本發(fā)明涉及一種能夠減少皮膚紅斑等副作用，改善視黃醇的穩(wěn)定性，顯示長(zhǎng)時(shí)間作為目的的效果的視黃醇透皮給藥系統(tǒng)，尤其涉及一種含有視黃醇的微針(Microneedle)及其制造方法。

本申請(qǐng)基于2014年07月24日申請(qǐng)的韓國(guó)專利申請(qǐng)第10-2014-0094220號(hào)要求優(yōu)先權(quán)，并將上述申請(qǐng)的說明書以及附圖所公開的全部?jī)?nèi)容援引到本申請(qǐng)。

背景技術(shù)：

視黃醇作為維生素A的一種，在皮膚的表皮細(xì)胞維持原來的功能上起重要的作用。具體而言,視黃醇被認(rèn)為有以下效能：使存在于皮膚細(xì)胞的細(xì)胞核中間的DNA表達(dá)RNA而促進(jìn)細(xì)胞分化,促進(jìn)彈性蛋白等的生物合成，以減少皺紋且增大皮膚彈性的效能，所述彈性蛋白由在動(dòng)物的細(xì)胞間以纖維狀固體存在的硬蛋白的膠原蛋白和由彈性纖維構(gòu)成。

由此，視黃醇很早開始當(dāng)作去除皺紋或預(yù)防皮膚老化的化妝品開發(fā)，在1990年代末以后，世界的化妝品公司跟著發(fā)行含有視黃醇的化妝品，并且企業(yè)間還發(fā)生了激烈的市場(chǎng)搶占競(jìng)爭(zhēng)。

但是視黃醇產(chǎn)品出現(xiàn)了很多問題。具體而言,雖然視黃醇效果顯著，但是在光、溫度、氧氣等條件下容易被破壞，因此，當(dāng)作化妝品原料使用時(shí)能夠到達(dá)皮膚內(nèi)的穩(wěn)定化最重要。如果因外部因素導(dǎo)致視黃醇成分氧化而變質(zhì)，則存在不僅沒有效果，還有引起副作用的問題。為了解決此問題,存在使用昂貴的特殊容器或?qū)⑹褂脳l件限制為沒有光的場(chǎng)所或者開始使用的化妝品推薦在3個(gè)月內(nèi)全部使用等很多不便。

為了解決這種有關(guān)穩(wěn)定性的問題，以穩(wěn)定性好的視黃醇乙酸酯和棕櫚酸視黃酯等代替使用視黃醇。但是這種視黃醇衍生物不能像視黃醇深入浸透皮膚而合成蛋白質(zhì)，因此雖然穩(wěn)定性高但是效果相對(duì)小。

另外，視黃醇在皮膚吸收時(shí)經(jīng)常引起紅斑等誘發(fā)皮膚刺激的問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明要解決的課題

因此，本發(fā)明要解決的課題是提供一種能夠改善視黃醇的皮膚刺激,在給藥系統(tǒng)內(nèi)確保視黃醇的穩(wěn)定性,視黃醇能夠長(zhǎng)期顯示效果的視黃醇給藥系統(tǒng)以及制造這種系統(tǒng)的方法,利用這種系統(tǒng)投給視黃醇的方法。

解決課題的方法

為了解決上述課題,本發(fā)明提供一種包括含有視黃醇或視黃醇衍生物的微粒的微針,更優(yōu)選地,形成上述微針的物質(zhì)在皮膚內(nèi)溶解后，微針適用于皮膚時(shí)微針溶解或崩壞，導(dǎo)致包含在微針內(nèi)部的微粒迅速傳到皮膚內(nèi),并且包含在內(nèi)部的微粒由于包含緩釋高分子，因此，在皮膚內(nèi)每次少量釋放視黃醇或其衍生物。

本發(fā)明人研究了多種給藥系統(tǒng)，無論哪種系統(tǒng)都很難同時(shí)解決上述提到的視黃醇的幾種問題。本發(fā)明人經(jīng)過很多努力之后，研究出了通過在皮膚內(nèi)的溶解性(soluble)微針內(nèi)含浸由緩釋高分子構(gòu)成且包含視黃醇成分的微粒，從而能夠一次性解決視黃醇的穩(wěn)定性、皮膚刺激、效果持續(xù)等問題的卓越的發(fā)明。如果將含有視黃醇成分的微粒含浸在溶解性微針中并適用于皮膚,則通過微針在沒有疼痛的狀態(tài)下向皮膚內(nèi)透過視黃醇成分,并且微針在皮膚內(nèi)水分溶解，而且含有視黃醇成分的微粒傳遞到皮膚內(nèi)。從傳遞到皮膚內(nèi)的微粒徐徐釋放視黃醇成分，由此能夠緩和基于視黃醇的皮膚刺激，并且能夠?qū)⒁朁S醇效果最大化。

