相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用

本申請(qǐng)要求2014年8月25日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)no.62/041,258和2014年8月25日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)no.62/041,272的優(yōu)先權(quán)，其內(nèi)容通過(guò)引用整體并入本文。

本發(fā)明在其一些實(shí)施方案中涉及治療，更具體地但非排他地涉及用于治療人類(lèi)受試者的炎癥、呼吸道感染或囊性纖維化的方法和裝置。

背景技術(shù)：

炎癥是血管組織對(duì)有害刺激如病原體、受損細(xì)胞或刺激物的復(fù)雜生物反應(yīng)的一部分。急性炎癥的典型癥狀是疼痛、熱、發(fā)熱、發(fā)紅、腫脹和功能喪失。

呼吸道感染(rti)是全世界住院、經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)、死亡率和發(fā)病率的主要原因。僅在美國(guó)(us)，rti每年導(dǎo)致超過(guò)150萬(wàn)的住院。細(xì)支氣管炎被定義為小氣道的感染。它也是嬰兒早期急性下呼吸道感染(alri)的最常見(jiàn)的表現(xiàn)，并且是全球兒童死亡的主要原因。病毒性細(xì)支氣管炎是目前美國(guó)兒科住院的最常見(jiàn)原因，幾乎占全因嬰兒住院的20％。

囊性纖維化(cf)是一種遺傳性單基因疾病，其表現(xiàn)為引起嚴(yán)重肺損傷和營(yíng)養(yǎng)缺乏的多系統(tǒng)疾病。cf會(huì)影響產(chǎn)生粘液、汗液和消化液的細(xì)胞。缺陷基因?qū)е逻@些分泌物變稠和變粘，并影響器官如肺和胰腺有效地發(fā)揮作用的能力。被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者高度易受環(huán)境機(jī)會(huì)性細(xì)菌感染，從而導(dǎo)致長(zhǎng)期和慢性肺部感染。這導(dǎo)致由于過(guò)度肺組織破壞而被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的預(yù)期壽命降低。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，提供了一種治療人類(lèi)受試者中的炎性疾病、呼吸道感染、或囊性纖維化或囊性病癥的方法，其包括使人類(lèi)受試者間歇性吸入包含濃度至少為160ppm的一氧化氮的氣體混合物，從而治療炎性疾病、呼吸道感染或囊性纖維化。

根據(jù)本文提供的一些實(shí)施方案，人類(lèi)受試者中的至少一種炎性生物標(biāo)志物的水平降低。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，提供了降低人類(lèi)受試者的炎性生物標(biāo)志物水平的方法，其包括使人類(lèi)受試者間歇性吸入包含濃度至少為160ppm的一氧化氮的氣體混合物，從而降低炎性生物標(biāo)志物的水平。

根據(jù)本文提供的一些實(shí)施方案，炎性生物標(biāo)志物選自由c-反應(yīng)蛋白(crp)、tnfα、tnfrii、il-1β、il-1ra/il-1f3、il-2、il-4、il-5、il-6、il-8、cxcl8/il-8、il-10、il-12p70、il-17a、gm-csf、icam-1、ifn-γ、mmp-8、mmp-9、vegf和il-12p70、嗜中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶活性、α-1-抗胰蛋白酶(aat)、觸珠蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、免疫球蛋白、粒酶b(gzmb)、嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ecp)、嗜酸細(xì)胞活化趨化因子、類(lèi)胰蛋白酶、趨化因子cc基序配體18(ccl18/parc)、rantes(ccl5)、表面活性蛋白d(sp-d)、脂多糖(lps)-結(jié)合蛋白和可溶性分化簇14(scd14)所組成的組。

根據(jù)本文提供的一些實(shí)施方案，炎性生物標(biāo)志物是c-反應(yīng)蛋白(crp)。

根據(jù)本文提供的一些實(shí)施方案，炎性生物標(biāo)志物選自由中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、il-8和嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶活性所組成的組。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，提供了一種在有需要的人類(lèi)受試者中降低c-反應(yīng)蛋白(crp)水平的方法，其包括使人類(lèi)受試者間歇性吸入含有濃度至少為160ppm的一氧化氮的氣體混合物，從而降低了crp的水平。

根據(jù)本文給出的一些實(shí)施方案，本文所述的任何生物標(biāo)志物的水平降低至少5％。

根據(jù)一些實(shí)施方案，人類(lèi)受試者患有與囊性纖維化相關(guān)的微生物感染。

根據(jù)一些實(shí)施方案，微生物感染是由病原微生物引起的。

根據(jù)一些實(shí)施方案，病原微生物選自由產(chǎn)堿假單胞菌、非粘液樣和粘液樣銅綠假單胞菌、煙曲霉菌、金黃色葡萄球菌、流感嗜血桿菌、洋蔥伯克霍爾德氏菌、肺炎克雷伯桿菌、大腸桿菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(mrsa)、對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(mssa)、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌、無(wú)色桿菌屬、木糖氧化無(wú)色桿菌和非結(jié)核分枝桿菌(ntm)所組成的組。

根據(jù)一些實(shí)施方案，病原微生物選自由產(chǎn)堿假單胞菌、對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(mssa)、無(wú)色桿菌屬、煙曲霉菌、非粘液樣銅綠假單胞菌和粘液樣銅綠假單胞菌所組成的組。

根據(jù)一些實(shí)施方案，在間歇吸入期間病原微生物的負(fù)荷減少至少1對(duì)數(shù)單位。

根據(jù)本文提供的一些實(shí)施方案，在間歇吸入期間，與受試者囊性纖維化相關(guān)的至少一種炎性生物標(biāo)志物的水平降低。

根據(jù)一些實(shí)施方案，與囊性纖維化相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物選自由c反應(yīng)蛋白(crp)、細(xì)胞因子、α-1-抗胰蛋白酶(aat)、觸珠蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、免疫球蛋白、顆粒酶b(gzmb)、趨化因子cc基序配體18(ccl18/parc)、表面活性蛋白d(sp-d)、脂多糖(lps)-結(jié)合蛋白和可溶性分化簇14(scd14)所組成的組。

根據(jù)一些實(shí)施方案，與囊性纖維化相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物是c-反應(yīng)蛋白(crp)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，間歇吸入期間crp的水平降低至少10％。

根據(jù)一些實(shí)施方案，細(xì)胞因子選自由tnfα、il-1β、il-6、il-8、il-10和il-12p70所組成的組。

根據(jù)一些實(shí)施方案，細(xì)胞因子選自由il-6和il-1β所組成的組。

根據(jù)一些實(shí)施方案，間歇吸入期間細(xì)胞因子的水平降低至少5％。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，提供了一種減少有需要的人類(lèi)受試者中的病原微生物的負(fù)荷的方法，所述方法包括使人類(lèi)受試者間歇性吸入含有濃度至少為160ppm的一氧化氮的氣體混合物，從而減少人類(lèi)受試者中病原微生物的負(fù)荷，其中病原微生物選自由產(chǎn)堿假單胞菌、非粘液樣和粘液樣銅綠假單胞菌、煙曲霉菌、金黃色葡萄球菌、流感嗜血桿菌、洋蔥伯克霍爾德氏菌、肺炎克雷伯桿菌、大腸桿菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(mrsa)、對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(mssa)、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌、無(wú)色桿菌屬、木糖氧化無(wú)色桿菌和非結(jié)核分枝桿菌(ntm)所組成的組。

根據(jù)一些實(shí)施方案，病原微生物選自由產(chǎn)堿假單胞菌、對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(mssa)、無(wú)色桿菌屬、煙曲霉菌、非粘液樣銅綠假單胞菌和粘液樣銅綠假單胞菌。

根據(jù)本發(fā)明的任何一個(gè)實(shí)施方案，間歇吸入期間病原微生物的負(fù)荷降低至少1個(gè)對(duì)數(shù)單位。

根據(jù)本發(fā)明的任何一個(gè)實(shí)施方案，人類(lèi)受試者患有囊性纖維化。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，提供了一種減少患有或遭受囊性纖維化的人類(lèi)受試者中與囊性纖維化相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物的水平的方法，所述方法包括使人類(lèi)受試者間歇性吸入含有濃度至少為160ppm的一氧化氮的氣體混合物，從而降低炎性生物標(biāo)志物的水平。

根據(jù)一些實(shí)施方案，與囊性纖維化相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物是c-反應(yīng)蛋白(crp)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，治療期間crp的水平降低至少10％。

根據(jù)一些實(shí)施方案，與囊性纖維化相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物選自由il-6和il-1β所組成的組。

根據(jù)一些實(shí)施方案，與囊性纖維化相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物的水平降低至少5％。

根據(jù)本文給出的一些實(shí)施方案，所述方法還包括監(jiān)測(cè)所述受試者中選自由如下參數(shù)組成的組中的至少一個(gè)現(xiàn)場(chǎng)血氧定量參數(shù)：

灌注指數(shù)(pi)；

呼吸率(rra)；

氧合血紅蛋白飽和度(spo2)；

總血紅蛋白(sphb)；

碳氧血紅蛋白(spco)；

高鐵血紅蛋白(spmet)；

氧含量(spoc)；和

脈搏灌注變異指數(shù)(pvi)。

根據(jù)本文提供的一些實(shí)施方案，該方法還包括監(jiān)測(cè)受試者中選自以下的組中的至少一個(gè)現(xiàn)場(chǎng)肺活量參數(shù)：

用力呼氣量(fev1)；

最大呼氣中段流量(mmef)；

肺一氧化碳彌散量(dlco)；

用力肺活量(fvc)；

總肺容量(tlc)；和

余氣量(rv)。

根據(jù)本文給出的一些實(shí)施方案，該方法還包括監(jiān)測(cè)由受試者吸入的氣體混合物中的至少一個(gè)現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)，所述參數(shù)選自由以下所組成的組：

潮氣末co2(etco2)；

二氧化氮(no2)，

一氧化氮(no)；和

吸入氧氣分?jǐn)?shù)(fio2)。

根據(jù)本發(fā)明的任何一個(gè)實(shí)施方案，所述方法還包括監(jiān)測(cè)所述受試者中的至少一個(gè)現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)，所述至少一個(gè)現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)選自由以下所組成的組：

血氧飽和度(spo2)；和

高鐵血紅蛋白(spmet)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，至少一個(gè)參數(shù)包括spmet，并且在間歇吸入期間和之后，spmet增加小于5％。

根據(jù)一些實(shí)施方案，至少一個(gè)參數(shù)包括spo2，并且在間歇吸入期間，spo2的水平高于89％。

根據(jù)本文提出的一些實(shí)施方案，該方法還包括監(jiān)測(cè)受試者中選自血清亞硝酸鹽/硝酸鹽(no2^-/no3^-)和尿亞硝酸鹽/硝酸鹽的組中的至少一個(gè)場(chǎng)外體液參數(shù)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，所述至少一個(gè)參數(shù)包括血清亞硝酸鹽/硝酸鹽水平，并且在間歇吸入期間和之后，血清亞硝酸鹽的水平分別低于2.5/25微摩爾/升。

根據(jù)本文給出的一些實(shí)施方案，所述方法還包括監(jiān)測(cè)所述受試者中的至少一個(gè)場(chǎng)外體液參數(shù)，所述參數(shù)選自以下參數(shù)所組成的組：

細(xì)菌和/或真菌負(fù)荷；

血液高鐵血紅蛋白；

血液ph值；

凝血因子；

血液血紅蛋白；

血細(xì)胞比容比；

紅細(xì)胞計(jì)數(shù)；

白細(xì)胞計(jì)數(shù)；

血小板計(jì)數(shù)；

血管內(nèi)皮活化因子；

腎功能；

電解液；

全血細(xì)胞計(jì)數(shù)；

孕激素；

血清肌酸酐；和

肝功能。

根據(jù)本文給出的一些實(shí)施方案，間歇吸入包括至少一個(gè)下述循環(huán)，所述循環(huán)包括連續(xù)的吸入混合物第一時(shí)間段，和隨后的吸入非一氧化氮?dú)怏w第二時(shí)間段。

根據(jù)一些實(shí)施方案，第一時(shí)間段約為30分鐘。

根據(jù)一些實(shí)施方案，第二時(shí)間段為3至5小時(shí)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，間歇吸入包括每天1至6次循環(huán)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，間歇吸入包括每天5次循環(huán)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，間歇吸入在1天至3周的時(shí)間段內(nèi)進(jìn)行。

根據(jù)一些實(shí)施方案，在第一時(shí)間段內(nèi)，混合物中一氧化氮的濃度偏離至少160ppm的濃度小于10％。

根據(jù)一些實(shí)施方案，在第一時(shí)間段內(nèi)，混合物中的no2濃度小于5ppm。

根據(jù)一些實(shí)施方案，在第一時(shí)間段內(nèi)，混合物中的o2濃度為20％至25％。

根據(jù)一些實(shí)施方案，在第一時(shí)間段內(nèi)，混合物中的吸入氧含量分?jǐn)?shù)(fio2)為21％至100％。

根據(jù)一些實(shí)施方案，所監(jiān)測(cè)的參數(shù)中的至少一個(gè)是spmet，并且在經(jīng)歷吸入期間和之后，spmet增加小于5％。

根據(jù)一些實(shí)施方案，所監(jiān)測(cè)的參數(shù)中的至少一個(gè)是spo2，并且在經(jīng)歷吸入期間，spo2的水平高于89％。

根據(jù)一些實(shí)施方案，所監(jiān)測(cè)的參數(shù)中的至少一個(gè)是血清亞硝酸鹽/硝酸鹽水平，并且在經(jīng)歷吸入期間和之后，血清亞硝酸鹽的水平分別小于2.5/25微摩爾/升。

根據(jù)本文呈現(xiàn)的一些實(shí)施方案，疾病或病癥選自由以下疾病所組成的組：特發(fā)性炎性疾病或病癥，慢性炎性疾病或病癥，急性炎性疾病或病癥，自身免疫性疾病或病癥，感染性疾病或病癥，炎性惡性疾病或病癥，炎性移植相關(guān)疾病或病癥，炎性退行性疾病或病癥，與超敏反應(yīng)相關(guān)的疾病或病癥，炎性心血管疾病或病癥，炎性腦血管疾病或病癥，外周血管疾病或病癥，炎性腺體疾病或病癥，炎性胃腸道疾病或病癥，炎性皮膚病或病癥，炎性肝病或病癥，炎性神經(jīng)疾病或病癥，炎性肌肉骨骼疾病或病癥，炎性腎臟疾病或病癥、炎性生殖疾病或病癥、炎性全身性疾病或病癥，炎性結(jié)締組織疾病或病癥，炎性腫瘤，壞死，炎性植入物相關(guān)疾病或病癥，炎性衰老過(guò)程，免疫缺陷疾病或病癥，增殖性疾病或病癥和炎性肺病或病癥。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了用于在本文所述的任何方法中實(shí)現(xiàn)本文所述的間歇吸入的裝置和系統(tǒng)，如下文所詳述的那樣。

除非另有定義，本文使用的所有技術(shù)和/或科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常理解的相同的含義。盡管類(lèi)似于或等同于本文所描述的方法和材料可以用于本發(fā)明的實(shí)施例的實(shí)踐或測(cè)試中，但是下面描述示例性方法和/或材料。在發(fā)生沖突的情況下，專(zhuān)利說(shuō)明書(shū)(包括定義)將具有限定作用(control)。此外，材料、方法和實(shí)施例僅是說(shuō)明性的，并不意圖是限制性的。

附圖說(shuō)明

專(zhuān)利或申請(qǐng)文件包含至少一張彩色圖。具有彩色附圖的本專(zhuān)利或?qū)＠暾?qǐng)公開(kāi)的副本將由專(zhuān)利局根據(jù)請(qǐng)求并支付必要的費(fèi)用提供。

本文中參考附圖僅以示例的方式描述了本發(fā)明的一些實(shí)施例?，F(xiàn)在具體參考附圖，需要強(qiáng)調(diào)的是，所示出的細(xì)節(jié)是作為示例并且用于本發(fā)明的實(shí)施例的說(shuō)明性討論的目的。在這方面，結(jié)合附圖的描述使得本領(lǐng)域技術(shù)人員明白如何實(shí)施本發(fā)明的實(shí)施例。

圖1a-b呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明一些實(shí)施方案的對(duì)比柱圖，其示出了在第一次處理之前(藍(lán)色)和最后一次處理之后(紅色)的methb百分比水平(圖1a)和ppm表示的no2水平(圖1b)的平均變化(閾值為5％，由紅色虛線(xiàn)示出)，這是在10天治療期間在9名受試者中測(cè)得的。

圖2a-f呈現(xiàn)出在整個(gè)治療過(guò)程中“患者1”(cfsch01)中的產(chǎn)堿假單胞菌(p.alcaligenes)(圖2a)、“患者3”(cfsch03)中的mssa(圖2b)、“患者3”中的無(wú)色桿菌屬(achromobacterspp.)(圖2c)、“患者3”中的煙曲霉菌(a.fumigatus)(圖2d)、“患者4”(cfsch04)中的非粘液型銅綠假單胞菌(圖2e)和“患者4”中的粘液型銅綠假單胞菌(圖2f)的cfu測(cè)定結(jié)果，而“nd”代表未檢測(cè)到的水平。

圖3呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明一些實(shí)施方案的對(duì)比曲線(xiàn)，其示出了fev1測(cè)量結(jié)果的線(xiàn)性趨勢(shì)，所述fev1測(cè)量結(jié)果取自9名被診斷為患有cf的人類(lèi)受試者，這些受試者用160ppm的一氧化氮每天治療三次，每?jī)纱沃委熼g隔至少3.5小時(shí)，從篩選到治療結(jié)束持續(xù)10天。

圖4呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明一些實(shí)施方案的比較曲線(xiàn)，其示出了以mg/l表示的crp水平的線(xiàn)性趨勢(shì)，所述crp水平在9名被診斷為患有cf的人類(lèi)受試者中測(cè)得，這些受試者用160ppm一氧化氮每天治療三次，每?jī)纱沃委熼g隔至少3.5小時(shí)，從篩選到治療結(jié)束持續(xù)10天。

圖5呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案的一種細(xì)支氣管炎治療方法的概要。

圖6呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案在用一氧化氮治療期間具有大于或小于5％methb的受試者的百分比。

圖7呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案對(duì)于治療1，在用一氧化氮治療的受試者中隨治療時(shí)間變化的平均methb水平。

圖8呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案在用一氧化氮治療的受試者中根據(jù)治療次數(shù)隨時(shí)間變化的平均methb水平。

圖9呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案的方法治療的被診斷為患有急性細(xì)支氣管炎的人類(lèi)受試者的中位住院時(shí)間(los)。圖a顯示itt。圖b顯示los小于或等于24小時(shí)的受試者亞組。圖c顯示los大于24小時(shí)的受試者亞組。

圖10呈現(xiàn)出針對(duì)來(lái)自根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案的方法治療的被診斷為患有急性細(xì)支氣管炎的人類(lèi)受試者中的數(shù)據(jù)的kaplan-meier分析。

圖11呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案的方法治療的被診斷患有急性細(xì)支氣管炎的人類(lèi)受試者的中位住院時(shí)間(los)。圖a顯示pp。圖b顯示los小于或等于24小時(shí)的受試者亞組。圖c顯示los大于24小時(shí)的受試者亞組。

圖12呈現(xiàn)出對(duì)于los大于24小時(shí)、los大于36小時(shí)和10位最嚴(yán)重的受試者的治療組(mitt)的中位los。

圖13呈現(xiàn)出在根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案的方法治療的被診斷為患有急性細(xì)支氣管炎的人類(lèi)受試者中對(duì)于治療亞組(itt)來(lái)說(shuō)達(dá)到并持續(xù)至出院的第一次o2飽和度的中值時(shí)間。圖a顯示itt。圖b顯示los小于或等于24小時(shí)的受試者亞組。圖c顯示los大于24小時(shí)的受試者亞組。

圖14呈現(xiàn)出針對(duì)來(lái)自根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案的方法治療的被診斷為患有急性細(xì)支氣管炎的人類(lèi)受試者的數(shù)據(jù)的kaplan-meier分析。

圖15呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案的方法治療的被診斷為患有急性細(xì)支氣管炎的人類(lèi)受試者中對(duì)于治療亞組(pp)來(lái)說(shuō)達(dá)到并持續(xù)至出院的第一次o2飽和度的中值時(shí)間。圖a顯示pp。圖b顯示los小于或等于24小時(shí)的受試者亞組。圖c顯示los大于24小時(shí)的受試者亞組。

圖16呈現(xiàn)出對(duì)于los大于24小時(shí)、los大于36小時(shí)和10位最嚴(yán)重的受試者的治療組(mitt)來(lái)說(shuō)達(dá)到并持續(xù)至出院的第一次o2飽和度的中值時(shí)間。

圖17呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案的方法治療的被診斷為患有急性細(xì)支氣管炎的人類(lèi)受試者的治療亞組(itt)中達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的中值時(shí)間。圖a顯示itt。圖b顯示los小于或等于24小時(shí)的受試者亞組。圖c顯示los大于24小時(shí)的受試者亞組。

圖18呈現(xiàn)出針對(duì)來(lái)自根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案的方法治療的被診斷為患有急性細(xì)支氣管炎的人類(lèi)受試者的數(shù)據(jù)的kaplan-meier分析。

圖19呈現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案的方法治療的被診斷為患有急性細(xì)支氣管炎的人類(lèi)受試者的治療亞組(pp)中達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的中值時(shí)間。圖a顯示pp。圖b顯示los小于或等于24小時(shí)的受試者亞組。圖c顯示los大于24小時(shí)的受試者亞組。

圖20呈現(xiàn)出los大于24小時(shí)、los大于36小時(shí)和10位最嚴(yán)重的受試者的治療組(mitt)中達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的中值時(shí)間。

圖21呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案的治療囊性纖維化的方法的概要。

圖22呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案治療的患有囊性纖維化的受試者按照治療次數(shù)的治療前和治療后的平均methb水平。

圖23呈現(xiàn)出對(duì)于根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案治療的患有囊性纖維化的受試者的治療前和治療后的平均fev1。

圖24呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案治療的患有囊性纖維化的受試者的細(xì)菌和真菌負(fù)荷。

圖25呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案治療的患有囊性纖維化的受試者的crp水平。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明在其一些實(shí)施方案中涉及治療，更具體地但非排他地涉及用于治療人類(lèi)受試者的炎癥、呼吸道感染或囊性纖維化的方法和裝置。

參考附圖和附帶的描述可以更好地理解本發(fā)明的原理和操作。

在詳細(xì)解釋本發(fā)明的至少一個(gè)實(shí)施方案之前，應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明的應(yīng)用不限于在以下描述中闡述的或由實(shí)施例舉例說(shuō)明的細(xì)節(jié)。本發(fā)明能夠具有其它實(shí)施例或者以各種方式實(shí)踐或執(zhí)行。此外，應(yīng)當(dāng)理解，本文中使用的措辭和術(shù)語(yǔ)是為了描述的目的，并且不應(yīng)被認(rèn)為是限制性的。

炎癥是身體對(duì)細(xì)胞損傷、感染或異物存在的主要或次要反應(yīng)。作為主要因素，炎癥與大量的疾病和病癥相關(guān)，所述疾病和病癥也可導(dǎo)致系統(tǒng)惡化和衰竭，并且如果不治療則是繼發(fā)性病癥的原因。除了炎癥的典型癥狀(例如發(fā)燒、腫脹、疼痛等)之外，還能通過(guò)監(jiān)測(cè)某些內(nèi)源性因子或炎性生物標(biāo)志物來(lái)診斷炎癥，其體內(nèi)水平指示炎癥的嚴(yán)重性和階段。

囊性纖維化(cf)是一種遺傳性疾病，其中上皮氯離子通道，即cf跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子(cftr)中的突變損害先天免疫的各種機(jī)制。由病原微生物引起的慢性肺部感染是被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的發(fā)病率和死亡率的主要原因。對(duì)被診斷患有或患有最常見(jiàn)的細(xì)菌病原體(銅綠假單胞菌)的cf的人類(lèi)受試者的早期抗生素根除治療已顯著增加了cf中的預(yù)期壽命，然而仍然有絕大多數(shù)被診斷患有或患有cf的成年人類(lèi)受試者患有慢性肺部感染，其由于生物膜形成和抗生素耐藥毒性菌株的形成而難以治療。在cf氣道中發(fā)現(xiàn)的其他物種包括抗生素耐藥菌株，例如耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(mrsa)，洋蔥伯克霍爾德氏菌群的成員，流感嗜血桿菌，嗜麥芽窄食單胞菌，木糖氧化無(wú)色桿菌，非結(jié)核分枝桿菌(ntm)種和各種嚴(yán)格厭氧菌。此外，來(lái)自支氣管的粘液的不良清除在被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者中引起一般呼吸困難。

細(xì)支氣管炎被定義為小氣道的感染。它也是嬰兒早期急性下呼吸道感染(alri)的最常見(jiàn)的表現(xiàn)，并且是全球兒童死亡的主要原因。病毒性細(xì)支氣管炎是目前美國(guó)兒科住院的最常見(jiàn)原因，幾乎占全因嬰兒住院的20％。病毒病因是主要原因，在呼吸道病毒中，呼吸道合胞病毒(rsv)被認(rèn)為是導(dǎo)致幼年兒童alri的最重要的病毒病原體。這種疾病主要在出生后的第一年很常見(jiàn)。臨床體征和癥狀與缺氧，呼吸困難，鼻竇炎，喂食不良，咳嗽，聽(tīng)診哮鳴音和捻發(fā)音(在某些情況下呼吸衰竭)相一致。

在本發(fā)明的一些方面，通過(guò)吸入一氧化氮的間歇給藥和遞送，在相對(duì)短的時(shí)間段吸入高濃度的一氧化氮持和在更長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)不吸入或吸入低濃度的一氧化氮之間的循環(huán)，已經(jīng)顯示克服了在所有年齡段的人中一氧化氮毒性的問(wèn)題。在一些實(shí)施方案中，已經(jīng)顯示，根據(jù)間歇方案遞送的高濃度的一氧化氮在壓倒病原體的一氧化氮防御機(jī)制方面是有效的，因此在這樣高的濃度下，一氧化氮表現(xiàn)出顯著的抗微生物效應(yīng)。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了向人類(lèi)受試者施用一氧化氮的方法，其中所述施用是短持續(xù)時(shí)間的吸入高濃度一氧化氮，這降低了示例性炎性生物標(biāo)志物的水平，同時(shí)不引起肺損傷或其他不良反應(yīng)的體征。例如，本發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，對(duì)人類(lèi)患者進(jìn)行間歇性吸入濃度為至少160ppm的一氧化氮的治療的結(jié)果是，c-反應(yīng)蛋白(crp)水平得到改善(降低)。對(duì)人類(lèi)患者進(jìn)行間歇性吸入濃度為至少160ppm的一氧化氮的治療的結(jié)果是，至少一些炎性細(xì)胞因子的水平也得到降低。這些數(shù)據(jù)表明，如本文所述的間歇性吸入一氧化氮可有利地用于治療炎癥和與炎癥相關(guān)的疾病和病癥(炎性疾病和病癥)。

在一個(gè)實(shí)施方案中，還已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一氧化氮在肺中的纖毛運(yùn)動(dòng)、炎癥通路和免疫系統(tǒng)(如果增強(qiáng)則有助于cf治療的所有過(guò)程)中起作用。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了向人類(lèi)受試者施用一氧化氮的方法，其中所述施用是短持續(xù)時(shí)間的吸入高濃度一氧化氮，這可以在被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者中改善肺功能并減少微生物感染和炎性癥狀，同時(shí)不引起肺損傷或其他不良反應(yīng)的體征。在一個(gè)實(shí)施方案中，第1秒用力呼氣量(fev1)和c反應(yīng)蛋白(crp)水平提高，血清亞硝酸鹽/硝酸鹽在基線(xiàn)和研究期間之間沒(méi)有不同，而高鐵血紅蛋白水平升高期間到一個(gè)可容許并接受的水平。因此，有人證實(shí)，在被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者中，間歇吸入160ppm或更多的一氧化氮是安全的且良好耐受的，而且在減輕cf癥狀方面是有益的。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明對(duì)人類(lèi)受試者施用一氧化氮，其中所述施用是短持續(xù)時(shí)間的吸入高濃度一氧化氮，其改善患有細(xì)支氣管炎的人類(lèi)受試者的肺功能，而不引起肺損傷或不良反應(yīng)的其他體征。

