專利名稱：從植物中分離生物堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從生物材料，特別是從植物物種中分離生物堿的方法。本發(fā)明進一歩包括用本發(fā)明的方法分離的生物堿以及這些生物堿用于制備藥物的用途。生物堿是天然生成的、大多包含至少ー個堿性氮原子的雜環(huán)化合物。術(shù)語“堿性氮原子”是指這種氮原子在中性PH值下顯示堿性反應(yīng)。所述名稱“生物堿”是由“堿性的 (alkaline) ”這個詞派生而來的并用來描述任何含氮的堿。
背景技術(shù)：
許多生物堿在包括人的哺乳類有機體中都具有藥理活性。藥用生物堿的實例有加蘭他敏、(")三尖杉堿和奎寧。加蘭他敏(CAS號:357-70-0 ；IUPAC 名稱(4aS,6R,8aS) -5,6,9,10，11，12-六
氫-3-甲氧基-11-甲基-4aH-[l]苯并呋喃[3a，3，2-ef]-[2]_苯并氮雜卓-6-醇)是ー 種乙酰膽堿酯酶抑制劑。因此，加蘭他敏能夠通過提高中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的乙酰膽堿的濃度來增強膽堿能的功能。加蘭他敏還顯示調(diào)節(jié)煙堿樣膽堿能受體的活性從而提高乙酰膽堿釋放。加蘭他敏用于或建議用于多種疾病和失調(diào)的治療，例如狹角性青光眼、脊髄灰質(zhì)炎、阿茲海默癥以及如神經(jīng)病性疼痛、酗酒、戒煙的神經(jīng)系統(tǒng)的多種失調(diào)。加蘭他敏還用作有機磷中毒的解毒剤。加蘭他敏是主要存在于石蒜科屬植物中的四環(huán)生物堿。例如在DE 195 09663 Al中描述過從自然資源中分離加蘭他敏的方法。加蘭他敏的化學(xué)合成也已經(jīng)在文獻中描述過(Kametani 等，Chem. Soc. C. 6,1043-1047 (1971) ；Shimizu 等，Heterocycles 8, 277-282(1977))。(-)三尖杉堿(CAS 號24316-19-6 ； IUPAC 名稱1S，3aR，14b. □ ) _1，5，6，8， 9，14b-六氫-2-甲氧基-4H-環(huán)戊烷[a][l，3] ニ氧雜環(huán)戊烷并W，5_h]吡咯并[2，l_b] [3]苯并氮雜卓-1 □-醇)(lS，3aR，14b. □ )-1,5,6,8,9,14b-Hexahydro-2-methoxy-4 H_cyclopenta[a」[1,3]diox ο ο[4,5_h」pyrrolo[2,l_b][3]benzazepin_l □ _ol)是三尖杉屬(genus C印halotaxus)(通常稱作粗榧(Plum Yew)或日本粗榧(Cowtail Pine)) 的針葉灌木樹種的主要生物堿。具有獨特結(jié)構(gòu)的三尖杉堿本身沒有特別的抗腫瘤活性，但是它的(α)_羥基琥珀酸酷(也稱作三尖杉酯堿(harringtonins))是血管生成和蛋白質(zhì)生物合成的抑制劑，并且是有希望用于治療骨髄性白血病的物質(zhì)。例如，omacetaxine m印esuccinate，一種高三尖杉酯堿的半合成制劑(以前稱作Ceflatonin )，其目前處于用于治療慢性骨髄性白血病的Π/ΙΙΙ期臨床試驗中。盡管從上世紀(jì)六十年代開始就有幾種合成三尖杉堿的(外)消旋混合物的方法的描述，并且在1995年報道了相關(guān)的藥用(-)立體異構(gòu)體的首次合成，但是提取三尖杉堿及隨后對其進行修飾仍然是獲得エ業(yè)規(guī)模的足夠量所選擇的方法。