本發(fā)明涉及一種阿戈美拉汀制劑技術(shù)。

背景技術(shù)：

抑郁癥是由人格因素、社會(huì)心理及慢性疾病等諸多亞健康因素引發(fā)的心理疾病，其主要表現(xiàn)為持久的心境低落、情緒消沉、抑郁，甚至產(chǎn)生自殺企圖或行為，同時(shí)經(jīng)常伴隨有行為、睡眠、中心溫度和皮質(zhì)醇及其他激素的生物周期節(jié)律紊亂，從而嚴(yán)重的影響了人的正常工作和生活，為社會(huì)帶來(lái)不良影響。

據(jù)世界衛(wèi)生部門(mén)最新發(fā)布的統(tǒng)計(jì)報(bào)告顯示，全球的抑郁癥患者已超過(guò)3.5億，同時(shí)由于治愈率和發(fā)病率的差距，導(dǎo)致抑郁癥患病人數(shù)逐年遞增。抑郁癥現(xiàn)已成為人類(lèi)繼癌癥、卒中、和慢性阻塞性肺病的第四大慢性疾病。

阿戈美拉汀(Agomelatine)作為治療成人重度抑郁癥(major depressive disorder MDD)的藥物，是首個(gè)褪黑素受體激動(dòng)劑，也是5-羥色胺2C(5-HT_2C)受體拮抗劑。臨床研究表明該藥具有抗抑郁、抗焦慮、調(diào)整睡眠節(jié)律及調(diào)節(jié)生物鐘的作用。此外，與選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRI)及5-羥色胺-去甲腎上腺素再攝取抑制劑(SNRI)相比，阿戈美拉汀的不良反應(yīng)顯著減少，患者依從性更好。因此，阿戈美拉汀被譽(yù)為精神疾病類(lèi)又一個(gè)“重磅炸彈”級(jí)的藥物。該藥是由法國(guó)Servier公司首先開(kāi)發(fā)，劑型為普通片劑，于2009年在歐盟獲得批準(zhǔn)，英文商品名維度新(Valdoxan)。

中文名：阿戈美拉汀，分子式：C₁₅H₁₇NO₂，分子量：243.3，結(jié)構(gòu)式：

歐洲藥品管理局(EMA)人用醫(yī)藥產(chǎn)品委員會(huì)公布的維度新的評(píng)估報(bào)告(CHMP assessment report for Valdoxan)指出，阿戈美拉汀的首過(guò)效應(yīng)較為明顯，維度新在人體內(nèi)的生物利用度僅為3％-4％，并且個(gè)體間的藥物代謝與藥效差異較大。近年來(lái)，研究者們嘗試研究阿戈美拉汀的新劑型，以解決以上問(wèn)題：專利申請(qǐng)US2007/0134331A1提出了阿戈美拉汀口腔分散技術(shù)；專利CN103040750B提出了阿戈美拉汀脂質(zhì)體技術(shù)專利，以上專利雖然提供了與原研廠家不同的阿戈美拉汀劑型，但在制劑穩(wěn)定性、放大生產(chǎn)可 行性、患者依從性上嚴(yán)重影響了其藥物制劑開(kāi)發(fā)的可行性。

為了提高阿戈美拉汀的溶出度，專利申請(qǐng)CN102218050A提出了原料為微粉化的阿戈美拉汀的藥物組合物。但是在大規(guī)模生產(chǎn)中，其工藝生產(chǎn)效率低，成本昂貴，且對(duì)微粉化的阿戈美拉汀需要進(jìn)行嚴(yán)格質(zhì)量控制。

專利申請(qǐng)CN104523589A提出阿戈美拉汀口服混懸液藥物組合物，但與本發(fā)明相比，在提高藥物生物利用度，增加水中溶解度，及長(zhǎng)期穩(wěn)定性上不具備優(yōu)勢(shì)。

