本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種神經(jīng)病理性疼痛治療用藥物組合物及其用途，具體涉及一種含有銀杏內(nèi)酯B和瑞替加濱的藥物組合物及其用途。

背景技術(shù)：

神經(jīng)病理性疼痛是慢性疼痛的兩種主要類型之一。產(chǎn)生慢性傷害感受性/炎癥性疼痛時(shí)，機(jī)體組織受到損傷，并通過傳導(dǎo)傷害感受性刺激的神經(jīng)通路形成疼痛信號(hào)的慢性傳遞。而神經(jīng)病理性疼痛通常沒有組織損傷，或是在外周神經(jīng)損傷后發(fā)生，疼痛傳導(dǎo)通路功能紊亂，導(dǎo)致疼痛信號(hào)的異常慢性傳遞。某些情況下(如癌癥)，可同時(shí)具有這兩種疼痛類型。

形成神經(jīng)病理性疼痛時(shí)，可以有明顯的神經(jīng)損傷，也可以沒有。未累及運(yùn)動(dòng)神經(jīng)纖維的神經(jīng)損傷通常難以診斷。損傷可能發(fā)生在周圍或者中樞傷害感受性神經(jīng)通路的任何水平，但由于分布位置的緣故，周圍神經(jīng)的損傷更為常見。目前神經(jīng)病理性疼痛的產(chǎn)生機(jī)制并未完全明確，但該方面的研究非?；钴S。在許多患者中可能有多種機(jī)制的參與這種情況下，這種情況與其它一些復(fù)雜的慢性疾病非常類似，如哮喘或慢性心衰，因此可能需要針對(duì)各種機(jī)制的不同藥物來治療。

瑞替加濱是一種新型抗癲癇藥物，由葛蘭素史克和Valeant公司合作開發(fā)，是同時(shí)作為鉀離子通道的開啟者和γ-氨基丁酸(GABA)的增強(qiáng)劑。瑞替加濱的雙重作用機(jī)制，可以從不同機(jī)制上控制癲癇的發(fā)作，緩解病情。為神經(jīng)元鉀通道開放劑。神經(jīng)元鉀通道開放劑瑞替加濱(retigabine)治療頑固性癲癇患者的癲癇部分發(fā)作有較好療效。目前國(guó)際市場(chǎng)上抗癲癇藥物的發(fā)展熱點(diǎn)主要集中在高效、低風(fēng)險(xiǎn)和低副作用上。瑞替加濱的出現(xiàn)，是間斷發(fā)作性癲癇治療的一項(xiàng)潛在的重大進(jìn)步，給間斷發(fā)作性癲癇患者帶來了新的希望。

銀杏內(nèi)酯B為在銀杏內(nèi)酯中銀杏內(nèi)酯B(BN52021)的活性生理活性最強(qiáng)，是迄今發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的血小板活化因子拮抗劑，可在臨床上用于治療血栓、急性胰腺炎和心血管疾病，還可用于轉(zhuǎn)移性癌癥的治療，對(duì)損傷神經(jīng)元也有保護(hù)作用，同時(shí)具有抗氧化，延緩衰老的作用。銀杏內(nèi)酯b注射液成分單一明確，療效顯著，安全性好，市場(chǎng)接受度高，為近年來不可多得的新型中藥靜脈注射劑型。銀杏內(nèi)酯b注射液功能主治化痰祛瘀，通脈舒絡(luò)。用于治療缺血性腦中風(fēng)的痰瘀阻絡(luò)證?，F(xiàn)有的治療神經(jīng)病理性疼痛的藥物中，尚無以瑞替加濱和銀杏內(nèi)酯B為活性成分的藥物組合物。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了克服現(xiàn)有神經(jīng)性疼痛治療藥物治療效果不理想，副作用大的缺陷，本發(fā)明提供一種新的神經(jīng)性疼痛治療用藥物組合物，該藥物組合物的優(yōu)點(diǎn)是組分明確，效果確切，治療效果顯著，毒副作用低。

