本申請要求于2015年8月7日提交的美國臨時申請第62/202568號的權(quán)益，其內(nèi)容通過引用并入本申請中。
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般涉及可以用于改善皮膚狀況和/或視覺外觀的局部用組合物。在某些方面，本發(fā)明的組合物可以包含，例如，用以提高皮膚緊實度和彈性的成分、改善皮膚紋理和清透度的成分、減少皮膚炎癥的成分、減少皮膚色素沉著的成分、減少皮膚紅疹的成分、減少細(xì)紋和/或皺紋的成分、減輕眼袋的成分、減輕黑眼圈的成分、減輕幼紋的成分以及減輕下垂的成分、提亮膚色的成分、治療酒糟鼻的成分、改善眼周區(qū)域的整體外觀的成分以及滋潤皮膚和/或毛發(fā)的成分的組合。該成分的組合可以包括于廣泛的產(chǎn)品制劑中(例如精華、眼霜、化妝水、凝膠、面膜等)。
背景技術(shù)：
：衰老、長期暴露于不利的環(huán)境因素、營養(yǎng)失調(diào)、疲勞等可以以被認(rèn)為是視覺上不期望的方式改變皮膚的視覺外觀、物理性能或生理功能。最值得注意和明顯的改變包括細(xì)紋和皺紋的發(fā)展、彈性的喪失、增加的下垂、堅實度的喪失、顏色均勻性或色調(diào)的損失、粗糙的表面紋理和斑駁的色素沉積。隨著皮膚老化或經(jīng)歷長期環(huán)境損害而發(fā)生的稍不明顯但重要的改變包括細(xì)胞和組織活性的普遍降低、細(xì)胞復(fù)制速率的降低、減少的皮膚血流、降低的水分含量、結(jié)構(gòu)和功能的累積錯誤、普通生化過程正常調(diào)節(jié)的改變以及皮膚的重建與修復(fù)自身的能力的降低。皮膚的外觀和功能的許多變化由皮膚的外表皮層的改變導(dǎo)致，而其他的變化由下部的真皮的改變導(dǎo)致。許多因素促成皮膚老化和外貌老化，例如人的實際年齡、暴露于環(huán)境因素(如陽光、污染、化學(xué)品、煙等)的量和人照顧其皮膚的良好程度。具體地，皮膚老化關(guān)系到兩個過程——與自然老化過程和基因影響有關(guān)的內(nèi)在老化，和歸結(jié)于環(huán)境因素的累積損傷的外在老化。細(xì)胞和皮膚的內(nèi)在老化過程可與維持生化途徑中皮膚的特有功能的損失相關(guān)。這種途徑可以控制皮膚中氧化/還原環(huán)境平衡、細(xì)胞分裂和細(xì)胞膜的完整性的調(diào)控以及皮膚水分平衡的維持。皮膚的特有功能的損失可以導(dǎo)致皮膚緊實度的喪失、增加皮膚的粗糙度、增加皮膚的細(xì)紋和皺紋以及干性皮膚。舉例來說，內(nèi)在老化可以歸因于核纖層蛋白A的功能，由于其提供核酸酶的膜結(jié)構(gòu)因而在細(xì)胞分裂中是重要的。在功能的核纖層蛋白A的作用，核纖層制造缺少結(jié)構(gòu)支撐的異常核膜。這可導(dǎo)致限制細(xì)胞分裂的異常形狀的核膜。核纖層蛋白A的突變形式，被稱為早老蛋白，與早老癥疾病有關(guān)，其中患者經(jīng)歷加速衰老，早在兩歲時就顯示出衰老信號并具有大幅縮短的壽命。皮膚的特有功能的這種和其他損失可以導(dǎo)致皮膚緊實度的喪失、增加皮膚粗糙度、增加細(xì)紋和皺紋、增加氧化損傷以及干性皮膚。外在因素可包括暴露于紫外(UV)線、刺激物和污染。通過陽光照射或使用紫外燈(例如日曬床)的紫外線可以引起氧化應(yīng)激、炎癥、黑色素的產(chǎn)生，甚至引起導(dǎo)致皮膚損傷的基因突變。憑借自由基形成的氧化應(yīng)激的累積可以損傷皮膚蛋白，導(dǎo)致包括失去彈性、失去真皮蛋白、細(xì)紋和皺紋以及異常色素沉著的皮膚老化。炎癥也是紫外損傷和環(huán)境損傷的特征。炎癥可以通過炎性細(xì)胞因子如TNF-α、VEGF、IL-1β、IL-6等，或者有助于炎癥通路的酶如環(huán)氧合酶(例如COX-1)而發(fā)生。當(dāng)炎癥持續(xù)時，如基質(zhì)金屬蛋白酶-1(matrixmetalloproteinase-1，MMP1)、基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP3)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP9)的酶參與到了真皮蛋白的分解，這使得免疫細(xì)胞遷移。真皮蛋白例如層粘連蛋白、彈性蛋白和膠原蛋白的這種分解可以導(dǎo)致皮膚老化。當(dāng)暴露于外在因素時，角化細(xì)胞(皮膚最外層細(xì)胞)釋放信號分子如α-促黑激素(α-melanocyte-stimulatinghormone，α-MSH)和炎性細(xì)胞因子。這些激素引發(fā)黑素細(xì)胞產(chǎn)生黑色素(黑素生成)。典型的色素沉著的特征在于均勻的、一致的皮膚著色。然而，通過外在因素產(chǎn)生黑色素可以導(dǎo)致皮膚顏色的變化。例如，人的皮膚可以具有黯啞、色素斑、不期望的雀斑或暗斑，如老年性著色斑、肝斑、黃褐斑、棕斑或老年斑、白癜風(fēng)、曬斑色素沉著、由于擦傷、灼傷、創(chuàng)傷或皮炎的炎癥后色素沉著過度、光毒性反應(yīng)和其它類似的小的、固定的色素沉著病變。通常希望使這些區(qū)域變亮或使皮膚的不規(guī)則色素沉著區(qū)域的外觀正常。個體還可能希望增加美觀或降低皮膚中色素沉著的總體水平。無論哪種情況，色素沉著過度通常被視為從化妝方面是不期望的，并且個體通常希望使皮膚變亮。傳統(tǒng)的褪色試劑如氫醌、皮質(zhì)類固醇和曲酸可以引起幾種與長期暴露相關(guān)的安全性擔(dān)憂(例如褐黃病、萎縮、致癌作用以及其他局部或全身的副作用)。(Talwar1993)。外在因素還可以減少皮膚水分。暴露于化學(xué)品、溶劑、洗滌劑、化妝品、纖維織物或干燥環(huán)境是皮膚可以失去水分的多種途徑中的一些。水分損失可以導(dǎo)致皮膚開裂或細(xì)紋和皺紋。維持皮膚和/或毛發(fā)中的水分有助于克服皮膚和毛發(fā)的一些不需要的改變。然而，在日常暴露于苛刻的外在因素下，維持皮膚水分可能是困難的。保濕劑已被設(shè)計為試圖彌補(bǔ)這種困境。用于皮膚和毛發(fā)的保濕劑是被特別設(shè)計為使得皮膚外層(表皮)更加柔軟和柔韌的化學(xué)試劑的復(fù)雜混合物。它們通過減少蒸發(fā)增加皮膚的水合(水含量)。天然生成的皮膚脂質(zhì)和固醇，以及人工或天然油脂、濕潤劑、潤膚劑、潤滑劑等可能是商用的皮膚保濕劑組合物的一部分。它們通常作為可商購產(chǎn)品有效的用于美容和治療用途，但是它們也可以使用普通制藥成分在家制備。然而，保濕劑不是完美的。和保濕劑聯(lián)系在一起的一些問題包括令人不愉快的觸覺特性(例如厚重、油膩或黏糊感)、不穩(wěn)定性、皮膚刺激或保濕能力不足。內(nèi)在因素和外在因素的結(jié)合最終導(dǎo)致了可見的衰老信號。目前市面上的產(chǎn)品要么并非有效地處理衰老的信號或成因，要么并非有效地處理外在因素對于皮膚的作用，和/或它們具有皮膚刺激作用。例如，目前產(chǎn)品可能不是處理皮膚緊實度的喪失、色素沉著問題、細(xì)紋或皺紋的外觀和/或水分損失。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明人已經(jīng)確定了目前與用以抵消老化和暴露于改變皮膚外觀和/或狀況的外在因素的一些作用的產(chǎn)品相關(guān)的問題的解決方法。該解決方法在于成分的組合，其可以是以下物質(zhì)的任意組合：積雪草(Centellaasiatica)提取物、積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物、荷花玉蘭(Magnoliagrandiflora)樹皮提取物、厚樸(Magnoliaofficinalis)樹皮提取物、豌豆(Pisumsativum)提取物、柚(Citrusgrandis)果皮提取物、望春玉蘭(Magnoliabiondii)花提取物、三肽-1、和/或橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2、和棕櫚酰四肽-7的組合，其可用于創(chuàng)建局部皮膚用組合物以有效增加皮膚的緊實度和彈性，改善皮膚紋理和清透度，減少皮膚炎癥、減少皮膚的色素沉著、減少皮膚上的紅疹、減少細(xì)紋和/或皺紋、減輕眼袋、減輕黑眼圈、減少幼紋(crepiness)和減輕下垂，亮白皮膚，治療酒糟鼻，改善眼周區(qū)域的整體外觀。成分的組合可以被用于創(chuàng)建局部皮膚用組合物以有效提高透明質(zhì)酸合成、增加層粘連蛋白的刺激、增加纖維粘連蛋白的刺激、增加膠原蛋白的刺激、抑制彈性蛋白酶、抑制MMP1、抑制黑色素生成、抑制酪氨酸酶、抑制內(nèi)皮細(xì)胞管的形成、抑制TNF-α、抑制IL-1β、抑制IL-6、抑制IL-10、抑制IL-2、抑制COX-1、抑制VEGF，并提供抗氧化能力。在一方面，公開了局部皮膚用組合物。在一個實例中，局部皮膚用組合物包含積雪草提取物、荷花玉蘭樹皮提取物或厚樸樹皮提取物、橙皮苷甲基查爾酮、豌豆提取物、柚果皮提取物、望春玉蘭花提取物、二肽-2、棕櫚酰四肽-7和三肽-1的任意一個、任意組合或全部。在一些方面，積雪草提取物為乙醇提取物。在一些方面，荷花玉蘭樹皮提取物為醇提取物。在一些方面，荷花玉蘭樹皮提取物包含至少一種木質(zhì)素。在一些方面，厚樸樹皮提取物為超臨界流體–CO2提取物。在一些方面，厚樸樹皮提取物包含木蘭醇與和厚樸酚。在一些方面，豌豆提取物為水提取物。在一些方面，柚果皮提取物為醇提取物。在一些方面，柚果皮提取物包含黃酮。在一些方面，望春玉蘭花提取物為水/丙二醇提取物。在一些方面，望春玉蘭花提取物含有木酚素。組合物內(nèi)成分的量可以改變(例如，該量以重量百分比計可以是低如0.000001％至高如98％，或是其間的任意范圍)。在一些方面，該組合物含有有效量的積雪草提取物以促進(jìn)透明質(zhì)酸合成、增加層粘連蛋白產(chǎn)生、抑制黑色素生成和/或降低酪氨酸酶活性。在一些方面，該組合物含有有效量的荷花玉蘭樹皮提取物以抑制TNFα、提供抗氧化能力、增加層粘連蛋白產(chǎn)生和/或抑制黑色素生成。在一些方面，該組合物含有有效量的厚樸樹皮提取物以提供抗氧化能力、抑制黑色素生成、抑制炎性細(xì)胞因子的表達(dá)、抑制TNF-α、抑制IL-1β、抑制IL-6、抑制IL-10、抑制IL-2和/或抑制COX-1。在一些方面，該組合物含有有效量的豌豆提取物以提供抗氧化能力、增加膠原蛋白I、抑制彈性蛋白酶和/或增加纖維連接蛋白的產(chǎn)生。在一些方面，該組合物含有有效量的柚果皮提取物以增加層粘連蛋白的產(chǎn)生和/或中斷內(nèi)皮細(xì)胞管形成。在一些方面，該組合物含有有效量的望春玉蘭花提取物以抑制VEGF和/或中斷內(nèi)皮細(xì)胞管形成。在一些方面，該組合物含有有效量的三肽-1以增加膠原蛋白I產(chǎn)生和/或增加透明質(zhì)酸產(chǎn)生。在一些方面，該組合物含有有效量的橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2和棕櫚酰四肽-7的組合以提供抗氧化能力、增加層粘連蛋白產(chǎn)生和/或抑制MMP1。在一個實例中，該組合物包含0.01重量％至1重量％的積雪草提取物、0.01重量％至1重量％的荷花玉蘭樹皮提取物或厚樸樹皮提取物、0.01重量％至1重量％的橙皮苷甲基查爾酮、0.001重量％至0.5重量％的豌豆提取物、0.001重量％至0.5重量％的柚果皮提取物、0.0005重量％至0.1重量％的望春玉蘭花提取物、0.0001重量％至0.1重量％的二肽-2、0.00001重量％至0.01重量％的棕櫚酰四肽-7和0.000001重量％至0.001重量％的三肽-1。在另一實例中，組合物還包含積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物。在一些方面，該組合物含有有效量的積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物以增加透明質(zhì)酸產(chǎn)生和/或降低酪氨酸酶活性。在另一個實例中，該組合物含有0.0005重量％至0.1重量％的積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物。在一個實例中，該組合物還包含水。在一個實例中，該組合物包含35重量％至70重量％的水。在另一個實例中，組合物還包含甘油、凡士林、礦物油、氫化聚癸烯、十六烷基酯、雙-二甘油多脂酰己二酸酯-2、丁二醇、氫化聚異丁烯、山梨坦橄欖油酸酯、鯨蠟硬脂醇橄欖油酸酯、十六烷酸鯨蠟醇酯和鯨蠟硬脂醇。在又一實例中，該組合物包含5重量％至20重量％的甘油、1重量％至15重量％的凡士林、1重量％至15重量％的礦物油、1重量％至10重量％的氫化聚癸烯、1重量％至10重量％的十六烷基酯、1重量％至10重量％的雙-二甘油多脂酰己二酸酯-2、0.5重量％至5重量％的丁二醇、0.5重量％至5重量％的氫化聚異丁烯、0.5重量％至5重量％的山梨坦橄欖油酸酯、0.5重量％至5重量％的鯨蠟硬脂醇橄欖油酸酯、0.1重量％至5重量％的十六烷酸鯨蠟醇酯和0.1重量％至5重量％的鯨蠟硬脂醇。在一個實例中，該組合物還包含山梨坦棕櫚酸酯、四己基癸醇抗壞血酸酯、二氧化硅、鯨蠟硬脂醇醚-20、重氮咪唑烷基脲、生育酚醋酸酯、三乙醇胺、丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聯(lián)聚合物和丙二醇。在另一實例中，該組合物包含0.1重量％至3重量％的山梨坦棕櫚酸酯、0.1重量％至3重量％的四己基癸醇抗壞血酸酯、0.1重量％至3重量％的二氧化硅、0.05重量％至1重量％的鯨蠟硬脂醇醚-20、0.05重量％至1重量％的重氮咪唑烷基脲、0.05重量％至1重量％的生育酚醋酸酯、0.05重量％至1重量％的三乙醇胺、0.01重量％至1重量％的丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聯(lián)聚合物和0.01重量％至1重量％的丙二醇。在又一實例中，該組合物還包含仙人果(Opuntiatuna)果實提取物。在一個實例中，該組合物包含0.00001重量％至0.01重量％的仙人果果實提取物。該組合物還可以包含一種或多種本文描述的成分。例如，該組合物可以包含選自一種或多種調(diào)理劑、保濕劑、pH調(diào)節(jié)劑、結(jié)構(gòu)劑、無機(jī)鹽和防腐劑的一種或多種附加成分。在另一實例中，該局部皮膚用組合物為乳液。在一個實例中，該組合物為水包油乳液。在另一實例中，該組合物被配制為霜劑。在又一實例中，組合物被配制為眼霜。還公開了本文公開的組合物的使用方法。在一些方面，公開了改善皮膚和/或毛發(fā)狀況或外觀的方法，其包括將本文描述的任一組合物施用于其中需要的皮膚和/或毛發(fā)。在一個方面，公開的組合物被施用于皮膚/或毛發(fā)并留在皮膚/或毛發(fā)上，或者一段時間后從皮膚/或毛發(fā)上移除。在另一方面，通過將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中該皮膚的緊實度增加，公開的組合物被用于增加皮膚的緊實度。在又一方面，通過將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中該皮膚的細(xì)紋和/或皺紋的出現(xiàn)減少，公開的組合物被用于減少細(xì)紋和/或皺紋的出現(xiàn)。在一個方面中，本文公開的組合物被用于改善皮膚紋理，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中該皮膚的紋理改善。在另一方面，本文公開的組合物被用于減輕眼袋，包括將本文公開的任一組合物施用于眼下皮膚，其中眼袋減輕。在又一方面，本文公開的組合物被用于減輕皮膚下垂，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中皮膚下垂減輕。在一個方面，本文公開的組合物被用于減少皮膚幼紋(crepiness)，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中皮膚幼紋減輕。在另一方面，本文公開的組合物被用于增加皮膚彈性，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中皮膚的彈性增加。在一個方面，通過將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中皮膚的亮度提高，公開的組合物被用于提亮皮膚。在另一方面，通過將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中皮膚的色素沉著減少，公開的組合物被用于減少皮膚的色素沉著。在又一方面，通過將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中黑色素生成被抑制，公開的組合物被用于抑制皮膚中黑色素生成。在另一方面，通過將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中該皮膚上的紅疹減輕，公開的組合物被用于減輕皮膚上的紅疹。在另一方面，通過將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中酒糟鼻減輕，公開的組合物被用于處理酒糟鼻。在又一方面，通過將本文公開的任一組合物施用于眼周皮膚，其中該眼周皮膚上的和/或眼周皮膚下的黑眼圈減輕，公開的組合物被用于減輕眼周皮膚上的和/或眼周皮膚下的黑眼圈。