為了達(dá)成上述課題,微針在皮膚內(nèi)應(yīng)該是溶解性的,且為了形成溶解性微針可以使用透明質(zhì)酸(Hyaluronic acid)、羧甲基纖維素鈉(Na-CMC,Sodium carboxymethyl cellulose)、乙烯吡咯烷酮-乙酸乙烯酯共聚物(vinylpyrrolidone vinyl acetate copolymer)、聚乙烯醇(Poly vinyl alcohol)、以及聚乙烯吡咯烷酮(Poly vinyl pyrrolidone)等水溶性高分子；木糖(Xylose)、蔗糖(Sucrose)、麥芽糖(Maltose)、乳糖(Lactose)、海藻糖(Trehalose)等糖類；或它們的混合物。尤其,綜合考慮微針的皮膚透過強(qiáng)度、在皮膚內(nèi)的溶解速度等，優(yōu)選地使用透明質(zhì)酸(Oligo-Hyaluronic acid)、羧甲基纖維素鈉(Na-CMC,Sodium carboxymethyl cellulose)以及糖類(saccharide)(更優(yōu)選為,海藻糖(Trehalose))的混合物,更優(yōu)選地使用還混合下述的甘油(Glycerine)的混合物。

優(yōu)選地,本發(fā)明的微針除了含有視黃醇成分的微粒以及形成微針的上述提到的成分以外，還可以包含增塑劑、表面活性劑、保鮮劑、抗炎劑等。

作為上述增塑劑(plasticizer),例如,可以單獨(dú)或混合使用乙二醇(Ethylene glycol)、丙二醇(Propylene glycol)、二丙二醇(Dipropylene glycole)、丁二醇(Butylene glycol)、甘油(Glycerine)等多元醇。

在本發(fā)明中,由于上述與視黃醇成分一起形成微粒的物質(zhì)應(yīng)該是不會(huì)在微針的制造過程中溶解或分散而消失，并能夠在微粒內(nèi)抓住視黃醇成分的物質(zhì)的同時(shí)，也應(yīng)該是在皮膚內(nèi)能夠達(dá)到視黃醇成分的緩釋(sustained release)的物質(zhì)。

作為形成這種微粒的物質(zhì)可以使用緩釋高分子,作為緩釋高分子可以單獨(dú)或混合使用聚(乳酸)、聚(乙交酯)、聚(丙交酯-co-乙交酯)、聚酸酐、聚原酸酯、聚醚酯、聚己內(nèi)酯、單甲氧基聚乙二醇-聚己內(nèi)酯(MPEG-PCL)、聚酯酰胺、聚(丁酸)、聚(戊酸)、聚氨酯、或它們的共聚物等生物降解性高分子；以及聚丙烯酸酯、乙烯-乙酸乙烯酯聚合物、丙烯酸置換醋酸纖維素、非-分解性聚氨酯、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚氟乙烯、聚(乙烯基咪唑)、氯磺酸酯聚烯烴(chlorosulphonate polyolefins)、聚氧化乙烯或它們的共聚物等非-生物降解性高分子,但是本發(fā)明并非限定于此。

綜合考慮視黃醇成分的穩(wěn)定化以及在皮膚內(nèi)的釋放性等時(shí),作為上述緩釋高分子優(yōu)選使用聚(乳酸)、聚(乙交酯)、以及聚(丙交酯-co乙交酯)中任意一種以上和單甲氧基聚乙二醇-聚己內(nèi)酯(MPEG-PCL)的混合物。

為了達(dá)到本發(fā)明的目的，這種微粒盡可能是骨架(matrix)型或藥庫(reservoir)型。

能夠在本發(fā)明中使用的微粒能夠通過本發(fā)明所屬的領(lǐng)域中眾所周知的多種方法制造。例如,可以利用溶劑交換法(Solvent exchange method)、溶劑蒸發(fā)法(Solvent evaporation method)、膜透析法(Membrane dialysis method)、噴霧干燥法(Spray drying method)等制造能夠在本發(fā)明中利用的微粒。例如,可以利用文獻(xiàn)Journal of Controlled Release 70(2001)1-20以及International Journal of Pharm Tech Research,3(2011)1242-1254中記載的方法。優(yōu)選地可以通過一般的乳化法(emulsification)和溶劑蒸發(fā)法(solvent evaporation)制造。