本發(fā)明藥物組合物含有藥物活性成分銀杏內(nèi)酯B和瑞替加濱，本發(fā)明人通過大量藥理實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該藥物組合物在治療神經(jīng)性疼痛時(shí)表現(xiàn)出顯著的治療作用。本發(fā)明實(shí)施例7證明銀杏內(nèi)酯B瑞替加濱藥物組合物對(duì)各種神經(jīng)病理性疼痛的治療效果顯著優(yōu)于各單藥組對(duì)神經(jīng)病理性疼痛的治療效果，兩種藥物對(duì)神經(jīng)病理性疼痛的治療體現(xiàn)出明顯的協(xié)同作用。本發(fā)明實(shí)施例8表明銀杏內(nèi)酯B和瑞替加濱組成復(fù)方后，不論與銀杏內(nèi)酯B單藥組相比，還是與瑞替加濱單藥組相比，其對(duì)糖尿病神經(jīng)病理性疼痛大鼠模型均表現(xiàn)出顯著的治療作用，且該治療效果隨著治療時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著增強(qiáng)。銀杏內(nèi)酯B和瑞替加濱在治療糖尿病引發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛方面表現(xiàn)出顯著的協(xié)同作用。

本發(fā)明中銀杏內(nèi)酯B和瑞替加濱聯(lián)合應(yīng)用組成復(fù)方后，藥物成分明確、性質(zhì)穩(wěn)定、相互影響較小，便于藥物制劑質(zhì)量控制的建立，有利于生產(chǎn)制備時(shí)質(zhì)量的控制，非常適合工業(yè)化大生產(chǎn)。

本發(fā)明所述的藥物組合物包含兩種藥物活性成分：

1)銀杏內(nèi)酯B；

2)瑞替加濱。

如上所述的藥物組合物中，銀杏內(nèi)酯B和瑞替加濱的重量比為1：0.01-500，優(yōu)選地，銀杏內(nèi)酯B和瑞替加濱的重量比為1：0.2-300；進(jìn)一步優(yōu)選地，銀杏內(nèi)酯B和瑞替加濱的重量比為1：1.5-24。

本發(fā)明藥物組合物種還可以含有制劑工藝上可接受的輔料賦形劑制備成合適的用藥劑型。本發(fā)明的藥物組合物劑型優(yōu)選為口服藥物劑型?？诜幬飫┬涂梢詾槠瑒?、緩控釋片劑、膠囊劑、口服液、顆粒劑等。所述片劑含有一種或多種如下輔料：淀粉、糊精、低取代羥丙基纖維素、硬脂酸鎂，微晶纖維素，羥丙基纖維素，淀粉漿乳糖、甘露醇、微粉硅膠、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮。所述膠囊劑或顆粒劑含有一種或多種如下輔料：可壓性淀粉、乳糖、低取代羥丙基纖維素、微晶纖維素、微粉硅膠。所述緩釋劑或控釋劑含有一種或多種如下輔料：可壓性淀粉、乳糖、低取代羥丙基纖維素、微晶纖維 素、微粉硅膠、卡波姆，海藻酸鈉、海藻酸鈣，甲殼素。

按照本發(fā)明所提供的藥物組合物制備成的藥物劑型中，所述制劑中每一制劑單位含有瑞替加濱的有效量為10mg-500mg，含有銀杏內(nèi)酯B的有效量為10mg-250mg。

本發(fā)明的另一目的是公開藥物組合物在制備治療神經(jīng)病理性疼痛藥物中的用途。本發(fā)明藥物組合物對(duì)神經(jīng)病理性疼痛取得了良好的治療效果，尤其在治療糖尿病引發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛時(shí)取得了明顯的協(xié)同作用，顯著優(yōu)于瑞替加濱和銀杏內(nèi)酯B單獨(dú)用藥時(shí)的治療效果。本發(fā)明藥物組合物治療神經(jīng)病理性疼痛，尤其是糖尿病引發(fā)的神經(jīng)性病理性疼痛時(shí)，優(yōu)選為口服給藥。藥物組合物中，瑞替加濱的給藥劑量為5mg/kg.d-40mg/kg.d，優(yōu)選為10mg/kg.d-40mg/kg.d；銀杏內(nèi)酯B的給藥劑量為1mg/kg.d-3mg/kg.d，優(yōu)選為1.5mg/kg.d-2.5mg/kg.d。

本藥物組合物的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在下列方面：

(1)本發(fā)明藥物組合物中銀杏內(nèi)酯B和瑞替加濱在治療神經(jīng)病理性疼痛尤其是糖尿病引發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛時(shí)，顯著優(yōu)于各單藥治療組，體現(xiàn)出很強(qiáng)的協(xié)同作用。另外，本發(fā)明藥物組合物在長(zhǎng)期用藥過程中體現(xiàn)出效果積累效應(yīng)，因此可以預(yù)期長(zhǎng)期用藥可以顯著改善神經(jīng)病理性疼痛，并可能徹底達(dá)到治愈的目的。