在一個方面，通過將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中皮膚的清透度被改善，該公開的組合物被用于改善皮膚的清透度。在另一方面，通過將本文公開的任一組合物施用于眼周皮膚，其中該眼周皮膚的整體外觀被改善，公開的組合物被用于改善眼周皮膚的整體外觀。在又一方面，通過將本文公開的任一組合物施用于皮膚和/或毛發(fā)，其中該皮膚和/或毛發(fā)被滋潤，公開的組合物被用于滋潤皮膚和/或毛發(fā)。在另一方面中，本文公開的組合物被用于減輕皮膚炎癥，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中皮膚中的炎癥被減輕。在一個方面，本文公開的組合物被用于抑制皮膚中的酪氨酸酶，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中皮膚中的酪氨酸酶被抑制。在又一方面中，本文公開的組合物被用于抑制血管生成，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中血管生成被抑制。在一個方面，本文公開的組合物被用于增加皮膚中透明質(zhì)酸產(chǎn)生，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中透明質(zhì)酸的產(chǎn)生增加。在另一方面，本文公開的組合物被用于增加皮膚中層粘連蛋白的產(chǎn)生，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中層粘連蛋白的產(chǎn)生增加。在另一方面，本文公開的組合物被用于增加皮膚中纖維連接蛋白的產(chǎn)生，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中纖維連接蛋白的產(chǎn)生增加。在一個方面，本文公開的組合物被用于增加皮膚中的膠原蛋白刺激，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中皮膚中的膠原蛋白刺激增加。在另一方面，本文公開的組合物被用于抑制皮膚中彈性蛋白酶活性，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中皮膚中彈性蛋白酶活性被抑制。在又一方面，本文公開的組合物被用于抑制皮膚中的MMP1，包括對將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中該皮膚中的MMP1被抑制。在另一方面中，本文公開的組合物被用于抑制皮膚中的TNF-α，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中皮膚中的TNF-α被抑制。在另一方面，本文公開的組合物被用于抑制皮膚中的VEGF，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中該皮膚中的VEGF被抑制。在一些方面，本文公開的組合物被用于抑制皮膚中的IL-1β，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中該皮膚中的IL-1β被抑制。在一些方面中，本文公開的組合物被用于抑制皮膚中的IL-6，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中該皮膚中的IL-6被抑制。在一些方面，本文公開的組合物被用于抑制皮膚中的IL-10，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中該皮膚中的IL-10被抑制。在一些方面中，本文公開的組合物被用于抑制皮膚中的IL-2，包括對皮膚應(yīng)用本文公開的任一組合物，其中該皮膚中的IL-2被抑制。在一些方面，本文公開的組合物被用于抑制皮膚中的COX-1，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚，其中該皮膚中的COX-1被抑制。在又一方面，本文公開的組合物被用于減少在皮膚和/或毛發(fā)表面和/或內(nèi)部的氧化劑，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚和/或毛發(fā)，其中該氧化劑被減少。在一個方面，本文公開的組合物被用于預(yù)防由氧化劑對皮膚和/或毛發(fā)造成的氧化損傷，包括將本文公開的任一組合物施用于皮膚和/或毛發(fā)，其中由該氧化劑對皮膚和/或毛發(fā)造成的氧化損傷被預(yù)防。在具體方面，本發(fā)明的組合物配制為局部皮膚和/或毛發(fā)用組合物。該組合物可以具有用于化合物、組合物和提取物的皮膚病學(xué)可接受的載劑或載體。該組合物還可以包含保濕劑或濕潤劑、表面活性劑、含硅酮的化合物、UV劑、油和/或本說明書確定的或本領(lǐng)域已知的其他成分。組合物可以是潤膚露、霜劑、凝膠、精華素、乳液(例如水包油、油包水、水包硅酮、硅酮包水、水包油包水、油包水包油、硅酮包水包油等)、溶液(例如水溶液或水-醇溶液)、無水基(例如唇膏或粉劑)、軟膏劑、乳液、貼劑、氣溶膠、固形、眼啫喱等。該組合物可以是粉劑形式(例如干燥的、凍干的、微粒的等)。該組合物可以被配制用于在使用期間每天局部皮膚施用至少1、2、3、4、5、6、7或更多次。在本發(fā)明的其它方面，組合物可以是儲存穩(wěn)定或顏色穩(wěn)定的，或是兩者。還期望可以選擇組合物的黏度以達(dá)到想要的結(jié)果，例如根據(jù)想要的組合物類型，該組合物的黏度可以從1cps到遠(yuǎn)超過1百萬cps，或者是其中可推得的任意范圍或整數(shù)(例如，如在25℃下在布氏黏度計上用TC軸以2.5rpm的轉(zhuǎn)速測量的2cps、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000、20000、30000、40000、50000、60000、70000、80000、90000、100000、200000、300000、400000、500000、600000、700000、800000、900000、1000000、2000000、3000000、4000000、5000000、10000000cps等)。本發(fā)明的組合物還可以被改性以具有想要的氧自由基吸收能力(ORAC)值。在某些非限制性方面，在本說明書全文中所確定的本發(fā)明的組合物或組分或其提取物可以被改性以具有每毫克至少約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、95、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000、15000、20000、30000、50000、100000或更多或者其中可推得的任意范圍的ORAC值。在非限制性方面，該組合物可以具有約6至約9的pH值。在其它方面，pH可以是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14。該組合物可以包含甘油三酸酯。非限制性實例包括小的、中等的和大的鏈甘油三酸酯。在某些方面，該甘油三酸酯是中等鏈甘油三酸酯(例如辛酸癸酸甘油三酯)。該組合物還可以包含防腐劑。防腐劑的非限制性實例包括對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯或?qū)αu基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸丙酯的混合物。在一些實施方案中，防腐劑不是苯甲酸酯類(paraben)。本發(fā)明的組合物可以具有UVA和UVB吸收性質(zhì)。該組合物可以具有的防曬系數(shù)(sunprotectionfactor，SPF)為2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、或更大、或其中可以推得的任何整數(shù)。該組合物可以是防曬的潤膚露、噴霧或霜劑。本發(fā)明的組合物還可以包含以下附加成分中的任何一種、任意組合或全部：水、螯合劑、保濕劑、防腐劑、增稠劑、含硅酮的化合物、精油、結(jié)構(gòu)化劑、維生素、藥物成分、或抗氧化劑、或這些成分的任意組合或這些成分的混合物。在某些方面，該組合物可以包含在上句中指出的這些附加成分中的至少二、三、四、五、六、七、八、九、十種或全部。這些附加成分的非限制性實例在本說明書全文指出并通過引用并入本章節(jié)。這些成分的量以組合物的重量或體積計可以是0.0001％至99.9％，或者是如本說明書其它章節(jié)中所公開的任意整數(shù)或范圍，其通過引用并入本段。也預(yù)期了包含本發(fā)明的組合物的試劑盒。在某些實施方案中，該組合物包含在容器中。該容器可以是瓶子、分配器或包裝。該容器可以分配預(yù)定量的組合物。在某些方面，該組合物以噴霧、霧、團(tuán)塊或液體分配。該容器可以包含其表面上的標(biāo)記。該標(biāo)記可以是單詞、縮寫、圖片或符號。還預(yù)期了在本說明書全文中所公開的組合物可以用作保留或洗去型組合物。舉例來說，保留型組合物可以局部施用于皮膚，并在皮膚上保留一端時間(例如，至少5、6、7、8、9、10、20或30分鐘，或至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23或24小時，或者整夜或整天)的產(chǎn)品?；蛘?，洗去型組合物可以是意在施用于皮膚，然后在一端時間內(nèi)如小于5、4、3、2或1分鐘從皮膚移除或洗去(比如用水)的產(chǎn)品。洗去型組合物的實例可以是洗面奶、洗發(fā)水、調(diào)理劑或肥皂。保留型組合物的例子可以是皮膚保濕霜、防曬霜、面膜、晚霜或日霜。預(yù)期了對于本發(fā)明的任何方法或組合物，可以實施于本說明書中所討論的任何實施方案，反之亦然。此外，本發(fā)明的組合物可以用于實現(xiàn)本發(fā)明的方法。在一個實施方案中，本發(fā)明的組合物可以是可藥用的或可化妝用的，或可以具有舒適的觸覺性質(zhì)。“可藥用的”、“可化妝用的”和/或“舒適的觸覺性質(zhì)”描述了具有在皮膚上令人感覺舒適的特定觸覺性質(zhì)的組合物(例如，不是太濕或太油的組合物、具有絲滑質(zhì)地的組合物、非發(fā)粘的或粘性的組合物等)?？伤幱玫幕蚩苫瘖y用的也可以與組合物的乳脂狀或潤滑性能、或組合物的保濕性能有關(guān)。還預(yù)期了一種包含本發(fā)明的組合物的產(chǎn)品。在非限制性方面，該產(chǎn)品可以是化妝品。該化妝品可以是本說明書其它章節(jié)所述的那些，或是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的那些。產(chǎn)品的非限制性實例包括保濕劑、霜劑、潤膚露、柔膚水、凝膠、化妝水、粉底、晚霜、唇膏、清潔劑、爽膚水、防曬霜、面膜、抗老化產(chǎn)品、除臭劑、止汗劑、香水、古龍水等。還公開了本發(fā)明的以下實施方案1-29。實施方案1是改善皮膚外觀或狀況的方法，其中緊實度提高、亮度提高、色素沉著減輕、黑色素生成被抑制、紅疹減輕、酒槽鼻減輕、黑眼圈減輕、清透度改善、細(xì)紋和/或皺紋的外觀減輕、紋理改善、眼袋減輕、下垂減輕、幼紋減輕、彈性增加、炎癥減輕和/或眼周皮膚的整體外觀改善，該方法包括將局部用組合物施用于皮膚，該局部用組合物包含：積雪草提取物；荷花玉蘭樹皮提取物或厚樸樹皮提取物；橙皮苷甲基查爾酮；豌豆提取物；柚果皮提取物；望春玉蘭花提取物；二肽-2；棕櫚酰四肽-7和三肽-1。實施方案2是根據(jù)實施方案1的方法，其中積雪草提取物為乙醇提取物，荷花玉蘭樹皮提取物為醇提取物，厚樸樹皮提取物為超臨界流體–CO2提取物，豌豆提取物為水提取物，柚果皮提取物為包含黃酮的醇提取物，和/或望春玉蘭花提取物為包含木酚素的水/丙二醇提取物。實施方案3是根據(jù)實施方案1和2中任一項的方法，其中抑制了酪氨酸酶，抑制了血管生成，增加了透明質(zhì)酸的產(chǎn)生，增加了層粘連蛋白的產(chǎn)生，增加了纖維連接蛋白的產(chǎn)生，增加了膠原蛋白刺激，抑制了彈性蛋白酶活性，抑制了MMP1，抑制了TNF-α，抑制了VEGF，抑制了IL-1β，抑制了IL-6，抑制了IL-10，抑制了IL-2，抑制了COX-1，和/或阻止了氧化劑對皮膚的氧化損傷。實施方案4是根據(jù)實施方案1至3中任一項的方法，其中該組合物包含有效量的：積雪草提取物以促進(jìn)透明質(zhì)酸的合成，增加層粘連蛋白的產(chǎn)生，抑制黑色素生成和/或降低酪氨酸酶活性；荷花玉蘭樹皮提取物以抑制TNFα，提供抗氧化能力，增加層粘連蛋白的產(chǎn)生，和/或抑制黑色素生成；厚樸樹皮提取物以提供抗氧化能力，抑制黑色素生成，抑制炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，抑制TNF-α，抑制IL-1β，抑制IL-6，抑制IL-10，抑制IL-2，和/或抑制COX-1；豌豆提取物以提供抗氧化能力，增加膠原蛋白I，抑制彈性蛋白酶，和/或增加纖維連接蛋白的產(chǎn)生；柚果皮提取物以增加層粘連蛋白的產(chǎn)生和/或破壞內(nèi)皮細(xì)胞管形成；望春玉蘭花提取物以抑制VEGF和/或破壞內(nèi)皮細(xì)胞管形成；三肽-1以增加膠原蛋白I的產(chǎn)生和/或增加透明質(zhì)酸的產(chǎn)生；和/或橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2和棕櫚酰四肽-7的組合以提供抗氧化能力，增加層粘連蛋白的產(chǎn)生，和/或抑制MMP1。實施方案5是根據(jù)實施方案1至4中任一項的方法，其中該組合物包含：0.01重量％至1重量％的積雪草提取物；0.01重量％至1重量％的荷花玉蘭樹皮提取物或厚樸樹皮提取物；0.01重量％至1重量％的橙皮苷甲基查爾酮；0.001重量％至0.5重量％的豌豆提取物；0.001重量％至0.5重量％的柚果皮提取物；0.0005重量％至0.1重量％的望春玉蘭花提取物；0.0001重量％至0.1重量％的二肽-2；0.00001重量％至0.01重量％的棕櫚酰四肽-7；和0.000001重量％至0.001重量％的三肽-1。實施方案6是根據(jù)實施方案1至5中任一項的方法，其中該組合物還包含積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物。實施方案7是根據(jù)實施方案6的方法，其中該組合物包含有效量的積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物以增加透明質(zhì)酸的產(chǎn)生和/或降低酪氨酸酶的活性。實施方案8是根據(jù)實施方案6至7中任一項的方法，其中該組合物包含0.0005重量％至0.1重量％的積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物。實施方案9是根據(jù)實施方案1至8中任一項的方法，其中該組合物還包含水。實施方案10是根據(jù)實施方案9的方法，其中該組合物包含35重量％至70重量％的水。實施方案11是根據(jù)實施方案1至10中任一項的方法，其中該組合物還包括仙人果果實提取物。實施方案12是根據(jù)實施方案11的方法，其中該組合物包含0.00001重量％至0.01重量％的仙人果果實提取物。實施方案13是根據(jù)實施方案1至12中任一項的方法，其中該組合物為乳液。實施方案14是根據(jù)實施方案1至13中任一項的方法，其中該組合物為水包油乳液。實施方案15是根據(jù)實施方案1至14中任一項的方法，其中該組合物被配制為眼霜。實施方案16為配制為改善皮膚狀況或外觀的局部用組合物，其包含：積雪草提取物；荷花玉蘭樹皮提取物或厚樸樹皮提取物；橙皮苷甲基查爾酮；豌豆提取物；柚果皮提取物；望春玉蘭花提取物；二肽-2；棕櫚酰四肽-7和三肽-1。實施方案17是根據(jù)實施方案16的局部用組合物，其中該組合物包含有效量的：積雪草提取物，以促進(jìn)透明質(zhì)酸合成、增加層粘連蛋白產(chǎn)生、抑制黑色素生成和/或降低酪氨酸酶活性；荷花玉蘭樹皮提取物，以抑制TNFα、提供抗氧化能力、增加層粘連蛋白的產(chǎn)生和/或抑制黑色素生成；厚樸樹皮提取物，以提供抗氧化能力、抑制黑色素生成、抑制炎性細(xì)胞因子的表達(dá)、抑制TNF-α、抑制IL-1β、抑制IL-6、抑制IL-10、抑制IL-2和/或抑制COX-1；豌豆提取物，以提供抗氧化能力、增加膠原蛋白I、抑制彈性蛋白酶和/或增加纖維連接蛋白的產(chǎn)生；柚果皮提取物，以增加層粘連蛋白的產(chǎn)生和/或破壞內(nèi)皮細(xì)胞管形成；望春玉蘭花提取物，以抑制VEGF和/或破壞內(nèi)皮細(xì)胞管形成；三肽-1，以增加膠原蛋白I的生產(chǎn)和/或增加透明質(zhì)酸的產(chǎn)生；和/或橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2和棕櫚酰四肽-7的組合，以提供抗氧化能力、增加層粘連蛋白的產(chǎn)生和/或抑制MMP1。