另外，也有研究者嘗試應(yīng)用環(huán)糊精及其衍生物作為藥物載體來(lái)提高阿戈美拉汀水溶性。專利申請(qǐng)WO 2014/012571A1和專利申請(qǐng)CN103623423A都以環(huán)糊精作為阿戈美拉汀的制劑載體，制備無(wú)晶型的阿戈美拉汀-環(huán)糊精固體粉末。本發(fā)明者重復(fù)專利申請(qǐng)WO 2014/012571A1實(shí)施例一和例三，發(fā)現(xiàn)該阿戈美拉汀-環(huán)糊精粉末分別屬于《中國(guó)藥典》規(guī)定的在水中“略溶”和“難溶”水平。而通過(guò)重復(fù)專利申請(qǐng)CN103623423A的實(shí)施例一、二、三、十二，其阿戈美拉汀包合物粉末在水中并未達(dá)到所述的“溶解”和“極易溶解”的水平。使用上述兩個(gè)專利的阿戈美拉汀-環(huán)糊精包合技術(shù)，并不能獲得與本發(fā)明等同的高水溶性及長(zhǎng)期穩(wěn)定的阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液。

以上專利和專利申請(qǐng)?jiān)诮鉀Q阿戈美拉汀制劑的溶出度、生物利用度、患者依從性，工業(yè)生產(chǎn)可行性等問(wèn)題的嘗試均存在一定不足。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種阿戈美拉汀水溶液的制備方法和應(yīng)用，以克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷。

所述的阿戈美拉汀水溶液，含有阿戈美拉汀與環(huán)糊精，阿戈美拉汀與環(huán)糊精的質(zhì)量比(w/w)為1:1-1:50，優(yōu)選為1:16-1:40；

以阿戈美拉汀水溶液的總質(zhì)量計(jì)，阿戈美拉汀在所述的環(huán)糊精水溶液中的濃度為1-100mg/ml，根據(jù)阿戈美拉汀溶解情況和環(huán)糊精的臨床用量，優(yōu)選為1-30mg/ml。

所述的阿戈美拉汀包括阿戈美拉汀及其藥學(xué)上可接受的鹽型。

所述的阿戈美拉汀的晶型包括但不限于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、A、B、C、D、X、Y，或兩種及以上的混合晶型以及其共結(jié)晶；

所述環(huán)糊精包括α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD)、磺丁基-β-環(huán)糊精(SBE-β-CD)、甲基-β-環(huán)糊精(RM-β-CD)及其它環(huán)糊精衍生物，優(yōu)選為羥丙基-β-環(huán)糊精；

所述羥丙基-β-環(huán)糊精的平均取代度(DS)可以是2.0-12.0或其多種取代度的混合物，其中平均取代度優(yōu)選為3.0-6.0。

阿戈美拉汀(AG)在水中溶解度低，經(jīng)測(cè)試為0.1-0.2mg/ml，同時(shí)該溶液不穩(wěn)定，長(zhǎng)期放置后有關(guān)物質(zhì)(如：水解產(chǎn)物)明顯增加，極不利于制成澄清透明穩(wěn)定的液體制劑。為得到溶解度高、穩(wěn)定性好且加水稀釋無(wú)AG晶體析出的阿戈美拉汀水溶液，發(fā)明者通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)用環(huán)糊精的水溶液溶解阿戈美拉汀可以得到澄清透明溶液，且該溶液物理化學(xué)穩(wěn)定性良好。表1列出了阿戈美拉汀在不同溶劑中的最大溶解度，及加水稀釋100倍后的穩(wěn)定性。由表1可見(jiàn)，雖然在有機(jī)溶劑(乙醇、丙二醇、聚乙二醇-400)中AG的溶解度(分別為：500mg/ml、140mg/ml、300mg/ml)大于其在HP-β-CD水溶液的溶解度(50mg/ml)，但是有機(jī)溶劑溶解阿戈美拉汀后加水稀釋100倍，析出AG晶體,同時(shí)，即使有機(jī)溶劑(乙醇、丙二醇、聚乙二醇-400)也溶解50mg/ml，加水稀釋100倍后也有AG晶體析出。而阿戈美拉汀雖然在酸性、堿性、表面活性劑溶液中穩(wěn)定，但AG的溶解度(分別為0.2mg/ml、0.2mg/ml、0.7mg/ml)遠(yuǎn)低于其在HP-β-CD水溶液的溶解度。可見(jiàn)，環(huán)糊精水溶液在增加阿戈美拉汀溶解性、穩(wěn)定性及安全性比現(xiàn)有的溶劑增溶方法有顯著優(yōu)勢(shì)。這為開(kāi)發(fā)一種阿戈美拉汀液體制劑和拓展阿戈美拉汀的給藥途徑提供了可行性。