(2)在治療過程中，合并使用作用機(jī)制不同的藥物可以增強(qiáng)對(duì)神經(jīng)病理性疼痛的治療效果，使多種危險(xiǎn)因素或并存疾病得到最佳控制，有利于保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能，進(jìn)一步減少毒副作用發(fā)生率。

(3)由于在組成固定復(fù)方時(shí)，各單藥劑量均有所減少，使藥物的副作用降低，而治療費(fèi)用卻大大減少，因此固定復(fù)方給藥使得治療的效益/費(fèi)用比明顯提高，從而使患者的治療依從性大大提高。

(4)本發(fā)明藥物組合物尤其對(duì)糖尿病引發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛有效，有效地緩解該類病人的疼痛，且對(duì)糖尿病本身也起到一定和緩解作用，從而使患者的生活質(zhì)量大大改善。

具體實(shí)施方式

現(xiàn)通過如下實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的內(nèi)容，其中實(shí)施例1～6為制劑實(shí)施方式，實(shí)施例7～8為藥效學(xué)實(shí)施方式，但本發(fā)明的應(yīng)用范圍不僅僅限于下列實(shí)施例。

實(shí)施例1 瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B復(fù)方片劑的制備

制備工藝：先將瑞替加濱和環(huán)糊精放入研缽中研磨混合均勻，依次加入羧甲基淀粉鈉、可壓性淀粉混合均勻，最后加入銀杏內(nèi)酯B混勻，用5％PVP的無水乙醇溶液作粘合劑制粒，40℃干燥，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，即得。

實(shí)施例2 瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B復(fù)方片劑的制備

制備工藝：先將瑞替加濱和環(huán)糊精放入研缽中研磨混合均勻，依次加入羧甲基淀粉鈉、可壓性淀粉混合均勻，最后加入銀杏內(nèi)酯B混勻，用5％PVP的無水乙醇溶液作粘合劑制粒，40℃干燥，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，即得。

實(shí)施例3 瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B復(fù)方片劑的制備

制備工藝：先將瑞替加濱和β-環(huán)糊精放入研缽中研磨混合均勻，依次加入羧甲基淀粉鈉、微晶纖維素、微粉硅膠混合均勻，最后加入銀杏內(nèi)酯B混勻，粉末直接壓片，即得。

實(shí)施例4 瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B膠囊劑的制備

制備工藝：先將瑞替加濱和β-環(huán)糊精放入研缽中研磨混合均勻，依次加入微晶纖維素、微粉硅膠混合均勻，最后加入銀杏內(nèi)酯B混勻，裝填膠囊殼，即得。

實(shí)施例5 瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B顆粒劑的制備

制備工藝：先將瑞替加濱與β-環(huán)糊精混合均勻，然后加入銀杏內(nèi)酯B、微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、十二烷基硫酸鈉過16目篩后混合，后再與甜橙香精、阿斯巴甜混合均勻?；旌衔镉?％聚維酮乙醇液制粒，干燥，整粒，分裝，即得。

實(shí)施例6 瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B緩釋片劑的制備

制備工藝：稱取處方量的瑞替加濱，銀杏內(nèi)酯B，卡波姆，羥丙基纖維素，β-環(huán)糊精混合均勻。另取適宜量的8％淀粉漿溶液，加入混合粉末中，混合均勻后制軟材，通過16目篩制粒，60℃以下干燥。干燥后完成后用18目篩進(jìn)行整粒，篩出干粒中的細(xì)粉，與過篩的硬脂酸鎂混勻，然后再與干顆?；旌途鶆颍瑝浩?，即得。

實(shí)施例7 瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B藥物組合物對(duì)神經(jīng)病理性疼痛的治療作用

1.實(shí)驗(yàn)造模及給藥

(1)瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B藥物組合物對(duì)大鼠甲醛致痛的影響

50只SD大鼠隨機(jī)分成5組，每組10只，雌雄各半，造模前1h灌胃給予各組藥物(10ml/kg)(如表1所示)，模型組灌胃給純水。用l00L微量注射器在大鼠左足跖皮下注射2％的甲醛100μL，注射甲醛后，立即觀察各組大鼠的行為學(xué)變化，每5min記錄1次，持續(xù)lh，觀察者不清楚實(shí)驗(yàn)的分組情況(雙盲)。實(shí)驗(yàn)過程中避免強(qiáng)光，保持環(huán)境安靜。