實施方案18是根據(jù)實施方案16至17中任一項的組合物，包含：0.01重量％至1重量％的積雪草提取物；0.01重量％至1重量％的荷花玉蘭樹皮提取物或厚樸樹皮提取物；0.01重量％至1重量％的橙皮苷甲基查爾酮；0.001重量％至0.5重量％的豌豆提取物；0.001重量％至0.5重量％的柚果皮提取物；0.0005重量％至0.1重量％的望春玉蘭花提取物；0.0001重量％至0.1重量％的二肽-2；0.00001重量％至0.01重量％的棕櫚酰四肽-7；和0.000001重量％至0.001重量％的三肽-1。實施方案19是根據(jù)實施方案16至18中任一項的組合物，其中積雪草提取物為乙醇提取物，荷花玉蘭樹皮提取物為醇提取物，厚樸樹皮提取物為超臨界流體–CO2提取物，豌豆提取物為水提取物，柚果皮提取物為包含黃酮的醇提取物，和/或望春玉蘭花提取物為包含木酚素的水/丙二醇提取物。實施方案20是根據(jù)實施方案16至19中任一項的組合物，其還包括積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物。實施方案21是根據(jù)實施方案20的組合物，其含有有效量的積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物以增加透明質(zhì)酸的產(chǎn)生和/或降低酪氨酸酶的活性。實施方案22是根據(jù)實施方案20至21中任一項的組合物，其包括0.0005重量％至0.1重量％的積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物。實施方案23是根據(jù)實施方案16至22中任一項的組合物，其還包含水。實施方案24是根據(jù)實施方案23的組合物，其包含35重量％至70重量％的水。實施方案25是根據(jù)實施方案16至24中任一項的組合物，其還包含仙人果果實提取物。實施方案26是根據(jù)實施方案25的組合物，其包含0.00001重量％至0.01重量％的仙人果果實提取物。實施方案27是根據(jù)實施方案16至26中任一項的組合物，其中該組合物為乳液。實施方案28是根據(jù)實施方案27的組合物，其中該組合物為水包油乳液。實施方案29是根據(jù)實施方案28的組合物，其中該組合物被配制為眼霜?！熬植渴┯谩笔侵笇⒔M合物施用或涂敷到嘴唇或角質(zhì)組織的表面上?！熬植科つw用組合物”包括適合局部施用于嘴唇或角質(zhì)組織的組合物。這類組合物當(dāng)被施用于嘴唇或皮膚時，其不具有異常毒性、不相容性、不穩(wěn)定性、過敏反應(yīng)等，因而一般為皮膚病學(xué)可接受的。本發(fā)明的局部護(hù)膚組合物可以具有選定的黏度以避免施用于皮膚后明顯的滴落或聚積?！敖琴|(zhì)組織”包括配置為哺乳類最外的保護(hù)的覆蓋物的含有角質(zhì)的層，并且包括但不限于嘴唇、皮膚、毛發(fā)和指甲。術(shù)語“大約”或“約”定義為如本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所理解的接近于，并且在一個非限制性實施方案中該術(shù)語定義為在10％以內(nèi)，優(yōu)選在5％以內(nèi)，更優(yōu)選在1％以內(nèi)，最優(yōu)選在0.5％以內(nèi)。術(shù)語“基本上”及其變體定義為如本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所理解的大部分但不必全部地為指定的事物，并且在一個非限定性的實施方案中基本上指的是范圍在10％以內(nèi)、在5％以內(nèi)、在1％以內(nèi)或在0.5％以內(nèi)。術(shù)語“抑制”或“減少”或這些術(shù)語的任何變體包含為了達(dá)到預(yù)期結(jié)果的任何可測量的減少或完全抑制。術(shù)語“促進(jìn)”或“增加”或這些術(shù)語的任何變體包含為了達(dá)到預(yù)期結(jié)果的任何可測量的增加或蛋白質(zhì)或分子(例如，基質(zhì)蛋白如纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原蛋白或彈性蛋白，或者分子如透明質(zhì)酸)的產(chǎn)生。作為本說明書和/或權(quán)利要求中所使用的術(shù)語，術(shù)語“有效的”表示足夠?qū)崿F(xiàn)預(yù)期的、期望的或意圖的結(jié)果。當(dāng)在權(quán)利要求和/或說明書中與術(shù)語“包含”一起使用時，要素前面不使用數(shù)量詞可以表示“一個”，但是其也符合“一個或更多個”、“至少一個”和“一個或多于一個”的意思。如本說明書和權(quán)利要求所使用的，詞“包含”、“具有”、“包括”或“含有”是包括性的或開放式的，并且不排除附加的、未列舉的要素或方法步驟。組合物和它們的使用方法可以“包含”貫穿說明書公開的任何成分或步驟，或“主要由”貫穿說明書公開的任何成分或步驟“組成”，或“由”貫穿說明書公開的任何成分或步驟“組成”。本發(fā)明的其它目的、特征和優(yōu)點通過下面的詳細(xì)描述會變得明顯。然而，應(yīng)理解詳細(xì)的描述和實施例在表明本發(fā)明的具體實施方案時僅以舉例說明給出。另外，期望通過該詳細(xì)描述，本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)的變化和修改對于本領(lǐng)域技術(shù)人員會變得明顯。具體實施方式如上所述，本發(fā)明若干獨特方面在局部用化妝品組合物中結(jié)合，其包含積雪草提取物、荷花玉蘭樹皮提取物、厚樸樹皮提取物、豌豆提取物、柚果皮提取物、望春玉蘭花提取物、三肽-1，和/或橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2和棕櫚酰四肽-7的組合中的一種或多種，以及任選的積雪草的分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物。這使得以下益處能夠?qū)崿F(xiàn)：提高皮膚緊實度和彈性、改善皮膚紋理和清透度、減輕皮膚炎癥、減少皮膚色素沉著、減少皮膚上的紅疹、減少細(xì)紋和/或皺紋、減輕眼袋、減輕黑眼圈、減輕幼紋以及減輕下垂、提亮膚色、治療酒糟鼻、和改善眼周區(qū)域的整體外觀。其他益處包括：增加透明質(zhì)酸的合成、增加層粘連蛋白刺激、增加纖維連接蛋白刺激、增加膠原蛋白刺激、抑制彈性蛋白酶、抑制MMP1、抑制黑色素生成、抑制酪氨酸酶、抑制內(nèi)皮細(xì)胞管形成、抑制TNF-α、抑制IL-1β、抑制IL-6、抑制IL-10、抑制IL-2、抑制COX-1、抑制VEGF，并提供了具有抗氧化能力的組合物。以下子章節(jié)更詳細(xì)地描述本發(fā)明的非限制性方面。本發(fā)明的特別的組合物被設(shè)計為用作眼霜組合物。在一個實例中，該眼霜可以有助于緊實皮膚和增加微循環(huán)以減輕下眼袋的外觀，同時減輕黑眼圈的外觀。該組合物依賴于以下物質(zhì)的任一種、任意組合或所有的獨特組合：積雪草提取物、荷花玉蘭樹皮提取物、厚樸樹皮提取物、橙皮苷甲基查爾酮、豌豆提取物、柚果皮提取物、望春玉蘭花提取物、二肽-2、棕櫚酰四肽-7、三肽-1和積雪草的分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物，以及另外任選的仙人果果實提取物。表1的實施例1中提供了該組合物的一個實例。上述組合物可施用于皮膚或毛發(fā)并留在皮膚或毛發(fā)上一段時間(例如,至少1、2、3、4、5、10、20、30、或60分鐘或更長)。之后，如果需要，該組合物可以從皮膚上沖掉或揭掉。A.活性成分本發(fā)明的前提是以下活性成分組合的確定：積雪草提取物、荷花玉蘭樹皮提取物或厚樸樹皮提取物、橙皮苷甲基查爾酮、豌豆提取物、柚果皮提取物、望春玉蘭花提取物、二肽-2、棕櫚酰四肽-7、三肽-1和積雪草的分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物——其可以有效增加皮膚緊實度和彈性、改善皮膚紋理和清透度、減少皮膚炎癥、減少皮膚的色素沉著、減少皮膚上的紅疹、減少細(xì)紋和/或皺紋、減輕眼袋、減輕黑眼圈、減少幼紋(crepiness)和減少下垂、亮白皮膚、治療酒糟鼻、改善眼周區(qū)域的整體外觀。成分的組合還可以有效增加透明質(zhì)酸的合成、提高層粘連蛋白刺激、提高纖維連接蛋白刺激、提高膠原蛋白刺激、抑制彈性蛋白酶、抑制MMP1、抑制黑色素生成、抑制酪氨酸酶、抑制內(nèi)皮細(xì)胞管形成、抑制TNF-α、抑制IL-1β、抑制IL-6、抑制IL-10、抑制IL-2、抑制COX-1、抑制VEGF、并提供抗氧化能力。該成分的組合可以用于不同產(chǎn)品以處理多種皮膚狀況。例如，眼霜可以有助于緊實皮膚并改善眼周區(qū)域的整體外觀，同時也減輕黑眼圈的外觀。本發(fā)明的組合物和制劑可以是特別有益于開始生長細(xì)紋、皺紋和/或幼紋的皮膚。除了阻止老化過程，該成分的組合保濕、緊實和提亮皮膚。積雪草是小型草本一年生植物，原產(chǎn)于印度、斯里蘭卡、澳大利亞北部、印度尼西亞和亞洲的部分地區(qū)。這種植物的提取物(不論該提取物是從整株植物、花、葉、莖、種子還是根中獲得)是從廣泛的來源商購的(參見InternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook，第12版，第1卷，第458-60頁(2008)，其通過引用并入)，所有的這種植物的提取物均可以用于本發(fā)明的環(huán)境。在一些方面，積雪草提取物為乙醇提取物。在具體方面，可以使用積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物，其是從InstitutodiRicercheBiotecnologiche(意大利)商購的，商標(biāo)名為CentellaAsiaticStemsGTM。在一些方面，該積雪草提取物可以促進(jìn)透明質(zhì)酸的合成、增加層粘連蛋白的產(chǎn)生、抑制黑色素生成和/或降低酪氨酸酶活性。在一些方面，該積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物可以增加透明質(zhì)酸的產(chǎn)生和/或降低酪氨酸酶的活性。荷花玉蘭樹皮提取物是從荷花玉蘭樹的樹皮獲得。在一些方面，荷花玉蘭樹皮提取物為醇提取物。在一些方面，荷花玉蘭樹皮提取物為粉狀提取物。在一些方面，荷花玉蘭樹皮提取物包含木蘭醇與和厚樸酚。荷花玉蘭樹皮提取物是從供應(yīng)商例如PremierSpecialties,Inc.和/或DSM(北美)商購的。參見InternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook，第12版，第2卷，第1499-50頁(2008)，其通過引用并入。在一些方面，荷花玉蘭樹皮提取物可以抑制腫瘤壞死因子α(TNFα)，提供抗氧化能力，增加層粘連蛋白的產(chǎn)生，和/或抑制黑色素生成。厚樸樹皮提取物是從厚樸樹的樹皮獲得的。在一些方面，厚樸樹皮提取物為超臨界流體–CO2提取物。在一些方面，厚樸樹皮提取物為超臨界CO2流體提取物。在一些方面，厚樸樹皮提取物包含木蘭醇與和厚樸酚。厚樸樹皮提取物是從供應(yīng)商如CoastSouthwest,Inc.商購得到。參見InternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook，第12版，第2卷，1499-50頁(2008)，其通過引用并入。在一些方面，該厚樸樹皮提取物可以提供抗氧化能力、抑制黑色素生成、抑制炎性細(xì)胞因子的表達(dá)、抑制TNF-α、抑制IL-1β、抑制IL-6、抑制IL-10、抑制IL-2和/或抑制COX-1。望春玉蘭花提取物是從望春玉蘭樹的花和蓓蕾獲得的。在一些方面，荷花玉蘭樹皮提取物包含木酚素。在某些方面，望春玉蘭花提取物為水/丙二醇提取物。荷花玉蘭樹皮提取物是從供應(yīng)商如CarrubbaInc.商購得到。參見InternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook，第12版，第2卷，1499-50頁(2008)，其通過引用并入。在一些方面，望春玉蘭花提取物可以抑制血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和/或破壞內(nèi)皮細(xì)胞管形成。豌豆，也被稱為青豆、菜豌豆和青豌豆，為產(chǎn)生小型可食用種子的一年生植物。在某些方面，豌豆提取物為水提取物。豌豆提取物是可從供應(yīng)商如Cognis(商標(biāo)名PROTEASYLTM)商購的。參見InternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook，第12版，第2卷，第2042頁(2008)，其通過引用并入。在某些方面，該豌豆提取物可以提供抗氧化能力、增加膠原蛋白I、抑制彈性蛋白酶和/或增加纖維連接蛋白產(chǎn)生。柚果皮提取物是從柚(葡萄柚)的果皮中獲得的。在一些方面，柚果皮提取物為醇提取物。在一些方面，柚果皮提取物包含黃酮。柚果皮提取物是從供應(yīng)商如J.L.PROSOURCING商購的。參見InternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook，第12版，第1卷，第610頁(2008)，其通過引用并入。在一些方面，該柚果皮提取物可以增加層粘連蛋白的產(chǎn)生和/或中斷內(nèi)皮細(xì)胞管的形成。三肽-1是含有甘氨酸、組氨酸和賴氨酸的合成肽。它具有滋潤皮膚的能力。該成分是從廣泛的來源商購得到(參見InternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook，第12版，第1卷，第458-60頁(2008)，其通過引用并入)。在具體的實例中，可以使用從UnipexInnovations(加拿大)獲得的產(chǎn)品其為三肽-1與水和右旋糖酐的結(jié)合。在一些方面，三肽-1可以增加膠原蛋白I的產(chǎn)生和/或增加透明質(zhì)酸的產(chǎn)生。橙皮苷甲基查爾酮是從廣泛的來源商購得到的化合物(參見InternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook，第12版，第1卷，第1146頁(2008)，其通過引用并入)。在一個方面，該成分可以通過使用以商標(biāo)名EyelissTM售賣的SederamaSAS(法國)混合物獲得，該混合物為水、甘油、橙皮苷甲基查爾酮、硬脂醇聚醚-20、二肽-2(纈氨酰色氨酸)和棕櫚酰四肽-7(Pal-GQPR)的組合。在一些方面，橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2和棕櫚酰四肽-7的組合提供了抗氧化能力，增加了層粘連蛋白產(chǎn)生和/或抑制了基質(zhì)金屬蛋白酶-1(MMP1)。二肽-2是含有纈氨酸和色氨酸的合成肽。它是從廣泛的來源商購得到(參見InternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook，第12版，第1卷，855頁(2008)，其通過引用并入)。在一個方面，該成分可以通過使用以商標(biāo)名EyelissTM售賣的SederamaSAS(法國)混合物來獲得。在一些方面，橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2和棕櫚酰四肽-7的組合提供了抗氧化能力，增加了層粘連蛋白產(chǎn)生和/或抑制了基質(zhì)金屬蛋白酶-1(MMP1)。棕櫚酰四肽-7是棕櫚酸與含有甘氨酸、谷氨酰胺、脯氨酸和精氨酸的合成肽的反應(yīng)產(chǎn)物，其是從廣泛的來源商購得到(參見InternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook，第12版，第2卷，第1767頁(2008)，其通過引用并入)。在一個方面，該成分可以從使用以商標(biāo)名EyelissTM售賣的SederamaSAS(法國)混合物來獲得。在一些方面，橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2和棕櫚酰四肽-7的組合提供了抗氧化能力，增加了層粘連蛋白產(chǎn)生和/或抑制了基質(zhì)金屬蛋白酶-1(MMP1)。本文描述的提取物可以是通過本領(lǐng)域已知的提取方法及其組合而制備的提取物。提取方法的非限制性實例包括使用液-液提取、固相萃取、水提取、乙酸乙酯、醇、丙酮、油脂、超臨界二氧化碳、熱、壓力、壓降提取、超聲提取等。提取物可以是液體、固體、干燥液體、再懸浮固體等。B.成分的量預(yù)期本發(fā)明的組合物可以包含任意量的本說明書所討論成分。該組合物還可以包含任意量的在本說明書全文中所描述的附加成分的組合(例如，顏料或附加的化妝品或藥物成分)。在該組合物中任意成分的濃度可以改變。