表1不同溶劑中阿戈美拉汀最大溶解度(AG_max)和加水稀釋后溶液外觀變化

其方法為：

本發(fā)明的阿戈美拉汀水溶液的制備方法，包括如下步驟：

方法1：

(1)將環(huán)糊精粉末加入水中，加熱使其溶解，獲得環(huán)糊精水溶液；

(2)將阿戈美拉汀粉末加入步驟(1)的環(huán)糊精水溶液中，使用包括但不限于磁力攪拌、超聲或研磨等任意一種方式加熱溶解，即得澄清穩(wěn)定的阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液；

方法2：

將環(huán)糊精粉末和阿戈美拉汀粉末加入水中，使用包括但不限于磁力攪拌、超聲或研磨等任意一種混合方式加熱溶解，即得澄清穩(wěn)定的阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液；

方法3：

(1)將環(huán)糊精粉末加入水中，加熱使其溶解，獲得環(huán)糊精水溶液；

(2)將阿戈美拉汀中加入有機(jī)溶劑，加熱使其溶解，獲得阿戈美拉汀有機(jī)溶液，所述阿戈美拉汀溶液中，阿戈美拉汀的濃度為50-250mg/ml，優(yōu)選為100-200mg/ml；

所述的有機(jī)溶劑選自甲醇、乙醇、丙酮、丙二醇、正丁醇、乙酸乙酯或乙腈中的一種以上，優(yōu)選為乙醇；

(3)將步驟(2)的溶液加入步驟(1)的溶液中，使用包括但不限于磁力攪拌、超聲或研磨任意一種方式加熱溶解；

(4)將步驟(3)所得的溶液用水稀釋5-50倍，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后，凍干；

(5)用水復(fù)溶至配制體積，即得澄清穩(wěn)定的阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液；

上述方法中：

加熱溫度為30℃-80℃，優(yōu)選50℃-70℃；

攪拌速度為100rpm-1200rpm，優(yōu)選600rpm-1000rpm；

攪拌時(shí)間為0.1h-48h，優(yōu)選為0.5h-5h；

表2列出了在0.2g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中，阿戈美拉汀晶型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ通過(guò)加熱溶解一定時(shí)間后的溶解度。同時(shí)，將上述溶液加水稀釋100倍后溶液仍澄清透明、無(wú)AG晶體析出?？梢?jiàn)該增加阿戈美拉汀水溶性的方法，適用于不同晶型的阿戈美拉汀。

表2不同晶型阿戈美拉汀在羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中的溶解情況及稀釋后的穩(wěn)定性

本研究在相同濃度環(huán)糊精水溶液中，投入等量且過(guò)量的Ⅱ型阿戈美拉汀，考察不同種類(lèi)的環(huán)糊精水溶液溶解Ⅱ型阿戈美拉汀的最大量。其優(yōu)選結(jié)果見(jiàn)表3，同時(shí)考慮到阿戈美拉汀在環(huán)糊精水溶液中的增溶量、溶液的穩(wěn)定性、安全性以及對(duì)于粘膜組織的刺激程度，優(yōu)選為羥丙基-β-環(huán)糊精，其平均取代度優(yōu)選為3.0-6.0。

表3方法1、方法3不同種類(lèi)環(huán)糊精的篩選結(jié)果

研究發(fā)現(xiàn)，在一定溫度和溶解時(shí)間下，阿戈美拉汀的溶解量與環(huán)糊精水溶液的濃度呈正相關(guān)，同時(shí)，加水稀釋100倍后溶液仍澄清透明、無(wú)晶體析出，見(jiàn)表4；