在另ー個藥理活性生物堿的實例中，棕金雞納樹(Cinchona officinalis)、紅金雞納樹(C. succirubra)、列氏金雞納樹(C. Iedgeriana)以及該種屬的其他物種的樹皮是奎寧生物堿的最主要來源。奎寧本身(CAS號130-95-0 ； IUPAC名稱(R)-(6-甲氧基喹啉-4-基)G2S，4S，8I )-8-乙烯基奎寧環(huán)-2-基)甲醇)已經(jīng)重新獲得了其作為抗瘧疾藥物的部分重要性，并且最近發(fā)現(xiàn)了其用于治療腿痛性痙攣和其他肌肉痙攣的新用途。奎尼丁(CAS號56づ4-2 ；IUPAC名稱(9S)-6'-甲氧基金雞納_9_醇)是奎寧的立體異構(gòu)體并且是用于治療心律失常的I類抗心律失常藥物。估計每年從5，000至10，000公噸的金雞納樹皮中提取300至500公噸的奎寧生物堿。生物堿作為所謂的ニ級代謝產(chǎn)物通過很多種有機體來制備，所述有機體包括細(xì)菌、真菌、植物和動物。包含生物堿的植物粗提物屬于人類根據(jù)經(jīng)驗使用的最早藥物(first medicine)。很早以前，從包含生物堿的提取物中分離藥理活性生物堿的方法就已經(jīng)引起了藥劑師的興趣。為了以低成本真正無限供應(yīng)具體的藥理活性生物堿，已經(jīng)開發(fā)了化學(xué)合成這些生物堿的方法。對于有些藥理活性生物堿，它們的化學(xué)合成已經(jīng)完全取代了從自然資源中提取它們。而對有些生物堿，從自然資源中提取的生物堿與其合成制備的類似物在全球市場上相互競爭。例如，Johnson&Johnson集団公司用合成的加蘭他敏和從植物中提取的加蘭他敏來滿足其制備Reminyl 和Razadyne 的需求，這兩種藥物都是用于治療阿茲海默癥的藥物。 對于其他有醫(yī)藥價值的生物堿，并沒有在經(jīng)濟競爭的條件下能用于エ業(yè)規(guī)模的其化學(xué)合成方法可用。顯然，從自然資源，尤其是從植物物種中分離藥理活性生物堿的提取エ藝構(gòu)成了獲得所述生物堿的主要エ藝。理想地，提取エ藝本身應(yīng)該已經(jīng)盡可能地對期望的生物堿有選擇性，同時保持可接受的生物堿的產(chǎn)率。然而，大多數(shù)分離生物堿的提取エ藝均使用有限數(shù)量的常用方法，這些方法能適用于相對寬范圍的要提取的生物堿并且適用于要從中提取所述生物堿的各種生物材料。這些常用的方法依賴于生物堿彼此共有的物理化學(xué)性質(zhì)，但這些物理化學(xué)性質(zhì)又是通常在包含生物堿的生物材料中存在的非生物堿化合物所缺乏的。生物堿的最重要的物理化學(xué)性質(zhì)是(i)當(dāng)pH值變化吋，化合物的溶解性和分配系數(shù)有相當(dāng)大的變化，這是由分子中存在的ー個或多個堿性氮原子引起的；和(ii)由存在于分子中的芳香環(huán)體系和雜原子導(dǎo)致的相當(dāng)高的極性。對已知的提取生物堿的常用方法進行調(diào)整并優(yōu)化以從特定的植物物種的具體生物材料中獲得特定的生物堿。大多數(shù)從自然資源中分離生物堿的方法都采用通過極性有機溶劑對包含生物堿的材料的提取法和隨后的酸/堿提取法。已使用超臨界ニ氧化碳代替有機極性溶剤。如果期望的生物堿已知將被糖基化、進行皂化或具有其他類型的化學(xué)變體 (對植物的ニ級代謝來說是典型的)，則也可以在提取エ藝中包括特異性地針對碳水化合物殘基或類似部分的エ藝步驟。然而，許多藥理活性生物堿并沒有化學(xué)修飾，因此不能使用受親和カ驅(qū)動(affinity-driven)的エ藝步驟。因此，對沒有化學(xué)修飾的生物堿的分離必須僅依賴于用極性溶劑的提取法以及它們的溶解度受PH值驅(qū)動改變的性質(zhì)。例如，比如在WO 96/29332 Al、WO 2006/064105 Al 和 WO 2006/099635A1 中公開了分離加蘭他敏的方法。