優(yōu)選地,本發(fā)明的微粒的直徑是0.01μm-10μm。如果粒子大小超過10μm，則含浸在微針時(shí)針(needle)的強(qiáng)度減弱而皮膚很難透過。本發(fā)明的微粒的直徑通過激光光散射法(LLS)測(cè)定,例如,利用Malvern公司的Zetasizer2000^TM測(cè)定。

優(yōu)選地,本發(fā)明的微粒含有微?？傊亓康?.01-10重量％的視黃醇或視黃醇衍生物,更優(yōu)選地含有0.1-5重量％。另外,本發(fā)明的微針優(yōu)選地含有微針總重量0.05-10重量％的這種微粒,更優(yōu)選地含有0.1-5重量％。

作為能夠在本發(fā)明中使用的視黃醇衍生物，有視黃醇乙酸酯、棕櫚酸視黃酯、視黃醇或它們的混合物,但是本發(fā)明并非限定于這種視黃醇衍生物的具體種類。

另外,本發(fā)明提供一種黏附如上述微針的視黃醇成分的用于給藥(傳遞用)的微針貼劑(patch)系統(tǒng)。

另外，本發(fā)明提供一種含有視黃醇的微針的制造方法，包括(S1)利用上述的緩釋高分子制造含有視黃醇或視黃醇衍生物的微粒的步驟以及(S2)通過利用皮膚內(nèi)溶解性物質(zhì)制造含有上述微粒的微針的步驟。所述含有視黃醇的微針能夠改善視黃醇成分的刺激,確保視黃醇成分的穩(wěn)定性,能夠持續(xù)顯示效果。

另外，本發(fā)明提供一種利用本發(fā)明的微針作為特征的，減少視黃醇的皮膚刺激、且達(dá)到視黃醇的緩釋釋放的視黃醇皮膚給藥方法。

發(fā)明效果

本發(fā)明提供一種能夠確保視黃醇的穩(wěn)定性,減少視黃醇的皮膚刺激,能夠持續(xù)發(fā)揮效果的視黃醇透皮給藥用微針。另外，本發(fā)明提供一種減少皮膚刺激,能夠長(zhǎng)期發(fā)揮視黃醇的效果,且能夠確保對(duì)光、濕度、溫度等非常不穩(wěn)定的視黃醇的穩(wěn)定性的，視黃醇給藥系統(tǒng)的制造方法。另外，本發(fā)明提供一種利用這種微針作為特征的視黃醇的皮膚給藥方法。

附圖說明

本說明書中附加的以下附圖是示出本發(fā)明的優(yōu)選的實(shí)施例,且和前述的發(fā)明的內(nèi)容一起起到更加深刻理解本發(fā)明的技術(shù)思想的作用,因此，本發(fā)明并非限定并解釋于所述附圖上的事項(xiàng)。

圖1是表示制造本發(fā)明的微針的多種方法中的一個(gè)例的圖。溶解性微針可以用溶液澆鑄法(solution casting)制造,可以將溶液(solution)澆鑄(casting)到模具(mold)后利用真空和離心機(jī)(centrifuge)向細(xì)小模具(mold)填充液體后干燥而制造。形成微針結(jié)構(gòu)體的材料(material)可以使用一般的合成及天然水溶性高分子。

圖2表示用于評(píng)價(jià)本發(fā)明的微針的視黃醇釋放舉動(dòng)的弗蘭茲擴(kuò)散池(Franz diffusion cell)。

圖3是利用安裝豬皮膚的弗蘭茲擴(kuò)散池(Franz diffusion cell)而評(píng)價(jià)的,表示從微針釋放視黃醇的評(píng)價(jià)結(jié)果的圖表。

圖4是表示含有視黃醇其本身(以乳液形態(tài)添加)的微針,含有本發(fā)明的視黃醇微粒的微針,以及將含有視黃醇微粒的通常的乳膏劑型適用在皮膚后所顯示的皮膚刺激程度的照片。

圖5是表示含有視黃醇其本身(以乳液形態(tài)添加)的微針,含有本發(fā)明的視黃醇微粒的微針,以及將含有視黃醇微粒的通常的乳膏劑型在皮膚上反復(fù)使用時(shí)所顯示的皮膚刺激指數(shù)的圖表。