例如，在非限制性的實施方案中，該組合物在其最終形式中可以包含、基本由以下成分組成或由以下成分組成：例如至少大約0.0001％、0.0002％、0.0003％、0.0004％、0.0005％、0.0006％、0.0007％、0.0008％、0.0009％、0.0010％、0.0011％、0.0012％、0.0013％、0.0014％、0.0015％、0.0016％、0.0017％、0.0018％、0.0019％、0.0020％、0.0021％、0.0022％、0.0023％、0.0024％、0.0025％、0.0026％、0.0027％、0.0028％、0.0029％、0.0030％、0.0031％、0.0032％、0.0033％、0.0034％、0.0035％、0.0036％、0.0037％、0.0038％、0.0039％、0.0040％、0.0041％、0.0042％、0.0043％、0.0044％、0.0045％、0.0046％、0.0047％、0.0048％、0.0049％、0.0050％、0.0051％、0.0052％、0.0053％、0.0054％、0.0055％、0.0056％、0.0057％、0.0058％、0.0059％、0.0060％、0.0061％、0.0062％、0.0063％、0.0064％、0.0065％、0.0066％、0.0067％、0.0068％、0.0069％、0.0070％、0.0071％、0.0072％、0.0073％、0.0074％、0.0075％、0.0076％、0.0077％、0.0078％、0.0079％、0.0080％、0.0081％、0.0082％、0.0083％、0.0084％、0.0085％、0.0086％、0.0087％、0.0088％、0.0089％、0.0090％、0.0091％、0.0092％、0.0093％、0.0094％、0.0095％、0.0096％、0.0097％、0.0098％、0.0099％、0.0100％、0.0200％、0.0250％、0.0275％、0.0300％、0.0325％、0.0350％、0.0375％、0.0400％、0.0425％、0.0450％、0.0475％、0.0500％、0.0525％、0.0550％、0.0575％、0.0600％、0.0625％、0.0650％、0.0675％、0.0700％、0.0725％、0.0750％、0.0775％、0.0800％、0.0825％、0.0850％、0.0875％、0.0900％、0.0925％、0.0950％、0.0975％、0.1000％、0.1250％、0.1500％、0.1750％、0.2000％、0.2250％、0.2500％、0.2750％、0.3000％、0.3250％、0.3500％、0.3750％、0.4000％、0.4250％、0.4500％、0.4750％、0.5000％、0.5250％、0.0550％、0.5750％、0.6000％、0.6250％、0.6500％、0.6750％、0.7000％、0.7250％、0.7500％、0.7750％、0.8000％、0.8250％、0.8500％、0.8750％、0.9000％、0.9250％、0.9500％、0.9750％、1.0％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％、2.1％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.6％、2.7％、2.8％、2.9％、3.0％、3.1％、3.2％、3.3％、3.4％、3.5％、3.6％、3.7％、3.8％、3.9％、4.0％、4.1％、4.2％、4.3％、4.4％、4.5％、4.6％、4.7％、4.8％、4.9％、5.0％、5.1％、5.2％、5.3％、5.4％、5.5％、5.6％、5.7％、5.8％、5.9％、6.0％、6.1％、6.2％、6.3％、6.4％、6.5％、6.6％、6.7％、6.8％、6.9％、7.0％、7.1％、7.2％、7.3％、7.4％、7.5％、7.6％、7.7％、7.8％、7.9％、8.0％、8.1％、8.2％、8.3％、8.4％、8.5％、8.6％、8.7％、8.8％、8.9％、9.0％、9.1％、9.2％、9.3％、9.4％、9.5％、9.6％、9.7％、9.8％、9.9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、35％、40％、45％、50％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％或其中可推得的任何范圍的至少一種在本說明書全文和權(quán)利要求提及的成分。在非限制性的方面，可以按整個組合物的重量或體積計算該百分比。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員會理解，濃度可以根據(jù)給定組合物中成分的添加、取代和/或減少而改變。C.載劑本發(fā)明的組合物可以包括或被并入到所有類型的載劑和載體中。該載劑或載體可以是藥學(xué)或皮膚病學(xué)可接受的載劑或載體。載劑或載體的非限制性實例包括水、甘油、醇、油、含硅化合物，硅酮化合物和蠟。變體和其它合適的載劑對于熟練技術(shù)人員是明顯的，并且適用于本發(fā)明。在某些方面，可以以這樣的方式挑選化合物、成分和試劑的濃度和組合，使得組合物是化學(xué)相容的且不形成從最終產(chǎn)品沉淀的復(fù)合物。D.結(jié)構(gòu)本發(fā)明的組合物可以被構(gòu)建或配制為多種不同的形式。非限制性的實例包括乳劑(例如，油包水、水包油包水、水包油、水包硅酮、硅酮包水、油包水包油、硅酮包水包油的乳液)、霜劑、潤膚露、溶液(水的和水-醇的)、無水基(例如唇膏和粉劑)、凝膠、面膜、面膜和軟膏。變體和其它結(jié)構(gòu)對于熟練技術(shù)人員是明顯的，并且適用于本發(fā)明。E.附加成分除了本發(fā)明人所公開成分的組合之外，組合物還可以包含附加成分，如化妝品成分和藥物活性成分。這些附加成分的非限制性實例在以下子章節(jié)中描述。1.化妝品成分CTFAInternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook(2004和2008)描述了可以在本發(fā)明的上下文中使用的多種非限制性化妝品成分。這些成分種類的實例包括：芳香劑(人造的和天然的；例如葡糖酸、苯氧基乙醇和三乙醇胺)、染料和著色成分(例如Blue1、Blue1Lake、Red40、二氧化鈦、D&C藍(lán)色4號、D&C綠色5號、D&C橙色4號、D&C紅色17號、D&C紅色33號、D&C紫色2號、D&C黃色10號和D&C黃色11號)、增味劑/鮮味劑(例如甜葉菊(Steviarebaudiana)(甜葉)提取物和甲醇)、吸附劑、潤滑劑、溶劑、保濕劑(包括例如潤膚劑、濕潤劑、成膜劑、密封劑和影響皮膚天然保濕機(jī)制的試劑)、阻水劑、紫外吸收劑(物理和化學(xué)吸收劑如對氨基苯甲酸(para-aminobenzoicacid，“PABA”)和相應(yīng)的PABA衍生物、二氧化鈦、氧化鋅等)、精油、維生素(例如A、B、C、D、E和K)、微量金屬(例如鋅、鈣和硒)、抗刺激物(例如類固醇和非類固醇類抗炎藥)、植物提取物(例如蘆薈(Aloevera)、甘菊、黃瓜提取物、銀杏(Ginkgobiloba)、人參和迷迭香)、抗菌劑、抗氧化劑(例如BHT和生育酚)、螯合劑(例如EDTA二鈉和EDTA四鈉)、防腐劑(例如羥苯甲酯和羥苯丙酯)、pH調(diào)節(jié)劑(例如氫氧化鈉和檸檬酸)、吸收劑(例如淀粉辛基琥珀酸鋁、高嶺土、玉米淀粉、燕麥淀粉、環(huán)糊精、滑石和沸石)、皮膚漂白和光亮劑(例如氫醌和煙酰胺乳酸酯)、濕潤劑(例如山梨醇、脲、甲基葡糖醇聚醚-20和甘露醇)、磨砂劑、防水劑(例如羥基硬脂酸鎂/羥基硬脂酸鋁)、皮膚調(diào)理劑(例如蘆薈提取物、尿囊素、沒藥醇、神經(jīng)酰胺、二甲硅油、透明質(zhì)酸、生物糖類膠-1、乙基己基甘油、戊二醇、氫化聚癸烯、辛基十二醇油酸酯和甘草酸二鉀)。在以下子章節(jié)中提供了這些成分的一些非限制性實例。a.紫外吸收劑可以與本發(fā)明的組合物組合使用的紫外吸收劑包括化學(xué)和物理的防曬物質(zhì)?？梢允褂玫幕瘜W(xué)防曬物質(zhì)的非限制性實例包括對氨基苯甲酸(PABA)、PABA酯(PABA甘油酯、二甲基PABA戊烷酯和二甲基PABA辛烷酯)、PABA丁酯、PABA乙酯、二羥基丙基PABA乙酯、苯甲酮(氧苯酮、磺異苯酮、二苯甲酮和二苯甲酮-1至12)、肉桂酸酯(甲氧基肉桂酸辛酯、對甲氧基肉桂酸異戊酯、辛基甲氧基肉桂酸酯、西諾沙酯、二異丙基肉桂酸甲酯、DEA甲氧基肉桂酸酯、二異丙基肉桂酸乙酯、辛酸二甲氧基肉桂酸甘油酯和甲氧基肉桂酸乙酯)、肉桂酸酯、水楊酸酯(均甲基水楊酸酯、水楊酸芐酯、水楊酸乙二酯、異丙基芐基水楊酸酯等)、鄰氨基苯甲酸鹽/酯、尿刊酸乙酯、胡莫柳酯、水楊酸辛酯、二苯甲?；淄檠苌?例如阿伏苯宗)、氰雙苯丙烯酸辛酯、辛基三嗪酮、二沒食子三油酸酯、氨基苯甲酸甘油酯、含二羥基丙酮的指甲花醌、乙基己基三嗪酮、二辛基丁酰胺基三嗪酮、苯亞甲基丙二酸脂聚硅氧烷、對苯二亞甲基二莰酮磺酸、苯基二苯并咪唑四磺酸酯二鈉、二乙氨基羥基苯甲?；郊姿峒乎ァ㈦p二乙氨基羥基苯甲?；郊姿狨?、雙苯并惡唑基苯基乙基己基亞氨基三嗪、甲酚曲唑三硅氧烷、亞甲基雙苯并三唑基四甲基丁基苯酚和雙乙基己氧基苯酚甲氧基苯基三嗪、4-甲基芐亞基莰酮和4-甲氧基肉桂酸異戊酯。物理防曬物質(zhì)的非限制性實例包括高嶺土、滑石、凡士林和金屬氧化物(例如二氧化鈦和氧化鋅)。b.保濕劑可以與本發(fā)明的組合物一起使用的保濕劑的非限制性實例包括氨基酸、硫酸軟骨素、雙甘油、赤蘚糖醇、果糖、葡萄糖、甘油、甘油聚合物、乙二醇、1,2,6-己三醇、蜂蜜、透明質(zhì)酸、氫化蜂蜜、氫化淀粉水解物、肌醇、乳糖醇、麥芽糖醇、麥芽糖、甘露醇、天然保濕因子、PEG-15丁二醇、聚甘油山梨醇、吡咯烷酮羧酸鹽、PCA鉀、丙二醇、葡糖醛酸鈉、PCA鈉、山梨醇、蔗糖、海藻糖、尿素和木糖醇。其他的實例包括乙?；蛎?、乙?；蛎肌⒈彼?、藻類提取物、庫拉索蘆薈(Aloebarbadensis)、庫拉索蘆薈提取物、庫拉索蘆薈凝膠、藥蜀葵(Altheaofficinalis)提取物、杏(Prunusarmeniaca)核油、精氨酸、精氨酸天冬氨酸鹽、山金車(Arnicamontana)提取物、天冬氨酸、鱷梨(Perseagratissima)油、屏障鞘脂、丁醇、蜂蠟、山崳醇、β-谷甾醇、樺木(Betulaalba)樹皮提取物、紫草科(Boragoofficinalis)提取物、假葉樹(Ruscusaculeatus)提取物、丁二醇、金盞花(Calendulaofficinalis)提取物、金盞花油、小燭樹(Euphorbiacerifera)蠟、菜子油、辛酸/癸酸甘油三酯、小豆蔻(Elettariacardamomum)油、巴西棕櫚(Coperniciacerifera)蠟、胡蘿卜(Daucuscarotasativa)油、蓖麻(Ricinuscommunis)油、神經(jīng)酰胺、地蠟、鯨蠟硬脂醇聚醚-5、鯨蠟硬脂醇聚醚-12、鯨蠟硬脂醇聚醚-20、辛酸十六酯、鯨蠟醇聚醚-20、鯨蠟醇聚醚-24、鯨蠟醋酸鹽、鯨蠟醇辛酸酯、棕櫚酸十六酯、洋甘菊(Anthemisnobilis)油、膽固醇、膽固醇酯、膽甾醇基羥基硬脂酸酯、檸檬酸、鼠尾草(Salviasclarea)油、可可(Theobromacacao)油、椰油醇-辛酸酯/癸酸酯、椰子(Cocosnucifera)油、膠原蛋白、膠原氨基酸、玉米(Zeamays)油、脂肪酸、油酸癸酯、二甲基硅氧烷共聚醇、聚二甲基硅氧烷醇、己二酸二辛酯、琥珀酸二辛酯、二聚季戊四醇六辛酸酯/六癸酸酯、DNA、赤蘚醇、乙氧基乙二醇、亞油酸乙酯、藍(lán)桉(Eucalyptusglobulus)油、月見草(Oenotherabiennis)油、脂肪酸、天竺葵(Geraniummaculatum)油、葡糖胺、葡萄糖谷氨酸酯、谷氨酸、甘油聚醚-26、甘油、丙三醇、二硬脂酸甘油酯、羥基硬脂酸甘油酯、月桂酸甘油酯、亞油酸甘油酯、肉豆蔻酸甘油酯、油酸甘油酯、羥基硬脂酸甘油酯、硬脂酸甘油酯SE、甘氨酸、乙二醇硬脂酸酯、乙二醇硬脂酸酯SE、葡糖氨基葡聚糖、葡萄(Vitisvinifera)籽油、榛子(Corylusamericana)堅果油、榛子(Corylusavellana)堅果油、己二醇、透明質(zhì)酸、雜交紅花(Carthamustinctorius)油、氫化蓖麻油、氫化椰油甘油酯、氫化椰子油、氫化羊毛脂、氫化卵磷脂、氫化棕櫚甘油酯、氫化棕櫚核油、氫化大豆油、氫化牛脂酸甘油酯、氫化植物油、水解膠原蛋白、水解彈性蛋白、水解葡糖氨基葡聚糖、水解角蛋白、水解大豆蛋白、羥基化羊毛脂、羥基脯氨酸、異鯨蠟硬脂酸酯、異鯨蠟醇硬脂酰硬脂酸酯、油酸異癸酯、異硬脂酸異丙酯、羊毛脂酸異丙酯、肉豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸異丙酯、異硬脂酰胺DEA、異硬脂酸、異硬脂醇乳酸酯、異硬脂醇新戊酸酯、茉莉(Jasminumofficinale)油、荷荷巴(Buxuschinensis)油、巨藻、夏威夷果(Aleuritesmoluccana)堅果油、乳酰胺MEA、羊毛脂醇聚醚-16、羊毛脂醇聚醚-10乙酸酯、羊毛脂、羊毛脂酸、羊毛脂醇、羊毛脂油、羊毛脂蠟、薰衣草(Lavandulaangustifolia)油、卵磷脂、檸檬(Citrusmedicalimonum)油、亞油酸、亞麻酸、澳洲胡桃(Macadamiaternifolia)堅果油、麥芽糖醇、洋甘菊(Chamomillarecutita)油、甲基葡萄糖倍半硬脂酸酯、甲基硅烷醇PCA酯、礦物油、貂油、被孢霉油、乳酸肉豆蔻酯、肉豆蔻酸肉豆蔻酯、丙酸肉豆蔻酯、新戊二醇基二辛酸酯/二癸酸酯、辛基十二烷醇、辛基十二烷醇肉豆蔻酸酯、硬脂酰硬脂酸辛基十二烷酯、羥基硬脂酸辛酯、棕櫚酸辛酯、水楊酸辛酯、硬脂酸辛酯、油酸、橄欖(Oleaeuropaea)油、橙(Citrusaurantiumdulcis)油、棕櫚(Elaeisguineensis)油、棕櫚酸、泛硫乙胺、泛醇、泛醇基乙基醚、石蠟、PCA、桃(Prunuspersica)核油、花生(Arachishypogaea)油、PEG-8C12-18酯、PEG-15可可胺、PEG-150二硬脂酸酯、PEG-60異硬脂酸甘油酯、PEG-5硬脂酸甘油酯、PEG-30硬脂酸甘油酯、PEG-7氫化蓖麻油、PEG-40氫化蓖麻油、PEG-60氫化蓖麻油、PEG-20甲基葡萄糖倍半硬脂酸酯、PEG-40山梨坦油酸酯、PEG-5大豆甾醇、PEG-10大豆甾醇、PEG-2硬脂酸酯、PEG-8硬脂酸酯、PEG-20硬脂酸酯、PEG-32硬脂酸酯、PEG-40硬脂酸酯、PEG-50硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、PEG-150硬脂酸酯、十五酸內(nèi)酯、胡椒薄荷(Menthapiperita)油、凡士林、磷脂、多氨基多糖縮合物、聚甘油-3二異硬脂酸酯、聚季銨鹽-24、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯85、肉豆蔻酸鉀、棕櫚酸鉀、丙二醇、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯、丙二醇二辛酸酯、丙二醇二壬酸酯、丙二醇月桂酸酯、丙二醇硬脂酸酯、丙二醇硬脂酸酯SE、PVP、吡哆醇二棕櫚酸酯、視黃醇、棕櫚酸視黃酯、水稻(Oryzasativa)糠油、RNA、迷迭香(Rosmarinusofficinalis)油、玫瑰油、紅花(Carthamustinctorius)油、鼠尾草(Salviaofficinalis)油、檀香(Santalumalbum)油、絲氨酸、血清蛋白、芝麻(Sesamumindicum)油、乳木果(Butyrospermumparkii)、蠶絲粉、硫酸軟骨素鈉、透明質(zhì)酸鈉、乳酸鈉、棕櫚酸鈉、PCA鈉、聚谷氨酸鈉、可溶性膠原蛋白、山梨坦月桂酸酯(鹽)、山梨坦油酸酯、山梨坦棕櫚酸酯(鹽)、山梨坦倍半油酸酯、山梨坦硬脂酸酯、山梨糖醇、大豆(Glycinesoja)油、鞘脂、角鯊?fù)椤⒔酋徬?、硬脂酰胺MEA-硬脂酸酯(鹽)、硬脂酸、硬脂氧基二甲硅氧烷、硬脂氧基三甲基硅烷、硬脂醇、硬脂醇甘草亭酸酯、硬脂醇庚酸酯、硬脂醇硬脂酸酯、向日葵(Helianthusannuus)籽油、甜杏仁(Prunusamygdalusdulcis)油、合成蜂蠟、生育酚、生育酚乙酸酯、生育酚亞油酸酯(鹽)、三山崳精、十三烷基新戊酸酯、十三烷基硬脂酸酯、三乙醇胺、三硬脂精、尿素、植物油、水、蠟、小麥(Triticumvulgare)胚芽油、和依蘭(Canangaodorata)油。c.抗氧化劑可以與本發(fā)明的組合物一起使用的抗氧化劑的非限制性實例包括乙酰半胱氨酸、抗壞血酸多肽、抗壞血酸二棕櫚酸酯、抗壞血酸甲基硅烷醇果膠酸酯、抗壞血酸棕櫚酸酯、抗壞血酸硬脂酸酯(鹽)、BHA、BHT、叔丁基氫醌、半胱氨酸、半胱氨酸HCI、二戊基氫醌、二叔丁基氫醌、二鯨蠟醇硫代二丙酸酯、二油基生育酚甲基硅烷醇、抗壞血酸硫酸酯二鈉、二硬脂醇硫代二丙酸酯、雙十三烷醇硫代二丙酸酯、沒食子酸月桂酯、異抗壞血酸、抗壞血酸的酯、阿魏酸乙酯、阿魏酸、沒食子酸酯、氫醌、巰基乙酸異辛酯、曲酸、抗壞血酸鎂、磷酸抗壞血酸酯鎂鹽、甲基硅烷醇抗壞血酸酯、天然植物抗氧化劑如綠茶或葡萄籽提取物、去甲二氫愈創(chuàng)木酸、沒食子酸辛酯、苯巰基乙酸、磷酸抗壞血酸酯生育酚酯鉀鹽、亞硫酸鉀、沒食子酸丙酯、醌類、迷迭香酸、抗壞血酸鈉、亞硫酸氫鈉、異抗壞血酸鈉、偏二亞硫酸鈉、亞硫酸鈉、超氧化物歧化酶、巰基乙酸鈉、山梨醇縮糠醛、硫二甘醇、亞硫基二乙酰胺、硫二乙酸、巰基乙酸、硫代乳酸、硫代水楊酸、生育酚聚醚-5、生育酚聚醚-10、生育酚聚醚-12、生育酚聚醚-18、生育酚聚醚-50、生育酚、托可索倫、生育酚乙酯、生育酚亞油酸酯(鹽)、煙酸生育酚酯、生育酚琥珀酸酯和三(壬基苯基)亞磷酸酯(鹽)。d.