在本文中，無(wú)論何時(shí)在吸入的情況下使用術(shù)語(yǔ)“一氧化氮”，都應(yīng)當(dāng)理解為一氧化氮是以氣態(tài)被吸入的。

炎癥及與其相關(guān)的疾病和病癥的治療：

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，提供了治療人類(lèi)受試者的炎癥和/或炎性疾病或病癥的方法，其通過(guò)使人類(lèi)受試者受到間歇吸入包含濃度至少為160ppm的一氧化氮的氣體混合物的治療而起作用。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，治療炎性疾病或病癥的方法包括在有需要的患者中表現(xiàn)出的任何有益效果，所述有益效果包括改善炎癥的癥狀、改善由與炎癥相關(guān)的醫(yī)療狀況引起的不良反應(yīng)、改善由炎癥和其癥狀的另一種治療引起的不良反應(yīng)、降低炎癥人類(lèi)受試者的死亡率以及人類(lèi)受試者的醫(yī)療和精神狀況的一般改善。

如上文所討論的，炎性病癥的一些體征包括一些蛋白質(zhì)(本文稱(chēng)為炎性生物標(biāo)志物)的檢測(cè)水平的變化，通常是增加，其在人類(lèi)免疫應(yīng)答中起關(guān)鍵作用。因此，炎性生物標(biāo)志物的減少通常被認(rèn)為是治療的有益效果；因此，炎性生物標(biāo)志物水平的降低可用作本文所述的炎癥治療的指征。

應(yīng)當(dāng)注意，根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，術(shù)語(yǔ)“炎性生物標(biāo)志物”用于一種炎癥指征和監(jiān)測(cè)治療進(jìn)展的一種手段的上下文中。在一些實(shí)施方案中，在監(jiān)測(cè)受試者的各種生理參數(shù)和各種生物標(biāo)志物(例如炎性生物標(biāo)志物)的同時(shí)實(shí)施本文所述的任何方法，以跟蹤疾病的進(jìn)展和/或治療的進(jìn)展。

還應(yīng)當(dāng)注意，根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，術(shù)語(yǔ)“炎性生物標(biāo)志物”在治療本身的上下文中使用，即降低參與炎性過(guò)程的炎性生物標(biāo)志物的水平，導(dǎo)致抑制并因此治療與炎癥相關(guān)的疾病或病癥。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，提供了一種降低有需要的人類(lèi)受試者的炎性生物標(biāo)志物水平的方法，該方法通過(guò)使人類(lèi)受試者經(jīng)受間歇吸入包含濃度至少為160ppm的一氧化氮的氣體混合物的治療來(lái)實(shí)現(xiàn)。

炎性生物標(biāo)志物(根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案的目前要求保護(hù)的方法以減少這些炎性生物標(biāo)志物為目標(biāo))包括但不限于c-反應(yīng)蛋白(crp)、tnfα、tnf-rii、il-1β、il-1ra/il-1f3、il-2、il-4、il-5、il-6、il-8、cxcl8/il-8、il-10、il-12p70、il-17a、gm-csf、icam-1、inf-γ、mmp-8、mmp-9、vegf和il-12p70、嗜中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶活性、α-1-抗胰蛋白酶(aat)、觸珠蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、免疫球蛋白、粒酶b(gzmb)、嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ecp)、嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子、類(lèi)胰蛋白酶、趨化因子cc基序配體18(ccl18/parc)、rantes(ccl5)、表面活性蛋白d(sp-d)、脂多糖(lps)結(jié)合蛋白和可溶性分化簇14(scd14)。

在本發(fā)明的實(shí)施方案的上下文中使用的術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞因子”包括趨化因子、干擾素、白細(xì)胞介素、淋巴因子和腫瘤壞死因子。

以下是非限制性示例性炎性生物標(biāo)志物的簡(jiǎn)要描述。

腫瘤壞死因子或tnf家族是可以引起細(xì)胞死亡(細(xì)胞凋亡)的一組細(xì)胞因子。最常見(jiàn)的tnf包括但不限于腫瘤壞死因子(tnf)和淋巴毒素-α，腫瘤壞死因子以前稱(chēng)為tnfα或tnfαlpha，淋巴毒素-α以前稱(chēng)為腫瘤壞死因子-β(tnf-β)。例如，已知tnfα是細(xì)胞因子或細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)蛋白，其向身體發(fā)信號(hào)以使嗜中性白細(xì)胞到達(dá)感染或損傷部位。tnfα在事故中作為“第一反應(yīng)者”，通過(guò)向最大損害處的身體發(fā)送信號(hào)，從而使得免疫系統(tǒng)可以有效地響應(yīng)，即發(fā)送嗜中性粒細(xì)胞。

核因子(nf)構(gòu)成密切相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子家族，其以高親和力作為二聚體與dna的特定序列構(gòu)成性地結(jié)合。家族成員含有結(jié)合識(shí)別序列的不尋常的dna結(jié)合結(jié)構(gòu)域。例如，核因子κb(nfkb)是一種作為某些基因開(kāi)關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子蛋白復(fù)合物。當(dāng)nfkb通過(guò)tnfa的幫助被允許進(jìn)入細(xì)胞核時(shí)，它啟動(dòng)允許細(xì)胞增殖、成熟、和通過(guò)凋亡(程序性細(xì)胞死亡)避免破壞的基因。這允許白細(xì)胞復(fù)制和實(shí)現(xiàn)它們?cè)谇鍧嵤芨腥净蚴軅麉^(qū)域中的活性。nfkb類(lèi)似于通過(guò)打開(kāi)所有可用于最快響應(yīng)的信道的通信線(xiàn)路上的優(yōu)先級(jí)設(shè)置。

白細(xì)胞介素構(gòu)成一組由白細(xì)胞(白血球)表達(dá)的分泌蛋白和信號(hào)分子(細(xì)胞因子)。免疫系統(tǒng)的功能在很大程度上取決于白細(xì)胞介素，已經(jīng)描述了許多白細(xì)胞介素的罕見(jiàn)缺陷，所有這些缺陷都以炎性病癥、自身免疫疾病或免疫缺陷為特征。大多數(shù)白細(xì)胞介素由輔助cd4t淋巴細(xì)胞，以及通過(guò)單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞合成。白細(xì)胞介素促進(jìn)t淋巴細(xì)胞和b淋巴細(xì)胞以及造血細(xì)胞的發(fā)育和分化。白細(xì)胞介素通常被看作由數(shù)字1-17表示的家族，即il-1、il2、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、il-9、il-10、il-11、il-12、il-13、il-14、il-15、il-16、il-17等。示例性的白細(xì)胞介素是白細(xì)胞介素-6。白細(xì)胞介素-6(il-6)是一種細(xì)胞因子，其指示中性粒細(xì)胞破壞自身，卻將單核細(xì)胞(另一種類(lèi)型的白細(xì)胞)吸引到感染或損傷區(qū)域。單核細(xì)胞產(chǎn)生巨噬細(xì)胞，巨噬細(xì)胞通過(guò)吞噬作用清除碎片和病原體，通過(guò)該過(guò)程巨噬細(xì)胞降解死細(xì)胞和其他顆粒整體。另一個(gè)示例性白細(xì)胞介素是白細(xì)胞介素8(il-8)或cxcl8，其是由巨噬細(xì)胞和其他細(xì)胞類(lèi)型例如上皮細(xì)胞、氣道平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的趨化因子。內(nèi)皮細(xì)胞將il-8存儲(chǔ)在它們的存儲(chǔ)囊泡(weibel-palade小體)中。在人類(lèi)中，白細(xì)胞介素-8蛋白由il8基因編碼。

據(jù)報(bào)道，在哺乳動(dòng)物中，cc趨化因子(或β-趨化因子)蛋白家族具有被稱(chēng)為cc趨化因子配體(ccl)-1至-28(ccl10與ccl9相同)的這一亞群中的至少27個(gè)不同成員。該亞家族的趨化因子通常含有四個(gè)半胱氨酸(c4-cc趨化因子)，但少數(shù)cc趨化因子具有六個(gè)半胱氨酸(c6-cc趨化因子)。c6-cc趨化因子包括嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子、ccl1、ccl15、ccl21、ccl23和ccl28。cc趨化因子誘導(dǎo)單核細(xì)胞和其他細(xì)胞類(lèi)型如nk細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞的遷移。cc趨化因子的實(shí)例包括單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1或ccl2)，其誘導(dǎo)單核細(xì)胞離開(kāi)血流并進(jìn)入周?chē)M織成為組織巨噬細(xì)胞。ccl5(或rantes)吸引表達(dá)受體ccr5的細(xì)胞，例如t細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞。血漿中增加的ccl11水平與小鼠和人的衰老(和減少的神經(jīng)再生)相關(guān)。

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vegf)是由刺激血管發(fā)生和血管形成的細(xì)胞產(chǎn)生的信號(hào)蛋白家族。vegf是當(dāng)血液循環(huán)不足時(shí)恢復(fù)組織氧供應(yīng)的部分系統(tǒng)。vegf的正常功能是創(chuàng)建在胚胎發(fā)育期間的新血管、損傷后新血管、運(yùn)動(dòng)后肌肉和繞過(guò)阻塞血管的新血管(側(cè)支循環(huán))。vegf的血清水平指示許多醫(yī)學(xué)病癥，包括炎性疾病和病癥。在支氣管哮喘和糖尿病中也已知存在高血漿水平的vegf。

c-反應(yīng)蛋白(crp)是“模式識(shí)別受體”蛋白，其由肝響應(yīng)于il-6水平而產(chǎn)生并結(jié)合死亡和垂死細(xì)胞的表面以及某些形式的細(xì)菌。crp作為巨噬細(xì)胞通過(guò)吞噬作用攝取某物的一種形式的信號(hào)，因此有助于在炎癥期間最終清除碎片。

根據(jù)一些實(shí)施方案，監(jiān)測(cè)炎性生物標(biāo)志物的水平可用于確定治療過(guò)程，因此是本文所述方法的一部分?；趯?duì)炎性生物標(biāo)志物的監(jiān)測(cè)的指示可以使醫(yī)生改變治療方案(增加或減少受試者對(duì)一氧化氮的暴露)。在一些實(shí)施方案中，治療的結(jié)果是，從受試者提取的例如血液、血清、痰、粘液、尿液或糞便中的生物標(biāo)志物水平，基于在開(kāi)始治療之前受試者的血清水平的基線(xiàn)，降低至少10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。

在一些實(shí)施方案中，生物標(biāo)志物水平的降低不僅是跟隨治療進(jìn)展的一種手段，而且是治療本身的目標(biāo)。例如，crp水平的降低本身是在一些一般醫(yī)學(xué)病癥和炎癥疾病中的治療目標(biāo)。

在一些實(shí)施方案中，crp的血漿水平指示炎性疾病或病癥的進(jìn)展。在一些實(shí)施方案中，降低crp的血漿水平構(gòu)成治療本身的一部分。

在本發(fā)明的該方面的一些實(shí)施方案中，炎性生物標(biāo)志物是c-反應(yīng)蛋白(crp)。與患者中的crp的基線(xiàn)水平相比，由于治療而導(dǎo)致的降低率為至少10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。

中性粒細(xì)胞是一種吞噬細(xì)胞，通常存在于血流中。在炎癥的急性期(開(kāi)始)，特別是由于細(xì)菌感染、環(huán)境暴露和一些類(lèi)型的癌癥，嗜中性粒細(xì)胞是炎癥細(xì)胞向炎癥部位遷移的第一反應(yīng)者之一。中性粒細(xì)胞跟隨化學(xué)信號(hào)如白細(xì)胞介素-8(il-8)、c5a、fmlp和白三烯b4，在稱(chēng)為趨化作用的過(guò)程中遷移穿過(guò)血管，然后穿過(guò)間質(zhì)組織。

在本發(fā)明該方面的一些實(shí)施方案中，炎性生物標(biāo)志物是嗜中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、il-8、嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ecp)、嗜酸細(xì)胞活化趨化因子、類(lèi)胰蛋白酶、rantes(c-c基序趨化因子)和嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶活性的誘導(dǎo)痰水平。與患者生物標(biāo)志物的基線(xiàn)水平相比，細(xì)胞因子水平由于治療而導(dǎo)致的降低率為至少3％、5％、10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。

在本發(fā)明的該方面的一些實(shí)施方案中，炎性生物標(biāo)志物是血漿細(xì)胞因子水平，所述細(xì)胞因子選自由tnfα、tnf-rii、il-1β、il-1ra/il-1f3、il-2、il-4、il-5、il-6、il-8、cxcl8/il-8、il-10、il-12p70、il-17a、gm-csf、icam-1、ifn-γ、mmp-8、mmp-9、vegf和il-12p70所組成的組。在一些實(shí)施方案中，炎性生物標(biāo)志物是il-8、il-6和il-1β。與患者生物標(biāo)志物的基線(xiàn)水平相比，細(xì)胞因子水平由于治療而引起的降低率為至少3％、5％、10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。

炎性疾病和病癥：

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，基于本文提供的間歇性吸入一氧化氮的任何方法在治療如本文所定義的人類(lèi)受試者的炎性疾病或病癥中是有效的。

在本發(fā)明任何實(shí)施方案的上下文中，炎性疾病或病癥或與炎癥相關(guān)的疾病或病癥包括例如但不限于特發(fā)性炎性疾病或病癥、慢性炎性疾病或病癥、急性炎性疾病或病癥、自身免疫性疾病或病癥、感染性疾病或病癥、炎性惡性疾病或病癥、炎性移植相關(guān)疾病或病癥、炎性退行性疾病或病癥、與超敏反應(yīng)相關(guān)的疾病或病癥、炎性心血管疾病或病癥、炎性腦血管疾病或病癥、外周血管疾病或病癥、炎性腺體疾病或病癥、炎性胃腸疾病或病癥、炎性皮膚疾病或病癥、炎性肝臟疾病或病癥、炎性神經(jīng)疾病或病癥、炎性肌肉骨骼疾病或病癥、炎性腎病或病癥、炎性生殖疾病或病癥、炎性全身性疾病或病癥、炎性結(jié)締組織疾病或病癥、炎性腫瘤、壞死、炎癥性植入相關(guān)疾病或病癥、炎性衰老過(guò)程、免疫缺陷疾病或病癥、增殖性疾病和病癥以及炎性肺部疾病或病癥，如下文詳述。

超敏反應(yīng)的非限制性實(shí)例包括i型超敏反應(yīng)、ii型超敏反應(yīng)、iii型超敏反應(yīng)、iv型超敏反應(yīng)、速發(fā)型超敏反應(yīng)、抗體介導(dǎo)的超敏反應(yīng)、免疫復(fù)合物介導(dǎo)的超敏反應(yīng)、t淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的超敏反應(yīng)、遲發(fā)型超敏反應(yīng)、輔助t淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的超敏反應(yīng)、細(xì)胞毒性t淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的超敏反應(yīng)、th1淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的超敏反應(yīng)和th2淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的超敏反應(yīng)。

炎性心血管疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括閉塞性疾病或病癥、動(dòng)脈粥樣硬化、心臟瓣膜病、狹窄、再狹窄、支架內(nèi)狹窄、心肌梗死、冠狀動(dòng)脈疾病、急性冠狀動(dòng)脈綜合征、充血性心力衰竭、心絞痛、心肌缺血、血栓形成、韋格納肉芽腫病、takayasu動(dòng)脈炎、川崎綜合征、抗凝血因子viii自身免疫疾病或病癥、壞死性小血管脈管炎、顯微鏡下多血管炎、churg-strauss綜合征、寡免疫局灶壞死性腎小球腎炎、新月體性腎小球腎炎、抗磷脂綜合征、抗體誘導(dǎo)的心力衰竭、血小板減少性紫癜、自身免疫性溶血性貧血、心臟自身免疫、查加斯病或病癥、以及抗輔助性t淋巴細(xì)胞自身免疫。

狹窄是脈管系統(tǒng)的閉塞性疾病，通常由動(dòng)脈粥樣硬化斑塊和增強(qiáng)的血小板活性引起，最關(guān)鍵性地是影響冠狀動(dòng)脈血管系統(tǒng)。

再狹窄是通常在狹窄血管系統(tǒng)中閉塞減少之后的進(jìn)行性再閉塞。在脈管系統(tǒng)的開(kāi)放需要支架的機(jī)械支撐的情況下，可能發(fā)生支架內(nèi)狹窄，從而重新堵塞治療過(guò)的血管。

腦血管疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括中風(fēng)、腦血管炎癥、腦出血和椎動(dòng)脈功能不全。

外周血管疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括壞疽、糖尿病性血管病變、缺血性腸病、血栓癥、糖尿病性視網(wǎng)膜病和糖尿病性腎病。

自身免疫性疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括由免疫應(yīng)答引起的所有疾病，例如自身抗體或細(xì)胞介導(dǎo)的對(duì)自身抗原的免疫等。代表性實(shí)例是慢性類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、混合性結(jié)締組織病、結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、多發(fā)性肌炎/皮肌炎、干燥綜合征、白塞氏病(bechet’sdisease)、多發(fā)性硬化、自身免疫性糖尿病、橋本氏病、牛皮癬、原發(fā)性粘液水腫、惡性貧血、重癥肌無(wú)力、慢性活動(dòng)性肝炎、自身免疫性溶血性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜、葡萄膜炎、血管炎和肝素誘導(dǎo)的血小板減少。

炎性腺體疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括胰腺疾病或病癥、i型糖尿病、甲狀腺疾病或病癥、格雷夫斯病、甲狀腺炎、自發(fā)性自身免疫性甲狀腺炎、橋本氏甲狀腺炎、特發(fā)性粘液水腫、卵巢自身免疫、自身免疫性抗精子不育、自身免疫性前列腺炎和i型自身免疫性多腺綜合征。

炎性胃腸疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括結(jié)腸炎、回腸炎、克羅恩病、慢性炎性腸病、炎性腸綜合征、慢性炎性腸病、乳糜瀉、潰瘍性結(jié)腸炎、潰瘍、皮膚潰瘍、褥瘡、胃潰瘍、消化性潰瘍、口腔潰瘍、鼻咽潰瘍、食管潰瘍、十二指腸潰瘍和胃腸潰瘍。

炎性皮膚疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括痤瘡和自身免疫性大皰性皮膚病。

炎性肝臟疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括自身免疫性肝炎、肝硬化和膽汁性肝硬化。

炎性神經(jīng)疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括多發(fā)性硬化、阿爾茨海默病、帕金森病、重癥肌無(wú)力、運(yùn)動(dòng)神經(jīng)病、格林巴利綜合征、自身免疫性神經(jīng)病、蘭伯特伊頓肌無(wú)力綜合征、副腫瘤性神經(jīng)疾病或病癥、副腫瘤小腦萎縮、非副腫瘤僵人綜合征、進(jìn)行性小腦萎縮、rasmussen腦炎、肌萎縮性側(cè)索硬化、sydeham舞蹈病、gillesdelatourette綜合征、自身免疫性多內(nèi)分泌腺病、免疫性神經(jīng)病、獲得性神經(jīng)性肌強(qiáng)直、多發(fā)性關(guān)節(jié)攣縮癥、亨廷頓舞蹈病、aids相關(guān)性癡呆、肌萎縮性側(cè)索硬化(aml)、多發(fā)性硬化、中風(fēng)、炎性視網(wǎng)膜疾病或病癥、炎性眼部疾病或病癥、視神經(jīng)炎、海綿狀腦病、偏頭痛、頭痛、叢集性頭痛和僵人綜合征。

炎性結(jié)締組織疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括自身免疫性肌炎、原發(fā)性干燥綜合征、平滑肌自身免疫疾病或病癥、肌炎、腱炎、韌帶炎、軟骨炎、關(guān)節(jié)炎癥、滑膜炎、腕管綜合征、關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、骨骼炎癥、自身免疫性耳部疾病或病癥、以及內(nèi)耳的自身免疫性疾病或病癥。

炎性腎臟疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括自身免疫性間質(zhì)性腎炎和/或腎癌。

炎性生殖疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括反復(fù)性流產(chǎn)(repeatedfetalloss)、卵巢囊腫或月經(jīng)相關(guān)的疾病或病癥。

炎性全身性疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡、系統(tǒng)性硬化、膿毒性休克、中毒性休克綜合征和惡病質(zhì)。

感染性疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括慢性感染性疾病或病癥、亞急性感染性疾病或病癥、急性感染性疾病或病癥、病毒性疾病或病癥、細(xì)菌性疾病或病癥、原生動(dòng)物疾病或病癥、寄生蟲(chóng)疾病或病癥、真菌疾病或病癥、支原體疾病或病癥、壞疽、敗血癥、朊病毒疾病或病癥、流感、結(jié)核病、瘧疾、獲得性免疫缺陷綜合征和嚴(yán)重急性呼吸綜合征。

炎癥性移植相關(guān)疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括移植排斥、慢性移植排斥、亞急性移植排斥、急性移植排斥、超急性移植排斥和移植物抗宿主疾病或病癥。示例性植入物包括假體植入物、乳房植入物、硅樹(shù)脂植入物、牙植入物、陰莖植入物、心臟植入物、人工關(guān)節(jié)、骨折修復(fù)裝置、骨替換植入物、藥物遞送植入物、導(dǎo)管、起搏器、人造心臟、人工心臟瓣膜、藥物釋放植入物、電極和呼吸器管。

炎性腫瘤的非限制性實(shí)例包括惡性腫瘤、良性腫瘤、實(shí)體瘤、轉(zhuǎn)移性腫瘤和非實(shí)體瘤。

炎性肺部疾病或病癥的非限制性實(shí)例包括哮喘、過(guò)敏性哮喘、肺氣腫、慢性阻塞性肺疾病或病癥、結(jié)節(jié)病和支氣管炎。

增殖性疾病或病癥的實(shí)例包括癌癥、淋巴增生性病癥、免疫增殖性病癥、骨髓增殖性腫瘤和漿細(xì)胞增殖性病癥。

囊性纖維化：

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，提供了治療人類(lèi)受試者(例如，受囊性纖維化折磨的人類(lèi)受試者，診斷患有囊性纖維化的人類(lèi)受試者或患有囊性纖維化的人類(lèi)受試者)的囊性纖維化的方法。囊性纖維化的診斷可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法進(jìn)行，包括下面實(shí)施例部分所述的方法。

根據(jù)一些實(shí)施方案的方法包括使人類(lèi)受試者間歇吸入包含一氧化氮的氣體混合物，如關(guān)于間歇吸入的任何一個(gè)實(shí)施方案及其任何組合中所述。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，治療患有cf的人類(lèi)受試者的方法包括在診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者中顯示出的任何有益的治療效果，包括例如改善cf癥狀(例如，改善肺功能)，改善與cf相關(guān)的醫(yī)學(xué)狀況(例如減少與cf相關(guān)的微生物感染、減少與cf有關(guān)的致病微生物的負(fù)荷、減少炎癥)，改善由另一種cf的治療所引起的不良反應(yīng)，降低診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的死亡率以及普遍改善被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的醫(yī)學(xué)和精神狀況。

在一些實(shí)施方案中，如本文所述的治療cf的方法被認(rèn)為是治療cf患者(例如，由囊性纖維化所折磨的受試者，由囊性纖維化診斷的受試者)的方法，并且包括在以下方面得到改善的方法，即，改善cf癥狀(例如，改善肺功能)，改善與cf相關(guān)的醫(yī)學(xué)狀況(例如，治療與cf相關(guān)的微生物感染，降低與cf有關(guān)的致病微生物的負(fù)荷，減輕炎癥)，改善由cf的另一種治療引起的不良反應(yīng)，延長(zhǎng)被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的壽命和/或普遍改善被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的醫(yī)學(xué)和/或精神狀況。

在研究被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者中治療cf的功效方面，普遍認(rèn)為肺功能是減輕cf癥狀的最簡(jiǎn)單和直接的標(biāo)志之一，因此人類(lèi)受試者中肺功能的改善代表被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者得到了有益治療。

cf的主要并發(fā)癥之一是氣道痰液的積聚，其主要包含細(xì)菌、炎癥細(xì)胞、聚合dna和f-肌動(dòng)蛋白。細(xì)菌定植和感染最通常由金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和流感嗜血桿菌引起。大腸桿菌和肺炎克雷伯桿菌作為慢性定植在氣道中生長(zhǎng)。洋蔥伯克霍爾德桿菌已經(jīng)在較老的人類(lèi)受試者中被分離出來(lái)，并且與肺功能迅速下降直至發(fā)展為死亡有關(guān)。

不受任何特定理論的約束，假設(shè)以外源性氣體形式遞送的一氧化氮容易進(jìn)入肺部系統(tǒng)，并通過(guò)肺血管擴(kuò)張起作用，降低細(xì)菌負(fù)荷，減輕炎癥和改善其他臨床癥狀。

已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的鼻內(nèi)一氧化氮濃度顯著降低，并且這種降低的一氧化氮可能在被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者中觀(guān)察到的支氣管阻塞和對(duì)細(xì)菌感染的防御降低中發(fā)揮作用。

在一些實(shí)施方案中，本文所述的任何一個(gè)實(shí)施方案及其任何組合中所述的方法通過(guò)改善人類(lèi)受試者中的一種或多種生理參數(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)，所述人類(lèi)受試者被診斷患有或患有由與cf相關(guān)聯(lián)的醫(yī)療狀況所惡化的cf。根據(jù)本文所述的任何一個(gè)實(shí)施方案，任何這些參數(shù)的改進(jìn)指示通過(guò)間歇吸入一氧化氮進(jìn)行治療的有益效果。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，該方法通過(guò)改善至少一種肺功能(肺活量參數(shù))來(lái)實(shí)現(xiàn)，例如但不限于第1秒用力呼氣量(fev1)、用力肺活量(fvc)、fev1/fvc比值或fev1％和用力呼氣流量(fef)。

肺活量參數(shù)用力肺活量(fvc)是以升計(jì)所測(cè)量的空氣體積，其可在完全吸氣后用力呼出，并且是肺活量測(cè)定法測(cè)試中最基本的操作。

肺活量參數(shù)第1秒用力呼氣量(fev1)是充分吸氣后1秒內(nèi)用力呼出的空氣量。fev1的平均值主要取決于性別和年齡，而數(shù)值落在平均值的80％到120％之間都被認(rèn)為是正常的。fev1的預(yù)測(cè)正常值可以在現(xiàn)場(chǎng)計(jì)算，并且取決于年齡、性別、身高、體重和種族以及他們所依據(jù)的研究。

肺活量參數(shù)fev1/fvc比(fev1％)是fev1與fvc的比值，該比值應(yīng)大約為75-80％。預(yù)測(cè)的fev1％被定義為患者的fev1％除以適合該患者的群體的平均fev1％。

肺活量參數(shù)用力呼氣流量(fef)是在用力呼氣中段期間從肺部流出的空氣的流量(或速度)?？梢园凑针x散時(shí)間給出，通常由用力肺活量(fvc)的分?jǐn)?shù)份額定義，即fvc的25％(fef25)，fvc的50％(fef50)或fvc的75％(fef75)。也可以由間隔期間流量的平均值給出，也通常由fvc的具體分?jǐn)?shù)份額來(lái)定義，通常為25-75％(fef25-75)。在平均值的50-60％到130％的范圍內(nèi)的測(cè)量值被認(rèn)為是正常的，而fef的預(yù)測(cè)正常值可以在現(xiàn)場(chǎng)計(jì)算，并且取決于年齡、性別、身高、體重和種族以及他們依據(jù)的研究。最近研究表明，在檢測(cè)阻塞性小氣道疾病中，fef25-75％或fef25-50％可能比f(wàn)ev1更敏感。然而，在標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)志物沒(méi)有伴隨變化的情況下，中程呼氣流量的差異可能不夠明確，從而還不能被使用，目前的實(shí)踐指南建議繼續(xù)使用fev1、vc和fev1/vc作為阻塞性疾病的指標(biāo)。