圖6是表示含有本發(fā)明的視黃醇微粒的微針及含有視黃醇微粒的通常的乳膏劑型在長(zhǎng)期使用后所顯示的皺紋改善程度的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

具體實(shí)施方式

以下，為了幫助理解本發(fā)明，舉實(shí)施例等詳細(xì)說明。但是,本發(fā)明的實(shí)施例能夠變形為其他多種形態(tài),本發(fā)明的范圍不能解釋為限定于下述實(shí)施例。本發(fā)明的實(shí)施例是為了給本領(lǐng)域的具有平均知識(shí)的人完整地說明本發(fā)明而提供的。

<視黃醇微粒制造>

將聚乳酸(PLA：Poly lactic acid)10g和單甲氧基聚乙二醇-聚己內(nèi)酯(MPEG-PCL：mono-methoxy poly ethylene glycole-Poly carprolactone)二嵌段共聚物(diblock copolymer)10g溶解在二氯甲烷(Methylene Chloride)100g后，混合視黃醇50C(BASF,視黃醇50％)5g而制造聚合物(polymer)-視黃醇溶液(solution)。在凈化水500mL中溶解聚乙烯醇(PVA：Poly vinyl alcohol)2.5g,來制造PVA水溶液。將PVA水溶液500mL以700rpm速度攪拌,且徐徐添加聚合物(polymer)-視黃醇溶液(solution)來制造水包油型乳狀液溶液(oil in water emulsion solution)。以700rpm速度攪拌24小時(shí)后，作為有機(jī)溶劑的二氯甲烷(Methylene chloride)蒸發(fā)而制造穩(wěn)定的視黃醇微粒。利用旋轉(zhuǎn)式汽化器(Rotary evaporator)來完全去除殘留的二氯甲烷(Methylene chloride),并且以使視黃醇含量成為總量的3％的方式，將水和有機(jī)溶劑一起蒸發(fā)而濃縮。

利用液相色譜法(Liquid chromatography)分析的結(jié)果,確認(rèn)視黃醇的含量為2.9％,利用粒度儀(Particle size analyzer)(Malvern Zetasizer2000)^TM分析的結(jié)果，微粒的平均大小是450nm。

<含有視黃醇或視黃醇微粒的微針的制造>

如下述表1,制造了含有視黃醇(以乳液形態(tài)添加)或視黃醇微粒的微針。

表1

具體而言，按以下方法制造含浸視黃醇(R MN)的溶解性(soluble)微針：將寡聚透明質(zhì)酸鈉(Hyaluronic acid)、羧甲基纖維素鈉(Sodium carboxymethyl cellulose)和海藻糖(Trehalose)溶解在凈化水后，添加甘油(Glycerin)、HCO-40及視黃醇50C(BASF,視黃醇50％,吐溫20 50％),制造油(oil)狀的視黃醇乳液(emulsion)。將所制造的視黃醇乳液(emulsion)澆鑄(casting)在硅膠微針模具(mold)后,在3000rpm的速度下離心(centrifugation)10分鐘，在細(xì)小模具(mold)中填充溶液。填充溶液后在干燥烤箱(70℃)中干燥3小時(shí),利用膠膜將微針從硅膠模具分離。

具體而言，按以下方法制造含浸視黃醇微粒(R-MN)的溶解性(soluble)微針。寡聚透明質(zhì)酸鈉(Hyaluronic acid)、羧甲基纖維素鈉(Sodium carboxymethyl cellulose)和海藻糖(Trehalose)溶解在凈化水后，添加甘油(Glycerin)、HCO-40和視黃醇微粒(視黃醇3％)制造溶液。將制造的溶液澆鑄在硅膠微針模具(silicone microneedle mold)后,在3000rpm的速度下離心(centrifugation)10分鐘，在細(xì)小模具(mold)中填充溶液。填充溶液后在干燥烤箱(70℃)中干燥3小時(shí),利用膠膜將微針從硅膠模具分離。

<視黃醇釋放舉動(dòng)>

利用安裝豬皮膚的弗蘭茲擴(kuò)散池(Franz diffusion cell)評(píng)價(jià)了上述制造的微針釋放視黃醇(參照?qǐng)D2)。作為受體溶液(acceptor solution)，使用含有1重量％的吐溫(Tween)20的磷酸鹽緩沖液(PBS)溶液。