表4不同濃度羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液中阿戈美拉汀的溶解量

本發(fā)明使用了一定量的環(huán)糊精，使阿戈美拉汀在水溶液中的溶解度最大可提高250倍。而且阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液穩(wěn)定性良好，加速實(shí)驗(yàn)(40℃，75％RH)8個(gè)月有關(guān)物質(zhì)、含量檢測(cè)合格，能保持在長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)無(wú)AG晶體析出，溶液澄清透明，這為制備阿戈美拉汀液體制劑開(kāi)創(chuàng)了可行性。該技術(shù)可用于制備阿戈美拉汀其它給藥途徑的制劑，其中包括但不限于靜脈注射制劑、肌內(nèi)注射劑、皮下注射劑、口服液體制劑、鼻腔滴劑、口腔噴劑、舌下噴劑或粉針劑；

本發(fā)明還涉及一種組合物，包括治療有效量的所述的阿戈美拉汀水溶液和醫(yī)藥學(xué)上可接受的載體，所述的載體如香料、甜味劑、液體或固體填料或稀釋劑等常用載體物質(zhì)，并采用本領(lǐng)域公知的方法，制成常見(jiàn)的藥用制劑，如靜脈注射制劑、肌內(nèi)注射劑、皮下注射劑、口服液體制劑、鼻腔滴劑、口腔噴劑、舌下噴劑或粉針劑，制劑通常含有濃度為1-30mg/ml的的阿戈美拉汀水溶液，較佳重量含量為0.1-2.5％；

本發(fā)明的有益效果是：

本發(fā)明將阿戈美拉汀與環(huán)糊精衍生物按一定比例和特定的制備工藝處理后，制得的 阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液，通過(guò)40℃8個(gè)月的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)證明，阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液技術(shù)顯著提高了阿戈美拉汀在水中的溶解度及穩(wěn)定性。同時(shí)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明,該阿戈美拉汀水溶液適合于制備靜脈注射制劑、肌內(nèi)注射劑、皮下注射劑、口服液體制劑、鼻腔滴劑、口腔噴劑、舌下噴劑或粉針劑。其中，在相同給藥劑量(32mg/kg)和相同給藥方式下(口服灌胃)，阿戈美拉汀水溶液的絕對(duì)生物利用度是市售阿戈美拉汀固體制劑(維度新)的5倍。

從而更具有極大地開(kāi)發(fā)價(jià)值和市場(chǎng)前景。

本發(fā)明采用的評(píng)價(jià)方法及結(jié)果如下：

1.差示掃描量熱法(DSC法)測(cè)定

為適用DSC法鑒定，將方法1和方法3獲得的阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液凍干，將得到的凍干粉用DSC法測(cè)定。結(jié)果：阿戈美拉汀與環(huán)糊精的物理混合物中顯示阿戈美拉汀的特征熔融峰。阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液凍干粉的DSC圖譜中，阿戈美拉汀和環(huán)糊精通過(guò)一定的相互作用，形成了熱穩(wěn)定性增強(qiáng)的組合物，因此不顯示有阿戈美拉汀的特征熔融峰。

2.高效液相色譜法(HPLC法)測(cè)定：

配制阿戈美拉汀對(duì)照品溶液：稱取20mg阿戈美拉汀(晶型Ⅱ)粉末于20mL容量瓶中，用甲醇定容至20ml，振搖溶解，移取1ml該溶液到100ml容量瓶中，用水定容至100ml，振搖混勻，即得0.01mg/ml的阿戈美拉汀對(duì)照品溶液。

色譜條件:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，柱溫30℃，流速1.0ml/min，波長(zhǎng)230nm，流動(dòng)相為10mmol/L磷酸二氫鈉(pH3.0)-乙腈(55-45)，阿戈美拉汀主峰的理論塔板數(shù)不低于2000。

附圖說(shuō)明

圖1為羥丙基-β-環(huán)糊精的DSC圖譜。

圖2為阿戈美拉汀(晶型Ⅱ)的DSC圖譜。

圖3為阿戈美拉汀與環(huán)糊精的物理混合物的DSC圖譜。

圖4為實(shí)施例1制備的阿戈美拉汀與羥丙基-β-環(huán)糊精組合物的DSC圖譜。

圖5為實(shí)施例15制備的阿戈美拉汀與羥丙基-β-環(huán)糊精組合物的DSC圖譜。

圖6為阿戈美拉汀水溶液(實(shí)施例3)不同給藥方式的絕對(duì)生物利用度。

圖7實(shí)施例16樣品40℃8月后與現(xiàn)配同濃度樣品兩個(gè)劑量(16mg/kg、32mg/kg) 兩種給藥方式(腹腔注射i.p、口服灌胃p.o)的最大血藥濃度(C_max)對(duì)比。

