本發(fā)明涉及一種艾迪制劑的新應(yīng)用，具體是涉及一種艾迪制劑在制備治療惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：惡性滋養(yǎng)細(xì)胞瘤是胚胎滋養(yǎng)細(xì)胞惡變而來，這類腫瘤包括侵蝕性葡萄胎、絨毛膜癌和胎盤部位滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤，而絨毛膜癌又包括妊娠性絨癌與非妊娠性絨癌，非妊娠性絨癌少見，但可發(fā)生在縱隔腹膜后、卵巢、肺、食管、胃、肝、盆腹腔等處。滋養(yǎng)細(xì)胞病因不清，可能與營養(yǎng)不良(特別是缺少高質(zhì)量的動(dòng)物蛋白飲食)、病毒感染、卵巢功能失調(diào)及卵子異常、染色體異常、免疫功能異常、人種、地理、氣候及環(huán)境影響有關(guān)。惡性滋養(yǎng)細(xì)胞瘤是少數(shù)幾種不完全依賴病理切片即可發(fā)現(xiàn)的腫瘤。瘤細(xì)胞可隨血液轉(zhuǎn)移至肺、陰道、腦、導(dǎo)致患者大咯血、陰道流血、突然失明、失語和顱內(nèi)出血而危及生命。艾迪制劑是以斑蝥、人參、黃芪及刺五加為主要原料，提取其具有藥用價(jià)值的提取物作為有效成分而制成的制劑。有清熱解毒、消瘀散結(jié)的作用，其中艾迪注射液收載于衛(wèi)生部部頒標(biāo)準(zhǔn)20冊。專利cn03117114.1、名稱為“治療腫瘤的中藥注射制劑及其制作方法”的發(fā)明專利和專利cn200510003151.3、名稱為“一種治療腫瘤的中藥制劑的制備方法”公開了以斑蝥、人參、黃芪及刺五加為處方的艾迪制劑以及其制備方法?，F(xiàn)有技術(shù)表明，艾迪制劑對(duì)惡性腫瘤具有良好的治療效果。目前研究中報(bào)到出艾迪制劑對(duì)原發(fā)性肝癌、肺癌、直腸癌、惡性淋巴瘤、婦科惡性腫瘤的治療有很好療效，但是沒有對(duì)惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的相關(guān)報(bào)道。盡管惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤發(fā)展迅速，但只要及時(shí)診斷并給予合理的治療，其療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于肺、胃、肝、卵巢的腫瘤。決定療效的關(guān)鍵是化療的藥物選擇，但是目前的化療藥物往往存在毒副作用大，預(yù)后生活質(zhì)量不高的問題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：發(fā)明的目的是提供一種艾迪制劑在制備治療惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的艾迪制劑由從斑蝥、人參、黃芪和刺五加組成。主要是含有從斑蝥、人參、黃芪和刺五加中提取出的具有藥用價(jià)值的提取物作為有效成分。按照重量份計(jì)算，本發(fā)明所述艾迪制劑是由中藥原料斑蝥0.5-5份、人參25-100份、黃芪50-200份和刺五加100-200份經(jīng)提取制備而成。優(yōu)選的配比為：斑蝥1-2份、人參30-70份、黃芪75-125份、刺五加125-175份。最優(yōu)選的配比為：斑蝥1.5份、人參50份、黃芪100份、刺五加150份。在應(yīng)用時(shí)，本發(fā)明的藥物可以根據(jù)需要加入一種或多種藥學(xué)上可以接受的載體，如稀釋劑、填充劑、粘合劑、賦形劑、崩解劑、表面活性劑、吸收促進(jìn)劑和潤滑劑等，制成各種艾迪制劑。前述的艾迪制劑優(yōu)選以注射劑、片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、乳劑、溶液或懸浮劑的形式使用，更優(yōu)選為注射劑。上述劑型均可按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。前述的艾迪制劑的給藥途徑為口服、經(jīng)皮、靜脈或肌肉注射。本發(fā)明艾迪制劑的制備方法中，其有效成分提取物可以按照專利號(hào)為cn03117114.1的方法進(jìn)行提取，也可以按照專利號(hào)為cn200510003151.3中的的方法進(jìn)行提取，還可以用常規(guī)的方法進(jìn)行提取。本發(fā)明所述的艾迪制劑，其有效成分斑蝥為芫青科昆蟲南方大斑蝥mylabrisphaleratapallas或黃黑小斑蝥mylabriscichoriilinnaeus的干燥體，性辛、熱，有大毒，具有破血消瘦、攻毒蝕瘡的作用；人參為五加科植物人參panaxginsengc.a.mey.的干燥根，味甘、微苦，微溫，具有大補(bǔ)元?dú)?，補(bǔ)脾益肺，生津益血，安神增智的功效；黃芪為豆科植物蒙古黃芪astragalusmembranaceus(fisch.)bge.var.mongholocus(bge.)或膜莢黃芪的干燥根，具有補(bǔ)氣固表、利尿托毒、排膿、斂瘡生肌的功效；刺五加為五加科植物刺五加acanthopanaxsenticosus(rupr.etmaxim.)harms的干燥根及根莖或莖，具有益氣健脾、補(bǔ)腎安神的作用。四者合用具有清熱解毒、消瘀散結(jié)的作用。艾迪制劑的活性成分為斑蝥、人參、黃芪和刺五加，斑蝥可用于積年頑癬、癓瘕腫塊、惡瘡死肌等；人參可用于元?dú)馓撁撟C、肺脾心腎氣虛證、熱病氣虛津傷口渴及消渴證；黃芪可用于氣虛乏力、食少便溏、中氣下陷、表虛自汗；刺五加可用于脾腎陽虛、體虛乏力、食欲不振、腰膝酸痛、失眠多夢等。上述四種藥物具有補(bǔ)中益氣、生津養(yǎng)血的功效，可以促進(jìn)機(jī)體生長，有抗氧化、增強(qiáng)免疫的作用。因此，艾迪制劑對(duì)惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤具有顯著的療效，副作用小，臨床用藥更為安全。本申請(qǐng)人進(jìn)一步的試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，艾迪制劑確可用于制備治療惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的藥物。