結(jié)構(gòu)劑在其它非限制性方面，本發(fā)明的組合物可以包含結(jié)構(gòu)劑。在某些方面，結(jié)構(gòu)劑協(xié)助向組合物提供流變性質(zhì)以促進(jìn)組合物的穩(wěn)定性。在其它方面，結(jié)構(gòu)劑還可以起乳化劑或表面活性劑的作用。結(jié)構(gòu)劑的非限制性實例包括硬脂酸、棕櫚酸、硬脂醇、鯨蠟醇、山崳醇、硬脂酸、棕櫚酸、具有平均約1至約21個亞乙基氧單元的硬脂醇的聚乙二醇醚、具有平均約1到約5個亞乙基氧單元的鯨蠟醇的聚乙二醇醚及其混合物。e.乳化劑在本發(fā)明的某些方面，組合物不包含乳化劑。然而，在其它方面，組合物可以包含一種或更多種乳化劑。乳化劑可以降低相間的界面張力并改善乳液的劑型和穩(wěn)定性。乳化劑可以是非離子的、陽離子的、陰離子的和兩性離子的乳化劑(參見McCutcheon(1986)；美國專利第5011681號；第4421769號；第3755560號)。非限制性實例包括甘油酯、丙二醇酯、聚乙二醇的脂肪酸酯、聚丙二醇的脂肪酸酯、山梨醇酯、失水山梨醇酐酯、羧酸共聚物、葡萄糖酯和葡萄糖醚、乙氧基醚、乙氧基醇、磷酸烷基酯、聚氧乙烯脂肪醚磷酸酯(鹽)、脂肪酸酰胺、?；樗狨ァ⒅舅猁}、TEA硬脂酸酯、DEA油醇聚醚-3磷酸酯、聚乙二醇20山梨醇酐月桂酸酯(聚山梨醇酯20)、聚乙二醇5大豆甾醇、硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-20、硬脂醇聚醚-21、鯨蠟硬脂醇聚醚-20、鯨蠟硬脂基葡糖苷、鯨蠟硬脂醇、C12-13鏈烷醇聚醚-3、PPG-2甲基葡萄糖醚二硬脂酸酯、PPG-5-鯨蠟醇聚醚-20、雙-PEG/PPG-20/20聚二甲基硅氧烷、鯨蠟醇聚醚-10、聚山梨醇酯80、鯨蠟磷酸酯、鯨蠟磷酸酯鉀、二乙醇胺鯨蠟基磷酸酯(鹽)、聚山梨醇酯60、甘油硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯(鹽)、十二烷醇、十二烷醇葡萄糖苷及其混合物。f.含硅酮的化合物在非限制性方面，含硅酮的化合物包括分子主鏈由交替的硅和氧原子與連接在硅原子上的側(cè)基組成的聚合產(chǎn)物一族中的任何成員。通過改變-Si-O-鏈的長度、側(cè)基和交聯(lián)，硅酮可以合成為各種材料。它們的稠度可以從液體變化到凝膠再到固體?？梢栽诒景l(fā)明的環(huán)境下使用的含硅酮的化合物包括在本說明書中所描述的或本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的那些。非限制性實例包括硅油(例如揮發(fā)性和非揮發(fā)性油)、凝膠和固體。在某些方面，含硅酮的化合物包括硅油，例如聚有機(jī)硅氧烷。根據(jù)預(yù)期的應(yīng)用(例如，針對特定區(qū)域如皮膚、毛發(fā)或眼睛)，聚有機(jī)硅氧烷的非限制性實例包括聚二甲基硅氧烷、環(huán)聚二甲基硅氧烷、聚硅氧烷-11、苯基三甲基聚硅氧烷、三甲基硅烷基氨端聚二甲基硅氧烷、硬脂氧基三甲基硅烷或其混合物和其它任何給定比例的有機(jī)硅氧烷材料以達(dá)到期望的稠度和應(yīng)用特征?！皳]發(fā)性硅油”包括具有低氣化熱的硅油，即通常低于約50卡每克的硅油。揮發(fā)性硅油的非限制性實例包括：環(huán)聚二甲基硅氧烷，如DowCorning344Fluid、DowCorning345Fluid、DowCorning244Fluid和DowCorning245Fluid、VolatileSilicon7207(康涅狄格州，丹伯里，UnionCarbideCorp.)；低黏度的聚二甲基硅氧烷，即具有約50cst或更低黏度的聚二甲基硅氧烷(例如，如DowCorning200-0.5cstFluid的聚二甲基硅氧烷)。DowCorningFluid可以從密歇根州米德蘭的DowCorningCorporation購得。在CTFACosmeticIngredientDictionary的第三版中(通過引用并入)，環(huán)聚二甲基硅氧烷和聚二甲基硅氧烷分別被描述為環(huán)狀二甲基聚硅氧烷化合物和用三甲基硅氧基單元封端的完全甲基化的線性硅氧烷聚合物的混合物。可以在本發(fā)明的環(huán)境下使用的其它非限制性的揮發(fā)性硅油包括從紐約州沃特福德的GeneralElectricCo.的SiliconeProductsDiv.和密歇根州艾德里安的StaufferChemicalCo.的SWSSiliconesDiv.購得的那些。g.精油精油包括來自草本植物、花朵、樹木和其它植物的油。這類油一般以植物細(xì)胞間微小的液滴存在，并可以用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的若干方法進(jìn)行提取(例如，蒸汽蒸餾、脂析法(即使用脂肪提取)、浸漬、溶劑提取或機(jī)械壓榨)。當(dāng)這類油暴露于空氣時其趨于揮發(fā)(即揮發(fā)性油)。因此，雖然許多精油是無色的，但是它們可以隨著時間被氧化且變得更深色。精油不溶于水但可溶于醇、醚、非揮發(fā)性油(植物的)和其它有機(jī)溶劑。在精油中發(fā)現(xiàn)的典型的物理特征包括約160℃至240℃變化的沸點和約0.759至約1.096的密度。精油一般以油被發(fā)現(xiàn)的來源植物命名。例如，玫瑰油或胡椒薄荷油分別來自玫瑰或胡椒薄荷植物?？梢栽诒景l(fā)明的環(huán)境下使用的精油的非限制性實例包括芝麻油、澳洲堅果油、茶樹油、月見草油、西班牙鼠尾草油、西班牙迷迭香油、芫荽油、百里香油、眾香果油、玫瑰油、大茴香油、鳳仙花油、佛手柑油、玫瑰木油、香柏油、甘菊油、鼠尾草油、香紫蘇油、丁香油、柏木油、桉油、茴香油、海茴香油、乳香油、香葉油、姜油、葡萄柚油、茉莉油、杜松子油、薰衣草油、檸檬油、檸檬草油、梨莓油、橘子油、甘牛至油、沒藥油、苦橙花油、橙油、廣霍香油、胡椒油、黑胡椒油、苦橙葉油、松油、奧圖玫瑰油、迷迭香油、檀香油、綠薄荷油、甘松油、香根草油、冬青油、依蘭依蘭。也預(yù)期本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它精油在本發(fā)明的環(huán)境下是有用的。h.增稠劑包括增稠劑或膠凝劑在內(nèi)的增稠劑包括可以增加組合物黏度的物質(zhì)。增稠劑包括可以增加組合物黏度而基本上不改變組合物內(nèi)活性成分功效的那些。增稠劑也可以增加本發(fā)明的組合物的穩(wěn)定性。在本發(fā)明的某些方面，增稠劑包括氫化聚異丁烯或三羥硬脂精，丙烯酰二甲基牛磺酸銨/VP共聚物或其混合物?？梢栽诒景l(fā)明的環(huán)境下使用的附加增稠劑的非限制性實例包括羧酸聚合物、交聯(lián)的聚丙烯酸酯聚合物、聚丙烯酰胺聚合物、多糖和膠。羧酸聚合物的實例包括含有一種或更多種衍生自丙烯酸、取代的丙烯酸和這些丙烯酸和取代的丙烯酸的鹽和酯的單體的交聯(lián)化合物，其中所述交聯(lián)劑含有兩個或更多個碳-碳雙鍵，并衍生自多元醇(參見美國專利第5087445號；第4509949號；第2798053號；CTFAInternationalCosmeticIngredientDictionary，第四版，1991，第12頁和第80頁)。市售羧酸聚合物的實例包括卡波姆，其為丙烯酸與蔗糖或季戊四醇的烯丙基醚交聯(lián)的均聚物(例如，來自B.F.Goodrich的CarbopolTM900系列)。交聯(lián)的聚丙烯酸酯聚合物的非限制性實例包括陽離子型和非離子型聚合物。美國專利第5100660號、第4849484號、第4835206號、第4628078號、第4599379號中描述了實例。聚丙烯酰胺聚合物(包括非離子的聚丙烯酰胺聚合物，其含有取代的支化或未支化聚合物)的非限制性實例包括聚丙烯酰胺、異構(gòu)烷烴和月桂醇聚醚-7、丙烯酰胺和被丙烯酸和取代的丙烯酸取代的丙烯酰胺的多嵌段共聚物。多糖的非限制性實例包括纖維素、羧甲基羥乙基纖維素、乙酸丙酸羧酸纖維素酯、羥乙基纖維素、羥乙基乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、甲基羥乙基纖維素、微晶纖維素、纖維素硫酸鈉及其混合物。其他實例為烷基取代的纖維素，其中纖維素聚合物的羥基被羥烷基化(優(yōu)選地羥乙基化或羥丙基化)以形成羥烷基化纖維素，其然后通過醚鍵用C10-C30直鏈或支鏈烷基基團(tuán)進(jìn)一步改性。一般來說，這些聚合物為C10-C30直鏈或支鏈醇與羥烷基纖維素的醚。其它有用的多糖包括硬葡聚糖類，其包含(1-3)連接的葡萄糖單元的直鏈以及每三個單元具有(1-6)連接的葡萄糖。本發(fā)明可以使用的膠的非限制性實例包括阿拉伯樹膠、瓊脂、藻膠、藻酸、藻酸銨、支鏈淀粉、藻酸鈣、卡拉膠鈣、肉毒堿、卡拉膠、糊精、明膠、結(jié)冷膠、瓜爾豆膠、瓜爾膠羥丙基氯化銨、鋰蒙脫石、透明質(zhì)酸、水合硅石、羥丙基殼聚糖、羥丙基瓜爾膠、卡拉亞膠、巨藻、豆膠、納豆膠、藻酸鉀、卡拉膠鉀、藻酸丙二醇酯、菌核膠、羧甲基右旋糖酐鈉、卡拉膠鈉、黃蓍膠、黃原膠及其混合物。i.防腐劑在本發(fā)明的環(huán)境下可以使用的防腐劑的非限制性實例包括季銨鹽防腐劑(例如聚季銨鹽-1和鹵代芐烷銨(例如苯扎氯銨(“BAC”)和苯扎溴銨)、苯甲酸酯類(例如羥苯甲酯和羥苯丙酯)、苯氧乙醇、芐醇、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫汞撒或其組合。2.藥物成分還預(yù)期藥物活性劑對本發(fā)明的組合物是有用的。藥物活性劑的非限制性實例包括抗粉刺劑、用于處理酒渣鼻的試劑、止痛劑、麻醉劑、肛門直腸的、抗組胺藥、包括非甾族消炎藥在內(nèi)的消炎劑、抗生素、抗真菌劑、抗病毒劑、抗菌劑、抗癌活性物、抗疥螨劑、滅虱劑、抗腫瘤藥、止汗藥、止癢劑、抗牛皮癬藥、抗脂溢劑、生物活性蛋白和多肽、燒傷處理劑、燒灼劑、脫色劑、脫毛劑、尿布疹處理劑、酶、毛發(fā)生長刺激劑、含有DFMO及其鹽和類似物的毛發(fā)生長抑制劑、止血劑、角質(zhì)分離劑、口瘡處理劑、唇皰疹處理劑、牙科或牙周處理劑、光敏感活性物、皮膚保護(hù)劑/屏障劑、含有激素和皮質(zhì)激素的類固醇、曬傷處理劑、遮光劑、經(jīng)皮活性物、鼻活性物、陰道活性物、疣處理劑、創(chuàng)傷處理劑、創(chuàng)傷愈合劑等。F.試劑盒還預(yù)期了用于本發(fā)明的某些方面的試劑盒。例如，本發(fā)明的組合物可以包括在試劑盒內(nèi)。試劑盒可以包括容器。容器可以包括瓶子、金屬管、層壓管、塑料管、分配器、壓力容器、屏障容器、包裝、分室、唇膏容器、壓縮容器、能夠保存化妝品組合物的化妝品盤，或其它類型的將分散體或組合物或期望的瓶子、分液器或包裝保存其中的容器如注射或吹塑成型的塑料容器。試劑盒和/或容器在其表面可以包含標(biāo)記。例如，標(biāo)記可以是單詞、短語、縮寫、圖片或符號。所述容器可以分散預(yù)定量的組合物。在其他實施方案中，可以擠壓容器(例如金屬、層壓或塑料管)以分散期望量的組合物。組合物可以分散為噴霧、氣溶膠、液體、流體或半固體。容器可以具有噴霧、抽吸或擠壓機(jī)制。試劑盒還可以包含使用試劑盒成分以及任何包含于容器內(nèi)的組合物的用途的說明書。說明書可以包含如何施用、使用和保存組合物的解釋。實施例并入以下實施例以說明本發(fā)明的優(yōu)選實施方式。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解，以下實施例中所公開的技術(shù)代表本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)的在本發(fā)明的實踐中發(fā)揮良好作用的技術(shù)，從而視為構(gòu)成了其優(yōu)選的實施方式。然而，根據(jù)本公開，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解，在所公開的具體實施方案中可以做出許多改變，并仍然獲得相同或相似的結(jié)果，而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。實施例1含有本文公開成分的制劑被制備成局部皮膚和/或毛發(fā)用組合物。作為非限制性實施例，表1中的制劑被制備成眼霜。本文所公開和要求保護(hù)的所有組合物根據(jù)本公開即可以制成和實現(xiàn)，無需過度的實驗。當(dāng)本發(fā)明的組合物和方法已經(jīng)從優(yōu)選的實施方案的角度進(jìn)行了描述時，所述組合物以及在本文所描述方法的步驟或步驟的順序中可以實施變化，而不脫離本發(fā)明的構(gòu)思、精神和范圍對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是明顯的。更具體來說，明顯地，化學(xué)和生理兩方面都相關(guān)的某些試劑可以替代本文所描述的試劑，同時會實現(xiàn)相同或相似的結(jié)果。所有對本領(lǐng)域技術(shù)人員明顯的這類相似的替代和改變都被視為在如所附的權(quán)利要求限定的本發(fā)明的構(gòu)思、范圍和概念內(nèi)。表1*成分％濃度(以重量計)水48甘油11凡士林8礦物油8氫化聚癸烯5鯨蠟酯4雙-二甘油多?；憾狨?23丁二醇2氫化聚異丁烯2山梨坦橄欖油酸酯2鯨蠟硬脂醇橄欖油酸酯2鯨蠟醇棕櫚酸酯1鯨蠟硬脂醇1山梨坦棕櫚酸酯0.8四己基癸醇抗壞血酸酯0.5二氧化硅0.5鯨蠟硬脂醇聚醚-200.3重氮烷基脲0.3生育酚乙酸酯0.2三乙醇胺0.2丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聯(lián)聚合物0.1丙二醇0.1積雪草提取物0.1荷花玉蘭樹皮提取物或厚樸樹皮提取物0.06橙皮苷甲基查爾酮0.05豌豆提取物0.02柚果皮提取物0.01積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物(任選的)0.002望春玉蘭花提取物0.002二肽-20.001棕櫚酰四肽-70.0003三肽-10.00005仙人果果實提取物(任選的)0.0005賦形劑**適量*制劑可以通過在70℃至75℃下加熱并在燒杯中混合所述成分直到均勻來制備。然后，所述制劑可以冷卻到標(biāo)準(zhǔn)室溫(20℃至25℃)。進(jìn)一步，如果需要，例如，可以添加附加成分以調(diào)整組合物的流變性能。**例如，可以添加賦形劑用以改變組合物的流變性能?；蛘撸梢愿淖兯牧?，只要組合物中水的量為至少35％(重量/重量)，優(yōu)選40％至60％(重量/重量)。實施例2(活性成分的體外功效)通過以下方法確定成分的功效。以下是可以在本發(fā)明的環(huán)境中使用的非限制性試驗。應(yīng)認(rèn)識到，可以使用其它測試過程，包括例如客觀的和主觀的過程。確定了積雪草提取物促進(jìn)透明質(zhì)酸合成、增加層粘連蛋白產(chǎn)生、抑制黑色素生成并降低酪氨酸酶活性。還確定了積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物增加透明質(zhì)酸產(chǎn)生并降低酪氨酸酶活性。確定了荷花玉蘭樹皮提取物抑制腫瘤壞死因子α(TNFα)、具有抗氧化能力、增加層粘連蛋白產(chǎn)生、并抑制黑色素生成。確定的是厚樸樹皮提取物提供抗氧化能力、抑制黑色素生成、抑制炎性細(xì)胞因子表達(dá)、抑制TNF-α、抑制IL-1β、抑制IL-6、抑制IL-10、抑制IL-2并抑制COX-1。確定的是豌豆提取物具有抗氧化能力、增加膠原蛋白I、抑制彈性蛋白酶并增加纖維連接蛋白產(chǎn)生。確定的是柚果皮提取物增加層粘連蛋白產(chǎn)生并破壞內(nèi)皮細(xì)胞管形成。確定的是望春玉蘭花提取物抑制血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)并破壞內(nèi)皮細(xì)胞管形成。確定的是橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2和棕櫚酰四肽-7的組合具有抗氧化能力、增加層粘連蛋白產(chǎn)生并抑制基質(zhì)金屬蛋白酶-1(MMP1)。確定的是三肽-1增加膠原蛋白I產(chǎn)生并增加透明質(zhì)酸產(chǎn)生。表2中示出了定量體外結(jié)果的概要且在下文提供了用于測定成分性質(zhì)的方法。表2刺激透明質(zhì)酸產(chǎn)生-積雪草提取物、三肽-1和積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物分別顯示了在真皮成纖維細(xì)胞中刺激透明質(zhì)酸(HA)的產(chǎn)生。HA是與基質(zhì)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性有關(guān)的多糖，并與向組織和細(xì)胞提供膨壓有關(guān)。使用來自R&DSystems(DY3614)的HyaluronanDuoSetELISA試劑盒測定在經(jīng)處理的和未經(jīng)處理的成人真皮成纖維(humandermalfibroblast,HDFa)細(xì)胞中的HA產(chǎn)生。確定的是積雪草提取物、三肽-1和積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物分別以+91％、+93％和+48％刺激真皮成纖維(HDFa)細(xì)胞中的HA產(chǎn)生。