注意，在一些實(shí)施方案中，如下文中定義和描述的其它肺活量參數(shù)可以用于研究間歇吸入160ppm一氧化氮治療cf的進(jìn)展和功效，和/或用于研究該治療的安全性參數(shù)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，fev1被監(jiān)測(cè)為如下文所定義的現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)，其表示間歇吸入一氧化氮的有益效果，如本文所提供的。通常，fev1水平的增加被認(rèn)為是被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的期望效果，其中在患者的fev1基線(xiàn)水平(開(kāi)始治療之前)增加至少3％被認(rèn)為是顯著的改進(jìn)。在一些實(shí)施方案中，實(shí)施該方法使得在間歇吸入一氧化氮期間和/或之后(例如，在整個(gè)時(shí)間間隔期間和/或之后間歇吸入一氧化氮)，fev1水平增加至少3％、5％、10％、15％或20％，如本文所述。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，cf與微生物感染相關(guān)，即通過(guò)本文所述方法診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者患有微生物感染。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，微生物感染是由一種或多種病原微生物引起的，其可以是例如革蘭氏陰性細(xì)菌、革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌、病毒和活的病毒粒子、真菌和寄生蟲(chóng)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，治療cf的方法包括治療與cf相關(guān)的微生物感染(通常在診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者中發(fā)生的微生物感染)和/或降低導(dǎo)致與cf相關(guān)的微生物感染(也稱(chēng)為與cf相關(guān)的病原微生物)的病原微生物的負(fù)荷。

cf通常與由某些病原體(與cf相關(guān)的病原微生物)引起的呼吸道微生物感染相關(guān)。這些病原體包括例如產(chǎn)堿假單胞菌、非粘液性和粘液樣銅綠假單胞菌、煙曲霉菌、金黃色葡萄球菌、嗜血桿菌、洋蔥伯克霍爾德菌、肺炎克雷伯桿菌、大腸桿菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(mrsa)、對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(mssa)、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌、無(wú)色桿菌屬、木糖氧化無(wú)色桿菌和非結(jié)核分枝桿菌(ntm)。

這種微生物感染可以被認(rèn)為是cf的次要病癥，或者作為診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的機(jī)會(huì)性感染。

根據(jù)一些實(shí)施方案，與cf相關(guān)的病原微生物選自由以下細(xì)菌所組成的組，所述細(xì)菌包括產(chǎn)堿假單胞菌、對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(mssa)、無(wú)色桿菌屬、煙曲霉菌、非粘液樣銅綠假單胞菌和粘液樣蛋白p銅綠假單胞菌。根據(jù)這些實(shí)施方案中的一些，本文所述的方法包括治療與cf相關(guān)的微生物感染和/或減少導(dǎo)致微生物感染的致病微生物(與cf相關(guān)的致病微生物)的負(fù)荷。

如下面實(shí)施例部分所示，已經(jīng)證明本文提出的方法可以減少已知在診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者中導(dǎo)致衰弱甚至致命感染的幾種病原體的負(fù)荷。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，實(shí)現(xiàn)該方法，以便在間歇吸入治療期間使受試者中病原微生物的負(fù)荷降低至少一個(gè)對(duì)數(shù)單位。

本文所使用的用于描述病原微生物的負(fù)荷變化的術(shù)語(yǔ)“對(duì)數(shù)單位”(也稱(chēng)為“對(duì)數(shù)減少”或“對(duì)數(shù)增加”)是一個(gè)數(shù)學(xué)術(shù)語(yǔ)，用于表明通過(guò)采用間歇吸入一氧化氮的方法從系統(tǒng)中消除的活的微生物的相對(duì)數(shù)，如本文所表明的。例如，減少5個(gè)對(duì)數(shù)單位意味著將微生物數(shù)量減少100,000倍，也就是說(shuō)，如果樣品上有100,000種致病微生物，則減少5個(gè)對(duì)數(shù)將使微生物數(shù)量減少到1。因此，減少1個(gè)對(duì)數(shù)單位意味著致病微生物的數(shù)量減少10倍，減少2個(gè)對(duì)數(shù)意味著病原體的數(shù)量減少100倍，減少3個(gè)對(duì)數(shù)意味著病原體的數(shù)量減少1000倍，減少4個(gè)對(duì)數(shù)意味著病原體數(shù)量減少10,000倍，等等。

如本領(lǐng)域已知的，cf通常與至少一個(gè)身體部位(例如，肺)的炎癥狀態(tài)相關(guān)，或與由一種或多種醫(yī)學(xué)病癥(包括但不限于病原體感染)引起的急性、慢性、局部或全身性炎癥相關(guān)。診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的炎癥也可視為cf的次要病癥(與cf相關(guān)的醫(yī)學(xué)病癥)。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，該方法通過(guò)降低與cf相關(guān)的炎癥水平來(lái)實(shí)現(xiàn)。

與cf相關(guān)的炎癥的減少通常被認(rèn)為是治療cf的有益效果。類(lèi)似地，與cf相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物水平的降低可以被認(rèn)為是治療被診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的方法的功效的指征，如本文所表現(xiàn)出的。關(guān)于診斷患有囊性纖維化的成年人類(lèi)受試者的全身炎癥與以前住院的關(guān)系的方法和討論的示例條款，參見(jiàn)ngan，d.a.等人的bmcpulmonarymedicine，2012,12(3)。

在本發(fā)明的一些實(shí)施方案的上下文中，與cf相關(guān)的炎性或炎癥生物標(biāo)志物包括如下物質(zhì)的血清/血液水平，所述物質(zhì)包括但不限于c-反應(yīng)蛋白(crp)、諸如白細(xì)胞介素il-6和il-1β的細(xì)胞因子、α-1-抗胰蛋白酶(aat)、觸珠蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、各種免疫球蛋白、粒酶b(gzmb)、趨化因子c-c基序配體18(ccl18/parc)、表面活性蛋白d(sp-d)、脂多糖(lps)-結(jié)合蛋白和可溶性分化簇14(scd14)。

本發(fā)明實(shí)施方案的上下文中使用的術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞因子”包括趨化因子、干擾素、白介素、淋巴因子和腫瘤壞死因子。

以下是與cf相關(guān)的四種非限制性示例性炎性生物標(biāo)志物的簡(jiǎn)要描述。

腫瘤壞死因子α(tnfα)向身體發(fā)出信號(hào)，將嗜中性白細(xì)胞攜帶到感染或損傷部位。已知tnfα是細(xì)胞因子或細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)蛋白。就像在事故中的“第一反應(yīng)者”一樣，tnfα通過(guò)向最大損傷處的身體部位發(fā)出信號(hào)來(lái)起作用，從而使免疫系統(tǒng)能夠有效地作出反應(yīng)，即發(fā)送嗜中性粒細(xì)胞。

核因子κb(nfkb)是轉(zhuǎn)錄因子蛋白質(zhì)復(fù)合物，其作為某些基因的開(kāi)關(guān)。當(dāng)nfkb被允許通過(guò)tnfa的幫助進(jìn)入細(xì)胞核時(shí)，它啟動(dòng)允許細(xì)胞增殖、成熟并避免通過(guò)細(xì)胞凋亡(程序性細(xì)胞死亡)破壞的基因。這樣可以使白細(xì)胞復(fù)制和實(shí)現(xiàn)其清潔感染或受傷區(qū)域的活性度。nfkb打開(kāi)所有可用于最快響應(yīng)的通道，這類(lèi)似于通信線(xiàn)路上的優(yōu)先級(jí)設(shè)置。

白細(xì)胞介素-6(il-6)是一種細(xì)胞因子，它指示嗜中性粒細(xì)胞破壞自身，卻將單核細(xì)胞(另一種類(lèi)型的白細(xì)胞)吸引到感染或受傷區(qū)域。單核細(xì)胞產(chǎn)生巨噬細(xì)胞，這些巨噬細(xì)胞通過(guò)吞噬作用清除碎片和病原體，巨噬細(xì)胞通過(guò)上述過(guò)程降解死細(xì)胞和其他顆粒整體。

c-反應(yīng)蛋白(crp)是一種“模式識(shí)別受體”蛋白質(zhì)，這意味著它標(biāo)記了被識(shí)別的碎片從而將其清除，這是由肝臟響應(yīng)于il-6水平而產(chǎn)生，它還與死亡和垂死細(xì)胞的表面結(jié)合，而且也與某些形式的細(xì)菌結(jié)合。crp作為巨噬細(xì)胞通過(guò)吞噬作用攝取某些物質(zhì)的一種信號(hào)，從而有助于在炎癥期間最終清除碎片。

根據(jù)一些實(shí)施方案，監(jiān)測(cè)與cf相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物的水平可用于確定治療與cf相關(guān)炎癥的過(guò)程和效果。在一些實(shí)施方案中，基于治療開(kāi)始前受試者的血清水平的基線(xiàn)，在治療期間，從受試者提取的血清中與cf相關(guān)的生物標(biāo)志物的水平降低至少3％、5％、10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。

在一些實(shí)施方案中，與cf相關(guān)的生物標(biāo)志物是crp，與開(kāi)始治療前受試者的基線(xiàn)水平相比，間歇吸入治療期間crp的血清水平降低至少3％、5％、10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。

在一些實(shí)施方案中，與cf相關(guān)的生物標(biāo)志物是細(xì)胞因子，例如但不限于tnfα、il-1β、il-6、il-8、il-10和/或il-12p70，與開(kāi)始治療前的受試者的基線(xiàn)水平相比，細(xì)胞因子的血清水平降低至少3％、5％、10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。在一些實(shí)施方案中，在本文提供的方法中用作炎性生物標(biāo)志物的細(xì)胞因子是il-6和il-1β。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，提供了一種通過(guò)使人類(lèi)受試者間歇吸入濃度至少為160ppm的一氧化氮的氣體混合物來(lái)減少人類(lèi)受試者中病原微生物的負(fù)荷的方法。

根據(jù)該方面的一些實(shí)施方案，人類(lèi)受試者是如本文所述診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者。

在一些實(shí)施方案中，如本文所述，致病微生物引起與cf相關(guān)的微生物感染。根據(jù)一些實(shí)施方案，病原微生物選自由產(chǎn)堿假單胞菌、非粘液樣和粘液樣銅綠假單胞菌、煙曲霉菌、金黃色葡萄球菌，嗜血桿菌、洋蔥伯克霍爾德菌、肺炎克雷伯桿菌、大腸桿菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(mrsa)、對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(mssa)、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌、無(wú)色桿菌屬、木糖氧化無(wú)色桿菌和非結(jié)核分枝桿菌(ntm)所組成的組。

根據(jù)一些實(shí)施方案，病原微生物選自由產(chǎn)堿假單胞菌、對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(mssa)、無(wú)色桿菌屬、煙曲霉菌、非粘液樣銅綠假單胞菌和粘液樣銅綠假單胞菌所組成的組。

如上所述，在一些實(shí)施方案中，病原微生物的負(fù)荷在間歇吸入期間通過(guò)目前要求保護(hù)的方法減少至少1個(gè)log單位。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，提供了一種通過(guò)使人類(lèi)受試者間歇吸入濃度為至少160ppm的一氧化氮的氣體混合物進(jìn)行治療來(lái)降低人類(lèi)受試者中與cf相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物的水平的方法。

根據(jù)一些實(shí)施方案，與cf相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物和/或其正常生理水平的變化與囊性纖維化和/或與cf相關(guān)的并發(fā)癥和其它醫(yī)學(xué)病癥相關(guān)。在診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者中與cf相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物的水平降低指示在診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者中治療炎癥(作為次要的醫(yī)學(xué)病癥)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，炎性生物標(biāo)志物(目前要求保護(hù)的方法以減少這些炎性生物標(biāo)志物為目標(biāo))選自由c-反應(yīng)蛋白(crp)、細(xì)胞因子、α-1-抗胰蛋白酶(aat)、觸珠蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、免疫球蛋白、粒酶b(gzmb)、趨化因子c-c基序配體18(ccl18/parc)、表面活性蛋白d(sp-d)、脂多糖(lps)-結(jié)合蛋白和可溶性分化簇14(scd14)所組成的組。

在本發(fā)明該方面的一些實(shí)施方案中，與cf相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物是c-反應(yīng)蛋白(crp)。與患者的生物標(biāo)志物的基線(xiàn)水平相比，由于間歇吸入所導(dǎo)致的減少率為至少3％、5％、10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。

在本發(fā)明該方面的一些實(shí)施方案中，與cf相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物是細(xì)胞因子，其選自由tnfα、il-1β、il-6、il-8、il-10和il-12p70所組成的組。在一些實(shí)施方案中，炎性生物標(biāo)志物是il-6和il-1β。與患者的生物標(biāo)志物的基線(xiàn)水平相比，細(xì)胞因子水平由于治療引起的降低率至少為3％、5％、10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。

根據(jù)該方面的一些實(shí)施方案，人類(lèi)受試者是如本文所述的囊性纖維化患者。

細(xì)支氣管炎

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，提供了治療有需要的受試者(例如，受細(xì)支氣管炎折磨的受試者，被診斷患有細(xì)支氣管炎的受試者)中細(xì)支氣管炎的方法。囊性纖維化的診斷可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法進(jìn)行，包括下面實(shí)施例部分所述的方法。

如本文所述的方法包括使人類(lèi)受試者間歇吸入包含一氧化氮的氣體混合物，如關(guān)于間歇吸入的任意一個(gè)實(shí)施方案及其任意組合中所述。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，治療細(xì)支氣管炎的方法包括在細(xì)支氣管炎患者中表現(xiàn)出的任何有益的治療效果，包括例如改善細(xì)支氣管炎癥狀(例如，改善肺功能)，改善與細(xì)支氣管炎相關(guān)的醫(yī)學(xué)病癥(例如，減少與細(xì)支氣管炎相關(guān)的微生物感染，減少與細(xì)支氣管炎相關(guān)的致病微生物的負(fù)荷，減少炎癥)以及減少患者的住院時(shí)間。

在一些實(shí)施方案中，如本文所述的治療細(xì)支氣管炎的方法被認(rèn)為是治療患有細(xì)支氣管炎的受試者的方法，并且包括改善細(xì)支氣管炎癥狀(例如，改善肺功能)、改善與細(xì)支氣管炎相關(guān)的醫(yī)學(xué)病癥(例如，減少與細(xì)支氣管炎相關(guān)的微生物感染，減少與細(xì)支氣管炎相關(guān)的致病微生物的負(fù)荷，減少炎癥)以及減少患者的住院時(shí)間的方法。

在研究在人類(lèi)中治療細(xì)支氣管炎的功效方面，通常認(rèn)為肺功能是減輕細(xì)支氣管炎癥狀的最簡(jiǎn)單和直接的標(biāo)記之一，因此改善人類(lèi)患者的肺功能代表患有細(xì)支氣管炎的人類(lèi)受試者得到了有益治療。

不受任何特定理論的約束，假設(shè)以外源性氣體形式遞送的一氧化氮容易進(jìn)入肺部系統(tǒng)，并通過(guò)肺血管擴(kuò)張起作用，這減少了病原微生物負(fù)荷，減輕了炎癥，并且減輕了其他臨床癥狀。

在一些實(shí)施方案中，本文任何一個(gè)實(shí)施方案及其任何組合中所述的方法通過(guò)改善患有被細(xì)支氣管炎相關(guān)醫(yī)學(xué)病癥惡化的細(xì)支氣管炎受試者的一種或多種生理參數(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)。根據(jù)本文所述的任何一個(gè)實(shí)施方案，任何這些參數(shù)的改進(jìn)指示通過(guò)間歇吸入一氧化氮進(jìn)行治療的有益效果。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，該方法通過(guò)改善至少一種肺功能(肺活量參數(shù))來(lái)實(shí)現(xiàn)，例如但不限于第1秒用力呼氣量(fev1)、用力肺活量(fvc)、fev1/fvc比值或fev1％和用力呼氣流量(fef)。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，該方法通過(guò)改善至少一種肺功能(肺活量參數(shù))來(lái)實(shí)現(xiàn)，例如但不限于第1秒用力呼氣量(fev1)、用力肺活量(fvc)、fev1/fvc比值或fev1％和用力呼氣流量(fef)。

肺活量參數(shù)用力肺活量(fvc)是以升計(jì)所測(cè)量的空氣體積，其可在完全吸氣后用力呼出，并且是肺活量測(cè)定法測(cè)試中最基本的操作。

肺活量參數(shù)第1秒用力呼氣量(fev1)是充分吸氣后1秒內(nèi)用力呼出的空氣量。fev1的平均值主要取決于性別和年齡，而數(shù)值落在平均值的80％到120％之間都被認(rèn)為是正常的。fev1的預(yù)測(cè)正常值可以在現(xiàn)場(chǎng)計(jì)算，并且取決于年齡、性別、身高、體重和種族以及他們所依據(jù)的研究。

肺活量參數(shù)fev1/fvc比(fev1％)是fev1與fvc的比值，該比值應(yīng)大約為75-80％。預(yù)測(cè)的fev1％被定義為患者的fev1％除以適合該患者的群體的平均fev1％。

肺活量參數(shù)用力呼氣流量(fef)是在用力呼氣中段期間從肺部流出的空氣的流量(或速度)。可以按照離散時(shí)間給出，通常由用力肺活量(fvc)的分?jǐn)?shù)份額定義，即fvc的25％(fef25)，fvc的50％(fef50)或fvc的75％(fef75)。也可以由間隔期間流量的平均值給出，也通常由fvc的具體分?jǐn)?shù)份額來(lái)定義，通常為25-75％(fef25-75)。在平均值的50-60％到130％的范圍內(nèi)的測(cè)量值被認(rèn)為是正常的，而fef的預(yù)測(cè)正常值可以在現(xiàn)場(chǎng)計(jì)算，并且取決于年齡、性別、身高、體重和種族以及他們依據(jù)的研究。最近研究表明，在檢測(cè)阻塞性小氣道疾病中，fef25-75％或fef25-50％可能比f(wàn)ev1更敏感。然而，在標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)志物沒(méi)有伴隨變化的情況下，中程呼氣流量的差異可能不夠明確，從而還不能被使用，目前的實(shí)踐指南建議繼續(xù)使用fev1、vc和fev1/vc作為阻塞性疾病的指標(biāo)。

注意，在一些實(shí)施方案中，如下文中定義和描述的其它肺活量參數(shù)可以用于研究間歇吸入160ppm一氧化氮治療細(xì)支氣管炎的進(jìn)展和功效，和/或用于研究該治療的安全性參數(shù)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，fev1被監(jiān)測(cè)為如下文所定義的現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)，其表示間歇吸入一氧化氮的有益效果，如本文所提供的。通常，fev1水平的增加被認(rèn)為是患有細(xì)支氣管炎的受試者的期望效果，其中，在患者的fev1基線(xiàn)水平(開(kāi)始治療之前)增加至少3％被認(rèn)為是顯著的改進(jìn)。在一些實(shí)施方案中，實(shí)施該方法使得在間歇吸入一氧化氮期間和/或之后(例如，在整個(gè)時(shí)間間隔期間和/或之后間歇吸入一氧化氮)，fev1水平增加至少3％、5％、10％、15％或20％，如本文所述。如下面實(shí)施例部分所示，已經(jīng)證明本文提出的方法可以減少已知在患有細(xì)支氣管炎的受試者中導(dǎo)致衰弱甚至致命感染的幾種病原體的負(fù)荷。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，實(shí)現(xiàn)該方法，以便在間歇吸入治療期間使受試者中病原微生物的負(fù)荷降低至少一個(gè)對(duì)數(shù)單位。

本文所使用的用于描述病原微生物的負(fù)荷變化的術(shù)語(yǔ)“對(duì)數(shù)單位”(也稱(chēng)為“對(duì)數(shù)減少”或“對(duì)數(shù)增加”)是一個(gè)數(shù)學(xué)術(shù)語(yǔ)，用于表明通過(guò)采用間歇吸入一氧化氮的方法從系統(tǒng)中消除的活的微生物的相對(duì)數(shù)，如本文所表明的。例如，減少5個(gè)對(duì)數(shù)單位意味著將微生物數(shù)量減少100,000倍，也就是說(shuō)，如果樣品上有100,000種致病微生物，則減少5個(gè)對(duì)數(shù)將使微生物數(shù)量減少到1。因此，減少1個(gè)對(duì)數(shù)單位意味著致病微生物的數(shù)量減少10倍，減少2個(gè)對(duì)數(shù)意味著病原體的數(shù)量減少100倍，減少3個(gè)對(duì)數(shù)意味著病原體的數(shù)量減少1000倍，減少4個(gè)對(duì)數(shù)意味著病原體數(shù)量減少10,000倍，等等。

細(xì)支氣管炎通常與至少一個(gè)身體部位(例如，肺)的炎癥狀態(tài)相關(guān)，或與由一種或多種醫(yī)學(xué)病癥(包括但不限于病原體感染)引起的急性、慢性、局部或全身性炎癥相關(guān)。患有細(xì)支氣管炎的受試者的炎癥也可視為細(xì)支氣管炎的次要病癥(與細(xì)支氣管炎相關(guān)的醫(yī)學(xué)病癥)。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，該方法通過(guò)降低與細(xì)支氣管炎相關(guān)的炎癥水平來(lái)實(shí)現(xiàn)。

與細(xì)支氣管炎相關(guān)的炎癥的減少通常被認(rèn)為是治療細(xì)支氣管炎的有益效果。類(lèi)似地，與細(xì)支氣管炎相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物水平的降低可以被認(rèn)為是治療患有細(xì)支氣管炎的受試者的方法的功效的指征，如本文所表現(xiàn)出的。

在本發(fā)明的一些實(shí)施方案的上下文中，與細(xì)支氣管炎相關(guān)的炎性或炎癥生物標(biāo)志物包括如下物質(zhì)的血清/血液水平，所述物質(zhì)包括但不限于c-反應(yīng)蛋白(crp)、諸如白細(xì)胞介素il-6和il-1β的細(xì)胞因子、α-1-抗胰蛋白酶(aat)、觸珠蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、各種免疫球蛋白、粒酶b(gzmb)、趨化因子c-c基序配體18(ccl18/parc)、表面活性蛋白d(sp-d)、脂多糖(lps)-結(jié)合蛋白和可溶性分化簇14(scd14)。

本發(fā)明實(shí)施方案的上下文中使用的術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞因子”包括趨化因子、干擾素、白介素、淋巴因子和腫瘤壞死因子。

以下是與細(xì)支氣管炎相關(guān)的四種非限制性示例性炎性生物標(biāo)志物的簡(jiǎn)要描述。

腫瘤壞死因子α(tnfα)向身體發(fā)出信號(hào)，將嗜中性白細(xì)胞攜帶到感染或損傷部位。已知tnfα是細(xì)胞因子或細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)蛋白。就像在事故中的“第一反應(yīng)者”一樣，tnfα通過(guò)向最大損傷處的身體部位發(fā)出信號(hào)來(lái)起作用，從而使免疫系統(tǒng)能夠有效地作出反應(yīng)，即發(fā)送嗜中性粒細(xì)胞。

核因子κb(nfkb)是轉(zhuǎn)錄因子蛋白質(zhì)復(fù)合物，其作為某些基因的開(kāi)關(guān)。當(dāng)nfkb被允許通過(guò)tnfa的幫助進(jìn)入細(xì)胞核時(shí)，它啟動(dòng)允許細(xì)胞增殖、成熟并避免通過(guò)細(xì)胞凋亡(程序性細(xì)胞死亡)破壞的基因。這樣可以使白細(xì)胞復(fù)制和實(shí)現(xiàn)其清潔感染或受傷區(qū)域的活性度。nfkb打開(kāi)所有可用于最快響應(yīng)的通道，這類(lèi)似于通信線(xiàn)路上的優(yōu)先級(jí)設(shè)置。

白細(xì)胞介素-6(il-6)是一種細(xì)胞因子，它指示嗜中性粒細(xì)胞破壞自身，卻將單核細(xì)胞(另一種類(lèi)型的白細(xì)胞)吸引到感染或受傷區(qū)域。單核細(xì)胞產(chǎn)生巨噬細(xì)胞，這些巨噬細(xì)胞通過(guò)吞噬作用清除碎片和病原體，巨噬細(xì)胞通過(guò)上述過(guò)程降解死細(xì)胞和其他顆粒整體。

c-反應(yīng)蛋白(crp)是一種“模式識(shí)別受體”蛋白質(zhì)，這意味著它標(biāo)記了被識(shí)別的碎片從而將其清除，這是由肝臟響應(yīng)于il-6水平而產(chǎn)生，它還與死亡和垂死細(xì)胞的表面結(jié)合，而且也與某些形式的細(xì)菌結(jié)合。crp作為巨噬細(xì)胞通過(guò)吞噬作用攝取某些物質(zhì)的一種信號(hào)，從而有助于在炎癥期間最終清除碎片。

根據(jù)一些實(shí)施方案，監(jiān)測(cè)與細(xì)支氣管炎相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物的水平可用于確定治療與細(xì)支氣管炎相關(guān)炎癥的過(guò)程和效果。在一些實(shí)施方案中，基于治療開(kāi)始前受試者的血清水平的基線(xiàn)，在治療期間，從受試者提取的血清中與細(xì)支氣管炎相關(guān)的生物標(biāo)志物的水平降低至少3％、5％、10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。

在一些實(shí)施方案中，與細(xì)支氣管炎相關(guān)的生物標(biāo)志物是crp，與開(kāi)始治療前受試者的基線(xiàn)水平相比，間歇吸入治療期間crp的血清水平降低至少3％、5％、10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。

在一些實(shí)施方案中，與細(xì)支氣管炎相關(guān)的生物標(biāo)志物是細(xì)胞因子，例如但不限于tnfα、il-1β、il-6、il-8、il-10和/或il-12p70，與開(kāi)始治療前的受試者的基線(xiàn)水平相比，細(xì)胞因子的血清水平降低至少3％、5％、10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。在一些實(shí)施方案中，在本文提供的方法中用作炎性生物標(biāo)志物的細(xì)胞因子是il-6和il-1β。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，提供了一種通過(guò)使人類(lèi)受試者間歇吸入濃度至少為160ppm的一氧化氮的氣體混合物來(lái)減少人類(lèi)受試者中病原微生物的負(fù)荷的方法。

根據(jù)該方面的一些實(shí)施方案，人類(lèi)受試者是如本文所述患有細(xì)支氣管炎的受試者。

在一些實(shí)施方案中，如本文所述，致病微生物引起與細(xì)支氣管炎相關(guān)的微生物感染。根據(jù)一些實(shí)施方案，病原微生物選自由產(chǎn)堿假單胞菌、非粘液樣和粘液樣銅綠假單胞菌、煙曲霉菌、金黃色葡萄球菌、嗜血桿菌、洋蔥伯克霍爾德菌、肺炎克雷伯桿菌、大腸桿菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(mrsa)、對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(mssa)、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌、無(wú)色桿菌屬、木糖氧化無(wú)色桿菌和非結(jié)核分枝桿菌(ntm)所組成的組。

根據(jù)一些實(shí)施方案，病原微生物選自由產(chǎn)堿假單胞菌、對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(mssa)、無(wú)色桿菌屬、煙曲霉菌、非粘液樣銅綠假單胞菌和粘液樣銅綠假單胞菌所組成的組。

如上所述，在一些實(shí)施方案中，病原微生物的負(fù)荷在間歇吸入期間通過(guò)目前要求保護(hù)的方法減少至少1個(gè)log單位。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，提供了一種通過(guò)使人類(lèi)受試者間歇吸入濃度為至少160ppm的一氧化氮的氣體混合物進(jìn)行治療來(lái)降低人類(lèi)受試者中與細(xì)支氣管炎相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物的水平的方法。

根據(jù)一些實(shí)施方案，與細(xì)支氣管炎相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物和/或其正常生理水平的變化與囊性纖維化和/或與細(xì)支氣管炎相關(guān)的并發(fā)癥和其它醫(yī)學(xué)病癥相關(guān)。在患有細(xì)支氣管炎的受試者中與細(xì)支氣管炎相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物的水平的降低指示了治療炎癥(作為次要的醫(yī)學(xué)病癥)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，與細(xì)支氣管炎相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物(目前要求保護(hù)的方法以減少這些炎性生物標(biāo)志物為目標(biāo))選自由c-反應(yīng)蛋白(crp)、細(xì)胞因子、α-1-抗胰蛋白酶(aat)、觸珠蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、免疫球蛋白、粒酶b(gzmb)、趨化因子c-c基序配體18(ccl18/parc)、表面活性蛋白d(sp-d)、脂多糖(lps)-結(jié)合蛋白和可溶性分化簇14(scd14)所組成的組。