將大鼠疼痛分為4級(jí)：0級(jí)為兩后腳掌平放在地面，活動(dòng)無異常；l級(jí)為注射腳掌輕微接觸地面，活動(dòng)時(shí)有跛行；2級(jí)為注射腳掌抬起，不接觸地面；3級(jí)為大鼠舔咬或搖動(dòng)注射腳掌。

痛級(jí)(pain intensity scoring，PIS)的計(jì)算方法：PIS＝(Tl+2×T2+3×T3)/(5×60)，其中Tl，T2，T3分別是5min內(nèi)出現(xiàn)l，2，3級(jí)的時(shí)間。

表1實(shí)驗(yàn)大鼠分組及給藥劑量

(2)瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B藥物組合物對(duì)大鼠熱板致痛的影響

雌性SD大鼠50只，隨即分為5組，各組動(dòng)物按表2灌胃給藥(10ml/kg)，模型組灌純水，每天兩次，第三天下午給藥后半小時(shí)進(jìn)行測(cè)定，實(shí)驗(yàn)時(shí)控制室溫18℃～21℃。將大鼠置于熱板儀上(熱板溫度控制在55℃)，用秒表記錄大鼠自放在熱板上至出現(xiàn)舔后足所需時(shí)間，作為該鼠的痛閾值。每只大鼠測(cè)量3次痛閾值，每只大鼠2次測(cè)量時(shí)間間隔40min。

表2實(shí)驗(yàn)大鼠分組及給藥劑量

(3)瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B對(duì)大鼠熱水致痛的影響

50只SD大鼠隨機(jī)分5組，每組10只，雌雄各半，灌胃給予各組藥物(10ml/kg)后1h測(cè)定痛閾值(如表2)，模型組灌胃給予純水。先將leica攤片機(jī)溫度設(shè)定在48℃，測(cè)定前預(yù)先在所有大鼠的尾巴上用油性筆作一標(biāo)記，此標(biāo)記與大鼠尾巴尖部的距離約為5cm，然后將大鼠用鼠袋包上，露出尾巴，并將大鼠的尾巴放入攤片機(jī)水內(nèi)，使得液面與大鼠尾巴上的標(biāo)記重合，大鼠尾巴與熱水接觸時(shí)立刻用秒表記時(shí)，記錄大鼠尾巴第一次從熱水中縮起的時(shí)間，每只大鼠測(cè)量3次致痛時(shí)間(每只大鼠2次測(cè)量時(shí)間間隔為10min，否則容易將大鼠燙傷)，取3次致痛時(shí)間的均數(shù)為該大鼠的痛閾。

(4)瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B對(duì)冰醋酸致小鼠扭體試驗(yàn)的影響

小鼠腹腔注射醋酸，引起腹腔深部大面積而較持久的疼痛刺激，致使小鼠產(chǎn)生扭體反應(yīng)，給藥后1h，i.p 0.6％醋酸生理鹽水溶液0.1ml/10g，記錄自注射醋酸致痛后每只小鼠在20min內(nèi)出現(xiàn)的扭體反應(yīng)的時(shí)間和次數(shù)。

表3實(shí)驗(yàn)大鼠分組及給藥劑量

2統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有數(shù)據(jù)均輸入SPSS l1.5進(jìn)行t檢驗(yàn)，各組計(jì)量數(shù)據(jù)均采用士s表示。

3實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B對(duì)大鼠甲醛致痛的影響

實(shí)驗(yàn)組大鼠單側(cè)足底注入2％甲醛0.1mL后，注射部逐漸紅腫，給藥完畢后動(dòng)物立即出現(xiàn)縮足和舔足等行為，在1h內(nèi)表現(xiàn)出明顯的雙相反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明各組藥物均不能減輕大鼠第一相評(píng)分，復(fù)方低劑量組在第二時(shí)相第15-20分鐘時(shí)段、第25-30分鐘時(shí)段和第40-50分鐘時(shí)段評(píng)分與模型組相比減輕(P＜0.05或P＜0.01)，復(fù)方高劑量組20-60分鐘評(píng)分均低于模型組(P＜0.05或P＜0.01)，瑞替加濱組在第25-35分鐘和40-50分鐘段評(píng)分顯著低于模型組(P＜0.01)，銀杏內(nèi)酯B組在第25-30分和40-50分鐘時(shí)間段評(píng)分顯著減輕(P＜0.05)。結(jié)果表明復(fù)方組呈現(xiàn)劑量依賴效應(yīng)，高劑量組評(píng)分低于低劑量組，其中在5-10分鐘、30-35分鐘和50-60分鐘差異具有顯著性意義。瑞替加濱組評(píng)分高于復(fù)方高劑量組，在55-60時(shí)間段差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。銀杏內(nèi)酯B組評(píng)分也高于復(fù)方高劑量組，在第25-40分鐘段差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而且給藥各組評(píng)分的峰值出現(xiàn)的時(shí)間均比模型組推后。