DE 1 193 061 A公開了ー種從石蒜科(Amaryllidaceae)屬的成員中分離加蘭他敏氫溴酸鹽(galanthaminium hydrobromide)的方法，其中，用氨水堿化經(jīng)空氣干燥并被粉碎的植物材料并且用ニ氯乙烷進行提取。用稀釋的硫酸處理初步提取物并通過用氨水沉淀來從溶液中除去伴生(accompanying)的生物堿。加蘭他敏保留在溶液中并進一歩用ニ乙基醚或ニ氯甲烷進行提取。WO 96/29332 Al教導(dǎo)了一種分離加蘭他敏的方法，其中，在第一個提取步驟之前， 將水仙屬物種經(jīng)空氣干燥的、粉碎的球莖與粉末狀的碳酸鈉混合。然后，用ニ氯乙烷提取堿化的生物材料并如DE 1 193 061 A中所述進ー步處理初步提取物。在第二個實例中，WO 96/29332 Al公開了用具有特定沸點的汽油作為非鹵化有機溶劑來提取堿化的植物材料以獲得初步提取物。將初步提取物的干燥殘渣溶解在PH值調(diào)到大約為4的稀釋硫酸中并通過用ニ乙基醚提取來除去伴生的非生物堿有機物。將精制水溶液堿化至PH值為9并將生物堿提取到ニ乙基醚中。WO 2006/064105 Al涉及用離心分配色譜法以置換模式(displacement mode)從包含至少20%加蘭他敏的起始組合物中純化加蘭他敏。該方法包括使至少兩種溶劑和起始組合物離心的步驟。選擇兩種溶劑以使它們形成兩個不互溶的相，水相和有機相。用乙ニ醇ニ乙酸酯(ethylene acetate)提取堿化的植物材料從而獲得起始組合物。用稀釋的硫酸處理初步提取物并通過用氨水沉淀來從溶液中除去伴生的生物堿。加蘭他敏保留在溶液中并進一歩用氯仿進行提取。WO 2006/099635 Al公開了ー種大規(guī)模分離加蘭他敏的方法，其中，用合適的有機酸或無機酸的水溶液初步提取植物材料。由此獲得的初步提取物的有機化合物吸附在吸附劑上，用水洗滌吸附劑，并用與水混溶的有機溶劑從吸附劑上洗脫有機化合物，以得到生物堿的濃縮物。已知的從生物材料中分離生物堿，特別是從植物生物材料中分離加蘭他敏，的方法的主要缺點是缺乏穩(wěn)定性以及對于大規(guī)模分離缺乏規(guī)?？闪繙y性。另外，對于特定來源的生物材料，通常要對已知的方法進行調(diào)整。如果使用另ー種生物材料，用于特定生物材料的特定方法就不能以足夠的產(chǎn)率分離生物堿。另外，在大多數(shù)已知方法中使用氯化烴，這使得這些方法不利于大規(guī)模地分離加蘭他敏，因為這些氯化烴具有毒性并對環(huán)境有害。使用汽油代替氯化烴效率低并需要大量的這種溶剤。此外，初步提取物必須進行干燥以達(dá)到一定干度且殘留物必須要溶解到另ー 種溶劑的方法難以按比例放大。基于這些原因，需要從自然資源，特別是從植物中分離生物堿，的通用方法，該方法對于特定構(gòu)型的生物堿和原材料能夠進行改進和優(yōu)化，且能夠放大至エ業(yè)化批量規(guī)模。

發(fā)明內(nèi)容