對于樣品，在處理前，在37℃和10％的CO2下在饑餓培養(yǎng)基中(Dulbecco’sModifiedEagleMedium中的0.15％的胎牛血清和1％的青霉素鏈霉素溶液)培養(yǎng)由CascadeBiologics獲得的亞融合HDFa細(xì)胞(C-13-5C)72小時。之后在檢測處理、陽性對照(來自Sigma-Aldrich的佛波酯(P1585)和衍生于來自Sigma-Aldrich的生長因子的血小板(P3201))或無添加劑下用新鮮的饑餓培養(yǎng)基孵育該細(xì)胞24小時。收集培養(yǎng)基并在-80℃下冷凍直至在ELISA試驗中使用。簡略來說，該ELISA檢測采用了定量三明治酶免疫分析技術(shù)，由此將對HA特異的捕獲抗體預(yù)先涂覆在微孔板上。將標(biāo)準(zhǔn)品、來自經(jīng)處理的和未處理細(xì)胞的培養(yǎng)基移液至微孔板，使得存在的任何HA與固定的抗體結(jié)合。沖走任何未結(jié)合的物質(zhì)后，添加對HA特異的酶聯(lián)檢測抗體到孔中。接著沖洗以去除任何未結(jié)合的抗體-酶試劑，添加底物溶液到孔中以使其與最初步驟中結(jié)合的HA量成比例顯色。在特定時間停止顯色，使用酶標(biāo)儀測量在450nm處的顏色強(qiáng)度。層粘連蛋白、纖維連接蛋白和膠原蛋白的刺激試驗-積雪草提取物、荷花玉蘭樹皮提取物、柚果皮提取物，以及橙皮苷甲基查爾酮二肽-2和棕櫚四肽-7的組合已經(jīng)顯示出增加層粘連蛋白的分泌。豌豆提取物已經(jīng)顯示出增加纖維連接蛋白的分泌。豌豆提取物和三肽-1已經(jīng)顯示出增加原膠原蛋白(膠原蛋白前體)的分泌。層粘連蛋白和纖維粘連蛋白是真皮-表皮連接(dermal-epidermaljunction,DEJ)(也被稱為基膜)中的主要蛋白質(zhì)。DEJ位于真皮和表皮聯(lián)結(jié)之間，形成叫做表皮突的指狀突出。表皮細(xì)胞從真皮中的血管接收其養(yǎng)分。表皮突增大了暴露于這些血管和所需養(yǎng)分的表皮的表面積。DEJ提供兩種組織隔室的粘連，并控制皮膚的結(jié)構(gòu)完整性。層粘連蛋白和纖維粘連蛋白是位于DEJ中的兩種結(jié)構(gòu)性糖蛋白。被認(rèn)為是將細(xì)胞保持在一起的膠，層粘連蛋白和纖維粘連蛋白由真皮成纖維細(xì)胞分泌以幫助促進(jìn)表皮細(xì)胞與DEJ的細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞間粘連。膠原蛋白是對皮膚結(jié)構(gòu)關(guān)鍵的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白。增加的膠原蛋白合成幫助改善皮膚的緊實度和彈性。在酶聯(lián)免疫吸附測試(ELISA)中，使用針對每種蛋白質(zhì)的免疫熒光抗體在培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞中觀測層粘連蛋白、纖維連接蛋白和原膠原蛋白的分泌。確定的是積雪草提取物、荷花玉蘭樹皮提取物、柚果皮提取物，以及橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2和棕櫚四肽-7的組合分別以+117％、+95％、+132％和+117％增加層粘連蛋白的分泌。確定的是豌豆提取物以+31％增加纖維連接蛋白的分泌。還確定的是豌豆提取物和三肽-1分別以+46％和+20％增加原膠原蛋白的分泌。簡略來說，通過對亞融合正常成人表皮成纖維細(xì)胞(CascadeBiologics)的細(xì)胞上清液中的這些蛋白質(zhì)進(jìn)行定量來觀測層粘連蛋白、纖維連接蛋白和原膠原蛋白的分泌，正常成人表皮成纖維細(xì)胞使用或不使用最終濃度為1.0％的測試成分在37℃、10％的CO2中、在含有10％胎牛血清(Mediatech)的標(biāo)準(zhǔn)DMEM生長培養(yǎng)基中處理3天。孵育之后，在酶聯(lián)免疫吸附測試(ELISA)中使用針對每種蛋白質(zhì)的免疫熒光抗體，測量層粘連蛋白、纖維連接蛋白和原膠原蛋白。對于細(xì)胞代謝活性測量是標(biāo)準(zhǔn)化的，通過3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(MTS)的生物轉(zhuǎn)化來測定。彈性蛋白酶活性的抑制-豌豆提取物已經(jīng)顯示出抑制彈性蛋白酶的活性。彈性蛋白酶是分解彈性蛋白的酶。使用來自MolecularProbes(尤金，美國俄勒岡州)的彈性蛋白酶檢測(試劑盒#E-12056)來測定豌豆提取物對彈性蛋白酶活性抑制。該試劑盒用于針對測定彈性蛋白酶活性抑制的體外酶抑制的檢測。確定的是豌豆提取物以20％抑制彈性蛋白酶活性。簡略來說，試劑盒含有可溶牛頸韌帶彈性蛋白，其用染料標(biāo)記以使共軛熒光淬滅。非熒光牛頸韌帶彈性蛋白底物可以被彈性蛋白酶或其他蛋白酶消化以產(chǎn)生高熒光片段。得到的熒光增強(qiáng)用熒光微孔板測定儀進(jìn)行觀測。來自彈性蛋白底物的消化產(chǎn)物在約505nm處具有吸收最大值，在約515nm處具有熒光發(fā)射最大值。將豌豆提取物加入酶切反應(yīng)或不對酶切反應(yīng)進(jìn)行處理以測定彈性蛋白酶的抑制。作為陽性對照，使用N-甲氧基琥珀酰基-丙氨酸-丙氨酸-脯氨酸-纈氨酸-氯甲基酮作為選擇性的、共同性的彈性蛋白酶活性抑制劑。基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)的抑制-橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2和棕櫚酰四肽-7的組合已經(jīng)顯示出抑制MMP1。MMP是胞外蛋白酶，其憑借廣泛的底物特異性在許多正常狀態(tài)和疾病狀態(tài)中起作用。MMP1底物包括膠原蛋白IV。在存在或不存在橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2和棕櫚酰四肽-7的組合的情況下，使用MolecularProbesEnz/ChekGelatinase/Collagenase檢測試劑盒(#E12055)測定MMP1的活性。確定的是橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2和棕櫚酰四肽-7的組合以23％抑制MMP1的活性。簡略來說，該試劑盒使用了熒光明膠底物以檢測體外的MMP1蛋白酶活性。在熒光明膠底物的蛋白水解切割后，顯示出亮綠色熒光并使用熒光酶標(biāo)儀來觀測亮綠色熒光以測量酶活性。在存在或不存在純化酶和底物的條件下孵育試驗材料或?qū)φ赵噭┮源_定其蛋白酶抑制能力。B16色素沉著檢測-積雪草提取物、荷花玉蘭樹皮提取物和厚樸樹皮提取物已經(jīng)顯示抑制黑色素生成。黑素生成是黑素細(xì)胞產(chǎn)生黑色素的過程，黑色素是天然產(chǎn)生的給予皮膚、毛發(fā)和眼睛顏色的色素。抑制黑素生成有益于預(yù)防皮膚變黑和減輕與老化有關(guān)的黑斑。在存在或不存在積雪草提取物和荷花玉蘭樹皮提取物的情況下，通過測量黑色素分泌測定B16細(xì)胞中的黑色素生成。確定的是積雪草提取物、荷花玉蘭樹皮提取物和厚樸樹皮提取物分別以28％，37％和63％抑制黑色素生成。使用B16-F1黑素細(xì)胞(ATCC)，永生的小鼠黑色素瘤細(xì)胞系，來測定黑色素生成。該分析的終點是黑色素產(chǎn)生和細(xì)胞存活能力的分光光度測量。在37℃下10％的CO2中用含10％的胎牛血清(Mediatech)在標(biāo)準(zhǔn)DMEM生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)B16-F1黑素細(xì)胞，并使用測試提取物處理6天或不處理。孵育之后，黑色素分泌通過在405nm處的吸收進(jìn)行測量，并量化細(xì)胞的存活能力。蘑菇酪氨酸酶活性檢測-積雪草提取物和積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物已經(jīng)顯示出抑制酪氨酸酶的活性。在哺乳動物細(xì)胞中，在來自酪氨酸(和來自多巴色素聚合)的黑色素的多步驟生物合成中酪氨酸酶催化兩個步驟。酪氨酸酶位于黑素細(xì)胞中并產(chǎn)生給予皮膚、毛發(fā)和眼睛顏色的黑色素(芳香醌化合物)。在存在或不存在積雪草提取物和積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物的情況下，使用蘑菇酪氨酸酶活性的比色分析確定酪氨酸酶在其底物L(fēng)-Dopa上的活性。確定的是，積雪草提取物和積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物分別以25％和55％抑制酪氨酸酶。在存在或不存在積雪草提取物和積雪草分生組織細(xì)胞培養(yǎng)物的情況下，通過測量純化蘑菇酪氨酸酶(Sigma)氧化其底物L(fēng)-Dopa(Fisher)的能力檢測酪氨酸酶活性。通過酪氨酸酶L-DOPA氧化產(chǎn)生色素，其由490nm處的比色板讀數(shù)來評價。計算蘑菇酪氨酸酶活性的抑制百分比并與未處理的對照物進(jìn)行比較，以確定試驗成分抑制純化酶活性的能力。試驗抑制與已知的酪氨酸酶抑制劑曲酸(Sigma)的抑制進(jìn)行比較。內(nèi)皮細(xì)胞管的形成-積雪草提取物、柚果皮提取物和望春木蘭花提取物已經(jīng)顯示出抑制內(nèi)皮細(xì)胞管形成。內(nèi)皮細(xì)胞管的形成涉及血管形成和毛細(xì)血管形成。毛細(xì)血管形成和血管形成可以促進(jìn)皮膚發(fā)紅和酒槽鼻。在存在或不存在試驗提取物和化合物的情況下，在細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中使用具有預(yù)成型的初代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的毛細(xì)管破壞檢測確定內(nèi)皮細(xì)胞形成管的能力。確定的是，積雪草提取物、柚果皮提取物和望春木蘭花提取物抑制內(nèi)皮細(xì)胞管形成。簡略來說，在細(xì)胞外基質(zhì)上體外培養(yǎng)HUVEC，其刺激內(nèi)皮細(xì)胞的附著和管狀形態(tài)生成以形成毛細(xì)管狀的內(nèi)腔結(jié)構(gòu)。在多個方面，這些體外形成的毛細(xì)管和人血管的毛細(xì)管類似。毛細(xì)管檢測是基于該現(xiàn)象的，并用于評價潛在的脈管系統(tǒng)靶向試劑。HUVEC培養(yǎng)物在5％的CO2、37℃下在細(xì)胞培養(yǎng)器中生長。用于HUVEC的完整生長培養(yǎng)基為內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(EBM)，補(bǔ)充2％的胎牛血清(FBS)、12μg/ml的牛腦提取物、1μg/ml的皮質(zhì)醇和1μg/ml的GA-1000(慶大霉素-兩性霉素)。在傳代3至8之間的HUVEC培養(yǎng)物用于所有的檢測實驗。使用熒光試劑CalceinAM預(yù)標(biāo)記HUVEC并與其完整生長培養(yǎng)基接種于細(xì)胞外基質(zhì)涂覆的96孔培養(yǎng)板。在形態(tài)生成過程約4小時之后，形成內(nèi)皮毛細(xì)管。然后，作為處理條件向形成的毛細(xì)管培養(yǎng)物施用50μl體積的設(shè)定劑量的測試試劑。向無處理對照組加入測試試劑的載劑。檢測性能的對照包括一個濃度的FDA批準(zhǔn)的抗血管生成藥物索坦(Sutent)。在處理約6小時之后，通過顯微鏡檢查每個孔中內(nèi)皮細(xì)胞管形態(tài)生成，獲得每個孔的圖像，并定量分析在測試條件下的毛細(xì)管破壞活性。每個測試條件在重復(fù)的孔中實施，包括對照組。腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的抑制-荷花玉蘭樹皮提取物和厚樸樹皮提取物已經(jīng)顯示出在角化細(xì)胞中抑制TNF-α產(chǎn)生。TNF-α是TNF超家族的原型配體。其是在炎癥中起關(guān)鍵作用的多效性細(xì)胞因子。其表達(dá)的增加與促炎活性上調(diào)有關(guān)。用于分析荷花玉蘭樹皮提取物和厚樸樹皮提取物的作用的生物檢測使用了反映TNF-α的存在和細(xì)胞存活能力的分光光度測量。確定的是，荷花玉蘭樹皮提取物以98％抑制角化細(xì)胞中TNF-α的產(chǎn)生，厚樸樹皮提取物以93％抑制角化細(xì)胞中TNF-α的產(chǎn)生。用佛波酯(PMA，10ng/ml，SigmaChemical，#P1585-1MG)和提取物(處理樣品)或無附加處理(未處理樣品)處理在37℃下5％的CO2中在EpiLife標(biāo)準(zhǔn)生長培養(yǎng)基(CascadeBiologics)中培養(yǎng)的亞融合正常人成熟角質(zhì)細(xì)胞(CascadeBiologics)6小時。PMA導(dǎo)致TNF-α的分泌急劇增加，在處理6小時后達(dá)到峰值。孵育之后，收集細(xì)胞培養(yǎng)基，并使用來自R&DSystems(#DTA00C)的三明治酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)量化TNF-α的分泌量。簡略來說，該ELISA檢測采用了定量的三明治酶免疫分析技術(shù)，由此將對TNF-α特異的單克隆抗體預(yù)先涂覆在微孔板上。將標(biāo)準(zhǔn)品、經(jīng)處理的和未處理的樣品移液至微孔板孔以使存在的任何TNF-α與固定化抗體結(jié)合。沖走任何未結(jié)合的物質(zhì)后，將對TNF-α特異的酶聯(lián)多克隆抗體添加到孔中。沖洗以去除任何未結(jié)合的抗體-酶試劑之后，將底物溶液添加到孔中以使其與最初步驟中結(jié)合的TNF-α的量成比例顯色。在特定時間停止顯色，并使用酶標(biāo)儀測量在450nm處的顏色強(qiáng)度。環(huán)氧合酶(COX)分析：厚樸樹皮提取物已經(jīng)在體外COX-1抑制檢測中顯示出抑制環(huán)氧合酶-1(COX-1)。COX是展現(xiàn)環(huán)氧合酶和與炎癥有關(guān)的過氧化物酶兩者活性的雙功能酶。環(huán)氧合酶活性將花生四烯酸轉(zhuǎn)換為過氧化氫內(nèi)過氧化物(前列腺素G2；PGG2)，過氧化物酶成分將內(nèi)過氧化物(前列腺素H2；PGH2)還原為相應(yīng)的醇，前列腺素的前體、凝血噁烷和環(huán)前列腺素。確定的是，厚樸樹皮提取物以61％抑制COX-1酶活性。該COX抑制劑篩選試驗測量環(huán)氧合酶的過氧化物酶成分。通過觀測氧化N,N,N',N'-四甲基-對苯二胺(TMPD)的出現(xiàn)比色檢測過氧化物酶的活性。比色的COX(綿羊的)抑制劑篩選試驗(#760111，CaymanChemical)用于分析厚樸樹皮提取物對純化環(huán)氧合酶(COX-1)活性的作用。根據(jù)制造商的說明書，純化酶、血紅素和試驗提取物在檢測緩沖液中混合，并在室溫下?lián)u動孵育15分鐘。孵育之后，加入花生四烯酸和比色底物開始反應(yīng)。通過比色板在590nm處讀取評價顏色變化。COX-1活性的抑制百分比通過與未處理的對照物比較進(jìn)行計算，以測定試驗提取物抑制純化酶活性的能力。細(xì)胞因子陣列(包括VEGF、IL-1β、IL-6、IL-10和IL-2)：望春玉蘭花提取物已經(jīng)顯示出抑制VEGF產(chǎn)生。厚樸樹皮提取物已經(jīng)顯示出抑制與炎癥和抗炎應(yīng)答有關(guān)的細(xì)胞因子、IL-1β、IL-6、IL-10和IL-2。VEGF是刺激血管生成和血管再生并可能促成炎癥、發(fā)紅和酒糟鼻的細(xì)胞因子。IL-1β、IL-2和IL-6是可能促成炎癥的細(xì)胞因子，而IL-10一般被視為抗炎性細(xì)胞因子，但是在某些研究中已經(jīng)顯示促進(jìn)炎癥。采用蛋白質(zhì)檢測試驗測定VEGF、IL-1β、IL-6、IL-10和IL-2產(chǎn)生的抑制，該蛋白質(zhì)檢測試驗將生物素化抗體應(yīng)用于檢測抗體的各種細(xì)胞因子。確定的是，望春玉蘭花提取物以26％抑制VEGF的產(chǎn)生，厚樸樹皮提取物以100％抑制IL-1β的表達(dá)，以95％抑制IL-6的表達(dá)，以88％抑制IL-10的表達(dá)，并以100％抑制IL-2的產(chǎn)生。簡略來說，將人表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)至70-80％的融合度。吸出板中的培養(yǎng)基并加入0.025％的胰蛋白酶/EDTA。當(dāng)細(xì)胞變圓時，輕敲培養(yǎng)皿以釋放細(xì)胞。從培養(yǎng)皿中去除含有胰蛋白酶/EDTA的細(xì)胞并中和。將細(xì)胞在180xg下離心5分鐘。細(xì)胞形成球團(tuán)且上清液被吸出。獲得的球團(tuán)在EPILIFETM培養(yǎng)基(CascadeBiologics)中被再懸浮。該細(xì)胞以約10-20％的融合度被接種到6孔板中。