3.2瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B對(duì)大鼠熱板致痛的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果(如表4)表明：復(fù)方低劑量組和復(fù)方高劑量組在給藥后與模型組相比痛閾值明顯升高(P＜0.01)，與瑞替加濱單藥高量組以及銀杏內(nèi)酯B單藥高量組相比痛閾值也有升高(P＜0.05)，表明瑞替加濱和銀杏內(nèi)酯B在升高痛閾值方面存在著明顯的協(xié)同作用。其中復(fù)方組給藥后30min，70min和110min后，痛閾值持續(xù)升高表明復(fù)方組在治療方面表現(xiàn)出持續(xù)得效果積累效應(yīng)。復(fù)方低組在升高痛閾值方面優(yōu)于瑞替加濱單藥高量組和銀杏內(nèi)酯B單藥高組，表現(xiàn)出顯著的協(xié)同作用。

表4瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B對(duì)大鼠熱板致痛作用的影響

與模型組相比^*P＜0.05，^**P＜0.01；與瑞替加濱組比^#P＜0.05，^##P＜0.01

與銀杏內(nèi)酯B組相比，^&P＜0.05，^&&P＜0.01；

3.3瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B對(duì)大鼠熱水致痛的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果(如表5)表明：給藥后1h測(cè)大鼠甩尾時(shí)間作為疼痛閾值，復(fù)方低劑量組、復(fù)方高劑量組、瑞替加濱組甩尾時(shí)間與對(duì)照組比較均明顯縮短(P＜0.01，P＜0.001，P＜0.01)。

表5瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B對(duì)大鼠熱水致痛疼痛閾值的影響

與模型組相比，^*P〈0.05，^**P〈0.01；

實(shí)施例8 瑞替加濱銀杏內(nèi)酯B藥物組合物對(duì)糖尿病引發(fā)神經(jīng)病理性疼痛的治療

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)用品

健康雄性SD大鼠120只，體重180～220g，SPF級(jí)，山東新時(shí)代藥業(yè)新藥安評(píng)中心提供。室溫20～25℃，室內(nèi)通風(fēng)良好，氨濃度小于20×10-6mL/m3，相對(duì)濕度為40％～70％，照明周期12h，大鼠飼養(yǎng)于不銹鋼鼠籠中，每籠4只，自由攝食、飲水。

鏈脲佐菌素(STZ，sigma公司生產(chǎn)，美國(guó))；ZH LUO/B型鼠尾光熱測(cè)痛儀、YLS 3E型電子壓痛儀均購(gòu)自安徽淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司。

1.2造模及篩選

120只大鼠隨機(jī)留取10只作為正常對(duì)照組，其余110只大鼠禁食12h后按75mg·kg-1 一次性腹腔注射STZ溶液(STZ溶液配制：將STZ溶于pH 4.2、0.1m mol/L檸檬酸緩沖液中，溶液現(xiàn)用現(xiàn)配，濃度為3.75％(W/V)即0.5mL/100g)。

血糖測(cè)定：造模7d后測(cè)尾靜脈血糖，血糖≥16m mol/L則為糖尿病大鼠，實(shí)驗(yàn)中有47只大鼠成功建成DM模型(模型組)。STZ注射前和注射后第7、21、35、49d檢測(cè)血糖，血糖低于16m mol/L則棄用。

機(jī)械痛閾測(cè)定：于STZ注射前(基礎(chǔ)狀態(tài))、注射后21、35、49d測(cè)定機(jī)械痛閾。將大鼠置于裝有音頻放大器的透明有機(jī)玻璃固定筒內(nèi)，鼠尾露筒外，在距尾尖5cm處標(biāo)記。大鼠適應(yīng)環(huán)境15min，待大鼠梳理和探究活動(dòng)消失后，將鼠尾標(biāo)記處置于電子壓痛儀壓頭處，向鼠尾施壓(每秒增加10g)，當(dāng)大鼠出現(xiàn)疼痛反應(yīng)如嘶鳴、掙扎則停止施壓，記錄施壓數(shù)據(jù)(g)，連續(xù)測(cè)定5次，每次間隔10min，取平均值作為機(jī)械痛閾值。若壓力值超過500g則剔除。