令人驚奇的是，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)如果在堿化植物材料的最初提取中使用非揮發(fā)性且未經(jīng)化學(xué)改性的植物油作為溶剤，則可以有效地從生物材料中分離生物堿。本發(fā)明的提取方法包括以下步驟使生物材料與植物油或植物油的混合物以及共存的堿性水相接觸以實現(xiàn)生物堿從生物材料到油相的轉(zhuǎn)移。只要生物材料包含要被提取的生物堿，則本發(fā)明的提取方法不受生物材料的限制。當(dāng)生物材料來自植物吋，本發(fā)明的提取方法不受植物生物材料的限制。在本發(fā)明的提取方法中可以使用植物的所有部分和組織。在本發(fā)明提取方法的優(yōu)選實施方式中，使用植物的具體部分或組織，其可以選自植物的地下部分或空氣中的部分。植物的地下部分和組織的實例是根、根莖、塊莖和球莖。 植物的空氣中的部分和組織的實例是莖、皮、葉、芽、花、果實、種子和癭瘤(gall)。也可以使用存在于提及的任何植物部分或組織中的液體或半液體成分。這些液體或半液體成分包括液、汁和滲出物。在本發(fā)明提取方法的一個實施方式中，所述生物材料是經(jīng)干燥的生物材料。在植物生物材料的情況下，使用的植物、植物的部分或植物的組織要在用于提取方法之前先經(jīng)過干燥。優(yōu)選地，用空氣干燥或冷凍干燥來干燥植物材料。植物材料的空氣干燥可以在真空或大氣壓下并在環(huán)境溫度或升高的溫度下進行。然而，不是必須要使用經(jīng)干燥的生物材料來進行本發(fā)明的提取方法。因此，在本發(fā)明提取方法的ー個優(yōu)選實施方式中，使用植物的新鮮組織或新鮮部分來提取它們的生物石厥。優(yōu)選的是，在提取之前，生物材料，特別是植物生物材料，是被粉碎的，也就是說， 用任何其他適合的方式將生物材料搗碎、切碎、破碎、粗粒化(coarsed)、碾碎、磨碎、研碎或粉碎。在本發(fā)明的提取方法中，使用植物油作為生物材料初始提取的溶剤。對于本發(fā)明，術(shù)語“植物油”是指室溫(大約23°C )下為液體并由三甘油、游離脂肪酸、單甘油和雙甘油組成的任何來源于植物的材料。作為本發(fā)明提取方法中合適的溶剤，植物油不需要任何化學(xué)改性。因此，純的植物油是本發(fā)明提取方法中優(yōu)選的植物油。適合用作從生物材料中提取生物堿的溶劑的植物油的實例是菜籽油、向日葵油、 亞麻籽油、葡萄籽油、花生油、蓖麻油、南瓜子油、大豆油、紅花油、棉籽油、椰子油、玉米油、 蓖麻油、棕桐油、大麻子油、米糠油、桐油、西蒙得木油和橄欖油。通常，可以使用任何植物油而不管其來源或級別。盡管可以使用エ業(yè)級的植物油， 但是優(yōu)選植物油是食品級、獸用級(veterinary grade)或化妝品級的。用于從植物材料中提取生物堿的最優(yōu)選的植物油是可食用的植物油。在本發(fā)明方法的ー個優(yōu)選實施方式中，向每重量単位要被提取的生物材料中加入至少0. 1重量単位，優(yōu)選至少0. 2重量単位，更優(yōu)選至少0. 5重量単位且最優(yōu)選至少0. 8重量単位的植物油。優(yōu)選地，向每重量単位要被提取的生物材料中加入至多2. 0重量単位，優(yōu)選至多3. 0重量単位，更優(yōu)選至多5. 0重量單位且最優(yōu)選至多10. 0重量単位的植物油。在本發(fā)明的提取方法中，用植物油對生物材料的提取是在堿性水相共存下進行的。所述堿性水相可以是氨的水溶液，也稱作氫氧化銨(NH4OH)。在另ー個實施方式中，所述堿性水相是堿金屬碳酸鹽的水溶液，優(yōu)選碳酸鈉(Na2CO3)或碳酸鉀(K2CO3)的水溶液。在另ー個實施方式中，所述堿性水相是堿金屬碳酸氫鹽的水溶液，優(yōu)選碳酸氫鈉(NaHCO3)或碳酸氫鉀(KHCO3)的水溶液。在再一個實施方式中，所述堿性水相是堿金屬氫氧化物的水溶液，優(yōu)選氫氧化鈉(NaOH)或氫氧化鉀(KOH)的水溶液。在本發(fā)明的一個實施方式中，在堿性水相共存下用植物油從生物材料中提取生物堿或生物堿的混合物是在環(huán)境溫度下進行的。