在本發(fā)明該方面的一些實(shí)施方案中，與細(xì)支氣管炎相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物是c-反應(yīng)蛋白(crp)。與患者的生物標(biāo)志物的基線(xiàn)水平相比，由于間歇吸入所導(dǎo)致的減少率為至少3％、5％、10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。

在本發(fā)明該方面的一些實(shí)施方案中，與細(xì)支氣管炎相關(guān)的炎性生物標(biāo)志物是細(xì)胞因子，其選自由tnfα、il-1β、il-6、il-8、il-10和il-12p70所組成的組。在一些實(shí)施方案中，炎性生物標(biāo)志物是il-6和il-1β。與患者的生物標(biāo)志物的基線(xiàn)水平相比，細(xì)胞因子水平由于治療的降低率至少為3％、5％、10％、15％、20％、30％、35％、40％、50％或至少60％。

根據(jù)該方面的一些實(shí)施方案，人類(lèi)受試者是如本文所述的囊性纖維化患者。

間歇吸入：

如上所述，本文提供的任何方法包括使人類(lèi)受試者間歇吸入包含濃度為至少160ppm的一氧化氮的氣體混合物。

術(shù)語(yǔ)“間歇”在本文和本領(lǐng)域中被用作“連續(xù)”的反義詞，并且意味著開(kāi)始和停止動(dòng)作和/或間隔地執(zhí)行動(dòng)作。

“間歇吸入”是指人類(lèi)受試者間歇地呼吸含有指定濃度一氧化氮的氣體混合物；因此雖然在間歇吸入期間吸入的氣體混合物的體積可能不會(huì)顯著變化，混合物的化學(xué)成分卻根據(jù)預(yù)定方案而改變，如下文所述。因此，人類(lèi)受試者吸入預(yù)定時(shí)間段的濃度為至少160ppm的一氧化氮的氣體混合物，并且在這些時(shí)間段之間，人類(lèi)受試者吸入基本上不含一氧化氮的氣體混合物(例如環(huán)境空氣或另一種無(wú)一氧化氮的混合物)。

此處及通篇中的“含有一氧化氮的氣體混合物(anitricoxide-containinggaseousmixture)”或“包含一氧化氮的氣體混合物(agasmixturecomprisingnitricoxide)”用于描述含有至少160ppm一氧化氮的氣體混合物。含一氧化氮的混合物可以包含160ppm、170ppm、180ppm、190ppm、200ppm和甚至更高濃度的一氧化氮。如本文所定義的，本文提及的其它氣體混合物包括少于160ppm的一氧化氮或者基本上不含一氧化氮。

“基本上不含一氧化氮”是指不大于50ppm，不大于40ppm，不大于30ppm，不大于20ppm，不大于10ppm，不大于5ppm，不大于1ppm，不大于ppb，并且包括絕對(duì)不含一氧化氮。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，間歇吸入包括一個(gè)或多個(gè)循環(huán)，每個(gè)循環(huán)包括持續(xù)吸入含有指定高濃度(例如至少160ppm)的一氧化氮的氣體混合物第一時(shí)間段，接著吸入基本上不含一氧化氮的氣體混合物第二時(shí)間段。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，在第二時(shí)間段期間，受試者可以吸入環(huán)境空氣或如本文所定義的基本上不含一氧化氮的受控混合氣體。

在一些實(shí)施方案中，第一時(shí)間段為10分鐘至45分鐘，或20至45分鐘，或20至40分鐘，以及根據(jù)一些實(shí)施方案，持續(xù)約30分鐘。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，第二時(shí)間段為3小時(shí)至5小時(shí)，或3至4小時(shí)，以及根據(jù)一些實(shí)施方案，第二時(shí)間段持續(xù)約3.5小時(shí)。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，根據(jù)第一和第二時(shí)間段的持續(xù)時(shí)間，這種吸入方案在24小時(shí)內(nèi)重復(fù)1-6次。

在一些實(shí)施方案中，一次循環(huán)為間歇遞送一氧化氮(例如160ppm)30分鐘，之后不呼吸一氧化氮3.5小時(shí)，每天重復(fù)該循環(huán)一次至六次。根據(jù)一些實(shí)施方案，每天重復(fù)該循環(huán)5次?；蛘撸刻熘貜?fù)該循環(huán)3次。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，每天1-5次循環(huán)的方案進(jìn)行1至21天，或2至14天，或3至10天。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，在2周的時(shí)間段內(nèi)進(jìn)行間歇吸入。然而，如本文所述的間歇性一氧化氮給藥的更長(zhǎng)時(shí)間段也是可以預(yù)期的。

安全性：

如上所述，已經(jīng)表明間歇吸入160ppm的一氧化氮在所有年齡的人類(lèi)受試者中是安全的。通過(guò)監(jiān)測(cè)人的一個(gè)或多個(gè)生理參數(shù)并且同時(shí)確定在所監(jiān)測(cè)的參數(shù)中沒(méi)有實(shí)質(zhì)的不利變化，以此作為本文給出的方法的安全措施已經(jīng)證明了安全性。根據(jù)本發(fā)明的任何一個(gè)實(shí)施方案，間歇吸入是在監(jiān)測(cè)人類(lèi)受試者中的一種或多種生理參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行的。

在一些實(shí)施方案中，本文公開(kāi)的方法在監(jiān)測(cè)各種參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行，所述各種參數(shù)與維持所需劑量和方案相關(guān)的、與所述方法的安全性相關(guān)并且與治療功效相關(guān)。

根據(jù)本發(fā)明的任何一個(gè)實(shí)施方案，在監(jiān)測(cè)人類(lèi)中的一種或多種生理參數(shù)時(shí)，以及在所監(jiān)測(cè)的安全性參數(shù)中確定沒(méi)有實(shí)質(zhì)的不利變化時(shí)，該方法是作為本文呈現(xiàn)的方法的安全措施來(lái)進(jìn)行。

在一些實(shí)施方案中，該方法在保持測(cè)量的安全性的同時(shí)進(jìn)行，包括非侵入性監(jiān)測(cè)體液化學(xué)，例如灌注指數(shù)(pi)、呼吸速率(rra)、氧合血紅蛋白飽和度(spo2/sao2/do)、總血紅蛋白(sphb)、碳氧血紅蛋白(spco)、高鐵血紅蛋白(spmet)、氧含量(spoc)和脈搏灌注變異指數(shù)(pvi))，因?yàn)檫@些生理參數(shù)是本領(lǐng)域已知的。通常，這些現(xiàn)場(chǎng)生理參數(shù)通過(guò)脈搏血氧定量法進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

根據(jù)其一些實(shí)施方案，作為本公開(kāi)方法的安全措施也被監(jiān)控的其它參數(shù)是場(chǎng)外(off-site)生理參數(shù)，其通常通過(guò)使用非侵入性(例如，尿液，糞便或痰樣品)和侵入性(如血液或活檢)方法來(lái)收集身體樣品從而測(cè)定。

例如，通常通過(guò)侵入性方法測(cè)量的場(chǎng)外生理參數(shù)可以包括血清亞硝酸鹽/硝酸鹽(no2^-/no3^-)、血液高鐵血紅蛋白、完全血細(xì)胞計(jì)數(shù)(cbc)、血液化學(xué)/生物化學(xué)(電解質(zhì)，腎臟和肝臟功能試驗(yàn)等)和凝血試驗(yàn)。

通常通過(guò)非侵入性方法測(cè)量的場(chǎng)外生理參數(shù)可包括尿亞硝酸鹽/硝酸鹽(no2^-/no3^-)、尿液中的妊娠試驗(yàn)以及痰液、尿液或糞便中的細(xì)菌和真菌負(fù)荷。

在一些實(shí)施例中，該方法是在維持安全措施的同時(shí)進(jìn)行的，其中安全措施包括控制吸入氣體的混合物和監(jiān)測(cè)呼出氣體，這是通過(guò)用于現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)和控制受試者經(jīng)受的或通過(guò)遞送接口遞送的混合物的含量和/或流量來(lái)實(shí)現(xiàn)的，和/或在通過(guò)實(shí)時(shí)反饋來(lái)監(jiān)測(cè)現(xiàn)場(chǎng)呼出氣體并控制攝入量的同時(shí)進(jìn)行該方法。在一些實(shí)施方案中，該方法是在監(jiān)測(cè)人暴露于或呼出的氣體混合物中的一氧化氮、o2、co2和no2的濃度的同時(shí)進(jìn)行的。

在一些實(shí)施方案中，含有一氧化氮的氣體混合物中的一氧化氮濃度被控制為偏離預(yù)定濃度不超過(guò)10％。例如，當(dāng)設(shè)定為160ppm的一氧化氮的濃度實(shí)質(zhì)上不超過(guò)144ppm至176ppm的邊界時(shí)，實(shí)施該方法。

類(lèi)似地，控制含有一氧化氮的氣體混合物中的no2濃度以使得no2的濃度保持低于5ppm。

此外，控制含有一氧化氮的氣體混合物中的氧含量以使得混合物中的o2濃度為約20％至約25％。

或者或另外，控制含有一氧化氮的氣體混合物中的氧含量以使得吸入氧的分?jǐn)?shù)(fio2)為約20％至約100％。

如本文所使用的短語(yǔ)“吸入的氧氣的分?jǐn)?shù)”或“fio2”是指給定氣體樣本中氧氣的分?jǐn)?shù)或百分比。例如，海平面環(huán)境空氣中含有20.9％的氧氣，相當(dāng)于0.02的fio2。富氧空氣具有比0.21更高的fio2，高達(dá)1.00，這意味著100％的氧氣。在本發(fā)明實(shí)施方案的上下文中，fio2保持在1以下(小于100％的氧氣)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，在含有一氧化氮的氣體混合物中吸入氧氣的分?jǐn)?shù)(fio2)為0.20。在替代實(shí)施方案中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.25。在替代實(shí)施方案中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.3。在替代實(shí)施例中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.35。在替代實(shí)施方案中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.4。在替代實(shí)施例中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.45。在替代實(shí)施方案中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.5。在替代實(shí)施方案中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.55。在替代實(shí)施方案中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.6。在替代實(shí)施方案中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.65。在替代實(shí)施方案中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.7。在替代實(shí)施方案中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.75。在替代實(shí)施例中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.8。在替代實(shí)施例中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.85。在替代實(shí)施例中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.9。在替代實(shí)施方案中，含有一氧化氮的氣體混合物中的fio2為0.95。

在一些實(shí)施方案中，含有一氧化氮的氣體混合物通過(guò)將一氧化氮的原料供應(yīng)與空氣組合形成，空氣將一氧化氮的原料供應(yīng)稀釋至所需濃度。在一些實(shí)施方案中，將一氧化氮的原料供應(yīng)與空氣和氧氣組合以將fio2保持在0.20以上。可以改變一氧化氮、空氣和/或氧氣的比例以達(dá)到所需的一氧化氮濃度和fio2。

如本文所使用的短語(yǔ)“潮氣末co2(endtidalco2)”或“etco2”是指在呼出氣結(jié)束時(shí)的二氧化碳(co2)的分壓或最大濃度，其表示為co2的比例或壓力單位mmhg。人的正常值范圍為5％至6％的二氧化碳，相當(dāng)于35-45mmhg。因?yàn)闅怏w由靜脈系統(tǒng)輸送到心臟的右側(cè)，然后由右心室泵入肺，而且由于二氧化碳從肺部擴(kuò)散到呼出的空氣中，所以etco2值反映了心輸出量(co)和肺血流量。稱(chēng)為電位計(jì)的裝置測(cè)量呼氣結(jié)束時(shí)的co2的分壓或最大濃度。在本發(fā)明的實(shí)施方案的上下文中，使用電位計(jì)，并監(jiān)視etco2水平，以便當(dāng)etco2大于60mmhg時(shí)提供警告反饋。

呼吸道no、no2和o2濃度水平(吸入和呼出；吸氣和呼氣氣體)通常通過(guò)從位于電化學(xué)分析儀配備的吸入面罩no、no2和o2中的接口樣本端口進(jìn)行采樣來(lái)監(jiān)測(cè)。在本發(fā)明的實(shí)施方案的上下文中，安全性考慮要求在一氧化氮施用期間發(fā)生如下情況的場(chǎng)合的數(shù)量絕對(duì)最小化，所述情況是no2水平超過(guò)5ppm、一氧化氮濃度變化超過(guò)10％和fio2/o2水平降至20％以下。

值得注意的是，炎性生物標(biāo)志物的急劇升高可能與接受一氧化氮吸入治療的受試者中觀(guān)察到的稱(chēng)為“細(xì)胞因子風(fēng)暴”的現(xiàn)象相關(guān)。因此，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，在執(zhí)行本文所述方法的同時(shí)監(jiān)測(cè)炎性生物標(biāo)志物在與該方法有關(guān)的安全性考慮方面具有額外的作用，其中非顯著增加的炎性標(biāo)志物表示安全性。

在一些實(shí)施例中，通過(guò)非侵入性措施和/或輕度侵入性措施來(lái)監(jiān)測(cè)一個(gè)或多個(gè)生理參數(shù)。

在一些實(shí)施方案中，通過(guò)現(xiàn)場(chǎng)測(cè)量和分析技術(shù)和/或非現(xiàn)場(chǎng)測(cè)量和分析技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)受試者的生理參數(shù)的監(jiān)測(cè)，所述現(xiàn)場(chǎng)測(cè)量和分析技術(shù)基于偶爾、連續(xù)或周期性在受試者的床側(cè)實(shí)時(shí)地現(xiàn)場(chǎng)從受試者收集的樣本，所述非現(xiàn)場(chǎng)測(cè)量和分析技術(shù)基于從受試者偶爾或周期性收集的樣本，這些樣本被發(fā)送用于在晚些時(shí)候在非現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行處理以提供結(jié)果和分析。

在本發(fā)明的一些實(shí)施方案的上下文中，短語(yǔ)“現(xiàn)場(chǎng)測(cè)量和分析技術(shù)”或“現(xiàn)場(chǎng)技術(shù)”是指實(shí)時(shí)向醫(yī)生報(bào)告受試者中指定的生理參數(shù)的監(jiān)測(cè)技術(shù)，而不需要將樣本或原始數(shù)據(jù)發(fā)送到非現(xiàn)場(chǎng)設(shè)施進(jìn)行分析?，F(xiàn)場(chǎng)技術(shù)通常是非侵入性的，然而，一些依賴(lài)于來(lái)自諸如呼吸管、排水管、靜脈導(dǎo)管或皮下端口或任何其他可植入探針的侵入性醫(yī)療裝置的取樣。因此，如本文所使用的短語(yǔ)“現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)”是指可通過(guò)在線(xiàn)技術(shù)獲得的生理參數(shù)。

除了主要表現(xiàn)為由醫(yī)生立即手動(dòng)響應(yīng)其任何關(guān)鍵變化的能力的實(shí)時(shí)現(xiàn)場(chǎng)確定生理參數(shù)的微不足道的優(yōu)點(diǎn)外，由生理參數(shù)的實(shí)時(shí)在線(xiàn)測(cè)定得到的數(shù)據(jù)可以被輸入機(jī)器，用于機(jī)器的實(shí)時(shí)反饋控制。在本發(fā)明的實(shí)施方案的上下文中，術(shù)語(yǔ)“實(shí)時(shí)”還涉及更新信息并基本上以與接收信息相同的速率來(lái)對(duì)其進(jìn)行響應(yīng)的系統(tǒng)。這樣的實(shí)時(shí)反饋可以用于遵守治療方案和/或響應(yīng)于作為安全措施的可接受參數(shù)的任何關(guān)鍵偏差而立即且自動(dòng)地起作用。

因此，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，術(shù)語(yǔ)“現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)”是指生理和/或機(jī)械和/或化學(xué)數(shù)據(jù)，其可獲得并且可以在相對(duì)短的時(shí)間段內(nèi)在受試者的位置處(例如，床邊)或附近被使用或考慮，所述相對(duì)短的時(shí)間段內(nèi)也就是說(shuō)，跨越采樣、測(cè)試、處理和顯示/使用數(shù)據(jù)的步驟的時(shí)間段相對(duì)短?？梢栽诶鐝牟蓸拥绞褂蒙儆?0分鐘、少于10分鐘、少于5分鐘、少于1分鐘、少于0.5分鐘、少于20分鐘、少于10秒、少于5秒、或不到1秒時(shí)間內(nèi)獲得“現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)”。例如，通過(guò)稱(chēng)為脈搏血氧定量法的技術(shù)獲得現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)所需的時(shí)間幾乎是瞬時(shí)的；一旦設(shè)備就位并安裝，關(guān)于例如人類(lèi)受試者周?chē)难躏柡投鹊臄?shù)據(jù)在從采樣到使用不到1秒內(nèi)就可獲得。

在本發(fā)明的一些實(shí)施方案的上下文中，術(shù)語(yǔ)“非現(xiàn)場(chǎng)測(cè)量和分析技術(shù)”或“非現(xiàn)場(chǎng)技術(shù)”是指在發(fā)送樣本或原始數(shù)據(jù)到脫機(jī)(通常是非現(xiàn)場(chǎng))設(shè)施并且有時(shí)在獲得樣本后的幾個(gè)小時(shí)或幾天內(nèi)離線(xiàn)接收分析之后提供關(guān)于受試者的指定生理參數(shù)的信息的技術(shù)。非現(xiàn)場(chǎng)技術(shù)通?；谕ㄟ^(guò)輕度侵入性技術(shù)和侵入性技術(shù)收集的樣本，輕度侵入性技術(shù)例如用于監(jiān)測(cè)炎癥細(xì)胞因子血漿水平的血液提取，侵入性技術(shù)例如活檢、插入導(dǎo)管或引流管，然而，一些非現(xiàn)場(chǎng)技術(shù)依賴(lài)于無(wú)創(chuàng)取樣如尿液和糞便化學(xué)物質(zhì)的離線(xiàn)和非現(xiàn)場(chǎng)分析。如本文所使用的短語(yǔ)“非現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)”是指可通過(guò)非現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)獲得的生理參數(shù)。

因此，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式，術(shù)語(yǔ)“非現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)”是指在相對(duì)長(zhǎng)的時(shí)間段內(nèi)獲得并可以使用或考慮的生理和/或機(jī)械和/或化學(xué)數(shù)據(jù)，即與現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)相比，跨越采樣、測(cè)試、處理和顯示/使用數(shù)據(jù)步驟的時(shí)間段是長(zhǎng)的。因此，從采樣到使用超過(guò)1天、超過(guò)12小時(shí)、超過(guò)1小時(shí)、超過(guò)30分鐘、超過(guò)10分鐘或超過(guò)5分鐘時(shí)間內(nèi)可以獲得“非現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)”。

通常在樣本經(jīng)受化學(xué)、生物、機(jī)械或其它的處理工序后可獲得“非現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)”，這些處理工序通常在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，因此不“在現(xiàn)場(chǎng)”(即在受試者的位置或附近)進(jìn)行。

用于監(jiān)測(cè)各種生理參數(shù)的非侵入性措施包括但不限于痰、尿和糞便樣本，脈搏血氧定量法、非插管呼吸分析和/或二氧化碳監(jiān)測(cè)法。用于監(jiān)測(cè)各種生理參數(shù)的侵入性措施包括但不限于血液提取、持續(xù)血液氣體和代謝物分析，并且在一些實(shí)施方案中，包括插管呼吸分析和經(jīng)皮監(jiān)護(hù)措施。強(qiáng)烈的侵入性措施包括活檢和其他外科操作。

術(shù)語(yǔ)“脈搏血氧定量法”是指通過(guò)遵循血紅蛋白透過(guò)皮膚(手指，耳垂等)的光吸收特性以及光譜差異來(lái)測(cè)量呼吸相關(guān)生理參數(shù)的非侵入性和現(xiàn)場(chǎng)技術(shù)，所述光譜差異在血紅蛋白的氧合和/或脫氧物質(zhì)以及與其它分子結(jié)合的血紅蛋白物質(zhì)中觀(guān)察到，所述其它分子諸如一氧化碳(co)和高鐵血紅蛋白，其中血紅素基團(tuán)中的鐵是fe³⁺(鐵)態(tài)?？梢酝ㄟ^(guò)脈搏血氧測(cè)定法確定的生理參數(shù)包括例如spo2、spmet和spco。

如本文所用的術(shù)語(yǔ)“非插管呼吸分析”是指一組非侵入性和現(xiàn)場(chǎng)技術(shù)，例如肺活量測(cè)定法和二氧化碳測(cè)定法，其通過(guò)對(duì)吸入/呼出的氣流進(jìn)行抽樣或通過(guò)指導(dǎo)受試者向檢測(cè)器呼吸來(lái)提供生理肺動(dòng)力學(xué)和呼吸氣體化學(xué)的測(cè)量，所有這些都不會(huì)進(jìn)入受試者的呼吸道或其他孔口，也不會(huì)在任何階段穿透皮膚。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“肺活量測(cè)定法”是指通過(guò)非侵入性和現(xiàn)場(chǎng)肺活量計(jì)對(duì)呼吸相關(guān)參數(shù)和肺功能的一系列測(cè)量。以下是可以在本發(fā)明的一些實(shí)施方案的上下文中使用的示例性肺活量測(cè)定參數(shù)：

肺活量參數(shù)潮氣量(tv)是正常休息時(shí)吸入和呼出的空氣量，其中正常值基于人的理想體重。

肺活量參數(shù)總肺容量(tlc)是肺部存在的最大空氣量。

肺活量參數(shù)肺活量(vc)是最大吸入后可從肺部排出的最大空氣量，其等于吸氣儲(chǔ)備量、潮氣量和呼氣儲(chǔ)備量的總和。

肺活量參數(shù)慢肺活量(svc)是盡可能深入地吸入然后完全呼出的空氣量，這測(cè)量了一個(gè)人可以呼吸多深。

肺活量參數(shù)用力肺活量(fvc)是以升計(jì)測(cè)量的空氣體積，其可在完全吸氣后用力呼出，并且是肺活量測(cè)定法測(cè)試中最基本的操作。

肺活量參數(shù)第1秒用力呼氣量(fev1)是完全吸氣后1秒內(nèi)用力呼出的空氣量。fev1的平均值主要取決于性別和年齡，而在平均值的80％到120％之間的值被認(rèn)為是正常的。fev1的預(yù)期正常值可以在現(xiàn)場(chǎng)計(jì)算，并且取決于年齡、性別、身高、體重和種族以及他們所依據(jù)的研究。

肺活量參數(shù)fev1/fvc比(fev1％)是fev1與fvc的比值，該比值應(yīng)大約為75-80％。預(yù)測(cè)的fev1％被定義為患者的fev1％除以適合該患者的群體的平均fev1％。

肺活量參數(shù)用力呼氣流量(fef)是在用力呼氣中段期間從肺部流出的空氣的流量(或速度)?？梢园凑针x散時(shí)間給出，通常由用力肺活量(fvc)的分?jǐn)?shù)份額定義，即fvc的25％(fef25)，fvc的50％(fef50)或fvc的75％(fef75)。也可以由間隔期間流量的平均值給出，也通常由fvc的具體分?jǐn)?shù)份額來(lái)定義，通常為25-75％(fef25-75)。在平均值的50-60％到130％的范圍內(nèi)的測(cè)量值被認(rèn)為是正常的，而fef的預(yù)測(cè)正常值可以在現(xiàn)場(chǎng)計(jì)算，并且取決于年齡、性別、身高、體重和種族以及他們依據(jù)的研究。最近研究表明，在檢測(cè)阻塞性小氣道疾病中，fef25-75％或fef25-50％可能比f(wàn)ev1更敏感。然而，在標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)志物沒(méi)有伴隨變化的情況下，中程呼氣流量的差異可能不夠明確，從而還不能被使用，目前的實(shí)踐指南建議繼續(xù)使用fev1、vc和fev1/vc作為阻塞性疾病的指標(biāo)。

肺活量參數(shù)負(fù)吸氣力(nif)是胸肌能夠使出以進(jìn)行呼吸的最大力量，其中數(shù)值表示呼吸肌肉的狀態(tài)。

肺活量參數(shù)mmef或mef指最大(中等)呼氣流量最大，并且是從流量曲線(xiàn)取得的呼氣流量峰值，以每秒升數(shù)為單位測(cè)量。mmef與峰值呼氣流量(pef)有關(guān)，通常由峰值流量計(jì)測(cè)量，以升/分鐘計(jì)。

肺活量參數(shù)峰值呼氣流量(pef)是指在以完全吸氣開(kāi)始的最大用力呼氣期間達(dá)到的最大流量(或速度)，以每分鐘升數(shù)測(cè)量。

肺活量參數(shù)一氧化碳的擴(kuò)散能力(dlco)是指在標(biāo)準(zhǔn)時(shí)間(通常為10秒)內(nèi)從單次吸氣中吸取的一氧化碳?，F(xiàn)場(chǎng)計(jì)算器可用于對(duì)血紅蛋白水平、貧血、肺出血以及進(jìn)行測(cè)量的海拔和/或大氣壓做dlco校正。

肺活量參數(shù)最大通氣量(mvv)是一分鐘內(nèi)可吸入和呼出的最大空氣量的量度。通常，該參數(shù)在15秒時(shí)間段內(nèi)確定，之后被外推為以升/分鐘表達(dá)的一分鐘的值。男性和女性的平均值分別為140-180升/分鐘和80-120升/分鐘。

肺活量參數(shù)靜態(tài)肺順應(yīng)性(cst)是指任何給定施加壓力下肺容積的變化。靜態(tài)肺順應(yīng)性可能是檢測(cè)異常肺動(dòng)力學(xué)最敏感的參數(shù)。如果cst是可公度群體(commensurablepopulation)平均值的60％至140％，則認(rèn)為cst是正常的。

肺活量參數(shù)用力呼氣時(shí)間(fet)是以秒為單位測(cè)量呼氣的長(zhǎng)度。

肺活量參數(shù)慢肺活量(svc)是在緩慢最大吸入后能夠緩慢呼出的空氣的最大體積。

靜態(tài)內(nèi)源性呼氣末正壓(靜態(tài)peepi)測(cè)量為氣道閉塞期間的平臺(tái)氣道開(kāi)啟壓力。

肺活量參數(shù)最大吸氣壓(mip)是代表一個(gè)人在吸入期間自己產(chǎn)生的最高負(fù)壓水平的值，其以水壓厘米(cmh2o)表示，并用壓力計(jì)測(cè)量并用作隔膜強(qiáng)度指標(biāo)和獨(dú)立診斷參數(shù)。

術(shù)語(yǔ)“二氧化碳監(jiān)測(cè)”是指用于監(jiān)測(cè)呼吸氣體中二氧化碳(co2)的濃度或分壓的技術(shù)。潮氣末co2或etco2是通過(guò)二氧化碳測(cè)定可以確定的參數(shù)。

氣體檢測(cè)技術(shù)被集成到許多醫(yī)療和其他工業(yè)裝置中，并且允許定量測(cè)定流過(guò)或以其他方式捕獲的氣態(tài)樣本的化學(xué)成分。在本發(fā)明的實(shí)施方案的上下文中，氣體的這種化學(xué)測(cè)定是現(xiàn)場(chǎng)非侵入性的一系列測(cè)試，用來(lái)控制和監(jiān)督本文所呈現(xiàn)的方法的活動(dòng)。氣體檢測(cè)器以及氣體混合器和調(diào)節(jié)器用于確定和控制吸入氣體混合物中的吸入氧含量分?jǐn)?shù)(fio2)和一氧化氮濃度等參數(shù)。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，對(duì)諸如心率，血壓，呼吸頻率和體溫的生命體征的測(cè)量被認(rèn)為是一系列現(xiàn)場(chǎng)和非侵入性測(cè)量的一部分。

術(shù)語(yǔ)“綜合肺指數(shù)”(ipi)是指患者的肺部指數(shù)，其使用來(lái)自二氧化碳測(cè)定法中的吸入/呼出氣體以及來(lái)自脈搏血氧測(cè)定法中溶解在血液中的氣體的信息，以提供描述患者呼吸狀態(tài)的單一值。通過(guò)現(xiàn)場(chǎng)和非侵入性技術(shù)獲得的ipi整合了患者監(jiān)測(cè)器提供的四個(gè)主要生理參數(shù)(通過(guò)二氧化碳測(cè)定法測(cè)量的潮氣末co2和呼吸頻率，由脈搏血氧測(cè)定法測(cè)量的脈搏率和血氧飽和度spo2)，使用該信息以及算法以產(chǎn)生ipi得分。ipi提供了一個(gè)患者的整體通氣狀態(tài)的實(shí)時(shí)的簡(jiǎn)單的指示，其以從1到10的整數(shù)(得分)來(lái)表示。ipi得分不能取代目前的患者呼吸參數(shù)，而是用于快速評(píng)估患者的呼吸狀態(tài)以確定是否需要額外臨床評(píng)估或干預(yù)。