以下實(shí)施例旨在對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步解釋說(shuō)明，有關(guān)技術(shù)條件等并不限于本發(fā)明的變化范圍。

實(shí)施例中，羥丙基-β-環(huán)糊精的DSC圖譜見(jiàn)圖1。

阿戈美拉汀(晶型Ⅱ)的DSC圖譜見(jiàn)圖2。

實(shí)施例1

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(1)：

將200g羥丙基-β-環(huán)糊精加適量水，加熱攪拌溶解，然后加水最后定容至500ml，配得濃度為0.4g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液；

羥丙基-β-環(huán)糊精平均取代度(DS)為3.0；

取0.4g/ml羥丙基-β-環(huán)糊精溶液100ml，加入阿戈美拉汀(晶型Ⅱ)2.5g，加熱至50℃，600rpm攪拌5小時(shí)，得澄清溶液，加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè),有關(guān)物質(zhì)含量均合格。

實(shí)施例2

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(2)：

將200g羥丙基-β-環(huán)糊精加適量水，加熱攪拌溶解，然后加水最后定容至500ml，配得濃度為0.4g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液；

羥丙基-β-環(huán)糊精平均取代度(DS)為6.0；

取0.4g/ml羥丙基-β-環(huán)糊精溶液100ml，加入阿戈美拉汀(晶型Ⅱ)1.0g，加熱至55℃，700rpm攪拌3小時(shí)，得澄清溶液，加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè),有關(guān)物質(zhì)含量均合格。

實(shí)施例3

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(3)：

將250g羥丙基-β-環(huán)糊精加適量水，加熱攪拌溶解，然后加水最后定容至500ml，配得濃度為0.5g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液；

羥丙基-β-環(huán)糊精平均取代度(DS)為3.9；

取0.5g/ml羥丙基-β-環(huán)糊精溶液100ml，加入3.0g阿戈美拉汀(晶型Ⅰ、Ⅱ混晶)，加熱至60℃，650rpm攪拌3.5小時(shí)，得澄清溶液，加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)含量合格。

實(shí)施例4

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(4)

稱取25g羥丙基-β-環(huán)糊精和1.25g阿戈美拉汀(晶型Ⅱ)共同加入適量水中，使最終體積為100ml，70℃下超聲1小時(shí)，得澄清溶液。加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出。含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)含量合格。

羥丙基-β-環(huán)糊精平均取代度(DS)為5.7。

實(shí)施例5

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(5)：

將75g甲基-β-環(huán)糊精加適量水，加熱攪拌溶解，然后加水最后定容至500ml，配得濃度為0.15g/ml的甲基-β-環(huán)糊精溶液；

取0.15g/ml甲基-β-環(huán)糊精溶液100ml，加入0.5g阿戈美拉汀(晶型Ⅰ)，加熱至60℃，900rpm攪拌2小時(shí)，得澄清溶液，加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)含量合格。

實(shí)施例6

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(6)：

將50g磺丁基-β-環(huán)糊精加適量水，加熱攪拌溶解，然后加水最后定容至500ml，配得濃度為0.1g/ml的磺丁基-β-環(huán)糊精溶液；

取0.1g/ml磺丁基-β-環(huán)糊精溶液100ml，加入0.25g阿戈美拉汀(晶型Ⅱ)，加熱至55℃，1000rpm攪拌2小時(shí)，得澄清溶液，加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)含量合格。

實(shí)施例7

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(7)：

將25gβ-環(huán)糊精加適量水，加熱攪拌溶解，然后加水最后定容至500ml，配得濃度為0.05g/ml的β-環(huán)糊精溶液；

取0.05g/mlβ-環(huán)糊精溶液100ml，加入0.1g阿戈美拉汀(晶型Ⅱ)，加熱至60℃，750rpm攪拌4小時(shí)，得澄清溶液，加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。