環(huán)境溫度是指室溫，也就是提取容器周圍空氣的溫度，其在15°C到35°C之間的范圍內(nèi)。如果提取是在環(huán)境溫度下進行的，則優(yōu)選使生物材料與植物油的接觸時間在15 小時到30小時之間。在另ー個實施方式中，在堿性水相共存下用植物油從生物材料中提取生物堿或生物堿的混合物是在升高的溫度下進行的，也就是在高于環(huán)境溫度的溫度下進行的。在優(yōu)選的實施方式中，升高的溫度在45°C到50°C的范圍內(nèi)。如果提取是在升高的溫度下進行的，則優(yōu)選使生物材料與植物油的接觸時間在10 到60分鐘之間。通過在堿性水相共存下使生物材料與植物油接觸獲得的初步提取物是乳液，其分為上部油相和下部水相。例如通過加入稀釋的酸(如硫酸)來使包含生物堿的上部油相酸化。優(yōu)選地，酸化的水相的PH值大約為pH 2。通過酸化，生物堿被從油相中轉(zhuǎn)移到酸性的水相中。優(yōu)選用氨水回收并堿化酸性的水相。堿化過的水相的優(yōu)選PH值為大約pH 11。然后用與水相不相混溶的有機溶劑提取水相?；厥沼袡C相、干燥并使有機溶劑蒸發(fā)以得到包含生物堿的干的殘留物。與已知的提取方法相比，本發(fā)明的提取エ藝是穩(wěn)定的，其可被放大以用于大規(guī)模地從生物質(zhì)中分離生物堿并能明顯降低有機溶劑(特別是氯化烴)的用量。本發(fā)明的提取方法能夠適用于分離各種生物堿，特別是雜環(huán)生物堿，只要所述雜環(huán)生物堿不是作為糖苷或皂甙存在。因此，本發(fā)明延伸到通過本發(fā)明的方法從生物材料，優(yōu)選植物材料，中分離的生物石厥。本發(fā)明進一歩延伸到用本發(fā)明方法分離的生物堿用于制備藥物的用途。例如，用本發(fā)明方法分離的加蘭他敏可以用于制備用來治療狹角性青光眼、脊髄灰質(zhì)炎、阿茲海默癥以及如神經(jīng)性疼痛、酗酒、戒煙的神經(jīng)系統(tǒng)的多種失調(diào)的藥物，或者用于制備用來防止有機磷中毒的藥物。用本發(fā)明方法分離的(_)三尖杉堿可以用于制備用來治療慢性骨髄性白血病的藥物。用本發(fā)明方法分離的奎寧生物堿可以用于制備用來治療腿痛性痙攣、其他肌肉痙攣、瘧疾或心律失常的藥物。
具體實施例方式下面將參照本發(fā)明的ー些具體實施方式
來描述本發(fā)明。技術(shù)人員會明白這些實施例僅是用于示例性說明而不會將發(fā)明解釋為描述的任何ー個具體實施方式
。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解在不偏離本發(fā)明的準(zhǔn)則和范圍的情況下，可以對步驟和方案作出各種改變、變化和修改以及替換、刪除或添加。實施例1 在環(huán)境溫度下提取加蘭他敏在ー個6升的容器中，將0. 3kg顆粒狀的Na2CO3完全溶解于1升的水中來制備碳酸鈉溶液。將卡爾頓栽培品系變種水仙(Narcissus cultivar Carlton)的2· 5千克干凈新鮮的球莖剁碎并和2. 2kg食用菜籽油(2，240ml從超市購買的“Bonita”菜籽油)一起加入到碳酸鈉溶液中。將得到的混合物攪拌3分鐘，然后在環(huán)境溫度(大約23°C )下放置23小吋，放置時偶爾攪拌ー下。將得到的褐色物質(zhì)轉(zhuǎn)移至液壓球形水果壓榨機(Hydrapress balloon fruit press)中，隨后的擠壓生成大約3kg的乳剤，所述乳劑經(jīng)快速傾析分成重2，165g的上部油相和重SlOg的下部黒褐色的水相。