根據(jù)本文所述的一些實(shí)施方案，所監(jiān)測(cè)的生理或化學(xué)參數(shù)包括以下參數(shù)中的一個(gè)或多個(gè)：

灌注指數(shù)(pi)；

呼吸頻率(rra)；

血氧飽和度(spo2)；

總血紅蛋白(sphb)；

碳氧血紅蛋白(spco)；

高鐵血紅蛋白(spmet)；

氧含量(spoc)；和

脈搏灌注變異指數(shù)(pvi)，

和/或至少一個(gè)選自以下構(gòu)成的組的場(chǎng)外參數(shù)：

血清亞硝酸鹽/硝酸鹽(no2^-/no3^-)；

血清或尿亞硝酸鹽/硝酸鹽(no2^-/no3^-)和

血液高鐵血紅蛋白。

根據(jù)本文所述的一些實(shí)施方案，所監(jiān)測(cè)的生理或化學(xué)參數(shù)包括以下參數(shù)中的一個(gè)或多個(gè)：

灌注指數(shù)(pi)；

呼吸頻率(rra)；

血氧飽和度(spo2)；

總血紅蛋白(sphb)；

碳氧血紅蛋白(spco)；

高鐵血紅蛋白(spmet)；

氧含量(spoc)；和

脈搏灌注變異指數(shù)(pvi)，

和/或至少一個(gè)選自以下構(gòu)成的組的場(chǎng)外參數(shù)：

血清亞硝酸鹽/硝酸鹽(no2^-/no3^-)；和

皮膚鹽度。

根據(jù)本文所述的一些實(shí)施方案，在監(jiān)測(cè)由人類(lèi)受試者吸入的氣體混合物中的以下現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)中的至少一個(gè)時(shí)進(jìn)行該方法：

潮氣末co2(etco2)；

二氧化氮(no2)，

一氧化氮(no)；和

吸入氧氣的分?jǐn)?shù)(fio2)。

根據(jù)本文所述的一些實(shí)施方案，所監(jiān)測(cè)的生理或化學(xué)參數(shù)還包括以下參數(shù)中的一個(gè)或多個(gè)：

二氧化氮的尿液水平(尿亞硝酸鹽水平)(離線(xiàn)參數(shù))；

選自心率，血壓，呼吸頻率和體溫(在線(xiàn)參數(shù))所組成的組的生命體征；

血液學(xué)標(biāo)記物(離線(xiàn)參數(shù))，例如但不限于血紅蛋白水平、血細(xì)胞比容比、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞差異和血小板計(jì)數(shù)；

凝血參數(shù)(離線(xiàn)參數(shù))，例如但不限于凝血酶原時(shí)間(pt)，凝血酶原比例(pr)和國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比(inr)；

血清肌酐水平(離線(xiàn)參數(shù))；

肝功能標(biāo)記物(離線(xiàn)參數(shù))，選自由天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ast)水平、血清谷氨酸草酰乙酸轉(zhuǎn)氨酶(sgot)水平、堿性磷酸酶水平和γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(ggt)水平所組成的組；

血管內(nèi)皮激活因子(離線(xiàn)參數(shù))，選自由ang-1、ang-2和ang-2/ang-1的比例所組成的組。

值得注意的是，炎性生物標(biāo)志物的急劇升高可能與被接受一氧化氮吸入治療的受試者中觀(guān)察到的稱(chēng)為“細(xì)胞因子風(fēng)暴”的現(xiàn)象有關(guān)。因此，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，在執(zhí)行本文所述方法的同時(shí)監(jiān)測(cè)炎性生物標(biāo)志物在與該方法有關(guān)的安全性考慮方面具有額外的作用，其中炎性標(biāo)志物的非顯著增加表示安全性。

選擇的安全性和效能參數(shù)以及安全性監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，本文公開(kāi)的方法使得在所監(jiān)測(cè)的生理參數(shù)中的至少一個(gè)或與上文所述的治療的安全性和功效有關(guān)的生物標(biāo)志物水平中沒(méi)有觀(guān)察到實(shí)質(zhì)性變化。

在本實(shí)施方案的上下文中，當(dāng)觀(guān)察值(測(cè)量、測(cè)試結(jié)果、閱讀、計(jì)算結(jié)果等)或一組觀(guān)察值顯著偏離正常值時(shí)(例如相對(duì)于正常水平上限下降兩倍左右)，生物標(biāo)志物的參數(shù)或水平的變化被認(rèn)為是實(shí)質(zhì)性變化。

參數(shù)或生物標(biāo)志物的“正?！彼皆诒疚闹蟹Q(chēng)為基線(xiàn)值或簡(jiǎn)稱(chēng)為“基線(xiàn)”。在本實(shí)施方案的上下文中，術(shù)語(yǔ)“基線(xiàn)”被定義為已經(jīng)從針對(duì)一般人群、一般人群中的特定小團(tuán)體(組群)或特定個(gè)人的多年醫(yī)療實(shí)踐中收集的大量觀(guān)察和/或測(cè)量在統(tǒng)計(jì)學(xué)上確定的數(shù)值范圍?；€(xiàn)是參數(shù)/生物標(biāo)志物特異性值，其在本領(lǐng)域中通常和醫(yī)學(xué)上被接受為受試者在某些物理?xiàng)l件下的正常值。這些基線(xiàn)或“正?！敝狄约按_定這些正常值的手段是本領(lǐng)域已知的?；蛘?，可以使用熟知且接受的方法、程序和技術(shù)手段在實(shí)施本文描述的方法之前從特定受試者或在特定受試者中確定基線(xiàn)值。因此，基線(xiàn)與已經(jīng)結(jié)合參數(shù)/生物標(biāo)志物的測(cè)量確定的耐受值或耐受性的范圍相關(guān)聯(lián)。換句話(huà)說(shuō)，基線(xiàn)是一個(gè)可接受的值的范圍，它限定了被認(rèn)為是“正?！钡挠^(guān)測(cè)值范圍?；€(xiàn)的寬度或其上限和下限之間的差值被稱(chēng)為“基線(xiàn)范圍”，與該范圍的中心的差異在本文中被稱(chēng)為“可接受的偏差單位”或adu。例如，4到8的基線(xiàn)具有4的基線(xiàn)范圍和2的可接受的偏差單位。

在本實(shí)施方案的上下文中，與給定參數(shù)/生物標(biāo)志物相關(guān)的觀(guān)察值的顯著變化是從預(yù)定的可接受基線(xiàn)下降大于2個(gè)可接受偏差單位(2adu)。例如，與基線(xiàn)為4-8(以基線(xiàn)范圍為4和可接受的偏差單位為2為特征)相關(guān)的觀(guān)察值10比基線(xiàn)下降了1個(gè)可接受的偏差單位，或1adu?；蛘?，當(dāng)大于1.5adu，大于1adu或大于0.5adu時(shí)，認(rèn)為是實(shí)質(zhì)性的變化。

在本實(shí)施方案的上下文中，“統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的觀(guān)察”或“與基線(xiàn)的統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著偏差”是使得不可能由于隨機(jī)因素、錯(cuò)誤或機(jī)會(huì)而發(fā)生。

值得注意的是，在一些參數(shù)/生物標(biāo)志物或參數(shù)/生物標(biāo)志物的組中，其變化的顯著性可以是上下文依賴(lài)性的、生物系統(tǒng)依賴(lài)性的、醫(yī)療情況依賴(lài)性的、人類(lèi)受試者依賴(lài)性的，甚至是測(cè)量機(jī)械依賴(lài)性的，即特定參數(shù)/生物標(biāo)志物可能需要或規(guī)定更嚴(yán)格或更寬松的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)確定其讀數(shù)是否應(yīng)被認(rèn)為是顯著的。這里注意到，在具體情況下，由于患者狀況、年齡或其他原因，一些參數(shù)/生物標(biāo)志物可能不可測(cè)量。在這種情況下，該方法在監(jiān)測(cè)其他參數(shù)/生物標(biāo)志物的同時(shí)進(jìn)行。

因此，與基線(xiàn)的偏差被定義為與參數(shù)/生物標(biāo)志物的相應(yīng)基線(xiàn)相比較，如在本文所述給藥方案的整個(gè)療程或部分療程期間和/或之后測(cè)量的參數(shù)/生物標(biāo)志物的值在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的變化。這里注意到，某些參數(shù)/生物標(biāo)志物的觀(guān)察可能由于幾個(gè)原因而波動(dòng)，并且其中的重大變化的確定應(yīng)該考慮這些事件并相應(yīng)地校正適當(dāng)?shù)幕€(xiàn)。

監(jiān)測(cè)高鐵血紅蛋白和血清亞硝酸鹽水平已被本領(lǐng)域所接受，作為監(jiān)測(cè)受試者中一氧化氮吸入的安全性所必需的。然而，到目前為止，還沒(méi)有明確的跡象表明，由人類(lèi)受試者吸入一氧化氮時(shí)，高鐵血紅蛋白和血清亞硝酸水平基本上保持不變。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，該方法包括監(jiān)測(cè)和/或改善上述參數(shù)/生物標(biāo)志物中的至少一個(gè)。

根據(jù)一些實(shí)施方案，所監(jiān)測(cè)的參數(shù)是高鐵血紅蛋白水平。

由于高鐵血紅蛋白水平可以使用非侵入性測(cè)量方式來(lái)測(cè)量，所以使用高鐵血紅蛋白周?chē)柡投?spmet)的參數(shù)來(lái)監(jiān)測(cè)本文提出的方法的穩(wěn)定性、安全性和有效性。因此，根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，所研究的參數(shù)是spmet，并且在給藥期間和之后，spmet水平不超過(guò)5％，優(yōu)選不超過(guò)1％。如以下實(shí)施例部分所示，經(jīng)歷本文所述方法的受試者的spmet水平不超過(guò)1％。

根據(jù)一些實(shí)施方案，所監(jiān)測(cè)的參數(shù)是血清硝酸鹽/亞硝酸鹽水平。

受試者血清中高亞硝酸鹽和硝酸鹽水平與一氧化氮毒性相關(guān)，因此血清亞硝酸鹽/硝酸鹽水平用于檢測(cè)本文提出的方法的不利影響。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，測(cè)試參數(shù)是在治療期間和之后監(jiān)測(cè)的血清亞硝酸鹽/硝酸鹽，并且可接受的血清亞硝酸鹽水平小于2.5微摩爾/升，血清硝酸鹽小于25微摩爾/升。

根據(jù)本文所述的一些實(shí)施方案，該方法是在監(jiān)測(cè)至少一個(gè)、至少兩個(gè)或所有現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)和/或監(jiān)測(cè)至少一個(gè)或所有場(chǎng)外參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行，所述現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)包括灌注指數(shù)(pi)、呼吸速率(rra)、血氧飽和度(spo2/sao2/do)、總血紅蛋白(sphb)、碳氧血紅蛋白(spco)、高鐵血紅蛋白(spmet)、氧含量(spoc)和脈搏灌注變異指數(shù)(pvi)，所述場(chǎng)外參數(shù)包括血清亞硝酸鹽/硝酸鹽水平。

根據(jù)本文所述的一些實(shí)施方案，該方法是在監(jiān)測(cè)由受試者吸入的氣體混合物中的至少一個(gè)、至少兩個(gè)或所有現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行的，其包括潮氣末co2(etco2)、二氧化氮(no2)、一氧化氮(no)和吸入氧氣分?jǐn)?shù)(fio2)。

根據(jù)本文所述的一些實(shí)施方案，該方法是在監(jiān)測(cè)與一氧化氮吸入(例如高鐵血紅蛋白形成)相關(guān)的至少一個(gè)、至少兩個(gè)或所有現(xiàn)場(chǎng)和/或場(chǎng)外的安全性參數(shù)以及在監(jiān)測(cè)至少一個(gè)、至少兩個(gè)或所有現(xiàn)場(chǎng)和/或場(chǎng)外功效參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行的。

根據(jù)本文所述的一些實(shí)施方案，該方法是在監(jiān)測(cè)與一氧化氮吸入(例如高鐵血紅蛋白形成)相關(guān)的至少一個(gè)、至少兩個(gè)或所有現(xiàn)場(chǎng)和/或場(chǎng)外的安全性參數(shù)以及在監(jiān)測(cè)與cf癥狀有關(guān)的至少一個(gè)、至少兩個(gè)或所有現(xiàn)場(chǎng)和/或場(chǎng)外功效參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行的，所述功效參數(shù)包括肺功能和/或炎性生物標(biāo)志物。

根據(jù)本文所述的一些實(shí)施方案，該方法是在監(jiān)測(cè)與一氧化氮吸入(例如高鐵血紅蛋白形成)相關(guān)的至少一個(gè)、至少兩個(gè)或所有現(xiàn)場(chǎng)和/或場(chǎng)外的安全性參數(shù)以及在監(jiān)測(cè)與細(xì)支氣管炎癥狀有關(guān)的至少一個(gè)、至少兩個(gè)或所有現(xiàn)場(chǎng)和/或場(chǎng)外功效參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行的，所述功效參數(shù)包括肺功能和/或炎性生物標(biāo)志物。

根據(jù)本文所述的一些實(shí)施例，該方法是在監(jiān)測(cè)至少一個(gè)、至少兩個(gè)或所有現(xiàn)場(chǎng)的肺功能參數(shù)(肺活量參數(shù))的同時(shí)進(jìn)行的，肺活量參數(shù)例如是用力呼氣量(fev1)、最大呼氣中段流量(mmef)、肺一氧化碳彌散量(dlco)、用力肺活量(fvc)、肺總?cè)萘?tlc)和余氣量(rv)。

例如，根據(jù)一些實(shí)施方案的方法是在監(jiān)測(cè)spmet的現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行的?；蛘?，該方法在監(jiān)測(cè)spmet和etco2的現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行的?；蛘?，該方法在監(jiān)測(cè)spmet、etco2和spo2的現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行。

或者，根據(jù)一些實(shí)施方案的方法是在監(jiān)測(cè)spmet的現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)和一個(gè)場(chǎng)外參數(shù)(例如no2^-/no3^-的血漿或尿液水平)的同時(shí)進(jìn)行。或者，該方法在監(jiān)測(cè)spmet和spo2的現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)以及血清亞硝酸鹽/硝酸鹽水平的一個(gè)非現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行。或者，該方法在監(jiān)測(cè)spme的一個(gè)現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)以及血漿中炎性生物標(biāo)志物(療效)和血清亞硝酸鹽/硝酸鹽水平的場(chǎng)外參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行?；蛘?，在監(jiān)測(cè)spo2的一個(gè)現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)以及細(xì)菌負(fù)荷和血清亞硝酸鹽/硝酸鹽水平的場(chǎng)外參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行該方法?；蛘撸诒O(jiān)測(cè)spo2的一個(gè)現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)以及血漿中炎性生物標(biāo)志物和肺功能參數(shù)(諸如fev1)的同時(shí)進(jìn)行該方法。

或者，該方法在監(jiān)測(cè)spmet，fev1和spo2的現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)以及血漿中炎癥生物標(biāo)志物和血清亞硝酸鹽/硝酸鹽水平的場(chǎng)外參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行。

根據(jù)本文描述的一些實(shí)施方式，該方法是在監(jiān)視包括spmet、spo2和fev1的現(xiàn)場(chǎng)參數(shù)中的至少一個(gè)、至少兩個(gè)或全部，和/或監(jiān)測(cè)包括血清亞硝酸鹽/硝酸鹽水平和血漿中炎性生物標(biāo)志物的場(chǎng)外參數(shù)中的至少一個(gè)或全部，并進(jìn)一步監(jiān)測(cè)以下的一種或多種和任意組合的同時(shí)進(jìn)行的：

尿no2水平(非現(xiàn)場(chǎng)參數(shù))；

生命體征(現(xiàn)場(chǎng)參數(shù))；

肺功能(現(xiàn)場(chǎng)參數(shù))；

血液學(xué)標(biāo)記(非現(xiàn)場(chǎng)參數(shù))；

凝血參數(shù)(非現(xiàn)場(chǎng)參數(shù))；

血清肌酐水平(非現(xiàn)場(chǎng)參數(shù))；

腎功能標(biāo)記(非現(xiàn)場(chǎng)參數(shù))；

肝功能標(biāo)記(非現(xiàn)場(chǎng)參數(shù))；

血管內(nèi)皮激活因子(非現(xiàn)場(chǎng)參數(shù))。

根據(jù)本文所述的一些實(shí)施方案，該方法是在監(jiān)測(cè)吸入氣體混合物中的至少一個(gè)、至少兩個(gè)或全部現(xiàn)場(chǎng)化學(xué)參數(shù)的同時(shí)進(jìn)行的，諸如fio2和no2。

這里注意到，對(duì)于上述實(shí)施方案中的任何一個(gè)，該方法是在本文所述的任何一個(gè)或多于一個(gè)或全部監(jiān)視參數(shù)中沒(méi)有觀(guān)察到實(shí)質(zhì)性變化的情況下進(jìn)行的。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，該方法在監(jiān)測(cè)尿亞硝酸鹽水平的同時(shí)進(jìn)行，使得在執(zhí)行本文所述的方法期間和之后，尿亞硝酸鹽水平基本上不變。這里注意到，由于幾個(gè)已知的原因尿亞硝酸鹽水平可能波動(dòng)，并且確定其中顯著變化應(yīng)該考慮這些事件并相應(yīng)地校正適合的基線(xiàn)。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，血液學(xué)標(biāo)志物，例如血紅蛋白水平、血細(xì)胞比容比、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞差異和血小板計(jì)數(shù)在執(zhí)行本文所述的方法期間和之后基本上不變。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，血管內(nèi)皮活化因子如ang-1，ang-2和ang-2/ang-1比例，以及血清肌酐水平和各種肝功能標(biāo)志物，例如天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ast)水平，血清谷氨酰氧乙酸轉(zhuǎn)氨酶(sgot)水平，堿性磷酸酶水平和γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(ggt)水平在實(shí)施本文所述方法期間和之后基本不變。

受試者的氧合作用可以通過(guò)測(cè)量受試者的外周氧飽和度(spo2)來(lái)評(píng)估。該參數(shù)是氧飽和度水平的估計(jì)，并且通常使用諸如脈搏血氧計(jì)裝置的非侵入性測(cè)量方式來(lái)測(cè)量。因此，根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，施用期間和之后被研究的參數(shù)為spo2，spo2的水平高于約89％。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，各種生命體征，如心率、血壓、呼吸頻率和體溫；以及各種凝血參數(shù)，諸如凝血酶原時(shí)間(pt)、凝血酶原比例(pr)和國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比例(inr)，在實(shí)施本文所述的方法期間和之后基本保持不變。應(yīng)當(dāng)注意，這些參數(shù)被認(rèn)為是由于醫(yī)學(xué)狀況和/或治療而使受試者的總體健康狀況不會(huì)惡化的指示。

根據(jù)一些實(shí)施方案，上述一般健康指標(biāo)在實(shí)施本文所述的方法期間和之后顯示出改善，這表明治療對(duì)受試者有益。

因此，根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，實(shí)現(xiàn)本文公開(kāi)的方法，使得如本文所述的一般健康指標(biāo)至少保持不變或改善。

給藥方式和吸入裝置：

人類(lèi)受試者可以通過(guò)主動(dòng)或被動(dòng)方式進(jìn)行吸入。

“主動(dòng)方式”是指氣體混合物被施用或輸送到人類(lèi)受試者的呼吸道。這可以例如通過(guò)具有適于人類(lèi)呼吸器官的輸送接口的吸入裝置來(lái)實(shí)現(xiàn)。例如，輸送接口可以間歇地放置在人類(lèi)受試者的呼吸器官上，由此當(dāng)其被移除時(shí)，受試者呼吸環(huán)境空氣或任何其它沒(méi)有一氧化氮的氣體混合物，如本文所定義。

“被動(dòng)方式”是指人類(lèi)受試者吸入含有指定劑量的一氧化氮的氣體混合物，而沒(méi)有用于將氣體混合物輸送到呼吸道的裝置。

例如，通過(guò)進(jìn)入和離開(kāi)填充有本文所討論的含有一氧化氮的氣體混合物的在氣壓上進(jìn)行控制的封閉空間，或者通過(guò)填充和抽空與受試者的呼吸道接觸的在氣壓上進(jìn)行控制的封閉空間，可以在間歇方案中使受試者經(jīng)受160ppm或更多的一氧化氮。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，在本文提出的任何治療方法中，一氧化氮施用可以通過(guò)吸入裝置進(jìn)行，該吸入裝置包括但不限于靜止吸入裝置，便攜式吸入器，計(jì)量吸入器和插管吸入器。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，吸入器可以產(chǎn)生肺活量數(shù)據(jù)并在例如美國(guó)專(zhuān)利5,724,986和wo2005/046426中所規(guī)定的時(shí)間內(nèi)相應(yīng)地調(diào)整治療。吸入器可以調(diào)節(jié)受試者的吸入波形以靶向特定的肺部位置。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，便攜式吸入器可以按受試者的選擇或者根據(jù)指定的方案自動(dòng)遞送一氧化氮的救援和維持劑量。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，示例性吸入裝置可以包括適于由人類(lèi)受試者吸入的輸送接口。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，輸送接口包括用于將含有一氧化氮的氣體混合物輸送到受試者的呼吸器官的面罩或口罩。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，吸入裝置還包括位于輸送接口附近的一氧化氮分析儀，用于測(cè)量流向輸送接口的一氧化氮、氧氣和二氧化氮的濃度，其中分析儀與控制器相連通。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，對(duì)受試者進(jìn)行本文所述的方法是通過(guò)使用吸入裝置進(jìn)行的，所述吸入裝置可以是能夠?qū)⒑幸谎趸臍怏w混合物輸送到受試者的呼吸器官的任何裝置。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，吸入裝置包括但不限于包括罐、儀表、管道、面罩、控制器、數(shù)值等的固定吸入裝置；便攜式吸入器(包括上述部件)、定量吸入器、在氣壓上進(jìn)行控制的封閉空間、呼吸機(jī)/系統(tǒng)和插管吸入/呼吸機(jī)/系統(tǒng)。在氣壓上進(jìn)行控制的封閉空間包括但不限于頭狀封閉空間(氣泡)、整體封閉空間或房間，其中填充封閉空間的氣氛可以通過(guò)流量、連續(xù)或間歇的內(nèi)容物交換或任何其他控制氣體混合物含量的形式來(lái)控制。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，間歇吸入是通過(guò)呼吸周期協(xié)調(diào)的脈沖輸送間歇地使人類(lèi)受試者經(jīng)受氣體混合物(吸入劑)而進(jìn)行的，該脈沖輸送含有指定濃度的一氧化氮(含一氧化氮的氣體混合物)。這種吸入模式在這里被稱(chēng)為間歇性呼吸周期協(xié)調(diào)脈沖輸送吸入。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案的另一方面，提供了治療人類(lèi)受試者的炎性疾病或病癥的方法，其包括使人類(lèi)受試者間歇吸入吸入劑，而間歇吸入包括如下循環(huán)的至少一個(gè)周期，所述循環(huán)是呼吸周期-協(xié)調(diào)的脈沖輸送吸入吸入劑持續(xù)第一時(shí)間段，然后在第二時(shí)間段內(nèi)吸入基本上不含一氧化氮，其中呼吸循環(huán)協(xié)調(diào)脈沖輸送吸入被配置為在至少一個(gè)循環(huán)中遞送約80ppm-小時(shí)的一氧化氮。

在本發(fā)明的實(shí)施方案的上下文中，術(shù)語(yǔ)“一氧化氮負(fù)荷”(“no負(fù)荷”)是指在吸入治療期間(例如，目前要求保護(hù)的治療)受試者或病原體暴露于某一累積量的一氧化氮，其以ppm-小時(shí)計(jì)，即吸入劑中一氧化氮的平均濃度乘以總暴露時(shí)間。一氧化氮負(fù)荷可以在每個(gè)治療周期(每個(gè)周期的no負(fù)荷)或每個(gè)時(shí)間單位(例如一天(每日no負(fù)荷))下估計(jì)。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，對(duì)受試者進(jìn)行一氧化氮的間歇遞送，使得受試者在一氧化氮負(fù)荷范圍為每天600ppm-小時(shí)至2000ppm-小時(shí)吸入一氧化氮，其中間歇進(jìn)行遞送，使得每日一氧化氮負(fù)荷在多于一次的不間斷給藥期間被吸入。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，進(jìn)行間歇遞送，使得在一次或多次間歇呼吸周期協(xié)調(diào)脈沖輸送吸入期間吸入每日一氧化氮負(fù)荷，而每個(gè)循環(huán)的每周期的一氧化氮負(fù)荷至少為約80ppm-小時(shí)。這種每周期一氧化氮負(fù)荷可以通過(guò)例如通過(guò)配置脈沖在一個(gè)周期內(nèi)輸送具有160ppm一氧化氮的吸入劑30分鐘(第一時(shí)間段)獲得。應(yīng)當(dāng)注意，其它濃度和其它第一時(shí)間段也是本發(fā)明的實(shí)施方案涵蓋和包含的，提供每周期至少80ppm-小時(shí)的一氧化氮負(fù)荷。

“間歇呼吸周期-協(xié)調(diào)脈沖輸送吸入”是指受試者間歇地經(jīng)受含有指定濃度的一氧化氮的氣體混合物，從而通過(guò)呼吸周期協(xié)調(diào)脈沖吸入這種含一氧化氮的氣體混合物兩次或更多次，每次吸入之間有間隔。因此，受試者吸入含有一氧化氮的氣體混合物，然后通過(guò)呼吸周期協(xié)調(diào)的脈沖輸送停止吸入含有一氧化氮的氣體混合物，而吸入不含有指定濃度的一氧化氮的氣體混合物(例如空氣)，然后通過(guò)呼吸周期協(xié)調(diào)的脈沖輸送再次吸入含有一氧化氮的氣體混合物，等等。

在本發(fā)明的這個(gè)方面的一些實(shí)施方案中，“包含一氧化氮的氣體混合物”用于描述含有至少160ppm一氧化氮的氣體混合物。包含一氧化氮的混合物可以包含160ppm、170ppm、180ppm、190ppm、200ppm和甚至更高濃度的一氧化氮。如本文所定義的，本文提及的其它氣體混合物包括少于160ppm的一氧化氮或者基本上不含一氧化氮。

在一些實(shí)施方案中，“包含一氧化氮的氣體混合物”描述了以80ppm-小時(shí)遞送一氧化氮的氣體混合物。

“基本上不含一氧化氮”是指不大于50ppm，不大于40ppm，不大于30ppm，不大于20ppm，不大于10ppm，不大于5ppm，不大于1ppm，不大于ppb，包括絕對(duì)不含一氧化氮。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，間歇性呼吸周期-協(xié)調(diào)脈沖輸送吸入包括一個(gè)或多個(gè)循環(huán)，每個(gè)循環(huán)包括呼吸周期協(xié)調(diào)的脈沖輸送吸入的含有指定濃度(例如至少160ppm)的一氧化氮的氣體混合物第一時(shí)間段，其在本文中也稱(chēng)為每周期的一氧化氮負(fù)荷，隨后吸入不含一氧化氮的氣體混合物第二時(shí)間段。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，在第二時(shí)間段期間，受試者可吸入環(huán)境空氣或基本上不含一氧化氮的受控混合氣體，如本文所定義。

在一些實(shí)施方案中，第一時(shí)間段持續(xù)10至45分鐘，或20至45分鐘，或20至40分鐘，根據(jù)一些實(shí)施方案，持續(xù)約30分鐘。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，第二時(shí)間段為3至5小時(shí)，或3至4小時(shí)，并且根據(jù)一些實(shí)施方案，第二時(shí)間段持續(xù)約3.5小時(shí)。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，根據(jù)第一和第二時(shí)間段的持續(xù)時(shí)間，這種吸入方案在24小時(shí)內(nèi)重復(fù)1-6次。