即,利用弗蘭茲擴(kuò)散池(Franz diffusion cell),且利用液相色譜法(Liquid Chromatography)測(cè)定隨時(shí)間的豬皮膚組織及受體溶液(acceptor solution)的視黃醇含量。在豬皮膚上黏附含浸視黃醇(乳液)或者視黃醇微粒的微針，使微針浸透豬皮膚內(nèi)溶化后(黏附時(shí)間:2小時(shí),溫度:32℃)去除微針。將通過微針吸收視黃醇的豬皮膚放入弗蘭茲擴(kuò)散池(Franz diffusion cell)中,確認(rèn)隨時(shí)間視黃醇從豬皮膚向受體溶液釋放的舉動(dòng)。其結(jié)果在圖3顯示。

如圖3顯示,在通過含浸視黃醇(乳液)的微針而浸透視黃醇的豬皮膚的情況下，隨時(shí)間，視黃醇含量在豬皮膚內(nèi)迅速減少,受體溶液(acceptor solution)的視黃醇含量迅速增加,相反，在通過含浸視黃醇微粒的微針浸透視黃醇的豬皮膚的情況下，豬皮膚內(nèi)視黃醇含量徐徐減少,在受體溶液中也徐徐增加。這是因?yàn)樵诮肛i皮膚內(nèi)的視黃醇-微粒中徐徐釋放視黃醇。

<皮膚刺激試驗(yàn)>

將含有視黃醇的微針、含浸視黃醇微粒的微針(Microneeldle)以及含有視黃醇微粒的乳膏分別每天適用胳膊內(nèi)側(cè)2周時(shí)間，試驗(yàn)皮膚刺激。微針每1小時(shí)黏附一次,涂抹乳膏并確認(rèn)了皮膚刺激程度(N＝20,視黃醇含量:2500IU)。其結(jié)果顯示在圖4和圖5。

在含浸視黃醇的微針的情況下，顯示伴隨紅斑以及浮腫的嚴(yán)重的刺激，相反，在含浸視黃醇微粒的微針的情況下，皮膚刺激是一般功能性化妝品水準(zhǔn)(皮膚刺激指數(shù):約0.1,在皮膚刺激指數(shù)為0.2以上時(shí)，判斷為有皮膚刺激,普通功能性化妝品的皮膚刺激是0.05-0.1水準(zhǔn)。)，這是微小的,顯示出比含有視黃醇微粒的乳膏更小的皮膚刺激。

與含浸視黃醇的微針相比，含浸視黃醇微粒的微針顯示更小的皮膚刺激是因?yàn)槠つw內(nèi)浸透視黃醇后微粒中徐徐釋放視黃醇,這可以從弗蘭茲擴(kuò)散池(Franz diffusion cell)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推出。但是,本發(fā)明并非限定于這種理論記傳。

另外,與含浸視黃醇微粒的乳膏相比，含浸視黃醇微粒的微針中顯示更小的皮膚刺激是因?yàn)閷?shí)際使用中微針短時(shí)間(1小時(shí))使用后去除，而乳膏長(zhǎng)時(shí)間涂抹，因此，皮膚接觸視黃醇的時(shí)間短。但是,本發(fā)明并非限定于這種理論記傳。

<皺紋改善效果>

將包含視黃醇微粒的乳膏和包含視黃醇微粒的微針(Microneeldle)每天在眼角皺紋上處理12周后評(píng)價(jià)了皺紋改善程度。通過硅膠復(fù)制品(silicone replica)以及皺紋影像分析方法確認(rèn)了皺紋改善程度(N＝20)。其結(jié)果在圖6顯示。

本發(fā)明的含有視黃醇微粒的微針與乳膏劑型相比，皺紋改善效果顯示優(yōu)秀2倍以上的改善效果,這是因?yàn)橥ㄟ^微針使藥物皮膚透過良好,且透過的視黃醇在微粒中徐徐釋放，因此，確認(rèn)到皮膚刺激小且效果明顯。

在含有視黃醇的微針的情況下，由于皮膚刺激大，因此難以以人為對(duì)象來看皺紋改善效果,在一般乳膏內(nèi)包含視黃醇乳液(emulsion)的情況下，乳膏內(nèi)視黃醇不穩(wěn)定,因此，適用一般視黃醇時(shí)在效能及效果方面沒有意義。因此,作為對(duì)照組使用了包含視黃醇微粒的乳膏。