為了使本領(lǐng)域普通技術(shù)人員更好的理解本發(fā)明，以下通過實(shí)驗(yàn)例來進(jìn)一步闡述本發(fā)明艾迪制劑的組成及制備方法，以及艾迪制劑在治療惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤藥物中的實(shí)驗(yàn)研究。需要說明的是：以下實(shí)施例僅為闡釋本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明。試驗(yàn)例試驗(yàn)例1：艾迪制劑抗體外人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤細(xì)胞的活性研究1.1材料及試劑1.1.1藥物名稱和來源：艾迪注射液，取自實(shí)施例1-7由不同處方配比制得的艾迪注射液；5-氟尿嘧啶，西安海欣制藥有限公司；順鉑，長春瑞濱為江蘇豪森藥業(yè)股份有限公司。配制方法：以上藥物均用無血清培養(yǎng)基配成相應(yīng)濃度。1.1.2細(xì)胞株人滋養(yǎng)細(xì)胞瘤jeg-3細(xì)胞和jar細(xì)胞，購自中科院動(dòng)物研究所計(jì)劃生育生殖生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，按照所提供的說明書培養(yǎng)。1.1.3試劑及儀器dmem/f12(1:1)培養(yǎng)基、胎牛血清(美國gibco公司)、青霉素(100u/l)、鏈霉素(100μg/ml)、0.25％胰蛋白酶co2孵箱、elx800型酶標(biāo)儀(美國bio-tek公司)。1.2研究方法1.2.1細(xì)胞培養(yǎng)以含10％胎牛血清、100u/l青霉素和100μg/ml鏈霉素的dmem/f12(1:1)培養(yǎng)基，于37℃、5％co2培養(yǎng)箱中常規(guī)傳代培養(yǎng)jeg-3細(xì)胞和jar細(xì)胞，2-3天消化傳代一次(0.25％胰酶含edta)。1.2.2細(xì)胞抑制率測定取對(duì)數(shù)生長期jeg-3細(xì)胞和jar細(xì)胞，用0.25％的胰酶消化后收集，細(xì)胞計(jì)數(shù)調(diào)整細(xì)胞濃度。按每孔6×104個(gè)細(xì)胞接種于24空板上，每處設(shè)置三個(gè)復(fù)孔。于5％co2、37℃孵育12小時(shí)，藥物分別設(shè)5-7個(gè)濃度，每個(gè)濃度設(shè)3個(gè)復(fù)孔，連續(xù)作用18小時(shí)后，每孔加入mtt溶液(5mg/ml)100μl，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)。終止培養(yǎng)，小心吸去上清，每孔加入400μl二甲基亞砜(dmso)，置于搖床上低速振蕩30min，使結(jié)晶物充分溶解。以酶標(biāo)儀在493nm波長處測定光密度(od)?？瞻讓?duì)照以新鮮無血清培養(yǎng)基替換。計(jì)算藥物抑制率及半數(shù)抑制濃度(ic50)：藥物抑制率(％)＝(空白對(duì)照od－用藥od)/空白對(duì)照od×100％半數(shù)抑制濃度(ic50)：指被抑制一半時(shí)抑制劑的濃度，即凋亡細(xì)胞與全部細(xì)胞數(shù)之比等于50％時(shí)所對(duì)應(yīng)的濃度。誘導(dǎo)能力越強(qiáng)，該數(shù)值越低。1.3試驗(yàn)結(jié)果5-氟尿嘧啶、順鉑和艾迪制劑均對(duì)體外人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤jeg-3細(xì)胞和jar細(xì)胞有抑制作用，其中按實(shí)施例1和實(shí)施例7制得的艾迪注射液抑制作用弱于5-氟尿嘧啶和順鉑；按實(shí)施例2-6制得的艾迪注射液抑制作用強(qiáng)于5-氟尿嘧啶和順鉑；艾迪(實(shí)施例4)對(duì)體外人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤jeg-3細(xì)胞和jar細(xì)胞的抑制作用最強(qiáng)。具體結(jié)果見表1：表15-氟尿嘧啶、順鉑和艾迪制劑體外人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤jeg-3細(xì)胞和jar細(xì)胞抑制率(％)及半數(shù)抑制濃度(ic50)結(jié)果1.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論5-氟尿嘧啶、順鉑和艾迪單用都具有明顯的抗體外人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤jeg-3細(xì)胞和jar細(xì)胞增殖作用；其中艾迪(實(shí)施例1)藥物組分最低，其抑制作用低于5-氟尿嘧啶和順鉑；艾迪(實(shí)施例7)藥物組分最高，其抑制作用反而低于5-氟尿嘧啶和順鉑。按實(shí)施例2-6制得的艾迪注射液抑制作用強(qiáng)于5-氟尿嘧啶和順鉑，在此范圍內(nèi)的艾迪注射液處方配比都具有顯著的抗體外人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤jeg-3細(xì)胞和jar細(xì)胞增殖作用；艾迪(實(shí)施例4)對(duì)體外人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤jeg-3細(xì)胞和jar細(xì)胞的抑制作用最強(qiáng)，此為最優(yōu)選的艾迪注射液處方配比。試驗(yàn)例2：艾迪制劑對(duì)人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤細(xì)胞的體內(nèi)療效研究2.1材料和試劑：2.1.1藥物名稱和來源：艾迪注射液，取自實(shí)施例1-7由不同處方配比制得的艾迪注射液；5-氟尿嘧啶，西安海欣制藥有限公司；順鉑，長春瑞濱為江蘇豪森藥業(yè)股份有限公司。2.