在一些實(shí)施方案中，一天重復(fù)1-6次如下循環(huán)，該循環(huán)包括間歇性呼吸周期-協(xié)調(diào)脈沖遞送一氧化氮，例如是160ppm持續(xù)30分鐘，然后呼吸沒(méi)有一氧化氮的氣體3.5小時(shí)。根據(jù)一些實(shí)施方案，一天重復(fù)5次該循環(huán)。

在一些實(shí)施方案中，一天重復(fù)1至6次如下循環(huán)，該循環(huán)包括間歇性呼吸周期協(xié)調(diào)脈沖遞送一氧化氮，例如是在每個(gè)循環(huán)中80ppm-小時(shí)，然后呼吸沒(méi)有一氧化氮的氣體3.5小時(shí)。根據(jù)一些實(shí)施方案，一天重復(fù)5次該循環(huán)。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，每天1-5次循環(huán)間歇性呼吸周期協(xié)調(diào)脈沖遞送一氧化氮的方案進(jìn)行1至7天，或2至7天，或3至7天天，或連續(xù)1、2、3、4或5周。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，間歇性呼吸周期協(xié)調(diào)脈沖輸送吸入在14天的時(shí)間段內(nèi)進(jìn)行。然而，如本文所述的較長(zhǎng)時(shí)間段的間歇性一氧化氮給藥也是可以預(yù)期的。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，受試者在第一時(shí)間段內(nèi)吸入的含有一氧化氮的氣體混合物在吸入裝置中原位產(chǎn)生，吸入裝置被配置為響應(yīng)受試者的呼吸循環(huán)，使得當(dāng)受試者以高速率呼吸時(shí)，即在呼吸周期的吸入期間，以一個(gè)或多個(gè)脈沖將一氧化氮混入吸入劑中。吸入一氧化氮的這種給藥方式在本文中被稱(chēng)為“呼吸周期協(xié)調(diào)脈沖輸送吸入”。

在本發(fā)明的實(shí)施方案的上下文中，術(shù)語(yǔ)“脈沖”是指施用一氧化氮的方式，一氧化氮在一段預(yù)定的時(shí)間內(nèi)(這里稱(chēng)為“脈沖輸送周期”)以中斷和濃縮的劑量被引入到吸入劑中，其中在脈沖傳送周期期間產(chǎn)生的每個(gè)脈沖持續(xù)預(yù)定的時(shí)間段，這里稱(chēng)為“脈沖開(kāi)啟周期”，并被“脈沖關(guān)閉周期”中斷。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，脈沖輸送周期在吸入周期期間開(kāi)始，并處于這里稱(chēng)為“脈沖延遲周期”的一段時(shí)間之后。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，脈沖輸送周期通常比吸入周期短，并且脈沖輸送周期結(jié)束與吸入周期結(jié)束之間的時(shí)間在本文中被稱(chēng)為“脈沖停止周期”。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，用于輸送呼吸周期協(xié)調(diào)脈沖輸送吸入煤氣廠(chǎng)的一氧化氮的吸入裝置被配置為檢測(cè)呼吸循環(huán)的各個(gè)階段，即吸入的開(kāi)始和呼氣周期，以及因此可以使脈沖與呼吸周期協(xié)調(diào)，使得脈搏延遲周期在吸入周期開(kāi)始時(shí)一旦吸入速率增加就協(xié)調(diào)啟動(dòng)，并且一旦吸入速率下降到接近吸入周期結(jié)束，脈沖停止周期就被協(xié)調(diào)啟動(dòng)。

在一些實(shí)施方案中，呼吸周期協(xié)調(diào)的脈沖輸送吸入方案中的各個(gè)時(shí)間段的長(zhǎng)度相對(duì)于呼吸循環(huán)的持續(xù)時(shí)間來(lái)確定和/或計(jì)算，即占呼吸循環(huán)的總持續(xù)時(shí)間或其部分的百分比。例如，通過(guò)感測(cè)吸入劑的流速來(lái)確定吸入周期的持續(xù)時(shí)間，并且將脈沖延遲周期自動(dòng)設(shè)定為吸入周期的20％。因此，脈沖輸送周期可設(shè)定為吸入周期的60％，脈沖停止周期為吸入周期的剩余20％。可以根據(jù)脈沖傳送周期的持續(xù)時(shí)間類(lèi)似地設(shè)置脈沖數(shù)，即脈沖開(kāi)啟和脈沖關(guān)閉周期。例如，可以將脈沖數(shù)設(shè)置為1，即跨越脈沖傳送周期的整個(gè)持續(xù)時(shí)間的脈沖。該實(shí)施例可適用于經(jīng)歷呼吸短促或呼吸困難的受試者?；蛘撸谑茉囌吆粑５那闆r下，將脈沖開(kāi)啟周期設(shè)定為200-300毫秒(ms)，將脈沖關(guān)閉周期設(shè)定為100ms，同時(shí)根據(jù)從測(cè)量的吸入周期得到的脈沖輸送周期的持續(xù)時(shí)間自動(dòng)設(shè)定脈沖數(shù)。

在一些實(shí)施方案中，脈沖延遲周期的范圍為0ms至2500ms?；蛘?，在一些實(shí)施方案中，脈沖延遲周期在吸入周期的0％至80％的范圍內(nèi)。

在一些實(shí)施方案中，脈沖停止周期的范圍為0ms至2500ms?；蛘?，在一些實(shí)施方案中，脈沖停止周期在吸入周期的80％至0％的范圍內(nèi)。

在一些實(shí)施方案中，每個(gè)脈沖開(kāi)啟周期各自在100ms至5000ms的范圍內(nèi)。或者，每個(gè)脈沖開(kāi)啟周期分別在吸入周期的10％至100％范圍內(nèi)。

在一些實(shí)施方案中，每個(gè)脈沖關(guān)閉周期分別在0ms至2500ms的范圍內(nèi)?；蛘?，每個(gè)脈沖關(guān)閉周期各自在脈沖開(kāi)啟周期的0％至200％的范圍內(nèi)。

在一些實(shí)施方案中，該方法基于每吸入周期的單個(gè)脈沖。在一些實(shí)施方案中，實(shí)現(xiàn)單個(gè)脈沖，使得脈沖輸送周期基本上開(kāi)始于吸入周期開(kāi)始(脈沖延遲周期基本上為零)，并且基本上隨著吸入周期結(jié)束(脈沖停止周期基本為零)而終止。在其它實(shí)施方案中，該方法通過(guò)使用在吸入期開(kāi)始后開(kāi)始并在吸入結(jié)束之前結(jié)束的單脈沖來(lái)實(shí)現(xiàn)。

在一些實(shí)施方案中，脈沖傳送的協(xié)調(diào)被設(shè)置為在脈沖傳送期間連續(xù)遞送多于一個(gè)脈沖，直到該裝置感測(cè)到接近吸入周期結(jié)束時(shí)的吸入速率的降低。在這樣的實(shí)施方案中，裝置被設(shè)置為以脈沖關(guān)閉周期中斷每個(gè)脈沖開(kāi)啟周期。在一些實(shí)施方案中，裝置被設(shè)置為遞送預(yù)定數(shù)量的脈沖，其范圍為1至2，1至3，1至4，1至5，1至6，1至7，1至8，1到9，1到10，或從1到任何數(shù)量的脈沖，可以在由任何給定的呼吸循環(huán)確定的脈沖傳送周期內(nèi)發(fā)生。還應(yīng)注意，每個(gè)脈沖可以跨越不同的脈沖開(kāi)啟周期，并且被不同長(zhǎng)度的脈沖關(guān)閉周期中斷。

包含一氧化氮的氣體混合物中一氧化氮的濃度由引入吸入劑中的一氧化氮的濃度、一氧化氮被引入吸入劑的輸出量、脈沖開(kāi)啟周期的持續(xù)時(shí)間以及在脈沖輸送期間引入到吸入劑中的脈沖數(shù)量來(lái)控制。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，在脈沖輸送周期期間，吸入劑基本上是含有一氧化氮的氣體混合物，其含有至少160ppm的一氧化氮或每周期80ppm-小時(shí)的一氧化氮負(fù)荷，而在脈沖延遲周期和脈沖停止周期期間吸入劑基本上沒(méi)有一氧化氮。

根據(jù)一些實(shí)施方案，該方法通過(guò)使用多于一個(gè)脈沖來(lái)實(shí)現(xiàn)，其中由每個(gè)脈沖產(chǎn)生的吸入劑向患者遞送不同濃度的一氧化氮。例如，該方法可以通過(guò)在脈沖輸送周期期間向患者施用三個(gè)脈沖來(lái)進(jìn)行，使得從第一脈沖產(chǎn)生的吸入劑的特征在于一氧化氮濃度為160ppm，來(lái)源于第二脈沖的吸入劑特征在于一氧化氮濃度為80ppm，來(lái)源于第一脈沖的吸入劑的特征在于一氧化氮濃度為100ppm。因此，至少一個(gè)脈沖產(chǎn)生至少160ppm的濃度。在其他實(shí)例中，一些脈沖可以輸送特征為大于160ppm的一氧化氮濃度的吸入劑。

或者，脈沖的數(shù)量、每個(gè)脈沖中一氧化氮的濃度以及產(chǎn)生脈沖的第一時(shí)間周期的持續(xù)時(shí)間被配置為輸送每周期80ppm-小時(shí)的一氧化氮負(fù)荷。

如上所述，呼吸周期協(xié)調(diào)的脈沖輸送吸入允許在受試者實(shí)質(zhì)上以最高呼吸速率吸入的時(shí)間段內(nèi)引入高濃度的一氧化氮，從而使部分呼吸道盡可能少地暴露于高一氧化氮濃度下。例如，由于一氧化氮在吸入周期開(kāi)始之后和吸入周期結(jié)束之前以脈沖形式引入，上呼吸道的部分、氣管和不富有肺泡毛細(xì)管的肺中的某個(gè)呼吸樹(shù)由于吸入劑的吸入速率僅僅短暫地暴露于高濃度一氧化氮中，而肺泡更長(zhǎng)時(shí)間暴露于這種高濃度的一氧化氮。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，利用吸入裝置使受試者經(jīng)受本文描述的方法，所述吸入裝置可以是能夠輸送含有一氧化氮的氣體混合物到受試者的呼吸器官的任何裝置，包括但不限于呼吸周期-協(xié)調(diào)脈沖輸送。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案的吸入裝置包括但不限于包括罐、儀表、管道、面罩、控制器、數(shù)值等的固定吸入裝置；便攜式吸入器(包括上述部件)，計(jì)量吸入器，呼吸機(jī)/系統(tǒng)和插管吸入/呼吸機(jī)/系統(tǒng)。

適用于執(zhí)行本文所述任何方法的任何實(shí)施方式的示例性吸入裝置例如由美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?1/876,346和61/969,201以及美國(guó)專(zhuān)利號(hào)6,164,276和6,109,260所提供的，其內(nèi)容通過(guò)引用并入本文。適用于執(zhí)行本文所述任何方法的商業(yè)吸入裝置包括由ikariaaustraliaptyltd開(kāi)發(fā)的ds-c，或由datex-ohmeda開(kāi)發(fā)的ohmedainopulsedeliverysystem。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，吸入器可以產(chǎn)生肺活量數(shù)據(jù)，并在例如美國(guó)專(zhuān)利no.5,724,986和wo2005/046426中提供的時(shí)間內(nèi)相應(yīng)地調(diào)整治療，其內(nèi)容通過(guò)引用并入本文。吸入器可以調(diào)節(jié)受試者的吸入波形以靶向特定的肺部位置。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，便攜式吸入器可以按受試者的選擇或者根據(jù)指定的方案自動(dòng)遞送一氧化氮的救援和維持劑量。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，示例性吸入裝置可包括適于由人類(lèi)受試者吸入的輸送接口。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，輸送接口包括用于將含有一氧化氮的氣體混合物輸送至受試者的呼吸器官的面罩或口罩。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，吸入裝置還包括靠近輸送接口的一氧化氮分析儀，該分析儀用于測(cè)定流到輸送接口的一氧化氮、氧氣和二氧化氮的濃度，其中，該分析儀與控制器連通。

預(yù)期，將開(kāi)發(fā)出通過(guò)間歇吸入160ppm或更多的一氧化氮來(lái)治療炎性疾病或病癥的其它方法，并且通過(guò)間歇吸入一氧化氮治療炎性疾病或病癥的術(shù)語(yǔ)的范圍旨在包括所有這樣推導(dǎo)的新技術(shù)。

如本文所使用的術(shù)語(yǔ)“約”指±10％。

術(shù)語(yǔ)“包含(comprises)”，“包含(comprising)”，“包括(includes)”，“包括(including)”，“具有(having)”和它們的同源詞意味著“包括但不限于”。

術(shù)語(yǔ)“由……構(gòu)成”是指“包括但不限于”。

術(shù)語(yǔ)“基本上由...組成”是指組合物、方法或結(jié)構(gòu)可以包括另外的成分、步驟和/或部分，但是只有當(dāng)附加成分、步驟和/或部分不會(huì)實(shí)質(zhì)上改變所要求保護(hù)的組合物、方法或結(jié)構(gòu)的基本和新穎特征。

如本文所用，除非上下文另有明確規(guī)定,單數(shù)形式“一(a)”，“一(an)”和“該(the)”包括復(fù)數(shù)參考。例如，術(shù)語(yǔ)“化合物”或“至少一種化合物”可以包括多種化合物，也包括它們的混合物。

在本申請(qǐng)中，本發(fā)明的各種實(shí)施方案可以以范圍形式呈現(xiàn)。應(yīng)當(dāng)理解，范圍格式的描述僅僅是為了方便和簡(jiǎn)潔，并且不應(yīng)被解釋為對(duì)本發(fā)明的范圍的僵化限制。因此，對(duì)范圍的描述應(yīng)考慮為具有具體公開(kāi)所有可能的子范圍以及該范圍內(nèi)的各個(gè)數(shù)值。例如，從1到6的范圍的描述應(yīng)被認(rèn)為具體公開(kāi)了諸如1至3，1至4，1至5，2至4，2至6，3到6等的子范圍，以及該范圍內(nèi)的個(gè)別數(shù)字，例如1、2、3、4、5和6。不管范圍的寬度為多少，這種解釋都適用。

無(wú)論何時(shí)在本文中顯示數(shù)值范圍，都意味著包括在指定范圍內(nèi)任何引用的數(shù)字(分?jǐn)?shù)或整數(shù))。短語(yǔ)“第一指示號(hào)碼和第二指示號(hào)碼之間的范圍/范圍”和“第一指示號(hào)碼到第二指示號(hào)碼的范圍/范圍”在本文中可互換使用，并且意在包括第一和第二指示號(hào)碼和其間的所有分?jǐn)?shù)和整數(shù)。

如本文所使用的術(shù)語(yǔ)“方法”是指完成給定任務(wù)的方式、手段、技術(shù)和程序，包括但不限于已知或者化學(xué)、藥理學(xué)、生物學(xué)、生物化學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的從業(yè)者根據(jù)已知方式、手段、技術(shù)和程序開(kāi)發(fā)的那些方式、手段、技術(shù)和程序。

如本文所用的術(shù)語(yǔ)“治療”包括廢除、大幅度抑制、減緩或逆轉(zhuǎn)病癥的進(jìn)展，大幅度改善病癥的臨床(clinical)或美學(xué)(aesthetical)癥狀或大幅度防止病癥的臨床或美學(xué)癥狀的出現(xiàn)。

當(dāng)提及特定的序列表時(shí)，這樣的參考應(yīng)被理解為也包括基本上對(duì)應(yīng)于其互補(bǔ)序列的序列，包括由于例如測(cè)序錯(cuò)誤，克隆錯(cuò)誤或?qū)е聣A基置換、堿基缺失或堿基添加的其他改變而導(dǎo)致的次要序列變異，條件是這些變異的頻率在50個(gè)核苷酸中少于1個(gè)，或者在100個(gè)核苷酸中少于1個(gè)，或者在200個(gè)核苷酸中少于1個(gè)，或者在500個(gè)核苷酸中少于1個(gè)，或者在1000個(gè)核苷酸中少于1個(gè)，或者在5,000個(gè)核苷酸中少于1個(gè)，或者在10,000個(gè)核苷酸中少于1個(gè)。

應(yīng)當(dāng)理解，為了清楚，在單獨(dú)實(shí)施例的上下文中描述的本發(fā)明的某些特征也可以在單個(gè)實(shí)施方案的組合中提供。相反，為了簡(jiǎn)潔起見(jiàn)，在單個(gè)實(shí)施方案的上下文中描述的本發(fā)明的各種特征也可以單獨(dú)提供或以任何合適的子組合提供或適用于本發(fā)明的任何其它描述的實(shí)施方案。在各種實(shí)施方案的上下文中描述的某些特征不被認(rèn)為是這些實(shí)施方案的基本特征，除非該實(shí)施方案在沒(méi)有那些元件的情況下不起作用。

如上所述和如下權(quán)利要求書(shū)部分所要求保護(hù)的本發(fā)明的各種實(shí)施方案和方面在以下實(shí)施例中找到實(shí)驗(yàn)支持。

實(shí)施例

現(xiàn)在參考以下實(shí)施例，其與上述描述一起以非限制性方式說(shuō)明本發(fā)明的一些實(shí)施方案。

實(shí)施例1

在診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者中一氧化氮的吸入

本文提出的本公開(kāi)開(kāi)放式二期臨床研究檢驗(yàn)了使用no作為cf輔助治療的一些方面。慢性微生物肺感染，特別是銅綠假單胞菌，是診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的發(fā)病率和死亡率的主要原因。以下研究的目的是評(píng)估診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的no吸入的安全性和耐受性。

cf癥狀：

在診斷患有或患有cf的一些人類(lèi)受試者中，在嬰兒期觀(guān)察到癥狀，但其它c(diǎn)f患者在青春期或成年期之前可能不會(huì)出現(xiàn)癥狀。診斷患有cf的人類(lèi)受試者中有百分之五十患有通常在嬰兒期開(kāi)始的肺部表現(xiàn)。青少年可能會(huì)延緩生長(zhǎng)發(fā)育、青春期遲緩和運(yùn)動(dòng)耐受性下降。

肺中由cf引起的又厚又粘的粘液會(huì)導(dǎo)致呼吸道癥狀，如持續(xù)咳嗽、喘息、反復(fù)肺部感染和反復(fù)竇感染。其他癥狀包括肋間退縮，使用呼吸輔助肌肉，桶胸畸形，杵狀指和發(fā)紺，這些癥狀在疾病進(jìn)展中發(fā)生。青少年和成人的肺部并發(fā)癥包括支氣管擴(kuò)張(擴(kuò)大、疤痕氣道)、鼻竇炎、慢性感染、氣道阻塞、氣胸(肺塌陷)和呼吸衰竭。事實(shí)上，診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者的肺部疾病占死亡人數(shù)的90％以上。由cf引起的粘稠粘液也可能影響胃腸系統(tǒng)，阻止消化酶從胰腺到達(dá)腸道。結(jié)果是腸不能很好地吸收營(yíng)養(yǎng)。造成的癥狀包括難聞?dòng)湍伒募S便；不良的體重增加和增長(zhǎng)；便秘；和腸梗阻。

以上觀(guān)察結(jié)果表明肺功能和全身炎癥生物標(biāo)志物可有效用于監(jiān)測(cè)cf治療安全性和療效。

cf診斷：

cf[voter，k.z.和ren，c.l.，clin.rev.allerg.immunol.，2008,35，p.100-106]的診斷測(cè)試包括針對(duì)通常在患有cf的嬰兒中升高的特定成分的血液檢查，汗液測(cè)試以評(píng)估鹽含量(cf的第一個(gè)跡象之一是對(duì)皮膚的咸味，導(dǎo)致在診斷患有或患有cf的人類(lèi)受試者汗水的含鹽量高于正常含鹽量的趨勢(shì))和基因測(cè)試以測(cè)試對(duì)cf負(fù)責(zé)的基因的特定突變。

汗水測(cè)試仍然是cf的標(biāo)準(zhǔn)診斷測(cè)試；它衡量?jī)和顾械柠}含量，鹽度高表明個(gè)體患有cf。對(duì)于具有不確定的汗液測(cè)試結(jié)果的人類(lèi)受試者，應(yīng)考慮以下診斷研究來(lái)評(píng)估人類(lèi)受試者：評(píng)估呼吸疾病(呼吸道培養(yǎng)物，用計(jì)算機(jī)斷層掃描評(píng)估支氣管擴(kuò)張，評(píng)估鼻旁竇)；通過(guò)糞便彈性蛋白酶測(cè)量定量評(píng)估胰腺功能；肝活檢評(píng)估肝功能；和男性生殖道評(píng)估(精液分析、泌尿檢查、超聲檢查和陰囊探查)。

當(dāng)前cf治療：

目前可用于cf的肺部癥狀的治療方法包括氣道清除技術(shù)，以松動(dòng)和去除肺部粘液，使用粘液溶解劑使其變?yōu)橄”≌骋海谷祟?lèi)受試者可以更容易地將其咳出，以及對(duì)抗引起感染的細(xì)菌的抗生素[doring，g等人，journalofcysticfibrosis，2012,11，p.461-479]。用于治療cf的藥物是用于治療和預(yù)防肺部感染的抗生素，減少粘液粘性的粘液稀釋藥物和幫助保持氣道暢通的支氣管擴(kuò)張劑。機(jī)械裝置如胸部拍打器(chestclapper)或充氣背心有助于使胸部粘液變松散。外科手術(shù)和其他手術(shù)可以包括提供額外營(yíng)養(yǎng)的喂食管、肺移植或腸外科手術(shù)。表1列出了目前用于治療cf的多系統(tǒng)表現(xiàn)的藥物干預(yù)措施和手段。

表格1

臨床方法：

no通過(guò)吸入給予來(lái)自?xún)蓚€(gè)醫(yī)療中心被診斷患有或患有cf的九個(gè)臨床穩(wěn)定的人類(lèi)受試者?；颊呓邮苋蚊刻?0分鐘160ppmno的治療，治療之間間隔至少3.5小時(shí)，在兩周的時(shí)間內(nèi)每周治療5天。

安全性參數(shù)包括no和二氧化氮(no2與no2^-/no3^-)濃度，吸入氧氣的吸入分?jǐn)?shù)(fio2)，高鐵血紅蛋白含量(spmet或“％methb”)和氧合血紅蛋白(氧氣)飽和度(spo2或sao2)，使用加利福尼亞州masimoirvine的非侵入性脈沖-血氧定量裝置rad-57^tm或rad-87^tm持續(xù)監(jiān)測(cè)安全性參數(shù)。這些裝置還監(jiān)測(cè)灌注指數(shù)(pi)，呼吸率(rra)，總血紅蛋白(sphb)，碳氧血紅蛋白(spco)，氧含量(spoc)和脈搏灌注變異指數(shù)還密切監(jiān)測(cè)生命體征，該生命體征包括血壓，脈搏和呼吸頻率。

初步功效測(cè)量包括測(cè)定痰中的微生物密度和1秒用力呼出體積的測(cè)量(fev1)。與c-反應(yīng)蛋白(crp)水平相關(guān)的炎癥被評(píng)估為次要結(jié)果測(cè)量。還監(jiān)測(cè)其他炎癥生物標(biāo)志物，例如白細(xì)胞介素(數(shù)據(jù)未顯示)。

測(cè)量了下述物種的細(xì)菌負(fù)荷，所述物種的示例性非限制性選擇包括產(chǎn)堿假單胞菌、對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(mssa)、無(wú)色桿菌屬、煙曲霉菌、非粘液樣銅綠假單胞菌和粘液樣銅綠假單胞菌的物種。

臨床結(jié)果：

圖1a-b呈現(xiàn)了根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案的比較柱形圖，其示出了在第一次治療(藍(lán)色)之前和最后一次治療(紅色)之后的methb百分比水平(圖1a)和ppm表示的no2水平(圖1b)的平均變化(閾值為5％，由紅色虛線(xiàn)示出)，這是在10天治療期間在9名人類(lèi)受試者中測(cè)得的。

從圖1a-b中可以看出，所有人類(lèi)受試者都耐受治療，并完成了每個(gè)方案的研究。在研究期間沒(méi)有觀(guān)察到嚴(yán)重的不良事件和生命體征臨床上的重大變化。在所有人類(lèi)受試者中，治療后的氧飽和度保持在92％以上。治療后平均methb水平為2.4％±0.5％(平均值±sd)，并且在所有人類(lèi)受試者的整個(gè)試驗(yàn)中遠(yuǎn)低于5％的安全極限。治療后的平均no2水平為1.2ppm±0.4ppm(平均值±sd)，在所有人類(lèi)受試者中保持小于3ppm。

圖2a-f呈現(xiàn)出在整個(gè)治療過(guò)程中“患者1”(cfsch01)中的產(chǎn)堿假單胞菌(p.alcaligenes)(圖2a)、“患者3”(cfsch03)中的對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(mssa)(圖2b)、“患者3”中的無(wú)色桿菌屬(achromobacterspp.)(圖2c)、“患者3”中的煙曲霉菌(a.fumigatus)(圖2d)、“患者4”(cfsch04)中的非粘液型銅綠假單胞菌(圖2e)和“患者4”中的粘液型銅綠假單胞菌(圖2f)的cfu測(cè)定結(jié)果，而“nd”代表未檢測(cè)到的水平。

從圖2a-f可以看出，在治療期間，9名人類(lèi)受試者中有3人通過(guò)菌落形成單位(cfu)測(cè)量的微生物密度的對(duì)數(shù)顯著降低。到第9天，“患者1”(cfsch01)在產(chǎn)堿假單胞菌cfu中減少2-log?！盎颊?”(cfsch03)在無(wú)色桿菌屬中減少1-log，消除了對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(mssa)和煙曲霉cfu計(jì)數(shù)。在“患者4”(cfsch04)中，非粘膜綠膿假單胞菌存在1-log減少和粘液樣銅綠假單胞菌計(jì)數(shù)的2-log減少。所有剩余的六個(gè)人類(lèi)受試者或者表現(xiàn)為調(diào)節(jié)其細(xì)菌計(jì)數(shù)(一個(gè)患者)，或者所有測(cè)試的微生物的cfu沒(méi)有顯著變化(數(shù)據(jù)未顯示)。值得注意的是，cfu在微生物計(jì)數(shù)中的測(cè)定顯示，在治療前4天內(nèi)，9名人類(lèi)受試者中有4名患者出現(xiàn)2-log到2.5-log的下降。

圖3呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明一些實(shí)施方案的對(duì)比曲線(xiàn)，其示出了fev1測(cè)量結(jié)果的線(xiàn)性趨勢(shì)，所述fev1測(cè)量結(jié)果取自9名被診斷為患有或患有cf的人類(lèi)受試者，這些受試者用160ppm的一氧化氮每天處理三次，每?jī)纱翁幚黹g隔至少3.5小時(shí)，從篩選到處理結(jié)束持續(xù)10天。

從圖3中可以看出，4名受試者中的fev1值增加3％到9％。兩名人類(lèi)受試者fev1減少3％到9％，1例患者fev1降低11％，2周后恢復(fù)至初始水平。兩個(gè)人類(lèi)受試者fev1值無(wú)明顯變化。

圖4呈現(xiàn)出根據(jù)本發(fā)明一些實(shí)施方案的比較曲線(xiàn)，其示出了以mg/l表示的crp水平的線(xiàn)性趨勢(shì)，所述crp水平在9名被診斷為患有或患有cf的人類(lèi)受試者中測(cè)得，這些受試者用160ppm一氧化氮每天處理三次，每?jī)纱翁幚黹g隔至少3.5小時(shí)，從篩選到處理結(jié)束持續(xù)10天。

從圖4中可以看出，9名人類(lèi)受試者中有3人在基線(xiàn)時(shí)出現(xiàn)炎癥征象，并且crp水平大于5mg/l。在處理后，所有三名人類(lèi)受試者表現(xiàn)出炎癥減輕，crp水平降低40-60％。

總之，吸入160ppm的no30分鐘，每周連續(xù)5天，每天3次，吸入之間間隔至少3.5小時(shí)，持續(xù)2周，上述情況下的吸入在被診斷患有cf的人類(lèi)受試者中是安全且耐受性良好的。治療導(dǎo)致微生物負(fù)荷有差異但是顯著的降低，而在具有活動(dòng)性炎癥的人類(lèi)受試者中，用no處理后觀(guān)察到減輕的炎癥狀態(tài)。

