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細(xì)胞外基質(zhì)組合物的制作方法

文檔序號(hào):12505232閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)組合物,其包含約35-55%的膠原蛋白和約10-30%的彈性蛋白。

2.如權(quán)利要求1的組合物,其中所述組合物包含少于0.1%的纖連蛋白。

3.如權(quán)利要求1或2的組合物,其中所述組合物包含不可檢測(cè)量的層粘連蛋白。

4.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物包含不可檢測(cè)量的糖胺聚糖。

5.如權(quán)利要求1的組合物,其中所述組合物包含少于0.1%的纖連蛋白、不可檢測(cè)量的層粘連蛋白和不可檢測(cè)量的糖胺聚糖。

6.一種ECM組合物,包含約40-70%的膠原蛋白和約15-25%的彈性蛋白。

7.如權(quán)利要求6的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的纖連蛋白。

8.如權(quán)利要求6或7的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的層粘連蛋白。

9.如權(quán)利要求6-8任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的糖胺聚糖。

10.如權(quán)利要求6-9任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物包含不可檢測(cè)量的細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子或脫氧膽酸。

11.如權(quán)利要求6的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的纖連蛋白、少于約0.1%的層粘連蛋白、少于約0.1%的糖胺聚糖和不可檢測(cè)量的細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子或脫氧膽酸。

12.如權(quán)利要求11的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的纖連蛋白、少于約0.1%的層粘連蛋白、少于約0.1%的糖胺聚糖及不可檢測(cè)量的細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子和脫氧膽酸。

13.如權(quán)利要求1-12任一項(xiàng)的組合物,其中所述ECM是胎盤(pán)ECM。

14.如權(quán)利要求13的組合物,其中所述胎盤(pán)ECM是人胎盤(pán)ECM。

15.如權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物配制為薄片。

16.如權(quán)利要求15的組合物,其中所述薄片為約1.5-2.5mm厚。

17.如權(quán)利要求1-16任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物配制為顆粒物。

18.如權(quán)利要求1-16任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物配制為可流動(dòng)基質(zhì)。

19.一種ECM組合物,包含約35-55%的膠原蛋白和約10-30%的彈性蛋白,其中所述ECM組合物按照以下方法制備:(i)從胎盤(pán)除去羊膜、絨毛膜和臍帶;(ii)將剩余的胎盤(pán)組織置于包含1M NaCl的溶液中;(iii)使所述胎盤(pán)組織均質(zhì)化;(iv)使所述胎盤(pán)組織與包含2%的脫氧膽酸鈉的溶液接觸;(v)用水洗滌所述胎盤(pán)組織;(vi)使所述胎盤(pán)組織與包含1M氫氧化鈉的溶液接觸;(vii)使包含所述胎盤(pán)組織的溶液至中性pH;和(viii)收集所述胎盤(pán)組織。

20.如權(quán)利要求19的組合物,其中所述組合物包含少于0.1%的纖連蛋白。

21.如權(quán)利要求19或20的組合物,其中所述組合物包含不可檢測(cè)量的層粘連蛋白。

22.如權(quán)利要求19-21任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物包含不可檢測(cè)量的糖胺聚糖。

23.如權(quán)利要求22的組合物,其中所述組合物包含少于0.1%的纖連蛋白、不可檢測(cè)量的層粘連蛋白和不可檢測(cè)量的糖胺聚糖。

24.一種ECM組合物,包含約40-70%的膠原蛋白和約15-25%的彈性蛋白,其中所述ECM按照以下方法制備:(i)從胎盤(pán)獲得絨毛膜;(ii)刮擦和清潔所述絨毛膜;(iii)將所述絨毛膜組織置于包含0.5M NaCl的溶液中;(iv)使所述絨毛膜與包含2%的脫氧膽酸或脫氧膽酸鈉的溶液接觸;(v)用水清洗所述絨毛膜;和(vi)研磨和凍干。

25.如權(quán)利要求24的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的纖連蛋白。

26.如權(quán)利要求24或25的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的層粘連蛋白。

27.如權(quán)利要求24-26任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的糖胺聚糖。

28.如權(quán)利要求24-27任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物包含不可檢測(cè)量的細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子或脫氧膽酸。