實(shí)施例8

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(8)：

將75g羥丙基-β-環(huán)糊精加適量水，加熱攪拌溶解，然后加水最后定容至500ml，配得濃度為0.15g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液；

羥丙基-β-環(huán)糊精平均取代度(DS)為4.5。

取0.15g/ml羥丙基-β-環(huán)糊精溶液100ml，加入0.5g阿戈美拉汀(晶型Ⅰ)，加熱至70℃，500rpm攪拌3.5小時(shí)，得澄清溶液，加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)含量合格。

實(shí)施例9

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(9)：

將150g羥丙基-β-環(huán)糊精加適量水，加熱攪拌溶解，然后加水最后定容至500ml，配得濃度為0.3g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液；

羥丙基-β-環(huán)糊精平均取代度(DS)為4.2。

取0.3g/ml羥丙基-β-環(huán)糊精溶液100ml，加入1.0g阿戈美拉汀(晶型Ⅱ)，加熱至65℃，800rpm攪拌4小時(shí)，得澄清溶液，加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)含量合格。

實(shí)施例10

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(10)：

將35g羥丙基-β-環(huán)糊精加適量水，加熱攪拌溶解，然后加水最后定容至500ml，配得濃度為0.07g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液；

羥丙基-β-環(huán)糊精平均取代度(DS)為3.9。

取0.07g/ml羥丙基-β-環(huán)糊精溶液100ml，加入0.2g阿戈美拉汀(晶型Ⅲ)，加熱至50℃，600rpm攪拌5小時(shí)，得澄清溶液，加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)含量合格。

實(shí)施例11

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(11)：

將175g羥丙基-β-環(huán)糊精加適量水，加熱攪拌溶解，然后加水最后定容至500ml，配得濃度為0.35g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液；

羥丙基-β-環(huán)糊精平均取代度(DS)為4.9。

取0.35g/ml羥丙基-β-環(huán)糊精溶液100ml，加入1.0g阿戈美拉汀(晶型Ⅵ)，加熱至60℃，650rpm攪拌5小時(shí)，得澄清溶液，加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)含量合格。

實(shí)施例12

阿戈美拉汀鹽酸鹽水合物/環(huán)糊精水溶液(12)：

將100g羥丙基-β-環(huán)糊精加適量水，加熱攪拌溶解，然后加水最后定容至500ml，配得濃度為0.2g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液；

羥丙基-β-環(huán)糊精平均取代度(DS)為4.0。

取0.2g/ml羥丙基-β-環(huán)糊精溶液100ml，加入0.5g阿戈美拉汀鹽酸鹽水合物(以阿戈美拉汀計(jì))，加熱至70℃，700rpm攪拌2.5小時(shí)，得澄清溶液，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH至中性，加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)含量合格。

實(shí)施例13

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(13)：

將100g羥丙基-β-環(huán)糊精加適量水，加熱攪拌溶解，加水并定容至500ml，配得濃度為0.2g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液；

羥丙基-β-環(huán)糊精平均取代度(DS)為3.5。

取0.2g/ml羥丙基-β-環(huán)糊精溶液10ml，在60℃條件下，邊研磨邊加入0.1g阿戈美拉汀(晶型Ⅱ)，繼續(xù)保溫研磨3h，加水稀釋并定容至100ml，即得1mg/ml的阿戈美 拉汀澄清溶液。加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè)含量有關(guān)物質(zhì)合格。

實(shí)施例14

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(14)

稱取羥丙基-β-環(huán)糊精200g，加適量水，加熱到70℃，700rpm攪拌溶解，最后定容至500ml，配得0.4g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液；

羥丙基-β-環(huán)糊精平均取代度(DS)為4.0。

稱取2.0g阿戈美拉汀(晶型Ⅱ)，溶解到無(wú)水乙醇中，定容至20ml，得100mg/ml的阿戈美拉汀乙醇溶液。

取0.4g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液100ml，加熱至70℃，逐滴加入100mg/ml阿戈美拉汀乙醇溶液10ml，繼續(xù)保溫超聲1h。稀釋5倍，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至一定體積后，分裝至凍干瓶?jī)?nèi)凍干，凍干結(jié)束后加水復(fù)溶至配制體積，即得澄清溶液。加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè)含量有關(guān)物質(zhì)均合格。