實(shí)施例2

一氧化氮吸入治療炎癥

按照上述實(shí)施例1中給出的方案通過(guò)間歇吸入一氧化氮治療一群被診斷患有炎癥的人類(lèi)受試者，即吸入160ppm一氧化氮30分鐘，每天3次，每周連續(xù)5天，持續(xù)2周，吸入間隔至少3.5小時(shí)。

血液/血清中的炎性生物標(biāo)志物：

在治療之前，之后和整個(gè)治療期間使用抽血和分析程序測(cè)定炎性生物標(biāo)志物如crp，tnfα，il-1β，il-6，il-8，il-10和il-12p70的血液/血清水平。

r&dsystems的人體磁液的篩選試驗(yàn)是一個(gè)示例性的分析程序。它是靈活的基于微球的多重平臺(tái)，可以允許以聚苯乙烯珠格式使用細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清或血漿樣品同時(shí)進(jìn)行多達(dá)100個(gè)用戶(hù)定義的目標(biāo)分析物，最多可以有50種分析物以磁珠格式進(jìn)行篩選。該平臺(tái)適用于測(cè)定炎性生物標(biāo)志物，例如但不限于cxcl8/il-8，gm-csf，icam-1，ifn-γ，il-1β，il-1ra/il-1f3，il-2，il-4，il-5，il-6，il-10，il-12p70，il-17a，mmp-8，mmp-9，tnf-α，tnfrii和vegf。

誘導(dǎo)痰中的炎性生物標(biāo)志物：

在治療之前，之后和整個(gè)治療期間收集誘導(dǎo)痰，并分析包括嗜中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，il-8水平和嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(ne)活性的炎性生物標(biāo)志物。

將一部分誘導(dǎo)的痰標(biāo)本轉(zhuǎn)移到微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行培養(yǎng)。稱(chēng)量從有蓋培養(yǎng)皿中選出的粘液樣部分。將蒸餾水1:10稀釋的0.1％的新鮮二硫蘇糖醇(dtt)加入2：1體積/痰重量，劇烈移液，并在37℃的振蕩水浴中勻漿15分鐘；并加入等體積的磷酸鹽緩沖鹽水溶液以停止反應(yīng)。將細(xì)胞懸浮液通過(guò)52μm尼龍紗布過(guò)濾并離心。上清液在-70℃下儲(chǔ)存。將用roswellparkmemorialinstitute培養(yǎng)基加10％胎牛血清的溶液稀釋至濃度為10/μl的小球進(jìn)行細(xì)胞離心并用吉姆薩染色染色。對(duì)數(shù)百個(gè)非鱗狀細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，該結(jié)果表示為總的非鱗狀計(jì)數(shù)的百分比。使用市售的試劑盒，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(elisa)和嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶活性分析上清液的il-8。

例如，在典型的誘導(dǎo)痰檢測(cè)中，非吸煙和一般健康人的痰中il-8、嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶、嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ecp)、嗜酸細(xì)胞活化趨化因子、類(lèi)胰蛋白酶和rantes水平的平均基線(xiàn)水平分別約為1.16ng·ml^-1、0.36μg·ml^-1、0.02μg·ml^-1、12.9pg·ml^-1、小于2ng·ml^-1和35.3pg·ml^-1。根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，可以發(fā)現(xiàn)用于隨后的炎性生物標(biāo)志物如嗜中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、il-8、嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶、嗜酸細(xì)胞活化蛋白、類(lèi)胰蛋白酶和rantes的另外的實(shí)驗(yàn)測(cè)定和分析程序，例如，在fujimoto，k.等人[eurrespirj.，2005,25(4)，pp.640-6]中。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施方案，平臺(tái)還可用于測(cè)定誘導(dǎo)痰樣本中的任何炎性生物標(biāo)志物。

實(shí)施例3

一氧化氮吸入治療細(xì)支氣管炎

按照下述和圖5中概述的方法間歇吸入一氧化氮來(lái)治療一群被診斷患有急性細(xì)支氣管炎的人類(lèi)受試者。

受試者在進(jìn)入兒科部后4小時(shí)內(nèi)進(jìn)行篩查。為了納入研究，受試者需要是2至12個(gè)月，被診斷患有急性細(xì)支氣管炎，而且臨床評(píng)分小于或等于10(參見(jiàn)表2)。

診斷為伴有疾病如肺炎、尿路感染或中耳炎；高鐵血紅蛋白血癥；慢性肺部疾病；免疫缺陷；或心臟病(包括先天性心臟病)的受試者被排除在研究之外。伴有潛在遺傳疾病(cf，唐氏綜合征)或慢性肺部疾病(支氣管肺發(fā)育不良，原發(fā)性纖毛運(yùn)動(dòng)障礙，閉塞性細(xì)支氣管炎)或低血壓的受試者也被排除在外。其他主要排除標(biāo)準(zhǔn)如下：在篩查時(shí)methb大于3％，胎齡小于36周齡，接受過(guò)rsv免疫球蛋白預(yù)防，頻繁鼻出血病史(大于1次/月)以及30天內(nèi)有明顯咯血(在一次咳嗽發(fā)作中大于或等于5ml血液或24小時(shí)內(nèi)大于30ml血液)。

合格受試者隨機(jī)(1：1)接受間歇性no和使用o2的標(biāo)準(zhǔn)治療(以下簡(jiǎn)稱(chēng)no治療)或單獨(dú)使用o2的標(biāo)準(zhǔn)治療(以下簡(jiǎn)稱(chēng)標(biāo)準(zhǔn)治療)，治療時(shí)間長(zhǎng)達(dá)5天。在治療期間，使用專(zhuān)用監(jiān)視器連續(xù)監(jiān)測(cè)methb和氧飽和度水平。

從入院當(dāng)天起第14天(+5天)和第21天(+5天)，所有受試者被要求返回診所進(jìn)行評(píng)估(例如身體檢查和ae/嚴(yán)重不良事件(sae)問(wèn)卷)，兩次隨訪(fǎng)之間至少間隔5天。此外，所有受試者在入院當(dāng)天起第30天(+5)通過(guò)電話(huà)聯(lián)系來(lái)完成ae/sae問(wèn)卷調(diào)查。

表2確定臨床評(píng)分

1由于最小的進(jìn)氣口而不能聽(tīng)到喘息，那么認(rèn)為評(píng)分＝3。

注意：按照每個(gè)參數(shù)(呼吸率、喘息、sao2和副肌使用)給定的評(píng)分總和來(lái)計(jì)算臨床評(píng)分。輕度：≤5；中度：6-10；重度：11-12。

sao2＝氧氣飽和度。

研究治療如下：

·臨床研究型治療：800ppm(0.08％)no，余量為n2，純度為99.999％；通過(guò)吸入口罩輸送160ppm的no(伴有空氣和o2的混合物，o2濃度最低為21％)。

·對(duì)照治療：o2(由主要醫(yī)院o2系統(tǒng)提供)；以100％o2由吸入口罩輸送。

除了在隨機(jī)化之前開(kāi)始的標(biāo)準(zhǔn)支持性o2治療之外，no組中的受試者每天被給予五次三十分鐘吸入160ppmno，間隔為3至4小時(shí)，直到受試者的起色導(dǎo)致醫(yī)師決定適合出院，連續(xù)5天最多吸入25次。吸入通過(guò)醫(yī)院面罩(hospiltak，unomedical公司)進(jìn)行施用。

對(duì)照組的所有受試者以與活性治療組相同的方式，以標(biāo)準(zhǔn)支持的o2治療方式處理，但沒(méi)有實(shí)際的no給藥。

通過(guò)相同的裝置給予兩種治療，no和o2(no治療)以及單獨(dú)o2(對(duì)照)，使得受試者的父母和病房工作人員不知道給予什么治療。通過(guò)分離知情的團(tuán)隊(duì)成員(實(shí)際治療)和不知情的團(tuán)隊(duì)成員，并將no的容器和所有與研究有關(guān)的設(shè)備隱藏在幕后，保持盲治療(treatmentblindness)。

用于標(biāo)準(zhǔn)治療的氧氣由主要醫(yī)院o2系統(tǒng)提供。o2通過(guò)o2混合器(birdmodel03800)，然后是o2流量計(jì)。對(duì)于對(duì)照組(僅o2)，微型混合器設(shè)置為提供100％的o2。對(duì)于no處理組，在吸入的160ppmno氣體混合物中，將o2與空氣混合以達(dá)到21％的最小濃度?；旌系目諝?o2通過(guò)附在醫(yī)院面罩(hospiltak，unomedicalinc)旁邊的y形連接器供應(yīng)給受試者。

對(duì)于no組中的受試者，通過(guò)流過(guò)壓力調(diào)節(jié)器和指示器(internationalbiomedical，us，partno.：731-9142)和流量計(jì)(carefusionus，model03800)調(diào)節(jié)no濃度(最初為800ppm)。完成系統(tǒng)設(shè)置程序后，每次吸入前調(diào)整流量計(jì)的no流量，以5到15l/minno的總流速輸送160ppm的no。經(jīng)由安裝在面罩旁邊的y形連接器(上面指定)的第二臂將no供應(yīng)給受試者。使用專(zhuān)用監(jiān)視器(aeronoxinternationalbiomedical，us)，從采樣端口連續(xù)監(jiān)測(cè)輸送給患者的no、no2和o2濃度。

還使用專(zhuān)用監(jiān)控器連續(xù)監(jiān)測(cè)血紅蛋白和o2飽和度水平。在methb>5％或者o2飽和度低于89％的情況下，治療暫時(shí)停止，30分鐘后重復(fù)測(cè)量。如果值已經(jīng)恢復(fù)到安全閾值之內(nèi)，則根據(jù)方案開(kāi)始下次吸入。在第二次發(fā)生mehb大于5％的任何情況下，將永久停止研究治療。

研究終點(diǎn)：主要研究終點(diǎn)是安全性和耐受性。沒(méi)有主要療效終點(diǎn)。

主要終點(diǎn)-安全性和耐受性：

·安全性：

○確定與吸入no相關(guān)的methb百分比

○確定與吸入no相關(guān)的ae

·耐受性：

○由于任何原因提前停止研究或研究治療的受試者比例(％)

○由于ae而提前停止研究治療的受試者比例(％)

次要終點(diǎn)-療效：

·以小時(shí)計(jì)的los，以從第一次吸入治療到“適合出院(fittodischarge)”的時(shí)間

·按第一次吸入治療至持續(xù)至出院的92％的第一次氧氣飽和度的時(shí)間測(cè)定的達(dá)到92％氧氣飽和度(飽和室內(nèi)空氣)的時(shí)間

·按第一次吸入治療至臨床評(píng)分小于或等于5的時(shí)間測(cè)定的達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的時(shí)間

分析集：以下分析集被定義為用于分析安全性和療效：

·意向治療(itt)：被定義為接受至少一項(xiàng)研究治療的所有隨機(jī)受試者。這是分析療效和安全性的主要集合。

·符合方案(pp)：被定義為itt群組中按照方案完成研究治療(即排除所有提早結(jié)束的受試者)以及沒(méi)有違反主要方案的所有受試者。這是分析功效的次要集合。

事后定義額外的療效分析集：

·改良意向治療(mitt)：定義為itt中除了根據(jù)方案指南過(guò)早停止治療和/或停止研究的受試者之外的所有受試者。

統(tǒng)計(jì)與分析方法：以小時(shí)為單位從第一次吸入治療到醫(yī)師決定出院的“適合出院”計(jì)算住院時(shí)間(los)。“適合出院”的時(shí)間是從可適用的最后臨床評(píng)分以及從特定情況下受試者的醫(yī)療記錄中得到的(即在研究過(guò)程中未達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的受試者和因懷疑細(xì)支氣管炎相關(guān)事件而仍住院的受試者)。

從第一次治療到釋放前第一次至少92％的o2飽和度計(jì)算達(dá)到導(dǎo)致釋放的92％的o2飽和度(改善)的時(shí)間。該時(shí)間是從適用的臨床評(píng)分和特定情況下的受試者每天記錄中得到的。

從第一次吸入到第一次受試者達(dá)到小于或等于5的臨床評(píng)分計(jì)算達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的時(shí)間。對(duì)于未達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的受試者，los被輸入為達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的時(shí)間。

對(duì)于itt集的分析，使用末次觀(guān)察值結(jié)轉(zhuǎn)法(locf)來(lái)解釋缺失的數(shù)據(jù)。

所有測(cè)量變量和派生參數(shù)均由描述性統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)制成表格。分類(lèi)變量按照研究組和總體在總表中列出，包括樣本量、絕對(duì)和相對(duì)頻率。

連續(xù)變量總結(jié)在表中，包括樣本量、算術(shù)平均值、sd、標(biāo)準(zhǔn)誤差、中值、最小和最大值。

在本研究中提供的數(shù)據(jù)分析中使用以下統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)：

配對(duì)t檢驗(yàn)用于測(cè)試每個(gè)研究組中定量變量基線(xiàn)變化的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。

適當(dāng)使用雙樣本t檢驗(yàn)或非參數(shù)wilcoxon秩和檢驗(yàn)或中值檢驗(yàn)來(lái)分析研究組之間在定量參數(shù)方面的差異。

卡方檢驗(yàn)用于檢驗(yàn)研究組間分類(lèi)變量頻率差異的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。

應(yīng)用kaplan-meier生存函數(shù)曲線(xiàn)的生存分析用于檢驗(yàn)以下終點(diǎn)中研究組之間的差異的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性：

·los，從第一次吸入到適合出院

·達(dá)到導(dǎo)致出院的92％飽和度的時(shí)間

·實(shí)現(xiàn)臨床評(píng)分的小于或等于5的時(shí)間

cox模型用于kaplan-meier曲線(xiàn)的比較分析。通過(guò)cox回歸模型估算危害比。

所有測(cè)試均為雙尾，p值為5％或以下被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。使用(sasinstitute，carynorthcarolina)分析數(shù)據(jù)。

還對(duì)關(guān)鍵的事后次要終點(diǎn)進(jìn)行了los小于或等于24小時(shí)和大于24小時(shí)的受試者的事后亞組分析。還對(duì)los大于36小時(shí)的亞組和來(lái)自每個(gè)治療組的10個(gè)最嚴(yán)重受試者的亞組(即最長(zhǎng)的los)進(jìn)行另外的探索性分析。這些事后分析基于下列原因：

·根據(jù)臨床前研究，no的抗病毒/抗微生物治療效果預(yù)計(jì)至少需要24小時(shí)(即2.5治療小時(shí))。

·在醫(yī)院不到24小時(shí)后，大約1/3的受試者出院。los小于24小時(shí)的受試者被認(rèn)為具有“非常輕微的疾病”，其改善可能與任何治療無(wú)關(guān)。

·較長(zhǎng)的los預(yù)期與較高的疾病嚴(yán)重程度相關(guān)，因此任何治療效果在3個(gè)亞組los大于24小時(shí)、los大于36小時(shí)、10個(gè)最嚴(yán)重的受試者中應(yīng)更為明顯。

計(jì)劃樣本量為40名受試者，每個(gè)研究組為20名。考慮到預(yù)期的約為10％的退出率，計(jì)劃招募44名受試者，使具有40名完成研究的人類(lèi)受試者的樣本量。

研究對(duì)象：研究人群包括43名2至12個(gè)月齡的細(xì)支氣管炎受試者，他們需要在以色列的beersheva的soroka大學(xué)醫(yī)學(xué)中心住院治療。表3匯總了篩選的所有受試者的總體情況。共篩選43例受試者，隨機(jī)分組：no組21例，標(biāo)準(zhǔn)治療組22例。其中，no組19/21(90.5％)受試者，標(biāo)準(zhǔn)治療組20/22(90.9％)受試者完成了整個(gè)治療和研究時(shí)間。

表3受試者情況(所有受試者隨機(jī)分組，n＝43)

1研究中兩次methb>5％(受試者24)。

2本受試者經(jīng)歷了sae的呼吸衰竭，并在返回兒科部門(mén)前轉(zhuǎn)到兒科重癥監(jiān)護(hù)室2天(受試者36)。

3主治醫(yī)生或研究者的要求(受試者26)。

4受試者的父母/法定監(jiān)護(hù)人撤回知情同意書(shū)(受試者8)。

注意：ae＝不良事件；sae＝嚴(yán)重不良事件。

表4分析集總結(jié)(所有受試者隨機(jī)分組，n＝43)

1排除受試者24(no組)、受試者26(no組)和受試者8(標(biāo)準(zhǔn)治療組)。

2排除受試者24(no組)、受試者26(no組)、受試者8(標(biāo)準(zhǔn)治療組)和受試者36(標(biāo)準(zhǔn)治療組)。

注意：itt＝意向性治療；mitt＝改良意向治療；pp＝符合方案。

所有隨機(jī)分組的受試者(n＝43)均包括在用于分析安全性和療效主要分析集的itt中。兩組篩選的治療組平均methb值均在正常實(shí)驗(yàn)室參考范圍內(nèi)，范圍為0.10-1.40％；no組的平均(sd)methb水平為0.69(0.43)％，標(biāo)準(zhǔn)治療組的平均(sd)methb水平為0.73(0.30)％(參見(jiàn)表5)。

表5人口統(tǒng)計(jì)學(xué)與基線(xiàn)特征總結(jié)(itt，n＝43)

1卡方檢驗(yàn)用于檢驗(yàn)研究組間以百分?jǐn)?shù)表示的差異的檢驗(yàn)意義。

2t檢驗(yàn)(未配對(duì))針對(duì)研究組間平均值的差異。

3非參數(shù)wilcoxon-mann-whitney秩和檢驗(yàn)針對(duì)研究組之間在平均值方面的差異

注意：itt＝意向性治療；max＝最大值；min＝最小值；methb＝高鐵血紅蛋白；nd＝?jīng)]有檢測(cè)到；sd＝標(biāo)準(zhǔn)偏差。

組之間的平均值/中值臨床評(píng)分是可比較的(參見(jiàn)表5)，所有受試者患有中度輕度細(xì)支氣管炎。除了一些受試者的發(fā)熱(最高溫度39.5℃)外，兩組治療組中的大多數(shù)受試者在篩選/基線(xiàn)處具有正常的體檢結(jié)果(即，no組中為76.2％，標(biāo)準(zhǔn)治療組為81.8％)。

表6示出了在第一次治療之前鼻洗液中檢測(cè)到的病毒匯總。在兩個(gè)治療組中，大多數(shù)受試者為rsv陽(yáng)性(no組為71.4％，標(biāo)準(zhǔn)治療組為63.6％)。

表6第一次治療前鼻洗液中檢測(cè)到的病毒匯總(itt，n＝43)

1該表中所報(bào)告的病毒學(xué)結(jié)果是基于rt-pcr的結(jié)果，除了1個(gè)rsv樣本使用了血清學(xué)。個(gè)別受試者可能具有多于一種病毒類(lèi)型。

注意：itt＝意向性治療；rsv＝呼吸道合胞病毒；rt-pcr＝逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈反應(yīng)。

還比較了los大于24小時(shí)和小于或等于24小時(shí)的亞組的人口統(tǒng)計(jì)學(xué)和基線(xiàn)特征(參見(jiàn)表7)。對(duì)于給定亞群體中的治療組之間或組合的治療組的亞群之間的任何參數(shù)，觀(guān)察不到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異。

表7los≤24小時(shí)和>24小時(shí)受試者的人口統(tǒng)計(jì)學(xué)與基線(xiàn)特征(itt，n＝43)

注意：itt＝意向性治療；max＝最大值；min＝最小值；methb＝高鐵血紅蛋白；nd＝?jīng)]有檢測(cè)到；sd＝標(biāo)準(zhǔn)偏差。

暴露和治療依從性：受試者每天以3至4小時(shí)的間隔給予5次30分鐘的no(no組)或僅o2(標(biāo)準(zhǔn)治療，對(duì)照組)，直到受試者改善導(dǎo)致適合出院的決定，每個(gè)受試者連續(xù)5天吸入最多25次。

鑒于研究設(shè)計(jì)(在醫(yī)院給予吸入)，兩個(gè)治療組的依從性良好。每個(gè)治療組中的三個(gè)受試者錯(cuò)過(guò)了一個(gè)或多個(gè)計(jì)劃的劑量，給予受試者的劑量中，大多數(shù)吸入(每個(gè)治療組中>96％)是完全吸入30分鐘(參見(jiàn)表8)。

與對(duì)照組(9.0)相比，no組(7.4)的平均吸入次數(shù)較低，盡管組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。在no組中，最大治療次數(shù)為16次，與標(biāo)準(zhǔn)治療組中的25次相對(duì)照，如表7所示，在第11次治療之前，每個(gè)治療次數(shù)中的受試者的數(shù)目大于標(biāo)準(zhǔn)治療組中的數(shù)目。

表8暴露和治療依從性總結(jié)(itt，n＝43)

1包括所有治療(30分鐘吸入)，其中記錄了開(kāi)始和結(jié)束時(shí)間，包括在完全30分鐘之前停止的治療。

2排除在每個(gè)方案指定的完全30分鐘之前停止的任何吸入。

注意：itt包括2名由于ae過(guò)早退出治療的受試者，和2名由于撤回同意/醫(yī)生決定而早日脫離治療和研究的受試者。

max＝最大；min＝最?。籹d＝標(biāo)準(zhǔn)偏差。

主要安全性終點(diǎn)-與吸入no相關(guān)的methb百分比：圖6示出了研究治療期間methb>5％或≤5％的受試者的百分比。標(biāo)準(zhǔn)治療中沒(méi)有受試者的methb超過(guò)5％。在no組中，在研究治療期間，6名(28.6％)受試者的任何methb測(cè)量值大于5％，其中3名受試者的methb大于5％。no組中的一個(gè)受試者的最大methb為5.6(受試者44)；這名受試者沒(méi)有停止研究治療。

圖7示出了在治療前、治療過(guò)程中和治療后監(jiān)測(cè)的methb水平的散點(diǎn)圖。在no組中，methb在治療期間增加，治療結(jié)束時(shí)達(dá)峰值，然后逐漸下降，在約3小時(shí)內(nèi)接近治療前水平。如圖8所示，當(dāng)比較研究中每個(gè)治療次數(shù)的治療前和治療結(jié)束時(shí)methb水平，在研究治療期間未觀(guān)察到對(duì)methb水平的“累積”效應(yīng)。

療效評(píng)估–住院時(shí)間：表9和圖9示出了itt中所有受試者以及基于los大于24小時(shí)和los小于或等于24小時(shí)的亞組的los平均值和中值的分析總結(jié)，圖10示出了相應(yīng)的kaplan-meier分析總結(jié)。

表9根據(jù)治療和亞組的los的平均值和中值(itt)

*表示p<0.05時(shí)的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。

注意：itt＝意向治療；los＝住院時(shí)間；sd＝標(biāo)準(zhǔn)偏差。

在itt(n＝43)中，與標(biāo)準(zhǔn)治療組相比，no組具有較短的平均los；然而，治療組之間的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。受試者之間的變化性很高，如sd值所示。在no組中，平均(sd)los為43.34(32.95)小時(shí)，與標(biāo)準(zhǔn)治療組中的49.98(46.23)小時(shí)(p＝0.856)相對(duì)照，los中值為40.03小時(shí)，與24.48小時(shí)(p＝0.654)相對(duì)照。kaplanmeier分析(參見(jiàn)圖10a)的結(jié)果也沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(風(fēng)險(xiǎn)比(hr)＝0.812，95％ci：0.435，1.518；時(shí)序檢驗(yàn)(logrank)中p值＝0.513)。

當(dāng)根據(jù)los大于24小時(shí)和los小于或等于24小時(shí)的亞組檢查itt時(shí)，對(duì)于los大于24小時(shí)的受試者來(lái)說(shuō)，與標(biāo)準(zhǔn)治療組(62.50小時(shí))相比，no組的los中值(41.92小時(shí))顯示為在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著更短(p＝0.014)(參見(jiàn)表9和圖9c)。雖然該結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(hr＝0.480，95％ci：0.211,1.091；時(shí)序檢驗(yàn)的p值＝0.073)，但kaplanmeier分析也顯示有利于los大于24小時(shí)的受試者的no組的趨勢(shì)(參見(jiàn)圖10b)。在los小于或等于24小時(shí)的亞組中，平均值和中值los在治療組之間相似，而且觀(guān)察到無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

如圖11和表10所示，pp集(n＝39)的分析結(jié)果與itt(n＝43)觀(guān)察到的結(jié)果相似。盡管與標(biāo)準(zhǔn)治療組相比，no組平均los較短，但治療組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。在no組中，平均(sd)los為38.79(21.52)小時(shí)，與標(biāo)準(zhǔn)治療組的43.86(40.97)小時(shí)(p＝0.531)相對(duì)照，中值los為40.03小時(shí)，與標(biāo)準(zhǔn)治療組的23.56小時(shí)(p＝0.270)相對(duì)照。對(duì)于pp，kaplan-meier分析的結(jié)果也沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(hr＝0.866，95％ci：0.444,1.688；時(shí)序檢驗(yàn)的p＝0.671)。

當(dāng)根據(jù)los大于24小時(shí)和los小于或等于24小時(shí)的亞組檢查pp時(shí)，對(duì)于los大于24小時(shí)的受試者來(lái)說(shuō)，與標(biāo)準(zhǔn)治療組相比，no組的平均值和中值los均更短，盡管組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(參見(jiàn)表10和圖11c)。盡管結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(hr＝0.418，95％ci：0.164,1.062；時(shí)序檢驗(yàn)的p值＝0.059)，但kaplanmeier分析也顯示有利于los大于24小時(shí)的受試者的no組。在los小于或等于24小時(shí)的亞組中，治療組之間的平均值和中值los相似，并且觀(guān)察到無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(參見(jiàn)表10和圖11b)。

表10根據(jù)治療和亞組(pp)的平均和中值los

*表示p<0.05時(shí)的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。

1對(duì)于los≤24小時(shí)的受試者亞組，pp和mitt的群體在本研究中是相同的。

注意：los＝住院時(shí)間；mitt＝改良意向治療；pp＝符合方案；sd＝標(biāo)準(zhǔn)偏差。

對(duì)于los大于24小時(shí)的受試者亞組，mitt(n＝25)分析觀(guān)察到的結(jié)果與itt(n＝27)和pp(n＝24)觀(guān)察到的結(jié)果相似。對(duì)于los大于24小時(shí)(mitt)的受試者，在中值los值(即，與62.67小時(shí)相對(duì)照的41.83小時(shí)，分別為標(biāo)準(zhǔn)治療組和no的值(p＝0.032))之間顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(參見(jiàn)圖12a)。另外，通過(guò)kaplan-meier分析(hr＝0.357，95％ci：0.140,0.913；時(shí)序檢驗(yàn)的p值＝0.025)觀(guān)察到有利于no組的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。

對(duì)mitt進(jìn)行額外的探索性分析，以檢查los大于36小時(shí)和每個(gè)治療組的10個(gè)最嚴(yán)重受試者(即最長(zhǎng)的los)的亞組之間的差異(參見(jiàn)圖12b和圖12c)。對(duì)于los大于36小時(shí)的受試者，no和標(biāo)準(zhǔn)治療組的中值los分別為41.92和66.17小時(shí)(p＝0.029)，對(duì)于每組10個(gè)最嚴(yán)重的受試者，中值los為42.14對(duì)64.42小時(shí)(p＝0.081)，分別為no和標(biāo)準(zhǔn)治療組的值。然而，應(yīng)該指出的是，這些結(jié)果的解釋受到每個(gè)亞組的受試者數(shù)量的限制。

達(dá)到并持續(xù)至出院的第一次92％o2飽和度的時(shí)間：表11和圖14示出了針對(duì)itt中的所有受試者并根據(jù)los大于24小時(shí)和los小于或等于24小時(shí)的亞組達(dá)到并持續(xù)至出院的第一次92％o2飽和度的平均和中值時(shí)間的分析總結(jié)，并且圖14示出了相應(yīng)的kaplan-meier分析的總結(jié)。