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和細(xì)胞scidbeige雌性小鼠(3～5周齡，體質(zhì)量16～20g)，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司；人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤細(xì)胞株jar，購自美國標(biāo)準(zhǔn)生物品收藏中心(atcc)、慢病毒空載體gv208，元件順序：ubi-mcs-egfp，真核抗性：嘌呤霉素，熒光標(biāo)記：egfp，購自吉?jiǎng)P基因，上海；polybrene購自上海吉?jiǎng)P公司。2.1.3試劑及儀器dmem/f12(1:1)培養(yǎng)基、胎牛血清(美國gibco公司)、青霉素(100u/l)、鏈霉素(100μg/ml)、0.5％胰酶倒置顯微鏡、co2孵箱、移液管、吸耳球、酒精燈。2.2試驗(yàn)方法2.2.1細(xì)胞培養(yǎng)jar細(xì)胞接種于含10％胎牛血清、100u/l鏈霉素和100μg/ml青霉素的dmem培養(yǎng)液中，在37℃、飽和濕度的5％co2孵箱中傳代培養(yǎng)。2.2.2注射用細(xì)胞懸液的制備選擇對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞接種于6孔板培養(yǎng)皿，37℃、5％co2飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，將適量病毒顆粒和polybrene加入3ml培養(yǎng)基，終濃度為6～8μg/ml，輕吹混勻，加入培養(yǎng)皿。24h后更換新鮮的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)48h；每隔2d更換2μg/ml嘌呤霉素藥物的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。待抗性細(xì)胞長滿后，0.5％胰酶消化，含10％血清的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，水平離心機(jī)1000r/min離心5min，滅菌pbs重懸細(xì)胞，輕柔涮洗3次，無血清培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，再次離心后，根據(jù)細(xì)胞數(shù)目加入無血清培養(yǎng)基，配置2.5×107/ml細(xì)胞懸液。2.2.3模型建立及給藥scidbeige雌性小鼠背部皮下注射200μl細(xì)胞懸液，待瘤體積生長至100～300mm3之間后，將動(dòng)物隨機(jī)分為生理鹽水對(duì)照組(ns組)、5-氟尿嘧啶、順鉑組和艾迪組。每組5只，5-氟尿嘧啶組每日靜脈注射5-氟尿嘧啶10mg/kg，2次/周，連續(xù)兩周。順鉑組每日靜脈注射順鉑5mg/kg，1次/周，連續(xù)兩周。艾迪組每日同一時(shí)間靜脈注射艾迪注射液50ml(以0.9％氯化鈉或5～10％葡萄糖注射液400～450ml稀釋后使用)，連續(xù)兩周。對(duì)照組每日同一時(shí)間靜脈注射ns5ml。每周測2-3次瘤體積，稱鼠重，記錄數(shù)據(jù)。計(jì)算腫瘤體積(v)、相對(duì)腫瘤體積(rtv)和抑瘤率(ir)。腫瘤體積(v)＝1/2×a(長徑)×b2(寬徑)對(duì)腫瘤體積(rtv)＝vt/v0(式中v0為分組給藥時(shí)測得的腫瘤體積，vt為每次測量時(shí)的腫瘤體積)抑瘤率(ir)％＝(1-5-氟尿嘧啶組或艾迪組或順鉑組平均瘤重/ns組平均瘤重)×100％2.2.4試驗(yàn)結(jié)果5-氟尿嘧啶和艾迪對(duì)人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤都有一定的治療效果，能明顯抑制人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的生長；其中，按實(shí)施例1和實(shí)施例7制得的艾迪注射液對(duì)人滋養(yǎng)細(xì)腫瘤的治療效果弱于5-氟尿嘧啶和順鉑；按實(shí)施例2-6制得的艾迪注射液治療效果比5-氟尿嘧啶和順鉑更加顯著；艾迪(實(shí)施例4)對(duì)人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的治療效果最好；此外，艾迪(實(shí)施例7)由于藥物組分最高，毒性最大，導(dǎo)致小鼠出現(xiàn)精神不振和嘔吐癥狀。具體結(jié)果見表1：表15-氟尿嘧啶、順鉑和艾迪對(duì)人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤jar細(xì)胞生長抑制療效注：d0：第一次給藥時(shí)間；dn：第一給藥后20天2.3試驗(yàn)結(jié)論5-氟尿嘧啶、順鉑和艾迪對(duì)人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤都有一定的治療效果，能明顯抑制人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的生長。其中，按實(shí)施例1制得的艾迪注射液藥物組分最低，對(duì)人滋養(yǎng)細(xì)腫瘤的治療效果弱于5-氟尿嘧啶和順鉑；按實(shí)施例7制得的艾迪注射液藥物組分最高，毒副作用最大，對(duì)人滋養(yǎng)細(xì)腫瘤的治療效果反而弱于5-氟尿嘧啶和順鉑；按實(shí)施例2-6制得的艾迪注射液治療效果比5-氟尿嘧啶和順鉑更加顯著；艾迪(實(shí)施例4)對(duì)體外人滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的治療效果最好。綜上所述，艾迪(實(shí)施例4)為最優(yōu)選處方配比，能達(dá)到最好治療效果。試驗(yàn)例3：艾迪制劑對(duì)惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的治療3.1病例選擇：通過臨床上惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的典型癥狀診斷，再結(jié)合hcg(人絨毛膜促性腺激素)檢測、b超及ct等多項(xiàng)檢查確診，篩選出明確診斷為惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的患者13例，根據(jù)uicctnm分期，處于ⅲ期5例，ⅳ期8例。