射用水來配制所述氨甲環(huán)酸注射劑。
優(yōu)選地，所述注射用水的電導(dǎo)率在20℃時不超過0.6μS.cm-1。
又一方面，本發(fā)明提供一種減少以氨甲環(huán)酸作為活性成分的注射劑中雜質(zhì)的方法，該方法包括：以氨甲環(huán)酸作為活性組分，含總有機(jī)碳在0.4mg/L以下或0.35mg/L以下的注射用水來配制所述注射劑。
優(yōu)選地，在所述方法中，使用含總有機(jī)碳在0.4mg/L以下的注射用水制成小容量注射劑或凍干粉針，或使用含總有機(jī)碳在0.35mg/L以下的注射用水制成大容量注射劑。
優(yōu)選地，所述注射用水的電導(dǎo)率在20℃時不超過0.6μS.cm-1。
再一方面，本發(fā)明提供上述氨甲環(huán)酸注射劑用于制備體外循環(huán)心臟外科手術(shù)圍術(shù)期中止血的藥物中的用途。
以下將對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。
本發(fā)明提供一種氨甲環(huán)酸注射劑，該注射劑使用含總有機(jī)碳在0.4mg/L以下或者0.35mg/L以下的注射用水來配制。
眾多研究已表明，水中種類繁多的有機(jī)物絕大部分是對人體有害的，有些甚至是致突變和致癌物。目前，我國有機(jī)污染物的排放是造成河流、湖泊污染的主要原因，從而也導(dǎo)致我國醫(yī)藥用水的安全隱患。目前，有機(jī)物已發(fā)現(xiàn)有幾百萬種，但是要對它們進(jìn)行區(qū)分和定量還存在一定的困難，總有機(jī)碳就是一個常用的有機(jī)物污染綜合指標(biāo)?？傆袡C(jī)碳指的是水中存在的溶解性和懸浮性有機(jī)碳的含量。純水中存在無機(jī)碳(IC)和有機(jī)碳(TOC)兩 種形式的總碳(TC)，TOC包含非揮發(fā)性有機(jī)碳(NPOC)和揮發(fā)性有機(jī)碳(POC)。國內(nèi)外對注射用水的控制不盡相同，大部分控制TOC時，要求不高于0.5mg/L。近年來，我國已慢慢開始重視了醫(yī)藥用水中TOC控制，但并未闡明其對成品制劑的影響，而在氨甲環(huán)酸注射制劑生產(chǎn)過程中，本申請的發(fā)明人出人意料地發(fā)現(xiàn)，將注射用水中總有機(jī)碳控制在0.4mg/L以下制成小容量注射劑或凍干粉針，或注射用水中總有機(jī)碳控制在0.35mg/L以下制成大容量注射劑，其成品的雜質(zhì)含量降低50％左右，其效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)超乎想象。同時，還發(fā)現(xiàn)，控制注射用水中TOC后，成品的不溶性微粒居然也大幅度下降。
在實際生產(chǎn)中，可以采用多種手段方法控制制劑生產(chǎn)過程中注射用水的TOC，現(xiàn)舉例一種降低注射用水的TOC的方法，但是并不限于所述的水預(yù)處理方法。
舉例如下：本發(fā)明可以通過如下水預(yù)處理方法，原水箱--沙濾--碳濾--一級反滲透--中間水箱--二級反滲透--納濾(膜的孔徑范圍在納米級(0.1nm～2nm))--注射用水箱。為得到注射用水TOC在0.4mg/L以下，必要時，可增加納濾次數(shù)(2～3次)，使注射用水中TOC更低。
通過對由不同水質(zhì)配制的氨甲環(huán)酸輸液劑的對比研究發(fā)現(xiàn)，水中TOC越高，其制劑中雜質(zhì)增加就越多，而且是隨著時間的延長，增加的越明顯。
正是發(fā)現(xiàn)了輸液制劑中，由于對所用注射用水的TOC加以控制，結(jié)果使得制劑中雜質(zhì)總量由原來的0.5％左右降至0.25％左右，各個雜質(zhì)均可控制在0.05％以下，有效控制了產(chǎn)品質(zhì)量，連續(xù)產(chǎn)業(yè)化幾十批，批批穩(wěn)定，本發(fā)明人又繼續(xù)對氨甲環(huán)酸注射劑及凍干粉針劑(包括自制與市售樣品)進(jìn)行了相應(yīng)的制備及質(zhì)量研究。