29.如權(quán)利要求24的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的纖連蛋白、少于約0.1%的層粘連蛋白、少于約0.1%的糖胺聚糖和不可檢測(cè)量的細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子或脫氧膽酸。

30.如權(quán)利要求29的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的纖連蛋白、少于約0.1%的層粘連蛋白、少于約0.1%的糖胺聚糖及不可檢測(cè)量的細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子和脫氧膽酸。

31.一種ECM組合物,包含約40-70%的膠原蛋白和約15-25%的彈性蛋白,其中所述ECM組合物按照以下方法制備:(i)從胎盤(pán)獲得絨毛膜;(ii)刮擦和清潔所述絨毛膜;(iii)將所述絨毛膜置于包含1.0M NaCl的溶液中;(iv)使所述絨毛膜與包含約0.05-0.1%的脫氧膽酸或脫氧膽酸鈉和約3mM-5mM EDTA的第一洗滌劑溶液接觸,接著水清洗;(iv)使所述絨毛膜與包含約0.05-0.1%的脫氧膽酸或脫氧膽酸鈉的第二洗滌劑溶液接觸,接著水清洗;和(v)凍干。

32.如權(quán)利要求31的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的纖連蛋白。

33.如權(quán)利要求31或32的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的層粘連蛋白。

34.如權(quán)利要求31-33任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的糖胺聚糖。

35.如權(quán)利要求31-34任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物包含不可檢測(cè)量的細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子或脫氧膽酸。

36.如權(quán)利要求35的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的纖連蛋白、少于約0.1%的層粘連蛋白、少于約0.1%的糖胺聚糖和不可檢測(cè)量的細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子或脫氧膽酸。

37.如權(quán)利要求36的組合物,其中所述組合物包含少于約0.1%的纖連蛋白、少于約0.1%的層粘連蛋白、少于約0.1%的糖胺聚糖及不可檢測(cè)量的細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子和脫氧膽酸。

38.如權(quán)利要求19-37任一項(xiàng)的組合物,其中所述ECM是胎盤(pán)ECM。

39.如權(quán)利要求38的組合物,其中所述胎盤(pán)ECM是人胎盤(pán)ECM。

40.如權(quán)利要求19-39任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物配制為薄片。

41.如權(quán)利要求40的組合物,其中所述薄片為約1.5-2.5mm厚。

42.如權(quán)利要求19-39任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物配制為顆粒物。

43.如權(quán)利要求19-39任一項(xiàng)的組合物,其中所述組合物配制為可流動(dòng)基質(zhì)。

44.一種治療需要細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的受試者的方法,包括向所述受試者施用權(quán)利要求1-43任一項(xiàng)的組合物或使所述受試者接觸權(quán)利要求1-43任一項(xiàng)的組合物。

45.如權(quán)利要求44的方法,其中所述受試者具有口腔病變。

46.如權(quán)利要求44的方法,其中所述受試者具有尿失禁。

47.如權(quán)利要求44的方法,其中所述受試者具有膀胱輸尿管反流。

48.如權(quán)利要求44的方法,其中所述受試者具有胃食管反流病。

49.如權(quán)利要求44的方法,其中所述受試者具有影響聲帶和/或喉之一或兩者的疾病、障礙或異常。

50.如權(quán)利要求44的方法,其中所述受試者具有聲門(mén)閉合不全。

51.如權(quán)利要求44的方法,其中所述ECM用作神經(jīng)導(dǎo)引管。

52.如權(quán)利要求44的方法,其中所述ECM用作肌腱套。

53.如權(quán)利要求44的方法,其中所述ECM用作硬腦膜置換。

54.如權(quán)利要求44的方法,其中所述受試者具有外觀缺陷。

55.如權(quán)利要求54的方法,其中所述外觀缺陷是皺紋、凹陷、折痕、妊娠紋、疤痕、凹陷的眼睛或?qū)е卵劬χ車暮谘廴Φ目梢?jiàn)血管。

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