在細(xì)胞變?yōu)榧s80％融合度之后吸出培養(yǎng)基，添加1.0ml的EPILIFETM,以及佛波酯(“PMA”)(已知的炎癥誘導(dǎo)劑)，將試驗組合物的稀釋物添加至兩個平行的孔中(即1.0％(100X儲備中的100μl)和0.1％(100X儲備中的10μl)的測試組合物被稀釋為最終體積為1ml的EpiLife生長培養(yǎng)基)。輕輕地攪拌培養(yǎng)基以確保充分混合。另外，在存在或不存在附加PMA的情況下，向?qū)φ湛字刑砑?.0ml的EPILIFETM。在定量給料之后，將板在37±1℃和5.0±1％的CO2中孵育約5小時。在該5小時的孵育之后，將所有培養(yǎng)基收集到錐形管中并在-70℃冷凍，之后將冷凍的培養(yǎng)基放置于干冰上。在分析當(dāng)日，將16面板雜交室連接至16面板FAST玻片，其與16抗細(xì)胞因子抗體(包含VEGF、IL-1β、IL-6,IL-10和IL-2)以及實驗對照組(WhatmanBioSciences)一式三份陣列，將玻片置于用于加工的FAST框架中(每框架4個玻片)。在室溫下使用70ml的S&S蛋白質(zhì)陣列阻斷緩沖液(WhatmanSchleicherandScheull)將陣列阻斷15分鐘。移除阻斷緩沖液，并向每個陣列添加70ml各自的上清液試樣。在輕微振動下，陣列在室溫孵育3小時。使用TBS-T將陣列清洗3次。使用70ml混合型抗體處理陣列，該混合型抗體含有對應(yīng)于每個陣列的捕獲抗體的一個生物素化抗體。在輕微振動下，陣列在室溫孵育1小時。使用TBS-T將陣列清洗3次。在輕微振動下，在室溫使用70ml含有鏈霉親和素-Cy5軛合物的溶液孵育陣列1小時。使用TBS-T將陣列清洗3次，在去離子水中快速沖洗并干燥。玻片在Perkin-ElmerScanArray4000共焦熒光成像系統(tǒng)中成像。使用ImagingResearchArrayVision軟件保存并分析陣列圖像。簡略來說，通過去除背景信號測定點強(qiáng)度。將來自每個樣品條件的點的副本平均，然后和適當(dāng)?shù)膶φ战M比對?？寡趸?AO)分析：豌豆提取物以及橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2、棕櫚酰四肽-7的組合已經(jīng)顯示出具有抗氧化能力。活生物體的抗氧化系統(tǒng)包含酶如超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶；高分子如白蛋白、血漿銅藍(lán)蛋白和鐵蛋白；和大量小分子，包括抗壞血酸、α-生育酚、β-胡蘿卜素、還原型谷胱甘肽、尿酸和膽紅素。內(nèi)源性抗氧化劑和源自食物的抗氧化劑的總和表示細(xì)胞外流體的總抗氧化能力。所有不同抗氧化劑的協(xié)作提供比單獨的任何單個化合物更強(qiáng)的對抗反應(yīng)性氧或氮自由基侵襲的保護(hù)。因此，總抗氧化能力與測量單獨組分獲得的抗氧化能力相比可以給出更相關(guān)的生物信息，因為其考慮了血漿和體液中存在的所有抗氧化劑的累積效應(yīng)。在使用來自CaymanChemical(安娜堡，密歇根美國)的抗氧化能力試劑盒#709001測量試驗化合物和提取物的總抗氧化能力的體外生物分析中，觀測試驗化合物和提取物的抗氧化能力。確定的是，豌豆提取物具有Trolox的抗氧化能力的34％，橙皮苷甲基查爾酮、二肽-2和棕櫚酰四肽-7的組合具有Trolox的抗氧化能力的47％。簡略來說，來自CaymanChemical(安娜堡，密歇根美國)的抗氧化能力試劑盒#709001依賴于樣品中抗氧化劑抑制(2,2'-聯(lián)氮-二-[3-乙基苯并噻唑啉磺酸鹽])被正鐵肌紅蛋白氧化成·+的能力。樣品中抗氧化劑預(yù)防ABTS氧化的能力與Trolox，水溶性生育酚類似物的能力進(jìn)行比較，并以Trolox的摩爾當(dāng)量進(jìn)行定量。方案可根據(jù)制造商建議進(jìn)行。抗氧化能力(ORAC)-荷花玉蘭樹皮提取和厚樸樹皮提取物已經(jīng)顯示出具有抗氧化能力?；钌矬w的抗氧化系統(tǒng)包含酶如超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶；高分子如白蛋白、血漿銅藍(lán)蛋白和鐵蛋白；和大量小分子，包括抗壞血酸、α-生育酚、β-胡蘿卜素、還原型谷胱甘肽、尿酸和膽紅素。內(nèi)源性抗氧化劑和源自食物的抗氧化劑的總和表示細(xì)胞外液的總抗氧化能力。所有不同抗氧化劑的協(xié)作提供比單獨的任何單個化合物更強(qiáng)的對抗反應(yīng)性氧或氮自由基侵襲的保護(hù)。因此，總抗氧化能力與測量單獨組分獲得的抗氧化能力相比可以給出更相關(guān)的生物信息，因為其考慮了血漿和體液中存在的所有抗氧化劑的累積效應(yīng)。確定的是，荷花玉蘭樹皮提取物具有Trolox的抗氧化能力的85％，厚樸樹皮提取物也具有相對于對照組提高的抗氧化能力，這說明荷花玉蘭樹皮提取物和厚樸樹皮提取物能夠減少氧化試劑(氧化劑)。通過氧自由基吸收(或吸收率)能力(ORAC)試驗測定抗氧化能力。該試驗定量了抑制已知導(dǎo)致?lián)p害細(xì)胞(例如皮膚細(xì)胞)的氧化劑如氧自由基的作用的程度及持續(xù)時間。使用Zen-BioORAC抗氧化分析試劑盒(#AOX-2)測定對照組和提取物的ORAC值。簡略來說，該試驗測量了熒光素?zé)晒怆S時間的損失，其歸因于通過AAPH(2,2'-偶氮雙-2-甲基丙脒，二鹽酸鹽)分解獲得的過氧自由基形成。Trolox，水溶性維生素E類似物，以劑量依賴方式作為抑制熒光素衰變的陽性對照。實施例3(組合物的臨床功效)眼周皮膚的外觀和狀況-表1中描述的組合物已經(jīng)顯示出在志愿受試者中能夠：增加皮膚緊實度和彈性；改善皮膚紋理和清透度；減輕細(xì)紋和/或皺紋、眼袋、黑眼圈、幼紋和下垂；改善眼周區(qū)域的整體外觀。該研究的目的是評價表1中的組合物對于眼部區(qū)域老化/光老化皮膚的功效。該研究通過視覺分級和生物儀器測量評價皮膚。確定的是，在處理4周之后，表1中的組合物從統(tǒng)計上地增加了皮膚緊實度，在12周也檢測到這種增加。在第8周皮膚的凈彈性也統(tǒng)計上地增加。12周后，相比于基線觀察到以下明顯改善：改善的皮膚紋理和清透度；減輕的細(xì)紋和/或皺紋、眼袋、黑眼圈、幼紋和下垂；改善的眼周區(qū)域的整體外觀。簡略來說，志愿人受試者參與12周、表1中組合物用于眼周的一元評價。根據(jù)使用說明，志愿者將試驗產(chǎn)品施用于他們的眼周區(qū)域皮膚12周。對于所有視覺評價使用0至9級的視覺分級：0＝無，最理想的情況；1-3＝輕微的；4-6＝適中的；和7-9＝嚴(yán)重的，最不理想的情況。使用皮膚彈性測量儀測量皮膚緊實度和彈性。使用5-FlashImagingStation捕獲每個受試者臉部的高分辨率可見的、平行極化的、橫向極化的、藍(lán)色熒光和紫外圖像用于評價。實施例4(附加分析)可以用于測定在本說明書全文和權(quán)利要求書中所公開的任一成分、或任意成分的組合或具有該成分的組合的組合物的功效的檢測，可以通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法進(jìn)行測定。以下是可以在本發(fā)明的環(huán)境中使用的非限制性檢測。應(yīng)認(rèn)識到，可以使用其它測試方法，包括例如客觀的和主觀的方法。彈性蛋白刺激分析：彈性蛋白是有助于皮膚在伸展和收縮之后恢復(fù)形狀的結(jié)締組織蛋白。彈性蛋白還是用于需要儲存機(jī)械能之處的重要的承載蛋白。在由賴氨酰氧化酶催化的反應(yīng)中，彈性蛋白通過連接多個可溶性彈性蛋白原蛋白分子而形成。通過使用針對彈性蛋白的免疫熒光抗體對培養(yǎng)的人類成纖維細(xì)胞進(jìn)行染色，彈性蛋白分泌和彈性蛋白纖維可以在培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞中觀測，通過使用針對彈性蛋白的免疫熒光抗體染色培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞。基質(zhì)金屬蛋白酶3和9(MMP3；MMP9)的活性分析：體外基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)抑制分析。MMP是胞外蛋白酶，其憑借廣泛的底物特異性在許多正常狀態(tài)和疾病狀態(tài)起作用。MMP3底物包括膠原蛋白、纖維粘連蛋白和層粘連蛋白；而MMP9底物包括膠原蛋白VII、纖維粘連蛋白和層粘連蛋白。使用來自BioMolInternational的用于MMP3(AK-400)和MMP-9(AK-410)的ColorimetricDrugDiscovery試劑盒，該分析設(shè)計用于測量MMP的蛋白酶活性，使用含硫多肽作為顯色底物(Ac-PLG-[2-巰基-4-甲基-戊?；鵠-LG-OC2H5)5,6。MMP切割位點肽鍵由含硫多肽中的硫酯鍵替代。該鍵被MMP水解產(chǎn)生巰基，其與DTNB[5,5'-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)，Ellman試劑]反應(yīng)生成2-硝基-5-硫代苯甲酸，可以通過其在412nm處的吸光度進(jìn)行檢測(在pH6.0和高于7時，ε＝13600M-1cm-1)?？梢苑治霰菊f明書公開的活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物環(huán)氧合酶(COX)分析：體外環(huán)氧合酶-1和-2(COX-1、-2)抑制分析。COX是展現(xiàn)環(huán)氧合酶和過氧化物酶兩者且與炎癥應(yīng)答有關(guān)的的雙功能酶。環(huán)氧合酶活性將花生四烯酸轉(zhuǎn)換為過氧化氫內(nèi)過氧化物(前列腺素G2；PGG2)，過氧化物酶組分將內(nèi)過氧化物(前列腺素H2；PGH2)還原為相應(yīng)的醇，前列腺素的前體、凝血噁烷和環(huán)前列腺素。該COX抑制篩選分析測量環(huán)氧合酶的過氧化物酶組分。通過觀測氧化N,N,N',N'-四甲基-對苯二胺(TMPD)的出現(xiàn)比色檢測過氧化物酶的活性。該抑制篩選分析可包括COX-1和COX-2酶兩者以篩選同工酶特異性抑制劑。比色的COX(綿羊的)抑制劑篩選分析(#760111，CaymanChemical)可以用于分析本說明書中所公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物對純化環(huán)氧合酶(COX-1或COX-2)活性的效果。根據(jù)制造商的說明書，純化酶、血紅素和試驗提取物可以在分析緩沖液中混合，并在室溫下?lián)u動孵育15分鐘。孵育之后，可以加入花生四烯酸和比色底物開始反應(yīng)。通過比色板在590nm測定可以評估顏色變化。COX-1或COX-2活性的抑制百分比可以通過與未處理的對照物比較進(jìn)行計算，以測定試驗提取物抑制純化酶活性的能力。脂肪氧合酶(LO)分析：體外脂肪氧合酶抑制分析。LO是非血紅素的含鐵加雙氧酶，其催化分子氧加成到脂肪酸。亞油酸鹽/酯和花生四烯酸鹽/酯是植物和動物中LO的主要底物。然后，花生四烯酸可以轉(zhuǎn)換為羥基二十三烯(HETE)酸衍生物，其隨后轉(zhuǎn)換為白三烯，有效的炎癥介質(zhì)。該分析通過測量利用花生四烯酸培養(yǎng)的脂肪氧合酶(5-、12-或15-LO)產(chǎn)生的氫過氧化物提供精確的和方便的用于篩選脂肪氧合酶抑制劑的方法。ColorimetricLOInhibitor篩選試劑盒(#760700，CaymanChemical)可以用于確定本說明書中所公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物抑制酶活性的能力。純化15-脂肪氧合酶和試驗成分可以在分析緩沖液中混合，并在室溫下?lián)u動孵育10分鐘。孵育之后，可以加入花生四烯酸開始反應(yīng)，混合物在室溫下再孵育額外10分鐘?？梢约尤氡壬孜锝K止催化，顏色變化通過熒光板在490nm測定進(jìn)行評估。脂氧合酶活性的抑制百分比可以相比于未處理的對照組進(jìn)行計算，以確定本說明書中所公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物抑制純凈酶活性的能力。油控制分析：用于測量皮脂腺中皮脂分泌的減少和/或皮脂腺中皮脂產(chǎn)生的減少的分析可以通過使用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)進(jìn)行分析。在具體的例子中，可以使用前額。在一段固定天數(shù)(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或更多天)，將本說明書中所公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物可以每天一次或兩次地施用到前額的一部分，而前額的其他部分不用所述組合物處理。在一段固定的天數(shù)期滿后，皮脂分泌于是可以通過將細(xì)吸墨紙施用到經(jīng)處理的和未處理的前額皮膚上進(jìn)行分析。這是通過首先用濕織物和干織物從處理過的和未處理的區(qū)域去除任何皮脂完成的。然后可以將吸墨紙施用到處理過的和未處理的前額區(qū)域，可以繞著前額放置橡皮筋以輕輕地將吸墨紙壓到皮膚上。2小時后，可以移去吸墨紙，使其干燥，然后進(jìn)行透照。越深的吸墨紙對應(yīng)于越多的皮脂分泌(或較淺的吸墨紙對應(yīng)于減少的皮脂分泌)。紅斑分析：測量皮膚發(fā)紅減少的分析可以使用MinoltaChromometer進(jìn)行評估。皮膚紅斑可以通過在受試者前臂施用0.2％的十二烷基硫酸鈉溶液來引發(fā)。該區(qū)域用封閉貼片保護(hù)24小時。24小時后，除去貼片，可以使用MinoltaChromaMeter的a*值對刺激引發(fā)的發(fā)紅進(jìn)行評估。a*值測量膚色在紅色區(qū)域的變化。讀取之后，立即使用本說明書中所公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物處理該區(qū)域?？梢远ㄆ谶M(jìn)行重復(fù)測量以確定制劑減少發(fā)紅和刺激的能力。皮膚水分/水合分析：皮膚水分/水合的益處可以通過利用以NovaDermalPhaseMeter進(jìn)行的阻抗測量進(jìn)行測量。阻抗計測量了皮膚水分含量的變化。皮膚外層具有不同的電性質(zhì)。當(dāng)皮膚干燥時，其導(dǎo)電很差。當(dāng)其變得更加含水時，則增加了導(dǎo)電性。因此，皮膚阻抗(與導(dǎo)電性有關(guān))的變化可以用于評價皮膚水合的變化。在每個試驗日，可以根據(jù)儀器說明校準(zhǔn)單元。還可以對溫度和相對濕度進(jìn)行標(biāo)記。對受試者可以進(jìn)行如下評估：測量前其可以在具有確定濕度(例如30-50％)和溫度(例如68℃-72℃)的室內(nèi)進(jìn)行平衡。在面部的每一側(cè)進(jìn)行三個獨立的阻抗測定，記錄并平均。阻抗計可以使用T5設(shè)定，其對施用到面部的每五秒的阻抗值進(jìn)行平均。變化可以用統(tǒng)計方差和顯著性進(jìn)行報道。根據(jù)該方法，可以分析本說明書公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物。皮膚清透度和雀斑與老年斑減少的分析：皮膚清透度和雀斑與老年斑減少使用MinoltaChromometer進(jìn)行評價。膚色改變可以使用MinoltaChromaMeter的a*值進(jìn)行評估以確定由于產(chǎn)品處理引起刺激的可能性。a*值測量膚色在紅色區(qū)域的變化。這用于確定本說明書中所公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物是否引發(fā)刺激。測量可以在每側(cè)面部進(jìn)行并進(jìn)行平均，作為左邊和右邊面部的值。皮膚清透度也可以使用MinoltaMeter進(jìn)行測量。測量是MinoltaMeter的a*、b、和L值的組合，并與皮膚亮度有關(guān)，而且非常好的對應(yīng)皮膚的光滑度和水合。皮膚測定如上進(jìn)行。在一個非限制性方面，皮膚清透度可以描述為L/C，其中C是色度并定義為(a2+b2)1/2。皮膚干燥、表面細(xì)紋、皮膚光滑度和膚色分析：皮膚干燥、表面細(xì)紋、皮膚光滑度和膚色可以用臨床分級技術(shù)進(jìn)行評估。例如，皮膚干燥的臨床分級可以通過5分標(biāo)準(zhǔn)Kligmanscale確定：(0)皮膚是柔軟和濕潤的；(1)皮膚呈現(xiàn)正常而沒有可見干燥；(2)皮膚觸摸感覺輕微干燥而沒有可見剝落；(3)皮膚感覺干燥、堅韌并且具有有些起皮的發(fā)白外觀；以及(4)皮膚感覺非常干燥、粗糙并且具有起皮的發(fā)白外觀。評估可以由兩個臨床醫(yī)師獨立進(jìn)行并平均。膚色臨床分級分析：膚色的臨床分級可以通過10分模擬數(shù)值標(biāo)度實施：(10)均勻、粉棕色顏色的平滑皮膚。手持放大鏡檢查時沒有暗的、發(fā)紅的或起皮的斑塊。皮膚的微觀紋理摸上去非常均勻；(7)不用放大鏡觀察到均勻的膚色。沒有起皮區(qū)域，但有由于色素淀積或紅斑引起的輕微變色。沒有直徑大于1cm的變色；(4)輕易地注意到皮膚變色和不均勻紋理。輕微起皮。某些區(qū)域摸上去粗糙的皮膚；以及(1)不均勻的皮膚著色和紋理。