在itt(n＝42)中，與標(biāo)準(zhǔn)治療組相比，no組達(dá)到持續(xù)92％的o2飽和度平均時(shí)間較短；然而，組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。在no組中，平均(sd)時(shí)間為35.50(33.73)小時(shí)，與標(biāo)準(zhǔn)治療組的45.75(44.43)小時(shí)(p＝0.517)相對(duì)照，中值時(shí)間為21.08小時(shí)，與23.00小時(shí)(p＝0.760)相對(duì)照。通過(guò)kaplan-meier分析(參見(jiàn)圖14a)也證明了在no組中達(dá)到持續(xù)92％的o2-飽和度具有較低的時(shí)間趨勢(shì)，盡管未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(hr＝0.73，95％ci：0.392,1.361；時(shí)序檢驗(yàn)的p值＝0.321)。

對(duì)于los大于24小時(shí)的受試者亞組，看到治療組之間差異較大(有利于no)，而治療組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(參見(jiàn)表11和圖13b)。盡管結(jié)果不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(hr＝0.515,95％ci：0.232,1.145；時(shí)序檢驗(yàn)p值＝0.098)，但kaplanmeier分析也顯示有利于los大于24小時(shí)的受試者的no組的趨勢(shì)(參見(jiàn)圖14b)。在los小于或等于24小時(shí)的亞組中，平均值和中值los在治療組之間相似，并且觀(guān)察到無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

表11根據(jù)治療和亞組(itt，n＝43)的達(dá)到并持續(xù)至出院的第一次92％的o2-飽和度的平均和中值時(shí)間

1不包括受試者29(標(biāo)準(zhǔn)治療組)因?yàn)樗朐簳r(shí)有92％飽和度。

注意：itt＝意向治療；sd＝標(biāo)準(zhǔn)偏差。

如圖15和表12所示，對(duì)于pp集(n＝38)的分析結(jié)果與itt(n＝42)觀(guān)察到的那些結(jié)果相似。雖然與標(biāo)準(zhǔn)治療組相比，no組達(dá)到持續(xù)92％的o2飽和度平均時(shí)間較短，然而，治療組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。在no組中，平均(sd)時(shí)間為30.17(21.06)小時(shí)，與標(biāo)準(zhǔn)治療組的41.22(41.46)小時(shí)(p＝0.582)相對(duì)照，中值時(shí)間為21.08小時(shí)，與21.40小時(shí)(p＝0.749)相對(duì)照。通過(guò)kaplan-meier分析的結(jié)果對(duì)于pp也沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(hr＝0.660，95％ci：0.334,1.302；時(shí)序檢驗(yàn)的p值＝0.227)。

當(dāng)根據(jù)los大于24小時(shí)和los小于或等于24小時(shí)的亞組檢查pp時(shí)，對(duì)于los大于24小時(shí)的受試者，與標(biāo)準(zhǔn)治療組相比，no組達(dá)到持續(xù)92％o2飽和度的平均和中值時(shí)間均較短，盡管組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(參見(jiàn)表12和圖15c)。kaplanmeier分析顯示los大于24小時(shí)的受試者有利于no組的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異(hr＝0.358，95％ci：0.139,0.921；時(shí)序檢驗(yàn)的p＝0.028)。在los小于或等于24小時(shí)的亞組中，治療組之間的平均和中值los相似，并且觀(guān)察到無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(參見(jiàn)表12和圖15b)。

表12根據(jù)治療和分組(pp)的達(dá)到并持續(xù)至出院的第一次92％o2飽和度的平均和中值時(shí)間

1不包括受試者29(標(biāo)準(zhǔn)治療組)，因?yàn)樗朐簳r(shí)有92％飽和度。

2對(duì)于los≤24小時(shí)的受試者亞組，pp和mitt的群體在本研究中是相同的。

注意：mitt＝改進(jìn)意向治療；pp＝按照方案；sd＝標(biāo)準(zhǔn)偏差。

在mitt中，對(duì)于los超過(guò)24小時(shí)的受試者來(lái)說(shuō)，與標(biāo)準(zhǔn)治療組(49.02小時(shí))相比，no組(38.98小時(shí))達(dá)到并持續(xù)至出院的的第一次92％的o2飽和度的中值時(shí)間顯示為在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著更短(p＝0.032)(參見(jiàn)圖16a)。另外，通過(guò)kaplan-meier分析觀(guān)察到有利于no組的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(hr＝0.308，95％ci：0.119,0.779；時(shí)序檢驗(yàn)的p值＝0.011)。

對(duì)mitt進(jìn)行額外的探索性分析，以檢查los大于36小時(shí)的亞組與來(lái)自每個(gè)治療組的10個(gè)最嚴(yán)重受試者(即最長(zhǎng)的los)之間的差異(參見(jiàn)圖16)。對(duì)于los大于36小時(shí)的受試者，達(dá)到并持續(xù)至出院的92％的o2飽和度的中值時(shí)間對(duì)于no和標(biāo)準(zhǔn)治療組分別是41.37對(duì)59.50小時(shí)(p＝0.002)，而no和標(biāo)準(zhǔn)治療組的中位時(shí)間分別為41.59對(duì)54.26小時(shí)(p＝0.009)。然而，應(yīng)該指出的是，這些結(jié)果的解釋受到每個(gè)亞組的受試者數(shù)量的限制。

達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的時(shí)間：表13和圖17示出了針對(duì)itt中的所有受試者并根據(jù)los大于24小時(shí)和los小于或等于24小時(shí)的亞組達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5(改善)的平均和中值時(shí)間的分析總結(jié)，并且圖18示出了相應(yīng)的kaplan-meier分析的總結(jié)。

在itt(n＝43)中，與標(biāo)準(zhǔn)治療組相比，no組平均時(shí)間較短；然而，組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。在no組中，達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的平均(sd)時(shí)間為32.83(30.61)小時(shí)，與標(biāo)準(zhǔn)治療組的43.10(43.91)小時(shí)(p＝0.621)相對(duì)照，中位時(shí)間為21.08小時(shí)，與22.20小時(shí)(p＝0.877)相對(duì)照。通過(guò)kaplan-meier分析也證明了在no組中達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的較低時(shí)間趨勢(shì)(參見(jiàn)圖18a)，盡管未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(hr＝0.728，95％ci：0.378,1.404；時(shí)序檢驗(yàn)的p值＝0.342)。

表13根據(jù)治療和亞組(itt，n＝43)的達(dá)到臨床評(píng)分≤5的平均和中值時(shí)間

注意：itt＝意向治療；sd＝標(biāo)準(zhǔn)偏差。

對(duì)于los大于24小時(shí)的itt受試者亞組，在達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的平均值和中值時(shí)間中觀(guān)察到相同趨勢(shì)，并且治療組之間有較大的明顯差異，但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(參見(jiàn)表13)?；趌os大于24小時(shí)的受試者的kaplan-meier分析，在有利于no組中觀(guān)察到統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著性差異(hr＝0.391，95％ci：0.161,0.949；時(shí)序檢驗(yàn)的p值＝0.033)(參見(jiàn)圖18b)。在los小于或等于24小時(shí)的亞組中，平均值和中值los在治療組之間相似，并且觀(guān)察到無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

如圖19和表14所示，pp集(n＝39)的分析結(jié)果與itt(n＝43)觀(guān)察到的結(jié)果相似。雖然與標(biāo)準(zhǔn)治療組相比，no組的達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5平均時(shí)間更短，但治療組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。在no組中，平均(sd)時(shí)間為27.18(13.17)小時(shí)，與標(biāo)準(zhǔn)治療組的36.30(36.68)小時(shí)(p＝0.813)相對(duì)照，中位時(shí)間為21.08小時(shí)，與20.30小時(shí)(p＝0.871)相對(duì)照。對(duì)于pp，kaplan-meier分析的結(jié)果也沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(hr＝0.663，95％ci：0.332,1.324；時(shí)序檢驗(yàn)的p值＝0.241)。

根據(jù)los大于24小時(shí)和los小于或等于24小時(shí)的亞組進(jìn)行pp檢查時(shí)，對(duì)于los大于24小時(shí)的受試者，與標(biāo)準(zhǔn)治療組相比，no組達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的平均值和中值時(shí)間更短，盡管組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(參見(jiàn)表14和圖19c)。對(duì)于los大于24小時(shí)的受試者，kaplanmeier分析顯示有利于no組的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(hr＝0.273，95％ci：0.093,0.799；時(shí)序檢驗(yàn)的p值＝0.013)。在los小于或等于24小時(shí)的亞組中，治療組之間的平均值和中值los相似，并且觀(guān)察到無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(參見(jiàn)表14和圖19b)。

表14根據(jù)治療和亞組(pp)的達(dá)到臨床評(píng)分≤5的平均和中值時(shí)間

1對(duì)于los≤24小時(shí)的受試者亞組，本研究中進(jìn)行pp和mitt的人群是相同的。

注意：mitt＝改良意向治療；pp＝符合方案；sd＝標(biāo)準(zhǔn)偏差。

在los大于24小時(shí)的mitt受試者的分析中觀(guān)察到相似的結(jié)果。達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的中值時(shí)間在no組為34.92小時(shí)，在標(biāo)準(zhǔn)治療組為49.02小時(shí)(p＝0.174)(參見(jiàn)圖20a)?；趉aplanmeier分析，表明有利于no組的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(hr＝0.238，95％ci：0.081,0.699；時(shí)序檢驗(yàn)的p值＝0.005)。

對(duì)mitt進(jìn)行額外的探索性分析，以檢查los大于36小時(shí)的亞組間與來(lái)自每個(gè)治療組的10個(gè)最嚴(yán)重受試者(即最長(zhǎng)的los)之間的差異(參見(jiàn)圖20b和圖20c)。對(duì)于los大于36小時(shí)的受試者，對(duì)于no和標(biāo)準(zhǔn)治療組的達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5的中值時(shí)間分別為41.37對(duì)59.50(p＝0.029)，對(duì)于每組中10個(gè)最嚴(yán)重的受試者(基于los)，對(duì)于no和標(biāo)準(zhǔn)治療組的中值時(shí)間分別為41.56對(duì)54.26小時(shí)(p＝0.081)。然而，應(yīng)該指出的是，這些結(jié)果的解釋受到每個(gè)亞組的受試者數(shù)量的限制。

結(jié)論：在本研究中，43名2月齡12月齡的細(xì)支氣管炎受試者，至多連續(xù)服用5天，每天5次地吸入160ppmno治療(除了標(biāo)準(zhǔn)o2治療)的安全性和耐受性與僅標(biāo)準(zhǔn)治療相當(dāng)。

治療組的ae總體發(fā)生率相似，no組有10例(47.6％)和標(biāo)準(zhǔn)治療組13例(59.1％)受試者報(bào)告至少1ae。每組4例受試者報(bào)告嚴(yán)重不良事件，研究期間無(wú)死亡。

研究期間任意methb大于5％的受試者(主要安全性終點(diǎn))的百分比在no組為28.6％(6名受試者)，標(biāo)準(zhǔn)治療組為0.0％。no組中三名受試者有多于一個(gè)methb測(cè)量超過(guò)5％。治療期間no組的平均methb水平顯著升高，但治療停止后迅速恢復(fù)至基線(xiàn)值。在研究中沒(méi)有methb暴露的累積效應(yīng)，報(bào)告的最高methb水平no組的一名受試者中為5.6％。

在這項(xiàng)研究中沒(méi)有進(jìn)行主要的療效分析，研究沒(méi)有為療效提供依據(jù)。結(jié)果的解釋受到每組受試者較少數(shù)量的限制?；诖渭?jí)和探索性分析，治療組間沒(méi)有看到主要療效集(itt，所有受試者)的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。然而，在los大于24小時(shí)的受試者亞組中，在較短的los、需要較短時(shí)間達(dá)到持續(xù)的o2飽和度、需要較短時(shí)間達(dá)到臨床評(píng)分小于或等于5方面，表明了no對(duì)標(biāo)準(zhǔn)治療的統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的治療益處。

實(shí)施例4

一氧化氮吸入治療囊性纖維化

按照下述和圖21中概述的方法間歇吸入一氧化氮治療診斷患有囊性纖維化的一群人類(lèi)受試者。

在第一次研究治療前14天內(nèi)篩選受試者。包括在研究中，受試者的要求為大于或等于10歲，診斷患有cf，而不是o2依賴(lài)型(即，室內(nèi)空氣中休眠清醒時(shí)至少92％的飽和度)，fev1為30％至85％，并且被銅綠假單胞菌和/或金黃色葡萄球菌定植。

被診斷患有高鐵血紅蛋白血癥、免疫缺陷或心臟病的受試者被排除在研究之外。經(jīng)受高血壓治療的受試者，在篩查的30天內(nèi)經(jīng)受全身性類(lèi)固醇治療的受試者(每天1mg/kg或大于20mg潑尼松)，吸煙者和有肺移植病史的受試者也被排除。其他主要排除標(biāo)準(zhǔn)如下：methb在篩查中大于3％，入院前1個(gè)月內(nèi)產(chǎn)生抗生素治療(除了預(yù)防性抗生素)，頻繁鼻出血病史(大于1次/月)和30天內(nèi)嚴(yán)重咯血(一次咳嗽發(fā)作大于或等于5毫升血液或24小時(shí)內(nèi)大于30毫升血液。

在2周的治療期后，所有受試者在最后一次研究治療后的1周和2周需要返回診所進(jìn)行2次隨訪(fǎng)評(píng)估(如體檢，肺功能檢查，實(shí)驗(yàn)室檢查，痰液分析和ae/sae調(diào)查問(wèn)卷)。

研究治療：給藥的研究治療如下：

·調(diào)查處理：800ppm(0.08％)no，99.999％氮純度，余量為n2；通過(guò)吸入口罩以160ppm的no(空氣和o2的混合物，最低濃度為21％o2)進(jìn)行輸送。

除了他們的標(biāo)準(zhǔn)護(hù)理之外，每天給予受試者吸入三十分鐘160ppm的no(含有o2/空氣)，持續(xù)10個(gè)工作日(即治療5天，2天不治療，治療5天，總共治療10天吸入30次)。

要求從一次治療結(jié)束至下次治療開(kāi)始的最短時(shí)間間隔為3.5小時(shí)。

氧氣和壓縮空氣從醫(yī)院用戶(hù)輸送到一個(gè)o2微型混合器(carefusionbirdmodel03800)，在微型混合器處將其混合成預(yù)先確定的o2濃度，這將允許吸入氣體混合物中最低濃度為21％o2。o2/空氣流混合的混合物由o2流量計(jì)控制并通過(guò)o2管道輸送。

使用800ppm的no氣瓶作為no氣體源。no氣體由no調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)。然后將其通過(guò)不銹鋼高壓軟管輸送到no質(zhì)量流量計(jì)，其中no氣流被調(diào)節(jié)并通過(guò)no管輸送到呼吸回路中。

使用三通閥，將no和o2管組合在一起，通過(guò)no管將160ppm的no輸送到患者吸入面罩。

使用專(zhuān)用監(jiān)視器(aeronoxinternationalbiomedical，us)從采樣端口連續(xù)監(jiān)測(cè)輸送給患者的no(ppm)，no2(ppm)和o2(％)濃度。

作為安全措施，在no施用期間，使用商業(yè)中“現(xiàn)成的”共同量氧計(jì)(masimocorporationmodelrad-57/rad87)”監(jiān)測(cè)人類(lèi)受試者血液中的methb和o2飽和水平。

在methb大于5％或者低于或等于88％的o2飽和度的情況下，治療暫時(shí)停止，30分鐘后重復(fù)測(cè)量。如果值已經(jīng)恢復(fù)到安全閾值以上，則根據(jù)方案開(kāi)始下一次吸入。在第二次發(fā)生mehb大于5％的任何情況下，將永久停止研究治療。

這些受試者的標(biāo)準(zhǔn)護(hù)理包括口服抗生素以及妥布霉素吸入溶液(tobi)，按月給予(一個(gè)月給予，一個(gè)月不給予)。在沒(méi)有給予tobi的那個(gè)月給予研究治療。標(biāo)準(zhǔn)護(hù)理還包括連續(xù)口服阿奇霉素；吸入dnase(pulmozyme)；吸入3％鹽水和支氣管擴(kuò)張劑；吸入除tobi以外的抗生素(如粘菌素)；每日維生素補(bǔ)充劑(a，d，e，k)；胸部理療(體位引流)；補(bǔ)充高蛋白，高熱量食物；和更多。

研究終點(diǎn)：主要研究終點(diǎn)是安全性和耐受性。沒(méi)有主要療效終點(diǎn)。

主要終點(diǎn)-安全性和耐受性：

·安全性

○確定吸入no治療期間的methb水平

○確定與吸入no相關(guān)的其他ae

·耐受性

○由于任何原因提前中止研究或研究治療的受試者比例(％)

○由于ae或sae而過(guò)早停止研究治療的受試者比例(％)

○由于與吸入no相關(guān)的ae或sae而過(guò)早停止研究治療的受試者比例(％)

次要終點(diǎn)-療效：

·比較no治療前后的fev1改善

觀(guān)察終點(diǎn)：

·確定每周no治療期間細(xì)菌和真菌痰負(fù)荷比在no處理之前的細(xì)菌痰負(fù)荷的減少

·評(píng)估通過(guò)肺活量測(cè)定(即fvc，fevi，fevi/fvc，強(qiáng)制呼氣流量25％至75％(fef25-75))確定的、no間歇吸入治療期間和之后的肺功能指標(biāo)的改善。

·評(píng)估隨時(shí)間變化的c反應(yīng)蛋白(crp)水平

·任何時(shí)間點(diǎn)研究藥物相關(guān)出血的受試者數(shù)量

分析集：

為了分析安全性和療效，定義了以下分析集：

·itt：被定義為接受至少一項(xiàng)研究治療的所有受試者。這是分析療效和安全性的主要集

·pp：定義為itt群組中按照方案完成研究治療的和沒(méi)有違反主要方案的所有受試者(即排除所有提前終止的受試者)。這是分析療效的次要集

統(tǒng)計(jì)與分析方法：所有測(cè)量變量和衍生參數(shù)單獨(dú)列出，并通過(guò)描述性統(tǒng)計(jì)列表。對(duì)于分類(lèi)變量，提供了總結(jié)表，其給出了樣本量、絕對(duì)和相對(duì)頻率。對(duì)于連續(xù)變量，提供了總結(jié)表，其給出了樣本量，算術(shù)平均值、sd、中值、最小值和最大值以及95％ci的變量。對(duì)于itt群組，在適當(dāng)?shù)那闆r下locf方法應(yīng)用于在研究終止時(shí)或之前解釋缺失數(shù)據(jù)。血紅蛋白總結(jié)在適當(dāng)?shù)拿枋霰碇?。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)計(jì)算methb水平大于5％的受試者的百分比。使用兩種手段的符號(hào)秩和檢驗(yàn)分析methb水平的基線(xiàn)變化。實(shí)驗(yàn)室結(jié)果按時(shí)間歸納在適當(dāng)?shù)谋砀裰?。也?jì)算和呈現(xiàn)出基線(xiàn)變化。

應(yīng)用兩種手段的符號(hào)秩和檢驗(yàn)來(lái)分析連續(xù)參數(shù)中基線(xiàn)的變化：

·fev1％

·特異性細(xì)菌定植(即金黃色葡萄球菌，銅綠假單胞菌)

所有試驗(yàn)均為雙尾，p值為5％或以下被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。使用版(sasinstitute，carynorthcarolina)分析數(shù)據(jù)。計(jì)劃樣本量為10名受試者。應(yīng)該注意的是，這里報(bào)告的結(jié)果被認(rèn)為是初步的。

研究受試者：研究人群包括9名10歲以上患有cf并定植有銅綠假單胞菌和/或金黃色葡萄球菌的受試者。該研究在2個(gè)中心進(jìn)行：soroka大學(xué)醫(yī)學(xué)中心，兒科肺部診所和施耐德兒童醫(yī)學(xué)中心，囊性纖維化診所。共有9名受試者參加了研究，而且所有9名受試者完成了整個(gè)研究期。所有9個(gè)受試者均被納入安全性和療效分析。

人口統(tǒng)計(jì)學(xué)和基線(xiàn)特征：篩選時(shí)主要人口學(xué)特征和基線(xiàn)methb(第1天治療前值)的總結(jié)見(jiàn)表格。在9個(gè)受試者中，2例(22.2％)為男性，7例(77.8％)為女性。所有受試者都是猶太人種族。平均(sd)年齡為28.89(9.87)歲，年齡范圍從13歲到46歲。平均(sd)基線(xiàn)methb為1.03(0.50)％，范圍為0.30～1.70％。作為入選標(biāo)準(zhǔn)的一部分，受試者需要具有銅綠假單胞菌和/或金黃色葡萄球菌的定植史。單個(gè)受試者的定植史總結(jié)見(jiàn)表格。所有9名受試者都有銅綠假單胞菌定植史，6/9個(gè)受試者也有金黃色葡萄球菌的定植史。

表15人口統(tǒng)計(jì)學(xué)與基線(xiàn)特征總結(jié)(所有受試者，n＝9)

1第1天治療前值

注意：max＝最大值；min＝最小值；sd＝標(biāo)準(zhǔn)偏差。

表16銅綠假單胞菌和/或金黃色葡萄球菌的定植史(所有受試者，n＝9)

注意：作為入選標(biāo)準(zhǔn)的一部分，受試者需要定植銅綠假單胞菌和/或金黃色葡萄球菌。

病史：收集以下身體系統(tǒng)的病歷數(shù)據(jù)：過(guò)敏、心臟病學(xué)，皮膚病學(xué)、耳鼻喉科、肝臟、胃腸道、泌尿生殖道、代謝、眼科、腎臟、呼吸系統(tǒng)等。表格提供了具有病史發(fā)現(xiàn)(異常有臨床顯著性和異常不具有臨床顯著性)的受試者的總結(jié)。病史數(shù)據(jù)與該患者人群一致。所有9名受試者均報(bào)告了異常有臨床顯著性的呼吸系統(tǒng)疾病史，5例(55.6％)患者胃腸道病史異常(4例臨床顯著，1例臨床不顯著)。

表17病史總結(jié)(所有受試者，n＝9)

注意：cs＝臨床顯著；ncs＝非臨床顯著。

暴露和治療依從性：9名受試者中有7名接受了所有30次治療，2名受試者接受了29/30次治療。在給藥的治療中，大多數(shù)(265/268(98.9％))完成了30分鐘吸入；3名受試者有1次持續(xù)時(shí)間不足30分鐘的治療。

與吸入no相關(guān)的methb百分比：在整個(gè)研究治療期間，methb沒(méi)有超過(guò)5％的受試者。觀(guān)察到的最高methb水平為4.6％。如圖22所示，當(dāng)比較研究中每項(xiàng)目治療的治療前和治療結(jié)束mehb水平時(shí)，在研究治療期間對(duì)methb水平?jīng)]有“累積”效應(yīng)。

療效評(píng)估–fev1治療前和治療后：治療前后以及在研究期間隨著時(shí)間變化，平均fev1變化不大。從第1天到第10天，平均(sd)fev1變化為-0.11％(5.5％)(p＝0.992)。

觀(guān)察終點(diǎn)-細(xì)菌和真菌痰負(fù)荷：細(xì)菌和真菌痰負(fù)荷分析的結(jié)果是高度可變的，由于采樣和測(cè)試技術(shù)的限制，必須謹(jǐn)慎解釋。對(duì)于研究期間所有樣本，從第1天到隨訪(fǎng)結(jié)束時(shí)記錄微生物學(xué)結(jié)果。為了使no治療有效，需要在整個(gè)研究期間使微生物群體盡可能少地暴露于no。沒(méi)有首先在具有致死作用之前消耗微生物內(nèi)的硫醇保護(hù)機(jī)制；并且體外研究表明至少需要10次不間斷的30分鐘治療。因此，僅在第1天對(duì)具有陽(yáng)性結(jié)果的培養(yǎng)物進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。此外，中心實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有分析來(lái)自2名受試者(so-01和so-02)的樣本。根據(jù)表18中的受試者提供第1天和第9天的細(xì)菌和真菌痰結(jié)果的總結(jié)。

表18受試者細(xì)菌和真菌痰結(jié)果的總結(jié)

注意：僅在第1天收集高于0的細(xì)菌計(jì)數(shù)的數(shù)據(jù)。

cfu＝菌落形成單位；mssa＝對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌。

“-”表示不適用。

隨著時(shí)間變化的肺功能指標(biāo)：肺功能指標(biāo)在整個(gè)研究中保持相對(duì)恒定，沒(méi)有報(bào)道臨床顯著性變化。平均fvc絕對(duì)值、fvc預(yù)測(cè)值(％)、fev1絕對(duì)值、fev1預(yù)測(cè)值(％)、fev1/fvc，fef25-75絕對(duì)值和fef25-75預(yù)測(cè)值(％)的總結(jié)見(jiàn)表。

表19隨著時(shí)間變化的肺功能指標(biāo)總結(jié)(所有受試者)

注意：第2次隨訪(fǎng)是第10天治療后兩周。

max＝最大；min＝最小；sd＝標(biāo)準(zhǔn)偏差。

隨著時(shí)間變化的crp水平：對(duì)于大多數(shù)受試者，crp小于或等于5mg/ml，其低于被認(rèn)為指示全身炎癥的閾值。對(duì)于這些受試者，盡管crp水平隨時(shí)間而波動(dòng)，但水平仍然主要低于5mg/ml。在第1天，三名受試者患有全身炎癥(crp大于5mg/l)，對(duì)于這些受試者，從第1天到第10天crp水平下降(即在治療期間)(參見(jiàn)圖25)。

總結(jié)和結(jié)論：在9名cf受試者(大于或等于10歲)的本次研究中，在2周治療期間(除標(biāo)準(zhǔn)o2治療之外)吸入160ppmno30分鐘，每日3次，共10次治療，這種吸入耐受性良好。

5例(55.5％)受試者報(bào)告有不良事件。沒(méi)有嚴(yán)重或嚴(yán)重的ae，沒(méi)有由于ae而撤銷(xiāo)治療，并且沒(méi)有死亡。研究者認(rèn)為可能或可能與治療有關(guān)的不良事件報(bào)告為2例(22.2％)。在報(bào)告的31個(gè)ae中，大多數(shù)事件(20)發(fā)生在單個(gè)受試者(受試者sc-01)。

沒(méi)有methb升高大于5％或no2升高大于5ppm的ae。總體來(lái)說(shuō)，2例患者共報(bào)告7件咯血，所有事件的嚴(yán)重度為輕度。沒(méi)有受試者在研究期間的任何一點(diǎn)的methb超過(guò)5％，在研究期間沒(méi)有methb暴露的無(wú)累積效應(yīng)。所報(bào)告的最高methb水平為4.6％。

在具有臨床穩(wěn)定性cf的人類(lèi)受試者的這種小(n＝9)不受控制的短期研究中，沒(méi)有進(jìn)行主要療效分析。隨著時(shí)間的推移，fev1無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性或臨床相關(guān)性變化，整個(gè)研究期間肺功能指標(biāo)也保持相對(duì)穩(wěn)定。雖然細(xì)菌和真菌痰負(fù)荷分析的結(jié)果是高度可變的，但在一些受試者中可以看到mssa、無(wú)色桿菌、銅綠假單胞菌和曲霉菌的顯著降低。在具有全身炎癥(crp大于5mg/ml)的受試者中，在治療期間，crp水平降低。

雖然已經(jīng)結(jié)合本發(fā)明的具體實(shí)施方案描述了本發(fā)明，但是顯而易見(jiàn)的是，許多替代例、修改例和變化例對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的。因此，旨在包括落在所附權(quán)利要求的精神和廣泛范圍內(nèi)的所有這樣的替代例、修改例和變化例。

本說(shuō)明書(shū)中提及的所有出版物、專(zhuān)利和專(zhuān)利申請(qǐng)通過(guò)引用整體并入本說(shuō)明書(shū)中，其程度如同每個(gè)單獨(dú)的出版物、專(zhuān)利或?qū)＠暾?qǐng)被具體和單獨(dú)地指明通過(guò)引用并入本文。此外，本申請(qǐng)中引用或標(biāo)識(shí)任何參考文獻(xiàn)不應(yīng)被解釋為承認(rèn)該參考文獻(xiàn)可用作本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)。在使用章節(jié)標(biāo)題的范圍內(nèi)，不應(yīng)將其解釋為必然的限制。