所有患者kps評(píng)分大于60。將13例患者隨機(jī)分為兩組，治療組7例，全為女性，年齡25-50歲，平均38.4歲，處于ⅲ期2例，ⅳ期5例；對(duì)照組6例，全為女性，年齡23-51歲，平均39.7歲，處于ⅲ期2例，ⅳ期4例。兩組在年齡、性別、病程、病情方面均具有可比性。治療前患者肝腎功能、血常規(guī)正常，預(yù)計(jì)生存大于3個(gè)月。3.2治療方法：對(duì)照組給予注射選5–氟尿嘧啶26mg/kg·d與更生霉素6mg/kg·d聯(lián)合應(yīng)用。各加入5％g.s500ml中靜滴，5天為一療程。治療組靜脈滴加艾迪注射液100ml(以0.9％氯化鈉或5～10％葡萄糖注射液400～450ml稀釋后使用)/日，療程15天，為一周期，2周期為一療程。3.3判定方法：療效按recist評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)定：完全緩解(cr)，部分緩解(pr)，穩(wěn)定(sd)，進(jìn)展(pd)和無變化(nc)。以cr+pr計(jì)算有效率(rr)，以cr+pr+sd計(jì)算疾病控制率(dcr)。生活質(zhì)量評(píng)定以kps評(píng)分為標(biāo)準(zhǔn)，治療后評(píng)分上升10分以上為提高，10分以內(nèi)為穩(wěn)定，減少10分以上為降低。3.4結(jié)果3.4.1近期療效：治療組7例中有效率(cr+pr)為85.7％，疾病控制率(cr+pr+sd)為100％；對(duì)照組有效率(cr+pr)為66.7％，疾病控制率(cr+pr+sd)為83.3％；治療組近期療效優(yōu)于對(duì)照組。兩組近期療效比較見表1。表1兩組患者近期療效比較3.4.2近期生活質(zhì)量：治療組中有6例(85.7％)患者生活質(zhì)量得到改善，對(duì)照組中生活質(zhì)量改善為4例(66.7％)，治療組患者生活質(zhì)量優(yōu)于對(duì)照組。兩組患者近期生活質(zhì)量比較見表二。表2兩組患者近期生活質(zhì)量比較組別例數(shù)改善(％)穩(wěn)定(％)下降(％)治療組76(85.7％)1(14.3％)0(0％)對(duì)照組64(66.7％)1(16.7％)1(16.7％)3.4.3討論：從上述結(jié)果可知，治療組的療效和患者的生活質(zhì)量均優(yōu)于對(duì)照組，艾迪制劑作為治療惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤藥物優(yōu)于5-氟尿嘧啶與更生霉素聯(lián)合用藥。艾迪制劑對(duì)惡性滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤具有良好的療效和潛在的治療價(jià)值。具體實(shí)施方式實(shí)施例1：艾迪注射液的制備(低組分)原料：斑蝥4g、人參200g、黃芪450g、刺五加900g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時(shí)間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用，提取液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調(diào)至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，備用；取人參切片，用480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時(shí)間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，用7％氫氧化鈉溶液調(diào)ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調(diào)ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調(diào)節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。實(shí)施例2：艾迪注射液的制備原料：斑蝥5g、人參250g、黃芪500g、刺五加1000g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時(shí)間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用，提取液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調(diào)至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，備用；取人參切片，用480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時(shí)間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，用7％氫氧化鈉溶液調(diào)ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調(diào)ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調(diào)節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。