本發(fā)明正是通過仔細(xì)的對比研究發(fā)現(xiàn)，氨甲環(huán)酸注射液的產(chǎn)品質(zhì)量與其配液時所用的注射用水的TOC有著緊密地聯(lián)系，只要將注射用水TOC控制在0.4mg/L以下，那么該方法所能控制的氨甲環(huán)酸小容量注射劑或凍干粉針劑的雜質(zhì)總量就可以得到有效控制。
本發(fā)明充分考慮到大容量注射劑由于制備工藝過程中需要經(jīng)過高溫滅菌，所以更容易導(dǎo)致雜質(zhì)增加，因此，在配制大容量注射劑時，將注射用TOC更嚴(yán)格地控制在0.35mg/L以下。
更具體地說，本發(fā)明提供的一種減少以氨甲環(huán)酸作為活性組分的注射劑中雜質(zhì)的方法，該方法包括：以氨甲環(huán)酸作為活性組分，使用TOC在0.4mg/L以下的注射用水制成小容量注射劑或凍干粉針，或使用在TOC 0.35mg/L以下的注射用水制成大容量注射劑。
按照歐洲藥典EP8.0中氨甲環(huán)酸的檢測方法，對氨甲環(huán)酸注射劑中雜質(zhì)進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示：氨甲環(huán)酸注射劑配液時，一定要控制所用注射用水的TOC，配制小容量注射劑或 凍干粉針時其注射用水TOC應(yīng)在0.4mg/L以下，而大容量注射劑其注射用水TOC應(yīng)在0.35mg/L以下，只有這樣，才能有效降低注射劑中雜質(zhì)含量，從而提高以氨甲環(huán)酸作為活性組分的注射劑的質(zhì)量。因此，通過本發(fā)明研究成果，發(fā)明人對氨甲環(huán)酸注射劑型的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于雜質(zhì)檢查項進(jìn)行修訂，對雜質(zhì)限度具體規(guī)定為：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)置的雜質(zhì)包括雜質(zhì)A：反式-4，4-(二亞甲基)二(環(huán)烷酸)含量不高于0.05％，雜質(zhì)B：順式-對氨甲基環(huán)己烷甲酸含量不高于0.05％，雜質(zhì)C：4-氨甲基-1-環(huán)己烯甲酸含量不高于0.05％，雜質(zhì)D：對氨甲基苯甲酸含量不高于0.05％，其他任何一個單雜含量均不高于0.05％，總雜質(zhì)不高于0.25％。同時，氨甲環(huán)酸原料藥中各類雜質(zhì)控制的限度定應(yīng)不得超過制劑中各種類雜質(zhì)控制限度。
本發(fā)明提供了一種減少以氨甲環(huán)酸作為活性組分的注射劑中雜質(zhì)的方法，其所控制的雜質(zhì)限度可以有效、穩(wěn)定地控制產(chǎn)品質(zhì)量，但對于氨甲環(huán)酸注射劑的雜質(zhì)檢測方法而言，并不限于上述一種方法。
本發(fā)明提供了一種適用于工業(yè)化大生產(chǎn)的高純度氨甲酸注射制劑，使氨甲環(huán)酸注射劑在臨床應(yīng)用中，單次安全有效使用劑量可以達(dá)到10g以上，甚至達(dá)到20g，尤其是在心臟外科手術(shù)體外循環(huán)圍術(shù)期適應(yīng)癥的應(yīng)用。正是因為對注射制劑中工藝用水的指標(biāo)進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制，從而提升了制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，重要的是有效降低臨床中因雜質(zhì)導(dǎo)致的潛在不良反應(yīng)的發(fā)生。