熱痛閾測(cè)定：測(cè)定時(shí)間點(diǎn)、準(zhǔn)備方法同機(jī)械痛閾。ZH LUO/B型鼠尾測(cè)痛儀的加熱溫度設(shè)定為49℃，達(dá)到設(shè)定值后將輻射光源對(duì)準(zhǔn)距尾尖4cm處，記錄從光照開始到鼠尾翹起的時(shí)間(s)。若光照時(shí)間超過15s鼠尾仍未翹起則剔除，測(cè)定5次，每次間隔10min，取均值作為熱痛閾值。

造模結(jié)果：注射鏈脲佐菌素的大鼠經(jīng)血糖測(cè)定篩選、機(jī)械痛閾和熱痛閾篩選后剩余大鼠即為造模成功的糖尿病神經(jīng)病理性疼痛大鼠，大鼠造模成功96只，造模成功率為87.2％。

1.3動(dòng)物分組及給藥

選取成功造模的糖尿病神經(jīng)病理性大鼠60只，隨機(jī)分成六組，每組十只，分別給予下列藥物，另增加正常對(duì)照組。

正常組：灌胃給予等體積的蒸餾水

模型組：灌胃給予等體積的蒸餾水

瑞替加濱高組：灌胃給予300mg/kg的瑞替加濱

瑞替加濱低組：灌胃給予10mg/kg的瑞替加濱

己酮高組：灌胃給予50mg/kg的銀杏內(nèi)酯B

己酮低組：灌胃給予1mg/kg的銀杏內(nèi)酯B

復(fù)方一組：灌胃給予10mg/kg的瑞替加濱和50mg/kg的銀杏內(nèi)酯B的藥物組合物

復(fù)方二組：灌胃給予10mg/kg的瑞替加濱和1mg/kg銀杏內(nèi)酯B的藥物組合物

復(fù)方三組：灌胃給予300mg/kg的瑞替加濱和1mg/kg銀杏內(nèi)酯B藥物組合物

復(fù)方四組：灌胃給予300mg/kg的瑞替加濱和50mg/kg銀杏內(nèi)酯B藥物組合物

各給藥組藥物用適量蒸餾水溶解，灌胃給藥，每天給藥一次。給藥7d、14d、21d后，測(cè) 定各給藥組大鼠的機(jī)械痛閾值和熱痛閾值。各給藥組測(cè)定結(jié)果如表所示。

表6復(fù)方對(duì)糖尿病神經(jīng)病理性大鼠的治療作用

與正常組相比，^**P〈0.01；與模型組相比，^#P〈0.05，^##P〈0.01；

與瑞替加濱高組相比，^￥P〈0.05，^￥￥P〈0.01；與瑞替加濱低組相比，^&P〈0.05，^&&P〈0.01；

與銀杏內(nèi)酯B高組相比，^＠P〈0.05，^＠＠P〈0.01；與銀杏內(nèi)酯B低組相比，^％P〈0.05，^％％P〈0.01；

由上表可以看出，模型組與正常組相比，機(jī)械痛閾和熱痛閾下降顯著(P〈0.01)，表明采用注射鏈脲佐菌素所得糖尿病神經(jīng)病理性疼痛大鼠模型理想，符合實(shí)驗(yàn)需要。瑞替加濱僅在高劑量組時(shí)對(duì)糖尿病神經(jīng)病理性疼痛大鼠機(jī)械痛閾和熱痛閾有一定的升高作用，且其治療效果并不隨治療時(shí)間延長(zhǎng)而增強(qiáng)。銀杏內(nèi)酯B的高劑量組和低劑量組均不引起糖尿病神經(jīng)病理性疼痛大鼠的機(jī)械痛閾和熱痛閾的改變。但銀杏內(nèi)酯B與瑞替加濱組成復(fù)方時(shí)，則對(duì)糖尿病引發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛表現(xiàn)出顯著的治療作用，且隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng)，糖尿病神經(jīng)病理性疼痛大鼠的機(jī)械痛閾和熱痛閾逐漸接近正常大鼠組。復(fù)方組(復(fù)方一、二、三、四組)無論與銀杏內(nèi)酯B單藥組相比，還是與瑞替加濱單藥組相比在對(duì)糖尿病引發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛方面均表顯著顯著的治療作用，即銀杏內(nèi)酯B和瑞替加濱在治療糖尿病引 發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛方面存在顯著的協(xié)同作用。