實(shí)施例15

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(15)

取0.6g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液100ml，加熱至60℃，逐滴加入200mg/ml的阿戈美拉汀乙醇溶液15ml，保溫，600rpm攪拌0.5h。放置室溫，稀釋50倍，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至一定體積后，分裝至凍干瓶?jī)?nèi)凍干，凍干結(jié)束后加水復(fù)溶至配制體積，即得澄清溶液。羥丙基-β-環(huán)糊精平均取代度(DS)為5.0。加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃10天后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，60℃10天后檢測(cè)含量有關(guān)物質(zhì)均合格。

實(shí)施例16

阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液(16)：

將200g羥丙基-β-環(huán)糊精加適量水，加熱攪拌溶解，然后加水最后定容至500ml，配得濃度為0.4g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液；

羥丙基-β-環(huán)糊精平均取代度(DS)為4.6；

取0.4g/ml羥丙基-β-環(huán)糊精溶液100ml，加入1.0g阿戈美拉汀(晶型Ⅰ)，加熱至60℃，650rpm攪拌5小時(shí)，得澄清溶液，加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出， 含量有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)合格。4℃8個(gè)月后澄清透明，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出，40℃8個(gè)月后檢測(cè)含量和有關(guān)物質(zhì)仍合格。

實(shí)施例17

稱取羥丙基-β-環(huán)糊精50g，加適量水，加熱至55℃，攪拌溶解，最后定容至100ml，配得0.5g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液，加入阿戈美拉汀3.0g，約70℃下700rpm水浴攪拌4小時(shí)，得澄清溶液。

分別加入0.03g的依地酸二鈉、0.005g的苯扎氯銨。

攪拌混勻。加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出。將該樣品同時(shí)分別置于4℃、室溫、40℃、60℃條件下考察穩(wěn)定性，包括0天、1個(gè)月、3個(gè)月各條件下及加速實(shí)驗(yàn)(40℃、75％RH)8個(gè)月的純度、外觀、含量，4℃、室溫樣品一直保持澄清透明無(wú)晶體析出，含量檢測(cè)合格，其他結(jié)果詳見(jiàn)于表4。

實(shí)施例18

稱取羥丙基-β-環(huán)糊精15g，加適量水，加熱(40℃-50℃)攪拌溶解，最后定容至100ml，配得0.15g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液，加入阿戈美拉汀1.0g，約70℃下700rpm水浴攪拌5小時(shí)，得澄清溶液。

分別加入0.03g的依地酸二鈉、0.005g的苯扎氯銨和0.55g氯化鈉。

攪拌混勻。加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出。將樣品同時(shí)分別置于4℃、室溫、40℃、60℃條件下考察穩(wěn)定性，包括0天、1個(gè)月、3個(gè)月各條件下及加速實(shí)驗(yàn) (40℃、75％RH)8個(gè)月的純度、外觀、含量，4℃、室溫樣品一直保持澄清透明無(wú)晶體析出，含量檢測(cè)合格，其他結(jié)果詳見(jiàn)于表4。

實(shí)施案例19

稱取羥丙基-β-環(huán)糊精20g，加適量水，加熱(40℃-50℃)攪拌溶解，最后定容至100ml，配得0.2g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液。稱取1g阿戈美拉汀，溶解到適量無(wú)水乙醇中，得200mg/ml的阿戈美拉汀乙醇溶液。

將100ml 0.2g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液加熱至60-70℃，逐滴加入全部上述阿戈美拉汀乙醇溶液，繼續(xù)保溫600rpm攪拌5h。放置室溫，稀釋15倍，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至一定體積后，分裝至凍干瓶?jī)?nèi)凍干，凍干結(jié)束后加水復(fù)溶至配制體積。