使油相與300ml的3. 3%的H2SO4 (pH值為2)兩次混合。將油相(1，88Ig)作為溶劑用于進ー步的提取，同時將兩次回收的酸性水相(重570g)混合。用由200ml環(huán)己烷和45ml NH4OH (25% )構(gòu)成的混合物在pH值為11下提取混合的酸性水相一次。通過加入兩次anl甲醇將得到的乳液破乳。回收有機相，用MgSO4干燥并真空下蒸發(fā)溶剤。得到純度大約為49%的0. 441g產(chǎn)量的粗制加蘭他敏。所提取的加蘭他敏的純度用HPLC測定，而加蘭他敏的鑒定通過質(zhì)譜分析來確定。實施例2 用溫和加熱來快速提取加蘭他敏在6升的容器中，將卡爾頓栽培品系水仙的1千克經(jīng)干燥并磨碎(< 5mm)的球莖加入到1升10%的氨水中。在攪拌的同吋，加入1. 4kg菜籽油并繼續(xù)攪拌直至混合物的外觀均勻。在水浴中將混合物加熱至40-45°C并在此溫度維持25分鐘。然后，將混合物轉(zhuǎn)移至球形壓榨機中并擠出乳液。在自發(fā)相分離之后，回收1. 2升油相并用400ml 3. 3%的H2SO4進行第一次提取， 然后用200ml 3. 3%的H2SO4再次提取?；旌纤嵝运嗖⑻崛纱?，毎次均使用200ml環(huán)己烷和90ml 25%氨水的混合物在pH值為11下進行?；厥沼袡C相，用MgSO4干燥并真空下去除溶剤，得到0. 473g加蘭他敏。所提取的加蘭他敏的純度用HPLC測定，而加蘭他敏的鑒定通過質(zhì)譜分析來確定。實施例3 三尖杉堿的提取在ー個IOOml的提取器中，將36克Na2CO3溶解在8細(xì)1的水中。將粗榧屬三尖杉酉旨喊變種 Fastigiata (C^phalotaxua harringtonia var. Fastigiata)的 40 克細(xì)碎地?fù)v碎的新 I羊葉子(從 Arnold garden services, 56154 Boppard, Germany 獲得)禾ロ 120 克菜軒油加入到碳酸鈉溶液中，然后充分混合該溶液。將混合物在環(huán)境溫度(大約23°C )下放置 21小吋，放置時偶爾攪拌ー下。過濾除去固體成分并將其丟棄。從經(jīng)過濾的乳液中分離油相并用100ml3%的 H2SO4在pH值為2下進行提取。分離后回收水相并在pH值為11下用30% Na2CO3水溶液與 CH2Cl2的1 1.33 (ν/ν)的87ml混合物進行提取。分離有機相，用MgSO4干燥并蒸發(fā)溶剤， 以得到純度為26%的0. 020g粗制三尖杉堿。所提取的三尖杉堿的純度用HPLC測定，而三尖杉堿的鑒定通過質(zhì)譜分析來確定。實施例4 從金雞納樹皮提取奎寧生物堿在ー個500ml的提取器中，將57克Na2CO3溶解在192ml的水中。將100克磨碎 (< 0. 5mm)的金雞納樹皮和150克菜籽油加入其中。充分混合該混合物并將其在環(huán)境溫度 (大約25°C )下放置19小吋，放置時偶爾攪拌該混合物。通過過濾除去混合物中的固體成分并將其丟棄。從經(jīng)過濾的乳液中分離油相并用 300ml 3%的H2S04*pH值為2下進行提取。分離后回收水相并用50ml環(huán)己烷洗滌。然后，在PH值為11下用25%的NH4OH水溶液與環(huán)己烷的1 4(ν/ν)的125ml混合物提取水相。通過添加5ml甲醇來分離得到的乳液。分離有機相，用MgSO4干燥并蒸發(fā)溶剤，以得到 0. 145g金雞納生物堿的混合物。在金雞納生物堿的這種混合物中奎寧的含量為47%。
權(quán)利要求