本發(fā)明所制備的高純度氨甲環(huán)酸，將雜質(zhì)A、B、C、D及其他任何一雜質(zhì)限度由0.1％(w/w)提高到了0.05％(w/w)，從而有效的控制了伴隨氨甲環(huán)酸給藥劑量提高所帶來的雜質(zhì)引入量提高的風(fēng)險因素，即控制雜質(zhì)限度為不高于0.05％(w/w)，保證其雜質(zhì)引入量遠(yuǎn)低于可能導(dǎo)致臨床潛在不良反應(yīng)發(fā)生的雜質(zhì)限度。在臨床實驗研究中，我們令人驚奇地發(fā)現(xiàn)了氨甲環(huán)酸雜質(zhì)含量和藥物不良反應(yīng)的關(guān)系，當(dāng)總雜質(zhì)含量降低到0.25％時，藥物不良反應(yīng)發(fā)生率則會大幅度地下降。從而進(jìn)一步證明了本發(fā)明所制備的高純度氨甲環(huán)酸當(dāng)總劑量高達(dá)到10g時同樣是安全的。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的詳細(xì)描述，給出的實施例僅為了闡明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。
實施例1 氨甲環(huán)酸氯化鈉注射液(100ml∶1.0g)
實施例2 氨甲環(huán)酸氯化鈉注射液(100ml∶0.5g)
實施例3 氨甲環(huán)酸注射液(5ml∶0.5g)
實施例4 注射用氨甲環(huán)酸(0.5g)
比較例1：氨甲環(huán)酸氯化鈉注射液(100ml∶1.0g)
處方組成與實施例1相同，僅是注射劑配液時所用注射用水TOC為0.5mg/L。
比較例2：氨甲環(huán)酸氯化鈉注射液(100ml∶0.5g)
處方組成與實施例2相同，僅是注射劑配液時所用注射用水TOC為0.5mg/L。
比較例3：氨甲環(huán)酸注射液(5ml∶0.5g)
處方組成與實施例3相同，僅是注射劑配液時所用注射用水TOC為0.5mg/L。
比較例4：注射用氨甲環(huán)酸(0.5g)
處方組成與實施例4相同，僅是注射劑配液時所用注射用水TOC為0.5mg/L。
試驗例1：
將實施例1-4以及比較例1-4中制備的注射劑按照我國現(xiàn)行藥典及藥品穩(wěn)定性考察指導(dǎo)原則相關(guān)要求進(jìn)行穩(wěn)定性測試，以考察其中雜質(zhì)的含量。結(jié)果見表1和表2。
表1 使用含不同TOC的注射用水所配制氨甲環(huán)酸氯化鈉輸液劑的穩(wěn)定性試驗中雜質(zhì)考察結(jié)果
表2 使用含不同TOC注射用水所配制氨甲環(huán)酸小容量和凍干制劑的雜質(zhì)穩(wěn)定性考察結(jié)果
試驗例2
將按實施例1制備的高純度氨甲環(huán)酸注射制劑應(yīng)用于臨床，研究共計入選受試者240例，手術(shù)時間約為6個小時，氨甲環(huán)酸大劑量(30mg/kg的負(fù)荷量+20mg/kg/h的維持量)、中劑量(20mg/kg的負(fù)荷量+15mg/kg/h的維持量)、小劑量(10mg/kg的負(fù)荷量+10mg/kg/h的維持量)和空白對照組分別為60例、59例、61例和60例。研究中共脫落/剔除4例病例，其中2例入組后發(fā)現(xiàn)術(shù)前血小板計數(shù)過低，不滿足入選標(biāo)準(zhǔn)；1例入組后發(fā)現(xiàn)術(shù)前肝功能異常，不滿足入選標(biāo)準(zhǔn)；1例患者自動出院，未完成研究。實際觀察統(tǒng)計的236例中，瓣膜性心臟病患者共176例，在氨甲環(huán)酸大劑量、中劑量、小劑量和空白對照組中分別為45例、42例、46例和43例；冠狀動脈粥樣硬化心臟病患者共60例，在氨甲環(huán)酸的3個劑量組和空白對照組中各15例。