實(shí)施例3：艾迪注射液的制備原料：斑蝥10g、人參300g、黃芪750g、刺五加1250g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時(shí)間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用，提取液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調(diào)至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，備用；取人參切片，用480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時(shí)間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，用7％氫氧化鈉溶液調(diào)ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調(diào)ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調(diào)節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。實(shí)施例4：艾迪注射液的制備原料：斑蝥15g、人參500g、黃芪1000g、刺五加1500g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時(shí)間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用，提取液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調(diào)至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，備用；取人參切片，用480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時(shí)間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，用7％氫氧化鈉溶液調(diào)ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調(diào)ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調(diào)節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。實(shí)施例5：艾迪注射液的制備原料：斑蝥20g、人參700g、黃芪1250g、刺五加1750g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時(shí)間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用，提取液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調(diào)至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，備用；取人參切片，用480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時(shí)間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，用7％氫氧化鈉溶液調(diào)ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調(diào)ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調(diào)節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。實(shí)施例6：艾迪注射液的制備原料：斑蝥50g、人參1000g、黃芪2000g、刺五加2000g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時(shí)間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用，提取液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調(diào)至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，備用；取人參切片，用480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時(shí)間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，用7％氫氧化鈉溶液調(diào)ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調(diào)ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調(diào)節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。實(shí)施例7：艾迪注射液的制備(高組分)原料：斑蝥60g、人參1100g、黃芪2100g、刺五加2100g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時(shí)間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用，提取液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調(diào)至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調(diào)至ph8-9，備用；取人參切片，用480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時(shí)間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，用7％氫氧化鈉溶液調(diào)ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達(dá)到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調(diào)ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調(diào)節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。當(dāng)前第1頁12