1.ー種從生物材料中提取生物堿的方法，該方法包括以下步驟-粉碎所述生物材料；-在堿性水相共存下，使所述生物材料與植物油接觸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在干，所述植物油選自菜籽油、向日葵油、亞麻籽油、葡萄籽油、花生油、蓖麻油、南瓜子油、大豆油、紅花油、棉籽油、椰子油、玉米油、蓖麻油、棕桐油、大麻子油、米糠油、桐油、西蒙得木油和橄欖油
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在干，所述植物油是植物籽油和/或是可食用的。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的方法，其特征在干，向每重量単位要被提取的生物材料中加入至少0. 1重量単位，優(yōu)選至少0. 2重量単位，更優(yōu)選至少0. 5重量単位且最優(yōu)選至少0. 8重量単位的植物油。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項所述的方法，其特征在干，向每重量単位要被提取的生物材料中加入至多2. 0重量単位，優(yōu)選至多3. 0重量単位，更優(yōu)選至多5. 0重量単位且最優(yōu)選至多10. O重量単位的植物油。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項所述的方法，其特征在干，所述堿性水相是堿金屬碳酸鹽、堿金屬碳酸氫鹽、堿金屬氫氧化物或氫氧化銨的水溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項所述的方法，其特征在干，所述堿性水相選自碳酸鈉水溶液、碳酸鉀水溶液、碳酸氫鈉水溶液、碳酸氫鉀水溶液、氫氧化鈉水溶液和氫氧化鉀水溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項所述的方法，其特征在干，在15°C到35°C之間的環(huán)境溫度下使所述生物材料與所述植物油接觸。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在干，使所述生物材料與所述植物油的接觸時間在15到30小時之間。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項所述的方法，其特征在干，在45°C到50°C之間的溫度下使所述生物材料與所述植物油接觸。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其特征在干，使所述生物材料與所述植物油的接觸時間在10到60分鐘之間。
12.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其特征在干，所述生物材料是植物生物材料。
13.用權(quán)利要求1至12中任一項所述的方法從生物材料中提取的生物堿。
14.用權(quán)利要求1至12中任一項所述的方法從生物材料中提取的生物堿用于制備藥物的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及從生物材料，優(yōu)選植物生物材料，中分離生物堿的方法，其中，在堿性水相共存下用植物油提取所述生物材料。
文檔編號A61K36/00GK102596210SQ201080047292
公開日2012年7月18日 申請日期2010年9月3日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月7日
發(fā)明者托馬斯·卡利莫普洛斯 申請人:托馬斯·卡利莫普洛斯