所有受試者術(shù)前人口學(xué)資料和體格檢查、既往病史、凝血功能和細(xì)胞因子檢查沒有組間差異。氨甲環(huán)酸大劑量、中劑量、小劑量和空白對照組的術(shù)后引流量分別為505.77±208.08ml、658.81±320.16ml、729.44±352.29ml和991.6±420.87ml，見表3。研究無嚴(yán)重不良事件發(fā)生。有22例一般不良事件，包括術(shù)后總膽紅素、術(shù)后直接膽紅素升高、術(shù)后血肌酐升高、術(shù)后尿素氮升高和術(shù)后谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶升高。在氨甲環(huán)酸大劑量、中劑量、小劑量和空白對照組中，一般不良事件的發(fā)生率分別為8.06％、8.47％、9.83％和10％，無統(tǒng)計學(xué)差異(p＞0.05)。所有一般不良事件經(jīng)試驗者評述，均判斷為與氨甲環(huán)酸可能無關(guān)和肯定無關(guān)，見表4。
表3 各組間術(shù)后引流量的比較
大、中、小劑量組與對照組術(shù)后引流量比較，有統(tǒng)計學(xué)差異P＜0.05；
大劑量組與中、小劑量組術(shù)后引流量比較，有統(tǒng)計學(xué)差異P＜0.05
表4 各組間不良事件發(fā)生率
p＞0.05，無統(tǒng)計學(xué)差異
試驗例3
將按本發(fā)明實施例1制備的氨甲環(huán)酸注射劑(樣品1)(雜質(zhì)A為0.044％，雜質(zhì)B為0.008％，雜質(zhì)C為0.005％，雜質(zhì)D為0.042％，其他最大單一雜質(zhì)為0.040％，總雜為0.142％)及按中國專利CN100579511C生產(chǎn)的氨甲環(huán)酸注射劑(樣品2)(雜質(zhì)A為0.068％、雜質(zhì)B為0.049％、雜質(zhì)C為0.038％、雜質(zhì)D為0.079％、其他最大單一雜質(zhì)為0.068％，總雜質(zhì)為0.429％)進(jìn)行臨床對比試驗。
擇期行體外循環(huán)冠狀動脈旁路移植術(shù)患者200例，年齡18～64歲，體重50～100kg，ASA分級I～I(xiàn)V級。無心臟手術(shù)史，術(shù)前未服用抗血小板藥物，肝、腎功能未見異常。采用隨機(jī)雙盲法，將患者隨機(jī)分為2組(n＝100)：樣品1組和樣品2組。兩組均給予30mg/kg的負(fù)荷量(輸注時間20min)，隨后給予20mg/kg/h的維持量至手術(shù)結(jié)束。結(jié)果，樣品1組與樣品2組比較，術(shù)中出血量、術(shù)后總引流量和術(shù)后輸血量無明顯差異(P＞0.05)，見表5；兩組不良事件發(fā)生率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，研究無嚴(yán)重不良事件發(fā)生。一般不良事件包括胃腸道反應(yīng)、肝腎功能異常、癲癇和血栓。樣品1組不良事件發(fā)生率為8％，經(jīng)研究者判斷為與試驗藥品氨甲環(huán)酸的雜質(zhì)可能無關(guān)，樣品2組不良事件發(fā)生率為24％，經(jīng)研究者判斷為與試驗藥品氨甲環(huán)酸的雜質(zhì)可能有關(guān)，見表6、7。
表5 兩組患者出血和輸血情況的比較
注：無統(tǒng)計學(xué)差異，P＞0.05
表6 兩組患者不良事件發(fā)生例數(shù)
表7 兩組患者不良事件發(fā)生率的比較
注：兩組間不良事件發(fā)生率比較，有統(tǒng)計學(xué)差異P＜0.05 。