多個區(qū)域起皮和變色，色素減退或發(fā)紅或暗色的斑點。直徑超過1cm的大面積的不均勻著色。評估由兩個臨床醫(yī)師獨立進(jìn)行并平均。皮膚平滑度的臨床分級分析：皮膚光滑度的臨床分級可以通過10分模擬數(shù)值標(biāo)度進(jìn)行分析：(10)光滑的，皮膚是濕潤的和反光的，手指劃過表面時沒有阻力；(7)一定程度光滑的，輕微阻力；(4)粗糙的、可見地改變的，摩擦?xí)r有摩擦力；以及(1)粗糙的、片狀的、不均勻的表面。評估由兩個臨床醫(yī)師獨立進(jìn)行并平均。用Packman等人(1978)公開的方法進(jìn)行的皮膚光滑度和皺紋減少的分析：皮膚光滑度和皺紋減少也可以通過使用Packman等人(1978)公開的方法進(jìn)行可視化評估。例如，每次受試者拜訪時，對每位受試者的表面面部線條(SFL)的深度、淺度和總量都可以進(jìn)行認(rèn)真評分和記錄。通過將數(shù)量因子乘以深度/寬度/長度因子得到數(shù)字分?jǐn)?shù)。獲得眼睛區(qū)域和嘴巴區(qū)域(左側(cè)和右側(cè))的分?jǐn)?shù)，并加到一起作為總皺紋分?jǐn)?shù)。用HargensBallistometer進(jìn)行的皮膚緊實度分析：皮膚緊實度可以用HargensBallistometer進(jìn)行測量，其是通過在皮膚上落下小物體并記錄前兩個反彈峰來評估皮膚彈性和緊實度的裝置。Ballistometry是使用相對鈍的探頭(4平方毫米-接觸面積)的小輕量探測器。探測器輕輕地穿透進(jìn)入皮膚，得到依賴于皮膚外層性質(zhì)的測量，該皮膚外層包括角質(zhì)層和外表皮以及部分真皮層。用GasBearingElectrodynamometer進(jìn)行的皮膚柔軟度/柔韌性分析：皮膚柔軟度/柔韌性可以使用GasBearingElectrodynamometer進(jìn)行評估，其是測量皮膚應(yīng)力/張力性質(zhì)的儀器。皮膚的黏彈性與皮膚保濕有關(guān)?？梢酝ㄟ^用雙面膠將探測器附著在皮膚表面實現(xiàn)對臉頰區(qū)域預(yù)定位點的測量?？梢詫⒋蠹s3.5gm的力平行施加于皮膚表面，精確地測量皮膚的位移。然后可以計算皮膚柔韌性，并表達(dá)為DSR(動態(tài)彈簧剛度，以gm/mm計)。用復(fù)制品進(jìn)行的線條和皺紋的顯現(xiàn)分析：皮膚上線條和皺紋的顯現(xiàn)可以使用復(fù)制品進(jìn)行評估，所述復(fù)制品是皮膚表面的印模?？梢允褂萌绻柘鹉z的材料。復(fù)制品可以通過圖像分析進(jìn)行分析。線條和皺紋的可見性變化可以通過利用硅復(fù)制品形成受試者的臉并用計算機(jī)圖像分析系統(tǒng)分析復(fù)制品圖像進(jìn)行客觀地定量。復(fù)制品可以從眼睛區(qū)域和頸部區(qū)域獲得，并用數(shù)碼相機(jī)以低照明入射角進(jìn)行拍攝。數(shù)字圖像可以用圖像處理程序進(jìn)行分析并確定復(fù)制品被皺紋和細(xì)紋覆蓋的區(qū)域。用表面光度儀/記錄針的方法進(jìn)行的皮膚表面輪廓分析：皮膚表面輪廓可以通過使用表面光度儀/記錄針的方法進(jìn)行測量。這包括要么閃光要么拖動記錄針穿過復(fù)制品表面。記錄針的垂直位移通過距離傳感器可以錄入計算機(jī)，在掃描復(fù)制品的一定距離后，皮膚輪廓的分析可以以二維曲面產(chǎn)生。該掃描可以沿著固定的軸重復(fù)任意次數(shù)以產(chǎn)生模擬的皮膚3-D圖像。使用記錄針技術(shù)可以獲得十個隨機(jī)的復(fù)制品截面，并組合產(chǎn)生平均值。感興趣的值包括Ra，其為通過積分相對于平均輪廓高度的輪廓高度計算得到的所有粗糙度(高度)值的算術(shù)平均數(shù)。Rt其為最高峰和最低谷之間的最大垂直距離，Rz其為平均峰振幅減去平均峰高度。數(shù)值以用mm為單位標(biāo)定的數(shù)值給出。設(shè)備應(yīng)在每次使用前通過掃描已知數(shù)值的金屬標(biāo)準(zhǔn)物進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。Ra值可以通過下式計算：Ra＝標(biāo)準(zhǔn)化粗糙度；lm＝橫向(掃描)長度；y＝相對于平均輪廓高度的輪廓位置的絕對值(x-軸)。MELANODERMTM分析：在其他非限制性方面，可通過使用皮膚模擬例如MELANODERMTM來評價本說明書中所公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物的功效。黑素細(xì)胞，皮膚類似物中細(xì)胞的一種，當(dāng)暴露于L-二羥苯基丙氨酸(L-DOPA)(黑色素的前體)時肯定著色。皮膚模擬MELANODERMTM可以使用多種基質(zhì)進(jìn)行處理，該基質(zhì)包含本說明書中所公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物，或者使用單獨的基質(zhì)作為對照?；蛘撸つw類似物的未處理樣品可以用作對照物。絲聚合蛋白的產(chǎn)生：可測定在角化細(xì)胞中的由于本說明書中所公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物的絲聚合蛋白產(chǎn)生的變化。絲聚合蛋白是皮膚中天然保濕因子(NaturalMoisturizingFactor，NMF)的前體。增加的NMF提高了皮膚中的水分含量。使用分析角化細(xì)胞溶解產(chǎn)物中的絲聚合蛋白濃度的生物測定可以測定在經(jīng)處理和未經(jīng)處理的角化細(xì)胞中的絲聚合蛋白產(chǎn)生。可以用于定量絲聚合蛋白產(chǎn)生的生物分析的非限制性實例為SimonTM免疫印跡方案。對于每個樣品，正常人表皮角化細(xì)胞(normalhumanepidermalkeratinocyte，NHEK)在EPI-200–Mattek生長培養(yǎng)基中生長，該生長培養(yǎng)基含有來自LifeTechnologies(M-EP-500-CA)的鈣。處理之前，NHEK在37℃、5％的CO2的生長培養(yǎng)基中過夜孵育。然后，NHEK在含有1％的試驗化合物/提取物或無化合物/提取物(陰性對照)的生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)24至36小時。然后可以清洗NHEK，收集，并儲存在冰上或更冷的物體上，直至在冰上使用裂解緩沖液和聲波降解法細(xì)胞裂解。樣品的蛋白質(zhì)濃度可以測定并用于標(biāo)準(zhǔn)化樣品。裂解物可在-80℃儲存直至在定量分析中使用。SimonTM免疫印跡生物測定使用了定量的免疫印跡免疫分析技術(shù)，該技術(shù)使用了對絲聚合蛋白特異的抗體來定量試樣中的絲聚合蛋白。將細(xì)胞樣品裂解并針對蛋白質(zhì)濃度進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。然后使用毛細(xì)管電泳可以將標(biāo)準(zhǔn)化樣品和分子量標(biāo)準(zhǔn)品裝載于變性蛋白質(zhì)分離凝膠并在其上跑。使用對絲聚合蛋白特異的初代抗體對凝膠中的蛋白質(zhì)進(jìn)行固定化以及免疫探測。固定化蛋白質(zhì)于是可以用與初代抗體結(jié)合的酶聯(lián)檢測抗體進(jìn)行免疫探測。然后，向固定化蛋白質(zhì)中添加化學(xué)發(fā)光底物溶液以使得化學(xué)發(fā)光顯色與在固定化中結(jié)合的絲聚合蛋白的量成比例。在特定時間終止化學(xué)發(fā)光顯色，可以測量化學(xué)發(fā)光信號的強(qiáng)度并與陽性對照和陰性對照比對。閉合蛋白的產(chǎn)生：可測定在角化細(xì)胞中的由于本說明書中所公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物的閉合蛋白產(chǎn)生的變化。閉合蛋白是對緊密連接的形成和皮膚的水分屏障功能關(guān)鍵的蛋白。如何確定在經(jīng)處理的和未經(jīng)處理的角化細(xì)胞中閉合蛋白產(chǎn)生的非限制性實例為通過使用分析角化細(xì)胞裂解物中閉合蛋白濃度的生物測定。使用SimonTM免疫印跡方案進(jìn)行該生物測定。對于樣品，在37℃下和5％的CO2中，來自LifeTechnologies(C-005-5C)的成人表皮角化細(xì)胞(humanepidermalkeratinocyte，HEKa)在Epilife生長培養(yǎng)基中生長24小時，Epilife生長培養(yǎng)基含有來自LifeTechnologies(M-EP-500-CA)的鈣，補(bǔ)充以來自LifeTechnologies(S-101-5)的KeratinocyteGrowthSupplement(HKGS)。HEKa然后在試驗含化合物/提取物的生長培養(yǎng)基、用于陰性對照的不含化合物/提取物的生長培養(yǎng)基、或用于陽性對照的含1mM的CaCl2的生長培養(yǎng)基孵育24至48小時。然后將HEKa清洗、收集并于冰或更冷的物體上儲存直至使用裂解緩沖液和聲波降解法裂解。可以確定樣品的蛋白質(zhì)濃度并用于標(biāo)準(zhǔn)化樣品。裂解物在-80℃下存儲直至在生物測試中使用。SimonTM免疫印跡生物分析使用定量的免疫印跡分析技術(shù)，該技術(shù)使用了對閉合蛋白特異性的抗體來定量檢測樣品中的閉合蛋白。將細(xì)胞樣品裂解并針對蛋白質(zhì)濃度進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。然后將標(biāo)準(zhǔn)化樣品和分子量標(biāo)準(zhǔn)品使用毛細(xì)管電泳裝載于變性蛋白質(zhì)分離凝膠并在其上跑。然后，使用針對閉合蛋白特異性的初代抗體對凝膠中的蛋白質(zhì)進(jìn)行固定化以及免疫探測。將固定化蛋白質(zhì)用與初代抗體結(jié)合的酶聯(lián)檢測抗體免疫探測。然后向固定化蛋白質(zhì)中添加化學(xué)發(fā)光底物溶液以使得化學(xué)發(fā)光顯色與在固定化中結(jié)合的閉合蛋白的量成比例?？稍谔囟〞r間終止化學(xué)發(fā)光顯色，可以測定化學(xué)發(fā)光信號的強(qiáng)度并與陽性對照和陰性對照比對。角化細(xì)胞單層滲透性：可測定由于本說明書中所公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物的角化細(xì)胞單層的滲透性變化。角化細(xì)胞單層滲透性是皮膚屏障完整性的量度。作為非限制性實例，使用Millipore(ECM642)的體外血管滲漏試驗可以確定在經(jīng)處理和未經(jīng)處理的角化細(xì)胞中的角化細(xì)胞單層滲透性。該試驗分析了內(nèi)皮細(xì)胞吸附、輸送和滲透。簡略來說，來自LifeTechnologies(C-005-5C)的成人表皮角化細(xì)胞可被接種到在收集孔內(nèi)的多孔膠原蛋白涂覆的膜上。在37℃下和5％的CO2中，角化細(xì)胞在Epilife生長培養(yǎng)基中孵育24小時，該Epilife生長培養(yǎng)基含有來自LifeTechnologies(M-EP-500-CA)的鈣，補(bǔ)充來自LifeTechnologies(S-101-5)的角化細(xì)胞補(bǔ)充物(KeratinocyteGrowthSupplement，HKGS)。孵育時間使得細(xì)胞形成單層并封閉膜孔。然后將培養(yǎng)基替換成含有(試驗樣品)或不含有(未處理對照)試驗化合物/提取物的新鮮培養(yǎng)基，該角化細(xì)胞在37℃下和5％的CO2中培養(yǎng)額外48小時。在存在/不存在試驗化合物/提取物的孵育之后，為了測定角化細(xì)胞單層滲透性，培養(yǎng)基被替換成含有高分子量異硫氰酸熒光素(Fluoresceinisothiocyanate，F(xiàn)ITC)-Dextran的新鮮培養(yǎng)基，該角化細(xì)胞在37℃下和5％的CO2中培養(yǎng)4小時。在孵育4小時期間，F(xiàn)ITC可以以與單層膜的滲透性成比例的速率穿過該角化細(xì)胞單層和多孔膜進(jìn)入收集孔。在孵育4小時之后，可確定細(xì)胞存活能力和收集孔中FITC的含量。對于FITC的含量，收集收集孔中的培養(yǎng)基，當(dāng)在520nm被激發(fā)時，在480nm(Em)處測定培養(yǎng)基的熒光?？梢酝ㄟ^以下等式測定與未處理的對照組相比的滲透性百分比和百分比的變化：滲透性百分比＝((試樣的平均Ex/Em)/未處理對照的平均Ex/Em)*100；百分比的變化＝試樣的滲透性百分比–未處理對照的滲透性百分比。透明質(zhì)酸酶活性的抑制：可測定由于本說明書中所公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物的透明質(zhì)酸酶活性變化。透明質(zhì)酸酶是分解HA的酶。HA是與基質(zhì)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性有關(guān)的多糖，還與向組織和細(xì)胞提供膨壓有關(guān)。作為非限制性實例，可以使用Sigma-Aldrichprotocol#EC3.2.1.35修改的體外方案測定透明質(zhì)酸的活性。簡略來說，向含有試驗化合物或?qū)φ战M的微孔板反應(yīng)孔中添加來自Sigma-Aldrich的1-S型透明質(zhì)酸(H3506)?？墒褂明匪嶙鳛殛栃詫φ找种苿瑢τ趯φ彰覆惶砑釉囼灮衔?，可以使用含有試驗化合物或陽性對照但沒有透明質(zhì)酸的孔作為背景陰性對照。在添加底物(HA)之前，孔在37℃下孵育10分鐘。添加底物，反應(yīng)在37℃下孵育45分鐘。然后將每個反應(yīng)溶液的一部分轉(zhuǎn)移至醋酸鈉和pH3.75的醋酸溶液中，并在其中輕輕混合以終止那部分的反應(yīng)(終止孔)。在一部分的反應(yīng)溶液添加至終止孔之后，終止孔和反應(yīng)孔應(yīng)該都包含相同體積的溶液。終止孔和反應(yīng)孔都在室溫孵育10分鐘。然后，對終止孔和反應(yīng)孔都測定600nm處的吸光度?？赏ㄟ^下式計算抑制：抑制劑(或?qū)φ?活性＝(抑制劑終止孔在600nm的吸光度–抑制劑反應(yīng)孔在600nm的吸光度)；初始活性＝對照酶在600nm的吸光度；抑制百分比＝[(初始活性/抑制劑活性)*100]-100。過氧化物酶體增殖劑-激活的受體γ(PeroxisomeProliferator-ActivatedReceptorGamma,PPAR-γ)的活性：可以測量由于本說明書中所公開的每種活性成分、成分組合的任一種或具有該組合的組合物的PPAR-γ活性變化。PPAR-γ是對皮質(zhì)產(chǎn)生的關(guān)鍵的受體。作為非限制性實例，可以使用分析試驗化合物或組合物抑制配體結(jié)合的能力的生物分析測定PPAR-γ的活性。簡略來說，可以使用熒光小分子泛-PPAR配體，由LifeTechnologies(PV4894)獲得的FLUORMONETMPan-PPARGreen，可以用于測定試驗化合物或組合物是否能夠抑制配體與PPAR-γ結(jié)合。樣品孔含有PPAR-γ和熒光配體和二者之一：試驗化合物或組合物(試驗)；參考抑制劑；羅格列酮(陽性對照)；或者沒有試驗化合物(陰性對照)?？妆环跤欢卧O(shè)定的時間以使得配體有機(jī)會與PPAR-γ結(jié)合。然后可以測定每個樣品孔的熒光偏振并與陰性對照孔比對以確定試驗化合物或組合物的抑制百分比。**************本文所公開和要求保護(hù)的所有組合物和/或方法可以根據(jù)本公開制得和實現(xiàn)，無需過度的實驗。當(dāng)優(yōu)選的實施方案已經(jīng)描述了本發(fā)明的組合物和方法，各種可以施用于本文所描述組合物和/或方法以及方法的步驟或步驟的順序中，而不脫離本發(fā)明的構(gòu)思、精神和范圍的變化，對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是明顯的。更具體而言，明顯地，化學(xué)和生理兩方面都相關(guān)的某些試劑可以替代本文所描述的試劑，同時會實現(xiàn)相同或相似的結(jié)果。所有對本領(lǐng)域技術(shù)人員明顯的這類相似的替代和改變都被視為在由所附權(quán)利要求限定的本發(fā)明的構(gòu)思、范圍和概念內(nèi)。參考文獻(xiàn)以下參考文獻(xiàn)在一定程度上提供示例性程序或?qū)Ρ疚乃愂黾?xì)節(jié)的其他補(bǔ)充細(xì)節(jié)，其通過引用明確地并入本文。CosmeticIngredientDictionary，第三版，CTFA，1982InternationalCosmeticIngredientDictionary，第四版，CTFA，1991InternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook，第十版，CTFA，2004InternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook，第十二版，CTFA，2008當(dāng)前第1頁1 2 3