分別加入0.03g的依地酸二鈉、0.005g的苯扎氯銨和0.45g氯化鈉。

攪拌混勻。加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出。將樣品同時(shí)分別置于4℃、室溫、40℃、60℃條件下考察穩(wěn)定性，包括0天、1個(gè)月、3個(gè)月各條件下及加速實(shí)驗(yàn)(40℃、75％RH)8個(gè)月的純度、外觀、含量，4℃、室溫樣品一直保持澄清透明無(wú)晶體析出，含量檢測(cè)合格，其他結(jié)果詳見(jiàn)于表4。

實(shí)施例20

稱取羥丙基-β-環(huán)糊精10g，加適量水，加熱至50℃攪拌溶解，最后定容至100ml，配得0.1g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液。稱取0.5g阿戈美拉汀，溶解到適量無(wú)水乙醇中，得200mg/ml的阿戈美拉汀乙醇溶液。

將100ml 0.1g/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精溶液加熱至70℃，逐滴加入全部上述阿戈美拉汀乙醇溶液，繼續(xù)保溫650rpm攪拌5h。放置室溫，稀釋15倍，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至一定體積后，分裝至凍干瓶?jī)?nèi)凍干，凍干結(jié)束后加水復(fù)溶至配制體積。

分別加入0.03g的依地酸二鈉、0.005g的苯扎氯銨和0.67g氯化鈉。

攪拌混勻。加水稀釋100倍，無(wú)阿戈美拉汀晶體析出。將該樣品同時(shí)分別置于4℃、室溫、40℃、60℃條件下考察穩(wěn)定性，包括0天、1個(gè)月、3個(gè)月各條件下及加速實(shí)驗(yàn)(40℃、75％RH)8個(gè)月的純度、外觀、含量，4℃、室溫樣品一直保持澄清透明無(wú)晶體析出，含量檢測(cè)合格，其他結(jié)果詳見(jiàn)于表4。

表5實(shí)施例17-20樣品各條件下穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果。

實(shí)施例21

將實(shí)施例3的樣品適當(dāng)稀釋，以三個(gè)梯度劑量8mg/kg、16mg/kg、32mg/kg給ICR小鼠滴鼻給藥。經(jīng)HPLC檢測(cè)，藥物的絕對(duì)生物利用度(以靜脈給藥的血漿濃度為100％)如下表所示，可見(jiàn)不同的滴鼻給藥劑量下，AG水溶液具有較為相似的生物利用度。

表6 AG水溶液不同給藥劑量的絕對(duì)生物利用度

實(shí)施例22

為了闡述該阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液制劑的優(yōu)勢(shì)，本發(fā)明考察了在ICR小鼠體內(nèi)，相同劑量(32mg/kg)阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液在不同給藥途徑(腹腔注射、肌內(nèi)注射、皮下注射、灌胃)相對(duì)于靜脈注射的絕對(duì)生物利用度，見(jiàn)圖6。阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液其他給藥形式的絕對(duì)生物利用度均不同程度優(yōu)于口服灌胃，更特別的是，阿戈美拉汀 水溶液口服灌胃的絕對(duì)生物利用度是市售阿戈美拉汀固體制劑(維度新)的5倍?？梢?jiàn)，該水溶液適合制備成不同給藥途徑的液體制劑，其中包括靜脈注射制劑、肌內(nèi)注射劑、皮下注射劑、口服液體制劑、鼻腔滴劑、口腔噴劑、舌下噴劑或粉針劑。

實(shí)施例23

為了驗(yàn)證阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液40℃8個(gè)月后其最大血藥濃度依然與0天配制樣品一致，故將實(shí)施案例16中40℃8月后的樣品與現(xiàn)配的相同處方的阿戈美拉汀/環(huán)糊精水溶液樣品(AG 10mg/ml，0.4g/ml HP-β-CD)對(duì)照給藥，以兩種給藥劑量和給藥方式考察ICR小鼠的最大血藥濃度，具體結(jié)果見(jiàn)附圖7?？梢?jiàn)，即使經(jīng)過(guò)加速試驗(yàn)(40℃，75％)8月后，本發(fā)明AG水溶液樣品放置8個(gè)月后的最大血藥濃度(C_max)依然與0天現(xiàn)配樣品相似，統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示兩樣品無(wú)顯著差異，說(shuō)明該水溶液具有較好的小鼠藥物代謝動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定性。