間皮瘤的治療方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及使用結(jié)合神經(jīng)節(jié)苷脂GM2抗原的抗體的治療方法和診斷方法。本發(fā)明 還涉及包含結(jié)合神經(jīng)節(jié)苷脂GM2抗原的抗體作為活性成分的治療劑和診斷劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 神經(jīng)節(jié)苷脂是一種類型的糖脂，其由含有唾液酸的細(xì)胞外糖鏈組成部分和包埋在 脂雙層中的神經(jīng)酰胺構(gòu)成，并以隨著細(xì)胞類型、器官和動(dòng)物物種而變的各種模式表達(dá)（非 專利文獻(xiàn)1)。已揭示，神經(jīng)節(jié)苷脂具有廣泛的生物功能，包括細(xì)胞間識(shí)別，通過與細(xì)胞外基 質(zhì)的相互作用控制細(xì)胞增殖，以及細(xì)胞分化（非專利文獻(xiàn)2和3)。
[0003] 根據(jù)唾液酸結(jié)合的模式和數(shù)目以及結(jié)合于非還原末端的N-乙酰半乳糖 胺（GalNAc)和半乳糖（Gal)的存在或不存在來對(duì)神經(jīng)節(jié)苷脂進(jìn)行分類。GM2是具有 GalNAcf3l_4(SAa2_3)Gall_4Glcf3 1-1神經(jīng)酰胺糖鏈結(jié)構(gòu)的神經(jīng)節(jié)苷脂的一個(gè)成員。
[0004] 已報(bào)道，隨著癌細(xì)胞的發(fā)展，神經(jīng)節(jié)苷脂表達(dá)經(jīng)歷量變和質(zhì)變（非專利文獻(xiàn)4)。還 已知道，在正常細(xì)胞中幾乎不存在任何GM2表達(dá)，而在腫瘤例如肺癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng) 膠質(zhì)瘤中觀察到高的GM2表達(dá)（非專利文獻(xiàn)4和5)。這使GM2成為抗體癌癥治療中有吸引 力的靶抗原。
[0005] 間皮瘤，也被稱為包覆間皮腫瘤或間皮腫瘤，是從中胚層起源的間皮（例如胸膜、 腹膜和心包膜）發(fā)展出來的腫瘤類型，并且被分類為局部良性腫瘤和彌散性惡性腫瘤。在 胸膜中發(fā)生的一種形式的惡性間皮瘤是惡性胸膜間皮瘤（在后文中，在某些情況下縮寫為 MPM) 〇
[0006]MPM是從胸腔的間皮細(xì)胞發(fā)展出來的一種癌癥形式，并以高生長(zhǎng)速率為特征，通常 伴有胸膜積液（非專利文獻(xiàn)6)。呼吸困難、呼吸短促和胸痛是MPM的一些癥狀，并且患者的 生活質(zhì)量（Q0L)降低。石棉、鐵和猿猴病毒40(SV40)是MPM的致病物質(zhì)的已知實(shí)例（非專 利文獻(xiàn)7和8)。
[0007] 具體來說，暴露于石棉已被認(rèn)為與MPM的發(fā)病高度相關(guān)，并且具有石棉暴露史的 人處于MPM發(fā)病的顯著提高的風(fēng)險(xiǎn)中。日本在1970至1980年間進(jìn)口和使用了大量石棉 (非專利文獻(xiàn)9)。由于MPM的潛伏期據(jù)信為石棉暴露后30至40年，因此預(yù)計(jì)從2010至 2020年，日本的MPM發(fā)病率極大增加。
[0008] 盡管MPM的唯一治療是在發(fā)病的早期階段移除腫瘤，但在臨床上該疾病被發(fā)現(xiàn)時(shí) 通常處于高級(jí)階段。此外，MPM對(duì)常用的化療和放療沒有反應(yīng)，并具有非常不良的預(yù)后，從 發(fā)病起的平均存活時(shí)間約為1年。因此，對(duì)可以改善該疾病預(yù)后的治療方法存在著需求。
[0009] 引用文獻(xiàn)名單
[0010] 非專利文獻(xiàn)
[0011][非專利文獻(xiàn) 1]J. Neurochem.，10, 613 (1963)
[0012] [非專利文獻(xiàn)2]Curr.Opin.Immunol.，3, 646(1991)
[0013] [非專利文獻(xiàn)3]Biochem.Biophys.Res.Commun.,192, 214 (1993)
[0014][非專利文獻(xiàn) 4]CancerRes.，45, 2405(1985)
[0015][非專利文獻(xiàn)f5]CancerRes.，5〇, 7444 (1"0)
[0016][非專利文獻(xiàn) 6]CancerSci.，97, 183(2006)
[0017][非專利文獻(xiàn) 7]CellMol.Biol.，17, 657(1997)
[0018][非專利文獻(xiàn) 8]Am.J.Respir.Crit.CareMed.，153, 711 (1996)
[0019] [非專利文獻(xiàn) 9]IndustrialHealth, 39, 65 (2001)
[0020] 發(fā)明概述
[0021] 發(fā)明解決的技術(shù)問題
[0022] 通過在早期階段移除腫瘤來治療間皮瘤。然而，在臨床上該疾病被發(fā)現(xiàn)時(shí)通常處 于高級(jí)階段，并且對(duì)常見的化療和放療反應(yīng)不佳。因此，對(duì)用于改善該疾病預(yù)后的治療方 法、治療劑和診斷方法，存在著需求。
[0023] 因此，本發(fā)明的目的是提供有效用于間皮瘤的診斷和治療，并且可以改善間皮瘤 患者的預(yù)后的治療方法、治療劑和診斷方法。
[0024] 解決技術(shù)問題的手段
[0025] 本發(fā)明涉及下列（1)至（13)。
[0026](1)-種用于間皮瘤的治療劑或診斷劑，其包含結(jié)合神經(jīng)節(jié)苷脂GM2的抗體或其 片段作為活性成分。
[0027] (2)⑴中所描述的治療劑或診斷劑，其中所述間皮瘤是選自胸膜間皮瘤、腹膜間 皮瘤和心包間皮瘤中的一種。
[0028] (3) (2)中所描述的治療劑或診斷劑，其中所述胸膜間皮瘤或所述腹膜間皮瘤是惡 性胸膜間皮瘤或惡性腹膜間皮瘤。
[0029] (4)⑴至（3)任一項(xiàng)中所描述的治療劑或診斷劑，其中所述抗體是與GM2的 a2-3連接的唾液酸（SA)結(jié)合的抗體。
[0030] (5)⑴至⑷任一項(xiàng)中所描述的治療劑或診斷劑，其中所述抗體是單克隆抗體。
[0031] (6) (1)至（5)任一項(xiàng)中所描述的治療劑或診斷劑，其中所述抗體是重組抗體。
[0032](7) (6)中所描述的治療劑或診斷劑，其中所述重組抗體是選自嵌合抗體、人源化 抗體和人類抗體中的一種。
[0033] (8) (1)至（7)任一項(xiàng)中所描述的治療劑或診斷劑，其中所述抗體是包含分別具有 SEQIDN0 :1至3的氨基酸序列的重鏈（后文中的"H鏈"）互補(bǔ)決定區(qū)（⑶R;在后文中縮 寫成"⑶R"）1至3和分別具有SEQIDN0 :4至6的氨基酸序列的輕鏈（后文中的"L鏈"） ⑶R1至3的抗體。
[0034](9)⑴至⑶任一項(xiàng)中所描述的治療劑或診斷劑，其中所述抗體是選自下列中的 一種：
[0035] 包含具有SEQIDN0 :7的氨基酸序列的H-鏈可變區(qū)（在后文中被稱為"VH"）和 具有SEQIDN0 :8的氨基酸序列的L-鏈可變區(qū)（在后文中稱為"VL"）的抗體；
[0036] 包含具有SEQIDN0:7的氨基酸序列的VH和具有SEQIDN0:9的氨基酸序列的 VL的抗體；
[0037] 包含具有SEQIDN0:10的氨基酸序列的VH和具有SEQIDN0 :8的氨基酸序列的 VL的抗體；和
[0038] 包含具有SEQIDNO:10的氨基酸序列的VH和具有SEQIDNO:11的氨基酸序列 的VL的抗體。
[0039] (10)⑴至（9)任一項(xiàng)中所描述的治療劑或診斷劑，其包含使用至少一種合用藥。
[0040] (11) (10)中所描述的治療劑或診斷劑，其中所述合用藥是選自化療藥劑和蛋白質(zhì) 藥物中的至少一種。
[0041] (12) -種治療方法或診斷方法，其使用結(jié)合神經(jīng)節(jié)苷脂GM2的抗體或其片段作為 活性成分。
[0042] (13)結(jié)合神經(jīng)節(jié)苷脂GM2的抗體或其片段在制造間皮瘤治療劑中的應(yīng)用。
[0043] 發(fā)明的效果
[0044] 根據(jù)本發(fā)明，通過用包含抗神經(jīng)節(jié)苷脂GM2抗體作為活性成分的診斷劑和治療劑 診斷和治療間皮瘤，可以改善GM2陽性間皮瘤患者的預(yù)后。
[0045] 附圖簡(jiǎn)述
[0046][圖1]圖1是示出了GM2在惡性間皮瘤細(xì)胞系中的表達(dá)的流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果的 柱狀圖。橫軸表示GM2表達(dá)水平，縱軸表示細(xì)胞計(jì)數(shù)。實(shí)線柱狀圖和灰色柱狀圖分別表示 與抗GM2抗體和陰性對(duì)照抗體的反應(yīng)。
[0047][圖2]圖2(a)和（b)示出了抗GM2抗體針對(duì)惡性間皮瘤細(xì)胞系MST0-211H的 ADCC活性的評(píng)估結(jié)果?？v軸表示細(xì)胞毒性（％)，橫軸表示抗體濃度（iig/mL)。實(shí)心圓圈 表示使用抗GM2抗體的活性，空心圓圈表示使用陰性對(duì)照抗體（抗DNP抗體）的活性。呈 現(xiàn)了PBMC供體A[圖2(a)]和供體B[圖2(b)]的結(jié)果。
[0048][圖3]圖3示出了在使用惡性間皮瘤細(xì)胞系MST0-211H的SCID小鼠原位移植模 型中抗GM2抗體的抗腫瘤效果的評(píng)估結(jié)果?？v軸軸表示胸部腫瘤質(zhì)量（mg)，橫軸表示給藥 樣品的類型。實(shí)心圓圈表示單個(gè)胸部腫瘤質(zhì)量（mg)，水平條表示平均值。通過進(jìn)行Dunnett 多重比較檢驗(yàn)來確定統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的差異。
[0049][圖4]圖4示出了人類惡性間皮瘤組織供體信息，從左側(cè)開始包括樣品ID、年齡、 性別、組織起源（或檢測(cè)到的組織）、通過病理學(xué)分類的疾病類型、TNM(腫瘤-淋巴結(jié)-轉(zhuǎn) 移）分類、最低階段分組、正常組織％、病變部位％、腫瘤組織％、腫瘤/細(xì)胞過多的基質(zhì)％、 腫瘤/細(xì)胞過少或無細(xì)胞的基質(zhì)％和壞死％。
【具體實(shí)施方式】
[0050] 本發(fā)明涉及包含抗神經(jīng)節(jié)苷脂GM2抗體作為活性成分的治療劑和診斷劑，包括向 間皮瘤患者給藥抗神經(jīng)節(jié)苷脂GM2抗體的治療方法，以及使用抗神經(jīng)節(jié)苷脂GM2抗體診斷 間皮瘤患者的方法。
[0051] 在本發(fā)明中，"間皮瘤"也被稱為包覆間皮腫瘤或間皮腫瘤，并且是指從中胚層起 源的間皮（例如胸膜、腹膜和心包膜）發(fā)展出來的所有腫瘤。間皮瘤根據(jù)組織學(xué)類型被分 類為局部良性腫瘤和彌散性惡性腫瘤，并且這些腫瘤被涵蓋在本發(fā)明的間皮瘤的定義中。
[0052] 胸膜起源的間皮瘤腫瘤被稱為胸膜間皮瘤，惡性腫瘤被稱為MPM。腹膜起源的間皮 瘤腫瘤被稱為腹膜間皮瘤。
[0053] 在本發(fā)明中，"神經(jīng)節(jié)苷脂GM2"是指具有GalNAcPl_4(SAa2-3) GalPl-4GlcP1-1神經(jīng)酰胺結(jié)構(gòu)的葡萄糖神經(jīng)酰胺，并且也將被簡(jiǎn)稱為"GM2"。GalNAc、 Gal、Glc和SA分別表示N-乙酰葡萄糖胺、半乳糖、葡萄糖和唾液酸。
[0054] 本發(fā)明中使用的抗GM2抗體的實(shí)例可以包括結(jié)合包含GalNAcPl_4(SAa2-3) GalM-4GlcM_l神經(jīng)酰胺結(jié)構(gòu)的a2-3連接的唾液酸（SA)的表位的抗GM2抗體，結(jié)合所 述表位并顯示出效應(yīng)活性的抗GM2抗體，以及在間皮瘤患者中抑制胸膜積液產(chǎn)生的抗體。
[0055] 其他實(shí)例包括與任何上述抗體競(jìng)爭(zhēng)與GM2的結(jié)合的抗體，與上述抗體所結(jié)合的表 位相同的表位結(jié)合的抗體，以及這些抗體的片段。
[0056] 具體來說，在本發(fā)明中使用的抗體可以是下列任一抗體：
[0057] 在JP-A-4-311385中描述的小鼠單克隆抗體KM750和小鼠單克隆抗體KM796;
[0058]在CancerRes.，46, 4116 (1986)中描述的單克隆抗體MoAb5_3;
[0059] 在CancerRes. ,48,6154(1988)中描述的單克隆抗體MK1-16和單克隆抗體 MK2-34 ；
[0060]在J.Biol.Chem.，264, 12122 (1989)中描述的單克隆抗體DMAb-1;
[0061] 在W02003/049704和W004/53102中描述的嵌合抗體DMF10. 167. 4抗體和嵌合抗 體ChGM2 ;
[0062]在JP-A-10-257893 中描述的由轉(zhuǎn)化株KM8966(FERMBP-5105)產(chǎn)生的KM8966,